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1、10申请公布号CN104054581A43申请公布日20140924CN104054581A21申请号201410330953422申请日20140714A01H4/0020060171申请人西北农林科技大学地址712100陕西省西安市杨凌示范区邰城路3号72发明人韩明玉韩静张东宋春晖王超赵彩平74专利代理机构北京科亿知识产权代理事务所普通合伙11350代理人汤东凤54发明名称一种苹果品种玉华早富快速繁殖的方法57摘要本发明公开了一种苹果品种玉华早富组培快繁的方法，该苹果品种玉华早富组培快繁的方法，通过采用培养基为MS6BA05MG/LIBA01MGPVP500MG/L的培养基初代培养、采用M。
2、S6BA05MG/LIBA01MG/L处理的继代培养、采用生根培养基1/2MSIBA08MG/L的生根培养、用纯锯末的炼苗移栽；实现了苹果品种玉华早富快速的繁殖，不仅保证了较高的成活率，而且也保留了品种的优良特性，为苹果产业的发展和进一步扩大提供了便捷的方法和途径。51INTCL权利要求书1页说明书4页附图1页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书4页附图1页10申请公布号CN104054581ACN104054581A1/1页21一种苹果品种玉华早富组培快繁的方法，其特征在于，该苹果品种玉华早富组培快繁的方法包括以下步骤步骤一，以苹果品种玉华早富为材料，用超声波。
3、清洗机清洗3MIN，再用无菌水冲洗34次，将处理好的嫩芽接种到MS6BA05MG/LIBA01MGPVP500MG/L的培养基中进行培养；每升培养基附加30G蔗糖，8G琼脂，然后放置在光照16H/D、光照2000LUX，26条件下进行培养；步骤二，将获得的无菌外植体接种到MS6BA05MG/LIBA01MG/L，光照2000LUX的培养基中进行继代培养，每升培养基附加30G蔗糖，8G琼脂；步骤三，选择继代培养获得的生长健壮，高度大于15CM的植株，生长时间为20天的芽子，接种于1/2MSIBA08MG/L生根培养基中进行生根培养，每升培养基附加30G蔗糖，8G琼脂。2如权利要求1所述的苹果品种。
4、玉华早富组培快繁的方法，其特征在于，在步骤五中，在步骤一超声波清洗机清洗之前，以苹果品种玉华早富为材料，选择生长健壮无病虫害的母树，于3月份剪取1年生枝条，放置25的温室内进行水培，水培为每升水含有30G蔗糖，每隔3D换一次水并剪掉水培枝条的旧剪口，当水培的一年生枝条上的芽抽生为1520CM时，剪取嫩芽，去除展开叶片，在自来水下冲洗68H，用75酒精处理8S，01升汞处理7MIN。3如权利要求1所述的苹果品种玉华早富组培快繁的方法，其特征在于，在步骤五中，在步骤三生根培养后，组培苗根长度达到2CM，移到室外遮阴炼苗1012天，然后将培养容器瓶口打开，自然光下进行开瓶炼苗24天后，将生根苗从培养。
5、基中取出，放入浓度为01多菌灵溶液中浸泡5MIN，并把根部多余的培养基清洗干净，最后用清水冲洗23次，然后用纯锯末移栽到的营养钵中。4如权利要求3所述的苹果品种玉华早富组培快繁的方法，其特征在于，在步骤五中，移栽苗的管理方式为移栽后将生根苗在遮阴网下进行管理，第一周采用浓度为01多菌灵溶液进行喷灌，第二周每天用水喷灌一次，保持基质湿润透气。待生根苗抽生出新芽之后即移出遮阴网。权利要求书CN104054581A1/4页3一种苹果品种玉华早富快速繁殖的方法技术领域0001本发明属于苹果苗木栽培技术领域，尤其涉及一种苹果品种玉华早富组培快繁的方法。背景技术0002苹果产业在中国农业经济中占有非常重要。
6、的地位，2013年中国苹果种植面积2253万公顷，产量为3170万吨。占世界总产量的1/2。品种结构不合理是我国苹果产业面临的突出问题，富士是我国苹果的第一大主栽品种，栽培面积占65以上国家苹果产业技术体系，内部数据。玉华早富为早熟的富士系品种，平均单果重与富士相当，但整齐度、优果率要比晚熟富士高。玉华早富树势强健，树冠扩展迅速，结果后树姿较开张。与晚熟长枝富士相比，具有较好的早果性，坐果率较高，正常管理条件下，高接树第二年平均株产35千克。玉华早富由于其良好的种植特性和果实特性在陕西黄土高原苹果产区得到大面积推广。苹果苗木是苹果生产栽培的基础，苗木的质量直接影响着苹果树体的生长、开花、结果以。
