技术领域
本发明属于药物制剂领域，更具体地说，涉及一种以丹参酮ⅡA磺酸钠为原料药制 备的冻干粉针注射剂，本发明还涉及该冻干粉针注射剂的制备方法。
背景技术
丹参酮ⅡA磺酸钠是从丹参中提取的丹参酮ⅡA经过磺化而得，药物的水溶性增 强，疗效增强，其结构式如下所示：
丹参酮ⅡA磺酸钠能增加冠脉流量，改善缺血区心肌的侧支循环及局部供血，改善 缺氧心肌梗的代谢紊乱，提高心肌耐缺氧能力，抑制血小板聚集及抗血栓的形成，缩小缺血 心肌梗死面积，在一定剂量下亦能增强心肌收缩力。在临床上主要用于冠心病、心绞痛、心 肌梗死的辅助治疗，此外，还可以治疗胸闷及心肌梗死，对室性早搏也可以使用。
目前，市场上有丹参酮ⅡA磺酸钠注射液小针剂销售，由上海第一生化药业有限公 司生产，商品名“诺新康”，规格为每2mL含主药丹参酮ⅡA磺酸钠10mg，使用量为40～80mg/ 次，每次使用开4～8支安瓿瓶，使用繁琐，增加了药瓶被污染的机会，影响药品的安全性。上 市品的国家药品标准为：WS-10001-(HD-1014)-2002，但该品见光遇热不稳定，长时间放置， 遇光或高温灭菌，颜色加深，易发生氧化、聚合、分解以及脱磺酸基等反应，使其含量下降、 杂质增加，使药物的有效性降低。该品长时间放置容易因脱磺酸基团而分解成脂溶性丹参 酮ⅡA，从而使溶液变浑浊；同时由于丹参酮ⅡA磺酸钠的溶解度小，在低温放置容易析出， 使溶液变浑浊。含有不溶性颗粒的水针是临床用药的一个重大安全隐患。
由于丹参酮ⅡA磺酸钠本身结构决定其具有表面活性剂的性质，使其本身晶体性 状类似胶体有溶胀行为，在搅拌溶解时容易产生大量固体粉末与气泡，导致溶解缓慢，延长 溶解时间，增加药物被感染的危险，不利于工业化生产。
专利文献CN200610086184公开了一种丹参酮ⅡA磺酸钠注射剂及其制备方法。该 方法选用羟丙基β-环糊精作为增溶剂，可以解决溶解问题，但是目前对羟丙基-β-环糊精及 其包合物在体内的安全性了解尚不深入，无法准确预测其在体内的分布规律。有资料显示， 该辅料有一定的肾毒性和溶血性，也有致癌性，而且可能存在未知的更严重的毒副作用。而 且迄今为止，国内没有注射级羟丙基-β-环糊精的批准文号。
专利文献CN201210515081公开了一种采用助溶消泡剂制备丹参酮ⅡA磺酸钠制剂 的方法。该方法以乙醇和叔丁醇作为助溶消泡剂，加水溶解丹参酮ⅡA磺酸钠后冻干。虽然 解决了溶解问题，但是由于丹参酮ⅡA磺酸钠在醇类溶剂中溶解度小，使得中间体溶液中丹 参酮ⅡA磺酸钠的浓度仅为4mg/mL，制备相同单位剂量的产品时，加大了灌装时的体积，溶 液高度增加，这就需要大量延长冻干时间，提高了生产成本。在生产过程中用到了有机溶 剂，生产过程中不仅要采用防爆措施，还要对产品中的有机溶剂进行去除，极大增加了生产 过程中的不安全性。
本发明人的大量稳定性研究工作表明，市售样品稳定性很差，现有的专利文献中 的技术也不能解决产品稳定性差问题。因此，市场对于单位剂量设计合理，稳定性好的丹参 酮ⅡA磺酸钠制剂以及适合商业化、安全的制备方法仍有需求。
发明内容
针对现有技术中丹参酮ⅡA磺酸钠制剂的不足，本发明的目的在于提供一种新的 丹参酮ⅡA磺酸钠冻干粉针制剂及其制备方法。
