相关申请的交叉引用
[001]本申请是2003年5月29日提交的USSN 10/447,992的部 分继续申请，其内容通过引用全文结合到本文中。
发明领域
[002]本发明涉及稳定的微包囊的/包衣的(-)-羟基柠檬酸组合物 及其制备方法。
发明背景
[003](-)-羟基柠檬酸(HCA)是天然形成的酸，它存在于部分藤黄 属(genus Garcinia)植物的果实中。HCA可影响哺乳动物包括人的代 谢功能。HCA和几种合成的柠檬酸衍生物，可抑制碳水化合物生成 脂肪酸，抑制食欲，及抑制体重的增加(Sullivan等，American Journal of Clinical Nutrition.1977，30：767)。还有众多的其它益处已归因于 HCA的使用，包括，但不限于，增加用于能量的脂肪贮备的代谢并 增加生热作用(以其它浪费的循环代谢能量来源以产生身体热量)。
[004]游离HCA、HCA的钙、镁和钾盐(即，羟基柠檬酸盐，也 称为HCA)和性质不佳的两种或多种这些矿物质的混合物在美国市场 有售。早在1994年已有HCA钙盐和HCA钠盐出售。目前出售的大 部分的HCA商业制品由不同纯度的钙盐组成，或者更近期地，由性 质不佳的HCA钙盐和HCA钾盐混合物组成。
[005]然而，其在酸性pH下低吸收和化学不稳定性，例如经暴 露于哺乳动物肠道的酸性环境中的内酯化作用，HCA盐失活，限制 HCA盐的治疗用途。HCA无论是为其优选的HCA钾盐形式，还是 次优选的HCA钠盐形式，都是极其吸湿的。同样地，呈更多生物活 性形式的HCA只能在控制的条件下保持粉末状。
[006]HCA盐的现有处理方法未能调节其在酸中的不稳定性和吸 湿性。无特别预防措施、呈游离酸形式和其钾盐和钠盐形式的HCA 会结合大量的其它化合物。HCA与其它化合物的结合会影响患者对 其的生物利用率，例如，结果患者较少吸收HCA。
[007]配制优选的HCA盐(即，HCA钾和HCA钠)的现有方法 已经受到限制，因为它们不能产生完全稳定和可使用的HCA制剂， 例如在饮料或制备好的零食或控释溶媒中的胶囊、片剂、粉末剂。 因此，需要适于包含于干传递形式、液体传递形式和控释溶媒中的 含HCA化合物。
发明简述
[008]本发明提供用于制片、微包囊化、制备控释溶媒和掺入干 燥粉末中的稳定的、不吸湿的含HCA化合物(例如，HCA钾)。本发 明的一个实施方案中，含HCA化合物被配制成干燥传递系统。所述 干燥传递系统包括，例如，片剂；干燥粉末；干膳食替代混合物。 在本发明的另一个实施方案中，所述含HCA化合物被配制成液体传 递系统。所述液体传递系统包括(例如，胶囊)；胶囊形片剂和饮料。 在本发明的另一个实施方案中，含HCA化合物被配制成控释系统。 所述控释系统包括，例如，片剂；胶囊形片剂和胶囊。
[009]在本发明的实施方案中，本发明的含HCA化合物包括 HCA、一种或多种吸收增强剂/控制释放剂和一种或多种控制速度的 赋形剂。所述HCA可包括，例如，HCA游离酸；HCA盐；HCA衍 生物；或它们的任何组合。在本发明的一个实施方案中，HCA的量 为含HCA化合物的总重量的约1.0％-约80％。在本发明的一个实施 方案中，HCA的量为含HCA化合物的总重量的约5％-约70％。在 本发明的一个实施方案中，HCA的量为含HCA化合物的总重量的 约10％-约60％。
[0010]所述吸收增强剂/控制释放剂可包括，例如，d-α-生育酚 聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)；Lubritab；火山油(volcanic oils)；高粘 度等级的共轭聚乙二醇；乙基纤维素、羧甲基纤维素、丙酸纤维素； 乙酸-丙酸纤维素；乙酸-丁酸纤维素；醋酸-邻苯二甲酸纤维素(CAP)； 三乙酸纤维素；邻苯二甲酸羟丙基-甲基纤维素；聚甲基丙烯酸甲酯； 聚甲基丙烯酸乙酯；聚甲基丙烯酸丁酯；聚甲基丙烯酸异丁基酯； 聚甲基丙烯酸己基酯；聚甲基丙烯酸异癸基酯；聚甲基丙烯酸月桂 基酯；聚甲基丙烯酸苯基酯；聚丙烯酸甲酯；聚丙烯酸异丙基酯； 聚丙烯酸异丁基酯；聚丙烯酸十八烷基酯；聚乙烯；低密度聚乙烯； 高密度聚乙烯；聚丙烯；聚环氧乙烷；聚对苯二酸乙二酯；聚乙烯 基异丁基醚；聚乙酸乙烯基酯；聚醋酸邻苯二甲酸乙烯基酯；聚氯 乙烯；聚氨酯；丙烯酸和甲基丙烯酸和酯的其它共聚物；蜡；虫胶； 玉米胶蛋白；氢化植物油；聚乙烯醇；聚乙烯吡咯烷酮；甲基纤维 素；羟丙基纤维素；羟丙基甲基纤维素或聚乙二醇；或它们的混合 物。在本发明的一个实施方案中，所述的一种或多种吸收增强剂/控 制释放剂含量为含HCA化合物的总重量的约1.0％-约50％。在本发 明的一个实施方案中，所述的一种或多种吸收增强剂/控制释放剂含 量为含HCA化合物的总重量的约1.0％-约40％。在本发明的一个实 施方案中，所述的一种或多种吸收增强剂/控制释放剂含量为含HCA 化合物的总重量的约1.0％-约30％。
[0011]所述的速度控制赋形剂可包括，例如，Eastacryl； KollicoatIR(聚乙烯醇-聚乙二醇接枝共聚物)；醋酸-邻苯二甲酸纤 维素；KollicoatSR；乙基纤维素；Eudragit(基于丙烯酸酯和甲基 丙烯酸酯类的包衣)；玉米胶蛋白(植物蛋白)；丙烯酸聚合物；聚醋 酸邻苯二甲酸乙烯基酯；邻苯二甲酸羟甲基丙基甲基纤维素；乙酸- 1，2，4-苯三酸纤维素(cenulose acetate trimalleate)；丙烯酸聚合物增塑 剂；聚乳酸聚合物；乙醇酸聚合物及其混合物；Primogel；PruvTM(硬 脂酰基富马酸钠)；柠檬酸酯；柠檬酸三乙基酯；丙二醇；和癸二酸 二丁基酯。在本发明的一个实施方案中，所述的一种或多种速度控 制赋形剂的含量为含HCA化合物总重量的约0.0001％-约60％。在本 发明的一个实施方案中，所述的一种或多种速度控制赋形剂的含量 为含HCA化合物总重量的约0.001％-约50％。在本发明的一个实施 方案中，所述的一种或多种速度控制赋形剂的含量为含HCA化合物 总重量的约0.01％-约25％。
[0012]在本发明的一个实施方案中，含HCA化合物的氯化物的 浓度低于含HCA化合物的总重量的约2.5％。在本发明的一个实施方 案中，含HCA化合物的氯化物的浓度低于含HCA化合物的总重量 的约1.0％。在本发明的一个实施方案中，含HCA化合物的氯化物 浓度低于含HCA化合物的总重量约0.5％。在本发明的一个实施方案 中，作为含HCA化合物的氯化物的总卤素含量低于含HCA化合物 的总重量的约2.9％。在本发明的一个实施方案中，作为含HCA化合 物的氯化物的总卤素含量低于含HCA化合物的总重量的约1.0％。在 本发明的一个实施方案中，作为含HCA化合物的氯化物的总卤素含 量低于含HCA化合物的总重量的约0.6％。
[0013]在本发明的一个方面，含HCA化合物包括HCA、一种 或多种吸收增强剂/控制释放剂、一种或多种速度控制赋形剂和一种 或多种润滑剂。所述润滑剂包括，例如硬脂酸镁；硬脂酸钙；硬脂 酸钠、甘油单硬脂酸酯；硬脂酸；Lubritab；氢化植物油；蜡；滑 石粉；硼酸；苯甲酸钠；乙酸钠；氯化钠；DL-亮氨酸；油酸钠；十 二烷基硫酸钠；十二烷基硫酸镁和聚乙二醇和白陶土。在本发明的 一个实施方案中，所述的一种或多种润滑剂的含量为含HCA化合物 的总重量的约0.0001％-约10％。在本发明的一个实施方案中，所述 的一种或多种润滑剂的含量为含HCA化合物的总重量的约0.001％- 约10％。在本发明的一个实施方案中，所述的一种或多种润滑剂的 含量为含HCA化合物的总重量的约0.01％-约5％。
[0014]在本发明的一个方面，含HCA化合物包括HCA、一种 或多种吸收增强剂/控制释放剂、一种或多种速度控制赋形剂和一种 或多种膨胀剂/粘合剂。所述膨胀剂/粘合剂包括，例如，淀粉糊；阿 拉伯胶；蔗糖；聚乙烯吡咯烷酮(PVP)；羟丙基甲基纤维素(HPMC)； 甲基纤维素；明胶；马铃薯淀粉；微晶纤维素(MCC)；预胶化淀粉 (PGS)；Primogel(羟基乙酸淀粉钠，USP/NF，Ph.Eur.)；Primellose(交 联羧甲基纤维素钠，USP/NF，ph.Eur.)；磷酸二钙和磷酸三钙。在 本发明的一个实施方案中，所述的一种或多种膨胀剂/粘合剂的含量 为含HCA化合物的总重量的约0.01％-约30％。在本发明的一个实施 方案中，所述的一种或多种膨胀剂/粘合剂的含量为含HCA化合物的 总重量的约0.1％-约30％。在本发明的一个实施方案中，所述的一种 或多种膨胀剂/粘合剂的含量为含HCA化合物的总重量的约0.1％-约 25％。
[0015]在本发明的一个方面，含HCA化合物包括HCA、一种 或多种吸收增强剂/控制释放剂、一种或多种速度控制赋形剂、一种 或多种润滑剂和一种或多种膨胀剂/粘合剂。
[0016]在本发明的一个方面，含HCA化合物包括HCA和一种 或多种速度控制赋形剂。在本发明的一个实施方案中，所述HCA含 量为含HCA化合物的总重量的约1.0％-约80％。在本发明的一个实 施方案中，所述HCA含量为含HCA化合物的总重量的约5％-约 70％。在本发明的一个实施方案中，所述HCA含量为含HCA化合 物的总重量的约10％-约60％。在本发明的一个实施方案中，所述一 种或多种速度控制赋形剂的含量为含HCA化合物的总重量的约 0.0001％-约60％。在本发明的一个实施方案中，所述一种或多种速 度控制赋形剂的含量为含HCA化合物的总重量的约0.001％-约50％。 在本发明的一个实施方案中，所述一种或多种速度控制赋形剂的含 量为含(-)-羟基柠檬酸化合物的总重量的约0.01％-约25％。
