白囊耙齿菌在制备耐缺氧药物中的用途.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201410328592.X

申请日:

2014.07.11

公开号:

CN104138395A

公开日:

2014.11.12

当前法律状态:

授权

有效性:

有权

法律详情:

授权|||实质审查的生效IPC(主分类):A61K 36/07申请日:20140711|||公开

IPC分类号:

A61K36/07; A61P39/00; A23L1/28; A23L2/52

主分类号:

A61K36/07

申请人:

吉林大学

发明人:

王迪; 李臣亮; 滕利荣; 孟庆繁; 宋佳; 逯家辉; 刘艳; 王贞佐; 周毓麟; 刘春刚; 程瑛琨; 权宇彤

地址:

130011 吉林省长春市前进大街2699号

优先权:

专利代理机构:

吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100

代理人:

陈宏伟

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内容摘要

本发明提供一种白囊耙齿菌在制备耐缺氧保健品中的用途,用发酵、水提、醇沉、冻干法制备白囊耙齿菌提取物,经动物实验,证明具有显著的耐缺氧作用。本发明制备方法简单,成本低廉,毒副作用小,耐缺氧效果显著,适用于耐缺氧保健食品或药物制剂的制备。

权利要求书

1.  白囊耙齿菌在制备耐缺氧保健品中的用途。

2.
   一种白囊耙齿菌提取物的制备方法,包括步骤如下:
将白囊耙齿菌经发酵罐得到发酵液,以4000~5000转/分钟离心5~10分钟,弃上清,沉淀冻干,得到白囊耙齿菌菌粉,再将菌粉水提2次,按液料比1:40,温度为70~90℃,第一次3小时,第2次1小时,合并两次水提液,用200目过滤布,得到过滤液,将过滤液浓缩,再加乙醇至醇浓度为80%,搅匀过夜,过滤后取沉淀物,将沉淀物冻干,即得白囊耙齿菌提取物。

3.
   权利要求2所述制备方法制备的白囊耙齿菌水提物,其特征在于:
用于制备耐缺氧保健食品或药物,所述的保健食品包括日常食品加工工艺可以制成的干粮,饮料、冲剂等各种食物形式;药物包括常规药物制剂工艺可以制成能够在临床上使用的任何药物剂型。