本发明提供的丹参酮ⅡA磺酸钠冻干粉针制剂，其包含以下组分：
丹参酮ⅡA磺酸钠1重量份
骨架支撑剂4～30重量份
pH调节剂0.015～0.1重量份
其中，所述pH调节剂为硫酸或者硫酸盐中的一种或多种。所述pH调节剂可以兼作 稳定剂。
优选地，所述骨架支撑剂可以为葡萄糖、甘露醇、右旋糖苷、蔗糖、山梨糖醇或者乳 糖中的一种或多种。所述骨架支撑剂可以兼作稳定剂。
更优选地，所述硫酸盐为硫酸钠或者硫酸钾。
优选地，所述制剂中的冻干粉的pH值为3.5～5.5。优选地，所述丹参酮ⅡA磺酸钠 冻干粉针制剂，其包含以下组分：
丹参酮ⅡA磺酸钠1重量份
骨架支撑剂4～20重量份
pH调节剂0.02～0.1重量份
在一个实施方案中，本发明的丹参酮ⅡA磺酸钠冻干粉针制剂中含有单位剂量的 丹参酮ⅡA磺酸钠5～100mg，优选10～80mg，并且在容器中以单位剂量形式提供。
丹参酮ⅡA磺酸钠作为活性药物，单独冻干后不能形成坚实的骨架，震荡易碎，影 响其复溶。本发明丹参酮ⅡA磺酸钠冻干粉针制剂的配方中的骨架支撑剂葡萄糖、甘露醇、 右旋糖苷、蔗糖、山梨醇、乳糖，是对现有的骨架支撑剂进行大量筛选得到的。当使用这些特 定的骨架支撑剂并以上述比例使用时，丹参酮ⅡA磺酸钠与这些骨架支撑剂的组合可以保 证产品骨架疏松、细腻，振摇不易碎，稳定性亦有所改善；加入溶剂后能迅速溶解，但是pH值 会上升1～2个单位。故在配方中加入硫酸或者硫酸盐作为pH调节剂，并且对硫酸或者硫酸 盐的使用比例进行筛选，其在冻干过程中不挥发，丹参酮ⅡA磺酸钠与pH调节剂之间的比例 能确保复溶后pH值在3.5～5.5之间，同时大大提高了药物稳定性。
此外，本发明提供一种上述丹参酮ⅡA磺酸钠冻干粉针制剂的制备方法，其包括以 下步骤：
(1)将所述丹参酮ⅡA磺酸钠和骨架支撑剂混合，缓慢加入到近处方量的注射用水 中，搅拌溶解；
(2)加入pH调节剂，搅拌，使得溶液的pH值为3.5～5.5；
(3)加入注射用水至全量后，灌装到容器中；
(4)将上述容器放入冻干机中进行冷冻干燥，即得本发明丹参酮ⅡA磺酸钠冻干粉 针制剂。
优选地，所述冷冻干燥的冻干曲线为：
预冻阶段：将样品温度降低至共晶点以下5℃～20℃，保持1～5小时；
预冻转升华阶段：开启冷凝器，当冷凝器温度降至-40℃以下时，开启真空泵抽真 空；预抽真空低于30Pa；
升华阶段：在0.5～4小时内将隔板升温至-30℃～5℃，至升华完全，并继续保温1 ～4小时；
解析阶段：在0.5～4小时内将隔板升温至25℃～35℃，至样品温度升至25℃以上， 保持1～5小时。
优选地，步骤(1)中，加入所述丹参酮ⅡA磺酸钠和骨架支撑剂时，所述注射用水被 搅拌呈旋涡状。
优选地，步骤(1)中，所述注射用水的温度为25～35℃，更优选为30℃。
优选地，步骤(1)中，所述近处方量为处方量的约95％。
优选地，步骤(3)中，在灌装到容器之前，将溶液用微孔滤膜过滤；所述微孔滤膜的 孔径为0.22μm。
本发明丹参酮ⅡA磺酸钠冻干粉针制剂的共晶点为-5～-28℃。
优选地，所述骨架支撑剂可以为葡萄糖、甘露醇、右旋糖苷、蔗糖、山梨糖醇或者乳 糖中的一种或多种。