[0017]在本发明的一个方面，含HCA化合物包括HCA和一种 或多种润滑剂。在本发明的一个实施方案中，所述HCA的含量为含 HCA化合物的总重量的约50％-约99％。在本发明的一个实施方案 中，所述HCA的含量为含HCA化合物的总重量的约50％-约96％。 在本发明的一个实施方案中，所述一种或多种润滑剂的含量为含HCA 化合物的总重量的约0.0001％-约50％。在本发明的一个实施方案中， 所述一种或多种润滑剂的含量为含HCA化合物的总重量的约0.001％- 约50％。在本发明的一个实施方案中，所述一种或多种润滑剂的含 量为含HCA化合物的总重量的约0.01％-约50％。
[0018]在本发明的一个方面，含HCA化合物包括HCA、一种 或多种吸收增强剂/控制释放剂和一种或多种润滑剂。在本发明的一 个实施方案中，所述HCA的含量为含HCA化合物的总重量的约1.0％- 约80％。在本发明的一个实施方案中，所述HCA的含量为含HCA 化合物的总重量的约5％-约70％。在本发明的一个实施方案中，所 述HCA的含量为含HCA化合物的总重量的约10％-约60％。在本 发明的一个实施方案中，所述一种或多种吸收增强剂/控制释放剂的 含量为含HCA化合物的总重量的约1.0％-约50％。在本发明的一个 实施方案中，所述一种或多种吸收增强剂/控制释放剂的含量为含 HCA化合物的总重量的1.0％-约40％。在本发明的一个实施方案中， 所述一种或多种吸收增强剂/控制释放剂含量为含HCA化合物的总重 量的约1.0％-约30％。在本发明的一个实施方案中，所述一种或多种 润滑剂的含量为含HCA化合物的总重量的约0.0001％-约10％。在本 发明的一个实施方案中，所述一种或多种润滑剂的含量为含HCA化 合物的总重量的约0.001％-约10％。在本发明的一个实施方案中，所 述一种或多种润滑剂的含量为含HCA化合物的总重量的约0.01％-约 5％。
[0019]在本发明的一个实施方案中，含HCA化合物包含于含有 药学上可接受的载体的药用组合物中。
[0020]一方面，通过向需要抑制食欲的患者提供足以抑制患者 食欲的量的本发明的含HCA化合物，本发明提供一种抑制患者食欲 的方法。
[0021]一方面，通过向需要减少细胞质的柠檬酸裂解酶活性的 患者提供足以减少柠檬酸裂解酶活性的量的本发明的含HCA的化合 物，本发明提供一种减少患者细胞质的柠檬酸裂解酶活性的方法。
[0022]一方面，通过向需要增加脂肪代谢的患者提供足以增加 脂肪代谢的量的本发明的含HCA化合物，本发明提供增加患者脂肪 代谢的方法。
[0023]一方面，通过给予需要减轻体重的患者足以引起体重减 轻的量本发明的含HCA化合物，本发明提供引起患者体重减轻的方 法。
[0024]一方面，通过向需要降低血脂和食后脂血症的患者提供 足以降低血脂和食后脂血症的量的含HCA化合物，本发明提供降低 患者血脂和食后脂血症的方法。
发明详述
I.定义
[0025]用于本文的“患者”优选哺乳动物，例如人，但也可以 是动物，例如家畜(例如，狗、猫等)、农畜(例如，牛、羊、猪、马 等)和实验动物(例如，大鼠、小鼠、豚鼠等)。
[0026]用于本文的“有效量”的本发明的含HCA化合物是足以 达到所需治疗和/或预防作用的量，例如，导致预防或减轻与要治疗 的疾病、紊乱或不适(例如，肥胖症、体重增加、饥饿、高脂血症、 食后脂血症)有关的症状的量。给予患者的本发明的含HCA组合物的 量将取决于所述疾病、紊乱或不适的类型和严重性，取决于个人的 特征，例如全身健康状况、年龄、性别、体重和对药物的耐受性。 它也取决于疾病的严重程度、严重性和类型。根据这些和其它因素， 熟练的医务人员能确定适当的剂量。一般说来，足以达到治疗或预 防效果的本发明含HCA化合物的有效量会在约0.000001mg/每公斤 体重每天-约10,000mg/每公斤体重每天的范围。在一个实施方案中， 所述剂量范围为约0.0001mg/每公斤体重每天-约100mg/每公斤体重 每天。常用剂量范围为1,000-5,000mg每天。另一个通常的剂量范 围是2,000-3,000mg/每天。常用日剂量为3,000mg/每天。本发明的 含HCA化合物也可单独或与一种或多种其它治疗化合物联合给药。
II.总论
[0027]本发明的目的是要提供稳定的、不吸湿性的含HCA化合 物，例如，HCA钾，它们在制片、胶囊化、控制释放溶媒的制备所 需要的那些条件下是有用的，并且可结合到干燥粉末中。因此，本 发明描述吸收增强剂/控制释放剂和速度控制赋形剂的用途，即修饰 HCA盐的吸湿性和其它性质，以稳定并控制HCA盐和衍生物的传 递。本发明提供制备不吸湿和稳定的(例如，不易被抑制其吸收或导 致其排泄的试剂引起内酯化作用或酸催化降解或螯合作用)、呈相对 纯净和活性形式的不同吸湿性的HCA盐(包括，但不限于，HCA钾 盐、HCA钠盐和其它HCA衍生物)的方法。本发明的方法用于当HCA 盐和衍生物出现在肠腔时减少其极性/离子性，以提供吸收方面的优 势。
[0028]在一个实施方案中，本发明的含HCA化合物包括HCA、 一种或多种吸收增强剂/控制释放剂和一种或多种速度控制赋形剂。 所述HCA可包括，例如，HCA游离酸；HCA盐；HCA衍生物；或 它们的任何组合。在一个实施方案中，所述HCA浓度为含HCA化 合物的总重量的约1.0％-约80％。在一个实施方案中，所述HCA浓 度为含HCA化合物的总重量的约5％-约70％。在另一实施方案中， 所述HCA浓度为含HCA化合物的总重量的约10％-约60％。
[0029]有用的吸收增强剂/控制释放剂可包括，但不限于，例如， d-α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)；Lubritab；火山油(例如，例 如甘油单硬脂酸酯，十六醇，十八醇)；和/或各种高粘度等级的共轭 聚乙二醇；乙基纤维素、羧甲基纤维素、丙酸纤维素(低、中或高分 子量)、醋酸-丙酸纤维素；醋酸-丁酸纤维素；醋酸-邻苯二甲酸纤维 素(CAP)；三醋酸纤维素；邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素；聚甲基丙 烯酸甲酯；聚甲基丙烯酸乙酯；聚甲基丙烯酸丁酯；聚甲基丙烯酸 异丁酯；聚甲基丙烯酸己酯；聚甲基丙烯酸异癸酯；聚甲基丙烯酸 月桂酯；聚甲基丙烯酸苯酯；聚丙烯酸甲酯；聚丙烯酸异丙酯；聚 丙烯酸异丁酯；聚丙烯酸十八烷基酯；聚乙烯；低密度聚乙烯；高 密度聚乙烯；聚丙烯；聚环氧乙烷；聚乙烯对苯二甲酸酯；聚乙烯 异丁基醚；聚乙酸乙烯酯；聚醋酸邻苯二甲酸乙烯基酯；聚氯乙烯； 聚氨酯；丙烯酸和甲基丙烯酸和酯的其它共聚物；蜡；虫胶；玉米 胶蛋白(醇溶谷蛋白基团的植物蛋白)；氢化植物油；聚乙烯醇；聚乙 烯吡咯烷酮；甲基纤维素；羟丙基纤维素；羟丙基甲基纤维素或聚 乙二醇；或它们的混合物。在一个实施方案中，所述吸收增强剂/控 制释放剂浓度为含HCA化合物的总重量的约1.0％-约50％。在另一 实施方案中，所述吸收增强剂/控制释放剂浓度为含HCA化合物的总 重量的约1.0％-约40％。在又一实施方案中，所述吸收增强剂/控制 释放剂浓度为含HCA化合物的总重量的约1.0％-约10％。在又一实 施方案中，所述吸收增强剂/控制释放剂的浓度为含HCA化合物的总 重量的约2.0％-约8.0％。
[0030]适用的速度控制赋形剂可包括，但不限于，例如，聚合 物、增塑剂和崩解剂。所述速度控制赋形剂可为疏水的。所述速度 控制赋形剂，例如，增塑剂可用于防止屏蔽HCA的聚合物变得过于 太脆而易于裂开。所述速度控制赋形剂也用来通过毛细作用将液体 送入所述片剂的基质等。有用的速度控制赋形剂可包括，但不限于， 例如，Eastacryl(醋酸-邻苯二甲酸纤维素的分散液)；KollicoatIR (聚乙烯醇-聚乙二醇接枝共聚物)；醋酸-邻苯二甲酸纤维素；Kollicoat SR(用聚乙烯吡咯烷酮和月桂基硫酸钠稳定的聚乙酸乙烯酯分散 液)；乙基纤维素；Eudragit(基于丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯类的包 衣)；玉米胶蛋白(植物蛋白)；丙烯酸聚合物；聚醋酸邻苯二甲酸乙 烯基酯；邻苯二甲酸羟甲基丙基甲基纤维素；乙酸-1，2，4-苯三酸纤维 素；丙烯酸聚合物增塑剂；聚乳酸聚合物；乙醇酸聚合物及其混合 物；Primogel；PruvTM(硬脂酰基富马酸钠)；柠檬酸酯；柠檬酸三乙 基酯；丙二醇；和癸二酸二丁基酯。在一个实施方案中，所述速度 控制赋形剂浓度为含HCA化合物的总重量的约0.0001-约60％。在 一个实施方案中，所述速度控制赋形剂浓度为含HCA化合物的总重 量的约0.001％-约50％。在另一实施方案中，所述速度控制赋形剂浓 度为含HCA化合物的总重量的约0.01％-约25％。
