本申请是2012年11月22日提出的申请号为201280057437.8的同名专利申请的分案申请。
技术领域
本发明涉及作为防止粘连用的医用材料或止血剂有效的医药组合物。
背景技术
一直以来，在用于防止粘连或止血等的医用材料，使用着藻酸盐等的胶凝剂。
所谓粘连是指，本来彼此接近存在，但是在游离的脏器间或组织间产生连续性的状态。手术后的缝合部粘连是人为产生的一种炎症性的粘连，尽管程度上存在差异，却是以高概率发生的手术的并发症。粘连在完全没有症状时不存在问题，但有时会成为腹痛、肠梗阻(ileus)、不孕症等的原因，因而一直以来寻求着各种为了防止粘连的方法。在现有技术中，作为利用胶凝剂的防止粘连用的医用材料，报告了以藻酸钙为主要构成成分的细胞阻断膜(参照专利文献1)、和含有藻酸等多糖类、含羧基的化合物和水的组合物(参照专利文献2)等。这些防止粘连用的医用材料，在使用时(手术中)，将胶凝剂溶解在水中，在达到适度的凝胶强度的时刻向患处给药。
利用这样的胶凝剂的防止粘连用的医用材料，根据组成凝胶化速度有所不同，从接触钙等凝胶化促进剂后接触面瞬间凝胶化的材料到凝胶化需要相当长时间的材料，是各种各样的。在防止粘连用的医用材料中，在使用时，要求呈现适合于在患处使用的粘性，胶凝剂的凝胶化速度过快或过慢都会损害操作性。但是，利用胶凝剂的现有的防止粘连用的医用材料，凝胶化速度的控制困难，存在操作性差的缺点。特别是在将藻酸用作胶凝剂时，为了在水中溶解，需要具有相当转速的电动机，因而必需乙醇等的分散介质。
另一方面，作为利用胶凝剂的止血作用的医用材料，例如，报告了含有藻酸盐的片状或海绵状的创伤被覆材料(参照专利文献3)。但是，如上所述将胶凝剂成型为片状或海绵状的医用材料中，预先凝胶化的创伤被覆材料仅仅是被覆损伤部位的表面，而不能在损伤部位的内部凝胶化而止血，所以，止血作用不能令人满意。
以这样的现有技术为背景，希望开发出在水中的溶解性优异、胶凝剂的凝胶化速度适度、作为防止粘连用的医用材料有效的医药组合物。还希望开发出利用胶凝剂的止血效果优异的医药组合物。
在先技术文献
专利文献1：日本特开平11-253547号公报
专利文献2：日本特开2003-153999号公报
专利文献3：日本特开平7-136240号公报
发明内容
发明要解决的技术问题
本发明目的之一在于提供一种在水中的溶解性优异、而且胶凝剂的凝胶化速度具备适度的范围、作为防止粘连用的医用材料有用的医药组合物。另外，本发明的另一个目的在于提供一种能够发挥优异的止血效果的医药组合物。
用于解决技术问题的手段
为了解决上述技术问题，本发明的发明人进行了深入研究，结果发现：通过并用胶凝剂、有机酸和/或无机酸与2价金属的盐、以及聚乙二醇，在水中的溶解性优异，在与水接触时能够以适度的凝胶化速度使之凝胶化，具备适合作为防止粘连用的医用材料的特性。还发现并用上述成分的医药组合物，在以粉末状的状态在伴有出血的患处使用时，由于在患处发生胶凝化能够有效地止血，作为止血剂是有效的。本发明是基于这些发现进一步进行研究而完成的。
即，本发明提供下述发明。
项1.一种固态的医药组合物，其含有(A)胶凝剂、(B)选自有机酸和无机酸中的至少1种酸与2价金属的盐和(C)聚乙二醇。
项2.如项1所述的医药组合物，还含有(D)有机酸或其碱金属盐。
项3.如项1或2所述的医药组合物，所述(A)成分是藻酸、藻酸的药学上允许的盐或果胶。
项4.如项1～3中任一项所述的医药组合物，所述(B)成分中的2价金属是钙。
项5.如项1～4中任一项所述的医药组合物，所述(B)成分是选自磷酸氢钙和葡糖酸钙中的至少1种。
项6.如项1～5中任一项所述的医药组合物，所述(C)成分的平均分子量为约1000～约20000。
项7.如项1～6中任一项所述的医药组合物，所述(C)成分是聚乙二醇4000。
项8.如项1～7中任一项所述的医药组合物，所述(D)成分是葡糖酸或葡糖酸-δ-内酯。
项9.如项1～8中任一项所述的医药组合物，相对于所述(B)成分1重量份，含有所述(D)成分3～50重量份。
项10.如项1～9中任一项所述的医药组合物，被用作防止粘连用的医用材料。
项11.如项1～9中任一项所述的医药组合物，被用作止血剂。
项12.一种固态的医药组合物用于制备防止粘连用的医用材料的用途，所述医药组合物含有(A)胶凝剂、(B)选自有机酸和无机酸中的至少1种酸与2价金属的盐和(C)聚乙二醇。
项13.一种固态的医药组合物用于制备止血剂的用途，所述医药组合物含有(A)胶凝剂、(B)选自有机酸和无机酸中的至少1种酸与2价金属的盐和(C)聚乙二醇。
项14.一种防止粘连的方法，其包括：将含有(A)胶凝剂、(B)选自有机酸和无机酸中的至少1种酸与2价金属的盐和(C)聚乙二醇的固态的医药组合物在水性溶剂中混合，配制溶解液的工序；和
在需要防止粘连的患处给予所述溶解液的工序。
项15.一种止血方法，其包括：在需要止血的患处给予固态的医药组合物的工序，所述固态的医药组合物含有(A)胶凝剂、(B)选自有机酸和无机酸中的至少1种酸与2价金属的盐和(C)聚乙二醇。
