与环丙基稠合的吲哚并苯并氮杂HCVNS5B抑制剂.pdf

发明内容
     本发明一个方面为式 I 化合物或其药用盐 ：
     其中 R1 为 -CO2R5 或 -CONR6R7 ； R2 为 或R3 为氢、 卤素、 烷基、 烯基、 羟基、 苄基氧基、 烷氧基或卤代烷氧基 ；R4 为环烷基 ；
     R5 为氢或烷基 ；
     R6 为氢、 烷基、 烷基 SO2-、 环烷基 SO2-、 卤代烷基 SO2-、 (R9)2NSO2- 或 (R10)SO2- ；
     R7 为氢或烷基 ；
     R8 为氢、 烷基、 环烷基、 ( 环烷基 ) 烷基、 烷基羰基、 环烷基羰基、 卤代烷基羰基、 烷 氧基羰基、 烷基 SO2-、 环烷基 SO2-、 卤代烷基 SO2-、 氨基羰基、 ( 烷基氨基 ) 羰基、 ( 二烷基氨 基 ) 羰基、 苄基、 苄基氧基羰基或吡啶基 ；
     R9 为氢、 烷基或环烷基 ； 且 10
     R 为氮杂环丁烷基、 吡咯烷基、 哌啶基、 哌嗪基、 吗啉基、 硫吗啉基、 高哌啶基或高 吗啉基， 且 R10 取代有 0-3 个烷基取代基。
     本发明另一个方面为式 I 化合物或其药用盐， 其中
     R1 为 -CO2R5 或 -CONR6R7 ；
     R2 为或R3 为氢、 卤素、 烷基、 烯基、 羟基、 苄基氧基或烷氧基 ；
     R4 为环烷基 ；
     R5 为氢或烷基 ；
     R6 为氢、 烷基、 烷基 SO2-、 环烷基 SO2-、 卤代烷基 SO2-、 (R9)2NSO2- 或 (R10)SO2- ；
     R7 为氢或烷基 ；
     R8 为氢、 烷基、 环烷基、 ( 环烷基 ) 烷基、 烷基羰基、 烷氧基羰基、 苄基、 苄基氧基羰 基或吡啶基 ；
     R9 为氢或烷基 ； 且 10
     R 为氮杂环丁烷基、 吡咯烷基、 哌啶基、 哌嗪基、 N-( 烷基 ) 哌嗪基、 吗啉基、 硫吗啉 基、 高哌啶基或高吗啉基。本发明另一个方面为式 I 化合物， 其中 R1 为 -CONR6R7 ； R6 为烷基 SO2-、 环烷基 SO2-、 9 10 7 卤代烷基 SO2-、 (R )2NSO2- 或 (R )SO2- ； 且 R 为氢。
     本发明另一个方面为式 I 化合物， 其中 R3 为氢。
     本发明另一个方面为式 I 化合物， 其中 R3 为甲氧基。
     本发明另一个方面为式 I 化合物， 其中 R4 为环己基。
     本发明另一个方面为式 I 化合物， 其中 R6 为 (R9)2NSO2- 或 (R10)SO2-。
     本发明另一个方面为式 I 化合物， 其中 R6 为 ( 二甲基氨基 )SO2-。
     本发明另一个方面为式 I 化合物， 其中 R6 为烷基 SO2-。
     本发明另一个方面为式 I 化合物， 其中 R6 为异丙基 SO2-。
     本发明另一个方面为式 I 化合物， 其具有如下立体化学 ：
     本发明另一个方面为式 I 化合物， 其具有如下立体化学 ：任何变量 ( 包括 R1、 R2、 R 3、 R4、 R5、 R6、 R7、 R8、 R9 或 R10) 的任何范围可独立与任何其 它变量的范围一起使用。
     除非另有说明， 这些术语具有下述意义。 “烷基” 的意思是由 1 至 6 个碳所组成的直 链或支链烷基。 “烯基” 的意思是由 2 至 6 个碳所组成且具有至少一个双键的直链或支链烷基。 “环烷基” 的意思是由 3 至 7 个碳所组成的单环环系。 “羟基烷基” 、 “烷氧基” 及具有经取代烷基 部分的其它术语包括由针对所述烷基部分的 1 至 6 个碳原子所组成的直链与支链异构体。 “卤 代烷基” 与 “卤代烷氧基” 包括所有卤化异构体， 从单卤素取代的烷基至全卤素取代的烷基。 “芳 基” 包括碳环芳族取代基与杂环芳族取代基。括号与多重括号术语意在向本领域技术人员阐明 键合关系。例如， 如 ((R) 烷基 ) 那样的术语指进一步被取代基 R 取代的烷基取代基。
     本发明包括所述化合物的所有药用盐形式。 药用盐为其中抗衡离子不会显著地助 长化合物的生理活性或毒性且其本身作为药理等价物的那些药用盐。这些盐可根据一般 有机技术使用商购试剂来制备。一些阴离子盐形式包括醋酸盐、 醋硬脂酸盐 (acistrate)、 苯磺酸盐、 溴化物、 樟脑磺酸盐、 氯化物、 构橼酸盐、 富马酸盐、 葡萄糖醛酸盐、 氢溴酸盐、 盐 酸盐、 氢碘酸盐、 碘化物、 乳酸盐、 马来酸盐、 甲磺酸盐、 硝酸盐、 双羟萘酸盐、 磷酸盐、 琥珀酸 盐、 硫酸盐、 酒石酸盐、 甲苯磺酸盐及昔萘酸盐 (xinofoate)。一些阳离子盐形式包括铵盐、 铝盐、 苄星 (benzathine) 盐、 铋盐、 钙盐、 胆碱盐、 二乙胺盐、 二乙醇胺盐、 锂盐、 镁盐、 葡甲
     胺盐、 4- 苯基环己胺盐、 哌嗪盐、 钾盐、 钠盐、 丁三醇胺 (tromethamine) 盐及锌盐。
     本发明一些化合物具有不对称碳原子 ( 参见例如以下结构 )。本发明包括所有立 体异构形式， 包括对映异构体与非对映异构体及立体异构体的混合物如外消旋体。一些立 体异构体可使用本领域已知的方法来制备。 所述化合物的立体异构混合物与相关中间体的 立体异构混合物可根据本领域已知的方法来分离成单独的异构体。 当在以下方案和表格中 描绘分子结构时使用的楔形线 (wedge) 和虚线 (hash) 仅意在表示相对立体化学， 而不应该 被解释为暗示绝对立体化学指定。
     合成方法
     所述化合物可通过本领域已知的方法 ( 包括如下所述的那些方法 ) 来制备。一些 试剂和中间体在本领域中是已知的。 其它试剂和中间体可通过本领域已知的方法使用容易 得到的原料来制备。用于描述化合物合成的变量 ( 例如所编号的 “R” 取代基 ) 仅意在说明 如何制备， 而不应该与权利要求书中或本说明书其它段落中所使用的变量相混淆。方案中 所使用的缩写通常符合本领域中所使用的惯用意义。
     可将 2- 溴 -3- 环己基 -1H- 吲哚 -6- 甲酸甲酯水解成 2- 溴 -3- 环己基 -1H- 吲 哚 -6- 甲酸 ( 参见方案 1)。该化合物可在无水 THF( 四氢呋喃 ) 中使用例如 1， 1’ - 羰基二 咪唑 (CDI) 及 1， 8- 二氮杂二环 [5.4.0] 十一碳 -7- 烯 (DBU) 而与各种磺酰脲 (sulfonyl urea) 缩合。所得到的酰基硫酰胺 (acyl sulfamide) 可使用例如苏楚基 (Suzuki) 偶联反 应条件而与各种 2- 甲酰基苯基硼酸或 2- 甲酰基苯基硼酸酯进行已知的偶联反应， 从而得 到所绘类型的环状半缩醛胺中间体 (cyclic hemiaminal intermediate)。这些化合物可
     如下转化为吲哚并苯并氮杂衍生物 ： 这些化合物在 DMF( 二甲基甲酰胺 ) 中用 2-( 二甲氧基磷酰基 ) 丙烯酸甲酯在碳酸铯的影响下通过连续的麦克尔 (Michael) 反应和 Horner Emmons 反应进行处理。
     相关的稠合有环丙基的酯衍生物可通过本领域已知的方法来得到， 包括吲哚并 苯并氮杂 酯在 DMSO 中在强碱性条件下用碘化三甲基氧化锍 (trimethyl sulfoxonium iodide) 处理。所得到的稠合环丙烷中余下的脂肪族酯残基可被水解， 且产物酸可与各 种烷基桥接的哌嗪 (alkyl-bridged piperazine) 缩合。例如， DMSO 中的 O-(1H- 苯并三 唑 -1- 基 )-N， N， N’ ， N’ - 四甲基 酰胺。
     四氟硼酸盐和二异丙基乙基胺可得到烷基桥接的哌嗪甲方案 1.
     N 经保护的哌嗪也可与中间体吲哚并苯并氮杂酸偶联， 且所得到的哌嗪甲酰胺可使用本领域已知的方法来脱保护， 及使用各种合成方案来衍生化， 所述方法和方案中的 一些示例性实例如下所示 ( 参见方案 2)。
     方案 2.
     可用于合成本发明一些化合物的中间体涉及方案 3 中所示叔丁酯吲哚并苯并氮 方案 3.杂 的制备。
     此方法学涉及对所示吲哚甲酯进行碱催化水解， 接着使其与亚硫酰氯及叔丁醇钾 反应， 或用碳酸银和叔丁基溴进行烷基化反应。所得到的化合物可使用与先前所概述相似
     的化学方法来转化， 从而得到如上所示的混合酯吲哚并苯并氮杂
     这些中间体可用于如下可选择的方法， 所述可选择的方法可如方案 4 中所示用于 制备酰基硫酰胺烷基桥接的哌嗪和酰基磺酰胺烷基桥接的哌嗪。中间体叔丁酯吲哚并苯 并氮杂 的环丙烷化及随后叔丁酯基的断裂可得到酸， 其可与各种磺酰胺和磺酰脲偶联。随后进行水解， 得到相关的脂肪族酸， 其可与各种烷基桥接的哌嗪偶联。例如， DMSO 中的 O-(1H- 苯并三唑 -1- 基 )-N， N， N’ ， N’ - 四甲基 基桥接的哌嗪甲酰胺。
     方案 4.
     四氟硼酸盐和二异丙基乙基胺可得到烷一些实施例以立体异构混合物的形式存在。 本发明涵盖所述化合物的所有立体异 构体。分离立体异构混合物的方法是本领域中所熟知的， 且包括但不限于制备性手性超临 界流体色谱 (SFC) 和手性高效液相色谱 (HPLC)。使用此手段的实例示于方案 5 中。
     方案 5.
     实现所述分离的另一种方法涉及制备非对映异构体的混合物， 所述混合物可使用 本领域已知的各种方法来分离。此手段的一个实例示于以下 ( 方案 6)。
     方案 6.
     一些非对映异构的酰胺可使用反相 HPLC 来分离。在水解后， 所得到的光学活性酸 可与桥接的哌嗪衍生物偶联 ( 方案 6)。例如， DMSO 中的 O-(1H- 苯并三唑 -1- 基 )-N， N， 四氟硼酸盐和二异丙基乙基胺可用于得到烷基桥接的哌嗪甲酰胺。也可N’ ， N’ - 四甲基使用其它标准酰胺偶联方法， 从而得到具有光学活性的甲酰胺。
     方案 6.
     方案 7-9 说明了制备中间体和化合物的其它方法。 方案 7.
     方案 8.
     方案 9.生物学方法
     当在以下 HCV RdRp 检测中测定时， 所述化合物展现了对抗 HCV NS5B 的活性。
     对 HCV NS5B RdRp 进行克隆、 表达及纯化
     将对 HCV 基因型 1b 的 NS5B 蛋白进行编码的 cDNA 克隆至 pET21a 表达载体中。 将所 述蛋白质表达成截掉 C 末端的 18 个氨基酸 (the protein was expressed with an 18amino acid C-terminal truncation) 以提高溶解度。大肠杆菌感受态细胞系 BL21(DE3) 用于所 述蛋白质的表达。使培养物在 37℃生长约 4 小时， 直到培养物达到 600 纳米处的光密度为 2.0。使培养物冷却至 20℃， 并用 1mM IPTG 进行诱导。加入新鲜的氨苄青霉素至最终浓度 为 50 微克 / 毫升， 并使细胞在 20℃生长过夜。
     使细胞沉淀 (3 升 ) 溶解以供纯化， 得到 15-24 毫克经纯化的 NS5B。溶胞缓冲液由 20mM Tris-HCl(pH 7.4)、 500mM NaCl、 0.5％ Triton X-100、 1mMDTT、 1mM EDTA、 20％甘油、 0.5 毫克 / 毫升溶菌酶、 10mM MgCl2、 15 微克 / 毫升脱氧核糖核酸酶 I 及完全 TM 蛋白酶抑 制剂药片 (Roche) 所组成。加入溶胞缓冲液后， 使用组织匀浆器来使经冷冻的细胞沉淀重 新悬浮。为了降低样品的粘度， 使用与 Branson 超声波处理器相连的微尖头来使溶胞产物 的等分液在冰上接受超声波处理。 经超声波处理的溶胞产物在 4℃以 100,000×g 离心 1 小 时， 并过滤经过 0.2 微米滤器单元 (Corning)。
     使用两个连续的色谱步骤来纯化蛋白质 ： 肝素琼脂糖 CL-6B 和 PolyU 琼脂糖 4B(Pharmacia)。 色谱缓冲液与溶胞缓冲液相同， 但不含有溶菌酶、 脱氧核糖核酸酶 I、 MgCl2 或蛋白酶抑制剂， 且缓冲液的 NaCl 浓度根据将蛋白质加载至色谱柱上的需要而调整。各色 谱柱以 NaCl 梯度液洗脱， 所述梯度液的长度在 5 至 50 个柱体积之间变化， 这取决于色谱柱 的类型。在最终色谱步骤后， 所得到的酶纯度＞ 90％ ( 基于 SDS-PAGE 分析 )。将酶分成等 分液， 并贮存在 -80℃。
     标准 HCV NS5B RdRp 酶检测
     在 96 孔板 (Corning 3600) 中在最终体积为 60 微升的情况下进行 HCVRdRp 基因 型 1b 检测。检测缓冲液由 20mM Hepes(pH 7.5)、 2.5mM KCl、 2.5mM MgCl2、 1mM DTT、 1.6 单 位 RNAse 抑制剂 (Promega N2515)、 0.01 毫克 / 毫升 BSA(Sigma B6917) 及 2％甘油所组成。 所有化合物在 DMSO 中连续稀释 (3 倍 ) 并在水中进一步稀释以使 DMSO 在检测中的最终浓度 为 2％。HCV RdRp 基因型 1b 酶在最终浓度为 28nM 时使用。聚 A(polyA) 模板在 6nM 时使 用， 且生物素化的寡 dT12 引物在最终浓度为 180nM 时使用。模板是商购得到的 (Amersham
     27-4110)。生物素化的引物由 Sigma Genosys 制备。3H-UTP 在 0.6μCi(0.29μM 总 UTP) 时使用。通过加入酶来引发反应， 在 30℃孵育 60 分钟， 并通过加入 25 微升含有 SPA 珠粒 (4 微克 / 微升， Amersham RPNQ 0007) 的 50mM EDTA 来停止。在室温孵育＞ 1 小时后， 将板 在 Packard Top Count NXT 上读取。
     经修改的 HCV NS5B RdRp 酶检测
     经修改的酶检测基本上如就标准酶检测所描述的那样来进行， 不同的是， 将生物 素化的寡 dT12 引物如下预捕获在链霉抗生物素 (streptavidin) 涂覆的 SPA 珠粒上 ： 将引 物与珠粒在检测缓冲液中混合， 并在室温孵育一小时。离心除去未结合的引物。使与引物 结合的珠粒重新悬浮在 20mM Hepes 缓冲液 (pH 7.5) 中， 并在引物的最终浓度为 20nM 及珠 粒的最终浓度为 0.67 微克 / 微升时用于检测。检测中的加入顺序如下 ： 将酶 (1.75nM) 加 到经稀释的化合物中， 接着加入模板 (0.36nM)、 3H-UTP(0.6μCi， 0.29μM) 及与引物结合 的珠粒的混合物以引发反应， 所给浓度为最终浓度。使反应在 30℃进行 4 小时。
     化合物的 IC50 值使用七种不同的 [I]([I] 为抑制浓度 ) 来确定。使用方程式 y ＝ A+((B-A)/(1+((C/x)^D))) 通过抑制作用来计算 IC50 值。
     FRET 检测制剂 在 96 孔细胞培养板中进行 HCV FRET 筛选检测。 FRET 肽 (Anaspec， Inc.)(Taliani et al.， Anal.Biochem.1996， 240， 60-67) 在其一端附近含有荧光供体即 EDANS， 且在另一端 附近含有受体即 DABCYL。 通过供体与受体之间的分子间共振能量转移 (RET) 来使所述肽的 荧光淬灭， 但当 NS3 蛋白酶使所述肽裂解时， 产物不再发生 RET 淬灭， 且供体的荧光变得显 而易见。检测试剂如下制备 ： 得自 Promega(#E153A) 的 5× 细胞荧光素酶细胞培养物溶胞 试剂 (cell Luciferase cell culture lysis reagent) 用 dH2O 稀释至 1×， 加入 NaCl 至 最终为 150mM， 且将 FRET 肽自 2mM 储备液稀释至最终为 20μM。
     为了制备板， 带有或不带有海紫罗兰属荧光素酶 (Renilla luciferase) 报告子基 因的 HCV 复制子细胞用胰蛋白酶处理， 并置于 96 孔板中， 其中将经滴定的测试化合物加到 第 3 列至第 12 列中 ； 第 1 列和第 2 列含有对照化合物 (HCV 对照抑制剂 )， 且最底行含有仅 带有 DMSO 的细胞。然后将板置于 37℃的 CO2 培养箱中。
     检测
     加入上述测试化合物 (FRET 检测制剂 ) 后， 在不同时间将板取出， 且向其中加入 Alamar 蓝色溶液 (Trek Diagnostics， #00-100) 以测量细胞毒性。 在 Cytoflour 4000 仪器 (PE Biosystems) 中读取后， 将板以 PBS 冲洗， 然后通过向每个孔中加入 30 微升上述 FRET 肽检测试剂 (FRET 检测制剂 ) 而用于 FRET 检测。接着， 将板置于 Cytoflour 4000 仪器中， 其已被设定成激发波长为 340nm/ 发射波长为 490nm， 以自动模式历时高达 20 次循环， 且板 在动态模式中读取。典型地， 在读取后使用终点分析的信号对噪声为至少三倍。或者， 在 Alamar 蓝色读取后， 将板以 PBS 冲洗， 然后用于使用 Promega Dual-Glo Luciferase Assay System 的荧光素酶检测或用于 Promega EnduRen Live Cell Substrate 检测。
     通过对相对的 HCV 复制子抑制作用及相对的细胞毒性值进行定量而对化合物进 行分析。为了计算细胞毒性值， 将得自对照孔的平均 Alamar 蓝色荧光信号设定为 100％无 毒性。 接着， 将各化合物测试孔中的各个信号除以平均对照信号并乘以 100％以确定细胞毒 性百分比。为了计算 HCV 复制子抑制值， 平均背景值得自在检测结束时含有最高量 HCV 对
     照抑制剂的两个孔。这些值类似于得自天然 Huh-7 细胞的那些值。然后将背景值从得自对 照孔的平均信号中扣除， 且将此值用作 100％活性。接着， 将各化合物测试孔中的各个信号 除以背景扣除后的平均对照值并乘以 100％以确定活性百分比。将 EC50 值计算成可使 FRET 或荧光素酶活性降低 50％的浓度。 针对化合物板所得到的两个值即细胞毒性百分比与活性 百分比用于确定有待进一步分析的重要化合物。
     化合物的代表性数据报道在表 1 中。
     表 1.
     A ＞ 0.5μM ； B 为 0.001μM-0.5μM ； C ＜ 0.02μM， 但没有确定确切值 ；
     D ＞ 0.04μM， 但没有确定确切值 ； D ＞ 0.11μM， 但没有确定确切值 ；
     药物组合物和治疗方法
     所述化合物展现出对抗 HCV NS5B 的活性， 且可用于治疗 HCV 与 HCV 感染。因此， 本发明另一个方面为一种组合物， 其包含所述化合物或其药用盐及药用载体。
     本发明另一个方面为一种组合物， 其还包含具有抗 HCV 活性的化合物。
     本发明另一个方面为一种组合物， 其中具有抗 HCV 活性的化合物为干扰素。在本 发明另一个方面， 所述干扰素选自干扰素 α2B、 PEG 化的 (pegylated) 干扰素 α、 同感干扰 素 (consensus interferon)、 干扰素 α2A 及淋巴细胞样干扰素 τ。
     本发明另一个方面为一种组合物， 其中具有抗 HCV 活性的化合物为环孢菌素。在 本发明另一个方面， 所述环孢菌素为环孢菌素 A。
     本发明另一个方面为一种组合物， 其中具有抗 HCV 活性的化合物选自白细胞介素 2、 白细胞介素 6、 白细胞介素 12、 可提高 1 型辅助 T 细胞应答发展的化合物、 干扰 RNA、 反义 RNA、 Imiqimod、 利巴韦林、 5’ - 单磷酸肌苷脱氢酶抑制剂、 金刚烷胺及金刚乙胺。
     本发明另一个方面为一种组合物， 其中具有抗 HCV 活性的化合物可有效抑制靶 标的功能以治疗 HCV 感染， 所述靶标选自 HCV 金属蛋白酶 (HCVmetalloprotease)、 HCV 丝 氨酸蛋白酶 (HCV serine protease)、 HCV 聚合酶 (HCVpolymerase)、 HCV 解螺旋酶 (HCV helicase)、 HCV NS4B 蛋白 (HCV NS4B protein)、 HCV 进入 (HCV entry)、 HCV 组装 (HCV assembly)、 HCV 释出 (HCVegress)、 HCV NS5A 蛋白 (HCV NS5A protein)、 IMPDH 及核苷类似 物 (nucleoside analog)。
     本发明另一个方面为一种组合物， 其包含所述化合物或其药用盐、 药用载体、 干扰 素及利巴韦林。
     本发明另一个方面为一种抑制 HCV 复制子 (HCV replicon) 功能的方法， 其包括使 HCV 复制子与所述化合物或其药用盐接触。
     本发明另一个方面为一种抑制 HCV NS5B 蛋白功能的方法， 其包括使 HCV NS5B 蛋 白与所述化合物或其药用盐接触。
     本发明另一个方面为治疗患者中 HCV 感染的方法， 其包括向所述患者给予治疗有 效量的所述化合物或其药用盐。在另一个实施方案中， 所述化合物可有效抑制 HCV 复制子 的功能。在另一个实施方案中， 所述化合物可有效抑制 HCV NS5B 蛋白的功能。
     本发明另一个方面为治疗患者中 HCV 感染的方法， 其包括向所述患者给予治疗有 效量的所述化合物或其药用盐， 且给予 ( 之前、 之后或同时 ) 另一种具有抗 HCV 活性的化合 物。
     本发明另一个方面为其中其它具有抗 HCV 活性的化合物为干扰素的方法。
     本发明另一个方面为其中所述干扰素选自干扰素 α2B、 PEG 化的干扰素 α、 同感 干扰素、 干扰素 α2A 及淋巴细胞样干扰素 τ 的方法。
     本发明另一个方面为其中其它具有抗 HCV 活性的化合物为环孢菌素的方法。
     本发明另一个方面为其中所述环孢菌素为环孢菌素 A 的方法。
     本发明另一个方面为其中其它具有抗 HCV 活性的化合物选自白细胞介素 2、 白细 胞介素 6、 白细胞介素 12、 可提高 1 型辅助 T 细胞应答发展的化合物、 干扰 RNA、 反义 RNA、 Imiqimod、 利巴韦林、 5’ - 单磷酸肌苷脱氢酶抑制剂、 金刚烷胺及金刚乙胺的方法。
     本发明另一个方面为其中其它具有抗 HCV 活性的化合物可有效抑制靶标功能以 治疗 HCV 感染的方法， 所述靶标选自 HCV 金属蛋白酶、 HCV 丝氨酸蛋白酶、 HCV 聚合酶、 HCV 解螺旋酶、 HCV NS4B 蛋白、 HCV 进入、 HCV 组装、 HCV 释出、 HCV NS5A 蛋白、 IMPDH 及核苷类似 物。
     本发明另一个方面为其中其它具有抗 HCV 活性的化合物可有效抑制 HCV 生命循环 中靶标的功能而非抑制 HCV NS5B 蛋白的功能的方法。
     “治疗有效” 的意思是提供有意义的患者益处所需要的药物量， 如肝炎与 HCV 感染 领域中的执业医师所理解的那样。
     “患者” 的意思是被 HCV 病毒感染且适于治疗的人们， 如肝炎与 HCV 感染领域中的 执业医师所理解的那样。
     “治疗” 、 “疗法” 、 “给药方案” 、 “HCV 感染” 及相关术语如肝炎与 HCV 感染领域中的 执业医师所理解的那样来使用。
     本发明化合物一般以药物组合物的形式来给予， 所述组合物包含治疗有效量的所 述化合物或其药用盐及药用载体， 且可含有常规赋形剂。治疗有效量为提供有意义的患者 益处所需要的量。药用载体为那些具有可接受安全性的常规已知载体。组合物涵盖所有常 见的固体形式与液体形式， 包括胶囊剂、 片剂、 锭剂与粉末剂及液体混悬剂、 糖浆剂、 酏剂及 溶液剂。组合物使用一般制剂技术来制备， 且常规赋形剂 ( 诸如粘合剂与润湿剂 ) 与介质 ( 诸如水与醇 ) 通常用于组合物。
     固体组合物通常被配制成剂量单位， 且每份剂量提供约 1 至 1000 毫克活性成份的 组合物是优选的。剂量的一些实例为 1 毫克、 10 毫克、 100 毫克、 250 毫克、 500 毫克及 1000 毫克。通常， 其它药物可按与临床上所使用的经典单位范围相似的单位范围存在。典型地， 其为 0.25-1000 毫克 / 单位。
     液体组合物通常在剂量单位范围内。通常， 液体组合物的单位剂量范围可以是 1-100 毫克 / 毫升。剂量的一些实例为 1 毫克 / 毫升、 10 毫克 / 毫升、 25 毫克 / 毫升、 50 毫 克 / 毫升及 100 毫克 / 毫升。通常， 其它药物可按与临床上所使用的经典单位范围相似的 单位范围存在。典型地， 其为 1-100 毫克 / 毫升。
     本发明涵盖所有常规给药模式， 且口服方法与肠胃外方法是优选的。 通常， 给药方 案可类似于临床上所使用的其它药物。典型地， 每日剂量可以是每日 1-100 毫克 / 公斤体重。通常， 口服方式需要较多的化合物， 而肠胃外方式需要较少的化合物。然而， 具体的给 药方案可由医师通过合理的医药判断来确定。
     本发明也涵盖在组合疗法中给予所述化合物的方法。 即所述化合物可与可用于治 疗肝炎及 HCV 感染的其它药物一起使用， 但所述化合物与所述其它药物分开使用。在这些 组合方法中， 所述化合物通常可搭配其它药物而以每日 1-100 毫克 / 公斤体重的每日剂量 来给予。其它药物一般可按治疗上所使用的量来给予。然而， 具体的给药方案可由医师通 过合理的医药判断来确定。
     适于组合物及方法的化合物的一些实例列在表 2 中。
     表 2.
