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1、10申请公布号CN104193668A43申请公布日20141210CN104193668A21申请号201410455120022申请日20140910C07D209/20200601A23K1/1620060171申请人新疆天富阳光生物科技有限公司地址832014新疆维吾尔自治区石河子市开发区95小区天富科技园申请人江苏赛奥生化有限公司72发明人杨卫东林永彬罗小芹李小波韩勤更74专利代理机构南通市永通专利事务所32100代理人葛雷54发明名称大孔树脂自发酵液中提取L色氨酸的方法57摘要本发明公开了一种大孔树脂自发酵液中提取L色氨酸的方法，包括发酵液预处理、树脂再生、上柱、解析、浓缩、结晶、。
2、分离、干燥等步骤。本发明方法简便，工作效果好；收率高。51INTCL权利要求书2页说明书3页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书2页说明书3页10申请公布号CN104193668ACN104193668A1/2页21一种大孔树脂自发酵液中提取L色氨酸的方法，其特征是包括下列步骤（一）发酵液预处理取L色氨酸发酵液加热、灭活，降温后加入浓硫酸调PH35，泵入过滤器过滤，得到L色氨酸膜滤液及菌体浓浆；（二）树脂再生（1）将湿树脂装入树脂柱中，通入50乙醇溶液；（2）通入5氢氧化钠溶液，通完后，用纯化水洗至PH8；（3）通入5盐酸溶液，通完后，用纯化水洗至PH35；（三）上柱、解。
3、析将步骤（1）得到的L色氨酸膜滤液上柱吸附；吸附结束后，加入纯化水洗柱，再加入温度为6070的热水解析，得到L色氨酸解析液；（四）浓缩、结晶、分离、干燥将L色氨酸解析液泵入薄膜蒸发器真空浓缩，温度4550；将浓缩液放入结晶罐中，搅拌，冷却降温至2025，保温结晶；结晶液离心，并用纯化水洗涤晶体，得湿L色氨酸，放入真空干燥箱干燥，得L色氨酸成品，离心还得到母液。2根据权利要求1所述的大孔树脂自发酵液中提取L色氨酸的方法，其特征是对步骤（四）得到的母液还进行母液回收母液和洗涤晶体后的洗水泵入按步骤（二）操作得到的再生树脂柱中，吸附结束后，加入纯化水洗柱，再加入温度为6070的热水解析，得到解析液；。
4、再按步骤（四）操作，解析液浓缩、结晶、分离、干燥，得成品；同时离心还得到二次母液。3根据权利要求1所述的大孔树脂自发酵液中提取L色氨酸的方法，其特征是树脂在连续使用510批后，按步骤（二）的步骤（2）、（3）操作进行树脂再生。4根据权利要求2所述的大孔树脂自发酵液中提取L色氨酸的方法，其特征是还进行菌体回收将步骤（一）发酵液经浓缩得到的菌体浓浆及母液回收离心得到的二次母液混合，用氨水调整PH57，采用单效浓缩器浓缩，并用喷雾干燥塔干燥，得到蛋白质含量75以上的菌体蛋白饲料。5根据权利要求1所述的大孔树脂自发酵液中提取L色氨酸的方法，其特征是包括下列步骤（一）发酵液预处理发酵培养终止后，取L色氨。
5、酸发酵液100L，发酵产酸率25G/L，含L色氨酸2500G；加热至80、保温30MIN，灭活，再降温至30；搅拌下加入浓硫酸1L调PH35，搅拌30分钟，泵入过滤面积1、孔径50NM的陶瓷膜过滤器过滤，控制温度3050，进膜压力与出膜压力差为025MPA，滤速1540L/H，当剩余料液25L时，连续加入纯化水顶洗，维持液位1025L继续过滤，直至浓液中L色氨酸含量低于08G/L以下时停止过滤，得到L色氨酸膜滤液150L，含量166G/L，L色氨酸发酵液膜滤收率为996过滤还得到菌体浓浆；（二）树脂再生（1）将80升型号为DM18大孔吸附树脂装入30CMX150CM的树脂柱中，通入50乙醇溶液。
6、，流速40L/H，当通入100L时，浸泡4H，再通入60L停止；（2）通入5氢氧化钠溶液200L，速度60L/H，通完后，用纯化水洗至PH8；（3）通入5盐酸溶液200升，速度60升/H，通完后，用纯化水洗至PH35待用；权利要求书CN104193668A2/2页3（三）上柱、解析将步骤（一）L色氨酸膜滤液150L正上柱吸附，流速为30L/H；吸附结束后，加入120升纯化水洗柱，流速30L/H；再加入温度为6070的热水解析，流速1015L/H，得到解析液260L，L色氨酸含量90G/L，收率9398；（四）浓缩、结晶、分离、干燥将L色氨酸解析液260L泵入薄膜蒸发器真空浓缩，温度4550，浓。