[0031]KollicoatIR(聚乙烯醇-聚乙二醇接枝共聚物)是一种即 时释放包衣，它用于制备要进一步加工的HCA粒状组合物，当遇到 湿气和其它挑战时，该组合物不会立即变成粘性的。KollicoatSR 是一种稳定的聚乙酸乙烯酯分散液，它提供持续释放的包衣。出自 Eastman的Eastacryl是CAP的分散液，用于提供持续释放的包衣。
[0032]在另一实施方案中，本发明的含HCA化合物包括HCA、 一种或多种吸收增强剂/控制释放剂；一种或多种速度控制赋形剂； 和一种或多种润滑剂。通过在压制/压缩作用期间和排出期间减少片 剂模具中的摩擦力，润滑剂帮助制备片剂。所述润滑剂改善粉末流 动特性，防止片剂粘到冲压机等。有用的润滑剂可包括，但不限于， 例如，硬脂酸盐或酯(例如，硬脂酸镁、硬脂酸钙和硬脂酸钠、甘油 单硬脂酸酯和硬脂酸)；Lubritab；氢化植物油；蜡；滑石粉；硼酸； 苯甲酸钠；乙酸钠；氯化钠；DL-亮氨酸；油酸钠；十二烷基硫酸钠； 十二烷基硫酸镁和聚乙二醇和白陶土。在一个实施方案中，所述润 滑剂浓度为含HCA化合物的总重量的约0.0001-约10％。在一个实 施方案中，所述润滑剂浓度为含HCA化合物的总重量的约0.001％- 约10％。在另一实施方案中，所述润滑剂浓度为含HCA化合物的总 重量的约0.01％-约5％。
[0033]Lubritab(氢化植物油，1型，NF；氢化油JP；氢化油JP； 和氢化植物油，BP由喷雾成干燥细小粉末的完全氢化的精练植物油 制备)可用作本发明的含HCA化合物的润滑剂。当片剂和胶囊要遮蔽 或制成箔(laminate)时，它也可用作辅助干燥粘合剂。含量高达含HCA 化合物的总重量的5％时，Lubritab可避免这些问题并帮助制备满 意的含HCA片剂。在压制和搅拌10-15分钟前，以持续搅拌操作中 的干燥状态加入作为含HCA化合物的润滑剂的Lubritab会更加有 效。当与一种抗粘附剂联合使用时，Lubritab可用作本发明的含HCA 化合物的润滑剂。抗粘附剂防止片剂粘在片剂冲压机和冲模壁上。 抗粘附剂可包括，但不限于，例如，滑石粉、玉米淀粉、胶态二氧 化硅、DL-亮氨酸、十二烷基硫酸钠和硬脂酸金属盐。某些成份，例 如滑石粉，可在同样的制剂中起润滑剂、抗粘附剂和助流剂的作用。 助流剂改善颗粒的流动特性。助流剂包括，例如，滑石粉、玉米淀 粉和胶态二氧化硅，例如AerosilTM(Degussa)。
[0034]此外，Lubritab可用于本发明的含HCA化合物的释放 控制应用方面。在一个实施方案中，Lubritab的用量为含HCA化合 物的总重量的20-40％。在另一实施方案中，Lubritab的用量为含 HCA化合物的总重量的约5％-约40％。本领域的技术人员会理解， 硬脂酸镁、其它硬脂酸盐或酯、氢化植物油和类似的相关化合物可 适用于HCA盐和化合物的释放控制的目的。
[0035]在另一实施方案中，本发明的含HCA化合物包括HCA、 一种或多种吸收增强剂/控制释放剂；一种或多种速度控制赋形剂； 和一种或多种填充剂/粘合剂。这些填充剂/粘合剂也用来调节HCA 释放速度。有用的填充剂/粘合剂包括，但不限于，例如，淀粉糊； 阿拉伯胶；蔗糖；聚乙烯吡咯烷酮(PVP)；羟丙基甲基纤维素 (HPMC)；甲基纤维素；和明胶。在一个实施方案中，水毛细作用剂 (water-wicking agent)，例如微晶纤维素，用于本发明的含HCA化合 物，以调节控释片剂到达高pH区域时的渗透速度。在另一实施方案 中，崩解剂用作本发明的含HCA化合物中的填充剂。有用的崩解剂 包括，但不限于，例如，马铃薯淀粉；微晶纤维素(MCC)；预胶化淀 粉(PGS)；Primogel(羟基乙酸淀粉钠，USP/NF，Ph.Eur.)；Primellose (交联羧甲基纤维素钠，USP/NF，ph.Eur.)
[0036]有用的填充剂/粘合剂可包括，但不限于，例如，磷酸二 钙和磷酸三钙。在一个实施方案中，所述填充剂/粘合剂浓度为含HCA 化合物的总重量的约0.01％-约30％。在一个实施方案中，所述填充 剂/粘合剂浓度为含HCA化合物的总重量的约0.1％-约30％。在另一 实施方案中，所述填充剂/粘合剂浓度为含HCA化合物的总重量的约 0.1％-约25％。
[0037]在又一实施方案中，本发明的含HCA化合物包括HCA， 一种或多种吸收增强剂/控制释放剂；一种或多种速度控制赋形剂； 一种或多种润滑剂；和一种或多种填充剂/粘合剂。
[0038]在又一实施方案中，本发明的含HCA化合物包括HCA 和一种或多种速度控制赋形剂。
[0039]在又一实施方案中，本发明的含HCA化合物包括HCA 和一种或多种润滑剂。
[0040]在又一实施方案中，本发明的含HCA化合物包括HCA， 一种或多种吸收增强剂/控制释放剂；和一种或多种润滑剂.
[0041]在另一实施方案中，前述的本发明的含HCA化合物具有 小于约2.5％重量的含氯量(chloride content)。在一个实施方案中，本 发明含HCA化合物具有小于约1.0％重量的含氯量。在又一实施方案 中，本发明的含HCA化合物具有小于约0.5％重量的含氯量。
[0042]在又一实施方案中，前述的本发明的含HCA化合物具有 的含量低于约2.9％重量的作为氯化物的总卤素。在一个实施方案中， 本发明的含HCA化合物具有低于约1.0％重量的作为氯化物的总卤素 含量。在又一实施方案中，本发明的含HCA化合物具有含量低于约 0.6％重量的作为氯化物的总卤素。
[0043]在一个实施方案中，本发明的含HCA化合物包含于干燥 传递系统中，例如片剂、干燥粉末和干燥膳食替代混合物。在另一 实施方案中，本发明的含HCA化合物包含于液体传递系统，例如， 胶囊、胶囊形片剂或饮料中。在又一实施方案中，本发明的含HCA 化合物以控制释放介质，例如，片剂、胶囊形片剂和胶囊的形式使 用。
[0044]本申请涉及2002年9月10日授权的美国专利号 6,447,807，其内容通过全文引用结合到本文中。
III.HCA和HCA盐的性质
[0045]早期的研究将体重减轻益处归因于HCA、它的盐及其内 酯形式。总体上参见授予John M.Lowenstein的美国专利号 3,764,692。对HCA的生物和治疗作用所提出的普遍解释是细胞质的 (胞浆的)ATP-柠檬酸裂解酶的抑制作用(D.Clouatre和M.E. Rosenbaum，The Diet and Health Benefits of HCA(羟基柠檬酸)， 1994)。在后继研究中，为减少体重的目的，HCA的内酯形式表现得 远不及HCA的钠盐形式有效，部分原因在于其内酯形式缺乏对ATP- 柠檬酸裂解酶(已知是HCA作用的靶标)适当的亲合力(Lowenstein和 Brunengraber，Methods Enzymol.1981；72：486-97)。在促进内酯化 作用的条件(例如，酸性条件)下，游离HCA被迅速灭活。事实上， 目前市售得到的在制成的酸性pH饮料中HCA无机盐的内含物随着 时间的推移向HCA内酯发展。
[0046]美国专利号5,536,516已经描述食品中游离HCA浓缩物 的用途，但它没有说明在体重减少或其它医学用途方面使用HCA的 任何特殊益处。即使短暂地将HCA钾盐和钠盐暴露于酸性环境或调 过味的饮料，也会导致这些HCA盐的化学变化。在某些情况下，一 加入HCA钾盐或HCA钠盐，所述饮料竟然变色。
[0047]游离HCA是极为离子化的，且不易于通过肠膜。通过粘 合可溶解和不可溶解纤维和通过许多其它化合物，HCA的游离酸形 式可以被螯合，从而表现出HCA生物学上的不可得性。有证据表明， 如果定期地大量地使用，游离HCA和HCA内酯都会刺激胃肠组织。
[0048]一般说来，HCA钙和HCA镁盐，单独或以各种在一起的 混合物的形式，或与HCA钾盐和HCA钠盐组合，不是优选的HCA 传递形式。通过胃肠道时，HCA钙和HCA镁盐也不易吸收，因为 它们难溶解于含水介质。这些HCA盐也与肠内的胆汁酸和脂肪反 应和/或经结合于膳食中的可溶和不溶纤维或其它物质而被螯合，或 在消化过程中分泌(Heymsfield，Steven B，等.JAMA 1998；280(18)： 1596-1600；Letters，JAMA 1999；282：235)。例如，胃酸的作用可使 附着于脂肪、胆汁酸、树胶、纤维、果胶等的二价HCA钙盐或HCA 镁盐之一游离，这是不受欢迎的结果。然而，向HCA钾中加入少量 HCA镁可促进HCA钾通过细胞膜。作为对比，钙阻止HCA钾通过 细胞膜。
[0049]HCA钙/钾(Super CitriMax)没有完全被吸收，用气相色 谱/质谱技术，只在血液中检测到被禁食患者吸收的20％的剂量(Loe 等，Anal Biochem.2001，1；292(1)：148-54)。Loe及其同事报道HCA 钙/钾(Super CitriMaX)在给药2小时后出现吸收峰，摄取后在血液中 保持该化合物超过9小时(Loe等，FASEB Journal，154：632，Abs. 501.1，2001)。摄取Super CitriMax后立即进食会减少约60％的吸收。 而且，动物实验(参见美国专利号6,476,071)还表明，为使钾盐最有效， 必须使配体完全结合到只含有微量的污染物，包括大多数其它矿物 质或纤维或糖的HCA中。