     32商品名 IFN-ω 丝氨酸蛋白酶抑制剂 Intarcia Therapeutics Boehringer Ingelheim Pharma KG， Ingelheim， Germany Endo Pharmaceuticals Holdings Inc.， Chadds Ford， PA F. Hoffmann-La Roche LTD， IFN-α2a Basel，Switzerland F.Hoffmann-La Roche LTD， PEG 化的 IFN-α2a Basel， Switzerland F.Hoffmann-La Roche LTD， PEG 化的 IFN-α2a/ 利巴韦林 Basel， Switzerland F.Hoffmann-La Roche LTD， HCV IgG 免疫抑制剂 Basel， Switzerland抑制剂的类型或靶标的类型来源公司CN 101918410 AOmega IFNBILN-2061Summetrel抗病毒RoferonA说明33书PegasysPegasys 和 RibavirinCellCept29/109 页Wellferon淋巴细胞样 IFN-αn1GlaxoSmithKline plc， Uxbridge， UK Human Genome Sciences Inc.，CN 101918410 AAlbuferon-α Rockville， MD白蛋白 IFN-α2bICN Pharmaceuticals， Costa 利巴韦林 Mesa，CA Idun Pharmaceuticals Inc.， San 胱天蛋白酶 (caspase) 抑制剂 Diego， CA Indevus Pharmaceuticals Inc.， 抗纤维变性 Lexingeon， MA INF-γ InterMune Inc.， B risbane， CA InterMune Pharmaceuticals IFN 干扰素 α-1(IFN alfacon-1) Inc.， B risbane， CA30/109 页Levovirin说IDN-6556明34书IP-501ActimmuneInfergen AISIS Pharmaceuticals Inc， Carlsbad， CA/Elan 反义 Phamaceuticals Inc.， New York， NY Japan Tobacco Inc.， Tokyo， RdRp 抑制剂 Japan Maxim Pharmaceuticals Inc.， PEG 化的 IFN-α2a/ 免疫调节剂 San Diego， CACN 101918410 AISIS 14803JTK-003Pegasys 和 Ceplene说明35Maxim Pharmaceuticals Inc.， 免疫调节剂 San Diego， CA Nabi Biopharmaceuticals Inc.， HCV IgG 免疫抑制剂 Boca Raton， FL书CepleneCivacir31/109 页RegeneRx Biopharmiceuticals Inc.， Bethesda， MD/SciClone IFN-α2b/α1- 胸腺素 Pharmaceuticals Inc， San Mateo， CA IMPDH 抑制剂 Ribapharm Inc.， Costa Mesa， CA 利巴韦林前药 Ribapharm Inc.， Costa Mesa， CA Ribozyme Pharmaceuticals Inc.， Boulder， CO Schering-Plough Corporation， IFN-α2b Kenilworth， NJ PEG 化的 IFN-α2b Schering-Plough Corporation， Kenilworth， NJ IFN-α2b/ 利巴韦林 Schering-Plough Corporation， Kenilworth， NJCN 101918410 AIntron A 和 ZadaxinLevovirinViramidine说明36Heptazyme核酶书Intron APEG-IntronRebetron32/109 页Ribavirin利巴韦林Schering-Plough Corporation， Kenilworth， NJ Schering-Plough Corporation， Kenilworth， NJ SciClone Pharmaceuticals Inc.，CN 101918410 APEG-Intron/RibavirinPEG 化的 IFN-α2b/ 利巴韦林Zadazim免疫调节剂 SanMateo， CA IFN-β1a Serono， Geneva， SwitzerlandRebif说Transition Therapeutics Inc.，IFN-β 和 EMZ701IFN-β 和 EMZ701 Ontario， Canada明37书Tularik Inc.， South San β- 微管蛋白抑制剂 Francisco， CA Vertex Pharmaceuticals Inc.， IMPDH 抑制剂 Cambridge， MA33/109 页Batabulin(T67)Merimepodib(VX-497)Telaprevir (VX-950， LY-570310) Co.Inc.， Indianapolis， IN 天然 IFN-α 单克隆抗体 Viragen Inc.， Plantation， FLCN 101918410 ANS3 丝氨酸蛋白酶抑制剂Vertex Pharmaceuticals Inc.， Cambridge， MA/Eli Lilly andOmniferonXTL-6865(XTL-002)XTL Biopharmaceuticals Ltd.， Rehovot， Isreal NS5B 复制酶抑制剂 NS5B 复制酶抑制剂 NS5B 复制酶抑制剂 NS5B 复制酶抑制剂 NS5B 复制酶抑制剂 NS5B 复制酶抑制剂 NS5B 复制酶抑制剂 丝氨酸蛋白酶抑制剂 Wyeth/Viropharma Idenix/Novartis Gene Labs/Novartis Gene Labs/Novartis Gilead Roche Roche Schering Plough34/109 页HCV-796说NM-283明38书GL-59728GL-606672’ C MeAPSI 6130R1626SCH 503034
     CN 101918410 ANIM811 亚甲蓝 长效 (long lasting)IFN TLR9 激动剂 干扰素 -β-1a 免疫调节剂 Coley Bioenvision Viragen/Valentis亲环蛋白抑制剂NovartisSuvusMultiferonActilon(CPG10101)说Interferon-βSerono Sciclone明具体实施方式
     除非另有说明， 使用下述柱和条件来得到下述中间体和实施例的分析性 LCMS 数 据。 停止时间 ： 梯度时间 +1 分钟 ； 起始浓度 ： 0％ B， 除非另有说明 ； 洗脱剂 A ： 5％ CH3CN/95％ H2O( 含有 10mM NH4OAc( 乙酸铵 ))( 对于柱 A、 D 和 E)， 10 ％ MeOH( 甲醇 )/90 ％ H2O( 含有 HCV 抑制剂 Arrow Therapeutics Ltd. NS5B 复制酶抑制剂 HCV 抑制剂 Merck Achillion/Gilead39Zadaxin书来自 WO 2005047288(2005 年 5 月 26 日 ) 的吡唑并嘧啶 化合物和盐2’ C 甲基腺苷GS-9132(ACH-806)35/109 页CN 101918410 A说明书36/109 页0.1％ TFA( 三氟乙酸 ))( 对于柱 B 和 C) ； 洗脱剂 B ： 95％ CH3CN/5％ H2O( 含有 10mM NH4OAc) ( 对于柱 A、 D 和 E)， 90％ MeOH/10％ H2O( 含有 0.1％ TFA)( 对于柱 B 和 C) ； 柱A： Phenomenex 10μ4.6×50mm C18 ； 柱B： Phenomenex C18 10μ3.0×50mm ； 柱C： Phenomenex4.6×50mm C18 10μ ； 柱D： Phenomenex Lina C18 5μ3.0×50mm ； 柱E： Phenomenex 5μ4.6×50mm C18。
     作为图形软件所生成的人为结构式 (artifact)， 一些结构具有被省略的氢原子。
     中间体 1
     2- 溴 -3- 环己基 -1H- 吲哚 -6- 甲酸甲酯 .
     在 2℃将新重结晶的三溴化吡啶鎓 （pyridinium tribromide)( 在热 AcOH( 乙酸 ) (5 毫升 /1 克 ) 中重结晶， 用冷 AcOH 冲洗， 并在高真空下用 KOH 干燥 ) 逐份 ( 历时 10 分钟 ) 加到搅拌的 3- 环己基 -1H- 吲哚 -6- 甲酸甲酯 (60 克， 233 毫摩尔 )( 使用在 WO2004/065367 中描述的方法来制备 ) 于 CHCl3/THF( 四氢呋喃 )(1 ∶ 1， 1.25L) 中的溶液中。将反应溶液 在 0-5 ℃搅拌 2.5 小时， 并用饱和 NaHSO3 水溶液 (1L)、 1N HCl(1L) 和盐水 (1L) 洗涤。干 燥 (MgSO4) 有机层并浓缩。所得红色油状物用 Et2O( 乙醚 ) 稀释并浓缩。将所得粉色固体 溶解在 Et2O(200mL) 中， 用己烷 (300mL) 处理， 并部分浓缩。过滤收集固体， 并用己烷冲洗。 将母液浓缩至干， 并重复上述操作。合并固体， 得到 2- 溴 -3- 环己基 -1H- 吲哚 -6- 甲酸 甲酯 (64 克， 190 毫摩尔， 82％ )， 其为蓬松粉色固体， 所述固体不经进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz， CDCl3)δ8.47( 宽单峰， 1H)， 8.03(d， J ＝ 1.4Hz， 1H)， 7.74(dd， J ＝ 1.4， 8.8Hz， 1H)， 7.69(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 3.92(s， 3H)， 2.82(tt， J ＝ 3.7， 11.7Hz， 1H)， 1.98-1.72(m， 7H)， 1.50-1.27(m， 3H)。13CNMR(75MHz， CDCl3)δ168.2， 135.6， 130.2， 123.1， 120.8， 120.3， 118.7， 112.8， 110.7， 52.1， 37.0， 32.2(2)， 27.0(2)， 26.1。LCMS ： m/e 334(M-H) ， 保留时间 ： 3.34 分钟， 柱 A， 4 分钟梯度。
     中间体 2
     2- 溴 -3- 环己基 -1H- 吲哚 -6- 甲酸 .
     将 2- 溴 -3- 环己基 -1H- 吲哚 -6- 甲酸甲酯 (20 克， 60 毫摩尔 ) 和 LiOH(3.8 克， 160 毫摩尔 ) 于 MeOH( 甲醇 )/THF/H2O(1 ∶ 1 ∶ 1， 300mL) 中的溶液在 90℃加热 2 小时。将
     反应混合物在冰 / 水浴中冷却， 用 1M HCl 溶液 ( 约 160mL) 中和， 用水 (250mL) 稀释， 并在室 温搅拌 1 小时。 过滤收集沉淀物， 用水冲洗， 并干燥， 得到 2- 溴 -3- 环己基 -1H- 吲哚 -6- 甲 酸 ( 定量 )， 其不经进一步纯化即使用。
     可用于提供 2- 溴 -3- 环己基 -1H- 吲哚 -6- 甲酸的可选择方法如下所述。
     将 2- 溴 -3- 环己基 -1H- 吲哚 -6- 甲酸甲酯 (117 克， 349 毫摩尔 ) 和 LiOH· H2O(26.4 克， 629 毫摩尔 ) 于 MeOH/THF/H2O(1 ∶ 1 ∶ 1， 1.8L) 中的溶液回流加热 3 小时。 将反应混合 物在冰 / 水浴中冷却至约 2℃， 用 1M HCl( 约 650mL) 中和 ( 加入速率使温度不超过 5℃ )， 用水 (1L) 稀释并搅拌， 同时温热至环境温度。过滤收集沉淀物， 用水冲洗， 并干燥， 得到 2- 溴 -3- 环己基 -1H- 吲哚 -6- 甲酸的单 THF 溶剂化物 (135.5 克， 345 毫摩尔， 99％ )， 其为 1 黄色固体， 所述固体不经进一步纯化即使用。 H NMR(300MHz， CDCl3)δ11.01( 宽单峰， 1H)， 8.77(s， 1H)， 8.07(d， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 7.82(dd， J ＝ 1.5， 8.8Hz， 1H)， 7.72(d， J ＝ 8.8Hz， 13 1H)， 3.84-3.74(m， 4H)， 2.89(m， 1H)， 1.98-1.72(m， 11H)， 1.50-1.24(m， 3H)。 CNMR(75MHz， CDCl 3) δ 172.7 ， 135.5 ， 130.7 ， 122.3 ， 120.9(2) ， 118.8 ， 113.3 ， 111.1 ， 67.9(2) ， 37.0 ， 32.2(2)， 27.0(2)， 26.1， 25.5(2)。LCMS ： m/e 320(M-H) ， 保留时间 ： 2.21 分钟， 柱 A， 4 分钟 梯度。
     中间体 3
     2- 溴 -3- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1H- 吲哚 -6- 甲酰胺 .
     在 22 ℃将 1， 1’ - 羰基二咪唑 (1.17 克， 7.2 毫摩尔 ) 加到搅拌的 2- 溴 -3- 环 己基 -1H- 吲哚 -6- 甲酸 (2.03 克， 6.3 毫摩尔 ) 于 THF(6mL) 中的溶液中。立即有 CO2 放 出， 当放出减慢时， 将溶液在 50℃加热 1 小时， 然后冷却到 22℃。加入 N， N- 二甲基硫酰胺 (0.94 克， 7.56 毫摩尔 )， 然后滴加 DBU(1.34 克， 8.8 毫摩尔 ) 于 THF(4mL) 中的溶液。继 续搅拌 24 小时。将混合物在乙酸乙酯和稀 HCl 之间分配。乙酸乙酯层先后用水和盐水 洗涤， 并用 Na2SO4 干燥。将萃取物浓缩至干， 留下标题化合物， 其为浅黄色易碎泡沫状物 (2.0 克， 74％， 通过 NMR 估计纯度＞ 90％ )。1H NMR(300MHz， DMSO-D6)δppm 1.28-1.49(m， 3H)1.59-2.04(m， 7H)2.74-2.82(m， 1H)2.88(s， 6H)7.57(dd， J ＝ 8.42， 1.46Hz， 1H)7.74(d， J ＝ 8.78Hz， 1H)7.91(s， 1H)11.71(s， 1H)12.08(s， 1H)。
     用于制备 2- 溴 -3- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1H- 吲哚 -6- 甲酰胺的 选择方法如下所述。
     在氮气气氛下向配备有机械搅拌器、 温度控制器、 氮气进口和冷凝器的 1L 四颈 圆 底 烧 瓶 中 加 入 2- 溴 -3- 环 己 基 -1H- 吲 哚 -6- 甲 酸 (102.0 克， 0.259 摩 尔 ) 和 无 水 THF(300mL)。搅拌 10 分钟后， 逐份加入 CDI(50.3 克， 0.31 摩尔 )。然后将反应混合物加热 至 50℃且保持 2 小时。 冷却到 30℃后， 一次性加入 N， N- 二甲基氨基磺酰胺 (41.7 克， 0.336 摩尔 )， 然后历时 1 小时滴加 DBU(54.1mL， 0.362 摩尔 )。然后将反应混合物在室温搅拌 20
     小时。真空除去溶剂， 并将残余物在 EtOAc( 乙酸乙酯 ) 和 1N HCl(1 ∶ 1， 2L) 之间分配。分 离有机层， 且水层用 EtOAc(500mL) 萃取。合并的有机层用盐水 (1.5L) 洗涤并用 MgSO4 干 燥。 过滤溶液， 并真空浓缩， 得到粗产物 (111.0 克 )。 在 60℃将粗产物悬浮在 EtOAc(400mL) 中。向悬浮液中缓慢加入庚烷 (2L)。搅拌所得悬浮液并冷却到 0℃。然后对其进行过滤。 滤饼用少量庚烷冲洗， 并真空风干 (house vacuum air dry)2 天。收集产物， 其为白色固体 1 (92.0 克， 83 ％ )。 HNMR(MeOD， 300MHz)δ7.89(s， H)， 7.77(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.55(dd， J ＝ 8.4 和 1.8Hz， 1H)， 3.01(s， 6H)， 2.73-2.95(m， 1H)， 1.81-2.05(m， 8H)， 1.39-1.50(m， 2H)。 + m/z 429(M+H) 。
     中间体 4
     3- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-2-(2- 甲酰基 -4- 甲氧基苯基 )-1H- 吲 哚 -6- 甲酰胺 .
     将 2- 溴 -3- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1H- 吲哚 -6- 甲酰胺 (4.28 克， 0.01 摩尔 )、 4- 甲氧基 -2- 甲酰基苯基硼酸 (2.7 克， 0.015 摩尔 )、 2- 二环己基膦基 -2’ ， 6’ - 二甲氧基 - 联苯 (41 毫克， 0.0001 摩尔 )、 乙酸钯 (11.2 毫克 ) 和经微细研磨的碳酸钾 (4.24 克， 0.02 摩尔 ) 于甲苯 (30mL) 中的混合物在氮气气氛下回流搅拌 30 分钟， 此时 LC/ MS 分析显示反应完成。然后反应混合物用乙酸乙酯和水稀释， 然后用过量稀 HCl 酸化。然 后收集乙酸乙酯层， 并用稀 HCl、 水和盐水洗涤。然后干燥 ( 硫酸镁 ) 有机溶液， 过滤并浓 缩， 得到胶状物。胶状物用己烷 (250ml) 和乙酸乙酯 (25mL) 稀释， 并将混合物在 22℃搅拌 20 小时， 在此期间产物转化成亮黄色颗粒状固体 (4.8 克 )， 所述固体不经进一步纯化即直 接使用。
     用于制备 3- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-2-(2- 甲酰基 -4- 甲氧基苯 基 )-1H- 吲哚 -6- 甲酰胺的可选择方法如下提供。
     向浆化的 2- 溴 -3- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]- 吲哚 -6- 甲酰胺 (54.0 克， 126 毫摩尔 )、 4- 甲氧基 -2- 甲酰基苯基硼酸 (29.5 克， 164 毫摩尔 ) 和 LiCl(13.3 克， 315 毫摩尔 ) 于 EtOH( 乙醇 )/ 甲苯 (1 ∶ 1， 1L) 中的溶液中加入 Na2CO3(40.1 克， 379 毫摩 尔 ) 的水 (380mL) 溶液。将反应混合物搅拌 10 分钟， 然后加入 Pd(PPh3)4( 四 ( 三苯基膦 ) 钯 )(11.3 克， 10.0 毫摩尔 )。反应溶液用氮气冲洗， 并在 70℃ ( 内部监测 ) 加热过夜， 然后 冷却至室温。反应混合物用 EtOAc(1L) 和 EtOH(100mL) 稀释， 用 1N HCl 水溶液 (1L) 和盐 水 (500mL) 小心洗涤， 干燥 (MgSO4)， 过滤并浓缩。将残余固体与 Et2O( 乙醚 )(600mL) 一起 搅拌 1 小时， 并过滤收集， 得到 3- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-2-(2- 甲酰基 -4- 甲 氧基苯基 )-1H- 吲哚 -6- 甲酰胺 (52.8 克， 109 毫摩尔， 87％ )， 其为黄色粉末， 所述粉末不 1 经进一步纯化即使用。 H NMR(300MHz， d6-DMSO)δ11.66(s， 1H)， 8.17(s， 1H)， 7.75(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.74(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.59(dd， J ＝ 1.4， 8.4Hz， 1H)， 7.23-7.16(m， 2H)，
     7.08(dd， J ＝ 2.6， 8.4Hz， 1H)， 6.54(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 3.86(s， 3H)， 3.22-3.08(m， 1H)， 13 2.91(s， 6H)， 2.00-1.74(m， 7H)， 1.60-1.38(m， 3H)。 C NMR(75MHz， CDCl3)δ165.7， 158.8， 147.2， 139.1， 134.3， 132.0， 123.4， 122.0， 119.2， 118.2， 114.8， 112.3， 110.4， 109.8， 79.6， 45.9， 37.2(2)， 34.7， 32.0(2)， 25.9(2)， 24.9。LCMS ： m/e 482(M-H) ， 保留时间 ： 2.56 分钟， 柱 A， 4 分钟梯度。
     中间体 5
     11- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-6- 乙氧基 -8- 甲氧基 -6H- 异吲哚并 [2， 1-a] 吲哚 -3- 甲酰胺 .向配备有温度控制器、 冷凝器、 氮气进口和机械搅拌器的 5L 四颈圆底烧瓶中加入 甲苯 (900mL)、 EtOH(900mL)、 2- 溴 -3- 环己基 -N-(N， N- 二甲基氨磺酰基 )-1H- 吲哚 -6- 甲 酰胺 (90 克， 0.21 摩尔 )、 2- 甲酰基 -4- 甲氧基苯基硼酸 (49.2 克， 0.273 摩尔 ) 和 LiCl(22.1 克， 0.525 摩尔 )。所得溶液用氮气鼓泡 15 分钟。加入 Na2CO3(66.8 克， 0.63 摩尔 ) 的水 (675mL) 溶液， 且反应混合物用氮气再鼓泡 10 分钟。加入 Pd(PPh3)4(7.0 克， 6.3 毫摩尔 )， 并将反应混合物加热至 70℃且保持 20 小时。 冷却至 35℃后， 缓慢加入 1N HCl 溶液 (1.5L)。 将所得混合物转移到 6L 分液漏斗中， 并用 EtOAc(2×1.5L) 萃取。合并的有机萃取物用盐 水 (2L) 洗涤， 用 MgSO4 干燥， 过滤并真空浓缩， 得到黄色固体， 所述黄色固体用 20％ EtOAc/ 己烷 (450mL， 50℃至 0℃ ) 研磨， 得到 3- 环己基 -N-(N， N- 二甲基氨磺酰基 )-2-(2- 甲酰 基 -4- 甲氧基苯基 )-1H- 吲哚 -6- 甲酰胺 (65.9 克 )， 其为黄色固体。HPLC 纯度为 98％。
     将来自研磨的母液真空浓缩。将残余物与 EtOH(50mL) 一起回流 3 小时。然后将 溶液冷却至 0℃。过滤沉淀物， 并用经冷却的 TBME( 叔丁基甲基醚 )(5℃ )(20mL) 洗涤。将 滤饼真空风干， 得到额外量的标题化合物， 其为白色固体 (16.0 克 )。HPLC 纯度为 99 ％。 1 H NMR(CDCl3， 300MHz)δ8.75(s， 1H)， 7.96(s， 1H)， 7.73(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.67(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.45(dd， J ＝ 8.4 和 1.4Hz， 1H)， 7.09(d， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 6.98(dd， J ＝ 8.4 和 2.2Hz， 1H)， 6.50(s， 1H)， 3.86(s， 3H)， 3.05(s， 6H)， 2.92-3.13(m， 3H)， 1.85-1.93(m， 7H)， + 1.40-1.42(m， 3H)， 1.05(t， J ＝ 7.1Hz， 3H)。m/z 512(M+H) 。
     中间体 6
     3- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-2-(2- 甲酰基 -4- 甲氧基苯基 )-1H- 吲 哚 -6- 甲酰胺 .
