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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201711363496.9 (22)申请日 2017.12.18 (71)申请人 董晓 地址 213000 江苏省常州市新北区凤凰名 城24栋703室 (72)发明人 董晓 郑薇 林凡 (51)Int.Cl. A01N 65/20(2009.01) A01N 61/00(2006.01) A01P 21/00(2006.01) A01P 17/00(2006.01) A01P 1/00(2006.01) A01P 3/00(2006.01) C05F 11/00(2006.01。
2、) C09J 105/08(2006.01) C09J 105/02(2006.01) C09J 129/04(2006.01) (54)发明名称 一种果树伤口愈合剂 (57)摘要 本发明涉及树木保护修复领域, 具体涉及了 一种果树伤口愈合剂。 本发明通过将魔芋精粉、 壳聚糖、 聚乙烯醇三者结合, 制成一种粘胶剂, 界 面粘结良好, 且胶膜表面致密, 明显了改善了双 螺旋结构, 有效的提高其耐水性能, 一方面将促 果树伤口愈合的营养物质更好的附着于果树伤 口表面, 使营养成分不易流失挥发, 增加了愈合 效率, 在果树伤口外面形成保护层, 有效的抗冻 防裂, 更好的呵护果树, 另一方面可降解, 。
3、其中的 活性基团与杨木中的纤维素和半纤维素上的羟 基发生了作用, 从而使果树内部结构更致密, 有 效的锁住了果树伤口愈合有效成分和促生长成 分, 提高了果树的品质。 权利要求书1页 说明书7页 CN 108077323 A 2018.05.29 CN 108077323 A 1.一种果树伤口愈合剂, 其特征在于, 按质量份数计, 包括1215份抗病诱导剂, 810份 促生长剂, 2030份果树营养素, 1518份粘合剂。 2.根据权利要求1所述的果树伤口愈合剂, 其特征在于, 所述抗病诱导剂是挑取菌种按 质量比1: 8接种至PDA培养基中, 2328培养35天, 取菌径最大的菌落划线接种至PD。
4、A培养 基中, 2328纯化培养12天, 重复划线接种23次, 取纯化菌落接种至PDA液体培养基中, 80r/min、 2528扩大培养45天, 离心, 取沉淀菌丝体, 将氯仿与甲醇按质量比1: 1混合, 得 到洗涤液, 取洗涤液洗涤沉淀菌丝体12次, 再经丙酮洗涤23次, 真空干燥, 取干燥菌丝体 按质量比1: 8加入无菌水研磨, 再加入无菌水质量810%的浓度为1mol/L的盐酸溶液, 搅拌 2030min, 调节pH至77.2, 得抗病诱导剂。 3.根据权利要求2所述的果树伤口愈合剂, 其特征在于, 所述菌种是刮取果树伤口腐烂 处病斑, 按质量比1: 9加入生理盐水, 超声振荡2030m。
5、in, 即得菌种。 4.根据权利要求1所述的果树伤口愈合剂, 其特征在于, 所述促生长剂是取新鲜的海藻 洗净, 按质量比1: 2加入蒸馏水混合, 匀浆, 取匀浆液按质量比20: 1: 80加入2,6-二叔丁基- 4-甲基苯酚和质量分数为90 %甲醇溶液, 磁力搅拌, 浸提34h, 抽滤, 取滤液, 于3035减 压浓缩, 取减压浓缩物按质量比1: 8: 10加入浓度为0.1mol/ L柠檬酸钠缓冲液和质量分数 为80%的甲醇溶液混合, 用石油醚萃取23次, 合并萃取液, 旋转蒸发, 干燥, 得促生长剂。 5.根据权利要求1所述的果树伤口愈合剂, 其特征在于, 所述果树营养素是按质量份数 计, 。
