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1、10申请公布号CN104107419A43申请公布日20141022CN104107419A21申请号201410384594022申请日20140806201410234263920140529CNA61K38/17200601A61P11/0020060171申请人四川大学华西医院地址610041四川省成都市武侯区国学巷37号72发明人卢铀薛建新周麟74专利代理机构成都高远知识产权代理事务所普通合伙51222代理人李高峡全学荣54发明名称胃饥饿素在预防或/和治疗放射性肺损伤中的用途57摘要本发明提供了胃饥饿素的一种新的医药用途，即胃饥饿素在预防或/和治疗放射性肺损伤、放射性肺炎、晚期肺纤维。
2、化中的用途。通过体内实验，验证胃饥饿素在预防或/和治疗放射性肺损伤、放射性肺炎、晚期肺纤维化方面的有效性。本发明开发胃饥饿素的新医药用途，开创性地将胃饥饿素应用在预防或/和治疗放射性肺损伤放射性肺炎、晚期肺纤维化中，为临床治疗提供了一种新的选择。66本国优先权数据51INTCL权利要求书1页说明书3页附图4页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页附图4页10申请公布号CN104107419ACN104107419A1/1页21胃饥饿素在制备预防或/和治疗放射性肺损伤的药物中的用途。2胃饥饿素在制备预防或/和治疗放射性肺炎的药物中的用途。3胃饥饿素在制备预防或/。
3、和治疗晚期肺纤维化的药物中的用途。4根据权利要求13任意一项所述的用途，其特征在于所述的药物是由胃饥饿素为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。5根据权利要求4所述的用途，其特征在于所述的制剂是口服制剂或注射制剂。6根据权利要求5所述的用途，其特征在于所述的口服制剂是片剂或胶囊剂。7根据权利要求5所述的用途，其特征在于所述的注射制剂是注射液或冻干粉针。权利要求书CN104107419A1/3页3胃饥饿素在预防或/和治疗放射性肺损伤中的用途技术领域0001本发明涉及胃饥饿素的一种新用途，具体涉及胃饥饿素在预防或/和治疗放射性肺损伤中的用途。背景技术0002肺癌是当前发病率高。
4、，治疗效果差，癌症相关死亡率最高的恶性肿瘤之一。放射治疗是肺癌治疗的重要手段，约50的肺癌患者需要接受放射治疗。放射性肺损伤RADIATIONINDUCEDLUNGINJURY,RILI是肺癌放疗最常见的并发症，发生率达1020。放射性肺损伤早期表现为放射性肺炎，后期进展为放射性肺纤维化,严重时导致患者死亡。目前，RILI尚缺乏有效防治手段，肾上腺皮质激素、广谱抗生素、支气管扩张剂以及免疫抑制剂仍为治疗急性放射性肺损伤的主要手段，而对晚期的放射性肺纤维化，至今无有效的预防和治疗措施。因此，寻找一种有效措施预防或者缓解RILI对于提高肺癌放射治疗的效果具有重要意义。0003胃饥饿素GHRELIN。
5、，由28个氨基酸组成，是生长激素促分泌素受体GROWTHHORMONESECRETAGOGUERECEPTOR,GHSR特异性的内源性配体。胃饥饿素除能有效促进生长激素分泌外，还参与调节能量代谢、胃肠功能和心血管功能等。近年来，有胃饥饿素在其他功能方面的文献报道，例如，重组的胃饥饿素已在临床试验中被证实可缓解厌食症，胃痉挛，恶病质及心脏衰竭。此外，胃饥饿素具有抗炎及抗纤维化作用，有研究报道，外源给予胃饥饿素可以减轻博来霉素或败血症引发的急性肺损伤NAKAZATOMETALEURJPHARMACOL2011,672131538；WANGPETALAMJRESPIRCRITCAREMED2007,。