     将 11- 环己基 -N-(N， N- 二甲基氨磺酰基 )-6- 乙氧基 -8- 甲氧基 -6H- 异吲哚并 [2， 1-a] 吲哚 -3- 甲酰胺溶解在 THF(75mL) 中。 向溶液中加入 2N HCl 溶液 (300mL)。 在室温 将混合物在氮气气氛下剧烈搅拌 16 小时。过滤所得悬浮液， 并用经冷却的 TBME(2×30mL) 洗涤。将滤饼真空风干 (vacuum air dry) 过夜， 得到标题化合物， 其为黄色固体。HPLC 纯 1 度为 99％。 H NMR(DMSO-d6， 300MHz)δ11.65(s， 1H)， 8.16(s， 1H)， 7.76(d， J ＝ 5.9Hz， 1H)， 7.73(d， J ＝ 5.9Hz， 1H)， 7.58(dd， J ＝ 8.5 和 1.5Hz， 1H)， 7.17-7.20(m， 2H)， 7.08(dd， J＝ 8.5 和 1.4Hz， 1H)， 6.55(d， J ＝ 8.6Hz， 1H)， 3.86(s， 3H)， 3.14-3.18(m， 1H)， 2.91(s， 6H)， + 1.75-1.99(m， 7H)， 1.48-1.60(m， 3H)。m/z 484(M+H) 。
     中间体 7
     13- 环己基 -10-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-3- 甲氧基 -7H- 吲哚并 -6- 甲酸甲酯 .[2， 1-a][2] 苯并氮杂
     将 3- 环己基 -N-(N， N- 二甲基氨磺酰基 )-2-(2- 甲酰基 -4- 甲氧基苯基 )-1H- 吲 哚 -6- 甲酰胺 (4.8 克， 0.01 摩尔 )、 2-( 二甲氧基磷酰基 ) 丙烯酸甲酯 (9.7 克， 0.02 摩尔 ) 和碳酸铯 (7.1 克， 0.02 摩尔 ) 于 DMF(28mL) 中的混合物在油浴温度 55℃搅拌 20 小时。将 混合物倒入冰 - 水中并用稀 HCl 酸化， 从而使粗产物沉淀。 收集固体， 干燥并进行硅胶 (110 克 ) 快速色谱 ( 使用含有 2％乙酸的乙酸乙酯和二氯甲烷 (1 ∶ 10) 溶液 )。合并同质的 级分 (homogeneous fraction) 并蒸发， 得到标题化合物， 其为浅黄色固体 (3.9 克， 71％收 率 )。MS ： 552(M ＝ H+)。
     用 于 制 备 13- 环 己 基 -10-[[[( 二 甲 基 氨 基 ) 磺 酰 基 ] 氨 基 ] 羰 基 ]-3- 甲 氧 基 -7H- 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     -6- 甲酸甲酯的可选择方法如下提供。将 11- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-6- 羟基 -8- 甲氧基 -6H- 异吲哚并 [2， 1-a] 吲哚 -3- 甲酰胺 ( 环状半缩醛胺 )(63.0 克， 130 毫摩尔 )、 2-( 二甲氧基磷酰基 ) 丙烯酸甲酯 (60 克， 261 毫摩尔 ) 和碳酸铯 (106 克， 326 毫摩尔 ) 于 DMF(400mL) 中的溶液 在 60 ℃ ( 浴温 ) 加热 4.5 小时。加入额外的 2-( 二甲氧基磷酰基 ) 丙烯酸甲酯 (15 克， 65 毫摩尔 ) 和碳酸铯 (21.2 克， 65 毫摩尔 )， 将反应混合物在 60℃加热过夜， 然后冷却至 室温。搅拌的反应混合物用 H2O(1L) 稀释， 用 1N HCl 水溶液 (800mL) 缓慢中和， 搅拌 3 小 时， 然后过滤收集沉淀物。固体用 Et2O(800mL) 研磨， 并干燥， 得到 13- 环己基 -10-[[[( 二 甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-3- 甲氧基 -7H- 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -6- 甲 酸甲酯 (70.2 克， 127 毫摩尔， 98 ％ )， 其为黄色固体， 所述固体不经进一步纯化即使用。44CN 101918410 A1说明书41/109 页HNMR(300MHz， CDCl3)δ8.67(s， 1H)， 8.09(s， 1H)， 7.86(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.80(s， 1H)， 7.50(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.42(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.08(dd， J ＝ 2.6， 8.8Hz， 1H)， 6.98(d， J ＝ 2.6Hz， 1H)， 5.75-5.51(m， 1H)， 4.29-4.01(m， 1H)， 3.89(s， 3H)， 3.82(s， 3H)， 3.05(s， 6H)， 2.87-2.73(m， 1H)， 2.11-1.12(m， 10H)。LCMS ： m/e 550(M-H) ， 保留时间 ： 3.21 分钟， 柱 A， 4 分钟梯度。
     中间体 8
     (+/-)-8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11- 甲 -1a(2H)- 甲酸甲酯 .氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     在圆底烧瓶中将 DMSO(5 毫升 ) 加到碘化三甲基氧化锍 (199 毫克， 0.906 毫摩尔 ) 与 NaH(38 毫克， 浓度为 60％的油分散液， 0.953 毫摩尔 ) 的混合物中。 将反应混合物在室温 搅拌 0.5 小时。然后加入 13- 环己基 -10-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-3-( 甲 氧基 )-7H- 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -6- 甲酸甲酯 (125 毫克， 0.227 毫摩尔 )， 并将反应混合物在室温搅拌 3 小时， 接着在 50℃再搅拌 3 小时。 然后以水使反应淬灭， 并以 1N HCl 溶液酸化。然后粗产物以淡黄色固体的形式沉淀， 其通过过滤来收集， 及风干 (106 毫克， 83％产率 )。 接着， 6 毫克此物质通过制备性 HPLC 来纯化， 得到标题化合物， 其为淡黄色固体 + 1 (1.8 毫克 )。 MS m/z 566(MH )， 保留时间为 3.850 分钟。HNMR(500MHz， MeOD)δppm 0.28(m， 0.36H)1.19-2.20(m ， 11.64H)2.70-3.02(m ， 2H)3.03(s ， 2.16H)3.05(s ， 3.84H)3.49(d ， J ＝ 15.26Hz， 0.64H)3.54(s， 1.92H)3.83(s， 1.08H)3.91(s， 3H)4.08(d， J ＝ 15.26Hz， 0.36H)5.29(d， J ＝ 15.26Hz， 0.36H)5.50(d， J ＝ 14.95Hz， 0.64H)6.98-7.06(m， 1H)7.16(d， J ＝ 2.44Hz， 0.36H)7.23(d， J ＝ 2.44Hz， 0.64H)7.30(d， J ＝ 8.55Hz， 0.64H)7.34(d， J ＝ 8.55Hz， 0.36H)7.56(dd， J ＝ 8.55， 1.53Hz， 0.64H)7.63(dd， J ＝ 8.55， 1.53Hz， 0.36H)7.88(d， J ＝ 8.55Hz， 0.64H)7.91(d， J ＝ 8.55Hz， 0.36H)8.12(s， 0.36H)8.33(d， J＝ 1.53Hz， 0.64H)。
     用于制备标题化合物的可选择操作如下提供。
     在 N2 下向配备有机械搅拌器、 N2 进口及温度计的经火焰干燥的 1 升四颈圆底烧瓶 中加入氢化钠 (95％ )(3.09 克， 129.2 毫摩尔 ) 与无水 DMF(200 毫升 )。在剧烈搅拌下分批 加入碘化三甲基氧化锍 (32.5 克， 147.3 毫摩尔 )， 在此期间温度上升至 30℃。搅拌 30 分钟 后， 迅速加入 13- 环己基 -10-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-3-( 甲氧基 )-7H- 吲 哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -6- 甲酸甲酯 (33.8 克， 61.3 毫摩尔 ) 在无水 DMF(70 毫升 ) 中的溶液。 将反应混合物在低于 30℃的温度搅拌 30 分钟， 然后分批倒入 1N HCl(130 毫升 ) 在 H2O(2 升 ) 中的冰冷溶液中。将所得到的悬浮液以机械方式搅拌 1 小时后， 过滤沉淀物，并以 H2O(100 毫升 ) 洗涤滤饼。将滤饼在 EtOAc 与 0.5N HCl(1 ∶ 1， 4 升 ) 之间分配。
     分离有机相， 以 H2O(1 升 ) 与盐水 (1 升 ) 洗涤， 以 MgSO4 干燥， 过滤， 及在真空中 浓缩。使残留物溶于 EtOAc(150 毫升 ) 中， 并使溶液过滤经过硅胶垫 (300 克， 在己烷中 )， 且以 50％ EtOAc/ 己烷 (5 升 ) 冲洗。使滤液在真空中浓缩， 得到微黄色固体， 将其与 50℃ 至 0℃的 10％ EtOAc/TBME(220 毫升 ) 一起研磨， 得到 (+/-)-8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨 基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯 并氮杂1-1a(2H)- 甲酸甲酯， 其为白色固体 (26.1 克， 75 ％产率 )。HPLC 纯度为 100 ％。H NMR(DMSO-d6， 300MHz)δ11.61(s， 1H)， 8.47(s， 0.5H)， 8.25(s， 0.5H)， 7.81-7.88(m， 1H)， 7.57-7.63(m， 1H)， 7.23-7.29(m， 2H)， 7.01-7.07(m， 1H)， 5.43(d， J ＝ 15.0Hz， 0.5H)， 5.22(d， J ＝ 15Hz， 0.5H)， 4.04(dd， J ＝ 15.4 和 6.6Hz， 0.5H)， 3.83(s， 3H)， 3.75(s， 1H)， 3.08-3.47(m， 0.5H)， 3.29(s， 3H)， 2.73-2.92(m， 8H)， 1.11-1.99(m， 10.5H)， 0.20(m， 0.5H)。 + m/z566(M+H) 。
     中间体 9
     (-)-8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11- 甲 -1a(2H)- 甲酸甲酯 . -1a(2H)- 甲酸甲酯的样品以 50 使 (+/-)-8- 环 己 基 -5-[[[( 二 甲 基 氨 基 ) 磺 酰 基 ] 氨 基 ] 羰 基 ]-1， 12b- 二氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂毫克 / 毫升的浓度溶于 EtOH/CH3CN 1/1+0.5％ DEA( 二乙胺 ) 中。[DEA 的加入确保所述化 合物在注射过程中留在溶液中 ]。然后在下文所示的条件下将此溶液注射至 Thar SFC-350 制备性 SFC 上。
     在 Thar SFC-350 上的制备条件 ： 色谱柱为 Chiralcel OJ-H 5×25 厘米 ； 流动相 为 25％ [MeOH/CH3CN(1/1)]/CO2 ； 压力 ( 巴 ) 为 100 ； 流速 ( 毫升 / 分钟 ) 为 240 ； 溶液浓度 ( 毫克 / 毫升 ) 为 50 ； 注射量 ( 毫升 ) 为 4.5-5 ； 循环时间 ( 分钟 / 注射 ) 为 6.5-7 ； 温度 (℃ ) 为 45 ； 通量 ( 克 / 小时 ) 为约 2 ； 检测器波长 ( 纳米 ) 为 254。
     由 371.4 克外消旋起始原料得到总计 177.3 克所要第二洗脱的 (-) 异构体， 其含 有约 1 摩尔当量的二乙胺。此物质使用下述程序来纯化。溶于二氯甲烷 (800 毫升 ) 中的 混合物 (24.7 克 ) 先后以 0.5N HCl(1×400 毫升， 1×240 毫升 )、 H2O(2×240 毫升 ) 及盐 水 (2×240 毫升 ) 洗涤。然后使有机层干燥 ( 无水 Na2SO4)， 过滤， 并蒸发， 得到 22.33 克 (-)-8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11- 甲氧基 - 环 丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -1a(2H)- 甲酸甲酯， 其为黄色固体 (92％收率 )。HPLC1 ＞ 99％ ( 保留时间 2.38 分钟 ) ； LC/MS(ES+)566.51(M+H， 100)。-194.64° (c1.03， MeOH)。C30H35N3O6S·0.33H2O 的分析计算值 ： C， 63.04、 H， 6.29、 N， 7.35、 S， 5.61、 H2O， 1.04 ； 实测值 ： C， 63.07、 H， 6.01、 N， 7.24、 S， 5.58、 H2O， 1.03。NMR 显示不存在 Et2NH( 二乙 胺 )。此物质的 EE( 对映异构体过量 ) 使用下述分析性 HPLC 程序来确定 ( ＞ 99％ )。
     在 Thar 分 析 性 SFC 上 确 定 对 映 异 构 体 过 量 的 分 析 条 件 ： 分析性色谱柱为 Chiralcel OJ(0.46×25 厘米， 10μl) ； BPR 压力为 100 巴 ； 温度为 35℃ ； 流速为 3.0 毫升 / 分钟 ； 流动相为 15％ [MeOH/CH3CN(1/1)]/CO2 ； 检测器波长为 254 纳米 ； 保留时间 ( 分钟 ) 为 4 和 6.5。
     中间体 10
     (-)-8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11- 甲 -1a(2H)- 甲酸 . -1a(2H)- 甲酸甲酯 历时 20 分钟向 (-)-8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1，氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     12b- 二氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂(22.33 克， 39.5 毫摩尔 ) 在 MeOH(300 毫升 ) 中的溶液中缓慢加入 1N NaOH(120 毫升 )， 同时保持反应温度＜ 30 ℃。在 N2 下将混合物在室温搅拌 18 小时。HPLC 显示反应完成。 向反应溶液中加入 1N HCl(130 毫升 )。加入完成后， 反应混合物的 pH 为约 2。对反应混 合物中的甲醇进行蒸发。将水 (300 毫升 ) 加到混合物中， 然后其以 CH2Cl2(1×600 毫升， 1×200 毫升 ) 萃取。合并的萃取物以 H2O(2×300 毫升 ) 及盐水 (2×300 毫升 ) 洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 并蒸发， 得到 20.82 克 (96％产率 ) 标题化合物， 其为黄色固体。HPLC 条件 ： 色谱 柱为 Phenomenoex Synergi Polar-RP 4 微米 4.6×50 毫米 ； UV 为 220 纳米 ； 梯度时间为 4 分钟 ； 流速为 4 毫升 / 分钟 ； 75-100％ B ； 溶剂 A 为含有 0.2％ H3PO4 的 10％ MeOH/90％ H2O ； 溶剂 B 为含有 0.2 ％ H3PO4 的 90 ％ MeOH/10 ％ H2O。HPLC ＞ 99 ％ ( 保留时间 1.80 分钟 )。 LC/MS(ES+)552.25(M+H， 100)。 -166.99° (c 1.00， MeOH)。GC 分析 ： CH2Cl24.94％。C， 60.37 ； H， 5.87 ； N， 7.20 ； S， 5.49 ； H2O， C29H33N3O6S·0.16H2O·0.35CH2Cl2 的 分 析 计 算 值 ： 0.49 ； CH2Cl2， 5.02。实测值 ： C， 59.95 ； H， 5.89 ； N， 7.03 ； S， 5.38 ； H2O， 0.47 ； CH2Cl2， 4.94。
     中间体 11
     (+/-)-8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11- 甲 -1a(2H)- 甲酸 . -1a(2H)- 甲酸甲酯 (100 毫 向 (+/-)-8- 环 己 基 -5-[[[( 二 甲 基 氨 基 ) 磺 酰 基 ] 氨 基 ] 羰 基 ]-1， 12b- 二氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂克， 0.177 毫摩尔 ) 在 THF/ 甲醇混合物 (2.0 毫升 /2.0 毫升 ) 中的溶液中加入 2N NaOH 溶液 (1.0 毫升 )。在微波条件下将反应混合物在 90 ℃加热 5 分钟。然后将其浓缩， 以 1N HCl 溶液酸化， 并以乙酸乙酯 (2×20 毫升 ) 萃取。合并有机层， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 及 浓缩。残留物通过制备性 HPLC 来纯化， 得到所要产物， 其为淡黄色固体 (59 毫克， 60％产 + 1 保留时间为 3.850 分钟。 H NMR(300MHz， MeOD)δppm 0.25(m， 率 )。MS m/z 552(MH )， 0.38H)1.14-2.22(m ， 11.62H)2.69-2.98(m ， 2H)3.02(s ， 2.28H)3.02(s ， 3.72H)3.41(d ， J ＝ 15.00Hz， 0.62H)3.88(s， 3H)4.01(d， J ＝ 15.00Hz， 0.38H)5.26(d， J ＝ 15.00Hz， 0.38H)5.45(d， J ＝ 14.64Hz， 0.62H)6.94-7.02(m， 1H)7.13(d， J ＝ 2.56Hz， 0.38H)7.21(d， J ＝ 2.20Hz， 0.62H)7.26(d， J ＝ 8.42Hz， 0.62H)7.30(d， J ＝ 8.78Hz， 0.38H)7.53(dd， J ＝ 8.42， 1.46Hz， 0.62H)7.61(dd， J ＝ 8.60， 1.65Hz， 0.38H)7.85(d， J ＝ 8.42Hz， 0.62H)7.89(d， J ＝ 8.42Hz， 0.38H)8.10(s， 0.38H)8.28(d， J ＝ 1.46Hz， 0.62H)。
     中间体 12
     (1aR)-[ 部分 ]-8- 环己基 -N5-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1， 12b- 二氢 -N1a-[(2R， 3S)-3- 羟基 -4， 7， 7- 三甲基二环 [2.2.1] 庚 -2- 基 ]-11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， -1a， 5(2H)- 二甲酰胺 .1-a][2] 苯并氮杂
     将 TBTU(437 毫克， 1.36 毫摩尔 ) 与 DIPEA( 二异丙基乙基胺 )(0.95 毫升， 5.436 毫摩尔 ) 加到 (+/-)-8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二 氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂48-1a(2H)- 甲酸 (500 毫克， 0.毫摩尔 ) 在 DMSO(20.0 毫升 ) 中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌 15 分钟。然后加入 (2S， 3R)-3- 氨基 -1， 7， 7- 三甲基二环 [2.2.1] 庚 -2- 醇 (280 毫克， 1.36 毫摩尔 )， 并将反 应混合物在室温搅拌过夜。以水使反应混合物淬灭， 并以 1N HCl 溶液酸化。褐色固体分离 出来， 其通过过滤来收集。接着， 此物质通过制备性 HPLC 在下述条件下来分离 ： 色谱柱为 Waters Sunfire 19 毫米 ×100 毫米 ； 溶剂 A 为 10％ CH3CN-90％ H2O-0.1％ TFA ； 溶剂 B 为 90％ CH3CN-10％ H2O-0.1％ TFA ； 程序为以 65％溶剂 B 开始， 最初保持时间为 5 分钟， 然后历 时 30 分钟逐渐增加至 90％溶剂 B ； 流速为 25 毫升 / 分钟 ； 加载量为 50-60 毫克 / 操作。
     在上述 HPLC 条件下洗脱 (1aR)-[ 部分 ]-8- 环己基 -N5-[( 二甲基氨基 ) 磺酰 基 ]-1， 12b- 二氢 -N1a-[(2R， 3S)-3- 羟基 -4， 7， 7- 三甲基二环 [2.2.1] 庚 -2- 基 ]-11- 甲氧 基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -1a， 5(2H)- 二甲酰胺， 接着洗脱 (1aS)-[ 部 12b- 二氢 -N1a-[(2R， 3S)-3- 羟基 -4， 7， 分 ]-8- 环己基 -N5-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1， 7- 三甲基二环 [2.2.1] 庚 -2- 基 ]-11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -1a， 5(2H)- 二甲酰胺。所得产物为淡黄色固体 (230 毫克， 36％产率 )。MS m/z 703(MH+)， 保 留 时 间 为 3.936 分 钟。1H NMR(500MHz， MeOD)δppm 0.14-0.24(m， 2.64H)0.51(s， 2.46H)0.72-2.21(m ， 20.9H)2.49(m ， 0.18H)2.62(m ， 0.82H)2.85(m ， 0.18H)2.96(m ， 0.82H)3.03(s ， 6H)3.39(m ， 0.82H)3.49-3.58(m ， 1.64H)3.71-3.80(m ， 0.36H)3.90(s ， 3H)4.17(d， J ＝ 14.65Hz， 0.18H)5.06(d， J ＝ 14.65Hz， 0.18H)5.37(d， J ＝ 14.95Hz， 0.82H)6.73(d， J ＝ 5.49Hz， 0.82H)6.98-7.05(m， 1H)7.08(d， J ＝ 4.58Hz， 0.18H)7.10(d， J ＝ 2.44Hz， 0.18H)7.21(d， J ＝ 2.44Hz， 0.82H)7.31(d， J ＝ 8.55Hz， 0.82H)7.34(d， J＝ 8.55Hz， 0.18H)7.59-7.64(m， 1H)7.87-7.93(m， 1H)7.99(s， 0.18H)8.09(d， J ＝ 1.22Hz， 0.82H)。
     中间体 13
     (1aS)-[ 部分 ]-8- 环己基 -N5-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1， 12b- 二氢 -N1a-[(2R， 3S)-3- 羟基 -4， 7， 7- 三甲基二环 [2.2.1] 庚 -2- 基 ]-11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， -1a， 5(2H)- 二甲酰胺 .1-a][2] 苯并氮杂
     将 TBTU(437 毫 克， 1.36 毫 摩 尔 ) 与 DIPEA(0.95 毫 升， 5.436 毫 摩 尔 ) 加 到 (+/-)-8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11- 甲氧 基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -1a(2H)- 甲酸 (500 毫克， 0.906 毫摩尔 ) 在 DMSO(20.0 毫升 ) 中的溶液中。 将反应混合物在室温搅拌 15 分钟。 然后加入 (2S， 3R)-3- 氨 基 -1， 7， 7- 三甲基二环 [2.2.1] 庚 -2- 醇 (280 毫克， 1.36 毫摩尔 )， 并将反应混合物在室温搅拌过夜。 以水使反应混合物淬灭， 接着以 1N HCl 溶液酸化。 褐色固体分离出来， 其通过过 滤来收集。接着， 此物质通过制备性 HPLC 在下述条件下来分离 ： 色谱柱为 Waters Sunfire 19 毫米 ×100 毫米 ； 溶剂 A 为 10％ CH3CN-90％ H2O-0.1％ TFA ； 溶剂 B 为 90％ CH3CN-10％ H2O-0.1％ TFA ； 程序为以 65％溶剂 B 开始， 最初保持时间为 5 分钟， 接着历时 30 分钟逐渐 增加至 90％溶剂 B ； 流速为 25 毫升 / 分钟 ； 加载量为 50-60 毫克 / 操作。
     在上述 HPLC 条件下， 在 (1aR)-[ 部分 ]-8- 环己基 -N5-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1， 12b- 二氢 -N1a-[(2R， 3S)-3- 羟基 -4， 7， 7- 三甲基二环 [2.2.1] 庚 -2- 基 ]-11- 甲氧基 - 环 丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -1a， 5(2H)- 二甲酰胺后洗脱 (1aS)-[ 部分 ]-8- 环 -1a， 5(2H)- 二 12b- 二氢 -N1a-[(2R， 3S)-3- 羟基 -4， 7， 7- 三甲基二环 己基 -N5-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1， [2.2.1] 庚 -2- 基 ]-11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂+保留时间为 4.038 甲酰胺。 所得产物为淡黄色固体 (215 毫克， 34％产率 )。 MS m/z 703(MH )， 1 分 钟。 H NMR(500MHz， MeOD)δppm0.20(m， 0.38H)0.75(s， 1.86H)0.76(s， 1.86H)0.84(s， 1.86H)0.85(s ， 1.14H)0.89-2.18(m ， 18.9H)2.52(m ， 0.38H)2.70(m ， 0.62H)2.85(m ， 0.38H)2.97(m， 0.62H)3.03(s， 2.28H)3.04(s， 3.72H)3.33-3.39(m， 0.62H)3.43-3.51(m， 1.24H)3.73-3.77(m， 0.38H)3.78-3.84(m， 0.38H)3.90(s， 1.86H)3.90(s， 1.14H)4.14(d， J ＝ 14.65Hz， 0.38H)5.11(d， J ＝ 14.65Hz， 0.38H)5.44(d， J ＝ 15.26Hz， 0.62H)6.68(d， J ＝ 4.88Hz， 0.62H)6.96-7.03(m， 1H)7.07(d， J ＝ 5.19Hz， 0.38H)7.12(d， J ＝ 2.44Hz， 0.38H)7.23(d， J ＝ 2.14Hz， 0.62H)7.27(d， J ＝ 8.54Hz， 0.62H)7.33(d， J ＝ 8.54Hz， 0.38H)7.55(dd， J ＝ 8.39， 1.68Hz， 0.62H)7.62(dd， J ＝ 8.55， 1.53Hz， 0.38H)7.87(d， J ＝ 8.54Hz， 0.62H)7.91(d， J ＝ 8.55Hz， 0.38H)8.08(d， J ＝ 1.22Hz， 0.38H)8.10(d， J ＝ 1.22Hz， 0.62H)。