6、1215份苦参, 23份蜂蜜, 810份竹醋液, 68份红糖, 升温至5060搅拌混合12h, 得 果树营养素。 6.根据权利要求1所述的果树伤口愈合剂, 其特征在于, 所述粘合剂是将聚乙烯醇按质 量比 1 9加入水混合, 升温至8590保持2030 min, 得混合液A, 将魔芋精粉按质量比1: 8: 4加入质量分数为1%的冰醋酸和壳聚糖, 混合搅拌12h, 得混合液B, 取混合液A按质量比 1: 2加入混合液B中, 调节pH至45, 搅拌混合0.51h, 得粘合剂。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 108077323 A 2 一种果树伤口愈合剂 技术领域 0001 本发明涉及树木。
7、保护修复领域, 具体涉及了一种果树伤口愈合剂。 背景技术 0002 随着农业现代化的发展, 果树作为农业的支柱产业之一有着广阔的发展前景, 相 应的果树的管理技术也需不断提高。 在现有技术中, 为了发展果树新品系, 提高果品的品质 和产量, 通常要进行嫁接甚至换头来实现, 但是在果树嫁接或是换头后造成的果树伤口, 紧 靠果树自身愈合慢, 有的采用塑料布或是泥土封口, 其效果差, 易受到病虫危害, 在夏季新 生枝头极易被大风刮断, 给果树的生长造成损害; 再者为了促进苹果、 梨等果树花芽分化, 提高枣树的座果率和产量, 通常采用树体环剥技术, 即在树体的树干或主枝上环状剥去一 定宽度的韧皮部 (。
8、俗称开甲) , 它主要是阻碍树冠产生的光合营养物质向根部输送的通道, 树上部碳水化物得到积累, 对促进花芽分化和提高座果率非常有利。 但当环剥口宽度太宽 或树体营养不良时, 往往不能按期愈合, 引起树势衰弱, 严重时会出现死枝或死树现象。 0003 此外, 近几年来果树修剪整形技术得到极大的推广应用, 增加了产量, 提高了产品 品质, 给果农带来了大量的经济效益。 但是在果树整形的过程中要产生大量的剪切口和伤 疤, 如果这些伤疤和伤口如果不能针对性的处理则会带来一系列的问题, 首先水份和营养 流失有可能造成枝条干枯, 甚至整个树干枯。 其次, 伤口处感染病菌而腐烂, 腐烂病是果树 的一种主要病。
9、害, 常造成树势衰弱, 枝干残缺, 整株死亡, 危害比较大。 对于广大的果农来 说, 处理这类问题的办法一般是用土办法, 如牛粪碱水、 蒜泥、 土泥、 保护药剂、 封剪油等进 行处理, 效果都不太理想, 伤口愈合慢易感病。 0004 但是目前, 市场上出售的各种植物伤口愈合剂、 愈合膏等, 不仅商品价格高, 使用 后伤口愈合和杀菌防病效果不佳, 有的甚至起不到促进伤口愈合和消毒杀菌作用。 并且目 前市面上的植物伤口保护剂、 愈合剂、 愈合膏等, 往往宣称涂抹后的维持时间在730天左 右, 但一般在7天10天左右时, 无法维持较好的保护、 愈合效果, 杀虫菌效果下降, 伤口处易 干裂, 使得树木。
10、无法完全愈合。 此外, 对于病虫危害造成树干腐烂较严重并产生洞孔的树木 部位, 因为虫害蛀入木质部造成树干上有洞孔较深, 虽然施杀虫剂控制杀死了害虫, 但由于 虫孔感染病菌引起树皮和木质部局部腐烂, 腐烂感染面积较大, 同时又具有孔洞, 容易干 裂, 前述市面上的各种植物伤口愈合剂、 愈合膏不能对这种情况起到一个较好的愈合效果。 0005 综上所述, 现在已知的树木伤口保护剂等产品, 对于树木因虫害、 腐烂、 修剪伤口 等处理无法达到一个较完整良好的保护效果。 0006 因此, 我们有必要重新制备出一种新型的果树伤口保护剂, 以此来解决现如今市 场上的果树伤口保护剂所存在的问题, 以此来适应于。