[0050]HCA钙盐还有一些可限制其治疗用途的其它缺点。经 肠的钙摄取被高度调节，在正常环境下不会超过食物和补充物中发 现的量的约35％。随着钙剂量的增加，钙摄取下降。这会限制HCA 钙的用途，其中需要摄取大剂量。例如，为减少体重和其它目的， 最小有效量的衍生自其钙盐的HCA也需要12-15克的50％原料的给 药量。除带来给药困难外，这个量的HCA钙还导致不需要的其它饮 食矿物质例如锌的结合和排泄的水平上升。
[0051]HCA钠盐不利于向患者长期提供。首先，HCA钠对肥胖 症没有积极代谢作用。其次，HCA钠有潜在的高血压作用。事实上， 几种早期印度人提供的“钾”盐确实是(-)一羟基柠檬酸钙、钾和钠的 混合物。这些HCA制剂中的钠的量仍超过低钠食物中所允许的量， 虽然在任何现代食物中加钠是不明智的。作为对比，HCA钾没有与 HCA钠有关的缺点。
[0052]优选的药用HCA盐是HCA钾。如其HCA盐一样，天然 钾是完全可溶的，且已知具有比钠所具有的大100倍的细胞膜渗透 性。然而，HCA钾盐，钠盐也一样，是极为吸湿的，因此，不适于 正常环境下制备干燥传递形式。为本身吸收水分，HCA钾也容易结 合到其临近的环境中的化合物的可利用的结合位置上，这种作用往 往随后会显著妨碍肠对HCA钾的消化。HCA钾也不适于液体传递 形式，因为溶液中的HCA钾会慢慢内酯化至pH所决定的平衡。
IV.选择含HCA化合物及其传递
[0053]几项国际专利申请和美国专利公开含HCA化合物及其作 为钙、镁和盐的混合物的传递。提交于1999年1月28日的国际专 利申请WO 99/03464涉及含14-26％重量HCA钙和约24-40％重量 HCA钾或约14-24％重量的HCA钠，或它们的混合物的含HCA化 合物，用于饮食补充物和食品的组合物的总HCA含量的百分比各自 被算出。对这类组合物的研究评估表明，它的消化极其不足，甚至 当空腹摄取时(Loe等，Anal Biochem.2001年5月1日；292(1)： 148-54)，而且摄取后立即进食会减少其约60％的吸收(Loe等，Time Course of Hydroxycitrate Clearance in Fasting and Fed Humans，FASEB Journal，15，4：632，Abs.501.1，2001)。此外，各种含HCA化合物 对大鼠肥胖症模型中的体重和食物摄取的作用的比较研究表明，在 降低中年大鼠(用30％脂肪膳食喂养)的体重增加方面，与WO 99/03464 所述的相同的HCA钙/钾盐的测试组合物不如HCA钾盐(参见美国专 利号6,476,071B1)。明确地，在对30％脂肪饮食的实验采用的摄取 水平下，HCA钾提高蛋白的体重百分比而减少脂肪的体重百分比。 作为对比，HCA钙/钾盐测试组合物增加脂肪且降低蛋白的体重百分 比。
[0054]国际专利申请WO 00/15051涉及通过使原料不充分反 应，即除去成品中的大多数量的HCA内酯，使HCA钙更加可溶解。 然而这个步骤只稍微改善HCA摄取。上面讨论HCA内酯的问题， 且知道大量的HCA内酯是刺激性的(Ishihara等，J Nutr.2000年12 月；130(12)：2990-5)。此外，使钙可溶解无助于防止其与肠内化合 物例如胆汁盐的反应，或无助于提高HCA钙消化的总速度。值得注 意的是，WO 00/15051中所公开的方法被其他人于1997年先行公开 (Sawada等，Journal of Japan Oil and Chemicals/Nihon Yukagaku Kaishi 1997December；46，12：1467-1474)，在日本更早几个月。
[0055]国际专利申请WO 02/014477涉及一种组合物，它包含 与garcinol和花色素苷之一或两者结合的HCA。Garcinol是HCA产 物的常见污染物，因此，它往往存在于已经被用于其它临床研究的 盐中，即，萃取物不同于合成的纯HCA盐。如果摄取更高剂量的任 一组分，表示于WO 02/014477的叠加效应是否超过所报道的适度响 应是未知的。然而，所出版的检验衍生自藤黄属藤黄的黄酮类化合 物作用的论文发现，剂量响应研究显示两阶段活性。在降低血清和 组织的脂水平方面，较大剂量效果更小，尽管没有毒性作用(Koshy AS，Vijayalakshmi NR.Impact of certain flavonoids on lipid profiles-- potential action of Garcinia cambogia flavonoids.Phytother Res.2001年8 月；15(5)：395-400)。
[0056]美国专利号6,221,901涉及HCA镁的制备和用途。然而， 获得预期效果所需的高剂量HCA镁会限制所述组合物的治疗效用。 例如，为得到降低血压的效果，例如，本发明者用500mg/kg HCA 镁喂其动物。Shrivastava等人对人采用5倍于大鼠的标准剂量的羟基 柠檬酸镁，相当于100mg/kg/天或中等身材的病人7克的摄取量。这 个量中的45％是元素镁；因此，使人摄取相当约3.15克镁的量。The Recommended Dietary Allowances，第10版(National Research Council，1989)指出，多于350mg/天时，大部分人会开始腹泻。换 句话说，Shrivastava等所用的试验剂量接近一般预期开始出现副作用 的剂量的10倍。所诱发的腹泻本身会快速降低血压。
[0057]美国专利号5,783,603涉及HCA钾的制备技术。用这种 方法制备HCA钾要求HCA钾的研磨、筛选、混合和包装在氮气中 进行，因为HCA钾制剂是极为吸湿的。即，如果置于湿度控制环境 之外的户外空气中，根据该专利方法制备的HCA钾会在几分钟之内 开始吸收水分。这种性质会限制这种原料作为干燥药物或营养 (nutraceutical)制品的组分的用途。有市售的低pH形式的HCA钾， 即，pH介于7-8，但这种形式的羟基柠檬酸钾是反应不完全的，混 有内酯的，或有类似的缺点：这使得它们在生理效果方面不如适当 制备的产物。完全反应的HCA钾的pH大于9。
[0058]美国专利号6,447,807涉及可用的HCA吸湿盐的制备方法 和控制HCA盐传递的方法。由于它们所述的TPGS的用途，本发明 的方法不同于所授权的专利方法。通过减去或去除喷雾干燥HCA于 单独载体(例如，maltodextan)上的需求和需要特别喷雾或冻干含HCA 化合物的步骤，含HCA化合物的制备中的TPGS的使用改进了美国 专利号6,447,807的方法。
V.HCA传递
[0059]HCA向有需要的患者的有效传递已经受控制释放形式的 HCA的不多的制备方法所限制，与所用的盐无关。确定HCA的食 欲抑制作用的试验表明，一次性口服大剂量或分为两次、总量达到 一次剂量的四分之一的口服剂量，导致用高糖饮食喂养的实验动物 减少10％或更大的食物消耗。随着HCA的缓慢摄取，该结果延续数 周。为有效需要将HCA剂量至少分为两次是目前唯一完全确定的方 法。
[0060]以多次给药提供HCA(适用于任何药物)，是不方便的且 不受患者的良好依从性支持。以任何目前盐的形式提供的多次给药 也是浪费，其中超出产生益处所需底线或极限之上的、传递到身体 的任何原料完全作为过量而被排泄。一方面，HCA的控制释放避免 过量和浪费，另一方面，避免覆盖的间隙。控制释放使剂量方案简 化为每日给药一次成为可能。而且预期经控制释放传递的更少量的 HCA会提供超过至少两次用药的普通方式之后所用较大量的HCA 所发现的益处。
[0061]如上所述，HCA的钾盐是用于人体重减少和其它药物和/ 或营养制品用途的最有效的HCA形式，对于这些用途的其次是钠盐。 在处理和操作方面，HCA的钾和钠盐表现出极为相似的困难。HCA 钾极为吸湿，并易于与户外空气中的水结合，形成不可口的、不适 用于片剂、胶囊或粉末剂的糊状物。该原料可与橙汁或水混合，但 需要在控制湿度的气氛下用真空囊密封，这种原料不便于患者的使 用。HCA钾与大量化合物反应(鞣酸、树胶、纤维、果胶等)，因此 在药理学有效性方面易于受到大量损失。
VI.含HCA化合物的颗粒化和TPGS的用途
[0062]已知用熔化油，例如氢化植物油、甘油单硬脂酸酯、十六 醇、十八醇和各种高粘度等级的共轭聚乙二醇，保护要被颗粒化的 原料，特别是吸湿性原料，这是周知的制药学实践。含HCA化合物 中的TPGS的用途是先前未知的。
[0063]TPGS的熔点为40℃，像聚乙二醇一样溶于水。用聚乙 二醇(PEG)1000酯化琥珀酸d-α-生育酚(即，PEG 1000的分子量约 为1,000道尔顿)合成TPGS。所生成的产物是淡黄色的蜡样固体物 质，它是两性分子的和亲水的，其分子量约为1,513道尔顿。d-α-生 育酚含26％TPGS。TPGS各被称作聚乙二醇1000琥珀酸d-α-生育酚 和d-α-生育酚PEG 1000琥珀酸d-α-生育酚。由于α-生育酚有八个立 体异构体，TPGS的更完整的化学名称包括RRR-α-生育酚聚乙二醇 1000琥珀酸酯、2R，4′R，8′R-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯和聚乙 二醇1000琥珀酸2，5，7，8-四甲基-2-(4′，8′，12′-三甲基十三烷基)-6-苯并 二氢吡喃酯。PDRhealth，Medical Economics Company的一种在线组 分(参见http：∥www.gettingwell.com/drug_info/nmdrugprofiles/ nutsupdrugs/alp_0091.shtml，它提供TPGS药动学说明)。预料将来生 育酚的其它异构体会随着本领域的自然延伸用于本文所述的用途。 计划将本领域的这类延伸应用置于本发明的范围内。