7、及抗逆性、抗病能力和寿命。苹果苗木是苹果生产栽培的基础，苗木的质量直接影响着苹果树体的生长、开花、结果以及抗逆性、抗病能力和寿命。良好的品种在苹果产业发展中显示出了巨大的作用。今后一段时期是我国苹果大规模更新换代的关键时期，如何从苗木方面提供支持和保障便成为一个值得高度重视的问题。本发明建立了一种苹果品种玉华早富快速繁殖组培快繁的方法，对于高效生产早熟苹果优质苗木，具有重要意义，市场前景广阔。发明内容0003本发明实施例的目的在于提供一种苹果品种玉华早富组培快繁的方法，旨在为我国苹果苗木的栽培提供一种组培快繁的方法，以加快我国苹果大规模更新换代。0004本发明实施例是这样实现的，一种苹果品种玉。
8、华早富组培快繁的方法，该苹果品种玉华早富组培快繁的方法包括以下步骤0005步骤一，以苹果品种玉华早富为材料，选择生长健壮无病虫害的母树，于3月份取1年生枝条，放置25的温室内进行水培，每升水含有30G蔗糖，每隔3D换一次水并剪掉旧剪口，当水培的一年生枝条上的芽抽生为1520CM时，剪取嫩芽，去除展开叶片，在自来水下冲洗68H，用75酒精处理8S，01升汞处理7MIN；0006步骤二，进行消毒处理后，用超声波清洗机清洗3MIN，再用无菌水冲洗34次，将处理好的嫩芽接种到MS6BA05MG/LIBA01MGPVP聚乙烯吡咯烷酮500MG/L的培养基中进行培养，每升培养基附加30G蔗糖，8G琼脂，然。
9、后放置在光照16H/D、光照2000LUX，26条件下进行培养；0007步骤三，将获得的玉华早富无菌外植体接种MS6BA05MG/LIBA01MG/L琼脂8G/L，光照2000LUX的培养基中进行继代培养，每升附加30G蔗糖，8G琼脂；0008步骤四，选择继代培养获得的生长健壮，高度大于15CM，生长时间为20天的芽说明书CN104054581A2/4页4子，接种于1/2MSIBA08MG/L蔗糖30G/L，琼脂8G/L生根培养基中进行生根培养；0009步骤五，当组培苗根长度达到2CM后，移到室外遮阴炼苗1012天左右，然后将培养容器瓶口打开，自然光下进行开瓶炼苗24天后，将生根苗从培养基中取。
10、出，放入浓度为01多菌灵溶液中浸泡5MIN，并把根部多余的培养基清洗干净，最后用清水冲洗23次，然后用纯锯末移栽到的营养钵中。0010进一步，在步骤五中，移栽苗的管理方式为移栽后将生根苗在遮阴网下进行管理，第一周采用浓度为01多菌灵溶液进行喷灌，第二周每天用水喷灌一次，保持基质湿润透气。待生根苗抽生出新芽之后即可移出遮阴网。0011本发明提供的苹果品种玉华早富组培快繁的方法，通过采用培养基为MS6BA05MG/LIBA01MGPVP500MG/L的培养基初代培养，成活率为274，有利于玉华早富组培苗的建立；采用MS6BA05MG/LIBA01MG/L处理的继代培养，扩繁系数高达686；采用生根。
11、培养基1/2MSIBA08MG/L的生根培养且生根率达50；用纯锯末进行炼苗移栽成活率达70；重复的对玉华早富品种进行继代培养，生根培养和移栽能够在较短的时间内实现苹果品种玉华早富无病毒苗木的快速的繁殖。本发明通过组织培养技术保留了品种的优良特性，有利于玉华早富优良品种的保存，为苹果玉华早富的无病毒苗木提供了高效便捷的繁育技术，促进苹果产业的进一步发展。附图说明0012图1是本发明实施例提供的苹果品种玉华早富组培快繁的方法流程图。具体实施方式0013为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并。
12、不用于限定本发明。0014下面结合附图及具体实施例对本发明的应用原理作进一步描述。0015如图1所示，本发明实施例的苹果品种玉华早富组培快繁的方法包括以下步骤0016S101以苹果品种玉华早富为材料，选择生长健壮无病虫害的母树，于3月份取1年生枝条，放置25的温室内进行水培，每升水含有30G蔗糖，每隔3D换一次水并剪掉旧剪口，当水培的一年生枝条上的芽抽生为1520CM时，剪取嫩芽，去除展开叶片，在自来水下冲洗68H，用75酒精处理8S，01升汞处理7MIN；0017S102进行消毒处理后，用超声波清洗机清洗3MIN，再用无菌水冲洗34次，将处理好的嫩芽接种到MS6BA05MG/LIBA01MG。
13、PVP聚乙烯吡咯烷酮500MG/L的培养基中进行培养，每升培养基附加30G蔗糖，8G琼脂，然后放置在光照16H/D、光照2000LUX，26条件下进行培养；0018S103将获得的玉华早富无菌外植体接种最优培养基处理，即MS6BA05MG/LIBA01MG/L琼脂8G/L，光照2000LUX的培养基中进行继代培养，每升附加30G蔗糖，8G琼脂；0019S104选择继代培养获得的生长健壮，高度大于15CM，生长时间为20天的芽子，接种于1/2MSIBA08MG/L蔗糖30G/L，琼脂8G/L生根培养基中进行生根培养；说明书CN104054581A3/4页50020S105当组培苗根长度达到2CM。