11、社会与有关部门的需求, 这也是一件 十分有意义的事情。 发明内容 0007 本发明所要解决的技术问题: 针对目前果树伤口愈合剂愈合效果差, 且有效时间 说 明 书 1/7 页 3 CN 108077323 A 3 较短的问题, 提供一种果树伤口愈合剂。 0008 为解决上述技术问题, 本发明采用如下所述的技术方案是: 一种果树伤口愈合剂, 按质量份数计, 包括1215份抗病诱导剂, 810份促生长剂, 20 30份果树营养素, 1518份粘合剂。 0009 所述抗病诱导剂是挑取菌种按质量比1: 8接种至PDA培养基中, 2328培养35 天, 取菌径最大的菌落划线接种至PDA培养基中, 232。
12、8纯化培养12天, 重复划线接种23 次, 取纯化菌落接种至PDA液体培养基中, 80r/min、 2528扩大培养45天, 离心, 取沉淀菌 丝体, 将氯仿与甲醇按质量比1: 1混合, 得到洗涤液, 取洗涤液洗涤沉淀菌丝体12次, 再经 丙酮洗涤23次, 真空干燥, 取干燥菌丝体按质量比1: 8加入无菌水研磨, 再加入无菌水质量 810%的浓度为1mol/L的盐酸溶液, 搅拌2030min, 调节pH至77.2, 得抗病诱导剂。 0010 所述菌种是刮取果树伤口腐烂处病斑, 按质量比1: 9加入生理盐水, 超声振荡20 30min, 即得菌种。 0011 所述促生长剂是取新鲜的海藻洗净, 按。
13、质量比1: 2加入蒸馏水混合, 匀浆, 取匀浆 液按质量比20: 1: 80加入2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚和质量分数为90 %甲醇溶液, 磁力搅 拌, 浸提34h, 抽滤, 取滤液, 于3035减压浓缩, 取减压浓缩物按质量比1: 8: 10加入浓度 为0.1mol/ L柠檬酸钠缓冲液和质量分数为80%的甲醇溶液混合, 用石油醚萃取23次, 合并 萃取液, 旋转蒸发, 干燥, 得促生长剂。 0012 所述果树营养素是按质量份数计, 1215份苦参, 23份蜂蜜, 810份竹醋液, 68份 红糖, 升温至5060搅拌混合12h, 得果树营养素。 0013 所述粘合剂是将聚乙烯醇按质量比 1 。
14、9加入水混合, 升温至8590保持2030 min, 得混合液A, 将魔芋精粉按质量比1: 8: 4加入质量分数为1%的冰醋酸和壳聚糖, 混合搅 拌12h, 得混合液B, 取混合液A按质量比1: 2加入混合液B中, 调节pH至45, 搅拌混合0.5 1h, 得粘合剂。 0014 本发明与其他方法相比, 有益技术效果是: (1) 本发明从果树伤口处提取有益菌丝, 制成抗病诱导剂, 其主要成分除菌丝壁多糖和 菌丝体内含物等物质外, 还有酸解的多糖片段, 使果树伤口处启动一系列的生理生化反应, 开启抗病相关基因, 表达与抗病有关的酶和蛋白, 调控抗病物质的产生, 综合时间上和空间 上表现的结果, 达。
15、到抗病的目的, 低聚糖为生物活性分子, 不污染环境, 易分解, 有广谱性的 抵抗病菌的功效; (2) 本发明提取海藻中的活性成分细胞分裂素能够促进果树的促进叶绿素的生物合 成、 促进细胞分裂, 可以在愈伤组织上会产生分生组织细胞, 这些细胞进一步分裂, 进而产 生芽、 茎和叶子, 另一方面可以刺激果树的生长和发育, 改进植物与环境的互作关系, 增强 植物的抗胁迫能力, 增强果树的免疫能力; (3) 苦参有驱虫功效, 蜂蜜增强果树伤口滋润度, 防止干裂, 红糖被果树吸收可以增强 果树叶片厚度、 抗性, 提高果实品质, 特别是果实含糖量和贮运性, 竹醋液一方面促进果树 伤口细胞分裂, 促进伤口愈合。