说明书

白囊耙齿菌在制备耐缺氧药物中的用途
技术领域
本发明涉及医药技术领域,具体涉及一种白囊耙齿菌在制备耐缺氧药物中的用途。
背景技术
氧是绝大多数生命形式存在所必需的。生活在平原的人进入高原后,由于缺氧对人体机能的影响很大,致使劳动能力下降,海拔越高,劳动能力下降的越明显。
缺氧广泛存在于人类的生活和工作中,它涉及到医学、体育、军事等领域,它也是很多疾病发生发展的病理学基础,大脑和心肌对缺氧都很敏感。一般短暂货轻度缺氧可以引起心跳加快、嘴唇发紫、头晕、头痛,甚至可能出现呕吐、腹泻、呼吸短促、昏迷等症状;长时间或重度缺氧,由于机体氧化代谢受阻,能量产生不足,可引起严重的功能性障碍或病理性改变,肺水肿、高原低血压症等,并可能导致生命活动的停止。缺氧对生物体的危害是很严重的,而在高原、高空等氧饱和度低的环境中,缺氧又是一个普遍的现象,所以人类愈来愈重视这个问题,因此,如何提高人类对低氧耐受力和有效的干预低氧对人体损害的措施是我们必须面临和解决的重大问题。
本发明涉及的白囊耙齿菌(Irpex lacteus Fr.)是一种真菌,通常生长在枯木上,是一种腐生真菌,属于担子纲,非褶菌目,多孔菌科,耙齿菌属,又被叫做白囊孔。白囊耙齿菌是一种重要的药用真菌,关于白囊耙齿菌的研究,一般主要集中在脱色合成染料和土壤中各种顽固有机污染物的降解。然而,同一物种的白囊耙齿菌由于生长环境的不同功效也完全不同。白囊耙齿菌的有效成分主要有蛋白质、多糖、腺苷、多肽、皂甙和甘露醇。关于白囊耙齿菌药理活性的相关研究较少,因此,发明提供白囊耙齿菌水提物作为原料提高机体的耐缺氧作用。
发明内容
本发明提供一种白囊耙齿菌在制备耐缺氧药物中的用途,提供了白囊耙齿菌的新的用途。
本发明提供一种白囊耙齿菌在制备耐缺氧药物中的用途,是以白囊耙齿菌水提物为原料能提供机体缺氧耐受力,白囊耙齿菌提取物的制备方法如下:
将白囊耙齿菌经发酵罐得到发酵液,以4000~5000转/分钟离心5~10分钟,弃上清,沉淀冻干,得到白囊耙齿菌菌粉,再将菌粉水提2次,按液料比1:40,温度为70~90℃,第一次3小时,第2次1小时,合并两次水提液,用200目过滤布,得到过滤液,将过滤液浓缩,再加乙醇至醇浓度为80%,搅匀过夜,过滤后取沉淀物,将沉淀物冻干,即得白囊耙齿菌提取物。
经动物实验证明(详见试验例1~3),本发明白囊耙齿菌水提物具有提高机体缺氧耐受能力的功能。主要的功效学作用如下:
明显延长小鼠在常压缺氧下的存活时间;
明显延长小鼠在急性缺氧下的张口次数;
明显延长小鼠在亚硝酸钠中毒缺氧条件下的存活时间;
本发明白囊耙齿菌水提物可用于制备耐缺氧保健食品或药物制剂。所述的保健食品包括日常食品加工工艺可以制成的各种食物形式,如:干粮,饮料、冲剂等;药物包括常规药物制剂工艺可以制成能够在临床上使用的药物剂型,如:丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、口服液及各类长效制剂和复方制剂。
本发明的积极效果在于:白囊耙齿菌是一种药食两用真菌,易于培植,制备方法简单,成本低廉,毒副作用小,耐缺氧效果显著,适用于耐缺氧保健食品或药物制剂的制备。
具体实施方式
实施例1:白囊耙齿菌提取物的制备
将白囊耙齿菌经发酵罐得到发酵液,以4000转/分钟离心10分钟,弃去上清,沉淀冻干,得到白囊耙齿菌菌粉,再将菌粉用去离子水提2次,按液料比为1:40,温度为90℃,第一次3小时,第2次1小时,合并两次水提液,用200目过滤布,得到过滤液,将过滤液浓缩,再加乙醇至醇浓度为80%,搅匀过夜,过滤后取沉淀物,将沉淀物冻干,即得白囊耙齿菌提取物。
实施例2
将白囊耙齿菌经发酵罐得到发酵液,以4500转/分钟离心8分钟,弃上清,沉淀冻干,得到白囊耙齿菌菌粉,再将菌粉水提2次,按液料比1:40,温度为80℃,第一次3小时,第2次1小时,合并两次水提液,用200目过滤布,得到过滤液,将过滤液浓缩,再加乙醇至醇浓度为80%,搅匀过夜,过滤后取沉淀物,将沉淀物冻干,即得白囊耙齿菌提取物。
实施例3
将白囊耙齿菌经发酵罐得到发酵液,以5000转/分钟离心5分钟,弃上清,沉淀冻干,得到白囊耙齿菌菌粉,再将菌粉水提2次,按液料比1:40,温度为70℃,第一次3小时,第2次1小时,合并两次水提液,用200目过滤布,得到过滤液,将过滤液浓缩,再加乙醇至醇浓度为80%,搅匀过夜,过滤后取沉淀物,将沉淀物冻干,即得白囊耙齿菌提取物。
试验例1:小鼠常压缺氧耐受实验
将实施例1~实施例3制备的白囊耙齿菌水提物用去离子水配成浓度为4mg/ml、20mg/ml、100mg/ml低剂量组、中剂量组、高剂量组。受试小鼠的经口灌胃剂量,即20g体重受试小鼠经口灌胃剂量为0.2ml/只,而空白对照组受试小鼠经口灌胃等体积的生理盐水,阳性对照组受试小鼠经口灌胃红景天600mg/kg,每天都灌胃给药,连续灌胃一周。 于末次灌胃1h后,将各对照组与实验组小鼠分别放入用纱布包有20g钠石灰的250 ml广口瓶内,瓶口用凡士林涂抹盖严,以保持密闭不透气,以小鼠呼吸停止为指标,观察自小鼠放入瓶中起到小鼠死亡的时间,并记录。结果见表1。
表1 不同剂量白囊耙齿菌水提物对小鼠常压缺氧耐受时间的影响

