技术领域
本发明涉及一种中药组合物及中药面膜，属于中医药领域。
背景技术
中药化妆品在我国有几千年的历史，在诸多古代中医名著中均有相关记载。春秋时期的《山海经》是第一部对中药化妆品有所记载的书籍，包含了荀草等几种药材；而后秦汉时期的《神农本草经》记载了20余种具美容功效的草药；明朝的《本草纲目》收载了168味，也是历代收集中药化妆品最多最详细的一部典籍。
中药面膜是中草药美容方法中外治法的一种，也是中药化妆品的一种常用剂型，其以中医药理论为指导，利用中草药的有效成分与成膜材料等其他基质相溶合后涂于面部，在皮肤上形成一层膜或不成膜的覆盖物，从而达到护肤、保湿、清洁、治疗皮肤等作用。与其它面膜相比，中药面膜最显著的特点是具有明显的功能性和针对性，并且源于天然、作用缓和、毒副作用小。
但是目前市面上已有的中药面膜美白效果不佳、对皮肤刺激性较强。
发明内容
鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种中药组合物及其用途，用于解决现有技术中面膜美白效果不佳，刺激性大的问题。
为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供一种中药组合物，所述中药组合物包括以下重量份的组分：
生白术15-20份、白及15-20份、白蔹12-20份、白茯苓15-20份、当归12-18份、川芎 12-18份、珍珠粉9-15份、杏仁9-15份。
进一步地，所述中药组合物还包括以下重量份的组分：益母草6-12份、薏苡仁12-18 份。
更优选地，所述中药组合物含有以下重量份的组分生白术20份、白及20份、白蔹15 份、白茯苓20份、当归15份、川芎15份、珍珠粉10份、杏仁10份、益母草9份、薏苡仁 15份。
白术，本品为菊科植物白术Atractylodes macrocephala Koidz.的干燥根茎，苦、甘，性温，入脾、胃经，益气健脾、燥湿利水。《药性论》称其“主面光悦，驻颜，去。”《新修本草》载“利小便，及用苦酒浸之，用拭面，极效”。
白及，为兰科植物白及Bletilla striata(Thunb.)Reichb.f.的干燥块茎；苦、涩，性微寒，归肺、胃经，收敛止血、消肿生肌。《药性论》称其“治面上皯疱，令人肌滑。”《本草纲目》载有“白及洗面，去”。
白蔹，本品为葡萄科植物白蔹Ampelopsis japonica(Thunb.)Makino的干燥块根；苦、辛、微甘，性微寒，归心、肝、脾经，清热解毒，散结消肿，生肌敛疮。《神农本草经》载“主痈肿疽疮，散结气。”《药性论》曰:“治面上疱疮。
白茯苓，为药材茯苓切去赤茯苓后的白色部分，茯苓为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos(Schw.)Wolf的干燥菌核；甘、淡，性平，归心、胃、肺、肾经，利水渗湿、健脾补中、宁心安神。《补缺肘后方》记载“治”。
此外，中药当归，为伞形科植物当归Angelica sinensis(Oliv.)Diels的干燥根。甘、辛，性温，归肝、心、脾经，补血、活血，调经止痛，润肠通便。我国唐代长寿名医孙思邈著的《千金翼方》中抗老、消斑、美容、健肤的“妇人面药”及王焘所著《外台秘要》中当归使用频率极高。当代研究也表明其对于雀斑、黑斑、老年斑有较好的疗效。
川芎，本品为伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.(或Ligusticum wallichii Franch.)的干燥根茎。辛，性温，归肝、胆、心包经，活血行气，祛风止痛。《外台秘要》中美白祛斑、散结除疤外用方常选用具有辛香畅达、祛风通络功效的药物，川芎；益母草，苦、辛，性微寒，归肝、心包、膀胱经，活血调经，利尿消肿，清热解毒。唐代药学家陈藏器在《本草拾遗》中记载“入面药，令人光泽，治粉刺。”现代医学美容研究表明，益母草能促进皮肤新陈代谢，在抗衰防癌、养颜美容、延年益寿上具有显著功效；