优选地，所述pH调节剂为硫酸或者硫酸盐中的一种或多种。
更优选地，所述硫酸盐为硫酸钠或者硫酸钾。
在一个具体实施方案中，所述加入pH调节剂可以是通过先后或者同时加入硫酸和 碱的水溶液(例如氢氧化钠水溶液或氢氧化钾水溶液)。
制剂稳定性一直是本领域研究的难点和重点，提高制剂稳定性也是本发明的关 键。本发明在处方中加入pH调节剂，不仅可以使制剂的pH稳定在合适范围，同时显著的提高 了制剂稳定性。
与现有技术相比，本发明丹参酮ⅡA磺酸钠冻干粉针制剂具有如下优势：
1、本发明所述制备方法中，在配液前将丹参酮ⅡA磺酸钠和骨架支撑剂预混合是 本发明的重大改进。将丹参酮ⅡA磺酸钠和骨架支撑剂预混合，使得丹参酮ⅡA磺酸钠颗粒 表面附着一层骨架支撑剂，避免溶解时形成大的胶状物质，可以显著的减少固体粉末和气 泡混合物，提高其溶解速度，溶解时间相较于单独溶解丹参酮ⅡA磺酸钠缩短2/3以上，有效 的缩短配液时间，与专利文献CN201210515081中提及的采用助溶消泡剂配液时间基本一 致。本发明通过改变配液工艺，在不加入有机溶剂、不适用存在安全隐患的辅料的情况下即 达到了较好的效果。
2、本发明针对药物在溶液状态不稳定，溶解度小的特点，采用冷冻干燥技术制备 注射剂，提高了药物的稳定性，临床使用时，加入溶剂能够迅速溶解、澄清。
3、通过改变配液工艺，有效缩短了配液时间。
4、本发明针对现有产品主药单位剂量设计不合理，开发了10～80mg不同单位剂量 规格，临床使用更加安全、便捷。
具体实施方式
通过下面给出的具体实施例，可以进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发 明。
本发明的技术方案是通过下面的一系列实验逐步实现的。
首先，考察市售样品水针剂稳定性，结果见表1。
表1：市售样品(40℃/RH75％)稳定性
时间(月) 含量(％) 有关物质(％) 0 94.1 10.59 1 79.1 19.63 3 64.4 29.64 6 39.3 43.12
注：市售样品批号为140218；规格为2mL:10mg；上海第一生化药业有限公司生产， 出厂4个月后进行上述实验。
在不添加辅料的前提下，将丹参酮ⅡA磺酸钠冻干，冻干过程中易坍塌，产品震荡 易碎，稳定性差。40℃/RH75％下稳定性结果见表2。
表2：不添加辅料冻干品稳定性
时间(月) 含量(％) 有关物质(％) 0 98.4 0.94 1 89.0 6.48
专利文献CN200310125178和CN200410024042公开的处方中只添加了骨架支撑剂。 本发明人经过研究发现：按照上述方法制备的冻干品的稳定性较不使用骨架支撑剂的对照 组在外观和稳定性方面均有提高，但依旧较差，安全性低。在40℃/RH75％下稳定性结果见 表3、表4。
表3：加入骨架支撑剂(甘露醇)冻干品稳定性
时间(月) 含量(％) 有关物质(％) 0 98.7 0.78 1 95.5 3.05
表4：加入骨架支撑剂(右旋糖苷)冻干品稳定性
时间(月) 含量(％) 有关物质(％) 4 --> 0 99.2 0.83 1 94.8 3.77