发明效果
根据本发明的医药组合物，胶凝剂的溶解性提高，能够在均匀地分散在水等溶剂中的状态下开始凝胶化反应，所以能够不生成球块地制备均匀的凝胶。并且，本发明的医药组合物在水等溶剂中混合时，由于聚乙二醇(以下称为(C)成分)，胶凝剂(以下称为(A)成分)、以及有机酸和/或无机酸与2价金属的盐(以下称为(B)成分)在溶剂中被均匀分散，2价金属从该(B)成分缓慢释放，所以，可以使凝胶化缓慢地进行。即，在本发明的医药组合物中，通过调节(A)成分与(B)成分的配合比例，能够容易地适当控制凝胶化速度。另外，根据本发明的医药组合物，通过调节(A)成分与(B)成分的配合比例，也能够将凝胶强度控制在适当的范围内。并且，通过将本发明的医药组合物与溶剂混合而制得的凝胶，能够有效地抑制腱、神经、血管部、脏器等生物体组织、脑神经系统等的粘连。这样，本发明的医药组合物在水中的溶解性优异，而且能够适度地调节胶凝剂的凝胶化速度，因而在医疗现场中的操作性优异，并且防止生物体组织粘连的效果也优异，所以，作为防止粘连用的医用材料是有效的。特别是本发明的医药组合物作为腱、神经、血管部等的整形外科领域以及脏器等的消化器官外科领域中的防止粘连用的医用材料是有效的。
另外，本发明的医药组合物，在以粉末状的状态用于伴有出血的患处时，通过在出血部位形成凝胶而发挥优异的止血效果。特别是本发明的医药组合物，能够以粉末状直接用于患处，所以，不管使用部位的形状如何，都能够沿着需要止血的患处使用，而且，能够与患处紧贴的状态形成凝胶，因而能够有效止血。
并且，本发明的医药组合物在应用的患处形成凝胶状态，在患处停留一定时间，因而通过在本发明的医药组合物中配合药剂，能够使该药剂在患处缓慢释放。另外，由于本发明的医药组合物能够以固态保存，所以，不易受温度等的影响，保存稳定性也优异。
附图说明
图1是表示在试验例8中，测定各组的手术部位趾深屈肌腱的可动区域(负荷前后的弯曲角度之差)的结果图。
图2的A是表示在试验例8中，观察对照组的大鼠的手术部位(趾深屈肌腱)状态的照片。B是表示在试验例8中，观察给药组I的大鼠的手术部位(趾深屈肌腱)状态的照片。
图3是表示在试验例9中，评价各组的总粘连得分的结果图。
图4的A是在试验例10中，在大鼠的夹紧部分散布有实施例15的粉末状的医药组合物时的照片。B是在试验例10中，在散布5分钟后除去凝胶化的医药组合物时的照片。C是在试验例10中，在大鼠的夹紧部分散布有藻酸钠的粉末时的照片。
图5是表示在试验例11中，测定各组的出血量的结果的图。
具体实施方式
＜医药组合物＞
本发明的医药组合物的特征在于：含有(A)胶凝剂、(B)选自有机酸和无机酸中的至少1种酸与2价金属的盐和(C)聚乙二醇，呈固态。下面，对本发明的医药组合物进行详细论述。其中，在本说明书中，单位“w/v％”表示g/100mL。
(A)成分
作为本发明中使用的胶凝剂((A)成分)，没有特别限定，从适合生物体的角度出发，优选具有生物体适应性或生物体吸收性，例如，可以列举藻酸、藻酸钠、藻酸钾、藻酸丙二醇酯、果胶、结冷胶、卡拉胶、葡甘露聚糖、瓜尔胶、刺槐豆胶、黄原酸胶、葡萄糖、羧甲基淀粉、甘露糖、半乳糖、阿拉伯糖、岩藻糖、核糖、果糖、右旋糖酐等。优选列举藻酸、藻酸钠、藻酸钙、藻酸钾、藻酸丙二醇酯、果胶、结冷胶、卡拉胶、葡甘露聚糖、瓜尔胶等。
从更有效地使其具备控制在适度范围的凝胶化速度的作用和止血作用的观点出发，在这些胶凝剂中，优选藻酸、藻酸的药学上允许的盐(例如碱金属盐)、藻酸的衍生物和果胶。作为这样的优选的胶凝剂，具体可以列举藻酸、藻酸钠、藻酸钙、藻酸钾、藻酸丙二醇酯、果胶，更优选列举藻酸、藻酸钠、藻酸钙、藻酸钾、藻酸钠、果胶，特别优选列举藻酸钠。
这样的藻酸钠能够通过商业获得，例如，可以列举：Kimica Algin High·G系列IL-6G(1w/v％水溶液、20℃时的粘度为50～80mPa·s；重均分子量约为68万)、I-1G(1w/v％水溶液、20℃时的粘度为100～200mPa·s；重均分子量约为72万)、I-3G(1w/v％水溶液、20℃时的粘度约为300～400mPa·s；重均分子量约为80万)等；Kimica Algin I系列IL-6(1w/v％水溶液、20℃时的粘度为50～80mPa·s；重均分子量约为69万)、I-1(1w/v％水溶液、20℃时的粘度为80～200mPa·s；重均分子量约为86万)、I-3(1w/v％水溶液、20℃时的粘度为300～400mPa·s；重均分子量约为77万)、I-5(1w/v％水溶液、20℃时的粘度为500～600mPa·s；重均分子量约为80万)、I-8(1w/v％水溶液、20℃时的粘度为800～900mPa·s；重均分子量约为79万)、IL-1(1w/v％水溶液、20℃时的粘度为15mPa·s左右；重均分子量约为26万)、IL-2(1w/v％水溶液、20℃时的粘度为20～50mPa·s；重均分子量约为58万)等；Kimica Algin ULV系列ULV-5(10w/v％水溶液、20℃时的粘度为500～600mPa·s；1w/v％水溶液、20℃时的粘度为4mPa·s左右；重均分子量约为8万)、ULV-10(1w/v％水溶液、20℃时的粘度为7mPa·s左右；重均分子量约为9万)、ULV-20(1w/v％水溶液、20℃时的粘度为10mPa·s左右；重均分子量约为20万)等(都由Kimica Corporation生产)，优选I-1G、I-3G、I-1、IL-1、ULV-5、ULV-10、ULV-20等。
