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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201710157870.3 (22)申请日 2017.03.16 (71)申请人 中国科学院昆明植物研究所 地址 650201 云南省昆明市蓝黑路132号 申请人 昆明龙津药业股份有限公司 (72)发明人 赵勤实 樊献俄 张人伟 杨春雷 苏佳 彭丽艳 邵立东 吴兴德 (74)专利代理机构 昆明协立知识产权代理事务 所(普通合伙) 53108 代理人 旃习涵 (51)Int.Cl. A61K 31/365(2006.01) A61K 31/403(2006.01) A61K 31。
2、/4025(2006.01) A61P 3/10(2006.01) C07D 307/92(2006.01) C07D 405/14(2006.01) (54)发明名称 Tilifodiolide及其衍生物在制备治疗或预 防II型糖尿病药物中的应用 (57)摘要 本发明公开了Tilifodiolide及其衍生物作 为有效成分及其与药学上可药用载体和赋形剂 制成的药物， 以及它们在制备治疗或预防II型糖 尿病药物中的应用。 权利要求书2页 说明书12页 附图3页 CN 106955285 A 2017.07.18 CN 106955285 A 1.式(I)所示的化合物Tilifodiolide及。
3、其衍生物在制备治疗或预防II型糖尿病药物 中的应用， 其中 ， X ， Y为氧或者氮原子 ； 当X和Y均为氧时R1和R2不存在 ， 此时化合物为 Tilifodiolide； 当X为氧原子时， R1不存在， Y为氮原子， R2选自H、 C1 C10直链、 环状(三元 十元环)或支链烷基、 芳基和酰基； 当Y为氧原子时， R2不存在， X为氮原子， R1选自H、 C1 C10直 链、 环状(三元十元环)或支链烷基、 芳基和酰基； 当X和Y同时为氮原子时， R1和R2分别或同 时选自H、 C1 C10直链、 环状(三元十元环)或支链烷基、 芳基和酰基。 2.如下结构式所示的Tilifodiolid。
4、e及其衍生物在制备治疗或预防II型糖尿病药物中 的应用， 3.如权利要求1或2所述的Tilifodiolide及其衍生物在制备治疗或预防II型糖尿病药 物中的应用， 其特征在于Tilifodiolide及其衍生物通过显著减轻给药生物体的体重， 显著 降低给药生物体的空腹血糖， 改善给药生物体的糖耐量和胰岛素耐量， 降低给药生物体的 血甘油三酯含量实现其在制备治疗或预防II型糖尿病的药物中的应用。 4.权利要求1或2所述的Tilifodiolide及其衍生物与药学上可药用载体或赋形剂组成 的药物组合物。 5.化合物Tilifodiolide的制备方法， 其特征在于该方法包括： 取椴叶鼠尾草地上部。
5、 分， 干燥粉碎后以甲醇、 乙醇、 丙酮在室温下冷浸提取三次， 每次24h， 减压浓缩得提取物浸 膏， 该提取物用80 100目1 1.5聚酰胺拌样后， 使用聚苯乙烯树脂柱层析对其进行分离， 先 采用50乙醇 水进行洗脱， 然后用75乙醇 水洗脱， 收集75乙醇 水洗脱部分， 减压浓 缩后用甲醇或乙醇结晶和重结晶获得Tilifodiolide， 母液部分用硅胶层析进一步纯化得 到Tilifodiolide。 6.化合物2 5的制备方法， 其特征在于该方法包括： 取椴叶鼠尾草地上部分， 干燥粉碎 后以甲醇、 乙醇、 丙酮在室温下冷浸提取三次， 每次24h， 减压浓缩得提取物浸膏， 该提取物 用8。