[0064]在基于水的有机乳液的配制中TPGS有能力担当乳化 剂，并可用作有低生物利用率的某些产物上的熔化的直接喷雾。所 述产物的HLB(亲水/亲油平衡值)约为13。它对空气稳定，但与碱反 应。TPGS可用作肠吸收低的颗粒化材料或油的优良包衣。TPGS还 有优于许多其它化学的无营养/非天然的乳化剂的好处。
[0065]所述产物在结构上类似于两亲物。其分子的一部分含有 亲水极性端和亲油性的另一端，而有两重性。包含亲水或极性末端 或亲油烷基末端的所述分子的确切部分不能由其分子结构说明。一 般公认的观点是，当琥珀酸生育酚部分作为亲油末端时，聚乙二醇 部分作为亲水极性端。TPGS以387-447IU/g提供维生素E。在约40℃ 或更高温度下，用热皿或其它装置熔化该材料，并用磁搅拌棒搅拌。 然后在流化床干燥器内，用约30℃的入口温度，将其喷雾到要被颗 粒化的原料上，要调整所述喷雾以在要颗粒化的原料上喷上细薄雾。 一旦所述粉末与熔化相完全混合并干燥至硬固体表面，就施加氢化 油的第二层包衣。
[0066]固体油的保护外包衣优选熔化的氢化植物油。该原料的 性质完全亲油，没有多少或完全没有两亲特性。在喷到含预先颗粒 化TPGS的粉末上时，它经加热和搅拌制成熔融相。所述速度控制聚 合物被喷雾和分散到这两种油层之上。
[0067]TPGS促进环孢菌素和许多其它化合物的摄取。为制备癌 症化疗的抗肿瘤药物紫杉醇(Taxol)的聚合物纳米球，维生素E TPGS也用于溶剂萃取/蒸发技术(BED-Vol.50，2001 Bioengineering Conference ASME 2001)中。含HCA化合物可受益于TPGS的胶束自 我生成特性的假设，引起评估TPGS对含HCA化合物的稳定性和吸 湿性的影响的研究。评估用TPGS配制含HCA制剂的效果的研究表 明，TPGS尤其适合含HCA化合物的造粒，并提高它们的生物利用 率。即，本发明者已经成功地将HCA的钾盐形式造粒成可使用的粉 末剂。此外，可根据美国专利号6,447,807所述的方法，用该可使用 的粉末剂制备配制产物以控制传递。相同结果可扩大到HCA的钠盐 和其它盐及其混合物。
[0068]如上所述，美国专利号6,447,807涉及制备可使用的HCA 吸湿盐和控制HCA盐传递的方法。根据他们所述的TPGS的用途， 本发明的方法截然不同与所授权的专利的方法。通过省略或排除对 喷雾干燥HCA于分离载体，例如，maltodextan上的需要和需要特别 喷雾或冻干含HCA化合物的步骤，TPGS在含HCA化合物制剂中的 使用对美国专利号6,447,807的方法加以改进。本发明可取代这些后 续过程的流化床干燥。
VII.含HCA化合物
[0069]包括，但不限于，例如，HCA游离酸、HCA盐、HCA 衍生物或它们的任何组合的本发明的含HCA化合物，所制备的有良 好传递模式，即适于传递给患者的颗粒可单独使用，或与药学上可 接受的化合物、溶媒或辅料进一步配制。这类组合物一般包含本发 明的含HCA化合物和药学上可接受的载体。用于本文的“药学上可 接受的载体”打算包括与药物给药适配的任何和所有溶剂、分散介 质、包衣、抗菌和抗真菌化合物、等渗的和吸收延缓化合物等。适 用载体描述于最近编辑的Remington′s Pharmaceutical Sciences，本领 域的标准参考教科书，通过引用结合到本文中。这类载体或稀释剂 的实例包括，但不限于，水、盐水、林格氏溶液、葡萄糖溶液和5％ 人血白蛋白。也可用脂质体和非水溶媒例如固定油。药用活性物质 的这类介质和化合物的用途为本领域所熟知。除非任何常规介质或 化合物与所述活性化合物不相容，其在所述组合物中的用途都被考 虑。辅助活性化合物也可结合到所述组合物中。
[0070]所配制的本发明的药用组合物要与其预计的给药途径相 适应。给药途径的实例包括胃肠外，例如，静脉内、皮内、皮下， 经口(例如，吸入)，透皮(即，局部的)，透过粘膜，和直肠给药。可 用酸或碱，例如盐酸或氢氧化钠调节pH。
[0071]口服组合物一般包含惰性稀释剂或可食用载体。它们可 装入明胶胶囊、胶囊形片剂中或压入片剂中。为口服治疗，本发明 的含HCA化合物可与赋形剂结合并以片剂、锭剂或胶囊形式使用。 为用作嗽口剂，也可用流体载体制备口服组合物，其中所述流体载 体中的化合物用于口部漱口，再咳出或咽下。作为所述组合物部分， 可包括药学上相容的结合化合物和/或辅料。所述片剂、丸剂、胶囊、 锭剂等可含有任何下列成分或有相似性质的化合物：粘合剂例如微 晶纤维素，黄蓍胶或明胶；赋形剂例如淀粉或乳糖，崩解化合物例 如海藻酸，Primogel或玉米淀粉；润滑剂例如硬脂酸镁或Sterotes； 助流剂例如胶态二氧化硅；增甜化合物例如蔗糖或糖精；或矫味化 合物例如欧薄荷，水杨酸甲酯或橙矫味剂。
[0072]对于直肠传递，本发明的含HCA化合物也可制备成栓剂 形式的药用组合物(例如，与常规栓剂基质例如可可脂和其它甘油酯) 或滞留型灌肠剂。
[0073]在一个实施方案中，用保护所述化合物免于从体快速排 出的载体制备本发明的含HCA化合物，例如控制释放制剂，包括植 入片和微包囊化传递系统。可用生物可降解的、生物相容的聚合物， 例如乙烯醋酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯和聚乳酸。 对本领域的技术人员这类制剂的制备方法是显而易见的。所述原料 也可从Alza Corporation和Nova Pharmaceuticals，Inc购得。脂质体悬 液也可用作药学上可接受的载体。可根据本领域的技术人员所知的 方法制备这些，例如，描述于美国专利号4,522,811中的方法。
[0074]为给药方便和剂量一致，将经口或胃肠外组合物配制成剂 量单位形式是特别有利的。用于本文的剂量单位形式指物理上分离 的单位，它适于作为要治疗的患者的单一剂量；每个单位含有与所 需药用载体结合的预先确定量的经计算可能产生所需治疗作用的活 性化合物。为个体治疗，直接根据含HCA化合物的独特性质、要实 现的特殊治疗作用和在化合这样的活性化合物的混合技术方面的固 有局限性，写出本发明的剂量单位形式的说明书。
[0075]药用组合物可与用药说明书一起包括于容器、包装盒或 分配器中。
VIII.用TPGS制备含HCA化合物的方法
[0076]TPGS可应用于干燥HCA制剂包括，但不限于，例如， HCA游离酸，HCA盐，HCA衍生物，或它们的任何组合，以制备 有良好传递模式，即适于传递给患者的颗粒，它可单独使用，或与 药学上可接受的化合物、溶媒或辅料进一步配制。(-)-羟基柠檬酸和 其内酯，都是液体，可如USSN 10/303,117(Clouatre，Clouatre和Dunn) 中所述，可先置于适用的干燥剂例如火成二氧化硅上，根据在本发 明中的使用制备，其中的实施例包括液体HCA钾。可通过任何适当 的途径向需要它的患者提供本发明的HCA制剂，包括，但不限于， 例如，经口、腹膜内和静脉内。在一个实施方案中，每天向患者提 供一次或多次本发明的HCA制剂。在一个实施方案中，每天向患者 提供一次本发明的HCA制剂。
[0077]HCA、HCA盐和HCA衍生物可以制备成与脂质体结合， 主要的试剂是TPGS。当制备控制释放片剂或胶囊时，口服后含延时 释放聚合物的其它制剂提供在体内的延长的停留时间。也可采用粘 膜粘合剂和类似试剂。TPGS的量一般介于终产物的2％-10％。类似 范围对用于补足TPGS的作用的氢化植物油或类似试剂是典型的。用 实施例1至实施例4详细说明本发明的含HCA化合物的制备方法。
[0078]简要说来，在低湿度环境下，HCA、HCA盐或HCA盐 的组合与TPGS混合，生成TPGS/HCA混合物。所述TPGS/HCA混 合物再与熔化的油，例如氢化植物油、甘油单硬脂酸酯、十六醇、 十八醇和/或各种高粘度等级的共轭聚乙二醇混合，生成粗TPGS/HCA 颗粒状混合物。所述粗TPGS/HCA颗粒状混合物再与聚合物混合， 其中的聚合物生成本发明的含HCA化合物。所述聚合物薄膜应有肠 的特性，如美国专利6,447,807中所述。适用聚合物包括，但不 限于，例如，醋酸-邻苯二甲酸纤维素、乙基纤维素、Eudragit L55、 玉米胶蛋白、丙烯酸聚合物、邻苯二甲酸羟甲基丙基甲基纤维素、 聚醋酸邻苯二甲酸乙烯基酯，乙酸-1，2，4-苯三酸纤维素、丙烯酸聚合 物增塑剂、聚乳酸聚合物、乙醇酸聚合物及其混合物。再将本发明 的含HCA化合物配制成片剂、胶囊、制备好的干饮料混合物、制备 好的可饮用液体制品和可食用棒。
[0079]在一个实施方案中，TPGS以基于干重的HCA的量的约 1.0％-约50％重量与所述组合物的其它组分混合。在一个实施方案中， TPGS以基于绝干重量的HCA的量的约1.0％-约20％重量与所述组 合物的其它组分混合。在另一实施方案中，TPGS以基于绝干重量的 HCA的量的约2％-约10％重量与所述组合物的其它组分混合。
IX.本发明的含HCA制剂的用途