这些(A)成分，既可以单独使用1种，也可以组合2种以上使用。
另外，作为(A)成分使用的胶凝剂的重均分子量过高时，粘度增高，可能导致本发明的医药组合物不能到达使用部位的细微部分，并且，防止粘连或止血超过必要的时间，可能导致本发明的医药组合物残留。另一方面，作为(A)成分使用的胶凝剂的重均分子量过低时，难以在患处停留。因此，胶凝剂的重均分子量可以考虑本发明的医药组合物的用途和使用部位等适当设定。
例如，使用藻酸钠作为胶凝剂、将本发明的医药组合物用作粘连防止剂时，为了在患处具备适度的停留性，优选使用重均分子量为60万以下的物质，另外，为了使之具备防止粘连效果所必须的凝胶强度，优选使用重均分子量为5万以上的物质。在使用藻酸钠作为胶凝剂、将本发明的医药组合物用作粘连防止剂时，作为藻酸钠的重均分子量，更优选列举8～50万。
另外，例如使用藻酸钠作为胶凝剂、将本发明的医药组合物用作止血剂时，为了使之具备止血效果所必须的粘性，优选使用重均分子量为10万以上的物质，更优选使用10万～90万的物质。
另外，在组合使用2种以上的藻酸钠时，上述藻酸钠的重均分子量是作为2种以上藻酸钠的混合物算出的值。
作为本发明的医药组合物中的(A)成分的含量，例如可以列举相对于医药组合物的总重量为1～99重量％。进一步具体而言，在作为粘连防止剂使用时，从(A)成分在医药组合物整体中的分散性和在溶剂中的溶解性的观点出发，优选列举1～50重量％、更优选5～25重量％。在作为止血剂使用时，优选列举40～99重量％、更优选50～80重量％。
(B)成分
作为本发明中使用的有机酸和/或无机酸与2价金属的盐((B)成分)，只要是药学上允许就没有特别限制。
作为构成(B)成分的酸，例如，可以列举葡糖酸、乳酸、草酸、柠檬酸、醋酸等的有机酸；硫酸、盐酸、磷酸、硝酸等的无机酸。
另外，作为构成(B)成分的2价金属，可以列举钡、镁、钙、铁等。这些2价金属中，优选列举钙。
作为(B)成分，具体可以列举乳酸钙、葡糖酸钙、硫酸钙、柠檬酸钙、磷酸氢钙(磷酸氢钙·2水合物)等。在这些(B)成分中，从更有效地使其具备控制在适度范围的凝胶化速度的作用和止血作用的观点出发，优选难溶于水的盐。作为难溶于水的盐，可以列举硫酸钙、柠檬酸钙、磷酸氢钙·2水合物和碳酸钙等，可以使用离子化促进剂和延迟剂制成均匀的凝胶。在本说明书中，所谓“难溶于水”对应于第一六改正日本药局法中规定的从“难溶”到“几乎不溶”。即指溶解1g溶质((B)成分)需要100mL以上的溶剂。
作为适合的(B)成分，可以列举磷酸氢钙、磷酸氢钙·2水合物和碳酸钙。
这些(B)成分既可以单独使用1种，也可以组合2种以上使用。
作为本发明的医药组合物中的(B)成分的含量，例如可以列举相对于医药组合物的总重量为0.1～50重量％、优选1～20重量％、更优选1～10重量％。
在本发明的医药组合物中，(A)和(B)成分的比例没有特别限制，显示出(B)成分与(A)成分的比例越高，凝胶化速度越快、凝胶强度增强的趋势，所以，考虑这些性能，可以考察用途和使用部位等适当设定。例如，在将本发明的医药组合物用作粘连防止剂时，通过使其满足每1重量份(A)成分、(B)成分为1重量份以下，从与水性溶剂混合后到给药的过程中，能够维持低的凝胶强度。
从更有效地使其具备控制在适度范围的凝胶化速度的作用、和防止粘连作用或止血作用的观点出发，优选满足每1重量份(A)成分，(B)成分为0.01～1重量份、优选为0.02～1重量份、更优选为0.03～0.3重量份。
(C)成分
本发明中使用的聚乙二醇(PEG)((C)成分)，只要药学上允许就没有特别限制。
本发明中使用的聚乙二醇，优选在常温呈固态，作为其平均分子量，例如可以列举1000以上左右、优选3000以上左右，具体可以列举约1000～约20000、优选约4000～约20000左右。在聚乙二醇的平均分子量低于1000时，在常温不呈固体；平均分子量超过20000时，粘度过大，因而制造时难以处理。在此，聚乙二醇的平均分子量是按照第一六改正日本药局法“聚乙二醇400”平均分子量法测得的值。
作为(C)成分，具体可以列举在第一六改正日本药局方和医药品添加物中作为制剂原料被收载的聚乙二醇1000、聚乙二醇1500、聚乙二醇1540、聚乙二醇3000、聚乙二醇3350、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000、聚乙二醇20000等。其中，从更有效地使其具备控制在适度范围的凝胶化速度的作用和止血作用的观点出发，优选列举聚乙二醇3350、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇20000，更优选列举聚乙二醇3350和聚乙二醇4000。