6、17680513，但目前并没有报道将胃饥饿素用于预防或/和治疗放射性肺损伤。因此，开发胃饥饿素新的医药用途，开创性地将胃饥饿素应用在预防或/和治疗放射性肺损伤中，为临床治疗放射性肺损伤提供了一种新的选择。发明内容0004为了解决现有技术的问题，本发明提供了胃饥饿素的一种新的医药用途，即胃饥饿素在预防或/和治疗放射性肺损伤、放射性肺炎、晚期肺纤维化中的用途。0005本发明提供了胃饥饿素在制备预防或/和治疗放射性肺损伤的药物中的用途。0006本发明提供了胃饥饿素在制备预防或/和治疗放射性肺炎的药物中的用途。0007本发明提供了胃饥饿素在制备预防或/和治疗晚期肺纤维化的药物中的用途。0008将胃饥饿。
7、素制成一种多肽药物，是由胃饥饿素为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。0009所述的制剂是口服制剂或注射制剂。0010所述的口服制剂是片剂或胶囊剂。0011所述的注射制剂是注射液或冻干粉针。0012本发明经过大量的实验证明，胃饥饿素对放射性肺损伤、放射性肺炎、晚期肺纤维说明书CN104107419A2/3页4化有显著的预防和治疗作用，为临床治疗提供了一种新的多肽药。附图说明0013图1放射性肺损伤小鼠模型的建立A全肺照射后1月；B对照组200。0014图2C57小鼠肺组织HE染色200。0015图3胃饥饿素对肺组织细胞凋亡的影响。A肺组织TUNEL染色680；B肺组织C。
8、LEAVEDCASPASED3WESTERNBLOT检测。0016图4胃饥饿素对肺组织细胞DNA损伤的影响。A肺组织细胞H2AX免疫荧光染色680；B肺组织H2AXWESTERNBLOT检测。0017图5胃饥饿素对肺组织ROS产生的影响。0018图6胃饥饿素对血浆炎性因子的影响。0019图7HE染色检测胃饥饿素对放射性肺纤维化的治疗效果。0020图8MASSONS三色染色检测胃饥饿素对放射性肺纤维化的影响。0021图9液相芯片检测胃饥饿素对纤维化因子TGF1的影响。具体实施方式0022下述实施实例中，所用胃饥饿素由生物公司合成,可直接购买市售品。0023实施例10024将胃饥饿素用PBS溶解，。
9、配制成注射液。0025以此注射剂为例研究胃饥饿素对预防和治疗放射性肺损伤的效果。0026实验例1本发明药物的动物实验0027一、实验方法00281雄性小鼠适应环境后给予全肺16GY照射；00292将雄性小鼠随机分为4组，每组N只；0030正常对照组PBS065MG/KGPBS，IP，隔日方案；0031单纯胃饥饿素组G065MG/KG胃饥饿素，IP，隔日方案；0032照射缓冲液组RTPBS065MG/KGPBS，IP，隔日方案；第一次注射24小时前给予胸部照射16GY1次；0033照射胃饥饿素治疗组RTG065MG/KG胃饥饿素，IP，隔日方案；第一次注射24小时前给予胸部照射16GY1次；00。
10、34每组小鼠N5。0035二、体内实验放射性肺损伤小鼠模型00361放射性肺损伤模型小鼠的建立003716GY射线处理C57小鼠1月后，小鼠肺组织出现明显的肺损伤表现，肺水肿、充血、肺泡间隔增宽并有大量炎性细胞浸润。证明在16GY射线处理下，小鼠放射性肺损伤模型建立成功，以后均采取此剂量建模。结果详见图1。00382HE染色检测胃饥饿素对早期放射性肺损伤程度的影响0039C57小鼠照射前1天注射胃饥饿素或PBS，之后隔日给药，30天后处死小鼠，采用HE染色方法检测胃饥饿素对小鼠早期放射性肺损伤的影响。结果显示胃饥饿素可显著减说明书CN104107419A3/3页5轻小鼠的放射性肺损伤。结果详见。