[0080]A.含HCA化合物的预防和治疗用途。
[0081]本发明的含HCA化合物用于可能的与患者的各种紊乱、 疾病和病症有关的预防和治疗应用中，包括但不限于，例如，肥胖 症、体重过重、饥饿、脂肪代谢不足、高脂血症和食后脂血症(即， 进食后血中的脂水平)。通过非限制性实施例，本发明的组合物对患 有下文的疾病和紊乱中所介绍的失调的患者的治疗会有效。
[0082]B.含HCA化合物的药动学或生物作用的确定
[0083]可用气相色谱法/质谱法技术测定给予含HCA化合物的患 者的血液中的HCA水平确定含HCA化合物的药动学，包括吸收(Loe 等，Anal Biochem.2001，1；292(1)：148-54)，这些还被Loe等详述 (FASEB Journal，2001，15 4：632，Abs.501.1)。测试化合物的药 动学评估和比较为本领域所熟知。
[0084]如Houston和Nimmo所详述的，用ATP-柠檬酸裂解酶 检验方法可测定含HCA化合物对ATP-柠檬酸裂解酶活性的影响 (Biochim Biophys Acta 1985 Feb 21；844(2)：233-9)。与不存在含HCA 化合物时的ATP-柠檬酸裂解酶活性水平相比，在含HCA化合物的 存在下，ATP-柠檬酸裂解酶活性降低，这说明含HCA化合物抑制ATP- 柠檬酸裂解酶。
[0085]在本发明的各种实施方案中，进行适于体外或体内的试 验，以确定特定的基于HCA的治疗剂的作用，以及它的给药对患者 的受侵袭组织的治疗是否有效。
[0086]在各种具体的实施方案中，用涉及患者紊乱的有代表性 的细胞种类进行体外试验，以确定给定的基于HCA的治疗剂对所述 细胞类型是否发挥所需作用。在对人受试者试验前，可在适用动物 模型系统包括，但不限于大鼠、小鼠、鸡、牛、猴子、兔子等中试 验用于治疗的化合物。同样地，对体内试验，可在向人受试者给药 前采用本领域所知的任何动物模型系统。
[0087]C.疾病、紊乱和病症
[0088]本发明提供治疗面临患上与脂肪代谢有关疾病的风险(或 易患这样的疾病)的或已患有与脂肪代谢有关的疾病，例如，但不限 于，肥胖症、体重过重、脂肪代谢不足、高脂血症、食后脂血症、 需要抑制细胞质的柠檬酸裂解酶的紊乱或身体不适例如饥饿的患者 的预防和治疗方法。
[0089]本发明的含HCA化合物用于预防或治疗其中抑制ATP- 柠檬酸裂解酶，例如降低胆固醇水平为有益的的疾病、紊乱或不适。 Berkhout等，(Biochem J.1990年11月15日；272(1)：181-6)研究HCA 对人肝细胞瘤细胞系Hep G2中的低密度脂蛋白受体的活性和3-羟基 -3-甲基戊二酰基(glutaryl)-辅酶还原酶水平的影响。在与0.5mM或更 高浓度HCA一起培养2.5小时和18h小时后，[1，5-14C]柠檬酸盐与 脂肪酸和胆固醇的结合被强烈抑制。断定这种减少反映出对ATP柠 檬酸裂解酶的有效抑制。通过结合3H2O测出胆固醇生物合成下降到 27％的对照值，表明经胆固醇合成途径的碳单位通量下降。
[0090]本发明的含HCA化合物用于预防或治疗与脂肪代谢，例 如，但不限于，肥胖症；超重；高脂血症；食后脂血症；和脂肪代 谢不足，例如，胰岛素抵抗有关的疾病或紊乱。Ishihara等，(J Nutr.2000 12月；130(12)：2990-5)研究HCA的长期给药对碳水化合物利用和脂 质体氧化的影响。在休息和运动情况下，HCA组中的受试者的呼吸 交换率明显更低。这些结果表明，对休息和跑步中的受试者长期提 供HCA，促进脂质体氧化和抑制碳水化合物的利用。
[0091]在重新提高人脂肪生成的情况下，HCA减少脂肪合成和 增加能量消耗(Kovacs和Westerp-Plantenga，Society for the Study of Ingestive Behavior，Annual Meeting，2001，Abstr.27页)。因此， 本发明的含HCA化合物用于与脂肪代谢相关的疾病。
[0092]由于已经报导向患者提供HCA可促进食欲抑制和饱满感 (Westerterp-Plantenga和Kovacs，Int.J.Obes.Relat.Metab.Disord.， 2002，26(6)：870-2)，本发明的含HCA化合物用于预防或治疗患者 的饥饿和促进饱满感。
实施例
[0093]上一段文字列出的提供这些参考文献的公开内容通过全 文引用结合到本文中。
实施例1
[0094]制备含下列组分(参见表1)的制剂：
表1 项目编号 成分 量(mg/片) 百分比 1 HCA钙盐 500 71.43 2 微晶纤维素 17 2.42 3 磷酸二钙 45 6.42 4 玉米淀粉 9 1.28 5 TPGS 46 6.60 6 氢化植物油 50 7.14 7 醋酸-邻苯二甲酸纤维素 15 2.14 8 Carbopol974P卡波姆 15 2.14 9 硬脂酸镁 3 0.43 合计 700 100
[0095]制备方法如下：
1.项目编号1-4被称重，并在流化床干燥器中混合4-5分钟。 然后通过加热到40℃直到熔融，溶解项目编号5，用磁搅拌棒搅拌。 搅拌所述粉末后，边加入熔融液体的TPGS(项目编号5)边继续平稳 地搅拌。注入所述流体TPGS直到生成均匀颗粒。接着，熔化所述氢 化植物油直到完全熔融和流动。在用磁搅拌棒搅拌的同时，再喷雾 该原料。于30℃继续用空气搅拌。所有所述材料被完全包衣且所述 颗粒被硬化，喷雾已经完全溶解于氨水的醋酸-邻苯二甲酸纤维素。 持续喷雾直到所有所述颗粒被包衣，再伴以持续搅拌下，于室温下 在流化床干燥器中干燥。颗粒一俟干燥，就将其移出滚筒，用D3 Fitzmill粉碎机使其通过093号筛。
2.所述颗粒一旦干燥并变小，就先与Carbopol-974P在流化床 中混合。一俟完全混合，加入硬脂酸镁并搅拌2-3分钟。
3.再将混合的颗粒置于旋转压片机上，压制成具有700mg重量 和10-15kg破碎力(fracture force)的片剂。
[0096]在pH 6.8的一磷酸盐缓冲溶液中搅拌，这些片剂抗崩解 至少1小时。用磷酸二氢钾(34.02g，5L水中)，再用1N氢氧化钠 调节溶液至pH 6.8，制备pH 6.8的磷酸盐缓冲液，它用于模拟肠内 崩解。而且没有证据表明，在搅拌下暴露于无胃蛋白酶的模拟胃液(pH 1.2的HCl溶液)60分钟时会崩解。因为所述片剂一般会在这个时间 段离开空胃，所以认为这个时间是足够的。这有利地区别于先前的、 在15-30分钟内于胃液中崩解的含非肠溶HCA的非肠溶胶囊制剂和 通常在相同时间段内且往往在不超过60分钟内就崩解的片剂。针对 某些用途，在pH 6.8下，对含HCA化合物的HCA延时释放，55分 钟是理想的，然而对含HCA化合物的每天一次的剂量，优选更长久 的延时释放制剂。
实施例2
[0097]制备含下列组分(参见表2)的制剂：
表2 项目编号 成分 量(mg/片) 百分比 1 HCA钾/钙盐 500 64.93 2 磷酸二钙 50 6.49 3 微晶纤维素 30 3.90 4 玉米淀粉 5 0.65 5 TPGS 30 3.90 6 氢化棉子油 60 7.79 7 醋酸-邻苯二甲酸纤维素 30 3.90 8 Carbopol974-P卡波姆 60 7.79 9 硬脂酸镁 5 0.65 合计 770 100
[0098]制备方法如下：
1.项目编号1-4被称重，并在流化床干燥器中混合4-5分钟。 然后通过加热到40℃直到熔化，溶解项目编号5，用磁搅拌棒搅拌。 搅拌所述粉末后，边加入熔化的液体的TPGS(项目编号5)边继续平 稳地搅拌。注入所述流体TPGS直到生成均匀颗粒。接着，熔化所述 氢化植物油直到完全熔化和流动。在用磁搅拌棒搅拌的同时，再喷 雾该原料。于30℃继续用空气搅拌。所有材料被完全包衣且所述颗 粒被硬化时，就喷涂已经完全溶解于氨水的醋酸-邻苯二甲酸纤维素。 持续喷涂直到所有颗粒被包衣，再伴以持续搅拌下，于室温下在流 化床干燥器中干燥。当颗粒干燥时，就移出滚筒，用D3 Fitzmill粉 碎机使其通过093号筛。
2.所述颗粒一旦干燥并变小，就先与Carbopol-974P在流化床 中混合。当完全混合时，加入硬脂酸镁并搅拌2-3分钟。
3.再将混合的颗粒置于旋转压片机上，压制成具有700mg重量 和10-15kg破碎力的片剂。
[0099]在pH 6.8的一磷酸盐缓冲液中测定这种新的稳定的HCA 制剂的崩解是3-4小时。这有利地区别于先前的、在15-30分钟内于 胃液中崩解的含非肠溶HCA的非肠溶胶囊制剂和通常在相同时间段 内且往往在不超过60分钟内崩解的片剂。
实施例3缓释HCA制剂
[00100]在本发明的一个实施方案中，甲基丙烯酸酯聚合物用作 薄膜阻滞剂。在本发明的实施例中，Eudragit是用作含生物粘附的 非pH敏感的包衣物的聚合物。
[00101]可得到EudragitRS的粉末或30％含水分散液。这类甲 基丙烯酸酯粉末或溶液是水不渗透的。包埋于它的基质的药物经被 动扩散而扩散出去，而不考虑其pH。在药用混合物中有粘性组分， 从而需要采用辅助试剂，例如，柠檬酸三乙基酯、滑石粉和/或硬脂 酸镁。
[00102]根据下列组分(参见表3)制备应用于HCA缓慢释放的这 种制剂的实例：