     中间体 14
     (-)-8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11- 甲 -1a(2H)- 甲酸 .氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     5将 10N NaOH 溶液 (2.0 毫升， 20 毫摩尔 ) 与 4 毫升水加到 (1aR)-[ 部分 ]-8- 环 己 基 -N -[( 二 甲 基 氨 基 ) 磺 酰 基 ]-1， 12b- 二 氢 -N1a-[(2R， 3S)-3- 羟 基 -4， 7， 7- 三 甲基 二 环 [2.2.1] 庚 -2- 基 ]-11- 甲 氧 基 - 环 丙 并 [d] 吲 哚 并 [2， 1-a][2] 苯 并 氮 杂 -1a， 5(2H)- 二甲酰胺 (160 毫克， 0.228 毫摩尔 ) 在 THF( 四氢呋喃 )/MeOH( 甲醇 )(7 毫 升 /7 毫升 ) 中的溶液中。在微波条件下将反应混合物在 120 ℃加热 1 小时。然后将 其浓缩， 以浓 HCl 溶液酸化， 并以乙酸乙酯萃取两次 (2×30 毫升 )。合并有机层， 干燥(MgSO4)， 过滤， 及在真空中浓缩成橙色油状物。接着， 粗产物通过制备性 HPLC 色谱柱来 纯化， 得到产物， 其为淡黄色固体 (80 毫克， 64％产率 )。平均旋光率 (average specific rotation)-130.85°； 溶剂 MeOH ； 波长 589 纳米 ； 50 厘米样品池。MS m/z 552(MH+)， 保留时 1 间： 3.760 分钟。 HNMR(500MHz， MeOD)δppm 0.27(m， 0.38H)1.14-2.22(m， 11.62H)2.76(m， 0.38H)2.80-2.92(m ， 1H)2.92-3.09(m ， 6.62H)3.45(d ， J ＝ 14.95Hz ， 0.62H)3.90(s ， 1.86H)3.91(s， 1.14H)4.04(d， J ＝ 15.26Hz， 0.38H)5.28(d， J ＝ 15.26Hz， 0.38H)5.47(d， J ＝ 15.26Hz， 0.62H)6.95-7.05(m， 1H)7.15(d， J ＝ 2.75Hz， 0.38H)7.23(d， J ＝ 1.83Hz， 0.62H)7.28(d， J ＝ 8.55Hz， 0.62H)7.33(d， J ＝ 8.54Hz， 0.38H)7.54(dd， J ＝ 8.39， 1.68Hz， 0.62H)7.63(dd， J ＝ 8.55， 1.53Hz， 0.38H)7.86(d， J ＝ 8.55Hz， 0.62H)7.91(d， J ＝ 8.55Hz， 0.38H)8.11(d， J ＝ 1.22Hz， 0.62H)8.29(d， J ＝ 1.22Hz， 0.38H)。
     中间体 15
     (+)-8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11- 甲 -1a(2H)- 甲酸 .氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     5将 10N NaOH 溶液 (1.8 毫升， 18 毫摩尔 ) 与 4 毫升水加到 (1aS)-[ 部分 ]-8- 环己 基 -N -[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1， 12b- 二氢 -N1a-[(2R， 3S)-3- 羟基 -4， 7， 7- 三甲基二环 -1a， 5(2H)- 二[2.2.1] 庚 -2- 基 ]-11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂甲酰胺 (130 毫克， 0.185 毫摩尔 ) 在 THF/MeOH(7 毫升 /7 毫升 ) 中的溶液中。 在微波条件下 将反应混合物在 120℃加热 1 小时。将其浓缩， 以浓 HCl 溶液酸化， 并以乙酸乙酯萃取两次 (2×30 毫升 )。 合并有机层， 干燥 (MgSO4)， 过滤， 及在真空中浓缩， 得到橙色油状物。 然后粗 产物通过制备性 HPLC 色谱柱来纯化， 得到产物， 其为淡黄色固体 (68 毫克， 67％产率 )。平 均旋光率 +174.73°； 溶剂 MeOH ； 波长 589 纳米 ； 50 厘米样品池。MS m/z552(MH+)， 保留时间 1 为 3.773 分钟。 H NMR(500MHz， MeOD)δppm 0.27(m， 0.38H)1.14-2.22(m， 11.62H)2.76(m， 0.38H)2.80-2.92(m ， 1H)2.92-3.09(m ， 6.62H)3.45(d ， J ＝ 14.95Hz ， 0.62H)3.90(s ， 1.86H)3.91(s， 1.14H)4.04(d， J ＝ 15.26Hz， 0.38H)5.28(d， J ＝ 15.26Hz， 0.38H)5.47(d， J ＝ 15.26Hz， 0.62H)6.95-7.05(m， 1H)7.15(d， J ＝ 2.75Hz， 0.38H)7.23(d， J ＝ 1.83Hz， 0.62H)7.28(d， J ＝ 8.55Hz， 0.62H)7.33(d， J ＝ 8.54Hz， 0.38H)7.54(dd， J ＝ 8.39， 1.68Hz， 0.62H)7.63(dd， J ＝ 8.55， 1.53Hz， 0.38H)7.86(d， J ＝ 8.55Hz， 0.62H)7.91(d， J ＝ 8.55Hz， 0.38H)8.11(d， J ＝ 1.22Hz， 0.62H)8.29(d， J ＝ 1.22Hz， 0.38H)。
     中间体 16
     2- 溴 -3- 环己基 -1H- 吲哚 -6- 甲酸 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯 . 向机械搅拌的 2- 溴 -3- 环己基 -1H- 吲哚 -6- 甲酸 (80 克， 0.24mol) 于无水二氯 80 克 ) 和碳酸银 (275甲烷 (1.2L) 和 THF(100mL) 中的溶液中加入经活化的分子筛 (克， 0.99mol)。将反应混合物冷却至 0℃， 并滴加叔丁基溴 (142 克， 1.04mol)。将混合物在 室温搅拌过夜， 并通过 TLC( 己烷 - 乙酸乙酯 80 ∶ 20， Rf( 产物 ) ＝ 0.7) 进行监测。如果 留有任何溴代酸未发生转化， 则再加入 10％的碳酸银， 并再继续搅拌 2-4 小时。结束后， 将 反应混合物过滤通过薄的硅藻土床。滤渣 (filtrand) 用二氯甲烷 (500mL) 洗涤。真空浓 缩合并的滤液， 由此得到的粗产物通过硅胶色谱 (230-400 目 )( 用 0-2％乙酸乙酯 / 石油 醚的梯度进行洗脱 ) 进行纯化。合并同质的级分， 并减压蒸发， 得到 80 克 (85％ ) 标题化 合物。HPLC ： 90.1 ％ (RT ＝ 6.56 分钟 )， 柱： C18BDS(50×4.6mm)， 流动相 ： 0.1 ％ TFA/ 水 ： ACN( 乙腈 ) 的梯度 (30 → 100 → 30)， 流速 ： 0.8mL/ 分钟。LCMS ： 99.8％ (RT ＝ 4.44min)， 柱： Geneis， C18 50×4.6mm， 流动相 ： 0.1 ％甲酸 / 水 ： ACN 的梯度 (70 → 95 → 70)， 流速 ： 1 0.8mL/ 分钟， M-1 ＝ 376.5。 HNMR(CDCl3)(400MHz)δ1.37-1.40(m， 3H， 环己基 )， 1.62(s， 9H， 叔丁基 )， 1.80-1.94( 两组多重峰， 分别是 3H 和 4H， 环己基部分 )， 2.81(m， 1H， 环己基的 CH- 苄型的 (CH of cyc.Hexyl-benzylic))， 7.70-7.75(m， 2H， 吲哚 -H4 和 H5)， 8.04(s， 1H， 吲哚 -H7)， 8.52(s， 1H， 吲哚 -NH)。
     中间体 17
     3- 环己基 -2-(2- 甲酰基 -4- 甲氧基苯基 )-1H- 吲哚 -6- 甲酸 (1， 1- 二甲基乙基 )酯. 将 2- 溴 -3- 环己基 -1H- 吲哚 -6- 甲酸叔丁酯 (72 克， 0.19mol) 溶解在甲苯和乙 醇的 1 ∶ 1 混合物 (720mL) 中并脱气。然后加入 LiCl(23.9 克， 0.51mol)， 接着加入碳酸 钠 (720mL， 经单独脱气的浓度为 1.0M 的溶液 ) 和 Pd-tetrakis(13.1 克， 0.011mol)。搅拌 0.25 小时后， 加入 2- 甲酰基 -4- 甲氧基苯基硼酸 (41.1 克， 0.22mol)， 并将反应混合物加 热至 85℃且保持 4 小时。然后通过 TLC( 己烷 - 乙酸乙酯 80 ∶ 20， Rf( 产物 ) ＝ 0.55) 监 测反应。结束后， 将反应混合物冷却至室温， 加入水 (1.0L)， 然后加入乙酸乙酯 (1.0L)。有 机层用盐水洗涤， 干燥并真空浓缩， 得到标题化合物， 其为黄色固体。收率 ： 75 克 (74％ )。 HPLC ： 99.7％ (RT ＝ 6.30min)， 柱： C18BDS(4.6×50mm)， SC-307， 流动相 ： 0.1％ TFA/ 水 ： ACN 的梯度 (30 → 100 → 30)， 流速 ： 0.8mL/ 分钟。LCMS ： 98.0％ (RT ＝ 5.28min)， 柱： Geneis，
     C18(50×4.6mm)， 流动相 ： 0.1 ％甲酸 / 水 ： ACN 的梯度 (70 → 95 → 70)， 流速 ： 0.8mL/ 分 1 钟， M-1 ＝ 432.2。 HNMR(DMSO-d6)(400MHz)δ1.40-1.48(m， 3H， 环己基 )， 1.57(s， 9H， 叔丁 基 )， 1.84-1.90(m， 7H， 环己基部分 )， 3.09(m， 1H， 环己基的 CH- 苄型的 )， 3.84(s， 3H， OCH3)， 6.55(d， J ＝ 4Hz， 1H， 芳基 H2’)， 7.06(d， 1H， 芳基 H3’)， 7.08(s， 1H， 芳基 H6’)， 7.23(d， 1H， 吲 哚 -H5)， 7.53(d， J ＝ 8Hz， 1H， 吲哚 -H4)， 7.70-7.75(m， 2H， NH+ 吲哚 -H7)， 8.06(s， 1H， CHO)。
     中间体 18
     13- 环己基 -3- 甲氧基 -7H- 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂-6， 10- 二甲酸 10-(1，1- 二甲基乙基 ) 酯·6- 甲酯 .
     将 3- 环己基 -2-(2- 甲酰基 -4- 甲氧基苯基 )-1H- 吲哚 -6- 甲酸叔丁酯 (62.5 克， 0.144mol) 溶解在无水 DMF(1.2L) 中并机械搅拌。然后加入碳酸铯 (84 克， 0.17mol) 和 2-( 二甲氧基磷酰基 ) 丙烯酸甲酯 (GC 纯度为 65-70％， 56.2 克， 0.18mol)， 将反应混合物 加热至 65℃且保持 4 小时， 且通过 TLC( 己烷 - 乙酸乙酯 80 ∶ 20， Rf( 产物 ) ＝ 0.7) 监测 反应。结束后， 将混合物冷却至室温， 然后用水 (1.0L) 淬灭。黄色固体沉淀出来， 过滤收集 所述固体并风干。 然后将该物质在甲醇中浆化， 过滤， 并真空干燥， 得到产物， 其为黄色粉末 (70 克， 90 ％ )。HPLC ： 99.1 ％ (RT ＝ 6.45 分钟 )， 柱： C18BDS(4.6×50mm)， 流动相 ： 0.1 ％ TFA/ 水 ： ACN 的梯度 (30 → 100 → 30)， 流速 ： 0.8 毫升 / 分钟。LCMS ： 100％ (RT ＝ 7.00 分 钟 )， 柱： Geneis， C18(50×4.6mm)， 流动相 ： 0.1 ％甲酸 / 水 ： ACN 的梯度 (70 → 95 → 70)， 1 流速： 0.8 毫 升 / 分 钟， M+1 ＝ 502.2。 H NMR(CDCl3)(400MHz)δ1.10-1.30(m， 3H， 环己 基 )， 1.64(s， 9H， 叔丁基 )， 1.77-2.07(m， 7H， 环己基部分 )， 2.80(m， 1H， 环己基的 CH- 苄型 的 )， 3.84(s， 3H， OCH3)， 3.93(s， 3H， COOCH3)， 4.15 和 5.65( 两个宽峰， 各为 1H， 烯丙酰基 的 CH2(allylic CH2))， 6.95(s， 1H， 芳 基 H6’)， 7.01(d， 1H， 芳 基 H2’)， 7.53(d， J ＝ 8Hz， 1H， 芳基 H3’)， 7.70(d， J ＝ 4Hz， 1H， 吲哚 -H5)， 7.84(s+d， 2H， 烯基的 H+ 吲哚 -H4)， 8.24(s， 1H， 13 吲 哚 -H7)。 C NMR(CDCl3)(100.0MHz)δ166.92， 165.71， 158.96， 142.28， 136.47， 13.50， 134.61， 132.43， 132.01， 129.73， 124.78， 124.68， 120.33， 119.39， 119.04， 115.62， 115.05， 111.27， 80.27， 55.49， 52.50， 39.09， 36.81， 33.40， 28.38， 27.15， 26.28。
     中间体 19
     2-( 二甲氧基氧膦基 )-2- 丙烯酸甲酯 .向配备有机械搅拌器、 冷凝器、 温度控制器和氮气进口的 5L 四颈圆底烧瓶中加入 低聚甲醛 (40.5 克， 1.35 摩尔 )、 MeOH( 甲醇 )(2L) 和哌啶 (2mL)。将反应混合物在氮气气 氛下加热至回流且保持 3 小时。冷却到 50℃后， 一次性加入 2-( 二甲氧基磷酰基 ) 乙酸甲 酯 (150 克， 0.824 摩尔 )。将反应混合物继续回流 18 小时。冷却到室温后， 真空浓缩反应 溶液， 得到透明无色油状物。在配备有温度控制器、 氮气进口、 磁力搅拌器和迪安 - 斯托克 分水器 (Dean-Stark apparatus) 的 3L 四颈圆底烧瓶中将上述油状物溶解在无水甲苯 (1L) 中。向溶液中加入 TsOH·H2O(5.2 克 )。然后将反应混合物共沸回流 18 小时， 从而除去甲 醇。冷却到室温后， 将溶液真空浓缩， 得到黄色油状物， 将其在 150-155℃ /0.2mm Hg 的条 件下真空蒸馏， 得到产物， 其为无色油状物 (135.0 克 )。根据 1H NMR 确定纯度为 90％。1H NMR(CDCl3， 300MHz)δ7.0(dd， J ＝ 42.4 和 1.5Hz， 1H)， 6.73(dd， J ＝ 20.5 和 1.8Hz， 1H)， 3.80(s， 6H)， 3.76(s， 3H)。
     中间体 20
     (+/-)-8- 环己基 -1， 12b- 二氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并 -1a， 5(2H)- 二甲酸 5-(1， 1- 二甲基乙基 ) 酯·1a- 甲酯 .氮杂
     在氮气下将氢化钠 (96 毫克， 4 毫摩尔 ) 加到搅拌的氯化三甲基氧化锍 (567 毫克， 4.4 毫摩尔 ) 在无水 DMSO(10 毫升 ) 中的悬浮液中。将所得到的混合物在室温搅拌 30-45 分钟， 然后以小份分批加入纯净的 13- 环己基 -3- 甲氧基 -7H- 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮 杂 -6， 10- 二甲酸 10-(1， 1- 二甲基乙基 ) 酯·6- 甲酯 (1.0 克， 2 毫摩尔 )。悬浮液以 DMSO(5 毫升 ) 稀释， 并在 50℃加热 3-4 小时。使反应混合物冷却至室温， 并加入水。固体 分离出来， 其通过过滤来收集， 并以水洗涤， 接着风干过夜， 得到 1.15 克粗产物。此物质通 过快速柱色谱 ( 硅胶， 3％ MeOH/DCM( 二氯甲烷 )) 来纯化， 得到纯标题化合物 (0.96 克 )。 + 1 LC/MS ： 保留时间 3.816 分钟 ； m/e 516(MH )。 H NMR(400MHz， CDCl3) ： 基于化合物的 NMR 光 谱， 发现产物以相互转化的旋转异构体 (rotamer) 的形式存在。
     下述程序为对外消旋的 (+/-)-8- 环己基 -1， 12b- 二氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -1a， 5(2H)- 二甲酸 5-(1， 1- 二甲基乙基 ) 酯·1a- 甲酯进 行拆分的方法的实施例。使 (+/-)-8- 环己基 -1， 12b- 二氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚 -1a， 5(2H)- 二甲酸 5-(1， 1- 二甲基乙基 ) 酯·1a- 甲酯的样品 溶于异丙醇与乙腈的混合物 (8 ∶ 2) 中， 所得到的最终浓度为 20 毫克 / 毫升。将此混合物 注射至使用下述条件的制备性手性 SFC 色谱系统上 ： Chiralcel OJ-H 色谱柱， 4.6×250 毫 米， 5 微米 ； 流动相为 8％ MeOH/CO2 ； 温度为 35℃ ； 流速为 2 毫升 / 分钟且保持 16 分钟 ； UV 监测在 260 纳米 ； 注射量为 5 微升浓度为约 20.0 毫克 / 毫升的 IPA ∶ ACN(8 ∶ 2) 溶液。中间体 21
     (+/-)-8- 环己基 -1， 12b- 二氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并 -1a， 5(2H)- 二甲酸 1a- 甲酯 . 将 TFA( 三氟乙酸 )(5 毫升 ) 加到 (+/-)-8- 环己基 -1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧 -5- 甲酸叔丁酯 (515 毫氮杂
     基 -1a-( 甲氧基羰基 )- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂克， 1 毫摩尔 ) 在无水 DCM( 二氯甲烷 )(10 毫升 ) 中的溶液中。将所得到的溶液在室温搅拌 约 8 至 12 小时。然后使反应混合物蒸发至干， 得到标题化合物 (0.47 克， 100％ )。LC/MS ： + 1 CDCl3) ： 基于化合物的 NMR 光谱， 发现 保留时间 2.245 分钟 ； m/e 460(MH )。 HNMR(400MHz， 产物以相互转化的旋转异构体的混合物的形式存在。
     中间体 22
     8- 环己基 -1， 12b- 二氢 -11- 甲氧基 -5-[[[( 甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]- 环 -1a(2H)- 甲酸甲酯 . 将 8- 环己基 -1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-( 甲氧基羰基 )- 环丙并 [d] 吲 -5- 甲酸 (140 毫克， 0.31 毫摩尔 ) 与 CDI(64 毫克， 0.40 毫摩丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂尔 ) 在 THF(3 毫升 ) 中的溶液在 60℃搅拌 1 小时。加入 N- 甲基硫酰胺 (68 毫克， 0.62 毫 摩尔 ) 与 DBU(71.6 毫克， 0.47 毫摩尔 )， 并将混合物在 60℃搅拌过夜。然后将反应混合物 倒入冷水中， 以稀盐酸酸化， 并萃取到乙酸乙酯中。萃取物先后以稀盐酸 (0.1N) 与盐水洗 涤， 接着干燥 ( 无水硫酸钠 )， 过滤， 及蒸发， 得到标题化合物， 其为褐色固体。ESI-MS m/e + 552(MH )。使用此物质而无需进一步纯化。
     中间体 23
     8- 环己基 -1， 12b- 二氢 -11- 甲氧基 -5-[[[( 甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]- 环 -1a(2H)- 甲酸 . -1a(2H)- 甲酸甲酯溶于 THF 和 MeOH 的混 使 8- 环己基 -5-[[[( 甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11- 甲氧丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂合物 (2 毫升， 2 毫升 ) 中。然后加入 2.5M NaOH( 水溶液 )(1.2 毫升， 3 毫摩尔 )， 并将反应 混合物在 22℃振荡 2 小时。接着以 1M HCl( 水溶液 )(3 毫升 ) 使溶液中和， 及浓缩， 从而除 去有机溶剂。残留物以 H2O 浆化， 并通过过滤来收集固体， 以 H2O 洗涤， 且干燥， 得到标题化 合物 (160 毫克， 0.30 毫摩尔 )。ESI-MSm/e 538(MH+)。使用此物质而无需进一步纯化。
     中间体 24
     (+/-)-8- 环己基 -5-[[[( 苄基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11-( 甲 -1a(2H)- 甲酸甲酯 . 将 (+/-)-8- 环己基 -1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-( 甲氧基羰基 )- 环丙并 -5- 甲酸 (200 毫克， 0.44 毫摩尔 ) 与 CDI(92 毫克， 0.57氧基 )- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂毫摩尔 ) 在 THF(5 毫升 ) 中的溶液在 60℃搅拌 1 小时。 然后加入 N- 苄基硫酰胺 (164 毫克， 0.88 毫摩尔 ) 与 DBU(100 毫克， 0.66 毫摩尔 )， 并将所得到的混合物在 60℃搅拌过夜。接 着， 将反应混合物倒入冷水中， 以稀盐酸酸化， 并萃取到乙酸乙酯中。有机相以盐酸 (0.1N) 及盐水洗涤， 并干燥 ( 硫酸钠 )， 及在真空中蒸发， 得到标题化合物， 其为褐色固体。ESI-MS + m/e 628(MH )。
     中间体 25
     (+/-)-8- 环己基 -1， 12b- 二氢 -11- 甲氧基 -5-[[[[( 苯基甲基 ) 氨基 ] 磺酰基 ] -1a(2H)- 甲酸 . -1a(2H)- 甲酸所述相似 标题化合物使用与就 8- 环己基 -5-[[[( 甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1，氨基 ] 羰基 ]- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     12b- 二氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 氧基 )- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂+ 1的程序由 (+/-)-8- 环己基 -5-[[[( 苄基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11-( 甲 -1a(2H)- 甲酸甲酯开始来制备。 ESI-MS MeOD)δppm1.22-2.20(m， 13H)3.27-3.31(m， 1H)3.47(d， J m/e 613(MH )。 H NMR(500MHz， ＝ 14.95Hz， 0.6H)3.92(d， J ＝ 2.44Hz， 3H)4.04(d， 0.4H)4.31(d， J ＝ 2.75Hz， 2H)5.24(d， 0.4H)5.48(d， 0.6H)7.02(d， 1H)7.17(d， J ＝ 2.75Hz， 1H)7.19-7.35(m， 5H)7.39(t， J ＝ 7.48Hz， 2H)7.45-7.52(m， 1H)7.80(d， J ＝ 1.53Hz， 0.4H)7.85(dd， J ＝ 8.39， 6.87Hz， 1H)8.22(d， J ＝ 1.53Hz， 0.6H)。
     中间体 26
     (+/-)-8- 环己基 -5-[[( 环丙基磺酰基 ) 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11- 甲氧 -1a(2H)- 甲酸 . 将 (+/-)-8- 环己基 -1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-( 甲氧基羰基 )- 环丙 -5- 甲酸 (1 当量 ) 与羰基二咪唑 (1.5 当量 ) 在无基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂水 THF 中的混合物在 50℃加热 30 分钟， 然后使其冷却至室温。然后连续加入 1 当量的环丙 基磺酰胺与 1， 8- 二氮杂二环 [5.4.0] 十一碳 -7- 烯 (2 当量 )。将所得到的混合物在室温 搅拌过夜。用酸性水溶液处理后， 经分离的粗产物通过制备性 HPLC 来纯化。接着， 使用 1N NaOH 的 THF-MeOH 溶液来水解中间体酯， 得到标题化合物。LC/MS ： 保留时间为 2.030 分钟 ； + 1 m/e 549(MH )。 HNMR(400MHz， CDCl3) ： 基于化合物的 NMR 光谱， 发现产物以相互转化的旋转 异构体的形式存在。
     中间体 27
     3- 甲基 -8-( 苯基甲基 )-3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 .
