技术领域
本发明涉及防止、治疗脱发或促进毛发生成的成分，尤其涉及包含植物鞘氨醇-1-磷酸盐衍生物的用于养发或治疗脱发的成分。
背景技术
在男性的身体特征当中，属于正常现象的骨骼肌的增加、生殖器的发达、精子的形成、性欲等与睾酮有关，而属于非正常现象生的粉刺、皮脂的增加、脱发及前列腺肥大等与双氢睾酮对相应组织所产生的影响有关。其中，对于男性群体中发生较多的脱发现象，虽然对其进行了长期的研究，但到至今为止还不完全了解脱发及生发的机制，而在越来越中外貌的现代社会，对脱发的防止及治疗需求变得越来越迫切。
毛发是有规律地重复生长期、退化期、休止期等周期性变化的生命体，而且，每根毛发都重复一个独立的生成和消灭的过程，从而可维持一定的毛发数量。毛发的数量是一出生即被决定的，但人们错误的认为青春期之后因受性激素的影响所发生的毛发的成毛过程是毛发数量的增加。生长期是因毛囊的活动和细胞分裂的活跃而使毛发生成的时期，约持续2~6年的时间，而全部头发的约85%处于生长期。在生长期，毛球细胞被由基质细胞构成的毛乳头围绕而呈圆形，而且，为新毛发生成的细胞分裂很活跃。退化期是毛囊的生长活动停止并急剧萎缩的时期，而此时毛发的形状类似于棍棒。维持约2~3周，而全部毛发的约5%处于退化期。休止期是毛囊的细胞活动完全停止的时期，维持约2~3个月，而在这期间，处于休止期的毛发被底部新生长出的处于生长期的毛发顶出或通过梳头或洗头等机械作用自然脱落。一般而言，脱发症是指在上述各周期中，生长期的毛发比例降低，而退化期或休止期的毛发增多，从而导致非正常脱落的毛发数量增加的现象。
导致毛发从头皮脱落的上述脱发症的原因很多，大致有雄性激素的作用、精神压力、头皮中脂类过氧化物的蓄积、药物副作用、白血病或结核等慢性疾病、放射疗法的副作用、营养不良等。另外，近来原本成为男性的苦恼的脱发，逐渐蔓延至女性或年轻人，从而导致对脱发的防止及治疗的需求的增加。
目前，作为毛发生成剂及养发剂的大体有促进头皮充分的血液循环的血管扩张剂、抑制雄性激素作用的雌性激素剂、抑制将睾酮变换为5-DHT（5-dihydrotesteone）的5α-还原酶的雄性激素活性抑制剂。上述血管扩张剂有氯化卡普氯铵、米诺地尔及各种植物萃取物等，磁性激素剂有雌性激素、雌二醇、黄体酮等，而雄性激素活性抑制剂有非那雄胺、十五烷酸酯等。
但是，上述多发治疗剂的治疗效果不佳或具有副作用，因此，急需开发出效果好且安全的脱发治疗或促进毛发生成的药物。外用或口服米诺地尔引起头皮的红斑、炎症、感染、刺激或疼痛等皮肤刺激且降低血压，因此，包括正在服用降压药物的患者在内的高血压患者需慎用。另外，非那雄胺因雄性激素活性抑制效果，具有导致阳痿、减少性欲等缺点。
另一方面，植物鞘氨醇是占据构成皮肤角质层双层脂膜的成分的40%以上的神经酰胺（ceramide）的主要成分。因此，植物鞘氨醇可被人体吸收并促进神经酰胺的合成，而且，具有抑制水分蒸发的效果，从而滋润皮肤且具有抗菌作用及舒缓皮肤等作用，可用作保湿剂、粉刺治疗剂等。
发明内容
为了开发出具有治疗脱发及促进毛发生成效果的药物，本发明人进行研究努力的结果发现，植物鞘氨醇-1-磷酸盐衍生物具有防止、治疗脱发或促进毛发生成的效果，从而完成了本发明。
因此，本发明的目的在于，提供一种包含植物鞘氨醇-1-磷酸盐衍生物的防止、治疗脱发或促进毛发生成的成分。
本发明的另一目的在于提供一种防止、治疗脱发或促进毛发生成的药物。