表3 项目编号 成分 量(mg/片) 百分比 1 HCA钾盐 750 76.14 2 微晶纤维素 20 2.03 3 磷酸二钙 87 8.83 4 玉米淀粉 9 0.91 5 TPGS 35 3.55 6 氢化植物油 35 3.55 7 Eudragit30％RS 15 1.52 8 柠檬酸三乙基酯 5 0.51 9 滑石粉 10 1.02 10 Carbopol974-P卡波姆 16 1.62 11 硬脂酸镁 3 0.30 合计 985 99.98
[00103]制备方法如下：
1.使用前彻底干燥所述HCA钾，制备环境是低湿度的。在流 化床干燥器筛中混合项目编号1-5，在不加热的情况下通过混合搅拌 混合。
2.接着在37℃下，所述原料与滑石粉、柠檬酸三乙基酯和 Eudragit(50mL/kg的、30％Eudragit)的混合物混合并喷雾。所述 温度不允许超过37℃。用干燥空气持续搅拌直到LOD＜1.20％。
3.所述颗粒经093 D3 Fitzmill筛筛选，再用干燥空气在流化床 干燥器中搅拌。加入Carbopol974并搅拌3分钟或直到与所述颗粒 完全混合。
4.接着，向所述颗粒中加入硬脂酸镁，再以相同方式搅拌，直 到干燥和自由流动。
5.移出干燥过的颗粒，置于带长方形冲头的旋转压片机上。将 所述颗粒压制成重量为950mg、有12-15kg破碎力强度的片剂。
实施例4
[00104]在另一实施方案中，占优势的天然赋形剂被用来延长 HCA从片剂基质中的释放。这种制剂中，聚乙酸乙烯酯用作延缓的 pH敏感释放聚合物。所有其它的赋形剂都是常用的USP成分。制备 含下列组分(参见表4)的制剂：
表4 项目编号 成分 量(mg/片) 百分比 1 HCA钾/镁盐 1,000 66.70 2 磷酸二钙 174 11.60 3 TPGS 40 2.60 4 玉米胶蛋白 21 1.40 5 海藻酸盐(Satialgine) 49.5 3.30 6 果胶 60 4.00 7 甘油 100.5 6.70 8 聚醋酸邻苯二甲酸乙烯基酯(PVAP) 45 3.00 9 硬脂酸镁 10 0.70 合计 1,500 100
[00105]制备方法如下：
1.在流化床干燥器中混合HCA和磷酸二钙。当HCA和磷酸二 钙混合时，将所述TPGS在加热下熔化直到它自由流动和熔化。再将 熔化的TPGS喷雾到HCA和磷酸二钙混合物中。含TPGS混合物在 流化床干燥器中进一步搅拌，直到形成硬颗粒。
2.使玉米胶蛋白溶解于250mL甲醇(试剂级)中，直到玉米胶蛋 白完全分散。
3.再将流体化玉米胶蛋白和甲醇与步骤1中硬化的混合物在流 化床中制成颗粒。
4.当所述玉米胶蛋白和干燥原料混合时，制备果胶。用高剪切 力混合机使果胶悬浮于甘油中，直到所述果胶彻底混合和表面平滑， 制备果胶。再将所混合的果胶缓慢喷入玉米胶蛋白包衣的HCA中。 持续搅拌含果胶的、玉米胶蛋白包衣的混合物，直到所述组分实现 均匀分布。进一步搅拌所述混合物，直到颗粒明显生成。持续搅拌 直到所述颗粒干燥并完全形成。
5.颗粒化的最后步骤是将过筛的海藻酸盐加入所述混合物中。 在过筛的海藻酸盐加入后，于30℃温度下持续搅拌15分钟。搅拌 干燥含海藻酸盐的颗粒，直到干燥损失(LOD)＜1.5％。
6.使所述颗粒原料通过120号Fitzmill筛，决定所述颗粒的大 小。再将一定大小的颗粒放入流化床干燥器。然后于室温下，边搅 拌所述颗粒边向一定大小的干燥颗粒喷PVAP。通过使其分散于含30 mL NH3OH 300mL净化的水中制备所述PVAP。全部PVAP被喷到 所述颗粒上，所述原料保持于流化床干燥器中直到其LOD＜1.2％。
7.在与硬脂酸镁混合前，移出所述颗粒，使其通过093 Fitzmill 筛。
8.再将筛过的颗粒置于旋转压片机上，压制成重量为1,500mg、 具有12±4kg破碎力强度的长方形片剂。
实施例5
[00106]为了制备的目的，需要有标准化的肠溶衣起始原料，为 了便于处理，它已经被稳定化，而且随后通过加入成分、改变加工 和其它技术，它的释放速度可被修饰。表5给出一种配方，它从包 衣向初始HCA原料加5％固体。这意味着产出65％HCA的初始HCA 盐可作为肠溶包衣颗粒加到配方中，并被计算为60％HCA。Kollicoat IR(聚乙烯醇-聚乙二醇接枝共聚物)是即时释放包衣，用于制备要进 一步加工的HCA颗粒组合物，在受到水分和其它挑战时，组合物不 会马上变得胶粘。产自Eastman的Eastacryl是CAP(醋酸-邻苯二 甲酸纤维素)的分粉末剂，它用于提供持续释放包衣。
表5：采用2％Kollicoat IR和3％Eastacryl的肠溶包衣 项目编号 成分 重量(Kg) 百分比 1 HCA钾/镁盐(65％HCA) 2.000 76.34 2 Kollicoat IR 0.040 1.53 3 水 0.380 14.50 4 Eastacryl(30％固体) (生成被溶解的CAP固体) 0.2 (0.06) 7.63 总计 2.62 100.00
[00107]制备方法如下：
1.项目编号1-3被称重并在流化床干燥器中与KollicoatIR如 下混合：使KollicoatIR溶解于400ml水中。加入约15ml乙醇帮助 干燥。再于流化床干燥器内以＜50℃的温度将产物喷雾干燥到HCA 盐上，直到水分含量接近2.5％。
2.接着，用Eastacryl在流化床干燥器中对步骤1所生成的原 料包衣，以得到肠溶特性。
3.Eastacryl的喷雾干燥器包衣技术信息如下：
喷雾速度：9％
出口：25-33℃
入口：45-55℃
雾化器：55PSI
CFM：200-400
干燥至：45℃出口温度；入口低于60℃
4.随着所加入的水的损失，所生成的肠溶颗粒剂，称作 HCActiveTM(60％)肠溶颗粒剂，产生60％HCA，适用于结合到本发 明的特定制剂中。
实施例6
[00108]实施例5的方法得到相对持久的颗粒。为某些目的，可 利用硬脂酸镁或类似化合物制备适当的肠溶粉末。这类方法需要更 少的装置和更少的时间。
表6：采用5％硬脂酸镁的肠溶包衣 项目编号 成分 重量(Kg) 百分比 1 HCA钾/镁盐(65％HCA) 2.000 95.24 2 硬脂酸镁 0.100 4.76 总计 2.10 100.00
[00109]制备方法如下：
1.项目编号1和2被称重，并彻底混合。
2.接着边接续搅拌边加热步骤1中生成的原料至约35℃。该步 骤持续足够久以熔化硬脂酸镁并对HCA盐均匀包衣。
3.保持搅拌，直到所述颗粒冷却到约室温。
4.经093 D3 Fitzmill筛，筛选所生成的颗粒以控制颗粒大小。 所生成的颗粒的HCA含量约为60％。
实施例7
[00110]在另一实施方案中，在实施例5中制备的HCActiveTM(60％)肠溶颗粒剂被用于制备含有TPGS的延长释放肠溶制剂。额外 的传递控制来自于KollicoatSR的内含物(用聚乙烯吡咯烷酮和月 桂基硫酸钠稳定的聚乙酸乙烯酯分散液)。KollicoatSR提供持续释 放包衣。
表7：延长释放剂(含肠溶制剂和TPGS) 项目编号 关键项目 成分 量(mg/片) 重量(Kg) 百分比 1 预混合 HCActiveTM(60％)肠 溶颗粒剂 833.33 1.000 57.391 2 TPGS 167 0.200 11.501 3 Kollicoat SR 12.5 0.015 0.861 4 二氧化硅(4％ Aerosil) 167 0.200 11.501 5 淀粉 15 0.018 1.033 6 硬脂酸镁 7 0.0234 0.502 7 磷酸二钙 250 0.300 17.219 总计 1451.83 1.7564 100.008
[00111]制备方法如下：
1.如实施例5所述制备预混合HCActiveTM(60％)肠溶颗粒剂。
2.在加到其它成分之前使熔化的TPGS与Aerosil混合，再使产 物与预混合物混合并搅拌均匀。
3.经093 D3 Fitzmill筛筛选所生成的颗粒，控制所述颗粒的大 小。
4.取出所述粉末，置于带长方形冲头的旋转压片机上。容易地 制成片剂。所述颗粒被压制成重量约为1450mg、具有12-15kg破碎 力强度的片剂。
[00112]这些延长释放的含肠溶制剂的片剂在搅拌下暴露于无胃 蛋白酶的模拟胃液(HCl溶液，pH 1.2)60分钟，没有多少或完全没有 崩解。当在pH 6.8的一磷酸盐缓冲液中搅拌时，这些延长释放的含 肠溶制剂的片剂在约55分钟内完全溶解(在先前实施例1中所述)。
实施例8
[00113]在另一实施方案中，实施例5中制备的HCActiveTM(60％) 肠溶颗粒用于制备含TPGS的延长释放肠溶制剂。与实施例6不同， 在这个实施例中，所述TPGS先不与Aerosil混合，而是液化，再加 到如下所述的全部粉末中。
表8：延长释放剂(含肠溶制剂和TPGS) 项目编号 关键项目 成分 量(mg/片) 重量(Kg) 百分比 1 预混合 HCActiveTM(60％) 肠溶颗粒 833.33 1.000 57.391 2 TPGS 167 0.200 11.501 3 Kollicoat SR 12.5 0.015 0.861 4 微晶纤维素 167 0.200 11.501 5 淀粉 15 0.018 1.033 6 硬脂酸镁 7 0.0234 0.502 7 磷酸二钙 250 0.300 17.219 总计 1451.83 1.7564 100.008