这些(C)成分可以单独使用1种，也可以组合2种以上使用。
从使其它成分((A)成分和(B)成分)有效地分散溶解、均匀反应的观点、以及利用聚乙二醇本身的溶解速度、更有效地使其具备控制在适度范围的凝胶化速度的作用和止血作用的观点出发，优选(C)成分以至少被覆(涂布)上述(A)成分的状态包含在本发明的医药组合物中。
本发明的医药组合物中的(C)成分的含量，根据该医药组合物的用途而有所不同，通常，相对于医药组合物的总重量，适合在1～99重量％的范围适当设定。进一步具体而言，在将本发明的医药组合物用作防止粘连用的医用材料时，相对于医药组合物的总重量，(C)成分的含量优选为20～99重量％、更优选为50～80重量％。另外，在将本发明的医药组合物用作止血剂时，从兼顾血液的吸收性和在患处的停留性、更有效地使其具备止血作用的观点出发，相对于医药组合物的总重量，(C)成分的含量优选为1～20重量％、更优选为1～10重量％。
(D)成分
另外，本发明的医药组合物除了含有上述(A)～(C)成分以外，还可以含有有机酸或其碱金属盐((D)成分)。通过含有(D)成分，控制在适度范围的凝胶化速度的作用和止血作用进一步提高。
作为本发明中使用的有机酸，没有特别限制，例如，可以列举葡糖酸-δ-内酯、葡糖酸、葡糖醛酸、半乳糖醛酸、草酸、柠檬酸、醋酸等。另外，作为有机酸的盐，例如，可以列举钠盐、钾盐等。其中，从更有效地使本发明的医药组合物具备将凝胶化速度调节在适度范围的作用和止血作用的观点出发，优选列举葡糖酸-δ-内酯、葡糖酸、葡糖酸的碱金属盐，更优选列举葡糖酸钠和葡糖酸-δ-内酯。其中，葡糖酸-δ-内酯是在与水接触时、水解为葡糖酸而呈现酸性的化合物。
这些(D)成分既可以单独使用1种，也可以组合2种以上使用。
作为本发明的医药组合物中的(D)成分的含量，例如，相对于医药组合物的总重量，可以列举1～60重量％、优选2～50重量％。进一步具体而言，在将本发明的医药组合物用作粘连防止剂时，作为(D)成分的含量，可以列举3～15重量％；在将本发明的医药组合物用作止血剂时，作为(D)成分的含量，可以列举15～40重量％。
在本发明中，(B)成分与(D)成分的配合比例没有特别限制，但从进一步提高将凝胶化速度调节为适度范围的作用、以及防止粘连作用和止血作用的观点出发，优选满足相对于1重量份(B)成分，(D)成分优选为0.01～80重量份、更优选为2～50重量份、进一步优选为3～30重量份。在相对于1重量份(B)成分，(D)成分低于0.01重量份时，凝胶化速度减慢，存在难以有效地发挥防止粘连作用和止血作用的倾向；另外，如果超过80重量份，凝胶化速度变得过快，存在操作性变差的倾向。
其它配合成分
本发明的医药组合物，除了上述成分以外，可以根据需要，以促进治疗效果或防止细菌感染等为目的，含有抗菌剂、抗生素、抗炎症剂、血液循环改善剂、类固醇剂、酶抑制剂、生长因子、各种维生素等的药理成分。本发明的医药组合物，在应用的患处凝胶化、在此停留一定时间，由于含有上述药理成分，也可以作为以缓释药理成分为目的的一种药物递送系统利用。
并且，在本发明的医药组合物中，还可以根据需要含有赋形剂、粘合剂、润滑剂、pH调节剂、缓冲剂、防腐剂、抗氧化剂、着色剂、防湿剂等的添加剂。
凝胶化速度
本发明的医药组合物，通过含有上述(A)～(C)成分和根据需要的(D)成分，能够将凝胶化速度调节在适度的范围，而且具备优异的止血作用。在此，所谓适度的凝胶化速度是指直到适用于患处为止能够确保足够的时间的速度，例如可以列举：在粘弹性测定中，在25℃、ω＝3.142rad/s、f＝0.5000Hz的条件下，形成储存弹性模量(G′)＝损失弹性模量(G″)的状态的时间为1～60分钟、优选为3～40分钟。凝胶化速度的测定可以使用流变仪进行。
形状
本发明的医药组合物只要为固态，其形状没有特别限制，优选为粉末状。在本发明的医药组合物为粉末状时，其粒径没有特别限制，例如以由筛分法测得的粒径计，可以列举约200～2000μm、优选约355～1000μm。
配制方法
本发明的医药组合物通过将上述(A)～(C)成分、根据需要的(D)成分以及其它的药理成分或添加剂混合、形成所希望的形态而配制。作为本发明的医药组合物的配制方法的优选例，可以列举以下的方法：
使(C)成分溶解的第一工序；
在第一工序中得到的(C)成分的溶解液中添加(A)成分、(B)成分、根据需要的(D)成分以及其它的药理成分或添加剂，进行混合的第二工序；和
使在第二工序中得到的混合物固化、成型为所希望形状的第三工序。
上述第一工序中的(C)成分的溶解，例如可以通过使其加热溶解的方法、或者使其在溶剂中溶解的方法来进行。在使(C)成分加热溶解的情况下，其温度条件可以根据使用的(C)成分的种类适当设定，例如可以列举50～90℃、优选60～80℃。另外，在使(C)成分在溶剂中溶解的情况下，例如，相对于90～99容量％的乙醇水溶液等的溶剂，可以混合(C)成分使其达到5～20重量％左右。在本发明的医药组合物中的(C)成分的含量较多时(例如，作为防止粘连用的医用材料使用时)，上述第一工序优选通过加热溶解进行；另外，在(C)成分的含量较少时(例如，作为止血剂使用时)，上述第一工序优选通过在溶剂中溶解进行。