本发明的又一目的在于提供一种包括防止、治疗脱发或促进毛发生成的成分的非处方产品。
为了达到上述目的，本发明提供包含如下述化学式1所示的化合物或药剂学上允许的其盐的防止、治疗脱发或促进毛发生成的成分。
[化学式1]
在上述化学式1中，R为氢或-COR1，而1为C1-C6烷基。
另外，本发明提供包含防止、治疗脱发或促进毛发生成的成分的药物。
另外，本发明提供包括防止、治疗脱发或促进毛发生成的成分的非处方产品。
下面，对本发明进行详细说明。
除非有另外的定义，本发明所用的所有技术术语的含义与本发明技术领域的技术人员通常所理解的含义相同。另外，本说明书记载较佳方法或试料，但类似或同等的也包括在本发明的范围之内。作为本发明参考文献的所有刊物的全部内容都作为本发明的参考。
为了开发出具有治疗脱发及促进毛发生成效果的药物，本发明人进行研究努力的结果发现，用作保湿剂、粉刺治疗剂的植物鞘氨醇衍生物具有与米诺地尔相同或以上的防止、治疗脱发或促进毛发生成的效果，而且，没有现有的米诺地尔对皮肤的刺激或高血压患者需慎用的副作用，从而开发出本发明的成分。
根据本发明的一个方面，提供包含如下述化学式1所示的化合物或药剂学上允许的其盐的防止、治疗脱发或促进毛发生成的成分。
[化学式1]
在上述化学式1中，R为氢或-COR1，而1为C1-C6烷基，而较佳地，R为氢或C1-C3烷基。
上述化学式1所示的化合物可用有机化学领域已公开的知识制备而成，例如，可用（S. Li, W.K. Wilson, G.J. Schroepfer, Chemical synthesis of D-ribo-phytosphingosine-1-phosphate, a potential modulator of cellular processes. J. Lipid Res. 40: 117-125, 1999）中公开的方法制备而成。
可通过下述实施例证明上述化学式1所示的化合物具有治疗脱发及促进毛发生成的效果。具体而言，对本发明化合物实施例实施了利用balb/c小鼠的促进毛发生成试验。其结果表明，本发明化合物具有与从FDA获得脱发治疗剂许可而进行销售的ROGAINE 5%（5%米诺地尔液体剂，JOHNSON&JOHNSON）相同或以上的促进毛发生成效果。另外，通过CAM（chorioallantoic membrane)试验测量本发明化合物的新生血管活性进行测量之后进行比较试验，其中，阴性对照组为磷酸缓冲溶液，阳性对照组为鞘氨醇-1-磷酸盐，而抑制对照组为作为新生血管抑制剂的TMP（三甲基植物鞘氨醇）。其结果表明，本发明化合物在促进新生血管生成方面表现出明显优秀的效果。因此，本发明化学式1所示的化合物通过促进新生血管的生成具有防止、治疗脱发或促进毛发生成的效果。
本发明上述成分，还可添加其他防止、治疗脱发或促进毛发生成的药物或辅助剂，用作复合制剂。其他药物或辅助剂有视黄酸（retinoic acid）、米诺地尔（minoxidil）、非那雄胺、缩氨酸锌（zinc peptide）、氧化锌（zinc oxide）、维生素H、染料木黄酮、洋葱萃取物、南瓜籽油、鸸鹋（Emu）油、绿茶萃取物、柳树皮萃取物等，但非限制。
本发明的上述成分可制成口服剂、注射剂、栓剂、贴剂及滴剂等制剂使用，但非限制，而较佳地，制作成适合外用于被头皮或毛发覆盖的皮肤部位的形式。上述外用制剂有脂质体、纳米乳剂、洗发剂、护发素或生发水等，但非限制。而较佳地，制作成脂质体或纳米乳剂，以促进通过皮肤吸收的效果。在上述成分制剂时，可利用药剂学领域已公开的适合于各种制剂制作的药剂学上允许的载体、稀释剂或添加剂。
