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1、10申请公布号CN104212740A43申请公布日20141217CN104212740A21申请号201410399837822申请日20140814CGMCCNO927520140605C12N1/20200601A23L1/30200601A61K35/74200601A61P3/04200601C12R1/24520060171申请人任发政地址100083北京市海淀区清华东路17号中国农业大学72发明人孙晶任发政郭慧媛赵亮74专利代理机构北京润平知识产权代理有限公司11283代理人李婉婉金迪54发明名称干酪乳杆菌及其应用以及功能食品组合物57摘要本发明公开了一种干酪乳杆菌LACTOB。
2、ACILLUSCASEI，所述干酪乳杆菌的保藏编号为CGMCCNO9275。其次，本发明公开了一种功能食品组合物，该功能食品组合物含有所述干酪乳杆菌的菌体和食物。再者，本发明公开了所述干酪乳杆菌在制备具有减肥功能的功能食品组合物中的应用以及在制备用于治疗肥胖症的药物中的应用。本发明的干酪乳杆菌具有良好的减肥作用。83生物保藏信息51INTCL权利要求书1页说明书7页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书7页10申请公布号CN104212740ACN104212740A1/1页21一种干酪乳杆菌LACTOBACILLUSCASEI，其特征在于，该干酪乳杆菌的保藏编号。
3、为CGMCCNO9275。2一种功能食品组合物，其特征在于，该功能食品组合物含有权利要求1所述的干酪乳杆菌的菌体和食物。3根据权利要求2所述的功能食品组合物，其中，所述干酪乳杆菌的菌体为干酪乳杆菌的活菌体和/或死菌体。4根据权利要求2或3所述的功能食品组合物，其中，所述干酪乳杆菌的菌体为干酪乳杆菌的活菌体。5根据权利要求24中任意一项所述的功能食品组合物，其中，以所述功能食品组合物的总重量为基准，所述干酪乳杆菌的菌体的添加量为1051010CFU/G，优选为1081010CFU/G。6权利要求1所述的干酪乳杆菌在制备具有减肥功能的功能食品组合物中的应用。7权利要求1所述的干酪乳杆菌在制备用于治。
4、疗肥胖症的药物中的应用。权利要求书CN104212740A1/7页3干酪乳杆菌及其应用以及功能食品组合物技术领域0001本发明涉及一种干酪乳杆菌LACTOBACILLUSCASEI及其应用以及功能食品组合物，具体地，涉及一种干酪乳杆菌，含有该干酪乳杆菌的功能食品组合物，以及该干酪乳杆菌在制备具有减肥功能的功能食品中的应用。背景技术0002肥胖症是一组常见的、古老的代谢症群。当人体进食热量多于消耗热量时，多余热量以脂肪形式储存于体内，其量超过正常生理需要量，且达一定值时遂演变为肥胖症。肥胖症是最主要的可预防性致死因素之一。大量美国和欧洲的研究表明肥胖症的致死率随身体质量指数BMI而异。非吸烟者中。
5、BMI在2124之间的以及吸烟者中BMI在2427之间的死亡率最低，BMI增加或者减少都会引起死亡率升高。肥胖症所导致的死亡率升高在仍在吸烟的，曾经吸烟现已戒断的，或者从未吸烟的患者中无显著区别。BMI大于32可导致死亡率加倍。美国每年因肥胖症而增加的死亡人数在111999到365000之间。肥胖症使预期寿命平均减少67年。其中严重肥胖症BMI40使男性预期寿命减少20年，女性减少5年。0003目前肥胖症的治疗手段主要有药物治疗、手术治疗和饮食干预三种方式。药物治疗中的抑制食欲药物，如右旋苯丙胺、西布曲明和右旋芬氟拉明对身体有严重的副作用，甚至出现死亡病例的报道。抑制脂肪吸收药物主要为奥利司他。
6、，是目前唯一的非中枢神经作用的减肥药物，它能够特异性地抑制胃肠道内的胰脂肪酶活性，从而抑制肠道内食物脂肪的分解，使1/3的脂肪从粪便中排除。该药物也有一定副作用，如抑制脂溶性维生素的水解和吸收，导致严重的排便紧迫。增加能量消耗的药物通过增加代谢率达到降低体重的目的，但是由于其毒副作用大，并不建议采用。外科手术法治疗肥胖症仅适用于严重的肥胖症患者，且有术后可能出现感染、顽固性呕吐、食管反流、营养不良等副作用。与以上两种方式相比，饮食干预是一种安全、健康的减肥方式。肥胖患者可以通过限制每日摄入的能量，调节饮食结构，少食高糖高脂的食物，并增加体育锻炼来达到减肥目的。0004干酪乳杆菌进入人体后可以在。