16、, 另一方面可以防菌抗菌, 有很好的促进有益伤口愈合的活性 成分渗入果树伤口处; (4) 本发明通过将魔芋精粉、 壳聚糖、 聚乙烯醇三者结合, 制成一种粘胶剂, 界面粘结良 好, 且胶膜表面致密, 明显了改善了双螺旋结构, 有效的提高其耐水性能, 一方面将促果树 说 明 书 2/7 页 4 CN 108077323 A 4 伤口愈合的营养物质更好的附着于果树伤口表面, 使营养成分不易流失挥发, 增加了愈合 效率, 在果树伤口外面形成保护层, 有效的抗冻防裂, 更好的呵护果树, 另一方面可降解, 其 中的活性基团与杨木中的纤维素和半纤维素上的羟基发生了作用, 从而使果树内部结构更 致密, 有效的。
17、锁住了果树伤口愈合有效成分和促生长成分, 提高了果树的品质。 0015 (5) 本发明加入抗菌功能性物质, 抵抗伤口处的感染, 其次通过提高果树自身细胞 分裂, 促进伤口的加快愈合和生长, 加入营养素, 补充伤口处所需的营养物质, 最后将有效 成分有效附着于伤口表面, 提高愈合效率, 延长了果树伤口愈合剂的有效时间。 具体实施方式 0016 菌种: 刮取果树伤口腐烂处病斑, 按质量比1: 9加入生理盐水, 超声振荡2030min, 即得菌种。 0017 竹醋液: 购于宜丰县方胜竹业有限公司。 0018 抗病诱导剂: 挑取菌种按质量比1: 8接种至PDA培养基中, 2328培养35天, 取菌 径。
18、最大的菌落划线接种至PDA培养基中, 2328纯化培养12天, 重复划线接种23次, 取纯 化菌落接种至PDA液体培养基中, 80r/min、 2528扩大培养45天, 离心, 取沉淀菌丝体, 将 氯仿与甲醇按质量比1: 1混合, 得到洗涤液, 取洗涤液洗涤沉淀菌丝体12次, 再经丙酮洗涤 23次, 真空干燥, 取干燥菌丝体按质量比1: 8加入无菌水研磨, 再加入无菌水质量810%的 浓度为1mol/L的盐酸溶液, 搅拌2030min, 调节pH至77.2, 得抗病诱导剂。 0019 促生长剂: 取新鲜的海藻洗净, 按质量比1: 2加入蒸馏水混合, 匀浆, 取匀浆液按质 量比20: 1: 80。
19、加入2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚和质量分数为90 %甲醇溶液, 磁力搅拌, 浸提3 4h, 抽滤, 取滤液, 于3035减压浓缩, 取减压浓缩物按质量比1: 8: 10加入浓度为0.1mol/ L柠檬酸钠缓冲液和质量分数为80%的甲醇溶液混合, 用石油醚萃取23次, 合并萃取液, 旋 转蒸发, 干燥, 得促生长剂。 0020 果树营养素: 按质量份数计, 1215份苦参, 23份蜂蜜, 810份竹醋液, 68份红糖 混合, 升温至5060搅拌混合12h, 得果树营养素。 0021 粘合剂: 将聚乙烯醇按质量比 1 9加入纯水混合, 升温至8590保持2030 min, 得混合液A, 将魔芋精。
20、粉按质量比1: 8: 4加入质量分数为1%的冰醋酸和壳聚糖, 混合搅拌1 2h, 得混合液B, 取混合液A按质量比1: 2加入混合液B中, 调节pH至45, 搅拌混合0.51h, 得 粘合剂。 0022 一种果树伤口愈合剂, 按质量份数计, 包括1215份抗病诱导剂, 810份促生长剂, 2030份果树营养素, 1518份粘合剂混合, 即得。 0023 实施例1 菌种: 刮取果树伤口腐烂处病斑, 按质量比1: 9加入生理盐水, 超声振荡20min, 即得菌 种。 0024 竹醋液: 购于宜丰县方胜竹业有限公司。 0025 抗病诱导剂: 挑取菌种按质量比1: 8接种至PDA培养基中, 23培养3。