珍珠，本品为珍珠贝科动物马氏珍珠贝Pteria martensii(Dunker)、蚌科动物三角帆蚌 Hyriopsis cumingii(Lea)或褶纹冠蚌Cristaria plicata(Leach)等双壳类动物受刺激形成的珍珠；甘、咸，性寒，归心、肝经，安神定惊，明目消翳，解毒生肌，润肤祛斑。明代医药家李时珍在《本草纲目》中载：“涂面，令人润泽好颜色。”现在珍珠养颜法已为世界各国所采用。
薏苡仁，为禾本科植物薏苡Coix lacryma-jobi L.var.ma-yuen(Roman.)Stapf的干燥成熟种仁；甘、淡，性凉，归脾、胃、肺经。利水渗湿，健脾止泻，除痹，排脓，解毒散结。始载于《神农本草经》。现代研究证实，薏苡仁富含蛋白质，维生素B1、B2，可保持皮肤光泽细腻，在消除粉刺、雀斑、老年斑，防脱屑、皮肤粗糙等都有很好的疗效；
杏仁，Amygdalus Communis Vas，为蔷薇科植物杏或山杏等味苦的干燥种子，苦，性微温，归肺、大肠经。降气止咳平喘，润肠通便。杏仁中含有丰富的维生素A、维生素E、亚油酸等，对面部痤疮、皮肤粗糙、色素沉着等具有较好的防治作用，使皮肤清洁亮丽、富有光泽和弹性。
益母草，本品为唇形科植物益母草Leonurus japonicus Houtt.的新鲜或干燥地上部分。
优选地地，所述中药组合物为粉末状或颗粒状。采用上述中药组合物粉碎后获得。
本发明的另一方面提供了上述中药组合物用于制备护肤品或化妆品的用途。
本发明的另一方面提供了上述中药组合物用于制备面膜的用途。
本发明的另一方面提供了一种中药面膜，所述中药面膜包括上述中药组合物以及人体可接受的辅料。
进一步，所述辅料是蜂蜜。
本发明的另一方面提供了中药提取物，所述中药提取物采用如上所述的中药组合物为原料提取有效成分制得。
本发明中，中药组合物中各组分的配方最为关键，在获知中药配方后，本技术领域的技术人员可采用各种常规的中药有效成分提取方法来提取其有效成分，如常规的煎煮、水提醇沉法、醇提水沉法、盐析法等，由于上述提取方法均能获得前述中药配方中的主要药效成分，因此均能对酪氨酸酶具有一定的抑制作用。
其中，水提醇沉法为：先以水为溶剂提取药材有效成分，再用不同浓度的乙醇沉淀去除提取液中杂质的方法。一般含乙醇量达到50％～60％(重量体积比即g/100ml)时，可去除淀粉等杂质，当含醇量达75％以上，除鞣质、水溶性色素等少数无效成分外，其余大部分杂质均可沉淀去除。
醇提水沉法为：先以适宜浓度的乙醇提取药材成分，再用水除去提取液中杂质的方法。
所述中药组合物提取有效成分后可再经常规的步骤浓缩、纯化或干燥获得中药提取物。其中浓缩的方法包括但不限于：常压蒸发、减压蒸发、薄膜蒸发、多效蒸发，纯化的方法包括但不限于：盐析纯化、大孔树脂吸附纯化、乙醇沉淀纯化、离子交换树脂纯化、絮凝沉淀纯化、膜分离纯化、聚酰胺吸附纯化、硅胶吸附层析纯化等，干燥的方法包括但不限于：烘干法、鼓式干燥法、带式干燥法、吸湿干燥法、沸腾干燥法、喷雾干燥法、减压干燥法、冷冻干燥法、红外线干燥法、微波干燥法等。
根据所述中药组合物中不同生药有效成分的特性，可采用不同的提取工艺。
本发明的另一方面还提供了一种中药提取物的制备方法，所述方法包括步骤：按配比取各味中药组分，混合后加开水浸泡，即可。
本发明的另一方面提供了上述中药提取物在制备护肤品或者化妆品中的用途。
本发明的另一方面提供了上述中药提取物用于制备面膜的用途。
本发明的另一方面提供了一种面膜，所述面膜上含有上述中药提取物以及人体可以接受的辅料。