6、0 100目1 1.5聚酰胺拌样后， 使用聚苯乙烯树脂柱层析对其进行分离， 先采用50乙 权 利 要 求 书 1/2 页 2 CN 106955285 A 2 醇 水进行洗脱， 然后用75乙醇 水洗脱， 收集75乙醇 水洗脱部分， 减压浓缩后用甲醇 或乙醇结晶和重结晶获得Tilifodiolide(1)， 母液部分用硅胶层析进一步纯化得到1， 然后 再按如下流程制备得化合物2 5： 权 利 要 求 书 2/2 页 3 CN 106955285 A 3 Tilifodiolide及其衍生物在制备治疗或预防II型糖尿病药 物中的应用 技术领域 0001 本发明属于药物技术领域， 具体涉及Tilif。
7、odiolide及其衍生物作为有效成分及 其与药学上可药用载体和赋形剂制成的制剂， 以及它们在治疗或预防II型糖尿病药物中的 应用。 背景技术 0002 糖尿病主要分为两类， 型糖尿病和型糖尿病。 其中， 型糖尿病约占糖尿病总 体人群的90 95以上。 糖尿病发病率的不断升高， 主要是由于型糖尿病发病率的大幅攀 升。 型糖尿病是一组发病机制仅部分获知的复杂代谢紊乱， 其临床表征为胰岛素拮抗， 过 量肝糖生成， 以及葡萄糖诱导的胰岛素在 细胞中分泌衰减。 目前用于治疗型糖尿病的口 服药物主要包括五类： 噻唑烷二酮类化合物(提高胰岛素灵敏度)； metformin等双胍类药物 (降低血糖浓度)； 。
8、葡萄糖苷酶抑制剂(延缓肠内糖吸收和消化)； 以及磺酰脲和非磺酰脲 促分泌素(促进胰岛素分泌)。 此外， DPPIV抑制剂类药物(抑制体内GLP 1降解、 促进胰岛素 分泌)、 GLP 1类似物类药物(促进胰岛素分泌)和SGLT2抑制剂类药物(促进尿糖排出)是近 10年来新上市使用的抗糖尿病药物。 然而， 这些药物都有各自的副作用和局限性， 且均无法 长期有效的治疗糖尿病。 通过联合疗法以控制病人的血糖浓度， 尽管可以在一定程度上治 疗糖尿病， 但研究证实仅靠这一种单一的方法， 很难完全治愈糖尿病。 因此， 发现高效低毒 的糖尿病治疗药物仍然是重大社会需求。 0003 Tilifodiolide。
9、为tetraline型克罗烷二萜类天然产物， 最早从墨西哥产的椴叶鼠 尾草(Salvia tiliifoliaVahl)中分离得到(J.Org.Chem.1990,55,3522 3525)。 椴叶鼠尾 草(Salvia tiliifoliaVahl)在我国是属于外来入侵植物， 可能在对外种子交换时逸出而 生植物， 早期被鉴定为宾鼠尾草或杜氏鼠尾草(Salvia dugesii Fernald)， 后又被向春雷 等人鉴定为椴叶鼠尾草(Salvia tiliifoliaVahl)。 Tilifodiolide作为在植物中含量占干 燥植物样品的0.2(Helvetica Chimica Acta.。
10、2004,87,949 955)。 Tilifodiolide对夜蛾 (Spodopteralittoralis)有明显拒食作用(Pestic.Sci.1996,47,17 23)， 并可减轻粘虫 (Pseudaletiaseparata Walker)对蚕豆嫩叶的啃食(Nat.Prod.Bioprospect.2011,1,81 86)。 到目前为止， 未见Tilifodiolide在糖尿病和II型糖尿病方面相关的活性报道。 发明内容 0004 本发明的目的在于提供式(I)所示的化合物Tilifodiolide及其衍生物作为有效 成分在治疗或预防II型糖尿病药物中的应用， 以它们为活性成分组。
11、成的药物组合物， 以及 它们的制备方法。 0005 为了实现本发明的上述目的， 本发明提供了如下的技术方案： 0006 式(I)所示的化合物Tilifodiolide及其衍生物在制备治疗或预防II型糖尿病药 物中的应用， 说 明 书 1/12 页 4 CN 106955285 A 4 0007 0008 其中， X， Y为氧或者氮原子； 当X和Y均为氧时R1和R2不存在， 此时化合物为 Tilifodiolide； 当X为氧原子时， R1不存在， Y为氮原子， R2选自H、 C1 C10直链、 环状(三元 十元环)或支链烷基、 芳基和酰基； 当Y为氧原子时， R2不存在， X为氮原子， R1选。