组别耐缺氧时间(min)空白组32.6±0.81阳性对照组44±1.87**实施例137.32±1.3**实施例246.45±2.03**实施例351.92±2.81**

*与空白组比P<0.05,**与空白组比<0.01
由表1可见,白囊耙齿菌水提物低、中、高剂量组小鼠常压耐缺氧时间与空白组相比有显著性的差异,这说明白囊耙齿菌水提物能够延长小鼠常压耐缺氧时间,即说明具有增强耐缺氧作用。
试验例2:小鼠急性缺氧耐受实验
将实施例1~实施例3制备的白囊耙齿菌水提物用去离子水配成浓度为4mg/ml、20mg/ml、100mg/ml低剂量组、中剂量组、高剂量组。受试小鼠的经口灌胃剂量,即20g体重受试小鼠经口灌胃剂量为0.2ml/只,而空白对照组受试小鼠经口灌胃等体积的生理盐水,阳性对照组受试小鼠经口灌胃红景天600mg/kg,每天都灌胃给药,连续灌胃一周。在末次灌胃60min后,在乙醚浅麻醉下,进行急性脑缺血性缺氧实验。方法为每组小鼠经粗剪刀自小鼠双耳连线处快速剪下,立即按秒表,依次记录每只小鼠断头后的张口次数。结果见表2。
表2 不同剂量白囊耙齿菌水提物对小鼠张口次数的影响
组别张口次数(n)空白组10.15±0.54阳性对照组14.8±0.59**实施例114.65±0.53**实施例215.45±0.42**实施例316.15±0.47**

*与空白组比P<0.05,**与空白组比<0.01
由表2可见,白囊耙齿菌水提物低、中、高剂量组小鼠断头后的张口次数与空白组相比有显著性的差异,这说明白囊耙齿菌水提物能够延长小鼠断头后的张口次数,即说明具有提高却氧耐受力。
试验例3:小鼠在亚硝酸钠中毒缺氧条件下的存活时间
将实施例1~实施例3制备的白囊耙齿菌水提物用去离子水配成浓度为4mg/ml、20mg/ml、100mg/ml低剂量组、中剂量组、高剂量组。受试小鼠的经口灌胃剂量,即20g体重受试小鼠经口灌胃剂量为0.2ml/只,而空白对照组受试小鼠经口灌胃等体积的生理盐水,阳性对照组受试小鼠经口灌胃红景天600mg/kg,每天都灌胃给药,连续灌胃一周。称取亚硝酸钠用生理盐水配制成浓度为24mg/mL备用溶液,在末次灌胃60min后,每只小鼠均腹腔注射240mg/kg亚硝酸钠,立即计时,依次记录小鼠中毒后的存活时间。结果见表3。
表3 不同剂量白囊耙齿菌水提物对小鼠亚硝酸钠缺氧耐受时间的影响
组别存活时间(min)空白组19.54±0.92阳性对照组25.68±1.56**实施例122.19±0.89*实施例223.15±1.14*实施例323.54±1.05**