在上述第一工序中使(C)成分在溶剂中溶解的情况下，在上述第二工序中的混合时或混合后除去该溶剂。上述第三工序中成型为所希望的形状，可以通过粉碎、造粒等与目的形状相对应的公知的成型方法进行。
本发明的医药组合物适用于生物体，所以优选实施灭菌处理。灭菌方法没有特别限制，例如可以列举EOG灭菌、电子射线灭菌、γ射线灭菌、紫外线照射等，从保持胶凝剂的稳定性的观点出发，优选列举电子射线灭菌、EOG灭菌和γ射线灭菌。
用途
本发明的医药组合物可以作为防止粘连用的医用材料或止血剂使用。
将本发明的医药组合物作为防止粘连用的医用材料使用时，将该医药组合物与适量的水性溶剂(水、生理食盐水等)混合，配制溶解液，在其呈现适度粘性时向需要防止粘连的患处给药即可。本发明的医药组合物的溶解液向需要防止粘连的患处给药时，凝胶化在该患处进行，形成发挥着防止粘连功能的适度强度的凝胶。在配制本发明的医药组合物的溶解液时，水性溶剂的混合比没有特别限制，例如，每1重量份本发明的医药组合物，可以将水性溶剂设定为1～99重量份左右、优选3～90重量份左右。另外，本发明的医药组合物的溶解液向患处给药的方法没有特别限制，例如，可以利用注射器、刷子等应用于患处。在作为防止粘连用的医用材料使用时，本发明的医药组合物的给药量可以根据患处的状态适当设定，例如，可以列举需要防止粘连的患处每1cm2，由本发明的医药组合物配制的凝胶为0.005～0.1g左右的范围。作为防止粘连用的医用材料使用时，其适用部位没有特别限制，优选用于腹腔内脏器等的外科领域和对腱、神经、关节的整形外科领域。
另外，将本发明的医药组合物作为止血剂使用时，可以将该医药组合物与适量水混合得到的溶解液应用于需要止血的患处，或者可以使该医药组合物凝胶化成为糊状的糊状物应用于需要止血的患处，但优选将该医药组合物直接以固态应用于需要止血的患处。本发明的医药组合物向患处给药时，在该患处发生凝胶化，形成发挥止血功能的适度强度的凝胶。另外，在将本发明的医药组合物以固态直接向患处给药时，可以根据需要，在给予该医药组合物后，通过散布水、生理食盐水等水性溶剂以促进该医药组合物的凝胶化。将本发明的医药组合物直接以固态向患处给药的方法没有特别限制，例如，可以将由喷雾干燥法等造粒得到的本发明的医药组合物通过散布等向患处给药。作为止血剂使用时，本发明的医药组合物的给药量可以根据患处的状态适当设定，例如，可以列举需要止血的患处每1cm2，由本发明的医药组合物配制的凝胶为0.01～0.1g左右的范围。
实施例
下面，基于实施例等对本发明进行详细说明，但本发明不限定于这些实施例。
试验例1：粉末状的医药组合物的凝胶化速度的评价-1
配制
在以约70℃熔融的聚乙二醇4000(三洋化成工业株式会社生产)中加入藻酸钠(种类如表1所示，全部由Kimica Corporation生产)、磷酸氢钙·2水合物(和光纯药工业株式会社生产)和葡糖酸-δ-内酯(Spectrum Chenmical Mfg.Corp.USP生产)，使用搅拌子充分混合后，自然冷却。之后，将混合物粉碎，放在日本药局方筛序号22号(筛目710μm)的筛上，得到通过该筛的粉末状的医药组合物。各成分的配合量如下述表1所示。
凝胶化速度的测定
测定上述得到的粉末状的医药组合物的凝胶化速度。具体而言，在0.3g粉末状的医药组合物中添加3mL精制水后，搅拌30秒，配制1分钟后，在25℃的条件下用粘度·粘弹性测定装置(流变仪)(HAAKE MARS III：Thermo Fisher Scientific Inc.生产)测定凝胶化时间。具体的测定条件如下。
温度控制单元：珀耳帖板
测定几何学(measurement geometry)：直径35mm的平行板
间隙：1mm
样品量：1mL
施加应力：11.90Pa
频率：0.5000Hz
角速度：3.142rad/s
将储存弹性模量(G′)与损失刚性模量(G″)的重合点(交叉点)作为凝胶化点，将直至到达凝胶化点的时间作为凝胶化时间。在下表1中一并表示结果。
[表1]
※表中，各配合成分的含量的单位为“重量％”。
※表中，藻酸钠如下所述。I-1G表示Kimica Algin High·G系列的I-1G、粘度为100～200mPa·s、重均分子量约为68万，I-1表示Kimica Algin I系列的I-1、粘度为80～200mPa·s、重均分子量约为86万，I-3G表示Kimica Algin High·G系列的I-3G、粘度为300～400mPa·s、重均分子量约为80万，I-8表示Kimica Algin I系列的I-8、粘度为800～900mPa·s、重均分子量约为79万。这里，粘度均为20℃的1w/v％水溶液的粘度。