12、自H、 C1 C10直 链、 环状(三元十元环)或支链烷基、 芳基和酰基； 当X和Y同时为氮原子时， R1和R2分别或同 时选自H、 C1 C10直链、 环状(三元十元环)或支链烷基、 芳基和酰基。 0009 如下结构式所示的Tilifodiolide及其衍生物在制备治疗或预防II型糖尿病药物 中的应用， 0010 0011 Tilifodiolide及其衍生物与药学上可药用载体或赋形剂组成的药物组合物。 0012 化合物Tilifodiolide的制备方法， 该方法包括： 取椴叶鼠尾草地上部分， 干燥粉 碎后以甲醇、 乙醇、 丙酮在室温下冷浸提取三次， 每次24h， 减压浓缩得提取物浸膏， 。
13、该提取 物用80 100目1 1.5聚酰胺拌样后， 使用聚苯乙烯树脂柱层析对其进行分离， 先采用50乙 醇 水进行洗脱， 然后用75乙醇 水洗脱， 收集75乙醇 水洗脱部分， 减压浓缩后用甲醇 或乙醇结晶和重结晶获得Tilifodiolide， 母液部分用硅胶层析进一步纯化得到 Tilifodiolide。 0013 化合物2 5的制备方法， 该方法包括： 取椴叶鼠尾草地上部分， 干燥粉碎后以甲醇、 乙醇、 丙酮在室温下冷浸提取三次， 每次24h， 减压浓缩得提取物浸膏， 该提取物用80 100目 1 1.5聚酰胺拌样后， 使用聚苯乙烯树脂柱层析对其进行分离， 先采用50乙醇 水进行洗 脱， 。
14、然后用75乙醇 水洗脱， 收集75乙醇 水洗脱部分， 减压浓缩后用甲醇或乙醇结晶和 重结晶获得Tilifodiolide(1)， 母液部分用硅胶层析进一步纯化得到1， 然后再按如下流程 制备得化合物2 5： 说 明 书 2/12 页 5 CN 106955285 A 5 0014 0015 上述发明是在天然化合物库基础上， 经过化学信息和生物信息筛选， 选用型糖 尿病小鼠C57BL/KsJdb/db为模型， 开展体内活性筛选发现的治疗糖尿病新型活性化合物。 由于Tilifodiolide在植物中含量高， 而相关的植物是属于唇形科鼠尾草属植物， 该植物是 一年生草本植物， 易于栽培， 因此具有重。
15、要的应用价值。 0016 Tilifodiolide可从中国产的椴叶鼠尾草(Salvia tiliifoliaVahl)分离制备， Tilifodiolide结构中含有两个内酯环， Tilifodiolide在碱催化下与氨或胺反应生成内酰 胺衍生物。 0017 式I所示Tilifodiolide衍生物与药学上可药用载体和赋形剂制成的制剂在治疗 或预防II型糖尿病药物中的应用。 可药用载体包括但不限于卵磷脂、 维生素E、 聚乙二醇、 丙 二醇、 丙三醇、 吐温或其他药物制剂用的表明活性剂、 氧化铝、 硬脂酸铝、 离子交换材料、 缓 冲物质如磷酸盐、 山梨酸、 聚乙烯吡咯酮、 纤维素物质、 聚乙烯。
16、醇、 羧甲基纤维素钠、 羊毛脂、 环糊精等可用于促进本发明所述化合物、 其药用盐或前药药物传递的载体。 0018 本发明所述的药物， 可以包含Tilifodiolide或其衍生物以及其它可药用辅料。 可 药用辅料包括但不限于： 崩解剂如羧甲基淀粉钠、 交联羧甲基纤维素钠、 低取代羟丙基纤维 素、 交联聚乙烯吡咯烷酮、 海藻酸钠等， 粘合剂如聚维酮K30、 微晶纤维素、 褐藻酸钠等， 填充 剂如无水乳糖、 淀粉、 葡萄糖、 乳糖珠粒等， 润滑剂如十二烷基硫酸镁、 硬脂酸镁等， 以及其 他赋形剂、 增溶剂、 香味剂、 着色剂等。 0019 本发明所述结构式(I)的化合物Tilifodiolide及。
17、其衍生物或其可药用盐及药物 组合物可通过肠道或者非肠道途径给药， 给药剂型包括但不限于颗粒剂、 胶囊、 片剂等。 0020 本发明选 用型糖尿病小鼠 C57BL/KsJd b/d b为模型 ,连续灌胃给予 Tilifodiolide， 实验结果提示Tilifodiolide能显著减轻给药的db/db小鼠体重， 与对照组 相比显著降低给药小鼠的空腹血糖， 改善糖耐量和胰岛素耐量； 部分减轻肝脏炎症； 一定程 说 明 书 3/12 页 6 CN 106955285 A 6 度上降低血甘油三酯含量。 0021 本发明发现的Tilifodiolide在II型糖尿病方面的应用尚无报道， 因此 Tilif。