*与空白组比P<0.05,**与空白组比<0.01
由表3可见,白囊耙齿菌水提物低、中、高剂量组小鼠存活时间与空白组相比有显著性的差异,这说明白囊耙齿菌水提物能够延长小鼠亚硝酸钠中毒后缺氧耐受时间,即说明具有提高却氧耐受力。

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1、10申请公布号CN104138395A43申请公布日20141112CN104138395A21申请号201410328592X22申请日20140711A61K36/07200601A61P39/00200601A23L1/28200601A23L2/5220060171申请人吉林大学地址130011吉林省长春市前进大街2699号72发明人王迪李臣亮滕利荣孟庆繁宋佳逯家辉刘艳王贞佐周毓麟刘春刚程瑛琨权宇彤74专利代理机构吉林长春新纪元专利代理有限责任公司22100代理人陈宏伟54发明名称白囊耙齿菌在制备耐缺氧药物中的用途57摘要本发明提供一种白囊耙齿菌在制备耐缺氧保健品中的用途,用发酵、水提。

2、、醇沉、冻干法制备白囊耙齿菌提取物,经动物实验,证明具有显著的耐缺氧作用。本发明制备方法简单,成本低廉,毒副作用小,耐缺氧效果显著,适用于耐缺氧保健食品或药物制剂的制备。51INTCL权利要求书1页说明书3页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页10申请公布号CN104138395ACN104138395A1/1页21白囊耙齿菌在制备耐缺氧保健品中的用途。2一种白囊耙齿菌提取物的制备方法,包括步骤如下将白囊耙齿菌经发酵罐得到发酵液,以40005000转/分钟离心510分钟,弃上清,沉淀冻干,得到白囊耙齿菌菌粉,再将菌粉水提2次,按液料比140,温度为7090,。

3、第一次3小时,第2次1小时,合并两次水提液,用200目过滤布,得到过滤液,将过滤液浓缩,再加乙醇至醇浓度为80,搅匀过夜,过滤后取沉淀物,将沉淀物冻干,即得白囊耙齿菌提取物。3权利要求2所述制备方法制备的白囊耙齿菌水提物,其特征在于用于制备耐缺氧保健食品或药物,所述的保健食品包括日常食品加工工艺可以制成的干粮,饮料、冲剂等各种食物形式;药物包括常规药物制剂工艺可以制成能够在临床上使用的任何药物剂型。权利要求书CN104138395A1/3页3白囊耙齿菌在制备耐缺氧药物中的用途技术领域0001本发明涉及医药技术领域,具体涉及一种白囊耙齿菌在制备耐缺氧药物中的用途。背景技术0002氧是绝大多数生命。

4、形式存在所必需的。生活在平原的人进入高原后,由于缺氧对人体机能的影响很大,致使劳动能力下降,海拔越高,劳动能力下降的越明显。0003缺氧广泛存在于人类的生活和工作中,它涉及到医学、体育、军事等领域,它也是很多疾病发生发展的病理学基础,大脑和心肌对缺氧都很敏感。一般短暂货轻度缺氧可以引起心跳加快、嘴唇发紫、头晕、头痛,甚至可能出现呕吐、腹泻、呼吸短促、昏迷等症状;长时间或重度缺氧,由于机体氧化代谢受阻,能量产生不足,可引起严重的功能性障碍或病理性改变,肺水肿、高原低血压症等,并可能导致生命活动的停止。缺氧对生物体的危害是很严重的,而在高原、高空等氧饱和度低的环境中,缺氧又是一个普遍的现象,所以人。

5、类愈来愈重视这个问题,因此,如何提高人类对低氧耐受力和有效的干预低氧对人体损害的措施是我们必须面临和解决的重大问题。0004本发明涉及的白囊耙齿菌(IRPEXLACTEUSFR)是一种真菌,通常生长在枯木上,是一种腐生真菌,属于担子纲,非褶菌目,多孔菌科,耙齿菌属,又被叫做白囊孔。白囊耙齿菌是一种重要的药用真菌,关于白囊耙齿菌的研究,一般主要集中在脱色合成染料和土壤中各种顽固有机污染物的降解。然而,同一物种的白囊耙齿菌由于生长环境的不同功效也完全不同。白囊耙齿菌的有效成分主要有蛋白质、多糖、腺苷、多肽、皂甙和甘露醇。关于白囊耙齿菌药理活性的相关研究较少,因此,发明提供白囊耙齿菌水提物作为原料提。