实施例1～8均可以确认：在水中的溶解性提高，能够不产生球块地形成均匀的凝胶。另一方面，除了不配合聚乙二醇4000以外，使用与实施例1相同组成的医药组合物，同样地进行试验，使之在水中溶解时，确认球块的形成等，不均匀地分散，难以配制均匀的凝胶。另外，除了不配合磷酸氢钙·2水合物以外，使用与实施例1相同组成的医药组合物，同样地进行试验，不能具备充分的凝胶强度。
另外，由实施例1～5的结果可以确认，随着聚乙二醇4000的含量增加，能够缩短凝胶化时间。并且，由实施例6～8的结果还可以确认，随着藻酸钠所呈现的粘度增高，凝胶化时间缩短。另外，未表示实施例5～8的凝胶强度的测定值，但实施例1～8(特别是实施例2～8)的凝胶强度均能够发挥防止粘连作用，并且显示良好的范围。
由以上结果可知，通过将藻酸钠(胶凝剂)、磷酸氢钙·2水合物(酸与2价金属的盐)和聚乙二醇4000(聚乙二醇)组合，藻酸钠(胶凝剂)在水中的溶解性提高，能够不产生球块地配制均匀的凝胶。另外，还可以通过适当设定藻酸钠(胶凝剂)、磷酸氢钙·2水合物(酸与2价金属的盐)和聚乙二醇4000(聚乙二醇)的组成，能够调节为所希望的凝胶化速度。由这些结果可以确认，实施例1～8的医药组合物具备适合作为防止粘连用的医用材料的特性。
试验例2.粉末状医药组合物的凝胶化速度的评价-2
配制
在以约70℃熔融的聚乙二醇4000(三洋化成工业株式会社生产)中加入藻酸钠(Kimica Algin I系列的IL-6、1w/v％水溶液、20℃时的粘度为50～80mPa·s；重均分子量约为69万，Kimica Corporation生产)、磷酸氢钙(和光纯药工业株式会社生产)和葡糖酸-δ-内酯(Spectrum Chenmical Mfg.Corp.USP生产)，使用搅拌子充分混合后，自然冷却。之后，将混合物粉碎，放在日本药局方筛序号30号(筛目500μm)的筛上，得到通过该筛的粉末状的医药组合物。各成分的配合量如下述表2所示。
凝胶化速度的测定
测定上述得到的粉末状的医药组合物的凝胶化速度。具体而言，在5mL精制水中添加0.25g粉末状的医药组合物，搅拌10秒，配制1分钟后，在37℃的条件下用粘度·粘弹性测定装置(流变仪)(HAAKE MARS III：Thermo Fisher Scientific Inc.生产)测定凝胶化时间。具体的测定条件如下。
温度控制单元：珀耳帖板
测定几何学(measurement geometry)：直径35mm的平行板
间隙：1mm
样品量：1mL
施加应力：1Pa
频率：0.5000Hz
角速度：3.142rad/s
将储存弹性模量(G′)与损失刚性模量(G″)的重合点(交叉点)作为凝胶化点，将直至到达凝胶化点的时间作为凝胶化时间。在表2中一并表示交叉点的储存弹性模量(G′)和损失刚性模量(G″)的值、凝胶化时间、交叉点的粘度(|η*|)。
[表2]
※表中，各配合成分的含量的单位为“重量％”。
由以上的结果可以确认，随着藻酸钠的含量增加，凝胶化时间缩短，粘度也升高。即，可知通过调节藻酸钠的浓度，能够控制与水接触时的凝胶化时间和凝胶强度。
试验例3.粉末状的医药组合物的凝胶化速度的评价-3
配制
在以约70℃熔融的聚乙二醇4000(三洋化成工业株式会社生产)中加入藻酸钠(Kimica Algin I系列的IL-1(1w/v％水溶液、20℃时的粘度约为15mPa·s、重均分子量约为26万；Kimica Corporation生产)、磷酸氢钙(和光纯药工业株式会社生产)和葡糖酸-δ-内酯(Spectrum Chenmical Mfg.Corp.USP生产)，使用搅拌子充分混合后，自然冷却。之后，将混合物粉碎，放在日本药局方筛序号30号(筛目500μm)的筛上，得到通过该筛的粉末状的医药组合物。各成分的配合量如下述表3所示。
凝胶化速度的测定
测定上述得到的粉末状的医药组合物的凝胶化速度。具体而言，在精制水中添加粉末状的医药组合物以达到表3所示的浓度，搅拌10秒，配制1分钟后，在37℃的条件下用粘度·粘弹性测定装置(流变仪)(HAAKE MARS III：Thermo Fisher Scientific Inc.生产)测定凝胶化时间。具体的测定条件与试验例2相同。在表3中表示得到的结果。
[表3]
※表中，各配合成分的含量的单位为“重量％”。
由以上的结果可以确认，磷酸氢钙相对于藻酸钠的的比例越高，凝胶化时间越短，粘度越上升。即，可知通过调节藻酸钠与磷酸氢钙的比例，能够控制与水接触时的凝胶化时间和凝胶强度。
试验例4.粉末状的医药组合物的凝胶化速度的评价-4
配制
在以约70℃熔融的聚乙二醇4000(三洋化成工业株式会社生产)中加入藻酸钠(Kimica Algin I系列的IL-1、1w/v％水溶液、20℃时的粘度约为15mPa·s、重均分子量约为26万；Kimica Corporation生产)、磷酸氢钙(和光纯药工业株式会社生产)和葡糖酸-δ-内酯(Spectrum Chenmical Mfg.Corp.USP生产)，使用搅拌子充分混合后，自然冷却。之后，将混合物粉碎，放在日本药局方筛序号30号(筛目500μm)的筛上，得到通过该筛的粉末状的医药组合物。各成分的配合量如下述表4所示。