18、odiolide及其衍生物药用盐极有应用前景。 0022 除非另有说明， 本发明使用的术语 “烷基” 是指直链或者支链的饱和一价烃基， 其 中烷基可以任选地被一个或多个取代基取代。 在某些实施方式中， 烷基是具有1到20 (C1 20)、 1到15(C1 15)、 1到12(C1 12)、 1到10(C1 10)、 或者1到6(C1 6)个碳原子的直链饱和的一 价烃基， 或者具有3到20(C3 20)、 3到15(C3 15)、 3到12(C3 12)、 3到10(C3 10)、 或者3到6(C3 6)个 碳原子的支链的饱和一价烃基。 本发明使用的直链C16和支链C36烷基也被称为 “低级烷 。
19、基” 。 烷基的实施方式包括但不限于甲基、 乙基、 丙基(包括所有同分异构形式)、 n 丙基、 异 丙基、 丁基(包括所有同分异构形式)、 n 丁基、 异丁基、 t 丁基、 戊基(包括所有同分异构形 式)、 和己基(包括所有同分异构形式)。 例如， C1 6烷基指具有1到6个碳原子的直链饱和一价 烃基或者具有3到6个碳原子的支链饱和一价烃基。 0023 除非另作说明， 本发明使用的术语 “环烷基” 是指环状饱和桥和/或非桥的一价烃 基， 其可以任选地被一个或多个本发明所述的取代基取代。 在某些实施方式中， 环烷基具有 从3到20(C3 20)、 从3到15(C3 15)、 从3到12(C3 1。
20、2)、 从3到10(C3 10)、 或者从3到7(C3 7)个碳原 子。 环烷烃基的实施方式包括但不限于环丙基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 环庚基、 十氢萘基 和金刚烷基。 0024 除非另作说明， 本发明使用的术语 “酰基” 是指直链、 支链或环状的饱和一价酰基， 其中烷基部分可以任选地被一个或多个取代基取代。 在某些实施方式中， 对酰基的烷基部 分的要求如上对 “烷基” 的定义。 0025 除非另作说明， 本发明使用的术语 “芳基” 是指单环芳基和/或包含至少一个芳香 烃环的多环单价芳基。 在某些实施方式中， 芳基具有从6到20(C6 20)、 从6到15(C6 15)、 或者从 6到。
21、10(C6 10)个环原子。 芳基的实施方式包括但不限于苯基、 萘基、 芴基、 薁基(azulenyl)、 蒽基、 菲基、 芘基、 联苯基和三联苯基。 芳基也指其中一个环是芳香族的和其他环可以是饱 和的， 部分不饱和的或者芳香族的二环或者三环的碳环， 例如二氢萘基、 茚基、 二氢茚基或 者四氢萘基(萘满基(tetralinyl)。 在某些实施方式中， 芳基也可以任选地被一个或多个 取代基取代。 附图说明： 0026 图1各组小鼠组织重量统计图； 0027 图2各组小鼠体重变化曲线图； 0028 图3各组小鼠血糖测定结果示意图； 0029 图4 OGTT曲线及曲线下面积示意图； 0030 图5 。
22、ITT曲线及曲线下面积示意图； 0031 图6各组小鼠血清相关指标测定结果示意图。 具体实施方式： 0032 以下通过实施例说明本发明的具体步骤， 但不以任何形式限制本发明。 除非另有 说明， 本发明中所使用的术语为本领域普通技术人员通常理解的含义。 下面结合附图， 用本 说 明 书 4/12 页 7 CN 106955285 A 7 发明的具体实施例并参照数据进一步来详细描述本发明， 以下的实施例仅为举例说明本发 明， 不以任何形式限制本发明的范围。 0033 实施例1： 0034 Tilifodiolide的分离提取： 椴叶鼠尾草(SalviatiliifoliaVahl)地上部分10kg。