专利文献CN200510064376、CN200310121026和CN200310111509公开的处方中均添 加了抗氧化剂。丹参酮ⅡA磺酸钠具有氧化性和还原性，抗氧剂的加入不仅不能提高药物的 稳定性，极有可能起到相反的作用。专利文献CN200610032653中就提出丹参酮ⅡA磺酸钠与 常用抗氧剂的相容性较差。本发明人对常用抗氧剂进行了研究，处方见表5。
表5：抗氧剂筛选处方
各处方考察结果见表6。
表6：抗氧剂筛选结果
由上述结果可见，用亚硫酸氢钠作抗氧剂无法得到澄清的溶液；使用半胱氨酸作 抗氧剂，溶液颜色加深，易析出固体；使用抗坏血酸作抗氧剂，溶液颜色明显加深，杂质增加 迅速；使用乙二胺四乙酸二钠作为抗氧剂不会改变溶液的性状。
将上述处方6的溶液冻干，40℃/RH75％下稳定性见表7。
表7：处方6冻干品稳定性
时间(月) 含量(％) 有关物质(％) 0 99.4 0.83 1 95.3 3.16
结果表明：乙二胺四乙酸二钠不能有效的提高冻干制剂稳定性。
在本发明过程中，本发明人发现冻干品复溶后其pH相对于中间品溶液有升高现 象，本发明人通过加入硫酸或硫酸盐来调节pH，不仅解决了产品pH值上升问题，还带来了额 外的效果——有效的提高了制剂稳定性。pH调节剂的筛选过程见表8。
表8：pH调节剂的筛选
*用硫酸盐，如硫酸钠、硫酸钾亦可达到同样效果。
结果表明：硫酸的加入量是丹参酮ⅡA磺酸钠用量的1.5％以上时，可以避免冻干 产品pH值的升高。上述处方11和12在40℃/RH75％下稳定性见表9，处方11在30℃下稳定性 见表10。
表9：处方11和处方12(40℃/RH75％)冻干品稳定性
表10：处方11(30℃)冻干品稳定性
时间(月) 含量(％) 有关物质(％) 6 --> 0 100.5 0.32 1 99.8 0.60 2 99.2 0.88 3 98.6 1.13 6 96.7 1.90
实施例1：
处方：规格(10mg/瓶，1000瓶)
丹参酮ⅡA磺酸钠 10g 甘露醇 60g 硫酸 0.2g 注射用水 加至2000mL
制备方法：
配液：取1900mL注射用水，将丹参酮ⅡA磺酸钠和甘露醇混合后加入到上述搅拌呈 旋涡状的温度为25℃的注射用水中，搅拌使之溶解；加入处方量的硫酸，搅拌均匀，调节pH 为3.5～4.5；加注射用水至全量；用0.22μm微孔滤膜过滤；
冻干：灌装于7mL西林瓶中，每瓶2mL，半压塞，放入冻干机中，按设计的冻干曲线冷 冻干燥；冻干结束后，压紧瓶塞、放气，取出样品，轧盖、包装，即得丹参酮ⅡA磺酸钠冻干粉。
设计的冻干曲线如下：
预冻阶段：板层全速降温，待制品温度达到约-30℃，继续维持1小时，使样品完全 冻结；
预冻转升华：开启冷凝器，当冷凝器温度降至-40℃以下时，开启真空泵抽真空；预 抽真空低于30Pa，开始升华；
升华阶段：隔板以20℃/3小时的速度升温至-10℃，维持-10℃，至水迹线消失，继 续维持2h；
解析干燥：隔板以40℃/3小时的速度升温至30℃，维持至30℃，当制品温度到达25 ℃，做压力升试验，当△P＜1pa/min达到干燥终点。