进一步地，所述辅料可以采用常规药剂学上使用的辅料。
如上所述，本发明的中药组合物及其用途，具有以下有益效果：
能够有效的抑制酪氨酸酶活性，对皮肤无刺激，可以作为用于皮肤美白产品。尤其是当所述中药组合物的浓度为468.9μg/mL，其抑制效率达到最大。
附图说明
图1显示为实施例1中酪氨酸酶促反应时间曲线示意图。
图2显示为实施例1不同浓度样品对酪氨酸酶活性抑制率示意图。
图3a显示为实施例3中空白对照组HE染色结果图。
图3b显示为实施例3中模型组HE染色结果图。
图3c显示为实施例3中蜂蜜基质组HE染色结果图。
图3d显示为实施例3中阳性药对照组HE染色结果图。
图3e显示为实施例3中归白凝肌方高剂量组HE染色结果图。
图3f显示为实施例3中归白凝肌方低剂量组HE染色结果图。
图4a显示为实施例4中空白对照组HE染色结果图。
图4b显示为实施例4中模型组HE染色结果图。
图4c显示为实施例4中蜂蜜基质组HE染色结果图。
图4d显示为实施例4阳性药对照组HE染色结果图。
图4e显示为实施例4归白凝肌方高剂量组HE染色结果图。
图4f显示为实施例4中归白凝肌方低剂量组HE染色结果图。
图5a显示为归白凝肌方对色素沉着模型豚鼠皮肤组织中SOD的影响。
图5b显示为归白凝肌方对色素沉着模型豚鼠皮肤组织中MDA的影响。
图6a显示为实施例6中面膜组1号病理切片HE染色结果图。
图6b显示为实施例6中面膜组2号病理切片HE染色结果图。
图6c显示为实施例6中面膜组3号病理切片HE染色结果图。
图6d显示为实施例6中基质组1号病理切片HE染色结果图。
图6e显示为实施例6中基质组2号病理切片HE染色结果图。
图6f显示为实施例6中基质组3号病理切片HE染色结果图。
具体实施方式
以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。
本发明所采用的原料药(或药材)均可从普通医药商店或中药材销售公司购买得到，其规格符合国家医药标准或符合中国药典等有关规定。所采用的药材除另有说明，均为中药材饮片，该中药材饮片也可以是获得后经加工而成。
以下归白归白凝肌方即本发明中的中药组合物
实施例1体外药效研究
研究背景：人的表皮基底层细胞间，分布着黑色素细胞，它含有的酪氨酸酶可以将酪氨酸氧化成多糖，中间再经过一系列的代谢过程，最后便可生成黑色素，所以酪氨酸酶是黑色素合成的关键酶。黑色素生成越多，皮肤就越黝黑；反之，则皮肤就越白皙。因此，以酪氨酸酶活性抑制率为指标，测定吸光度值，对归白凝肌方的功效进行评价。
实验方法：在96孔板中加入220μL的L-酪氨酸溶液(0.25mmol/L)、20μL磷酸盐缓冲溶液(pH＝6.8)，混匀后于30℃水浴中溫孵10min后，加入10μL酪氨酸酶溶液 (268.7U/mL)，使得终体积为250μL，在475nm波长处测定其吸光度，连续记录至160min。
在96孔板上加入以下四组反应液，归白凝肌方(生白术20g、白及20g、白蔹15g、白茯苓20g、当归15g、川芎15g、珍珠粉10g、杏仁10g、益母草9g、薏苡仁15g，制备成为极细粉)的终浓度分别为50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL、500μg/mL、750μg/mL、 1500μg/mL、2500μg/mL，30℃溫孵30min，于475nm处分别测定吸光度A，按公式求抑制率。
表1酪氨酸酶活性抑制实验
抑制率＝[1-(A3-A4)/(A1-A2)]×100
实验结果：如图1所示，吸光度随时间的增长而增大，在15-45min时间内吸光度变化呈线性增长反应速度最快，45min后，吸光度增长趋于平缓，反应速度减慢。因此，实验选取反应30min时的吸光度变化来计算测定酶促反应速度。