23、， 干燥粉碎后以100丙酮在室温下冷浸提取三次， 每次24h， 减压浓缩得浸膏230g。 该浸膏用 80 100目聚酰胺(1： 1.5)拌样后， 使用树脂MCI GEL CHP20P柱层析对其进行分离， 先采用 50乙醇 水进行洗脱， 然后用75乙醇 水洗脱， 收集75乙醇 水洗脱部分， 减压浓缩后 用甲醇或乙醇结晶和重结晶， 母液部分可用硅胶层析进一步纯化， 共可得25克化合物 Tilifodiolide。 0035 实施例2： 0036 化合物4的制备： 将化合物Tilifodiolide(20.0mg)溶于甲醇(5mL)中， 加入三乙胺 (8.5 L)和25氨水(5 L)， 封管加热至1。
24、80反应24小时， 减压蒸馏除去甲醇， 加水5mL， 用 CH2Cl2萃取三次(5mL3)， 合并有机相， 用Na2SO4干燥。 过滤， 蒸干滤液， 装硅胶柱色谱， 用石 油醚： 乙酸乙酯(2:8)洗脱得化合物4(5.6mg)。 ESI MS:358M+Na+； 6932M+Na+； 核磁数据 见表1 0037 实施例3： 0038 化合物5的制备： 将化合物1(5 .0mg)溶于四氢呋喃(5mL)中， 冰浴中加入NaH (0.5mg)半小时后， 加入CH3I(1 L) ,恢复至室温， 反应2小时。 加水5mL， 用CH2Cl2萃取三次 (5mL3)， 合并有机相， 用Na2SO4干燥。 过滤。
25、， 减压蒸干滤液， 装硅胶柱色谱， 用石油醚： 乙酸 乙酯(2:8)洗脱得化合物5(3.2mg)。 ESI MS:372M+Na+； 388M+K+； 7212M+Na+； 7372M+ K+； 核磁数据见表1 0039 表1化合物4和5的核磁数据(600MHz in CDCl3) 说 明 书 5/12 页 8 CN 106955285 A 8 0040 0041 0042 实施例4： 0043 Tilifodiolide在糖尿病及II型糖尿病相关疾病方面的活性： 0044 实验动物与分组： 0045 C57BL/KsJdb/db小鼠(db/db小鼠)是Leptin受体基因缺陷导致的先天性型糖。
26、尿 病小鼠， 主要表现为下丘脑缺陷， 对饱感物质(瘦素)缺乏反应， 具有高血糖、 高胰岛素血症、 糖代谢异常、 肥胖等特征， 与人类型糖尿病临床症状极为相似。 0046 受试C57BL/KsJdb/db小鼠为6周龄雄性小鼠， SPF级， 体重为20 24g， 购于中国科学 院上海药物研究所。 饲养条件按照SPF级动物标准饲养操作规程饲养， 除必要禁食时间外， 自由饮食饮水， 饲料为常规饲料。 0047 实验材料： 0048 化合物Tilifodiolide米色晶体， 采用PEG400与水的混合液作为溶媒(VPEG400:V 水3:7)。 先用研钵研成细粉末状后分次加入PEG400研磨至均匀， 。
27、再分次加入适量水继续 研磨至均一状。 实验原则按标准操作规程。 0049 实验方法： 说 明 书 6/12 页 9 CN 106955285 A 9 0050 1)动物分组： 组1为模型对照组， 组2为Tilifodiolide给药组， 组3为正常参照组， 实验动物分组及给药剂量如表2所示。 0051 表2实验动物分组 0052 0053 2)给药与检测 0054 空腹血糖检测： db/db小鼠常规监测， 适应性喂养一周后， 给予药物前1天(P 1)再 次进行血糖、 体重检测； 受试物按上述表格浓度溶解稀释， 灌胃(PO)给药， 给药当天记为P0； 每天14： 00p.m. 16:00p.m.。
28、之间给药。 根据实际情况适当延长了给药时间(56天)， 期间跟踪 记录体重； 给药后每3天测量耗食量， 每7天测量空腹6h血糖。 0055 葡萄糖耐受(OGTT)检测： 实验前1天， 各组小鼠禁食12h检测血糖后， 以0.3g/kg灌 胃给予葡萄糖， 在15min， 30min， 60min， 90min， 120min五个时间点分别尾静脉测量各组血 糖； 0056 胰岛素耐受(ITT)检测： 实验当天各组小鼠禁食6h， 腹腔注射0.8IU/kg胰岛素， 在 30min， 60min， 90min， 120min四个时间点分别尾静脉测量各组血糖。 0057 血清甘油三酯、 胆固醇水平等相关指标。
