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1、10申请公布号CN102002109A43申请公布日20110406CN102002109ACN102002109A21申请号201010558113522申请日20101125C08B37/0020060171申请人南京泽朗医药科技有限公司地址210046江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边108号01幢701702室72发明人刘东锋万冬梅杨成东54发明名称一种山茱萸多糖的制备方法57摘要本发明涉及一种山茱萸多糖的制备方法，工艺以山茱萸果肉醇提总苷后的干燥残渣为原料，加510倍量V/W温水超声提取12H，合并提取液，浓缩，加30H2O2和3三氯醋酸，离心，取上清液，超滤，截留物先加适量水，再加不。
2、同浓度乙醇分级沉淀，滤出高浓度醇沉淀物干燥即得产品。该工艺操作简单，成本较低，纯度较高，利于大生产操作。51INTCL19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页CN102002119A1/1页21一种山茱萸多糖的制备方法，其特征在于包含以下步骤1提取将山茱萸果肉醇提总苷后的干燥残渣加入510倍量V/W温水超声提取12H，重复23次，过滤，合并提取液；2除杂上述提取液浓缩，加适量30H2O2，至浅黄色，加3三氯醋酸至不再产生混浊，离心，取上清液；3膜分离上述上清液用超滤膜超滤，得截留物；4分级沉淀上述截留物加适量水，先加30乙醇沉淀，滤液再加50乙醇，过滤，滤液加入。
3、90乙醇，生成沉淀，滤出沉淀依次用丙酮、乙醇洗涤，真空干燥即得山茱萸多糖产品。2如权利要求1所述山茱萸多糖的制备方法，其特征在于步骤1中温水为3070，超声频率为20KHZ。3如权利要求1所述山茱萸多糖的制备方法，其特征在于步骤2中H2O2用量为浓缩液体积的1/41/2。4如权利要求1所述山茱萸多糖的制备方法，其特征在于步骤3中超滤膜为截留分子量为60000的中空纤维膜。权利要求书CN102002109ACN102002119A1/3页3一种山茱萸多糖的制备方法技术领域0001本发明涉及一种山茱萸多糖的制备方法，尤其是一种利用超声提取、膜分离和分级沉淀提取纯化山茱萸多糖的方法。背景技术0002。
4、山茱萸FRUCTUSCORNI为山茱萸科植物山茱萸CORNUSOFFICINALISSIEBETZUCC的干燥果肉，又名山萸肉、药枣、肉枣等。是一种滋补类名贵药材，具有补益肝肾、涩精固脱的功效。近年来研究显示，山茱萸具有抗失血性休克、抑制血小板聚集、免疫调节、抗炎、降血糖、抗氧化、抗癌、抗菌等作用。文献“山茱萸有效化学成分的研究进展周京华，李春生，李电东中国新药杂志，2001，1011808”和“山茱萸多糖的化学研究杨云，刘建鑫，刘翠平，等中国中药杂志，1999，2410614”，临床研究证明，山茱萸是治疗糖尿病、冠心病和高血压病的主要药材。现代研究表明山茱萸果肉中主要成分有糖类、有机酸类及其。
5、酯类、鞣质类等，其中多糖类物质是生命代谢不可缺少的重要物质，具有多种生物活性，山茱萸多糖具有免疫调节活性和明显的抗氧化作用。0003有关山茱萸多糖的提取方法报道很少，方法比较局限。现有方法是原料脱脂、水提、浓缩、洗涤、干燥，得到产品，如赵晓华等山茱萸多糖提取工艺及理化性质研究，脱脂使用石油醚，用量大、毒性大；工艺所用有机溶剂种类多，容易导致有效成分流失。0004张丽娟等山茱萸多糖的提取工艺优化及对大鼠局部灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用，该文献公开的方法是超声水提、浓缩、超滤、醇沉、除蛋白、洗涤干燥所得山茱萸多糖产品纯度不高。0005中国专利“一种酶解提取山茱萸多糖的方法”申请号20081012。
6、05696，该专利公开的方法是取山茱萸干燥果肉粉碎制得山茱萸干粉，加入质量为山茱萸干粉质量1560倍的蒸馏水，加入酶于3560、PH3570下酶解05H4H，酶解结束后灭酶，提取液浓缩醇沉，离心干燥即得山茱萸多糖提取物，产品纯度低。发明内容0006本发明所要解决的技术问题是提供一种操作简单，生产安全，纯度较高的山茱萸多糖制备方法。0007为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案0008一种山茱萸多糖的制备方法，其特征在于包含以下步骤00091提取将山茱萸果肉醇提总苷后的干燥残渣加入510倍量V/W温水超声提取12H，重复23次，过滤，合并提取液；00102除杂上述提取液浓缩，加适量30H2O。