     在配备有机械搅拌器、 回流冷凝器和温度计的 5L 三颈圆底烧瓶中将顺式 -1- 苄 基 -2， 5- 二 ( 氯 甲 基 ) 吡 咯 烷 盐 酸 盐 (37.5 克， 0.13 摩 尔 )( 如 公 开 的 PCT 专 利 申 请 WO200232902 中所述进行制备 ) 悬浮在 CH3CN(900 毫升 ) 中。将搅拌的悬浮液温热至 50℃， 加入 NaHCO3(97 克， 1.1 摩尔 )， 并将悬浮液温热至 70 ℃。加入 NaI(50 克， 0.33 摩尔 )， 在 70℃搅拌 5 分钟， 此时将加料漏斗固定在冷凝器顶部。向加料漏斗中加入 48 毫升浓度为 40％的 MeNH2( 甲胺 )(0.55 摩尔 ) 水溶液 /850 毫升 CH3CN， 并滴加该溶液 ( 加入速率保持 在 10-15 毫升 / 分钟 )。75 分钟后完成加入， 此时将反应混合物冷却至室温， 滤出固体并将 溶剂浓缩至～ 800 毫升。将反应混合物倒入 EtOAc(800 毫升 ) 中， 用 1N NaOH(2×100 毫 升 ) 洗涤。水相用 EtOAc(2×100 毫升 ) 再萃取， 合并的有机相用 Na2SO4 干燥并浓缩。将所 得残余物加载到硅胶 (620 克 ) 上并用 2.8 ％ MeOH/0.4 ％浓 NH4OH/CHCl3( 总共 6L) 洗脱。 从 2L 至 4L 收集纯馏分。浓缩， 得到 8.76 克 (32 ％收率 ) 标题化合物， 其为棕色油状物。
     H NMR(400MHz， CDCl3)δppm1.79-1.87(m， 2H)1.92-1.99(m， 2H)2.23(s， 3H)2.27-2.37(m， 2H)2.54-2.63(m ， 2H)3.10(s ， 2H)3.52(s ， 2H)7.20-7.26(m ， 1H)7.30(t ， J ＝ 7.30Hz ， 2H)7.36-7.42(m， 2H)。LC 方法 ： 溶剂 A ＝ 10 ％ MeOH/90 ％ H2O/0.1 ％ TFA， 溶剂 B ＝ 90 ％ MeOH/10％ H2O/0.1％ TFA， 起始％ B ＝ 0％， 最终％ B ＝ 100， 流速＝ 4 毫升 / 分钟， 梯度时 间＝ 2 分钟， 运行时间＝ 3 分钟， 柱： Phenomenex-Luna 10μm C1850mm×3.0mm， Rt ＝ 0.23 + + 分钟。MS ： (ES )m/z(M+H) ＝ 217.3。从柱中得到额外的 6.1 克混合馏分 ( 通过 1H NMR 积 分确定纯度＞ 80％ )。
     中间体 28
     13- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷二盐酸盐 .
     将 N- 甲基 -N- 苄基二环二胺 (14.22 克， 65.7 毫摩尔 ) 溶解在 650ml 甲醇中， 加入 17 毫升浓度为 12M 的盐酸水溶液。在氮气气氛下将溶液置于 2 升帕尔瓶中， 并向反应混合 物中加入 3.66 克的 20％氢氧化钯 / 炭。将混合物置于帕尔摇动器上， 在压力为 60psig( 磅 / 平方英寸 ) 的氢气下保持 17 小时。通过 TLC 分析 ( 硅胶板， 用 10 体积份 [2M 氨 / 甲醇 溶液 ] 在 90 体积份氯仿中的溶液洗脱 ) 判断反应完成。使反应混合物过滤通过硅藻土塞， 所述塞接着先后用水和甲醇冲洗。 将合并的滤液真空浓缩， 加入甲醇和苯， 直到得到均匀溶 液。然后加入 75 毫升浓度为 2.0M 的盐酸于乙醚中的溶液。真空除去产物溶液中的挥发 物。使用甲醇 / 苯混合物从产物溶液中反复对水进行共沸， 由此最终得到浅黄色固体。将 固体产物 3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷真空干燥过夜， 得到 11.98 克 (91％ ) 吸 1 湿性固体。 将产物从烧瓶中取出， 由于其吸湿性而在氮气气氛下将其装在手套式袋子中。 H
     NMR(500MHz， DMSO-D6)δppm1.96-2.14(m， 2H)2.34(d， J ＝ 8.24Hz， 2H)2.66(s， 3H)3.46(d， J ＝ 11.90Hz， 2H)3.58(s， 3H， 含 有 H2O)4.17(s， 2H)9.92(s， 1H)10.21(s， 1H)11.39(s， 1H)。 13 CNMR(126MHz， DMSO-D6)δppm 24.04(s， 1C)43.49(s， 1C)52.50(s， 1C)54.47(s， 1C)。
     中间体 29 和 30
     3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸苯基甲基酯和 3-( 苯基甲基 )-3， 8- 二氮 杂二环 [3.2.1] 辛烷
     将三乙胺 (1.44 毫升， 10.363 毫摩尔 ) 加到 8- 叔丁氧羰基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 (2.0 克， 9.421 毫摩尔 ) 于 CH2Cl2(20 毫升 ) 中的溶液中， 在 0℃滴加氯甲酸 苄酯 (1.46 毫升， 10.363 毫摩尔 )， 并将反应混合物在 0℃搅拌 0.5 小时， 然后使其温热至室 温， 继续搅拌 3 天。然后用水将反应混合物淬灭， 并用 1N HCl 溶液酸化。分离有机层， 用盐 水洗涤， 干燥 (MgSO4) 并浓缩， 得到无色稠厚油状物， 其为粗产物。然后将 70 毫克该物质溶 解在 1， 2- 二氯乙烷 (2 毫升 ) 和 TFA(0.5 毫升 ) 中。将反应混合物在室温搅拌 2 小时。然 后蒸发溶剂和 TFA， 得到两种标题化合物的混合物， 其为无色稠厚油状物。
     中间体 31
     制备磺酰胺的一般方法。将酸 (1 当量 ) 和羰基二咪唑 (1.5 当量 ) 于无水 THF 中 的混合物在 50℃加热 30 分钟， 并使其冷却至室温。接着先后加入 1 当量硫酰胺 (R ＝ NR2) 或磺酰胺 (R ＝烷基或芳基 ) 和 DBU(2 当量 )。将所得混合物在室温搅拌过夜。用酸性水溶 液处理后， 经分离的粗产物通过制备性 HPLC 来纯化， 得到标题中间体。
     中间体 32
     制备酸的一般方法。使用 1N NaOH/THF-MeOH 对甲酯进行水解。 中间体 33将纯净的 CDI(0.049 克， 0.302 毫摩尔 ) 加到搅拌的酸 (0.092 克， 0.200 毫摩尔 ) 于 THF(1 毫升 ) 中的溶液中， 将混合物在 50℃加热 30 分钟， 然后使其冷却至室温。接着先 后加入 N- 环丙基 -N- 甲基硫酰胺 (0.0451 克， 0.300 毫摩尔 ) 和 DBU(0.060 毫升， 0.400 毫 摩尔 )。混合物用超声波处理 1-2 小时， 然后在室温搅拌过夜。用 MeOH(0.5 毫升 ) 将反应 淬灭， 然后用 1N HCl 酸化并用 EtOAc(2×25 毫升 ) 萃取， 用水和盐水洗涤并干燥 (Na2SO4)。 通过硅胶快速色谱 (5％ MeOH/DCM) 对粗产物 (0.123 克 ) 进行纯化， 得到所期望的产物， 其 为灰白色固体 (0.101 克， 85％ )。
     中间体 34
     在氮气气氛下将 1N NaOH(2 毫升， 2.000 毫摩尔 ) 加到搅拌的甲酯 (0.098 克， 0.166 毫摩尔 ) 于 THF-MeOH 中的溶液中。将混合物在室温搅拌 2 小时， 然后用 1N HCl(3 毫升 ) 酸化， 用 EtOAc(2×25 毫升 ) 萃取， 用水和盐水洗涤并干燥 (MgSO4)。蒸发溶剂， 得到 + 酸， 其为灰白色固体 (0.0942 克， 98％ )。LC/MS ： m/e 578(MH )。LC/MS 方法 ： 起始％ B ＝ 0 ； 最终％ B ＝ 100 ； 梯度时间 ： 3 分钟 ； 停止时间 ： 4 分钟 ； 流速 ： 4 毫升 / 分钟 ； 波长 ： 220 ； 溶 剂A： 10％ MeOH/90％ H2O/0.1％三氟乙酸 ； 溶剂 B ： 10％ H2O/90％ MeOH/0.1％三氟乙酸 ； 柱： XBridge 4.6×50mm S5。
     中间体 35
     在 0 ℃将叔丁醇 (1.35 毫升， 14 毫摩尔 ) 滴加到 CSI(1.24 毫升， 14 毫摩尔 ) 的 CH2Cl2(10 毫升 ) 溶液中。将所形成的溶液在 0 ℃搅拌 2 小时。滴加 N- 甲基丙烷 -2- 胺 (1.57 毫升， 14.13 毫摩尔 ) 和 TEA(2.167 毫升， 15.54 毫摩尔 ) 于 CH2Cl2(3 毫升 ) 中的溶 液。将所形成的反应混合物在室温搅拌 2 小时。反应混合物用 EtOAc 稀释， 用冷的 1N HCl 和盐水洗涤， 干燥 (MgSO4)， 除去溶剂， 残余物通过 Biotage 40M 柱 (EtOAc-MeOH(90-10)/ 己
     烷 5％至 100％ ) 来纯化， 得到产物， 其为无色胶状物 (2.3 克， 65％ )。1H NMR(400MHz， 氯 仿 -d)δppm 1.19(d， J ＝ 6.55Hz， 6H)1.49(s， 9H)2.90(s， 3H)4.05-4.26(m， 1H)7.02( 宽单 峰， 1H)。
     中间体 36
     向 N- 异丙基 -N- 甲基氨磺酰基氨基甲酸叔丁酯 (2.3 克， 9.12 毫摩尔 ) 中加入冷 的 HCl(6 毫升， 24.00 毫摩尔 ) 并在室温搅拌 2 小时， 除去溶剂， 得到产物， 其为浅黄褐色 1 固体 (1.38 克， 99 ％ )。 H NMR(400MHz， 氯仿 -d)δppm 1.16(d， J ＝ 6.80Hz， 5H)2.72(s， 3H)4.16(dt， J ＝ 13.53， 6.70Hz， 1H)4.43( 宽单峰， 1H)。
     中间体 37
     使用 CDI 和 DBU 由酸 (0.25 克， 0.54 毫摩尔 ) 和胺来制备产物 (0.261 克， 81％ )。 1 LC-MS 保留时间 ： 3.635 分钟 ； MS m/z(M+H)594。 HNMR 表明化合物以旋转异构体 ( ～ 4/3) 的形式存在。LC/MS 方法 ： 起始％ B ＝ 0 ； 最终％ B ＝ 100 ； 梯度时间 ： 3 分钟 ； 停止时间 ： 4 分钟 ； 流速 ： 4 毫升 / 分钟 ； 波长 ： 220 ； 溶剂 A ： 10％ MeOH/90％ H2O/0.1％三氟乙酸 ； 溶剂 B ： 10％ H2O/90％ MeOH/0.1％三氟乙酸 ； 柱： XBridge 4.6×50mm S5。
     中间体 38
     使用 NaOH 于 THF/MeOH 中的溶液由酯 (0.258 克， 0.435 毫摩尔 ) 来制备酸 (0.22 克， 87％ )。分离所述酸， 其为浅黄色固体。LC-MS 保留时间 ： 3.608 分钟 ； MS m/z(M+H)580。 LC/MS 方法 ： 起始％ B ＝ 0 ； 最终％ B ＝ 100 ； 梯度时间 ： 3 分钟 ； 停止时间 ： 4 分钟 ； 流速 ： 4 毫升 / 分钟 ； 波长 ： 220 ； 溶剂 A ： 10％ MeOH/90％ H2O/0.1％三氟乙酸 ； 溶剂 B ： 10％ H2O/90％ 1 MeOH/0.1 ％ 三 氟 乙 酸 ； 柱： XBridge 4.6×50mm S5。 HNMR 表 明 存 在 旋 转 异 构 体 ( ～ 1 1/2)。主要异构体 ： H NMR(400MHz， 氯仿 -d)δppm 0.41(t， J ＝ 6.30Hz， 1H)1.08-2.15(m，
     17H)2.63-2.80(m， 1H)2.84-2.96(m， 1H)3.04(s， 3H)3.84(s， 3H)4.03(d， J ＝ 14.86Hz， 1H)4.22-4.41(m， 1H)5.35(d， J ＝ 15.11Hz， 1H)6.86(dd， J ＝ 8.44， 2.39Hz， 1H)6.98(d， J＝ 2.27Hz， 1H)7.20(d， J ＝ 8.56Hz， 1H)7.67(d， J ＝ 8.31Hz， 1H)7.81-7.89(m， 1H)8.10(s， 1H)。
     制备用于一些实施例的酰胺的一般方法。将酸衍生物 (1 当量 ) 与相应的胺 (1.2 当量 )、 三乙胺 (2-3 当量 ) 和 TBTU(1.3 当量 ) 在无水 DMF 中混合， 在室温搅拌 1-2 小时， 直 到酰胺偶联完成。经分离的粗产物通过制备性 HPLC 来纯化， 得到所需的酰胺。
     实施例 1
     (+/-)-8- 环 己 基 -N-[( 二 甲 基 氨 基 ) 磺 酰 基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 基 -1a-[(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 ]- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a]
     [2] 苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .将 TBTU(43.7 毫 克， 0.136 毫 摩 尔 ) 和 DIPEA(0.095 毫 升， 0.544 毫 摩 尔 ) 加 到 (+/-)-8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11- 甲氧 -1a(2H)- 甲酸 (50 毫克， 0.0906 毫摩尔 )基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂于 DMSO(2.0 毫升 ) 中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌 15 分钟。然后加入 3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷二盐酸盐 {J & W PharmLab， LLC Morrisville， PA 19067-3620} (27.1 毫克， 0.136 毫摩尔 )， 将反应混合物在室温搅拌 3 小时。然后将其浓缩， 残余物通 过制备性反相 HPLC 来纯化， 得到最终产物， 其为黄色固体 (32 毫克， 46 ％收率 )。MS m/z + 1 660(MH )， 保留时间 ： 2.445 分钟。 HNMR(300MHz， MeOD)δppm 0.20(m， 0.23H)1.11-2.25(m， 15.77H)2.58(m ， 0.23H)2.69(m ， 0.77H)2.75-3.11(m ， 10H)3.28-3.75(m ， 5H)3.91(s ， 2.31H)3.92(s， 0.69H)4.15-4.37(m， 1H)4.68( 宽 多 重 峰， 1H)4.94-5.00(m， 0.23H)5.16(d， J ＝ 15.00Hz， 0.77H)7.00-7.09(m， 1H)7.18(d， J ＝ 2.56Hz， 0.23H)7.21(d， J ＝ 2.56Hz， 0.77H)7.33(d， J ＝ 8.41Hz， 0.77H)7.35(d， J ＝ 8.42Hz， 0.23H)7.57(dd， J ＝ 8.42， 1.46Hz，0.77H)7.62(dd， J ＝ 8.78， 1.46Hz， 0.23H)7.91(d， J ＝ 8.42Hz， 0.77H)7.93(d， J ＝ 8.42Hz， 0.23H)8.00(s， 0.77H)8.07(s， 0.23H)。
     实施例 2
     (+/-)-3-[[8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二 -1a(2H)- 基 ] 羰基 ]-3， 8- 二氮氢 -11- 甲氧基环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 甲酸 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯 .
     将 TBTU(131 毫 克， 0.408 毫 摩 尔 ) 和 DIPEA(0.237 毫 升， 1.36 毫 摩 尔 ) 加 到 (+/-)-8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11- 甲氧 基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -1a(2H)- 甲酸 (150 毫克， 0.272 毫摩尔 ) 于 DMSO(4.0 毫升 ) 中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌 15 分钟。然后加入 8- 叔丁氧羰 基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 (86.7 毫克， 0.408 毫摩尔 )， 将反应混合物在室温搅拌 过夜。然后将其浓缩， 残余物通过制备性反相 HPLC 来纯化， 得到标题化合物， 其为浅黄色固 + 1 体 (110 毫克， 54％收率 )。MS m/z 746(MH )， 保留时间 ： 3.040 分钟。 H NMR(300MHz， MeOD) δppm 0.17(m， 0.25H)1.08(m， 0.25H)1.17-2.28(m， 24.5H)2.38-3.12(m， 8H)3.43-4.43(m， 10H)4.76-4.85(m， 0.25H)4.96-5.19(m， 0.75H)7.02(dd， J ＝ 8.60， 2.38Hz， 1H)7.17(d， J ＝ 2.19Hz ， 0.25H)7.20(d ，J ＝ 2.20Hz ， 0.75H)7.26-7.39(m ， 1H)7.49-7.70(m ， 1H)7.80-8.00(m， 1.75H)8.12(s， 0.25H)。
     实施例 3
     (+/-)-8- 环己基 -1a-(3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -3- 基羰基 )-N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 .将 TFA(2 毫升 ) 加到 (+/-)-3-[[8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] -1a(2H)- 基 ]羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11- 甲氧基环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂羰基 ]-3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 甲酸 (1， 1- 二甲基乙基 ) 酯 (98 毫克， 0.131 毫 摩尔 ) 于 1， 2- 二氯乙烷 (3 毫升 ) 中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌 2 小时。然后 保留时 将其浓缩， 得到所需产物， 其为棕色固体 (100 毫克， 100％收率 )。MS m/z646(MH+)， 1 间： 2.478 分钟。 H NMR(500MHz， MeOD)δppm 0.24(m， 0.28H)1.14(m， 0.28H)1.19-2.23(m， 15.22H)2.57(m ， 0.28H)2.69(m ， 0.72H)2.81-3.09(m ， 8H)3.30-3.40(m ， 1H)3.67(d ， J ＝ 15.87Hz ， 0.72H)3.91(s ， 2.16H)3.93(s ， 0.84H)3.90-4.27(m ， 4.28H)4.88-4.91(m ， 0.28H)5.11(d， J ＝ 15.56Hz， 0.72H)7.00-7.09(m， 1H)7.19(d， J ＝ 2.75Hz， 0.28H)7.21(d， J ＝ 2.14Hz， 0.72H)7.34(d， J ＝ 8.54Hz， 0.72H)7.37(d， J ＝ 8.55Hz， 0.28H)7.59(dd， J ＝ 8.55， 1.53Hz， 0.72H)7.63(dd， J ＝ 8.39， 1.37Hz， 0.28H)7.92(d， J ＝ 8.55Hz， 0.72H)7.94-7.99(m， 1H)8.10(s， 0.281H)。
     实施例 4
     (+/-)-8- 环 己 基 -N-[( 二 甲 基 氨 基 ) 磺 酰 基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 基 -1a-[(8- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -3- 基 ) 羰基 ]- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a]
     [2] 苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .向 (+/-)-8- 环己基 -1a-(3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -3- 基羰基 )-N-[( 二甲基 氨基 ) 磺酰基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮 杂 -5- 甲酰胺 (54 毫克， 0.071 毫摩尔 ) 于甲醇 (3 毫升 ) 中的溶液中加入低聚甲醛 (6.4 毫克， 0.213 毫摩尔 )、 ZnCl2(29 毫克， 0.213 毫摩尔 ) 和 Na(CN)BH3(13.4 毫克， 0.213 毫摩 尔 )。将所得混合物在 60℃加热 2 小时， 然后冷却至室温。过滤除去所存在的固体， 真空浓 缩滤液， 残余物通过制备性反相 HPLC 来纯化， 得到标题化合物， 其为浅黄色固体 (37 毫克， + 1 67％收率 )。 MS m/z 660(MH )， 保留时间 ： 2.495 分钟。H NMR(500MHz， MeOD)δppm 0.21(m， 0.3H)1.13(m ， 0.3H)1.18-2.22(m ， 15.4H)2.58(m ， 0.3H)2.68(m ， 0.7H)2.76-3.11(m ， 11H)3.32-3.37(m， 1H)3.63(d， J ＝ 15.56Hz， 0.7H)3.82-4.32(m， 7.3H)4.88-4.92(m， 0.3H)5.08(d， J ＝ 15.56Hz， 0.7H)7.00-7.08(m， 1H)7.18(d， J ＝ 2.14Hz， 0.3H)7.21(d， J ＝ 2.14Hz， 0.7H)7.32(d， J ＝ 8.55Hz， 0.7H)7.35(d， J ＝ 8.55Hz， 0.3H)7.57(d， J ＝ 7.93Hz， 0.7H)7.62(dd， J ＝ 8.39， 1.37Hz， 0.3H)7.91(d， J ＝ 8.55Hz， 0.7H)7.93-7.99(m， 1H)8.09(s， 0.3H)。实施例 5(+/-)-8- 环 己 基 -N-[( 二 甲 基 氨 基 ) 磺 酰 基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 基 -1a-[[8-(1- 甲基乙基 )-3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -3- 基 ] 羰基 ]- 环丙并 [d] 吲哚
     并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .向 (+/-)-8- 环 己 基 -1a-(3， 8- 二 氮 杂 二 环 [3.2.1] 辛 -3- 基 羰 基 )-N-[( 二 甲 基 氨 基 ) 磺 酰 基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 基 - 环 丙 并 [d] 吲 哚 并 [2， 1-a] [2] 苯 并 氮 杂 -5- 甲 酰 胺 (40 毫 克， 0.071 毫 摩 尔 ) 于 甲 醇 (3 毫 升 ) 中 的 溶 液 中 加 入 丙 酮 (1 毫 升 )、 ZnCl2(29 毫 克， 0.213 毫 摩 尔 ) 和 Na(CN)BH3(13.4 毫 克， 0.213 毫 摩 尔 )。将反应混合物在 60 ℃加热过夜， 然后冷却至室温。过滤除去所存在的固体， 真空 浓缩滤液， 通过制备性反相 HPLC 对残余物进行纯化， 得到标题化合物， 其为浅黄色固体 + 1 (29 毫克， 69 ％收率 )。MS m/z 688(MH )， 保留时间 ： 2.477 分钟。 H NMR(300MHz， MeOD) δppm 0.20(m， 0.23H)1.12(m， 0.23H)1.18-2.41(m， 21.54H)2.51-3.18(m， 10H)3.64(d， J ＝ 15.37Hz， 0.77H)3.79-4.51(m， 8.23H)4.81-4.88(m， 0.23H)5.07(d， J ＝ 14.27Hz， 0.77H)6.99-7.08(m， 1H)7.17-7.23(m， 1H)7.28-7.36(m， 1H)7.57(dd， J ＝ 8.42， 1.10Hz， 0.77H)7.61(dd， J ＝ 8.42， 1.47Hz， 0.23H)7.83-8.00(m， 1.77H)8.09(s， 0.23H)。
     实施例 6
     (1aR， 12bS)-8- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲 氧基 -1a-[(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 ]- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， -5- 甲酰胺 .651-a][2] 苯并氮杂
     向 (-)-8- 环 己 基 -5-[[[( 二 甲 基 氨 基 ) 磺 酰 基 ] 氨 基 ] 羰 基 ]-1， 12b- 二CN 101918410 A说明书62/109 页氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂-1a(2H)- 甲酸 (204 毫克， 0.37毫摩尔 ) 于 DMSO(8.0 毫升 ) 中的溶液中加入 TBTU(178 毫克， 0.555 毫摩尔 ) 和 DIPEA(0.39 毫升， 2.22 毫摩尔 )。将反应混合物在室温搅拌 15 分钟。然后加入 3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二 环 [3.2.1] 辛烷二盐酸盐 (111 毫克， 0.555 毫摩尔 )， 将反应混合物在室温搅拌 2 小时。 然后 将其浓缩， 残余物通过制备性反相 HPLC 来纯化， 得到黄色固体， 其为最终产物的 TFA 盐 (265 毫克， 92％收率 )。平均旋光率 ： -53.56°； 溶剂 ： MeOH. ； 波长 ： 589nm ； 50cm 样品池。MS m/z + 1 660(MH )， 保留时间 ： 3.035 分钟。 H NMR(300MHz， MeOD)δppm 0.20(m， 0.23H)1.11-2.25(m， 15.77H)2.58(m ， 0.23H)2.69(m ， 0.77H)2.75-3.11(m ， 10H)3.28-3.75(m ， 5H)3.91(s ， 2.31H)3.92(s， 0.69H)4.15-4.37(m， 1H)4.68( 宽 多 重 峰， 1H)4.94-5.00(m， 0.23H)5.16(d， J ＝ 15.00Hz， 0.77H)7.00-7.09(m， 1H)7.18(d， J ＝ 2.56Hz， 0.23H)7.21(d， J ＝ 2.56Hz， 0.77H)7.33(d， J ＝ 8.41Hz， 0.77H)7.35(d， J ＝ 8.42Hz， 0.23H)7.57(dd， J ＝ 8.42， 1.46Hz， 0.77H)7.62(dd， J ＝ 8.78， 1.46Hz， 0.23H)7.91(d， J ＝ 8.42Hz， 0.77H)7.93(d， J ＝ 8.42Hz， 0.23H)8.00(s， 0.77H)8.07(s， 0.23H)。