29、检测： 实验结束后取血清测定相关指标； 取 心脏、 肝脏、 肾脏、 胰腺、 骨骼肌、 脂肪待下一步检测。 0058 常规记录实验进行过程中动物表现、 体重、 摄食摄水量。 0059 3)统计方法 0060 所有统计均利用PASW Statistics 18(SPSS18.0)进行。 以血糖值或者体重为纵坐 标， 给药组分别为横坐标作统计图。 以时间为横坐标， 血糖浓度为纵坐标坐OGTT、 ITT曲线。 以血清指标为纵坐标， 组别为横坐标作统计图。 统计数据使用平均数标准差表示， 采用单 因素方差分析(One Way ANOVA)， p0.05认为有显著性差异。 0061 实验结果： 0062 。
30、1)本发明化合物( )对db/db糖尿病小鼠各器官及周围脂肪重量的影响： 0063 Tilifodiolide灌胃给予db/db小鼠56天后， 以剪断颈部的方式处死， 检查各组织 和脏器的病变并分别称重。 Tilifodiolide对db/db小鼠各脏器及周围脂肪重量的影响如表 3和图1。 0064 表3各组小鼠组织重量数据 说 明 书 7/12 页 10 CN 106955285 A 10 0065 0066 0067 *p0.05,*p0.01. 0068 实验结果显示， 小鼠无明显异常， 摄食量、 摄水量无明显改变， 解剖时各器官无显 著肉眼可见变化。 肝脏重量较对照组有明显下降(*p0。
31、.01)， 肠系膜脂肪、 睾丸周围脂肪重 量较对照组也有明显下降(*p0.05)， 肾周脂肪重量较对照组有一定下降趋势， 但无统计学 意义。 说明Tilifodiolide不引起小鼠内脏组织的明显病变， 且具有显著减少内脏脂肪的作 用。 0069 2)本发明化合物( )对db/db糖尿病小鼠体重的影响： 0070 db/db小鼠于给药前1天记录体重， 每3天称重一次， 比较组1和组2小鼠体重。 小鼠 的体重变化曲线如表4和图2所示。 0071 表4各组小鼠体重变化数据表 说 明 书 8/12 页 11 CN 106955285 A 11 0072 0073 0074 *p0.05， *p0.0。
32、1， *p0.001. 0075 实验结果显示， Tilifodiolide给药组小鼠体重较对照组有明显下降(*p0.05、 * p0.01、 *p0.001)， 说明Tilifodiolide具有显著的减重作用。 0076 3)本发明化合物( )对db/db糖尿病小鼠空腹血糖的影响： 0077 db/db小鼠于给药前1天检测空腹血糖， Tilifodiolide连续给药后， 每7天检测空 腹6h血糖。 小鼠的空腹血糖测定结果如表5和图3所示。 0078 表5各组小鼠血糖含量测定值 说 明 书 9/12 页 12 CN 106955285 A 12 0079 0080 0081 *p0.05，。
33、 *p0.01， *p0.001.组2、 组3分别与组1比较。 0082 实验结果显示， 与对照组相比Tilifodiolide能够显著降低给药组小鼠的空腹血 糖(*p0.05、 *p0.01、 *p0.001)。 0083 4)本发明化合物( )对db/db糖尿病小鼠口服糖耐量(OGTT)的影响： 0084 Tilifodiolide给药第32天， 进行OGTT检测， 实验前1天各组小鼠禁食12h过夜， 灌 胃给予葡萄糖0.3g/kg。 在灌糖前和灌糖后15min， 30min， 60min， 90min， 120min尾静脉测量 血糖值， 根据血糖值计算血糖曲线下面积(Area under。