7、肠道内大量存活，起到调节肠内菌群平衡、促进人体消化吸收等作用。同时，干酪乳杆菌具有高效降血压、降胆固醇，促进细胞分裂，产生抗体免疫，增强人体免疫及预防癌症和抑制肿瘤生长等功能；还具有缓解乳糖不耐症、过敏等益生保健作用。近年来，由于干酪乳杆菌对其宿主营养、免疫、防病等具有显著的益生功效，越来越成为人们研究、开发、生产的焦点。而对于干酪乳杆菌在减肥方面的应用有待进一步研究。发明内容0005本发明的目的是提供一种具有减肥功能的干酪乳杆菌。0006为了实现上述目的，第一方面，本发明提供了一种干酪乳杆菌LACTOBACILLUSCASEI，所述干酪乳杆菌的保藏编号为CGMCCNO9275。说明书CN10。
8、4212740A2/7页40007第二方面，本发明提供了一种功能食品组合物，该功能食品组合物含有第一方面所述的干酪乳杆菌的菌体和食物。0008第三方面，本发明提供了第一方面所述的干酪乳杆菌在制备具有减肥功能的功能食品组合物中的应用。0009第四方面，本发明提供了第一方面所述的干酪乳杆菌在制备用于治疗肥胖症的药物中的应用。0010本发明提供的干酪乳杆菌具有良好的减肥作用。0011本发明的其它特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。0012生物保藏0013本发明的干酪乳杆菌LACTOBACILLUSCASEI，于2014年6月5日被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心地址北京。
9、市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码100101保藏单位的缩写为CGMCC，保藏编号为CGMCCNO9275。具体实施方式0014以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。0015本发明提供了一种干酪乳杆菌LACTOBACILLUSCASEI，其中，该干酪乳杆菌的保藏编号为CGMCCNO9275。0016本发明的干酪乳杆菌从干酪中分离得到。而且，本发明的干酪乳杆菌菌株具有良好的发酵性能，且能够耐受人体胃肠道环境，到达肠道发挥其生理功能。本发明的干酪乳杆菌菌株在调节免疫、调节肠道菌群和促进肠道。
10、健康等方面具有显著的效果。0017本发明提供的干酪乳杆菌经过液体培养能够产生大量干酪乳杆菌的活菌体，所述培养的方法没有特别的要求，只要是能使所述干酪乳杆菌增殖即可，例如可以按照1068CFU/ML的接种量将干酪乳杆菌的活菌体接种于乳杆菌培养基中，并且在厌氧或好氧的条件下，在1538的温度下培养872小时后，得到培养液。所述乳杆菌的培养基可以为本领域公知的各种适合乳杆菌培养的培养基，例如可以为乳汁和/或乳酸菌生物学基础及应用杨洁彬，轻工业出版社，1996年出版中所述的乳酸菌MRS培养基。0018本发明可以进一步分离上述培养液中的干酪乳杆菌的活菌体，所述分离的方法没有特别的限制，只要是能从培养液中。
11、富集菌体即可，例如可以通过离心和/或过滤的方法实现，所述离心和所述过滤的条件可以为公知的条件，本发明在此不再赘述。0019第二方面，本发明提供了一种功能食品组合物，其中，该功能食品组合物含有第一方面所述的干酪乳杆菌的菌体和食物。0020本发明的发明人在研究中发现，无论是干酪乳杆菌的活菌体还是干酪乳杆菌的死菌体，或是干酪乳杆菌的活菌体和死菌体的混合菌体均具有良好的减肥功效，因此本发明提供的功能食品组合物含有食物和干酪乳杆菌的活菌体和/或死菌体。优选地，为了进一步增强干酪乳杆菌的减肥效果，使用干酪乳杆菌的活菌体。0021根据本发明，所述干酪乳杆菌的死菌体的制备方法没有特别的限制，即，可以通过常规的。