21、天, 取菌径最 大的菌落划线接种至PDA培养基中, 23纯化培养1天, 重复划线接种2次, 取纯化菌落接种 至PDA液体培养基中, 80r/min、 25扩大培养4天, 离心, 取沉淀菌丝体, 将氯仿与甲醇按质 量比1: 1混合, 得到洗涤液, 取洗涤液洗涤沉淀菌丝体1次, 再经丙酮洗涤2次, 真空干燥, 取 说 明 书 3/7 页 5 CN 108077323 A 5 干燥菌丝体按质量比1: 8加入无菌水研磨, 再加入无菌水质量8%的浓度为1mol/L的盐酸溶 液, 搅拌20min, 调节pH至7, 得抗病诱导剂。 0026 促生长剂: 取新鲜的海藻洗净, 按质量比1: 2加入蒸馏水混合, 。
22、匀浆, 取匀浆液按质 量比20: 1: 80加入2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚和质量分数为90 %甲醇溶液, 磁力搅拌, 浸提 3h, 抽滤, 取滤液, 于30减压浓缩, 取减压浓缩物按质量比1: 8: 10加入浓度为0.1mol/ L柠 檬酸钠缓冲液和质量分数为80%的甲醇溶液混合, 用石油醚萃取2次, 合并萃取液, 旋转蒸 发, 干燥, 得促生长剂。 0027 果树营养素: 按质量份数计, 12份苦参, 2份蜂蜜, 8份竹醋液, 6份红糖混合, 升温至 5060搅拌混合1h, 得果树营养素。 0028 粘合剂: 将聚乙烯醇按质量比 1 9加入纯水混合, 升温至85保持20 min, 得混合。
23、 液A, 将魔芋精粉按质量比1: 8: 4加入质量分数为1%的冰醋酸和壳聚糖, 混合搅拌1h, 得混合 液B, 取混合液A按质量比1: 2加入混合液B中, 调节pH至4, 搅拌混合0.5h, 得粘合剂。 0029 一种果树伤口愈合剂, 按质量份数计, 包括12份抗病诱导剂, 8份促生长剂, 20份果 树营养素, 15份粘合剂混合, 即得。 0030 实施例2 菌种: 刮取果树伤口腐烂处病斑, 按质量比1: 9加入生理盐水, 超声振荡25min, 即得菌 种。 0031 竹醋液: 购于宜丰县方胜竹业有限公司。 0032 抗病诱导剂: 挑取菌种按质量比1: 8接种至PDA培养基中, 25培养4天,。
24、 取菌径最 大的菌落划线接种至PDA培养基中, 25纯化培养1天, 重复划线接种2次, 取纯化菌落接种 至PDA液体培养基中, 80r/min、 26扩大培养4天, 离心, 取沉淀菌丝体, 将氯仿与甲醇按质 量比1: 1混合, 得到洗涤液, 取洗涤液洗涤沉淀菌丝体1次, 再经丙酮洗涤2次, 真空干燥, 取 干燥菌丝体按质量比1: 8加入无菌水研磨, 再加入无菌水质量9%的浓度为1mol/L的盐酸溶 液, 搅拌25min, 调节pH至7.1, 得抗病诱导剂。 0033 促生长剂: 取新鲜的海藻洗净, 按质量比1: 2加入蒸馏水混合, 匀浆, 取匀浆液按质 量比20: 1: 80加入2,6-二叔丁。
25、基-4-甲基苯酚和质量分数为90 %甲醇溶液, 磁力搅拌, 浸提 4h, 抽滤, 取滤液, 于33减压浓缩, 取减压浓缩物按质量比1: 8: 10加入浓度为0.1mol/ L柠 檬酸钠缓冲液和质量分数为80%的甲醇溶液混合, 用石油醚萃取2次, 合并萃取液, 旋转蒸 发, 干燥, 得促生长剂。 0034 果树营养素: 按质量份数计, 13份苦参, 2份蜂蜜, 9份竹醋液, 7份红糖混合, 升温至 55搅拌混合1h, 得果树营养素。 0035 粘合剂: 将聚乙烯醇按质量比 1 9加入纯水混合, 升温至87保持25 min, 得混合 液A, 将魔芋精粉按质量比1: 8: 4加入质量分数为1%的冰醋。
26、酸和壳聚糖, 混合搅拌1h, 得混合 液B, 取混合液A按质量比1: 2加入混合液B中, 调节pH至4, 搅拌混合0.7h, 得粘合剂。 0036 一种果树伤口愈合剂, 按质量份数计, 包括13份抗病诱导剂, 9份促生长剂, 25份果 树营养素, 17份粘合剂混合, 即得。 0037 实施例3 菌种: 刮取果树伤口腐烂处病斑, 按质量比1: 9加入生理盐水, 超声振荡30min, 即得菌 种。 说 明 书 4/7 页 6 CN 108077323 A 6 0038 竹醋液: 购于宜丰县方胜竹业有限公司。 0039 抗病诱导剂: 挑取菌种按质量比1: 8接种至PDA培养基中, 28培养5天, 取。