34、 curve， AUC)。 小鼠的口服糖耐量曲 线和曲线下面积统计结果如表6和图4所示。 0085 表6 OGTT曲线下面积统计数据 0086 分组曲线下面积(AUC， MeanSD) 组12379.14426.70 组21706.53193.27* 说 明 书 10/12 页 13 CN 106955285 A 13 组31015.00133.47* 0087 *p0.001.组2、 组3分别与组1比较。 0088 实验结果显示， Tilifodiolide显著改善db/db给药小鼠的糖耐量(*p0.001)。 0089 5)本发明化合物( )对db/db糖尿病小鼠胰岛素耐量(ITT)的影响。
35、： 0090 Tilifodiolide给药第34天， 进行ITT检测， 实验当天各组小鼠禁食6h， 腹腔注射 0.8IU/kg胰岛素， 此时记为0min， 在30min， 60min， 90min， 120min四个时间点分别尾静脉测 量各组血糖。 各组小鼠的胰岛素耐量曲线和曲线下面积统计数据如表7和图5所示。 0091 表7 ITT曲线下面积统计数据 0092 分组曲线下面积(AUC， MeanSD) 组11392.30442.89 组21001.44135.11* 组3595.572.24* 0093 *p0.05， *p0.001.组2、 组3分别与组1比较。 0094 实验结果显示，。
36、 Tilifodiolide给药组db/db小鼠在相同剂量胰岛素作用下， 血糖 值明显低于对照组db/db小鼠(*p0.05)， 说明Tilifodiolide能提高db/db小鼠胰岛素敏感 性。 0095 6)本发明化合物( )对db/db糖尿病小鼠血清各项指标的影响： 0096 Tilifodiolide给药第56天， 对各组小鼠血清进行了甘油三酯水平(TG)、 总胆固醇 含量(TC)、 葡萄糖含量(Glucose)、 谷草转氨酶活性(AST)、 谷丙转氨酶活性(ALT)的相关测 定。 各组小鼠血清相关指标测定结果如表8和图6所示。 0097 表8各组小鼠血清相关指标测定数据 0098 0。
37、099 *p0.01， *p0.001.组2、 组3分别与组1比较。 0100 实验结果显示， 化合物Tilifodiolide无明显肝毒性， Tilifodiolide给药组小鼠 血清ALT和AST有一定程度的下降说明Tilifodiolide部分缓解了肝脏炎症； 与对照组相比 Tilifodiolide给药组小鼠血清葡萄糖含量显著降低(*p0.05)， 同时血清甘油三酯水平降 低(*p0.05)； Tilifodiolide对小鼠血清胆固醇含量无明显影响。 0101 实施例5： 说 明 书 11/12 页 14 CN 106955285 A 14 0102 片剂的制备： 0103 按实施例。
38、1-3的方法先制得Tilifodiolide及其衍生物， 以及利用有机酸(酒石酸， 柠檬酸， 甲酸， 乙二酸等)或无机酸(盐酸， 硫酸， 磷酸等)制成的盐， 按其与赋形剂重量比为 1:5-1:10的比例加入赋形剂， 制粒压片。 0104 实施例6： 0105 口服液制剂的制备： 0106 按实施例1-3的方法先制得Tilifodiolide及其衍生物， 以及利用有机酸(酒石酸， 柠檬酸， 甲酸， 乙二酸等)或无机酸(盐酸， 硫酸， 磷酸等)制成的盐， 按常规口服液制法制成 口服液。 0107 实施例7： 0108 胶囊剂、 颗粒剂、 或冲剂的制备： 0109 按实施例1-3的方法先制得Tilifodiolide及其衍生物， 以及利用有机酸(酒石酸， 柠檬酸， 甲酸， 乙二酸等)或无机酸(盐酸， 硫酸， 磷酸等)制成的盐， 按其与赋形剂重量比为 5:1的比例加入赋形剂， 制成胶囊或颗粒剂或冲剂。 说 明 书 12/12 页 15 CN 106955285 A 15 图1 图2 说 明 书 附 图 1/3 页 16 CN 106955285 A 16 图3 说 明 书 附 图 2/3 页 17 CN 106955285 A 17 图4 图5 图6 说 明 书 附 图 3/3 页 18 CN 106955285 A 18 。