上述丹参酮ⅡA磺酸钠冻干粉复溶后pH值在3.5～4.5之间。
实施例2：
处方：规格(40mg/瓶，1000瓶)
丹参酮ⅡA磺酸钠 10g 甘露醇 100g 硫酸 0.5g 注射用水 加至2000mL
制备方法：
配液：同实施例1；
冻干：灌装于20mL西林瓶中，每瓶8mL，半压塞，放入冻干机中，按设计的冻干曲线 冷冻干燥；冻干结束后，压紧瓶塞、放气，取出样品，轧盖、包装，即得丹参酮ⅡA磺酸钠冻干 粉。
设计的冻干曲线如下：
预冻阶段：板层全速降温，待制品温度达到约-30℃，继续维持2小时，使样品完全 冻结；
预冻转升华：开启冷凝器，当冷凝器温度降至-40℃以下时，开启真空泵抽真空；预 抽真空低于30Pa，开始升华；
升华阶段：隔板以30℃/3小时的速度升温至0℃，维持0℃，至水迹线消失，继续维 持2h；
解析干燥：隔板以30℃/3小时的速度升温至30℃，维持至30℃，当制品温度到达25 ℃，做压力升试验，当△P＜1pa/min达到干燥终点。
上述丹参酮ⅡA磺酸钠冻干粉复溶后pH值在3.5～4.5之间。
实施例3：
处方：规格(60mg/瓶，1000瓶)
丹参酮ⅡA磺酸钠 10g 葡萄糖 200g 硫酸钠 0.5g 注射用水 加至2000mL
制备方法：
配液：同实施例1；
冻干：灌装于30mL西林瓶中，每瓶12mL，半压塞，放入冻干机中，按设计的冻干曲线 冷冻干燥；冻干结束后，压紧瓶塞、放气，取出样品，轧盖、包装，即得丹参酮ⅡA磺酸钠冻干 粉。
设计的冻干曲线如下：
预冻阶段：板层全速降温，待制品温度达到约-40℃，继续维持3小时，使样品完全 冻结；
预冻转升华阶段：开启冷凝器，当冷凝器温度降至-40℃以下时，开启真空泵抽真 空；预抽真空低于30Pa，开始升华；
升华阶段：隔板以10℃/2小时的速度升温至-30℃，维持-30℃，至水迹线消失，继 续维持2h；
解析干燥：隔板以60℃/3小时的速度升温至30℃，维持至30℃，当制品温度到达25 ℃，做压力升试验，当△P＜1pa/min达到干燥终点。
上述丹参酮ⅡA磺酸钠冻干粉复溶后pH值在3.5～4.5之间。
实施例4：
处方：规格(80mg/瓶，1000瓶)
丹参酮ⅡA磺酸钠 10g 右旋糖苷40 40g 硫酸钾 1g 8 --> 注射用水 加至2000mL
制备方法；
配液：同实施例1；
冻干：灌装于40mL西林瓶中，每瓶16mL，半压塞，放入冻干机中，按设计的冻干曲线 冷冻干燥；冻干结束后，压紧瓶塞、放气，取出样品，轧盖、包装，即得丹参酮ⅡA磺酸钠冻干 粉。
设计的冻干曲线如下：
预冻阶段：板层全速降温，待制品温度达到约-30℃，继续维持5小时，使样品完全 冻结；
预冻转升华阶段：开启冷凝器，当冷凝器温度降至-40℃以下时，开启真空泵抽真 空；预抽真空低于30Pa，开始升华；
升华阶段：隔板以30℃/3小时的速度升温至5℃，维持5℃，至水迹线消失，继续维 持2h；
解析干燥：隔板以25℃/3小时的速度升温至30℃，维持至30℃，当制品温度到达25 ℃，做压力升试验，当△P＜1pa/min达到干燥终点。
上述丹参酮ⅡA磺酸钠冻干粉复溶后pH值在3.5～4.5之间。