7、缩至体积为25L时，停止浓缩；将浓缩液放入结晶罐中，搅拌，缓慢冷却降温至2025，保温结晶4H；结晶液离心，并用5L温度1020的纯化水洗涤晶体，得湿L色氨酸2305G，放入真空干燥箱干燥，温度6065、真空度0085MPA，干燥6H，得L色氨酸成品1890G，含量985，浓缩结晶干燥收率为7955，发酵液一次收率为756，离心还得到母液；（五）母液回收离心得到的母液和洗水共28L，含量175G/L，含L色氨酸490G；泵入按第二步操作再生的D67树脂柱中，树脂装量16L，流速为16L/H；吸附结束后，加入25L纯化水洗柱，流速5L/H；再加入温度为6070的热水解析，流速23L/H，得到解析。
8、液55L，含量85G/L，树脂收率9541；再按步骤（四）操作，解析液浓缩、结晶、分离、干燥，得成品420G，含量985；浓缩结晶干燥收率为8849，L色氨酸母液回收总收率8442；同时离心还得到二次母液；（六）树脂连续使用树脂连续使用510批后，根据树脂吸附情况，按步骤（二）中（2）、（3）操作进行树脂再生；（七）菌体回收将第一步发酵液经陶瓷膜浓缩得到的菌体浓浆及步骤（五）母液回收离心得到的二次母液混合，用氨水调整PH57，采用单效浓缩器浓缩，温度6080，真空度为008MPA，浓缩至固形物含量为30左右的浓缩液，用喷雾干燥塔干燥，控制喷塔热空气进口温度160200，出口温度80100，得到。
9、蛋白质含量75以上的菌体蛋白饲料。权利要求书CN104193668A1/3页4大孔树脂自发酵液中提取L色氨酸的方法技术领域0001本发明涉及一种大孔树脂自发酵液中提取L色氨酸的方法。背景技术0002L色氨酸是人体和动物体生命活动中不可缺少的必须从外界摄取的氨基酸之一，对人和动物的生长发育、新陈代谢起着重要作用。L色氨酸广泛应用于医药、食品和饲料行业，近年来，随着国内外饲料工业、食品工业和医药工业的不断发展，L色氨酸已成为一种国际市场发展前景良好、中国市场需求极大的产品。L色氨酸是重要的氨基酸饲料添加剂，是继蛋氨酸、赖氨酸、苏氨酸之后的第四大饲料添加剂氨基酸。0003目前发酵法已是L色氨酸生产的。
10、首选技术，提取方法通常是发酵液酸化、陶瓷膜过滤、超滤、活性炭脱色，脱色液采用强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂吸附、氨水洗脱，洗脱液经浓缩、结晶、干燥，得到L色氨酸成品。该工艺生产流程长、设备投资大、废水多、收率低。本发明采用大孔树脂D67自发酵液中分离L色氨酸，树脂选择性好，不需超滤，活性炭脱色，可去除滤液中的无机盐、可溶性杂蛋白、色素等，产品质量好，收率高，生产成本低。洗脱时不使用氨水，工艺简洁，大幅度减少废水排放，节能环保，并可实现连续生产。L色氨酸提取总收率为9101，产品质量符合国家标准GB/T257352010，饲料添加剂L色氨酸。发明内容0004本发明的目的在于提供一种方便、效果好的大。
11、孔树脂自发酵液中提取L色氨酸的方法。0005本发明的技术解决方案是一种大孔树脂自发酵液中提取L色氨酸的方法，其特征是包括下列步骤（一）发酵液预处理取L色氨酸发酵液加热、灭活，降温后加入浓硫酸调PH35，泵入过滤器过滤，得到L色氨酸膜滤液及菌体浓浆；（二）树脂再生（1）将湿树脂装入树脂柱中，通入50乙醇溶液；（2）通入5氢氧化钠溶液，通完后，用纯化水洗至PH8；（3）通入5盐酸溶液，通完后，用纯化水洗至PH35；（三）上柱、解析将步骤（1）得到的L色氨酸膜滤液上柱吸附；吸附结束后，加入纯化水洗柱，再加入温度为6070的热水解析，得到L色氨酸解析液；（四）浓缩、结晶、分离、干燥将L色氨酸解析液泵入。