14、后，移到室外遮阴炼苗1012天左右，然后将培养容器瓶口打开，自然光下进行开瓶炼苗24天后，将生根苗从培养基中取出，放入浓度为01多菌灵溶液中浸泡5MIN，并把根部多余的培养基清洗干净，最后用清水冲洗23次，然后用纯锯末移栽到的营养钵中。0021在步骤S105中，移栽苗的管理方式为移栽后将生根苗在遮阴网下进行管理，第一周采用浓度为01多菌灵溶液进行喷灌，第二周每天用水喷灌一次，保持栽培基质湿润透气。待生根苗抽生出新芽之后即可移出遮阴网。0022本发明的具体步骤如下0023步骤一，初代培养0024苹果品种玉华早富为材料，选择生长健壮无病虫害的母树，于3月份取1年生枝条，放置25的温室内进行水培每升。
15、水含有30G蔗糖，每隔3D换一次水并剪掉旧剪口，当水培的一年生枝条上的芽抽生为1520CM时，剪取嫩芽，去除展开叶片，在自来水下冲洗68H，用75酒精处理8S，01升汞处理7MIN，进行消毒处理后，用超声波清洗机清洗3MIN，再用无菌水冲洗34次，将处理好的嫩芽接种到MS6BA05MG/LIBA01MG/L不同浓度处理0、03、05、07、10G/L的聚乙烯吡咯烷酮PVP的培养基中进行培养，每升培养基附加30G蔗糖，8G琼脂，每个三角瓶接3个芽，每处理15瓶，然后放置在光照16H/D、光照2000LUX，26条件下进行培养，14D后分别调查污染率、褐化率、成活率，得出玉华早富的初代培养是最适宜。
16、的培养基为MS6BA05MG/LIBA01MGPVP500MG/L蔗糖30G/L，琼脂8G/L；0025步骤二，继代培养0026将获得的无菌外植体接种到含有不同浓度6BA行继代培养，每升附加30G蔗糖，8G琼脂，每瓶3株，每个处理10瓶，重复3次，玉华早富的最优培养基为，即MS6BA05MG/LIBA01MG/L琼脂8G/L，光照2000LUX；0027步骤三，生根培养0028选择继代培养获得的生长健壮，高度大于15CM的植株，生长时间为20天的芽子，接种于1/2MS不同浓度IBA处理0、08、09、10、11MG/L的生根培养中进行生根培养，每瓶接种3个，每个处理10瓶，重复3次，得到玉华早。
17、富最适宜的生根培养基为1/2MSIBA08MG/L蔗糖30G/L，琼脂8G/L；0029步骤四，炼苗移栽0030当组培苗根长度达到2CM后，移到室外遮阴炼苗1012天左右，然后将培养容器瓶口打开，自然光下进行开瓶炼苗24天后，将生根苗从培养基中取出，放入浓度为01多菌灵溶液中浸泡5MIN，并把根部多余的培养基清洗干净，最后用清水冲洗23次，然后移栽到容量相同的不同基质处理纯锯末、锯末基质、纯基质、基质珍珠岩的营养钵中，移栽苗的管理方式为将生根苗在遮阴网下进行管理，第一周采用浓度为01多菌灵溶液进行喷灌，第二周每天用水喷灌一次，保持移栽基质湿润透气。于14天后统计炼苗移栽成活率，得出用纯锯末的炼。
18、苗移栽成活率最好。0031通过以下的实验和数据对本发明的原理做进一步的说明00321、参考表1不同浓度PVP处理对外植体生长的影响；0033表1不同浓度PVP处理对外植体生长的影响说明书CN104054581A4/4页60034PVP浓度玉华早富污染率/褐化率/成活率/07470102A5635124A1912025B300MG/L6700210B5495212A2200090B500MG/L6070240C4048233C2740121A700MG/L6700190B4878188B2073201B1000MG/L7500170A4674311B1956178B00350036注同列数相同字。
19、母表示差异不显著P005，不同字母表示差异显著P005。数据为MEANSE平均值标准误；下同。00372、不同6BA浓度处理对玉华早富继代培养的影响0038表2不同6BA浓度对玉华早富继代培养的影响0039基本培养基6BAMG/LIBAMG/L扩繁系数MS00113008CMS0301187009CMS0401375012BMS0501686023AMS0601532011A00403、不同IBA浓度处理对玉华早富生根的影响0041表3不同IBA浓度处理对玉华早富生根的影响004200434不同炼苗基质对生根苗生长的影响0044表4不同栽培基质处理对移栽苗生长的影响0045基质处理玉华早富移栽成活率锯末7000232A锯末基质6250432B基质5000342C基质珍珠岩5000422C0046以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。说明书CN104054581A1/1页7图1说明书附图CN104054581A。