27、菌径最 大的菌落划线接种至PDA培养基中, 28纯化培养2天, 重复划线接种3次, 取纯化菌落接种 至PDA液体培养基中, 80r/min、 28扩大培养5天, 离心, 取沉淀菌丝体, 将氯仿与甲醇按质 量比1: 1混合, 得到洗涤液, 取洗涤液洗涤沉淀菌丝体2次, 再经丙酮洗涤3次, 真空干燥, 取 干燥菌丝体按质量比1: 8加入无菌水研磨, 再加入无菌水质量810%的浓度为1mol/L的盐酸 溶液, 搅拌30min, 调节pH至7.2, 得抗病诱导剂。 0040 促生长剂: 取新鲜的海藻洗净, 按质量比1: 2加入蒸馏水混合, 匀浆, 取匀浆液按质 量比20: 1: 80加入2,6-二叔丁。
28、基-4-甲基苯酚和质量分数为90 %甲醇溶液, 磁力搅拌, 浸提 4h, 抽滤, 取滤液, 于35减压浓缩, 取减压浓缩物按质量比1: 8: 10加入浓度为0.1mol/ L柠 檬酸钠缓冲液和质量分数为80%的甲醇溶液混合, 用石油醚萃取3次, 合并萃取液, 旋转蒸 发, 干燥, 得促生长剂。 0041 果树营养素: 按质量份数计, 15份苦参, 3份蜂蜜, 10份竹醋液, 8份红糖混合, 升温 至60搅拌混合2h, 得果树营养素。 0042 粘合剂: 将聚乙烯醇按质量比 1 9加入纯水混合, 升温至90保持30 min, 得混合 液A, 将魔芋精粉按质量比1: 8: 4加入质量分数为1%的冰。
29、醋酸和壳聚糖, 混合搅拌2h, 得混合 液B, 取混合液A按质量比1: 2加入混合液B中, 调节pH至5, 搅拌混合1h, 得粘合剂。 0043 一种果树伤口愈合剂, 按质量份数计, 包括15份抗病诱导剂, 10份促生长剂, 30份 果树营养素, 18份粘合剂混合, 即得。 0044 对比例1 菌种: 刮取果树伤口腐烂处病斑, 按质量比1: 9加入生理盐水, 超声振荡30min, 即得菌 种。 0045 竹醋液: 购于宜丰县方胜竹业有限公司。 0046 促生长剂: 取新鲜的海藻洗净, 按质量比1: 2加入蒸馏水混合, 匀浆, 取匀浆液按质 量比20: 1: 80加入2,6-二叔丁基-4-甲基苯。
30、酚和质量分数为90 %甲醇溶液, 磁力搅拌, 浸提 4h, 抽滤, 取滤液, 于35减压浓缩, 取减压浓缩物按质量比1: 8: 10加入浓度为0.1mol/ L柠 檬酸钠缓冲液和质量分数为80%的甲醇溶液混合, 用石油醚萃取3次, 合并萃取液, 旋转蒸 发, 干燥, 得促生长剂。 0047 果树营养素: 按质量份数计, 15份苦参, 3份蜂蜜, 10份竹醋液, 8份红糖混合, 升温 至60搅拌混合2h, 得果树营养素。 0048 粘合剂: 将聚乙烯醇按质量比 1 9加入纯水混合, 升温至90保持30 min, 得混合 液A, 将魔芋精粉按质量比1: 8: 4加入质量分数为1%的冰醋酸和壳聚糖,。
31、 混合搅拌2h, 得混合 液B, 取混合液A按质量比1: 2加入混合液B中, 调节pH至5, 搅拌混合1h, 得粘合剂。 0049 一种果树伤口愈合剂, 按质量份数计, 包括10份促生长剂, 30份果树营养素, 18份 粘合剂混合, 即得。 0050 对比例2 菌种: 刮取果树伤口腐烂处病斑, 按质量比1: 9加入生理盐水, 超声振荡30min, 即得菌 种。 0051 竹醋液: 购于宜丰县方胜竹业有限公司。 说 明 书 5/7 页 7 CN 108077323 A 7 0052 抗病诱导剂: 挑取菌种按质量比1: 8接种至PDA培养基中, 28培养5天, 取菌径最 大的菌落划线接种至PDA培。