11、图2。00403胃饥饿素对肺组织细胞凋亡的影响0041于胃饥饿素治疗后第30天收集实验组及对照组小鼠肺的组织标本，采用TUNNEL染色及WESTERNBLOT检测胃饥饿素对肺组织细胞凋亡的影响。检测结果显示较单独16GY放疗组，胃饥饿素能够明显抑制CLEAVEDCASPASE3的表达，说明为胃饥饿素可以抑制肺组织细胞凋亡。结果详见图3。00424胃饥饿素对肺组织细胞DNA损伤的影响0043采用免疫荧光染色检测肺组织细胞H2AX焦点的形成，采用WESTERNBLOT检测肺组织H2AX蛋白的表达情况。检测结果显示较单独16GY放疗组，胃饥饿素能够抑制肺组织细胞的DNA损伤。结果详见图4。00445。
12、胃饥饿素对肺组织ROS产生的影响0045采用活性氧检测试剂盒检测各处理组肺组织ROS水平。检测结果显示较单独放疗组，胃饥饿素能够抑制肺组织的ROS的产生。结果详见图5。00466胃饥饿素对血浆炎性因子的影响0047血浆炎性因子在RILI的发展过程中发挥着重要的作用，当射线损伤肺组织后，炎性因子的分泌增加，外周血中的炎性因子水平也相应升高。研究显示血浆炎性因子水平可间接反应肺组织受损伤程度。我们采用液相芯片技术检测照射后30天各实验组小鼠血浆中炎性因子的浓度，包括TGF1，TGF2，GMCSF,IFN，IL6，IL1，IL，IL2，TNF。结果显示胃饥饿素预处理组血浆炎性因子均低于单纯射线处理组。
13、，其中TGF1，TGF2，IFN，IL1，IL，IL2，TNF的浓度均有统计学差异P005，而GMCSF与IL6的浓度未见明显统计学差异。结果详见图6。00487胃饥饿素对放射性肺损伤模型小鼠肺纤维化的影响00491HE染色检测胃饥饿素对放射性肺纤维化的治疗效果0050如图7所示在16GY射线照射后6个月，即胃饥饿素治疗结束后5个月，小鼠肺组织出现明显损伤，肺泡间隔较1个月时明显增宽，内有大量炎性细胞浸润，肺泡形态破坏、异常，肺间增生明显。在胃饥饿素治疗组，损伤较单纯射线处理组有所减轻。00512MASSONS三色染色检测胃饥饿素对放射性肺纤维化的影响0052放射性肺炎及放射性肺纤维化是RIL。
14、I的两个主要部分，一般情况下，放射性肺炎发生在射线照射后24个月，而放射性肺纤维化则发生在照射后46个月。在照射后6个月，我们处死小鼠检测其肺组织纤维化的程度。MASSONS染色是常用的胶原纤维染色方法，该方法中胶原纤维被染为蓝色，细胞核染为兰褐色，而红色则代表了红细胞与肌纤维。如图8所示在单纯射线处理组RTPBS，肺泡间隔及支气管周围可见大量胶原沉积，而在胃饥饿素治疗组胶原沉积则有所减轻。00533液相芯片检测胃饥饿素对纤维化因子TGF1的影响0054RILI的病理生理过程中血浆纤维化因子TGF1起着很重要的作用。外周血中TGF1水平具有间接预测与评估肺组织受损伤程度的作用。我们检测了射线处理后6个月个实验组小鼠血浆当中TGF1的浓度。结果显示胃饥饿素处理组小鼠血浆TGF1的水平明显低于单纯射线处理组，差异具有统计学意义P005，结果详见图9。说明书CN104107419A1/4页6图1图2说明书附图CN104107419A2/4页7图3图4图5说明书附图CN104107419A3/4页8图6图7说明书附图CN104107419A4/4页9图8图9说明书附图CN104107419A。