凝胶化速度的测定
测定上述得到的粉末状的医药组合物的凝胶化速度。具体而言，在精制水10mL中添加粉末状的医药组合物1g，搅拌10秒，配制1分钟后，在37℃的条件下用粘度·粘弹性测定装置(流变仪)(HAAKE MARS III：Thermo Fisher Scientific Inc.生产)测定凝胶化时间。具体的测定条件与试验例2相同。在表4中表示得到的结果。
[表4]
※表中，各配合成分的含量的单位为“重量％”。
由以上的结果可以确认，随着葡糖酸-δ-内酯相对于磷酸氢钙的比例增高，能够缩短凝胶化时间。即，可知通过调节磷酸氢钙与葡糖酸-δ-内酯的比例，能够控制与水接触时的凝胶化时间。
试验例5.粉末状的医药组合物的凝胶化速度的评价-5
配制
在以约70℃熔融的聚乙二醇4000(三洋化成工业株式会社生产)中加入藻酸钠、磷酸氢钙(和光纯药工业株式会社生产)和葡糖酸-δ-内酯(Spectrum Chenmical Mfg.Corp.USP生产)，使用搅拌子充分混合后，自然冷却。之后，将混合物粉碎，放在日本药局方筛序号30号(筛目500μm)的筛上，得到通过该筛的粉末状的医药组合物。各成分的配合量如下述表5～9所示。其中，表5～9中藻酸钠的种类如下。
A：90重量份Kimica Algin ULV系列ULV-5(10w/v％水溶液、20℃时的粘度为500～600mPa·s；Kimica Corporation生产)和10重量份Kimica Algin I系列I-1(1w/v％水溶液、20℃时的粘度为80～200mPa·s、重均分子量约为86万；Kimica Corporation生产)的混合物
B：ULV-10(1w/v％水溶液、20℃时的粘度为7mPa·s左右、重均分子量约为9万；Kimica Corporation生产)
C：ULV-20(1w/v％水溶液、20℃时的粘度为10mPa·s左右、重均分子量约为20万；Kimica Corporation生产)
D：Kimica Algin High·G系列IL-1(1w/v％水溶液、20℃时的粘度约为15mPa·s、重均分子量约为26万；Kimica Corporation生产)
E：Kimica Algin I系列IL-6(1w/v％水溶液、20℃时的粘度为50～80mPa·s、重均分子量约为69万；Kimica Corporation生产)
凝胶化速度的测定
测定上述得到的粉末状的医药组合物的凝胶化速度。具体而言，在精制水中添加粉末状的医药组合物以达到表5至9所示的浓度，搅拌10秒，配制1分钟后，在37℃的条件下用粘度·粘弹性测定装置(流变仪)(HAAKE MARS III：Thermo Fisher Scientific Inc.生产)测定凝胶化时间。也测定开始测定时的粘度(|η*|)。具体的测定条件与试验例2相同。在表5中表示得到的结果。
[表5]
※表中，各配合成分的含量的单位为“重量％”。
[表6]
※表中，各配合成分的含量的单位为“重量％”。
[表7]
※表中，各配合成分的含量的单位为“重量％”。
[表8]
※表中，各配合成分的含量的单位为“重量％”。
[表9]
※表中，各配合成分的含量的单位为“重量％”。
※表中，“-”表示未测定。
实施例28～50的医药组合物均具备适度范围的凝胶化速度和凝胶强度，充分满足作为粘连防止用医疗材料所要求的特性。
试验例7.粉末状的医药组合物的配制
配制
将藻酸钠(Kimica Algin High·G系列I-1G：1w/v％水溶液、20℃时的粘度为100～200mPa·s；重均分子量约为72万、Kimica Corporation生产)、磷酸氢钙·2水合物(和光纯药工业株式会社生产)和葡糖酸-δ-内酯(Spectrum Chenmical Mfg.Corp.USP生产)充分混合后，添加到聚乙二醇4000的5重量％溶液(溶剂为水)中，暴露在暖风中，同时用玛瑙研钵混炼，得到混合物。之后，将混合物粉碎，放在日本药局方筛序号22号(筛目710μm)的筛上，得到粉末状的医药组合物。各成分的配合量如下述表10所示。这些粉末状的医药组合物具备适合作为止血剂的特性。
[表10]
※表中，各配合成分的含量的单位为“g”。
试验例7.粉末状的医药组合物的凝胶化速度的评价-6
除了使用果胶(SM-666和Vistop D-1382，均由三荣源FFI株式会社生产)代替藻酸钠以外，按照与试验例5同样的方法得到粉末状的医药组合物。各成分的配合量如下述表11所示。另外，使用得到的各粉末状的医药组合物，按照与试验例5同样的方法进行凝胶化速度的测定。在下述表11中表示结果。
[表11]
※表中，各配合成分的含量的单位为“重量％”。
实施例63和64的医药组合物，均具备适度范围的凝胶化速度和凝胶强度，充分满足作为粘连防止用医疗材料所要求的特性。
试验例8.腱粘连防止效果-1
