富锗灵芝菌液体培养配方.pdf

本发明涉及到一种真菌的培养，尤其是液体培养所采用的配方。
    天然灵芝是我国医药保库中的一味珍贵的中草药，已在医疗、保健、食品、化妆、酿酒、饮料业中应用，由于它对多种疾病具有显著的疗效，许多研究者对灵芝菌的有效成份、药理和临床作用加以研究并给予充分的肯定。由于受到野生资源数量的限制，科学家们对灵芝菌的液体培养进行了研究。日本专利昭60-43318公开了一种灵芝菌丝体的新型配方液体培养法，该培养法是以葡萄糖0.2-10g/100ml和从谷类胚芽、米糠及玉米浸渍液组成的一类营养物质中选出的营养源0.2-2g/100ml为必要成分的液体培养基，采用液体培养法培养灵芝菌丝体，在液体培养基中可适当添加如磷、锰、镁、钙、铁等的盐类矿物营养素，以及维生素类、核酸类、氨基酸类、淀粉、酵母精、蛋白胨冻之类的其它成分。科学出版社1985年出版的《灵芝》第74页讲述了灵芝的深层培养，培养的工艺流程为：菌种-试管斜面培养-摇瓶培养-种子罐培养-发酵罐培养-发酵产品处理。其液体培养法的配方为：蔗糖2%、（NH4）2SO40.5%、KH2PO40.3%、MgSO40.15% CaCO30.2%，维生素B0.001%。但在目前所公布的有关灵芝液体培养的文献中尚无灵芝菌醪液和菌丝体中含有有机锗的报导。

    本发明地目的旨在克服现有技术的不足，在现有灵芝菌液体培养配方的基础上进行改进，提供一种富锗灵芝菌的液体培养配方。

    本发明所述的富锗灵芝菌液体培养配方为：糖1-4%、粮食作物提取液30-60%、碳酸钙0.1-1.0%、硫酸铵0.3-1.5%、磷酸钾0.1-1.0%、硫酸镁0.1-1.0%、维生素类0.0005-0.002%、无机锗（有效）0.002-0.15%，水余量。其中粮食作物提取液为黄豆饼、玉米粉、花生饼等的提取液，浓度为1-5%，无机锗为不含对人体有害杂质的单晶锗、一氧化锗、二氧化锗或锗盐。

    本发明是根据天然灵芝子实体生长的条件，在其液体培养配方中加入无机锗，灵芝菌类在自然状态下有富锗的作用，并且能将所加入的无机锗转化为有机锗，这一功能从测试结果中清楚地看到。用本发明所述配方培养出来的灵芝醪液和灵芝菌丝体中所含有机锗的量可通过浓缩醪液和配方中添加的无机锗的量来调节，而且用本配方培养出来的灵芝菌丝体还含有丰富的氨基酸、糖类和微量元素，很接近于天然灵芝子实体的有效成份。本配方可用于工业化大规模生产，生产成本低，周期短，经济效益高，有广阔的市场前景，用本配方生产出来的灵芝醪液和菌丝体粉可用于食品、医疗、化妆、饮料行业。

    下面是本发明的实施例：

    用以下步骤进行培养：

    1、组织分离获得菌株;

    2、培养液制备：取蔗糖3g、碳酸钙0.2g、硫酸铵0.5g、磷酸氢二钾0.3g、硫酸镁0.15g、3%的黄豆汁50g、维生素B10.001g，二氧化锗0.08g、加入水至100ml，高压灭菌待用。

    3、按常规液体培养方法进行培养。

    所得醪液及菌丝体粉分析值如下：

    氨基酸含量

    氨基酸  灵芝醪液(mg/100ml)  灵芝菌丝体粉(%)

    ASP天门冬氨酸  42.80  2.67

    THR苏氮酸  13.41  1.01

    SER丝氨酸  17.00  1.24

    GLU谷氨酸  103.81  4.36

    PRO脯氮酸  13.21  0.35

    GLY甘氮酸  15.26  1.08

    ALA丙氨酸  16.02  1.26

    CYS胱氨酸  1.48  0.08

    VAL缬氨酸  14.25  1.28

    MET蛋氨酸  0.06

    ILE异亮氨酸  10.90  1.10

    IEU亮氨酸  17.95  0.19

    TYR酪按酸  7.16  0.67

    PHE苯丙氨酸  13.13  1.21

    LYS赖氨酸  27.21  1.25

    NH3氨  68.08  0.75

    HIS组氨酸  7.84  0.49

    ARC精氨酸  28.25  1.49

    总量  417.85  20.04

    有机锗及微量元素含量  单位:微克/毫升醪液

    元素  含量  元素  含量

    S  1189  Cu  0.60

    MO  0.3  P  563

    Ni  0.62  Fe  0.6

    B  1.1  Zn  0.21

    Mn  0.19  Ca  177

    K  798  有机锗  46.0