本发明成分，相对于上述化学式1所示的化合物成分的全部重量，包含约0.1~10重量%，而较佳地，包含0.5~5重量%，而且，可根据化学式1所示的化合物的种类增减。
外用时，每天1~2次将化学式1所示的化合物涂抹于需防止、治疗脱发或促进毛发生成的部位即可。以活性成分为1重量%时为准，每日涂抹量为0.5~3mg左右，而且，可根据涂抹部位的面积增减。上述使用量及次数，可根据患者的年龄、性别、脱发的程度适当增减。
本发明上述化学式1所示的化合物或药剂学上允许的其盐，不仅防止、治疗脱发或促进毛发生成的效果好，而且，因化学结构简单而容易制备，从而经济性高，另外，若制成脂质体、纳米乳剂等脂质微粒球制剂，则容易传递至毛囊。另外，较之作为现有使用的其他脱发治疗剂的米诺地尔及非那雄胺，无皮肤刺激，无副作用，从而非常适合使用。
将上述本发明化学式1所示的化合物作为活性成分的防止、治疗脱发或促进毛发生成的成分，可制作成具有防止、治疗脱发或促进毛发生成效果的药品或非处方产品。
另外，根据本发明的另一方面，提供一种包含上述化学式1所示的化合物或药剂学上允许的其盐的成分，及包含药剂学上允许的载体或添加剂的药品或非处方产品。
如上所述，本发明防止、治疗脱发或促进毛发生成的成分不仅效果好，而且，若制成脂质体、纳米乳剂等脂质微粒球制剂，则容易传递至毛囊，另外，较之作为现有使用的其他脱发治疗剂的米诺地尔及非那雄胺，无皮肤刺激，无副作用，从而非常适合使用。另外，化学式1所示的化合物因化学结构简单而容易制备，从而经济性高。
附图说明
图1为剪掉balb/c小鼠胁腹的毛之后，以每天1次连续14次涂抹包含N-乙酰植物鞘氨醇-1-磷酸盐（NAPS-1-P）的脂质体并与非处理组进行比较而拍摄的照片；
图2为剪掉balb/c小鼠胁腹的毛之后，以每天1次连续4周涂抹植物鞘氨醇-1-磷酸盐（PhS-1-P）脂质体和NAPS-1-P的脂质体并与对照组进行比较而拍摄的照片；
图3为剪掉balb/c小鼠胁腹的毛之后，以每天1次连续4周涂包含0.5%的NAPS-1-P脂质体和包含1.0%的NAPS-1-P的脂质体及5%米诺地尔液剂并与对照组进行比较而拍摄的照片；
图4为实施CAM试验的各步骤示意图；
图5为对包含0.5%的NAPS-1-P的脂质体、包含0.5%的PhS-1-P的脂质体、三甲基植物鞘氨醇（TMP）及磷酸缓冲液进行CAM试验并用显微镜观察新生血管抑制效果的结果照片。
具体实施方式
下面，对本发明实施例进行详细说明。但这些实施例仅帮助对本发明的理解，而非以任何形式限制本发明。
实施例1：包含N-乙酰植物鞘氨醇-1-磷酸盐（NAPS-1-P）的脂质体的制备（1）
制备包含N-乙酰植物鞘氨醇-1-磷酸盐（NAPS-1-P）的脂质体。NAPS-1-P根据S. Li, W.K. Wilson, G.J. Schroepfer, Chemical synthesis of D-ribo-phytosphingosine-1-phosphate, a potential modulator of cellular processes. J. Lipid Res. 40: 117-125, 1999所记载的方法从N-乙酰植物鞘氨醇制备而成。首先，将3g的75%大豆软磷脂（Lipoid公司）和0.5g的NAPS-1-P溶解于20g的乙醇。将溶解有0.1g的薄荷醇的76.4g的蒸馏水缓缓添加至溶解有软磷脂和NAPS-1-P的乙醇中。在添加的同时强力搅拌。添加完蒸馏水并继续搅拌1个小时之后，利用尖头型超音波样品震碎机进行超声波处理并利用0.22?膜过滤器，以制得包含0.5%的NAPS-1-P的脂质体。在此，作为皮肤渗透促进剂添加泊洛沙姆+聚山梨酯20（Tween 20），制得本发明奈米乳剂。