6、高机体的耐缺氧作用。发明内容0005本发明提供一种白囊耙齿菌在制备耐缺氧药物中的用途,提供了白囊耙齿菌的新的用途。0006本发明提供一种白囊耙齿菌在制备耐缺氧药物中的用途,是以白囊耙齿菌水提物为原料能提供机体缺氧耐受力,白囊耙齿菌提取物的制备方法如下将白囊耙齿菌经发酵罐得到发酵液,以40005000转/分钟离心510分钟,弃上清,沉淀冻干,得到白囊耙齿菌菌粉,再将菌粉水提2次,按液料比140,温度为7090,第一次3小时,第2次1小时,合并两次水提液,用200目过滤布,得到过滤液,将过滤液浓缩,再加乙醇至醇浓度为80,搅匀过夜,过滤后取沉淀物,将沉淀物冻干,即得白囊耙齿菌提取物。0007经动物。

7、实验证明(详见试验例13),本发明白囊耙齿菌水提物具有提高机体缺氧耐受能力的功能。主要的功效学作用如下明显延长小鼠在常压缺氧下的存活时间;明显延长小鼠在急性缺氧下的张口次数;说明书CN104138395A2/3页4明显延长小鼠在亚硝酸钠中毒缺氧条件下的存活时间;本发明白囊耙齿菌水提物可用于制备耐缺氧保健食品或药物制剂。所述的保健食品包括日常食品加工工艺可以制成的各种食物形式,如干粮,饮料、冲剂等;药物包括常规药物制剂工艺可以制成能够在临床上使用的药物剂型,如丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、口服液及各类长效制剂和复方制剂。0008本发明的积极效果在于白囊耙齿菌是一种药食两用真菌,易于培植,制备。

8、方法简单,成本低廉,毒副作用小,耐缺氧效果显著,适用于耐缺氧保健食品或药物制剂的制备。具体实施方式0009实施例1白囊耙齿菌提取物的制备将白囊耙齿菌经发酵罐得到发酵液,以4000转/分钟离心10分钟,弃去上清,沉淀冻干,得到白囊耙齿菌菌粉,再将菌粉用去离子水提2次,按液料比为140,温度为90,第一次3小时,第2次1小时,合并两次水提液,用200目过滤布,得到过滤液,将过滤液浓缩,再加乙醇至醇浓度为80,搅匀过夜,过滤后取沉淀物,将沉淀物冻干,即得白囊耙齿菌提取物。0010实施例2将白囊耙齿菌经发酵罐得到发酵液,以4500转/分钟离心8分钟,弃上清,沉淀冻干,得到白囊耙齿菌菌粉,再将菌粉水提2。

9、次,按液料比140,温度为80,第一次3小时,第2次1小时,合并两次水提液,用200目过滤布,得到过滤液,将过滤液浓缩,再加乙醇至醇浓度为80,搅匀过夜,过滤后取沉淀物,将沉淀物冻干,即得白囊耙齿菌提取物。0011实施例3将白囊耙齿菌经发酵罐得到发酵液,以5000转/分钟离心5分钟,弃上清,沉淀冻干,得到白囊耙齿菌菌粉,再将菌粉水提2次,按液料比140,温度为70,第一次3小时,第2次1小时,合并两次水提液,用200目过滤布,得到过滤液,将过滤液浓缩,再加乙醇至醇浓度为80,搅匀过夜,过滤后取沉淀物,将沉淀物冻干,即得白囊耙齿菌提取物。0012试验例1小鼠常压缺氧耐受实验将实施例1实施例3制备。