12、薄膜蒸发器真空浓缩，温度4550；将浓缩液放入结晶罐中，搅拌，冷却降温至2025，保温结晶；结晶液离心，并用纯化水洗涤晶体，得湿L色氨酸，放入真空干燥箱干燥，得L色氨酸成品，离心还得到母液。说明书CN104193668A2/3页50006对步骤（四）得到的母液还进行母液回收母液和洗涤晶体后的洗水泵入按步骤（二）操作得到的再生树脂柱中，吸附结束后，加入纯化水洗柱，再加入温度为6070的热水解析，得到解析液；再按步骤（四）操作，解析液浓缩、结晶、分离、干燥，得成品；同时离心还得到二次母液。0007树脂在连续使用510批后，按步骤（二）的步骤（2）、（3）操作进行树脂再生。0008还进行菌体回收将步。
13、骤（一）发酵液经浓缩得到的菌体浓浆及母液回收离心得到的二次母液混合，用氨水调整PH57，采用单效浓缩器浓缩，并用喷雾干燥塔干燥，得到蛋白质含量75以上的菌体蛋白饲料。0009本发明方法简便，工作效果好；收率高。0010下面结合实施例对本发明作进一步说明。具体实施方式0011大孔树脂自发酵液中提取L色氨酸的方法，其特征是包括下列步骤（一）发酵液预处理发酵培养终止后，取L色氨酸发酵液100L，发酵产酸率25G/L，含L色氨酸2500G；加热至80、保温30MIN，灭活，再降温至30；搅拌下加入浓硫酸1L调PH35，搅拌30分钟，泵入过滤面积1、孔径50NM的陶瓷膜过滤器过滤，控制温度3050，进膜。
14、压力与出膜压力差为025MPA，滤速1540L/H，当剩余料液25L时，连续加入纯化水顶洗，维持液位1025L继续过滤，直至浓液中L色氨酸含量低于08G/L以下时停止过滤，得到L色氨酸膜滤液150L，含量166G/L，L色氨酸发酵液膜滤收率为996过滤还得到菌体浓浆；（二）树脂再生（1）将80升型号为DM18大孔吸附树脂装入30CMX150CM的树脂柱中，通入50乙醇溶液，流速40L/H，当通入100L时，浸泡4H，再通入60L停止；（2）通入5氢氧化钠溶液200L，速度60L/H，通完后，用纯化水洗至PH8；（3）通入5盐酸溶液200升，速度60升/H，通完后，用纯化水洗至PH35待用；（三。
15、）上柱、解析将步骤（一）L色氨酸膜滤液150L正上柱吸附，流速为30L/H；吸附结束后，加入120升纯化水洗柱，流速30L/H；再加入温度为6070的热水解析，流速1015L/H，得到解析液260L，L色氨酸含量90G/L，收率9398；（四）浓缩、结晶、分离、干燥将L色氨酸解析液260L泵入薄膜蒸发器真空浓缩，温度4550，浓缩至体积为25L时，停止浓缩；将浓缩液放入结晶罐中，搅拌，缓慢冷却降温至2025，保温结晶4H；结晶液离心，并用5L温度1020的纯化水洗涤晶体，得湿L色氨酸2305G，放入真空干燥箱干燥，温度6065、真空度0085MPA，干燥6H，得L色氨酸成品1890G，含量98。
16、5，浓缩结晶干燥收率为7955，发酵液一次收率为756，离心还得到母液；（五）母液回收离心得到的母液和洗水共28L，含量175G/L，含L色氨酸490G；泵入按第二步操作再生的D67树脂柱中，树脂装量16L，流速为16L/H；吸附结束后，加入25L纯化水洗柱，流速5L/H；再加入温度为6070的热水解析，流速23L/H，得到解析液55L，含量85G/说明书CN104193668A3/3页6L，树脂收率9541；再按步骤（四）操作，解析液浓缩、结晶、分离、干燥，得成品420G，含量985；浓缩结晶干燥收率为8849，L色氨酸母液回收总收率8442；同时离心还得到二次母液；发酵液一次L色氨酸提取及母液回收合计总收率为9101，产品质量符合国家标准GB/T257352010，饲料添加剂L色氨酸。0012（六）树脂连续使用树脂连续使用510批后，根据树脂吸附情况，按步骤（二）中（2）、（3）操作进行树脂再生；（七）菌体回收将第一步发酵液经陶瓷膜浓缩得到的菌体浓浆及步骤（五）母液回收离心得到的二次母液混合，用氨水调整PH57，采用单效浓缩器浓缩，温度6080，真空度为008MPA，浓缩至固形物含量为30左右的浓缩液，用喷雾干燥塔干燥，控制喷塔热空气进口温度160200，出口温度80100，得到蛋白质含量75以上的菌体蛋白饲料。说明书CN104193668A。