实施例2：包含NAPS-1-P的脂质体的制备（2）
较之上述实施例1，除将NAPS-1-P的量从0.5g增加至1.0g之外，以与上述实施例1相同的方式制得包含1.0%的NAPS-1-P的脂质体。而且，根据牡丹皮萃取物和柳树皮萃取物的添加量，相应减少蒸馏水的量。
*实施例3：包含NAPS-1-P的脂质体的制备（3）
较之上述实施例1，除在添加蒸馏水时一同添加3g的牡丹皮萃取物和5g的柳树皮萃取物，且将NAPS-1-P的量增加至1.0g之外，以与上述实施例1相同的方式制备。而且，根据牡丹皮萃取物和柳树皮萃取物的添加量，相应减少蒸馏水的量。
实施例4：包含植物鞘氨醇-1-磷酸盐（PhS-1-P）的脂质体的制备（3）
较之上述实施例1，除将NAPS-1-P替代为植物鞘氨醇-1-磷酸盐（PhS-1-P）之外，以与上述实施例1相同的方式制得包含0.5%的PhS-1-P的脂质体。
通过上述方式制得的实施例1~4的脂质体的成分如下表1所示：
[表1] 包含NAPS-1-P及Phs-1-P的的脂质体的成分
。
实施例5：包含NAPS-1-P的纳米乳剂的制备（1）
制备包含N-乙酰植物鞘氨醇的纳米乳剂。首先，将2g的75%大豆软磷脂（Lipoid公司）和0.5g的NAPS-1-P溶解于15g的乙醇。接着，将15g的PEG-8辛酸/癸酸甘油酯（LAS）和3.0g的十四酸异丙酯添加至上述乙醇溶液。接着，将溶解有0.1g的薄荷醇的57.4g的蒸馏水添加至上述乙醇溶液之后，轻轻搅拌30分钟至1小时，以制得纳米乳剂。在此，作为皮肤渗透促进剂添加泊洛沙姆+聚山梨酯20（Tween 20），制得本发明奈米乳剂。
实施例6：包含NAPS-1-P的纳米乳剂的制备（2）
较之上述实施例5，除将NAPS-1-P的量从0.5g增加至1.0g之外，以与上述实施例1相同的方式制得包含1.0%的NAPS-1-P的脂质体。但是，根据NAPS-1-P的含量的增加，相应减少蒸馏水的量。
实施例7：包含NAPS-1-P的纳米乳剂的制备（3）
较之上述实施例5，除在添加蒸馏水时一同添加3g的牡丹皮萃取物和5g的柳树皮萃取物，且将NAPS-1-P的量增加至1.0g之外，以与上述实施例5相同的方式制备。而且，根据牡丹皮萃取物和柳树皮萃取物的添加量，相应减少蒸馏水的量。
*实施例8：包含植物鞘氨醇-1-磷酸盐（PhS-1-P）的纳米乳剂的制备（3）
较之上述实施例5，除将NAPS-1-P替代为植物鞘氨醇-1-磷酸盐（PhS-1-P）之外，以与上述实施例5相同的方式制得包含0.5%的PhS-1-P的纳米乳剂。
通过上述方式制得的实施例5~8的纳米乳剂的成分如下表2所示：
[表2] 包含NAPS-1-P及Phs-1-P的的纳米乳剂
。
实验例1
利用Balb/c小鼠的促进毛发生成试验（1）
购买5~6周龄的balb/c小鼠并剪掉胁腹的毛之后，涂抹除毛霜完全去除原先的毛。未完全除毛的小鼠不用于试验，而且，在除毛之后随机选取小鼠每笼饲养3只，共饲养5笼。