     用于合成 (1aR， 12bS)-[ 相对 ]-(-)-8- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-[(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 ]- 环 丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     -5- 甲酰胺的可选择方法如下提供。 -1a(2H)- 甲酸 (25.2 克，在氮气气氛下向 (-)-8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1，12b- 二氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂45.68 毫摩尔 ) 和 3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷二盐酸盐 (10.0 克， 50.22 毫摩尔 ) 于无水 MeCN( 乙腈 )(300 毫升 ) 中的混合物中加入 DIPEA(23.62 克， 182.72 毫摩尔 )。15 分钟后， 加入 TBTU(16.12 克， 50.22 毫摩尔 )。 将反应溶液在氮气气氛下搅拌 30 分钟。 HPLC 表明起始原料消失。蒸发溶液中的溶剂， 得到泡沫状物。将其溶解在 EtOAc(2.5 升 ) 中， 用 H2O(1.5 升 )、 H2O/ 盐水 (8 ∶ 2)(1.5 升 ) 和盐水 (1.5 升 ) 洗涤， 用 Na2SO4 干燥并蒸发， 得到 28.8 克粗产物。将该固体与由另外五次反应得到的 45.4 克物质合并， 得到总量为 74.2 克 的粗产物。 使其通过硅胶垫 (E.Merck 230-400 目， 1 千克 )， 用 MeOH/CH2Cl2(2.5 ∶ 97.5) 洗 脱。 蒸发后， 其得到泡沫状物， 用 EtOAc 和己烷处理所述泡沫状物， 使其转化成固体。 在 50℃ 真空干燥 7 小时后， GC 分析表明其含有各自为 1.4％的 EtOAc 和己烷。在 61-64℃进一步干 燥后， GC 分析表明其仍含有 1.0％的己烷和 1.4％的 EtOAc。将产物溶解在 Et2O 中， 并在真 空中缓慢蒸发， 如此进行三次， 在 60℃真空干燥 3 小时， 得到 68.3 克。其用 H2O(900 毫升 ) 洗涤并在 68℃再次真空干燥 7 小时， 得到 67.1 克 (77％收率 ) 实施例 6 的化合物。GC 分 析表明其含有 0.97％的 Et2O。HPLC 条件 ： 柱： Cadenza CD-C183×250mm ； UV ： 257 和 220nm ； 25℃ ； 流速 ： 0.5 毫升 / 分钟 ； 梯度时间 ： 38 分钟， 0-80％ B(0-35 分钟 ) 和 80％ B(35-38 分 钟)； 溶剂 A ： 浓度为 25nM 的 CH3COONH4(pH 4.7) 于水中的溶液 ； 溶剂 B ： MeCN。HPLC 纯度 ： 99.7％ ( 保留时间 ： 26.54 分钟 )。 手性 HPLC 条件 ： 柱： Regis(S， S)Whelk-O1250×4.6mm ； UV 258nm ； 35℃ ； 流速 ： 2.0 毫升 / 分钟 ； 流动相 ： CO2/MeOH ； 梯度时间 ： 20 分钟， 30％ MeOH(0-1 分钟 )， 30-48％ MeOH(1-19 分钟 )， 48％ MeOH(19-20 分钟 )。手性 HPLC 纯度＞ 99.8％ ( 保 留时间 ： 16.60 分钟 )。LC/MS(ES+)660.36(M+H， 100)。HRMS ： 计算 值 ： 660.3220 ； 实测值 ： 660.3197。 -79.66° (c 1.06， MeOH)。C36H45N5O5S·0.6H2O·0.09Et2O 的分析计算值： C， 64.53 ； H， 7.00 ； N， 10.35 ； S， 4.74 ； H2O， 1.51 ； Et2O， 0.97 ； 实 测 值： C， 64.50 ； H， 7.12 ； N， 10.41 ； S， 5.14 ； H2O， 1.52 ； Et2O， 0.97。 (1aR， 12bS)-[ 相对 ]-(-)-8- 环己基 -N-[( 二甲基 氨基 ) 磺酰基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-[(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 ]- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺的绝对立体化学 如上所示， 且通过基于 (R)- 樟脑磺酸盐而得到的 X 射线晶体结构来确定。
     此外， 制备了下述盐 ： 盐酸盐、 磷酸盐、 乙酸盐、 硫酸盐、 樟脑磺酸盐、 钠盐、 钙盐和 镁盐。所述盐酸盐具有如下特征 ： DSC ： 小的宽的吸热 (25℃至 75℃ ) 和峰温度为 253℃至 258℃的潜在融化 / 降解吸热 ； TGA ： 0.003％至 1.5％的早期重量减轻 (25℃至 75℃ ) 和在 约 200℃开始的降解性重量减轻。
     实施例 7
     (+/-)-8- 环己基 -N-( 环丙基磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-[(3- 甲 基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 ]- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 . 将 (+/-)-8- 环己基 -5-( 环丙基磺酰基氨甲酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲 -1a- 甲 酸 (1 当 量 ) 与 3- 甲 基 -3，
     氧 基 - 环 丙 并 [d] 吲 哚 并 [2， 1-a][2] 苯 并 氮 杂8- 二 氮 杂 二 环 [3.2.1] 辛 烷 (1.2 当 量 )、 三 乙 胺 (3 当 量 ) 和 TBTU(1.3 当 量 ) 在 无 水 DMF 中混合， 并在室温搅拌约 2 小时， 直到通过 LCMS 分析观察到反应完成。然后产物通 过制备性反相 HPLC 来分离， 得到所需标题化合物的单 TFA 盐， 其为米色固体。LC/MS ： 保 + 1 留时间 ： 2.986 分钟 ； m/e 657(MH )。通过以下 H NMR 观察到化合物以相互转化的旋转异 1 构体的形式存在 ： H NMR(400MHz， 氯仿 -D)δppm 0.22-0.36(m， 1H)H)， 1.09-1.20(m， J＝ 8.06Hz， 3H)， 1.18-1.30(m， 2H)， 1.29-1.48(m， 5H)， 1.48-1.67(m， 1H)， 1.68-1.86(m， 3H)， 1.87-2.09(m， 5H)， 2.11-2.40(m， 1H)， 2.42-2.67(m， 1H)， 2.67-2.88(m， J ＝ 4.78Hz， 1H)， 2.86-3.02(m， 2H)， 3.02-3.28(m， 2H)， 3.42-3.55(m， 1H)， 3.55-3.77(m， 2H)， 3.83-3.92(m， 3H)， 3.93-4.15(m， 1H)， 4.28-4.58(m， 1H)， 4.61-4.99(m， J ＝ 106.26Hz， 1H)， 5.04-5.26(m， 1H)， 6.90-7.03(m， 1H)， 7.07-7.15(m， J ＝ 2.52Hz， 1H)， 7.27-7.36(m， 1H)， 7.42-7.68(m， 1H)， 7.82-7.96(m， J ＝ 8.56Hz， 1H)， 8.01-8.18(m， 1H)。
     实施例 8
     (+/-)-8- 环 己 基 -N-[( 二 甲 基 氨 基 ) 磺 酰 基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 基 -1a-[[3-( 苯基甲基 )-3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ] 羰基 ]- 环丙并 [d] 吲哚并
     [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 . -1a(2H)- 甲酸 (40 毫克， 0.0725 毫摩尔 ) 于向 8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂DMSO(1.0 毫升 ) 中的溶液中加入 TBTU(35 毫克， 0.109 毫摩尔 ) 和 DIPEA(0.076 毫升， 0.435 毫摩尔 )。 将反应混合物在室温搅拌 15 分钟。 然后加入来自上述 3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸苄酯制备的混合物， 将反应混合物在室温搅拌过夜。然后将其浓缩， 残余物 通过制备性反相 HPLC 来纯化， 得到产物， 其为浅黄色固体 (12.5 毫克， 20％收率 )。MS m/z + 1 保留时间 ： 2.631 分钟。 H NMR(500MHz， MeOD)δppm 0.20(m， 0.16H)1.11-2.25(m， 736(MH )， 15.84H)2.57(m， 0.16H)2.70(m， 0.84H)2.85(m， 0.16H)2.80-3.60(m， 11.84H)3.65(d， J ＝ 15.26Hz， 0.84H)3.92(s， 3H)4.22(d， J ＝ 14.95Hz， 0.16H)4.33-4.76(m， 3H)4.96(m， 0.16H)5.08-5.33(m， 0.84H)6.97-7.10(m， 1H)7.17(d， J ＝ 2.44Hz， 0.16H)7.22(d， J ＝ 2.44Hz， 0.84H)7.28-7.42(m， 1H)7.43-7.74(m， 6H)7.87-7.96(m， 1H)7.99-8.19(m， 1H)。
     实施例 9
     (+/-)-8-[[8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二 -1a(2H)- 基 ] 羰基 ]-3， 8- 二氮氢 -11- 甲氧基环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂杂二环 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸 ( 苯基甲基 ) 酯 .
     向 8- 环己基 -5-[[[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11- 甲 氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -1a(2H)- 甲酸 (40 毫克， 0.0725 毫摩 尔 ) 于 DMSO(1.0 毫升 ) 中的溶液中加入 TBTU(35 毫克， 0.109 毫摩尔 ) 和 DIPEA(0.076 毫升， 0.435 毫摩尔 )。将反应混合物在室温搅拌 15 分钟。然后加入来自 3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸苄酯制备的混合物， 将反应混合物在室温搅拌过夜。然后将所得混 合物真空浓缩， 并通过制备性反相 HPLC 对残余物进行纯化， 得到产物， 其为浅黄色固体 (42 + 1 毫克， 74 ％收率 )。MS m/z780(MH )， 保留时间 ： 3.070 分钟。 H NMR(500MHz， MeOD)δppm 0.14(m， 0.22H)1.06-2.20(m， 15.78H)2.51(m， 0.22H)2.58-3.23(m， 9.78H)3.54-4.07(m， 6.78H)4.16(d， J ＝ 14.65Hz， 0.22H)4.31-4.59( 宽单峰， 1H)4.96(m， 0.22H)5.02-5.23(m， 2.78H)6.94-7.07(m ， 1H)7.16(d ， J ＝ 2.44Hz ， 0.22H)7.21(s ， 0.78H)7.26-7.45(m ， 6H)7.50-7.65(m， 1H)7.82-8.04(m， 1.78H)8.10(s， 0.22H)。
     实施例 10
     (+/-)-8- 环己基 -1a-(3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基羰基 )-N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 .
     向 8-[[8- 环 己 基 -5-[[[( 二 甲 基 氨 基 ) 磺 酰 基 ] 氨 基 ] 羰 基 ]-1， 12b- 二 氢 -11- 甲氧基环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -1a(2H)- 基 ] 羰基 ]-3， 8- 二氮 杂二环 [3.2.1] 辛烷 -3- 甲酸 ( 苯基甲基 ) 酯 (360 毫克， 0.462 毫摩尔 ) 于甲醇 / 乙酸乙 酯 (20 毫升 /20 毫升 ) 中的溶液中加入 10％ Pd/ 炭 (40 毫克 )。将反应混合物在氢气气氛 (1 大气压 ) 下搅拌过夜。 然后使混合物过滤通过硅藻土， 滤渣用甲醇和乙酸乙酯洗涤。 浓缩 + 合并的滤液， 得到产物， 其为黄色固体 (275 毫克， 92％收率 )。MS m/z 646(MH )， 保留时间 ： 1 2.983 分钟。 H NMR(500MHz， MeOD)δppm0.20(m， 0.2H)1.12-2.29(m， 15.8H)2.52-2.86(m， 1.2H)2.99(m， 0.8H)3.02(s， 4.8H)3.03(s， 1.2H)3.09-3.49(m， 5H)3.68(d， J ＝ 15.26Hz， 0.8H)3.91(s ， 2.4H)3.92(s ， 0.6H)4.03-4.26(m ， 0.4H)4.62-4.85(m ， 1H)5.17(d ， J ＝ 13.71Hz， 0.8H)6.99-7.11(m， 1H)7.19(s， 0.2H)7.23(s， 0.8H)7.32-7.40(m， 1H)7.59(d， J＝ 8.24Hz， 0.8H)7.63(d， J ＝ 8.24Hz， 0.2H)7.89-7.96(m， 1H)7.98(s， 0.8H)8.09(s， 0.2H)。
     实施例 11
     (+/-)-8- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1a-[(3- 乙基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2]
     苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .向 (+/-)-8- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧 基 -1a-(3， 8- 二 氮 杂 二 环 [3.2.1] 辛 -8- 基 羰 基 )- 环 丙 并 [d] 吲 哚 并 [2， 1-a][2] 苯 并氮杂 -5- 甲酰胺 (30 毫克， 0.0465 毫摩尔 ) 于甲醇 (2 毫升 ) 中的溶液中加入乙醛 0.14 毫摩尔 ) 和 Na(CN)BH3(8.8 毫克， 0.14 (0.013 毫克， 0.232 毫摩尔 )、 ZnCl2(19 毫克， 毫摩尔 )。将所得混合物在室温搅拌过夜， 在此期间形成沉淀物。过滤除去该固体并真空 浓缩滤液。然后残余物通过制备性反相 HPLC 来纯化， 得到标题化合物的 TFA 盐， 其为浅黄 + 1 色固体 (35 毫克， 96 ％收率 )。MS m/z674(MH )， 保留时间 ： 3.013 分钟。 H NMR(500MHz， MeOD)δppm 0.22(m， 0.16H)1.09-2.29(m， 18.84H)2.59(m， 0.16H)2.70(m， 0.84H)2.86(m， 0.16H)2.97-3.03(m ， 5.88H)3.03(s ， 0.96H)3.11-3.81(m ， 7H)3.92(s ， 2.52H)3.93(s ， 0.48H)4.22(d， J ＝ 14.95Hz， 0.16H)4.39( 宽 单 峰， 0.84H)4.60-4.85(m， 1.16H)5.20(d， J ＝ 14.64Hz， 0.84H)7.01-7.09(m， 1H)7.20(d， J ＝ 2.75Hz， 0.16H)7.22(d， J ＝ 2.44Hz， 0.84H)7.33-7.38(m， 1H)7.59(dd， J ＝ 8.39， 1.37Hz， 0.84H)7.63(dd， J ＝ 8.55， 1.53Hz， 0.16H)7.90-7.96(m， 1H)8.02(s， 0.84H)8.09(s， 0.16H)。
     实施例 12
     (+/-)-8- 环 己 基 -N-[( 二 甲 基 氨 基 ) 磺 酰 基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 基 -1a-[[3-(1- 甲基乙基 )-3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ] 羰基 ]- 环丙并 [d] 吲哚
     并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .向 (+/-)-8- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-(3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基羰基 )- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 (30 毫克， 0.0465 毫摩尔 ) 于甲醇 (2 毫升 ) 中的溶液中加入丙酮 (0.010 毫克， 0.14 毫摩尔 )。将反应混合物在 50℃加热 1 小时。然后加 0.14 毫摩尔 ) 和 ZnCl2(19 毫克， 入 Na(CN)BH3(8.8 毫克， 0.14 毫摩尔 )， 将反应混合物在 50℃保持过夜， 在此期间形成沉淀 物。 过滤除去该物质， 然后真空浓缩滤液。 接着通过制备性 HPLC 柱对所得残余物进行纯化， 得到标题化合物的 TFA 盐， 其为浅黄色固体 (35 毫克， 94％收率 )。 MS m/z 688(MH+)， 保留时 1 间： 3.011 分钟。H NMR(500MHz， MeOD)δppm 0.21(m， 0.19H)1.11-2.24(m， 21.81H)2.58(m， 0.19H)2.72(m， 0.81H)2.85(m， 0.19H)2.93-3.03(m， 5.67H)3.03(s， 1.14H)3.14-3.73(m， 6H)3.91(s ， 2.43H)3.93(s ， 0.57H)4.22(d ， J ＝ 14.95Hz ， 0.19H)4.39( 宽 单 峰， 0.81H)4.58-4.80( 宽单峰， 1H)4.84(m， 0.19H)5.19(d， J ＝ 15.26Hz， 0.81H)6.99-7.09(m， 1H)7.20(d， J ＝ 2.44Hz， 0.19H)7.23(d， J ＝ 2.44Hz， 0.81H)7.31-7.39(m， 1H)7.58(d， J＝ 8.55Hz， 0.81H)7.63(d， J ＝ 8.55Hz， 0.19H)7.93(d， J ＝ 8.24Hz， 1H)8.01(s， 0.81H)8.11(s， 0.19H)。
     实施例 13
     (+/-)-8- 环己基 -1a-[[3-( 环丙基甲基 )-3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ] 羰基 ]-N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并
     [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .向 (+/-)-8- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧 基 -1a-(3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基羰基 )- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并 氮杂 -5- 甲酰胺 (20 毫克， 0.031 毫摩尔 ) 于甲醇 (2 毫升 ) 中的溶液中加入环丙基甲 醛 (0.007 毫克， 0.093 毫摩尔 )、 ZnCl2(12.7 毫克， 0.093 毫摩尔 ) 和 Na(CN)BH3(5.8 毫克， 0.093 毫摩尔 )。将混合物在室温搅拌 2 小时， 之后过滤除去不溶性固体。真空浓缩滤液， 通过制备性反相 HPLC 对所得残余物进行纯化， 得到标题化合物的 TFA 盐， 其为浅黄色固体 + 1 (10 毫克， 40 ％收率 )。MS m/z 700(MH )， 保留时间 ： 3.033 分钟。 H NMR(500MHz， MeOD) δppm 0.21(m， 0.18H)0.47( 宽 单 峰， 2H)0.69-0.85(m， 2H)0.93-2.29(m， 16.82H)2.58(m， 0.18H)2.71(m ， 0.82H)2.86(m ， 0.18H)2.94-3.80(m ， 13.82H)3.91(s ， 2.46H)3.93(s ， 0.54H)4.23(d， J ＝ 14.95Hz， 0.18H)4.41( 宽 单 峰， 0.82H)4.61-4.79(m， 1H)4.98(m， 0.18H)5.19(d， J ＝ 14.35Hz， 0.82H)7.01-7.09(m， 1H)7.19(d， J ＝ 2.75Hz， 0.18H)7.22(d， J ＝ 2.44Hz， 0.82H)7.32-7.39(m， 1H)7.58(d， J ＝ 8.24Hz， 0.82H)7.63(d， J ＝ 8.24Hz，0.18H)7.90-7.96(m， 1H)8.02(s， 0.82H)8.09(s， 0.18H)。
     实施例 14
     (+/-)-1a-[(3- 乙 酰 基 -3， 8- 二 氮 杂 二 环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰 基 ]-8- 环 己 基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 .向乙酸 (3 毫克， 0.0465 毫摩尔 ) 于 DMSO(1.0 毫升 ) 中的溶液中加入 TBTU(15 毫克， 0.0465 毫摩尔 ) 和 DIPEA(0.027 毫升， 0.155 毫摩尔 )， 将混合物在室温搅拌 15 分 钟。然后加入 (+/-)-8- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲 氧基 -1a-(3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基羰基 )- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯
     并氮杂-5- 甲酰胺 (20 毫克， 0.031 毫摩尔 )， 将反应混合物在室温搅拌过夜。然后将其浓缩， 残余物通过制备性 HPLC 柱来纯化， 得到标题化合物， 其为浅黄色固体 (7 毫克， 33％ + 1 收率 )。MS m/z 688(MH )， 保留时间 ： 3.278 分钟。 H NMR(500MHz， MeOD)δppm 0.18(m， 0.2H)1.07-2.27(m ， 18.8H)2.55(m ， 0.2H)2.72(m ， 0.8H)2.86(m ， 0.2H)2.95-3.08(m ， 6.8H)3.15-3.78(m ， 5H)3.91(s ， 2.4H)3.93(s ， 0.6H)4.05-4.29(m ， 1H)4.40-4.59(m ， 1H)4.93(m， 0.2H)5.16(m， 0.8H)6.99-7.10(m， 1H)7.19(m， 0.2H)7.23(d， J ＝ 2.14Hz， 0.8H)7.30-7.41(m， 1H)7.59(d， J ＝ 8.85Hz， 0.8H)7.64(d， J ＝ 8.24Hz， 0.2H)7.86-8.06(m， 1.8H)8.13(s， 0.2H)。
     实施例 15
     (+/-)-8- 环 己 基 -N-[( 二 甲 基 氨 基 ) 磺 酰 基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 基 -1a-[[3-( 吡啶 -2- 基 )-3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ] 羰基 ]- 环丙并 [d] 吲哚
     72CN 101918410 A说-5- 甲酰胺 .明书69/109 页并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     在氮气气氛下向微波反应管中加入 (+/-)-8- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰 基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-(3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基羰基 )- 环丙 并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 (20 毫克， 0.031 毫摩尔 )、 Pd2(dba)3( 三 ( 二亚苄基丙酮 ) 二钯 )(0.6 毫克， 2 摩尔％ )、 1， 3- 二 ( 二苯基膦基 ) 丙烷 (0.5 毫克， 4 摩 尔 ％ )、 叔 丁 醇 钠 (8.9 毫 克， 0.093 毫 摩 尔 ) 和 2- 溴 吡 啶 (0.006 毫 升， 0.062 毫 摩 尔 )。然后将反应管密封并加入二噁烷 (1 毫升 )， 然后在油浴中将反应混合物在 70 ℃加 热过夜。然后过滤反应混合物并浓缩， 残余物通过制备性 HPLC 柱来纯化， 得到标题化合物 + 的 TFA 盐， 其为灰白色固体 (2.2 毫克， 7.5％收率 )。MS m/z 723(MH )， 保留时间 ： 3.048 分 1 钟。 H NMR(500MHz， MeOD)δppm 0.25(m， 0.2H)1.11-2.23(m， 15.8H)2.60(m， 0.2H)2.76(m， 0.8H)2.79-3.10(m ， 7H)3.13-4.00(m ， 8H)4.27(d ， J ＝ 15.26Hz ， 0.2H)4.46( 宽 单 峰， 0.8H)4.63-4.81(m ， 1H)4.99(m ， 0.2H)5.26(d ， J ＝ 15.26Hz ， 0.8H)7.02-7.16(m ， 2H)7.20-7.27(m， 1H)7.32-7.68(m， 3H)7.77(d， J ＝ 7.93Hz， 0.2H)7.85-8.18(m， 3.8H)。
     实施例 ]6
     (+/-)-8- 环己基 -N-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -1a-[(3- 甲 基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 ]-11-( 苯基甲氧基 )- 环丙并 [d] 吲哚并
     [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 . -1a(2H)- 甲酸 (496 毫将 (+/-)-8- 环 己 基 -5-[[[( 二 甲 基 氨 基 ) 磺 酰 基 ] 氨 基 ] 羰 基 ]-1， 12b- 二氢 -11-( 苯基甲氧基 )- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂克， 0.79 毫摩尔 ) 溶解在 7 毫升 DMF 中， 加入 TBTU(392 毫克， 1.22 毫摩尔 )， 将反应混合物 在室温和氮气气氛下搅拌 1 小时， 之后加入 DMAP(525 毫克， 4.29 毫摩尔 )， 然后加入 3- 甲 基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷二盐酸盐 (196 毫克， 0.98 毫摩尔 )。 将反应混合物在室温 和氮气气氛下搅拌 17 小时， 然后倒入 100 毫升水中。含水混合物用乙酸乙酯萃取。有机萃 取物先后用水和盐水洗涤两次， 用硫酸镁干燥。真空除去挥发物， 得到 615 毫克粗产物， 将 其吸附在 1.5 克硅胶上并在 18 克硅胶上进行色谱分离 ( 用 3％甲醇于二氯甲烷中的溶液洗 1 脱 )。 合并纯产物馏分并真空除去挥发物， 得到 216 毫克 (37％ ) 几乎无色的无定形固体。 H NMR(500MHz， 氯仿 -D)δppm 0.27(t， J ＝ 5.80Hz， 0.4H)1.14-1.30(m， 2.9H)1.30-1.48(m， 3.7H)1.57(d ， J ＝ 15.26Hz ， 2.3H)1.63-1.87(m ， 11.2H)1.85-2.20(m ， 8.4H)2.30(s ， 1.3H)2.39(s ， 0.9H)2.69(s ， 1.2H)2.79(s ， 1.2H)2.85-3.01(m ， 1.9H)3.01-3.11(m ， 6.0H)3.25-3.51(m， 1.8H)3.59(d， J ＝ 15.26Hz， 1.2H)4.14(d， J ＝ 14.95Hz， 0.4H)4.40(s，0.9H)4.75(d， J ＝ 13.73Hz， 0.4H)5.07-5.21(m， 2.8H)6.92-7.11(m， 1.5H)7.21(d， J ＝ 2.75Hz， 1.0H)7.27-7.49(m， 7.0H)7.53(d， J ＝ 7.93Hz， 0.6H)7.87(dd， J ＝ 8.55， 4.88Hz， 1.0H)7.91-8.03(m， 0.9H)8.83(s， 0.2H)9.67(s， 0.3H)。