如表2和图2所示，归白凝肌方对酪氨酸酶活性明显的抑制作用，随着归白凝肌方浓度增大，抑制率也随之增大。当样品浓度在500μg/mL以上时，抑制率的增加幅度随样品浓度的变化很缓和。归白凝肌方的半数抑制浓度IC50为468.9μg/mL。
表2不同浓度样品对酪氨酸酶活性抑制率
实验结论：人的表皮基底层细胞间，分布着黑色素细胞，它含有的酪氨酸酶可以将酪氨酸氧化成多糖，中间再经过一系列的代谢过程，最后便可生成黑色素，所以酪氨酸酶是黑色素合成的关键酶。黑色素生成越多，皮肤就越黝黑；反之，则皮肤就越白皙。根据体外归白凝肌方对酪氨酸酶活性影响的实验结果显示，归白凝肌方对酪氨酸酶有明显的抑制作用， IC50为468.9μg/mL。
实施例2
研究目的：观察归白凝肌方对NB-UVB诱导豚鼠色素沉着模型作用的研究。
实验方法：将豚鼠随机分为空白组、模型组、基质对照组、阳性对照组、归白凝肌方低剂量组、归白凝肌方高剂量组，每组8只。将豚鼠脱去背部被毛,脱毛面积约为5×6cm2，每周脱毛1次。除空白组以外，其他各组以波长为311nm的中波紫外线每日照射1次，每次照射时间为60min，动物与光源的距离为20cm，连续照射4周。造模成功后，分别在豚鼠皮损处涂抹相应的药物，每日l次,以氢醌软膏为阳性对照药，0.3g/只均匀涂抹于脱毛部位，蜂蜜为基质对照，将4g归白凝肌方加入10mL蜂蜜中搅拌均匀作为高剂量，将1g归白凝肌方加入10mL蜂蜜中搅拌均匀作为低剂量。连续给药4周后,记录各组豚鼠脱毛部位皮肤的变化情况，并按表3的评分标准进行评分。结果如表4。实验结束后处死动物，分别取其脱毛部位皮肤组织，将皮肤标本分成两份，一份用于HE染色和Fontana-Masson染色，一份用于皮肤组织中SOD、MDA的测定。
表3皮肤反应评分标准
反应 记分 色素沉着 正常肤色 0 出现轻微色素增加，呈淡红色 1 出现明显色素增加，呈淡褐色 2 颜色呈暗红色或是深褐色 3 黑色 4
表4归白凝肌方对豚鼠皮肤色素沉着的影响
注：与空白对照组比较，###p<0.01；与基质对照组比较，*p<0.05，**p<0.01， ***p<0.001
实验结果：如表4所示，豚鼠背部经UVB照射后出现明显的色素沉着，蜂蜜基质组豚鼠的色素沉着区皮肤没有明显变化。经归白凝肌方和氢醌处理以后，豚鼠均出现相应的色素沉着减轻。
实施例3对实施例2中的实验结果进行病理组织学检查
结果如图3a～3f，HE染色结果显示，空白组表皮角质层细胞排列整齐，基底层可见极少数的黑素颗粒，间质胶原纤维无明显增生，无淋巴细胞浸润；与空白组相比，模型组与基质对照组表皮厚度明显增厚，伴角化不良，基底层可见大量的黑素颗粒，间质胶原纤维增生，可见淋巴细胞浸润，且两组无明显差异；归白凝肌方与阳性对照组表皮厚度均略有增厚，基底层可见少量的黑素颗粒，归白凝肌方高剂量组最接近空白组正常豚鼠表皮，真皮层无明显间质胶原纤维增生，未见淋巴细胞浸润。
实施例4对实施例2中的结果Fontana-Masson染色观察皮肤黑素合成情况
结果如图4a～4f，与基质对照组相比，阳性药和归白凝肌方组黑素颗粒数量明显减少。空白对照组表皮中偶见黑素颗粒；模型组和基质对照组表皮基底层中黑素颗粒分布连续，可见大量的黑素颗粒；归白凝肌方与阳性对照组表皮基底层中黑素颗粒分布不连续，可见少量黑素颗粒。
实施例5归白凝肌方对色素沉着豚鼠皮肤中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA) 含量的影响