除毛之后放置约1天之后，在除毛部位以每天1次涂抹上述实施例1所制备的包含NAPS-1-P的脂质体。涂抹14次之后，对非处理组和处理组的促进毛发生成程度进行比较。图1为涂抹14次之后拍摄除毛部位的照片。
如图1所示，非处理组几乎没有长出毛，从而皮肤暴露在外面，但利用包含NAPS-1-P的脂质体处理的组，生长出毛发，以致几乎与未除毛的部分没有什么区别。因此，可从上述结果得出本发明化合物具有促进毛发生成作用的结论。
实验例2
利用Balb/c小鼠的促进毛发生成试验（2）
利用与上述实验例1相同的方式，利用上述实施例中所制备的包含0.5%的NAPS-1-P的脂质体（实验例1）、包含1.0%的NAPS-1-P的脂质体（实施例2）及包含0.5%的PhS-1-P的脂质体进行促进毛发生成试验。而且，以每天1次持续4周之后，拍摄除毛部位的照片。阳性对照组使用作为米诺地尔5%液剂的ROGAINE 5%。其结果如图2及图3所示。
图2为将涂抹PhS-1-P脂质体和NAPS-1-P的脂质体的结果与对照组进行比较而拍摄的照片。图3为将涂抹包含0.5%的NAPS-1-P脂质体和包含1.0%的NAPS-1-P的脂质体及5%米诺地尔液剂的结果与对照组进行比较而拍摄的照片。
如图2所示，较之对照组，PhS-1-P脂质体和NAPS-1-P的脂质体都具有促进毛发生成的效果，但NAPS-1-P的促进毛发生成效果优于PhS-1-P。
如图3所示，对于包含NAPS-1-P的脂质体而言，包含1.0%的促进毛发生成的效果优于包含0.5%的效果，从而可知浓度的增加提高其效果；而1%的NAPS-1-P脂质体制剂具有与现有广泛用作脱发治疗剂的米诺地尔5%液剂相同或以上的促进毛发生成效果。
实验例3
新生血管生成性测量
以各在上述实施例1及4制备的包含0.5%的NAPS-1-P的脂质体及包含0.5%的PhS-1-P的脂质体为对象，测量其新生血管生成性。阴性对照组使用磷酸缓冲溶液，阳性对照组使用鞘氨醇-1-磷酸盐（PS-1-P），而抑制对照组使用作为新生血管抑制剂的三甲基植物鞘氨醇（TMP），并进行比较。
对新生血管生成性的测量，通过CAM（chorioallantoic membrane）试验完成，而这是观察新生血管生成性的一般方法。
购买鸡所下的1周之内的受精卵并在3天之后，如图4的i）所示，利用注射器抽掉6mL左右的蛋清，且如图ii）所示，可打开鸡蛋的上面部分。3天之后，鸡的胚芽开始发育，而围绕胚芽的部分称作CAM。接着，如图4的iii）所示，在CAM上盖上点滴试验药物并干燥而得的盖玻片，并在3天之后，如图4的iv）所示，用显微镜观察是否因药物的使用而有新的血管生成。
用显微镜观察包含0.5%的NAPS-1-P的脂质体、包含0.5%的PhS-1-P的脂质体、TMP及磷酸缓冲液的新生血管抑制效果的结果如表3及图5所示。
[表3] 新生血管生成性结果
组---0+/-+++PBM 28 TMP82 PS-1-P 154PhS-1-P 154NAPS-1-P 37
--：抑制新生血管生成效果强；-：抑制效果弱；0：没有效果
+/-：微弱的新生血管活性
+：促进新生血管生成效果弱
++：促进新生血管生成效果强
如上述表3及图5所示，较之对照组，作为本发明成分的活性成分的PhS-1-P及NAPS-1-P的新生血管生成性高，尤其是，NAPS-1-P表现出最高的新生血管生成性。