使用雄性大鼠(Crlj:Wl)(由Charles River Laboratories Japan,Inc.购入)，评价腱的粘连防止效果。具体而言，首先纵向切开大鼠足底部的膜性腱鞘，使趾深屈肌腱露出进行半切开，由此制作腱损伤模型大鼠。接着，在半切开的手术部位及其周边给予50μL表12所示的各试验物质。之后，为了避免半切开的腱由于大鼠自身的运动而断裂，将坐骨神经切断，以限制自动运动的状态饲养4周。4周后，以各大鼠只带有长趾屈肌的状态，将足从脚踝切离。在切离的足的长趾屈肌负荷60g荷重，测定负荷前后的第2趾的中足指节关节(MTP)和近侧指节间关节(PIP)的角度。按照下式算出负荷前后的弯曲角度之差。另外，为了比较，也测定没有将趾深屈肌腱半切开的正常趾负荷前后的弯曲角度之差。
负荷前后的弯曲角度之差(°)＝(负荷后的MTP角度+负荷后的PIP角度)－(负荷前的MTP角度+负荷前的PIP角度)
[表12]
在图1中表示得到的结果。由该结果可以确认，与对照组相比，给药组1～5中负荷前后的弯曲角度之差显示大的值，手术部位的趾深屈肌腱的可动区域扩大，手术后的粘连得到有效抑制。
另外，在图2的A中表示手术起4周后，观察对照组的大鼠的手术部位(趾深屈肌腱)的状态的结果；在图2的B中表示观察给药组1的大鼠的手术部位(趾深屈肌腱)的状态的结果。由图2的A可以确认，在给予了生理食盐水的对照组中，腱上附着的瘢痕组织与周围组织严重粘连。另一方面，由图2的B可知，在将实施例28的医药组合物与生理食盐水一起给药的给药组1中，腱上几乎没有瘢痕组织，粘连得到大幅度抑制。
试验例9.腹膜-盲肠防止粘连效果-2
使用雄性大鼠(Crlj:Wl)(由Charles River Laboratories Japan,Inc.购入)，评价侧壁(side wall)和盲肠的粘连防止效果。具体而言，首先切除大鼠右腹膜外腹斜肌和内腹斜肌的1×4cm的肌片，制作侧壁。接着，以纱布对侧壁内进行擦拭。并且，从大鼠摘出盲肠，用纱布对全部区域进行擦拭，之后，以在空气中暴露的状态室温静置20分钟。然后，用乳酸林格氏液(株式会社大塚制药工场生产)清洗盲肠，在盲肠的全部区域给予表13所示的各试验物质。接着，在侧壁部分填充上述处理过的盲肠，送回腹腔内，闭腹，饲养1周。在1周后开腹，观察侧壁与盲肠的粘连状态。粘连的状态按照下述判断基准，求出粘连部位得分和粘连程度得分，将它们的合计得分作为总粘连得分算出。
＜粘连部位得分＞
得分：状态
0：无粘连
1：确认只在侧壁切断部位粘连
2：确认在侧壁切断部位和侧壁内双方粘连
＜粘连程度得分＞
得分：状态
1：轻度粘连：能够用手指容易剥离粘连的粘连
2：中等程度粘连：必须钝剥离，能够剥离粘连的粘连
3：重度粘连：必须钝剥离，不能不损伤组织地剥离的粘连
[表13]
在图3中表示得到的结果。结果，在给予了乳酸林格氏液的对照组B中，6例全部确认粘连；而在给药组A中，6例中有5例未确认粘连，在给药组B中，6例中有4例未确认粘连。由以上结果可知，通过利用本发明的医药组合物，能够有效地抑制脏器的粘连。
试验例10.止血效果-1
＜a法：对非持续性出血的止血效果的评价＞
将雄性(Crlj:Wl)大鼠(由Charles River Laboratories Japan,Inc.购入)开腹，露出左肾，将左肾动静脉夹紧，除去从那里渗出的血液，散布约0.3g实施例57的粉末状的医药组合物，用以生理食盐水润湿的纱布按压1分钟。然后，解除夹紧，目测观察在5分钟期间内有无出血。作为比较例，散布藻酸钠粉末，同样地进行测定。
＜b法：对持续性出血的止血效果的评价＞
除了在散布组合物前解除夹紧以外，与a法同样地试验。
在a法中，散布实施例57的粉末状的医药组合物，在图4的A中表示从解除夹紧起5分钟后的状态；另外，在图4的B中表示除去凝胶化的实施例57的医药组合物后的状态；在图4的C中表示散布比较例(藻酸钠粉末)、从解除夹紧起5分钟后的状态。如图4所示可以确认，在散布实施例57的粉末状的医药组合物时，可以目测确认从解除夹紧起5分钟后没有出血。另外，即使除去凝胶化的组合物，也没有确认出血。另一方面，在比较例(散布藻酸钠粉末)中，从解除夹紧起5分钟后，继续明显出血，不能确认止血效果。另外，在b法中实施例57的粉末状的医药组合物也显示几乎同样的止血效果，但在比较例的藻酸钠粉末中未能确认止血效果。
试验例11.止血效果-2
使用雄性大鼠(Crlj:Wl)(由Charles River Laboratories Japan,Inc.购入)，评价止血效果。具体而言，在夹紧大鼠的左肾动静脉后，切除1/3肾。接着，除去渗出来的血液，在肾的切断部位给予表14所示的试验物质。然后，使用带有喷嘴的注射器，在已向肾的切断部位给药的试验物质上散布约2mL生理食盐水，放置1分钟。然后，解除夹紧。从解除夹紧起到5分钟后的过程中，用医用纱布吸取从肾的切断部位流出的血液，将吸取前后的纱布重量差作为出血量算出。
[表14]
在图5中表示得到的结果。由该结果可以确认，与对照组I和II相比，在给药组I中可以明显地减少出血量，本发明的医药组合物具有优异的止血效果。