12、方法获得。例如，可以将上述培养后的干酪乳杆菌的活菌体加热致死，也可以将其辐说明书CN104212740A3/7页5射致死。所述加热致死的条件可以包括温度为6585，时间为0515H。0022根据本发明，尽管将干酪乳杆菌的菌体添加到食物中，即可实现本发明的目的，即起到减肥的作用，但优选情况下，以功能食品组合物的总重量为基准，所述干酪乳杆菌的菌体的添加量为1051010CFU/G，优选为1081010CFU/G。在上述优选情况下，功能食品组合物的减肥效果更显著。0023CFUCOLONYFORMINGUNITS，菌落形成单位指活菌个数。在活菌培养计数时，由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上。
13、生长繁殖所形成的集落，称为菌落形成单位，以其表达活菌的数量，可以通过平板菌落计数法获得。本发明中，当干酪乳杆菌的死菌体的浓度以CFU/ML表示时，是指将干酪乳杆菌的活菌体致死得到相应数量的死菌体，并将其溶于缓冲液中配制成所需浓度。0024本发明中，食物可以是任意类型的食物，例如果汁制品、乳制品、豆制品等。食物也可以根据食用对象的不同而有所不同。所述功能食品组合物中还可以含有常规的添加剂，例如香料、矿物质、维生素、稳定剂、增稠剂、防腐剂等。0025只要将本发明的干酪乳杆菌的菌体添加到食物中即可得到本发明的功能食品组合物。符合上述要求的功能食品组合物可以包括干酪乳杆菌的培养液例如经该干酪乳杆菌发酵。
14、制得的发酵乳制品、分离的干酪乳杆菌的菌体等。0026第三方面，本发明提供了如上所述的干酪乳杆菌在制备具有减肥功能的功能食品组合物中的应用。所述干酪乳杆菌的使用剂量可以为1061010CFU/KG体重/天。0027第四方面，本发明提供了如上所述的干酪乳杆菌在制备用于治疗肥胖症的药物中的应用。0028以下将通过实施例对本发明进行详细描述。以下制备例和实施例中0029实验动物雄性4周龄SPF级C57BL/6J小鼠，体重1415G，购自北京华阜康生物科技股份有限公司；饲养使用的无菌垫料购自中国军事科学医学院。实验饲料购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，分为维持饲料和高脂饲料40脂肪供能肥胖、胰岛素抵抗。
15、诱导模型饲料，经辐射灭菌，两种饲料配方如下表1所示0030表10031成分/供能比例维持饲料高脂饲料蛋白质G/100G205223脂肪G/100G462198碳水化合物G/100G525446蛋白质23820脂肪12140碳水化合物61140说明书CN104212740A4/7页6总能量KCAL/100G34544550032饲养条件温度202，湿度4050，12H光照交替，小鼠按照每笼3只饲养，自由摄入维持饲料，自由饮水，适应性饲养1周。0033实验菌株干酪乳杆菌L9为本发明的干酪乳杆菌，保藏编号为CGMCCNO9275。0034鼠李糖乳杆菌LACTOBACILLUSRHAMNOSUSGG，。
16、LGG，购自ATCC，ATCC编号为53103TM公认的具有良好减肥功效的益生菌菌株，作为本发明的对照菌株。0035MRS培养基PH65蛋白胨10G、牛肉膏10G、酵母膏5G、葡萄糖20G、吐温801ML、无水乙酸钠5G、K2HPO42G、柠檬酸铵2G、MGSO47H2O058G、MNSO4H2O02G、蒸馏水1000ML固体培养基加20G琼脂，121灭菌15MIN后备用，以上试剂均购自科百奥生物技术公司。0036数据的统计分析实验数据以平均值标准误MEANSE来表示，利用SPSS170软件分析。造模后正常组和造模组体重及摄食量的变化采用独立样本T进行分析，P005；死菌体组小鼠的血糖水平也显。
17、著下降P005。0072从以上实施例可以看出，本发明的干酪乳杆菌能够显著降低肥胖小鼠的体重增重、摄食量、脂肪含量、总胆固醇含量、总甘油三酯浓度和血糖浓度，说明本发明的干酪乳杆菌具有良好的减肥功效。而且，本发明的干酪乳杆菌的减肥效果优于LGG。0073以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。0074另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。0075此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。说明书CN104212740A。