     实施例 17
     (+/-)-8- 环 己 基 -N-[( 二 甲 基 氨 基 ) 磺 酰 基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 羟 基 -1a-[(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 ]- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a]
     [2] 苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .通 过 加 热 将 (+/-)-8- 环 己 基 -N-[( 二 甲 基 氨 基 ) 磺 酰 基 ]-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -1a-[(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 ]-11-( 苯基甲氧基 )- 环丙 并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 (189 毫克， 0.26 毫摩尔 ) 溶解在 5 毫升 甲醇和 2 毫升 THF( 不含抑制剂 ) 的混合物中。冷却后， 一些物质沉淀出来。加入 1N 盐酸水 溶液 (0.3 毫升， 0.3 毫摩尔 ) 以有助于溶解。 将反应混合物置于氮气气氛下， 然后加入 20％ 氢氧化钯 / 炭 (46 毫克 )。使反应在室温和压力为大气压的氢气气氛 ( 气囊 ) 下进行 6.75 小时。使反应混合物过滤通过硅藻土塞。真空除去滤液中的挥发物， 得到 161 毫克 (92％ ) 产物， 其为浅黄色固体。1HNMR(500MHz， DMSO-D6)δppm 0.01(t， J ＝ 5.34Hz， 0.3H)0.39(s， 0.3H)1.08-1.60(m ， 6.6H)1.62-1.83(m ， 2.9H)1.82-2.20(m ， 6.3H)2.58-2.84(m ， 4.9H)2.84-2.96(m ， 6.9H)3.07-3.19(m ， 1.0H)3.20-3.29(m ， 1.6H)3.34(s ， 10.0H ， H2O)3.42(s， 0.9H)3.58(d， J ＝ 14.65Hz， 0.8H)4.13(d， J ＝ 14.95Hz， 0.4H)4.31-4.62(m， 0.8H)4.91(d， J ＝ 14.95Hz， 0.3H)4.98-5.21(m， 0.7H)6.85(t， J ＝ 8.55Hz， 1.1H)6.99(s， 1.0H)7.09-7.25(m， 1.0H)7.62(d， J ＝ 20.14Hz， 1.0H)7.72-7.91(m， 1.0H)7.92-8.29(m， 0.9H)9.92(s， 1.0H)10.16(d， J ＝ 56.15Hz， 0.8H)11.63(d， J ＝ 10.68Hz， 0.9H)。
     实施例 18
     (-)-8- 环 己 基 -1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 基 -N-[( 甲 基 氨 基 ) 磺 酰 基 ]-1a-[(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 ]- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 . -1a(2H)- 甲酸 (158 毫克， 0.29 毫摩尔 )、 将 8- 环己基 -5-[[[( 甲基氨基 ) 磺酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11- 甲氧
     基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷二盐酸盐 (59 毫克， 0.29 毫摩尔 )、 二异丙基乙基 胺 (0.15 毫升 ) 和 TBTU(112 毫克， 0.35 毫摩尔 ) 于 DMF(1.5 毫升 ) 中的溶液在 22℃搅拌 1 小时， 通过制备性 HPLC 进行纯化， 得到标题化合物， 其为浅黄色固体 (150 毫克， 80.1％ )。 + 1 MeOD)δppm 0.93-2.08(m， 16H)2.49-2.53(m， ESI-MS m/e 646(MH )。 H NMR(500MHz， 1H)2.55(s ， 3H)2.60-2.93(m ， 4H)3.15(s ， 3H)3.24(m ， 2H)3.73(s ， 3H)3.88-4.18(m ， 1H)4.41-4.56(m ， 1H)4.86-5.03(m ， 1H)6.86(d ，J ＝ 8.24Hz ， 1H)6.97-7.06(m ， 1H)7.09-7.20(m， 1H)7.37-7.49(m， 1H)7.73(d， J ＝ 8.24Hz， 1H)7.77-7.94(m， 1H)。
     实施例 19
     (+/-)-8- 环己基 -1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-[(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二 环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 ]-N-[[( 苯基甲基 ) 氨基 ] 磺酰基 ]- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， -5- 甲酰胺 .1-a][2] 苯并氮杂
     以与就合成 (-)-8- 环己基 -N-(( 甲基氨基 ) 磺酰基 )-1a-((3- 甲基一 3， 8- 二氮 杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-11-( 甲基氧基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺所述相似的方式由 (+/-)-8- 环己基 -5-[[[( 苄基氨基 ) 磺 酰基 ] 氨基 ] 羰基 ]-1， 12b- 二氢 -11-( 甲氧基 )- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -1a(2H)- 甲酸甲酯来制备 (+/-)-8- 环己基 -N-(( 苄基氨基 ) 磺酰基 )-1a-((3- 甲基 -3，8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-11-( 甲基氧基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂1 H NMR(500MHz， MeOD)δ -5- 甲酰胺。 ESI-MSm/e 722(MH+)。ppm 1.14-2.20(m， 16H)2.56-3.08(m， 7H)3.39-3.72(m， 3H)3.89-3.96(m， 3H)4.21-4.37(m， 3H)4.60-4.74(m ， 1H)5.11-5.22(m ， 1H)7.06(dd ，J=8.55 ， 2.44Hz ， 1H)7.17-7.24(m ， 2H)7.28(t， J=7.63Hz， 2H)7.33-7.43(m， 3H)7.45-7.56(m， 1H)7.86-8.00(m， 2H)。
     实施例 20
     (+/-)-N-( 氨基磺酰基 )-8- 环己基 -1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-[(3- 甲 基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 ]- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺．将 10％钯 / 炭 (40 毫克， 0.038 毫摩尔 ) 加到 (+/-)-8- 环己基 -N-(( 苄基氨基 ) 磺 酰基 )-1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-11-( 甲基氧基 )-1， 1a， 2，
     12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂-5- 甲酰胺 (20 毫克， 0.028 毫摩尔 ) 于EtOH(10 毫升 ) 中的溶液中， 接着使反应混合物经历真空， 然后用氮气冲洗三次， 然后置于 氢气气氛 (1 大气压 ) 下。 将反应混合物在室温搅拌两天， 然后过滤通过硅藻土垫并浓缩。 残 余物通过制备性 HPLC( 乙腈 /H2O( 含有 TFA 缓冲剂 )) 来纯化， 得到标题化合物， 其为白色膜 + 1 状物。 ESI-MSm/e 632(MH )。H NMR(500MHz， MeOD)δ ppm 1.13-2.23(m， 16H)2.48-3.11(m， 9H)3.54-3.75(m， 1H)3.86-3.97(m， 3H)4.15-4.37(m， 1H)4.62(s， 1H)5.19(s， 1H)7.05(s， 1H)7.16-7.24(m， 1H)7.31-7.39(m， 1H)7.55-7.67(m， 1H)7.88-7.97(m， 1H)7.99-8.12(m， 1H)。 实 施 例 20-31 通 过 下 述 LC/MS 方 法 来 分 析 ： 分析条件 ： 柱： PHENOMENNEX-LUNA 3.0×50mm S10 ； 流动相 ： (A)10 ∶ 90 甲醇 - 水 ； (B)90 ∶ 10 甲醇 - 水 ； 缓冲剂 ： 0.1％ TFA ； 梯度范围 ： 0-100％ B ； 梯度时间 ： 2 分钟 ； 流速 ： 4 毫升 / 分钟 ； 分析时间 ： 3 分钟 ； 检测 ： 检测 + 器1： UV(220nm) ； 检测器 2 ： MS(ESI )。
     实施例 21
     (+/-)-8- 环 己 基 -5-( 吗 啉 代 磺 酰 基 氨 甲 酰 基 )-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 -1a- 甲酸 .基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     产物通过制备性 HPLC 来纯化并分离， 其为米色固体。LC/MS ： 保留时间 ： 1.968 分 + 1 钟； m/e 460(MH )。 H NMR(400MHz， CDCl3) ： 观察到化合物以相互转化的旋转异构体的形式 存在。
     实施例 22
     (+/-)-8- 环 己 基 -5-(4- 甲 基 哌 嗪 -1- 基 磺 酰 基 氨 甲 酰 基 )-1， 1a， 2， 12b- 四 -1a- 甲酸 .氢 -11- 甲氧基 - 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     产物通过制备性 HPLC 来纯化并以单 TFA 盐的形式分离， 其为米色固体。LC/MS ： 保 + 1 留时间 ： 1.687 分钟 ； m/e 607(MH )。 H NMR(400MHz， CDCl3) ： 观察到化合物以相互转化的旋 转异构体的形式存在。
     实施例 23
     (+/-)-8- 环己基 -N-( 吗啉代磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 .产物通过制备性 HPLC 来纯化并分离， 其为 TFA 盐。LC/MS ： 保留时间 ： 1.770 分 + 1 钟； m/e 702(MH )。通过以下 H NMR 观察到化合物以相互转化的旋转异构体的形式存在 ： 1 H NMR(500MHz， 氯仿 -D)δ ppm 1.14-1.59(m， 7H)， 1.69-1.88(m， 3H)， 1.87-2.15(m， 6H， )， 2.49-2.66(m， 1H)， 2.80-3.02(m， 3H)， 3.05-3.32(m， 1H)， 3.41-3.55(m， 5H)， 3.58-3.68(m， J ＝ 15.56Hz， 1H)， 3.70-3.81(m， 4H)， 3.83-3.93(m， 3H)， 3.94-4.14(m， 1H)， 4.43-4.71(m， 3H)， 4.75-4.87(m， 1H)， 5.18(s， 1H)， 6.90-7.02(m， 1H)， 7.07-7.15(m， J ＝ 2.75Hz， 1H)， 7.27-7.36(m， J ＝ 9.16， 9.16Hz， 1H)， 7.37-7.60(m， 1H)， 7.83-7.95(m， J ＝ 8.39， 8.39Hz， 1H)， 8.03(s， 1H)， 9.47(s， 1H)。
     实施例 24
     (+/-)-8- 环 己 基 -N-( 吡 咯 烷 -1- 基 磺 酰 基 )-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 )- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a]
     [2] 苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .产物通过制备性 HPLC 来纯化并分离， 其为 TFA 盐。LC/MS ： 保留时间 ： 2.873 分 + 1 钟； m/e 686(MH )。通过以下 H NMR 观察到化合物以相互转化的旋转异构体的形式存在 ： 1 H NMR(400MHz，氯 仿 -D)δppm 1.12-1.30(m， 3H)， 1.29-1.45(m， 3H)， 1.45-1.60(m， 2H)， 1.71-1.86(m， 3H)， 1.86-1.98(m， J ＝ 6.17， 6.17Hz， 6H)， 1.97-2.12(m， J ＝ 23.42Hz， 3H)， 2.12-2.32(m， 1H)， 2.56-2.72(m， 1H)， 2.80-2.88(m， J ＝ 4.78Hz， 1H)， 2.88-3.02(m， 2H)， 3.07-3.23(m， 1H)， 3.45-3.52(m， 1H)， 3.51-3.60(m， 4H)， 3.60-3.74(m， 2H)， 3.85-3.93(m， 3H) ， 4.02-4.18(m ， 1H) ， 4.50-4.64(m ， 1H) ， 4.78-4.92(m ， 1H) ， 5.10-5.26(m ， 1H) ， 6.90-7.02(m， 1H)， 7.07-7.16(m， J ＝ 2.52Hz， 1H)， 7.26-7.34(m， J ＝ 9.19， 9.19Hz， 1H)， 7.48-7.64(m， 1H)， 7.82-7.97(m， J ＝ 9.19， 9.19Hz， 1H)， 8.08-8.27(m， 1H)， 9.52(s， 1H)。
     实施例 25(+/-)-8- 环 己 基 -N-( 哌 啶 -1- 基 磺 酰 基 )-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2]
     苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .产物通过制备性 HPLC 来纯化并分离， 其为 TFA 盐。LC/MS ： 保留时间 ： 1.882 分 + 1 钟； m/e 700(MH )。通过以下 H NMR 观察到化合物以相互转化的旋转异构体的形式存 1 在： H NMR(400MHz， 氯 仿 -D)δppm 1.17-1.30(m， 2H)， 1.30-1.46(m， J ＝ 14.23， 6.92Hz， 4H)， 1.47-1.61(m， J ＝ 11.33Hz， 4H)， 1.61-1.72(m， J ＝ 4.03Hz， 4H)， 1.71-1.86(m， 3H)， 1.86-2.11(m， J ＝ 10.32Hz， 6H)， 2.21-2.38(m， 1H)， 2.51-2.68(m， 1H)， 2.77-3.02(m， 3H)， 3.33-3.47(m， 4H)， 3.47-3.52(m， 1H)， 3.58-3.73(m， 2H)， 3.86-3.93(m， 3H)， 3.93-4.13(m， 2H)， 5.06-5.23(m， 1H)， 6.91-7.02(m， 1H)， 7.06-7.16(m， J ＝ 2.52Hz， 1H)， 4.57-4.77(m， 1H)， 7.26-7.33(m， 1H)， 7.37-7.56(m， 1H)， 7.82-7.94(m， 1H)， 7.98-8.12(m， 1H)， 9.03(s， 1H)。
     实施例 26
     (+/-)-8- 环 己 基 -N-((2S， 6R)-2， 6- 二 甲 基 吗 啉 代 磺 酰 基 )-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲氧基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚
     并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .产物通过制备性 HPLC 来纯化并分离， 其为 TFA 盐。LC/MS ： 保留时间 ： 2.911 分 + 1 钟； m/e 730(MH )。通过以下 H NMR 观察到化合物以相互转化的旋转异构体的形式存 1 在： H NMR(400MHz，氯 仿 -D)δppm 1.13-1.23(m， 5H)， 1.22-1.31(m， J ＝ 5.29Hz， 1H)， 1.31-1.47(m， J ＝ 7.30， 7.30Hz， 3H)， 1.47-1.62(m， 1H)， 1.74-1.91(m， J ＝ 20.90Hz， 1H)， 1.91-2.10(m， 2H)， 2.70-2.92(m， 4H)， 3.02-3.12(m， 1H)， 3.18-3.39(m， 6H)， 3.44-3.52(m，3H)， 3.58-3.79(m， 8H)， 3.90(s， 3H)， 3.92-4.01(m， 1H)， 4.00-4.11(m， 1H)， 4.30-4.47(m， 1H)， 4.80-4.93(m， 1H)， 5.09-5.23(m， 1H)， 6.92-7.02(m， 2H)， 7.08-7.14(m， J ＝ 2.52Hz， 1H)， 7.29(d， J ＝ 8.31Hz， 1H)， 7.85-7.93(m， 1H)， 7.94-8.02(m， 1H)， 8.85(s， 1H)。
     实施例 27
     (+/-)-8- 环己基 -N-(4- 甲基哌嗪 -1- 基磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧 基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2]
     苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .产物通过制备性 HPLC 来纯化并分离， 其为二 TFA 盐。LC/MS ： 保留时间 ： 1.563 分 + 1 钟； m/e 715(MH )。通过以下 H NMR 观察到化合物以相互转化的旋转异构体的形式存在 ： 1 H NMR(500MHz，氯 仿 -D)δ ppm0.23-0.33(m， 1H)， 1.14-1.30(m， 2H)， 1.28-1.46(m， 3H)， 1.45-1.61(m， 1H)， 1.63-1.86(m， 3H)， 1.85-2.09(m， 5H)， 2.50-2.66(m， 1H)， 2.77-2.90(m， 4H) ， 2.88-3.17(m ， 4H) ， 3.44-3.54(m ， 2H) ， 3.52-3.75(m ， 5H) ， 3.84-3.94(m ， 3H) ， 3.95-4.19(m， 4H)， 4.31-4.52(m， 1H)， 4.55-4.70(m， 1H)， 4.73-4.87(m， 1H)， 5.00-5.23(m， 1H) ， 6.89-7.05(m ， 2H) ， 7.05-7.15(m ， 1H) ， 7.25-7.32(m ， 1H) ， 7.45-7.64(m ， 1H) ， 7.78-7.91(m， 1H)， 7.95-8.13(m， 1H)。
     实施例 28
     (+/-)-8- 环己基 -N-( 异丙基磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 .
     产物通过制备性 HPLC 来纯化并以单 TFA 盐的形式分离， 其为米色固体。LC/MS ： 保留时间 ： 1.818 分钟 ； m/e 659(MH+)。通过以下 1H NMR 观察到标题化合物以相互转化的旋转 1 异构体的形式存在 ： H NMR(400MHz， 氯仿 -D)δppm 1.11-1.29(m， 2H)， 1.28-1.66(m， 8H)， 1.67-1.87(m， 3H)， 1.86-2.11(m， 5H)， 2.12-2.42(m， 2H)， 2.43-2.72(m， 2H)， 2.72-3.04(m， 4H)， 3.05-3.30(m， J ＝ 7.55， 4.28Hz， 2H)， 3.31-3.57(m， 2H)， 3.57-3.78(m， J ＝ 18.63Hz， 2H)， 3.85-3.93(m， 3H)， 3.96-4.15(m， 2H)， 4.37-4.76(m， J ＝ 71.51Hz， 1H)， 5.04-5.25(m， 1H)， 6.86-7.02(m， 1H)， 7.07-7.16(m， J ＝ 2.52Hz， 1H)， 7.26-7.36(m， J ＝ 8.31， 8.31Hz， 1H)， 7.44-7.69(m， 1H)， 7.90(d， J ＝ 8.56Hz， 1H)， 8.00-8.29(m， J ＝ 48.09Hz， 1H)， 9.33(s， 1H)。
     实施例 29
     (+/-)-8- 环己基 -N-(N， N- 二甲基氨磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 二氟甲氧 基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 )- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a]
     [2] 苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .通过对相应的苯酚衍生物进行二氟甲基化 (ClCHF2， 1N NaOH， 丙酮 - 异丙醇， 室温 ) 来制备产物， 其通过制备性 HPLC 来纯化并以单 TFA 盐的形式分离， 其为米色固体。LC/MS ： + 1 保留时间 ： 1.798 分钟 ； m/e 696(MH )。通过以下 H NMR 观察到标题化合物以相互转化的旋 1 转异构体的形式存在 ： HNMR(500MHz， 氯仿 -D)δppm 0.25-0.81(m， 3H)， 0.81-1.33(m， 6H)， 1.29-1.64(m， 4H)， 1.78(s， 2H)， 1.85-2.17(m， J ＝ 4.58Hz， 4H)， 2.36-2.59(m， 2H)， 2.79(t， J ＝ 11.90Hz， 2H)， 2.84-2.93(m， 1H)， 2.97-3.10(m， 5H)， 3.08-3.23(m， 1H)， 3.45(s， 1H)， 4.40(s， 1H)， 5.07(s， 1H)， 6.44-6.66(m， 1H)， 6.73-6.86(m， J ＝ 14.34Hz， 1H)， 7.17(d， J＝ 1.83Hz， 1H)， 7.28(dd， J ＝ 8.55， 2.44Hz， 1H)， 7.42-7.60(m， 2H)， 7.92(d， J ＝ 8.55Hz， 1H)， 8.09(s， 1H)， 8.91(s， 1H)。
     实施例 30
     (+/-)-8- 环 己 基 -N-(N， N- 二 甲 基 氨 磺 酰 基 )-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -N- 甲基 -5- 甲酰胺 .
     在 Mitsonobu 条 件 (Ph3P， DEAD， MeOH-THF， 0-23 ℃ ) 下 通 过 对 (+/-)-8- 环 己 基 -N-(N， N- 二 甲 基 氨 磺 酰 基 )-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 基 -1a-(3- 甲 基 -3， 8- 二 -5- 甲 酰胺进行 N- 甲基化来制备产物， 其通过制备性 HPLC 来纯化并以单 TFA 盐的形式分离，氮 杂 二 环 [3.2.1] 辛 烷 -8- 羰 基 ) 环 丙 并 [d] 吲 哚 并 [2， 1-a][2] 苯 并 氮 杂其 为 米 色 固 体。LC/MS ： 保留时间 ： 1.828 分 钟 ； m/e 674(MH+)。 通 过 以 下 1H NMR 观 察 1 到标题化合物以相互转化的旋转异构体的形式存在 ： H NMR(400MHz， 氯 仿 -D)δppm 1.12-1.62(m ， 6H) ， 1.65-2.32(m ， 8H) ， 2.46(d ， J ＝ 5.29Hz ， 2H) ， 2.69-2.91(m ， 3H) ， 2.90-2.99(m， 7H)， 2.96-3.19(m， 2H)， 3.25-3.34(m， 3H)， 3.33-3.43(m， 1H)， 3.49(s， 1H)， 3.63(d， J ＝ 15.36Hz， 1H)， 3.67-3.84(m， J ＝ 1.51Hz， 1H)， 3.89(s， 3H)， 3.93-4.20(m， 1H)， 4.44-4.67(m， 1H)， 5.09-5.27(m， 1H)， 6.92-7.02(m， J ＝ 8.69， 2.64Hz， 1H)， 7.06-7.14(m， J ＝ 2.52Hz， 1H)， 7.26-7.33(m， 2H)， 7.64(s， 1H)， 7.89(d， J ＝ 8.31Hz， 1H)。
     实施例 31
     (+/-)-8- 环 己 基 -N-(N- 环 丙 基 氨 磺 酰 基 )-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2]
     苯并氮杂
     -N- 甲基 -5- 甲酰胺 .产物通过制备性 HPLC 来纯化并以单 TFA 盐的形式分离， 其为米色固体。LC/MS ： 保 + 1 留时间 ： 2.751 分钟 ； m/e 672(MH )。通过以下 H NMR 观察到标题化合物以相互转化的旋转 1 异构体的形式存在 ： H NMR(400MHz， 氯仿 -D)δppm 0.55-0.96(m， 3H)， 1.05-1.59(m， 6H)，1.60-2.19(m， 8H)， 2.22-2.45(m， 2H)， 2.44-2.81(m， 6H)， 2.81-3.09(m， 4H)， 3.36-3.52(m， J ＝ 25.68Hz， 1H)， 3.59-3.80(m， 2H)， 3.82-3.94(m， 3H)， 3.97-4.19(m， 1H)， 5.14-5.29(m， 1H)， 5.99(s， 1H)， 6.90-7.02(m， J ＝ 8.44， 2.90Hz， 1H)， 7.06-7.14(m， J ＝ 2.52Hz， 1H)， 7.26-7.35(m， 1H)， 7.53-7.71(m， 1H)， 7.93(d， J ＝ 8.56Hz， 1H)， 8.23(s， 1H)， 9.95(s， 1H)。
     实施例 32-36 通过下述 LC/MS 方法来分析 ： 起始％ B ： 0； 最终％ B ： 100 ； 梯度时 间： 3 分钟 ； 停止时间 ： 4 分钟 ； 流速 ： 4 毫升 / 分钟 ； 波长 ： 220 ； 溶剂 A ： 10 ％ MeOH/90 ％ H2O/0.1％三氟乙酸 ； 溶剂 B ： 10％ H2O/90％ MeOH/0.1％三氟乙酸 ； 柱： XBridge 4.6×50mm S5。
     实施例 32
     (+/-)-8- 环己基 -N-( 甲基磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 .