如表5和图5a、5b所示，豚鼠皮肤经紫外线照射后，与正常对照组比较，模型组、基质对照组豚鼠实验区皮肤SOD值极显著降低，MDA值极显著升高，且蜂蜜基质对照组与模型组没有显著性差异。氢醌阳性对照组豚鼠实验区皮肤SOD值大于基质对照组，且具有显著性差异；MDA小于基质对照组，且具有显著性差异。归白凝肌方高剂量组豚鼠实验区皮肤 SOD值大于空白对照组，且具有高显著性差异(P<0.01)；MDA值小于空白对照组，且具有极显著性差界(P<0.001)。归白凝肌方低剂量组豚鼠实验区皮肤SOD值大于空白对照组，且具有显著性差界(P<0.05)；MDA值小于空白对照组，且具有显著性差异(P<0.05)。
表5归白凝肌方对色素沉着模型豚鼠皮肤组织中SOD、MDA含量的影响
注：与空白对照组比较，###p<0.01；与基质对照组比较，*p<0.05，**p<0.01， ***p<0.001
实验结论：归白凝肌方能够上调豚鼠局部皮肤超氧化物歧化酶活性，抑制脂质过氧化反应，抑制黑素颗粒合成从而减轻色素沉着模型豚鼠色素沉着，达到祛斑美白作用。
实施例6家兔皮肤刺激性试验——安全性实验
研究目的：确定归白凝肌方安全性
实验方法：取白色家兔6只，以空白基质作为阴性对照组，采用同体左右自身对比法。试验前一天将家兔背部脊柱两侧毛去掉，面积约5cm x 5cm，作为试验和观察部位。每次实验取3g归白凝肌方，加入7.5mL蜂蜜调匀制成面膜使用。每天左侧均匀涂抹归白凝肌方面膜，右侧涂抹等量的空白基质，用一层玻璃和纱布覆盖给药部位，然后用半封闭性包扎带固定，持续4h后，除去覆盖物并用温水清洗给药部位，每天一次，连续7天。在每次去除药物后1h以及再次涂药前观察及记录红斑和水肿、涂抹部位是否有色素沉着、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲薄情况及其发生时间和消退时间，并对红斑及水肿进行评分。于末次除去除受试物和对照物后l、24、48和72小时进行肉眼观察，72小时后取皮肤固定、染色进行病理学观察。
表6皮肤刺激性反应评分标准
反应 记分 红斑和焦痂形成： 无红斑 0 极轻微红斑(勉强可见) 1 红斑清晰 2 中度红斑 3 重度红斑(紫红色)至焦痂形成 4 水肿： 无水肿 0 极轻微水肿(勉强可见) 1 水肿清晰(肿起，不超出区域边縁) 2 中度水肿(肿起约1mm) 3 重度水肿(肿起超过1mm，并超出涂药区) 4 刺激最高记分 8
表7皮肤刺激性强度评价标准
平均分值 皮肤刺激性程度评价 0～0.49 无刺激性 0.50～2.99 轻度刺激性 3.00～5.99 中度刺激性 6.00～8.00 强刺激性
表8归白凝肌方对家兔皮肤刺激性试验肉眼观察结果
反应平均分值＝(红斑形成总分+水肿形成总分)/动物数
实验结果：
肉眼观察结果：如表8所示，末次涂抹去除药物后1h，24h、48h和72h肉眼观察受试药组和空白基质组对家兔皮肤均未见任何异常反应，皮肤局部未见水肿、色素沉着、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲薄等情况，表明受试药归白凝肌方两者对正常皮肤和破损皮肤均未产生肉眼可见的刺激性。
实施例7对实施例6中的实验结果进行病理学检查
病理组织学检查结果如图6a-f：面膜组和基质组皮肤鳞状上皮显示是薄的，并没有增生，2-3层的上皮细胞，表面含少量的角质。真皮层及皮下组织内见少量慢性炎细胞浸润，皮肤毛囊、皮脂腺和小汗腺等附属器未见明显异常。皮肤组织结构正常。
实验结论：归白凝肌方连续局部涂抹7天，对家兔皮肤未见明显刺激性。
以上的实施例是为了说明本发明公开的实施方案，并不能理解为对本发明的限制。此外，本文所列出的各种修改以及发明中方法、组合物的变化，在不脱离本发明的范围和精神的前提下对本领域内的技术人员来说是显而易见的。虽然已结合本发明的多种具体优选实施例对本发明进行了具体的描述，但应当理解，本发明不应仅限于这些具体实施例。事实上，各种如上所述的对本领域内的技术人员来说显而易见的修改来获取发明都应包括在本发明的范围内。