32、养基中, 28纯化培养2天, 重复划线接种3次, 取纯化菌落接种 至PDA液体培养基中, 80r/min、 28扩大培养5天, 离心, 取沉淀菌丝体, 将氯仿与甲醇按质 量比1: 1混合, 得到洗涤液, 取洗涤液洗涤沉淀菌丝体2次, 再经丙酮洗涤3次, 真空干燥, 取 干燥菌丝体按质量比1: 8加入无菌水研磨, 再加入无菌水质量810%的浓度为1mol/L的盐酸 溶液, 搅拌30min, 调节pH至7.2, 得抗病诱导剂。 0053 粘合剂: 将聚乙烯醇按质量比 1 9加入纯水混合, 升温至90保持30 min, 得混合 液A, 将魔芋精粉按质量比1: 8: 4加入质量分数为1%的冰醋酸和壳聚。
33、糖, 混合搅拌2h, 得混合 液B, 取混合液A按质量比1: 2加入混合液B中, 调节pH至5, 搅拌混合1h, 得粘合剂。 0054 一种果树伤口愈合剂, 按质量份数计, 包括15份抗病诱导剂, 30份果树营养素, 18 份粘合剂混合, 即得。 0055 对比例3 菌种: 刮取果树伤口腐烂处病斑, 按质量比1: 9加入生理盐水, 超声振荡30min, 即得菌 种。 0056 竹醋液: 购于宜丰县方胜竹业有限公司。 0057 抗病诱导剂: 挑取菌种按质量比1: 8接种至PDA培养基中, 28培养5天, 取菌径最 大的菌落划线接种至PDA培养基中, 28纯化培养2天, 重复划线接种3次, 取纯化。
34、菌落接种 至PDA液体培养基中, 80r/min、 28扩大培养5天, 离心, 取沉淀菌丝体, 将氯仿与甲醇按质 量比1: 1混合, 得到洗涤液, 取洗涤液洗涤沉淀菌丝体2次, 再经丙酮洗涤3次, 真空干燥, 取 干燥菌丝体按质量比1: 8加入无菌水研磨, 再加入无菌水质量810%的浓度为1mol/L的盐酸 溶液, 搅拌30min, 调节pH至7.2, 得抗病诱导剂。 0058 促生长剂: 取新鲜的海藻洗净, 按质量比1: 2加入蒸馏水混合, 匀浆, 取匀浆液按质 量比20: 1: 80加入2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚和质量分数为90 %甲醇溶液, 磁力搅拌, 浸提 4h, 抽滤, 取滤液,。
35、 于35减压浓缩, 取减压浓缩物按质量比1: 8: 10加入浓度为0.1mol/ L柠 檬酸钠缓冲液和质量分数为80%的甲醇溶液混合, 用石油醚萃取3次, 合并萃取液, 旋转蒸 发, 干燥, 得促生长剂。 0059 果树营养素: 按质量份数计, 15份苦参, 3份蜂蜜, 10份竹醋液, 8份红糖混合, 升温 至60搅拌混合2h, 得果树营养素。 0060 一种果树伤口愈合剂, 按质量份数计, 包括15份抗病诱导剂, 10份促生长剂, 30份 果树营养素, 即得。 0061 对比例4: 广州某生物科技有限公司生产的果树伤口愈合剂 方法: 以苹果树为例, 分7组, 分别为700棵苹果树嫁接, 以红富士苹果一年生枝条为接 穗进行嫁接改造, 当接穗嫁接到砧木后伤口涂上述实施例与对比例所制备的果树伤口愈合 剂, 包扎缚紧, 等待相同时间后, 检测其性能。 0062 果树伤口愈合剂具体检测情况如表1 表1 说 明 书 6/7 页 8 CN 108077323 A 8 由上可知, 本发明所制备的果树伤口愈合剂具有防病虫能力强、 效果突出、 安全性高的 优点, 涂抹于因剪口、 锯口、 环剥口及病害造成的树体伤口后可有效地保护伤口、 促进伤口 快速愈合, 对果树伤口的保护有特效。 是一种安全且高效的果树伤口愈合剂, 值得推广和使 用。 说 明 书 7/7 页 9 CN 108077323 A 9 。