7、2，至浅黄色，加3三氯醋酸至不再产生混浊，离心，取上清液；00113膜分离上述上清液用超滤膜超滤，得截留物；00124分级沉淀上述截留物加适量水，先加30乙醇沉淀，滤液再加50乙醇，过说明书CN102002109ACN102002119A2/3页4滤，滤液加入90乙醇，生成沉淀，滤出沉淀依次用丙酮、乙醇洗涤，真空干燥即得山茱萸多糖产品。0013步骤1中温水为3070，超声频率为20KHZ。0014步骤2中H2O2用量为浓缩液体积的1/41/2。0015步骤3中超滤膜为截留分子量为60000的中空纤维膜0016综上所述，本发明存在以下优点本工艺采用温水超声提取山茱萸多糖，溶剂简单；所用药材为醇提。
8、总苷后的残渣，成本较低；膜分离能有效除去小分子杂质。0017采用上述技术方案制备山茱萸多糖，操作简单，成本较低，纯度较高，利于大生产操作。0018下面将结合具体实施方式对本发明做进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。具体实施方式0019实施例10020取山茱萸果肉醇提总苷后的干燥残渣1KG，加入5L60温水超声提取2H，重复3次，合并提取液。提取液浓缩至原体积的1/2，冷却至25，加入18L30H2O2，搅拌，至浅黄色，加3三氯醋酸至不再产生混浊，加入离心机离心，直到离液面交界处无白色混悬，分出澄清液体，用超滤膜超滤，截留物加400ML水，加入400ML30乙醇沉淀，滤液再。
9、加600ML50乙醇，过滤，滤液加入1400ML90乙醇，放置沉淀，滤出沉淀，依次用200ML丙酮、150ML乙醇洗涤，真空干燥，即得山茱萸多糖118G，经HPLC检测，纯度为915。0021实施例20022取山茱萸果肉醇提总苷后的干燥残渣1KG，加入10L30温水超声提取1H，重复2次，合并提取液，提取液浓缩至原体积的1/2，冷却至25，加入25L30H2O2，搅拌，至浅黄色，加3三氯醋酸至不再产生混浊，加入离心机离心，直到离液面交界处无白色混悬，分出澄清液体，用超滤膜超滤，截留物加650ML水，加入650ML30乙醇沉淀，滤液再加940ML50乙醇，过滤，滤液加入2250ML90乙醇，放置。
10、沉淀，滤出沉淀，依次用丙酮、乙醇洗涤，真空干燥，即得山茱萸多糖129G，经HPLC检测，纯度为956。0023实施例30024取山茱萸果肉醇提总苷后的干燥残渣1KG，加入8L70温水超声提取15H，重复2次，合并提取液。提取液浓缩至原体积的1/2，冷却至25，加入38L30H2O2，搅拌，至浅黄色，加3三氯醋酸至不再产生混浊，加入离心机离心，直到离液面交界处无白色混悬，分出澄清液体，用超滤膜超滤，截留物加500ML水，加入500ML30乙醇沉淀，滤液再加750ML50乙醇，过滤，滤液加入1750ML90乙醇，放置沉淀，滤出沉淀，依次用丙酮、乙醇洗涤，真空干燥，即得山茱萸多糖138G，经HPLC。
11、检测，纯度为872。0025实施例40026取山茱萸果肉醇提总苷后的干燥残渣1KG，加入7L50温水超声提取1H，重复3次，合并提取液。提取液浓缩至原体积的1/2，冷却至25，加入7L30H2O2，搅拌，至浅黄色，加3三氯醋酸至不再产生混浊，加入离心机离心，直到离液面交界处无白色混悬，分出澄清液体，用超滤膜超滤，截留物加450ML水，加入450ML30乙醇沉淀，滤液再加说明书CN102002109ACN102002119A3/3页5680ML50乙醇，过滤，滤液加入1600ML90乙醇，放置沉淀，滤出沉淀，依次用丙酮、乙醇洗涤，真空干燥，即得山茱萸多糖104G，经HPLC检测，纯度为925。0027实施例50028取山茱萸果肉醇提总苷后的干燥残渣5KG，加入25L50温水超声提取2H，重复2次，合并提取液。提取液浓缩至原体积的2/5，冷却至25，加入8L30H2O2，搅拌，至浅黄色，加3三氯醋酸至不再产生混浊，加入离心机离心，直到离液面交界处无白色混悬，分出澄清液体，用超滤膜超滤，截留物加1200ML水，加入1200ML30乙醇沉淀，滤液再加1800ML50乙醇，过滤，滤液加入4200ML90乙醇，放置沉淀，滤出沉淀，依次用丙酮、乙醇洗涤，真空干燥，即得山茱萸多糖586G，经HPLC检测，纯度为891。说明书CN102002109A。