10、的白囊耙齿菌水提物用去离子水配成浓度为4MG/ML、20MG/ML、100MG/ML低剂量组、中剂量组、高剂量组。受试小鼠的经口灌胃剂量,即20G体重受试小鼠经口灌胃剂量为02ML/只,而空白对照组受试小鼠经口灌胃等体积的生理盐水,阳性对照组受试小鼠经口灌胃红景天600MG/KG,每天都灌胃给药,连续灌胃一周。于末次灌胃1H后,将各对照组与实验组小鼠分别放入用纱布包有20G钠石灰的250ML广口瓶内,瓶口用凡士林涂抹盖严,以保持密闭不透气,以小鼠呼吸停止为指标,观察自小鼠放入瓶中起到小鼠死亡的时间,并记录。结果见表1。0013表1不同剂量白囊耙齿菌水提物对小鼠常压缺氧耐受时间的影响组别耐缺氧时。

11、间(MIN)空白组326081阳性对照组44187实施例1373213实施例24645203实施例35192281与空白组比P005,与空白组比001说明书CN104138395A3/3页5由表1可见,白囊耙齿菌水提物低、中、高剂量组小鼠常压耐缺氧时间与空白组相比有显著性的差异,这说明白囊耙齿菌水提物能够延长小鼠常压耐缺氧时间,即说明具有增强耐缺氧作用。0014试验例2小鼠急性缺氧耐受实验将实施例1实施例3制备的白囊耙齿菌水提物用去离子水配成浓度为4MG/ML、20MG/ML、100MG/ML低剂量组、中剂量组、高剂量组。受试小鼠的经口灌胃剂量,即20G体重受试小鼠经口灌胃剂量为02ML/只,。

12、而空白对照组受试小鼠经口灌胃等体积的生理盐水,阳性对照组受试小鼠经口灌胃红景天600MG/KG,每天都灌胃给药,连续灌胃一周。在末次灌胃60MIN后,在乙醚浅麻醉下,进行急性脑缺血性缺氧实验。方法为每组小鼠经粗剪刀自小鼠双耳连线处快速剪下,立即按秒表,依次记录每只小鼠断头后的张口次数。结果见表2。0015表2不同剂量白囊耙齿菌水提物对小鼠张口次数的影响组别张口次数N空白组1015054阳性对照组148059实施例11465053实施例21545042实施例31615047与空白组比P005,与空白组比001由表2可见,白囊耙齿菌水提物低、中、高剂量组小鼠断头后的张口次数与空白组相比有显著性的差。

13、异,这说明白囊耙齿菌水提物能够延长小鼠断头后的张口次数,即说明具有提高却氧耐受力。0016试验例3小鼠在亚硝酸钠中毒缺氧条件下的存活时间将实施例1实施例3制备的白囊耙齿菌水提物用去离子水配成浓度为4MG/ML、20MG/ML、100MG/ML低剂量组、中剂量组、高剂量组。受试小鼠的经口灌胃剂量,即20G体重受试小鼠经口灌胃剂量为02ML/只,而空白对照组受试小鼠经口灌胃等体积的生理盐水,阳性对照组受试小鼠经口灌胃红景天600MG/KG,每天都灌胃给药,连续灌胃一周。称取亚硝酸钠用生理盐水配制成浓度为24MG/ML备用溶液,在末次灌胃60MIN后,每只小鼠均腹腔注射240MG/KG亚硝酸钠,立即计时,依次记录小鼠中毒后的存活时间。结果见表3。0017表3不同剂量白囊耙齿菌水提物对小鼠亚硝酸钠缺氧耐受时间的影响组别存活时间MIN空白组1954092阳性对照组2568156实施例12219089实施例22315114实施例32354105与空白组比P005,与空白组比001由表3可见,白囊耙齿菌水提物低、中、高剂量组小鼠存活时间与空白组相比有显著性的差异,这说明白囊耙齿菌水提物能够延长小鼠亚硝酸钠中毒后缺氧耐受时间,即说明具有提高却氧耐受力。说明书CN104138395A。

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