[00114]制备方法如下：
1.如实施例5所述制备预混合HCActiveTM(60％)肠溶颗粒。
2.在机械搅拌下，向预混合物中加入熔化的TPGS。所生成的 混合物是油状粉末，通过加入微晶纤维素，接着加入并混合项目编 号1、3、5、6至全体中，以利于加工。
3.经093 D3 Fitzmill筛筛选所生成的颗粒，控制所述颗粒的大 小。
4.再将所述粉末移出，置于带长方形冲头的旋转压片机上。所 述颗粒被压制成重量约为1450mg的片剂。但所述片剂易碎且密度 不均匀。
[00115]当在pH 6.8的一磷酸盐缓冲液中搅拌时，这些延长释 放的含肠溶制剂的片剂在约55分钟内完全溶解(先前叙述于实施例1 中)。
实施例9
[00116]在另一实施方案中，实施例5中制备的HCActiveTM(60％) 肠溶颗粒剂用于制备含TPGS的延长释放肠溶制剂。与实施例6不同， 在这个实施例中，所述TPGS先与少量的Aerosil混合，再彻夜冷却 以利于加工。
表9：延长释放剂(含TPGS和Aerosil的肠溶制剂) 项目编号 关键项目 成分 量(mg/片) 重量(Kg) 百分比 1 预混合 HCActiveTM(60％) 肠溶颗粒剂 833.33 1.000 0.57339 2 TPGS 167 0.200 0.11491 3 Aerosil 61 0.073 0.04197 4 硬脂酸镁 7 0.0086 0.00482 5 磷酸二钙 385 0.462 0.26491 总计 1453.33 1.7436 1.00000
[00117]制备方法如下：
1.如实施例5所述制备预混合HCActiveTM(60％)肠溶颗粒。
2.在不锈钢容器内的热皿上加热TPGS，再加至Aerosil中并用 Kitchen Aide搅拌器混合形成固体块，再彻底冷冻。
2.次日，打碎TPGS/Aerosil块，减小成颗粒，再将这些颗粒混 入其它成分中。
3.经093 D3 Fitzmill筛筛选所生成的颗粒，控制所述颗粒的大 小。
4.取出所述粉末，置于带长方形冲头的旋转压片机上。所述颗 粒被压制成重量约为1450mg、具有12-15kg破碎力强度的片剂。
[00118]当在pH 6.8的一磷酸盐缓冲液中搅拌时，这些延长释 放的含肠溶制剂的片剂在约45分钟内完全溶解(如先前于实施例1中 所述)。
实施例10
[00119]在另一实施方案中，实施例5中制备的HCActiveTM(60％) 肠溶颗粒剂用于制备包含替代TPGS的Lubritab的延长释放肠溶制 剂。Lubritab可作为干燥粉末混入所述制剂中，而不需要对TPGS 所需要的大量的预处理。
表10：延长释放剂(含Lubritab的肠溶制剂) 项目编号 关键项目 成分 量(mg/片) 重量(Kg) 百分比 1 预混合 HCA(60％) 肠溶颗粒剂 833.33 1.000 55.543 2 磷酸二钙 332 0.376 22.128 3 Lubritab 228 0.258 15.197 4 Kollicoat SR 100 0.113 6.665 5 硬脂酸镁 7 0.0082 0.466 总计 1500.33 1.7552 99.999
[00120]制备方法如下：
1.如实施例5所述制备预混合HCActiveTM(60％)肠溶颗粒剂。
2.将所有成分混合在一起。
3.经093 D3 Fitzmill筛筛选所生成的原料，控制所述颗粒的大 小。
4.再取出所述粉末，置于带长方形冲头的旋转压片机上。所述 颗粒被压制成重量约为1500mg、具有12-15kg破碎力强度的片剂。
[00121]当在pH 6.8的一磷酸盐缓冲溶液中搅拌时，这些含延 长释放肠溶制剂的片剂用超过12小时才完全溶解(如先前叙述于实施 例1中)。Aerosil、微晶纤维素或某些类似组分的毛细作用用于增强 该肠溶制剂，以便减少崩解时间。在pH 6.8时采用本发明的制剂， 可在至少约30-超过约12小时的时间段内控制HCA释放速度。 Lubritab是本发明的含HCA化合物中的有用的TPGS替代物。
实施例11：本发明的含HCA化合物和另一种市售的含HCA制 剂的氯化物含量和总卤素含量的比较分析
[00122]通过Galbraith Laboratories，Inc.(Knoxville，TN)的元素和 离子层析法分析选出的含HCA制剂的氯化物含量，概括于下表11 和12中。如表11所示，采用满足环境保护局(EPA)方法/EPA 300.0 的标准技术，根据离子交换色谱法，本发明的含HCA化合物(RH1-1) 的氯化物含量比市售的含HCA制剂(SCM-1)的氯化物含量低至少6 倍。
表11：氯化物含量 重量百分比 样品ID 试样1 试样2 RH1-1 0.427 0.424 SCM-1 2.71 2.65
[00123]出于健康考虑，许多国家严格控制氯化物含量。用美国 专利5,656,314和5,536,516中的前述方法制备所述含HCA化合物， 并再进一步如下处理。简要说来，使含HCA化合物的溶液通过少量 强阴离子交换柱，其中氯化物优先与HCA结合。损失最小量的HCA， 但氯化物有相当的减少，以至于氯化物水平达到少于0.6％。然后， 根据我们的技术，用活性碳处理所述溶液，再与镁和钾反应，得到 Mg-K HCA，随后喷雾干燥得到吸湿更少的自由流动粉末剂。在本发 明的一个实施方案中，元素镁和元素钾以约1∶10-约1∶3的比例存在 于含HCA化合物中。
[00124]卤素指元素周期表的第17列中的那些元素：氟(F)、氯 (Cl)、溴(Br)、碘(I)和砹(At)。卤化指含有卤原子的化学化合物或混合 物。在共价分子中，卤化物原子对另一个原子有强的、定向的化学 键。如果所述其它原子是碳原子，则所述材料是卤化有机分子，例 如，四氯化碳、亚甲基氯(二氯甲烷)、三氯乙烯、聚氯乙烯(PVC)。 卤化有机分子是非常重要一类的化学物质，它们用于制备大量的其 它化学品和消费产品。当共价卤化物溶解时，卤素原子仍保持稳定 附在它所连结的无论什么原子上，而不会成为电解质。氯化有机分 子往往有害健康，某些甚至是已知人致癌物质。一般说来，有机分 子有越多的氯原子，它越可能是致癌物质。因此，用Galbraith Laboratories，Inc.(Knoxville，TN)确定选出的含HCA制剂的作为氯化 物含量的总卤素，概述于下表12中。
[00125]用环境保护局(EPA)方法/EPA 330.5(产生总残余氯)确定 总元素氯。在其中氯以分子连结，以至于通过氧化或其它技术不易 于释放的情况和某些其它例子中，元素分析优于离子分析。对两种 样品的元素分析的结果略高于用离子确认的那些结果。如表12所示， 本发明的含HCA化合物(RH1-1)的作为氯化物含量的总卤素比含 HCA制剂商品(SCM-1)的作为氯化物含量的总卤素至少低5倍。
表12：作为氯化物含量的总卤素 重量百分比 样品ID 试样1 试样2 RH1-1 0.603 0.599 SCM-1 3.02 3.05
实施例12：用大鼠模型测试含HCA化合物
[00126]用OM大鼠模型测试本发明的含HCA化合物的生物学 性质。简要说来，在标准条件下，用其中从脂肪中得到30％卡路里 的食物喂养10周龄的雄性OM大鼠。每天两次用含HCA试验化合 物或安慰剂插管治疗每组5-10只大鼠(例如，0.01mmoles/kg体重-1 mole/kg体重)60天。每天从尾巴静脉抽血一次或多次。用气相色谱 法/质谱法技术(Loe et等，Anal Biochem.2001，1；292(1)：148-54)和 另外由Loe等详述的那些技术(FASEB Journal，2001，154：632， Abs.501.1)，通过测定给予含HCA化合物的受试者的血液中的HCA 水平确定含HCA化合物的药动学，包括吸收。测出试验对象的体重， 及血脂水平、荷尔蒙和代谢调节剂，例如，但不限于，LDL和HDL、 糖皮质类固醇、瘦身蛋白、胰岛素和皮质酮水平(总的参见2002年11 月19日授权的美国专利号6,482,858)。在60天实验期的最后，处死 动物。通过采用Students t-检验(one-or two-tailed P-values(单或双尾P- 值))或ANOVA的统计学分析，将接受含HCA化合物的试验对象的 实验参数，例如对试验对象测得的体重，及血脂水平、荷尔蒙和代 谢调节剂，例如，但不限于，LDL和HDL、糖皮质类固醇、瘦身蛋 白、胰岛素和皮质酮水平，与接受安慰剂的试验对象的那些实验参 数比较。小于或等于约0.05的P-值被认为是统计学上有意义的。统 计上有意义的变化，例如，与接受安慰剂的对象相比，接受含HCA 化合物的试验对象的实验参数的增加或减少表明，含HCA化合物是 能够预防或治疗以这类参数的变化为特征的疾病或病症的药物。
等效性
[00127]根据前面详述的本发明的说明，已经描述的独特的含 HCA化合物及其方法导致改进的含HCA制剂适用于治疗用途是显 然的。尽管具体的实施方案已经详细公开于本文，但通过举例所做 的仅仅是为了说明，而不是要限制随后所附的权利要求书的范围。 尤其是，本发明者预料，对本发明可进行替代、变更和修饰不脱离 权利要求书所限定的本发明的精神和范围。例如，HCA盐、包囊化 试剂的选择或基于此的适当患者治疗的选择被认为是具有本文所述 实施方案的知识的本领域普通技术人员的常规性事务。