     将吲哚甲酸 - 环丙基酯 (1.3 克， 2.83 毫摩尔 ) 和 CDI(0.64 克， 3.97 毫摩尔 ) 于 THF(20 毫升 ) 中的混合物在 50℃加热 0.5 小时， 冷却下来并加入甲基磺酰胺 (0.4 克， 4.2 毫 摩尔 ) 和 DBU(0.264 毫升， 1.77 毫摩尔 )。 将混合物搅拌 20 分钟并用 EtOAc 稀释， 用冷的 1N HCl(2×) 和盐水洗涤， 干燥 (MgSO4)， 除去溶剂并通过快速色谱 (Biotage 40M) 来纯化， 得 到化合物 1-2(1.28 克， 85％ )， 其为浅黄色固体。 LC-MS 保留时间 ： 3.51 ； MS m/z 537(M+H)。 1 观察到所得磺酰胺以相互转化的旋转异构体的形式存在。主要异构体 ： HNMR(400MHz， 氯 仿 -D)δppm 1.11-2.17(m， 12H)， 2.84-2.98(m， 2H)， 3.43(d， J ＝ 14.86Hz， 1H)， 3.49(s， 3H)， 3.55(s， 3H)， 3.89(s， 3H)， 5.40(d， J ＝ 15.11Hz， 1H)， 6.91-6.96(m， 1H)， 7.13(d， J ＝ 2.52Hz， 1H)， 7.22-7.27(m， 1H)， 7.39(dd， J ＝ 8.31， 1.51Hz， 1H)， 7.85(d， J ＝ 8.81Hz， 1H)， 8.23(d， J ＝ 1.26Hz， 1H)， 8.75(s， 1H)。 向所得磺酰胺 - 酯 (1.28 克， 2.4 毫摩尔 ) 于 THF(5 毫升 ) 和 MeOH(5 毫升 ) 中的 溶液中加入 NaOH(1N， 12 毫升， 12 毫摩尔 )。在室温搅拌 3 小时后， 混合物用 EtOAc 稀释， 用冷的 1N HCl 和盐水洗涤， 干燥 (MgSO4)， 真空除去溶剂， 得到酸， 其为米色固体 (1.20 克， 1 96％ )。LC-MS 保留时间 ： 3.46 ； MS m/z523(M+H)。通过 H NMR(400MHz， 氯仿 -D) 观察到化 合物 1-2 以相互转化的旋转异构体 ( ～ 1/1) 的形式存在。
     向所得酸 (0.060 克， 0.11 毫摩尔 ) 和 3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷二 盐酸盐 (0.034 克， 0.17 毫摩尔 ) 于 DMC(1.5 毫升 ) 中的混合物中加入 Et3N(0.096 毫升， 0.69 毫摩尔 ) 和 HBTU(0.065 克， 0.17 毫摩尔 )。将混合物在室温搅拌 0.5 小时， 用 MeOH 稀
     释， 除去溶剂。将残余物溶解在甲醇中， 过滤并通过制备性 HPLC 来纯化， 得到产物的 TFA 盐 (0.0378 克， 82％ )。LC-MS 保留时间 ： 2.96 ； MS m/z 631(M+H)。观察到产物以相互转化的 1 旋转异构体的形式存在。 H NMR(400MHz， 氯仿 -D)δppm 1.04-1.61(m， 8H)， 1.68-2.38(m， 10H)， 2.48-3.03(m， 6H)， 3.09-3.20(m， 1H)3.30， -3.78(m， 2H)， 3.41(s， 3H)， 3.88(s， 3H)， 4.05(d， J ＝ 14.10Hz， 1H)， 5.06-5.28(m， 1H)， 6.97(dd， J ＝ 8.81， 2.27Hz， 1H)， 7.11(d， J ＝ 2.27Hz， 1H)， 7.24-7.34(m， 1H)， 7.54-7.73(m， 1H)， 7.82-7.94(m， J ＝ 7.18， 5.41Hz， 1H)， 8.17(s， 1H)。
     实施例 33
     (+/-)-8- 环己基 -N-( 乙基磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 .
     以与上述相似的方式来制备产物 ： 磺酰胺 (0.47 克， 44 ％ ) ； LC-MS 保留时间 ： 3.54 ； MS m/z 551(M+H) ； 酸 (0.43 克， 94％ ) ； LC-MS 保留时间 ： 3.49 ； MS m/z 537(M+H)。制 备了产物的 TFA 盐 (0.0378 克， 71％ )。 LC-MS 保留时间 ： 3.028 ； MS m/z 645(M+H)。 观察到产 1 物以相互转化的旋转异构体的形式存在。主要异构体 ： H NMR(500MHz)ppm 1.12-2.37(m， 19H)， 2.51-2.66(m， 1H)， 2.69-3.03(m， 4H)， 3.08-3.22(m， 1H)， 3.21-3.83(m， 8H)， 3.90(s， 3H)， 5.11-5.28(m， 1H)， 6.87-6.95(m， 1H)， 6.97-7.00(m， 1H)， 7.12(d， J ＝ 2.14Hz， 1H)， 7.30(d， J ＝ 8.85Hz， 1H)， 7.88-7.96(m， 1H)， 8.08(s， 1H)。
     实施例 34
     (+/-)-8- 环己基 -N-( 氮杂环丁烷 -1- 基磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧 基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 )- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a]
     84CN 101918410 A说-5- 甲酰胺 .明书81/109 页[2] 苯并氮杂
     以与上述相似的方式来制备产物 ： 磺酰胺 (0.96 克， 59 ％ ) ； LC-MS 保留时间 ： 3.58 ； MS m/z 578(M+H)。观察到化合物以相互转化的旋转异构体 (3/4) 的形式存在。主 1 要异构体 ： H NMR(400MHz， 氯仿 -D)δppm 1.16-1.59(m， 4H)， 1.72(dd， J ＝ 9.44， 4.15Hz， 3H)， 1.88-2.12(m， 4H)， 2.24-2.36(m， 2H)， 2.75-2.97(m， 2H)， 3.44(d， J ＝ 14.86Hz， 1H)， 3.56(s， 3H)， 3.89(s， 3H)， 4.09(d， 1H)， 4.24-4.37(m， 4H)， 5.41(d， J ＝ 14.86Hz， 1H)， 6.92-6.96(m， 1H)， 7.13(d， J ＝ 2.01Hz， 1H)， 7.24-7.30(m， 1H)， 7.39(dd， J ＝ 8.31， 1.51Hz， 1H)， 7.84-7.88(m， 1H)， 8.24(d， J ＝ 1.51Hz， 1H)。酸 (0.93 克， 100 ％ ) ； LC-MS 保留时间 ： 3.51 ； MS m/z 564(M+H)。观察到化合物以相互转化的旋转异构体 ( ～ 3/4) 的形式存在。 1 主要异构体 ： HNMR(400MHz)ppm 0.34-0.42(m， 1H)， 1.15-2.10(m， 11H)， 2.22-2.38(m， 2H)， 2.65-2.78(m， 1H)， 2.84-2.94(m， J ＝ 3.02Hz， 1H)， 3.84(s， 3H)， 4.03(d， J ＝ 15.11Hz， 1H)， 4.21-4.43(m， 4H)， 5.34(d， J ＝ 14.86Hz， 1H)， 6.87(dd， J ＝ 8.56， 2.77Hz， 1H)， 6.98(d， J＝ 2.52Hz， 1H)， 7.21(d， J ＝ 8.31Hz， 1H)， 7.69-7.75(m， 1H)， 7.86-7.90(m， 1H)， 8.13(s， 1H)。 1 制备了产物的 TFA 盐 ： LC-MS 保留时间 ： 3.51 ； MS m/z672(M+H)。通过以下 H NMR(400MHz， 1 氯 仿 -D) 观 察 到 标 题 化 合 物 以 相 互 转 化 的 旋 转 异 构 体 的 形 式 存 在 ： H NMR(400MHz) ppm 1.02-1.63(m， 8H)， 1.72-2.36(m， 10H)， 2.47-3.23(m， 6H)， 3.45(d， J ＝ 29.46Hz， 2H)， 3.59-3.75(m， 2H)， 3.89(s， 3H)， 4.12-4.38(m， 4H)， 4.38-4.98(m， 2H)， 5.12-5.30(m， 1H)， 6.90-7.03(m， 2H)， 7.12(d， J ＝ 2.52Hz， 1H)， 7.27-7.35(m， J ＝ 9.06， 9.06Hz， 1H)， 7.59-7.75(m， 1H)， 7.84-7.96(m， 1H)。
     实施例 35
     (+/-)-8- 环己基 -N-(N- 乙基 -N- 甲基氨基磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧 基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 )- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a]
     [2] 苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .以与上述相似的方法由酸进行制备。磺酰胺 (0.109 克， 67 ％ ) ； LC-MS 保留时 间： 3.60 ； MS m/z 580(M+H)。观察到化合物以相互转化的旋转异构体 ( ～ 5/4) 的形式 1 H NMR(400MHz)ppm 1.16-2.09(m， 14H)， 2.73-2.93(m， 2H)， 3.07(s， 存 在。 主 要 异 构 体 ： 3H)， 3.31-3.52(m， 3H)， 3.76(s， 3H)， 3.88(s， 3H)， 4.05-4.10(m， 1H)， 5.40(d， J ＝ 15.11Hz， 1H)， 6.88-6.93(m， 1H)， 7.13(d， J ＝ 2.27Hz， 1H)， 7.22-7.29(m， 1H)， 7.33-7.42(m， 1H)， 7.82-7.86(m， 1H)， 8.19(d， J ＝ 1.51Hz， 1H)。 酸 (0.108 克， 100％ )。 LC-MS 保留时间 ： 3.55 ； MS m/z 566(M+H)。制备了产物的 TFA 盐 (0.0437 克， 54％ )。LC-MS 保留时间 ： 3.10 ； MS m/1 z674(M+H)。 H NMR(500MHz)ppm 1.14-1.62(m， 6H)， 1.22(t， J ＝ 7.17Hz， 3H)， 1.69-2.21(m， 10H) ， 2.25-3.31(m ， 11H) ， 3.02(s ， 3H) ， 3.43(q ， J ＝ 7.02Hz ， 2H) ， 3.55-3.80(m ， 1H) ， 3.89(s， 3H)， 5.08-5.29(m， 1H)， 6.93-7.00(m， 1H)， 7.11(d， J ＝ 2.44Hz， 1H)， 7.28-7.31(m， 1H)， 7.39-7.56(m， 1H)， 7.85-7.91(m， 1H)， 8.04(s， 1H)。
     实施例 36
     (+/-)-8- 环己基 -N-(N- 乙基 -N- 甲基氨基磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧 基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 )- 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a]
     [2] 苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .以与上述相似的方法由酸进行制备。磺酰胺 (0.127 克， 67 ％ ) ； LC-MS 保留时 1 间： 3.64 ； MS m/z 594(M+H)。 观 察 到 化 合 物 以 相 互 转 化 的 旋 转 异 构 体 的 形 式 存 在 ： H NMR(400MHz)ppm 1.11-2.13(m， 18H)， 2.64(dd， J ＝ 10.07， 6.80Hz， 1H)， 2.84-2.96(m， 1H)， 3.34-3.67(m， 4H)， 3.75(s， 3H)， 3.88(s， 3H)， 4.03-4.10(m， 1H)， 5.40(d， J ＝ 15.36Hz， 1H)， 6.90-6.95(m， 1H)， 7.13(d， J ＝ 2.01Hz， 1H)， 7.21-7.29(m， 1H)， 7.33-7.39(m， 1H)， 7.83(d， J ＝ 8.06Hz， 1H)， 8.20(d， J ＝ 1.26Hz， 1H)。酸 (0.126 克， 100％ ) ； LC-MS 保留时间 ： 3.57 ； MS m/z580(M+H)。制备了产物的 TFA 盐 (0.431 克， 52％ )。LC-MS 保留时间 ： 3.18 ； MS m/ 1 z 688(M+H)。 H NMR(400MHz，氯 仿 -D)δppm 1.13-1.55(m， 6H)， 1.21(t， J ＝ 7.18Hz， 6H)， 2.31-3.55(m， 11H)， 2.41-3.29(m， 10H)， 3.49(q， J ＝ 7.05Hz， 4H)， 3.59-3.67(m， 1H)， 3.89(s， 3H)， 5.02-5.29(m， 1H)， 6.97(dd， J ＝ 8.81， 2.27Hz， 1H)， 7.10(d， J ＝ 2.52Hz， 1H)， 7.28(d， J ＝ 8.56Hz， 1H)， 7.36-7.49(m， 1H)， 7.83-7.91(m， 1H)， 7.95-8.06(m， 1H)。
     实施例 37
     在氮气气氛下将纯净的 (neat)2-(1H- 苯并三唑 -1- 基 )-1， 1， 3， 3- 四甲基86四氟硼酸盐 (0.0535 克， 0.167 毫摩尔 ) 加到搅拌的化合物 1-4(0.0774 克， 0.128 毫摩尔 )、CN 101918410 A说明书83/109 页3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷二盐酸盐 (0.026.4 克， 0.128 毫摩尔 ) 和 TEA(0.071 毫升， 0.512 毫摩尔 ) 于 DCM(2 毫升 ) 中的混合物中。将混合物在室温搅拌 1 小时， 用 MeOH(0.5 毫升 ) 淬灭， 然后蒸干， 通过反相 HPLC 来纯化， 得到经分离的呈单 TFA 盐形式的 产物 (0.0613 克， 60％ ))， 其为米色固体。LC/MS ： m/e 686(MH+)。LC/MS 方法 ： 起始％ B ： 0； 最终％ B ： 100 ； 梯度时间 ： 3 分钟 ； 停止时间 ： 4 分钟 ； 流速 ： 4 毫升 / 分钟 ； 波长 ： 220 ； 溶剂 A： 10 ％ MeOH/90 ％ H2O/0.1 ％三氟乙酸 ； 溶剂 B ： 10 ％ H2O/90 ％ MeOH/0.1 ％三氟乙酸 ； 柱： XBridge 4.6×50mm S5。
     实施例 38
     使用 HBTU 和 TEA 于二氯甲烷中的溶液由酸 (0.060 克， 0.104 毫摩尔 ) 和胺来制 备标题酰胺的 TFA 盐 (0.0465 克， 56％ )。LC-MS 保留时间 ： 3.146 分钟 ； MS m/z(M+H)688。 LC/MS 方法 ： 起始％ B ： 0； 最终％ B ： 100 ； 梯度时间 ： 3 分钟 ； 停止时间 ： 4 分钟 ； 流速 ： 4毫 升 / 分钟 ； 波长 ： 220 ； 溶剂 A ： 10 ％ MeOH/90 ％ H2O/0.1 ％三氟乙酸 ； 溶剂 B ： 10 ％ H2O/90 ％ 1 MeOH/0.1 ％三氟乙酸 ； 柱： XBridge 4.6×50mm S5。 H NMR 表明存在旋转异构体， 主要 1 形式： H NMR(400MHz， 氯 仿 -d)δppm 1.14-1.18(m， 6H)1.19-2.12(m， 16H)2.19-3.77(m， 9H)2.95(s， 3H)3.89(s， 3H)3.95-5.02(m， 4H)5.03-5.24(m， 1H)6.97(dd， J ＝ 8.81， 2.77Hz， 1H)7.11(d， J ＝ 2.52Hz， 1H)7.28(d， J ＝ 8.56Hz， 1H)7.40-7.64(m， 1H)7.88(d， J ＝ 8.31Hz， 1H)8.07( 宽单峰， 1H)。
     其它化合物
     其它化合物可使用下述途径来制备。
     向配备有搅拌棒的 250 毫升圆底烧瓶 (RBF) 中加入溴环丁烷 (3.49 毫升， 37.0 毫 摩尔 ) 和 70 毫升乙醚。将烧瓶冷却至 -78℃ ( 丙酮 / 干冰浴 )。然后通过注射器向该溶液 中加入 2.0 当量浓度为 1.7M 的叔丁基锂溶液 (43.6 毫升， 74.1 毫摩尔 )。将混合物搅拌 60 分钟， 然后在 -78℃通过导管加到含有硫酰氯 (6.00 毫升， 74.1 毫摩尔 ) 于 30 毫升乙醚中 的溶液的 500 毫升烧瓶中。将悬浮液温热至室温且过夜。白色混合物用 40 毫升乙醚稀释， 过滤并静置。借助干冰 / 异丙醇浴将配备有搅拌棒且装有无水 THF(10 毫升 ) 的 500 毫升 三颈圆底烧瓶冷却至 -65℃， 将氨气缓慢喷射到烧瓶中。 然后通过注射器滴加先前合成的环 丁基磺酰氯 (5.2 克， 33.6 毫摩尔 )( 在～ 200 毫升乙醚 /THF 中的粗混合物 )。再继续喷射氨气 5 分钟。将混合物在 -65℃保持 4 小时， 然后使其缓慢温热至室温。过滤反应混合物， 用 100 毫升 THF 洗涤。蒸发溶剂， 得到 2.1 克所需磺酰胺 (46％收率 )， 其为浅黄色油性固 1 体。 H NMR(500MHz， DMSO-D6) ： δppm 1.81-1.89(m， 2H)， 2.16-2.22(m， 2H)， 2.23-2.31(m， 2H)， 3.66-3.74(m， 1H)， 6.68(s， 2H)。
     H NMR(500MHz， DMSO-D6) ： δppm 0.94(m， 3H)， 1.20(m， 3H)， 1.30-1.45(m， 1H)， 1.90(m， 1H)， 2.76(m， 1H)， 6.59(s， 2H)。1
     H NMR(500MHz， DMSO-D6) ： δppm 1.02(d， J ＝ 6.95Hz， 6H)， 2.11(m， 1H)， 2.86(d， J ＝ 6.22Hz， 2H)， 6.71(s， 2H)。1
     H NMR(500MHz， DMSO-D6) ： δppm 1.51-1.66(m， 4H)， 1.86(m， 4H)， 3.37(m， 1H)， 6.65(s， 2H)。1
     1H NMR(500MHz， DMSO-D6) ： δppm 4.24(m， 2H)， 7.46(s， 2H)。
     1H NMR(500MHz， DMSO-D6) ： δppm 2.70(m， 2H)， 3.20(m， 2H)， 7.01(s， 2H)。
     H NMR(500MHz， DMSO-D6) ： δppm 1.07-1.17(m， 1H)， 1.22-1.38(m， 4H)， 1.62(m， 1H)， 1.78(m， 2H)， 2.05(m， 2H)， 2.68-2.77(m， 1H)， 6.57(s， 2H)。1
     1H NMR(300MHz， DMSO-D6) ： δppm 1.22(d， J ＝ 6.59Hz， 6H)， 3.00(m， 1H)， 6.59(s，2H)。
     10-(( 仲丁基磺酰基 ) 氨甲酰基 )-13- 环己基 -3- 甲氧基 -7H- 吲哚并 [2， 1-a][2] -6- 甲酸甲酯 .苯并氮杂
     向 100 毫升圆底烧瓶 (RBF) 中加入羧酸 1(575 毫克， 1.291 毫摩尔 ) 和 1， 1’ - 羰基 二咪唑 (460 毫克， 2.84 毫摩尔 ) 于 THF(15 毫升 ) 中的溶液， 得到黄色溶液。将混合物在室 温和氮气气氛下搅拌 1 小时， 然后在油浴中加热至 70℃且保持 90 分钟。 冷却混合物并加入 仲丁基磺酰胺 (921 毫克， 6.71 毫摩尔 ) 于 4 毫升 THF 中的溶液及纯净的 DBU(0.389 毫升， 2.58 毫摩尔 )。将 RBF 放回到油浴中并在 70℃加热过夜。将反应混合物转移到分液漏斗 中， 用 100 毫升 DCM 稀释， 用 100 毫升浓度为 0.5M 的 HCl 洗涤三次， 然后用 100 毫升水洗涤， 最后用饱和 NaCl 洗涤。 有机混合物用 MgSO4 干燥， 过滤并浓缩， 得到 713 毫克所需的酰基磺酰胺 2， 其为黄色固体 (96％收率 )， 将所述固体真空放置过夜。在配备有 Phenomenex-Luna 10μ， C18， 4.6×30mm 柱的 ShimadzuLC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据， 其中使用检测器波 长为 220nm 的 SPD-10AV UV-Vis 检测器。使用以下洗脱条件 ： 流速为 5 毫升 / 分钟， 梯度 为 100％溶剂 A/0％溶剂 B 至 0％溶剂 A/100％溶剂 B， 梯度时间为 2 分钟， 保持时间为 1 分 钟， 且分析时间为 3 分钟， 其中溶剂 A 为 10 ％ MeOH/90 ％ H2O/0.1 ％三氟乙酸， 且溶剂 B 为 10％ H2O/90％ MeOH/0.1％三氟乙酸。使用针对 LC 的 Micromass Platform 以电喷雾模式 来确定 MS 数据。1H NMR(500MHz， CD3OD) ： δppm 0.84-0.92(m， 3H)， 1.03(t， J ＝ 7.32Hz， 3H)， 1.23(m， 1H)， 1.28-1.44(m， 7H)， 1.58(m， 1H)， 1.72(m， 2H)， 1.85(m， 1H)， 1.95-2.07(m， 3H)， 2.17(m， 1H)， 2.78(m， 1H)， 3.69(m， 2H)， 3.83-3.91(m， 3H)， 7.02(s， 1H)， 7.11(m， 1H)， 7.47(d， J ＝ 7.63Hz， 1H)， 7.74(m， 3H)， 8.25(s， 1H)。LC/MS ： m/z 565.22， Rf ： 2.192 分钟， 97.5％纯度。
     5-(( 仲丁基磺酰基 ) 氨甲酰基 )-8- 环己基 -11- 甲氧基 -1， 12b- 二氢环丙并 [d] -1a(2H)- 甲酸甲酯 . 在室温向在 100 毫升 RBF 中的 63.1 毫克浓度为 95％的 NaH 于 5 毫升无水 DMF 中89吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     CN 101918410 A说明书86/109 页的溶液中加入 629 毫克碘化三甲基氧化锍。将混合物在室温和氮气下搅拌 30 分钟。通过 注射器加入中间体 9 的溶液 ( 在 7 毫升 DMF 中 )， 将反应混合物搅拌 15-20 分钟。用冰浴 将反应混合物快速冷却至 0℃。加入 1 毫升浓度为 1M 的 HCl， 然后加入 60 毫升冰水。将非 均质混合物搅拌 30 分钟。过滤混合物， 黄色固体用冰水洗涤。将固体吸收在 2％甲醇 /DCM 中并使用 Biotage Horizon MPLC( 使用 40+M 柱 )( 溶剂梯度为 2％甲醇 /DCM 至 10％甲醇 /DCM) 来纯化。蒸发溶剂后， 得到 450 毫克 (62％收率 ) 化合物， 其为黄色固体。在配备有 Phenomenex-Luna 10μ， C18， 4.6×30mm 柱的 ShimadzuLC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据， 其 中使用检测器波长为 220nm 的 SPD-10AV UV-Vis 检测器。使用以下洗脱条件 ： 流速为 5 毫 升 / 分钟， 梯度为 100％溶剂 A/0％溶剂 B 至 0％溶剂 A/100％溶剂 B， 梯度时间为 2 分钟， 保 持时间为 1 分钟， 且分析时间为 3 分钟， 其中溶剂 A 为 10％ MeOH/90％ H2O/0.1％三氟乙酸， 且溶剂 B 为 10％ H2O/90％ MeOH/0.1％三氟乙酸。使用针对 LC 的 Micromass Platform 以 电喷雾模式来确定 MS 数据。1H NMR(300MHz， CD3OD) ： δppm 0.19(m， 0.35H)， 1.03-1.14(m， 3H) ， 1.19-1.34(m ， 2.65H) ， 1.43(m ， 5H) ， 1.55-1.66(m ， 2H) ， 1.74(m ， 2H) ， 1.89-1.94(m ， 2H)， 1.99-2.14(m， 3H)， 2.64-2.95(m， 2H)， 3.35(d， J ＝ 15.00Hz， 0.65H)， 3.48(m， 2H)， 3.67-3.81(m， 2H)， 3.85(s， 3H)， 3.90-3.98(m， 0.35H)， 5.17(m， 0.35H)， 5.36(m， 0.65H)， 6.91-6.98(m， 1H)， 7.09(m， 0.35H)， 7.16(m， 0.65H)， 7.19-7.27(m， 1H)， 7.52-7.65(m， 1H)， 7.83(m， 1H)， 8.09(s， 0.35H)， 8.29(s， 0.65H)。 LC/MS ： m/z 57931， Rf ： 2.167 分钟， 95.2％纯 度。
     8- 环己基 -5-(( 环己基磺酰基 ) 氨甲酰基 )-11- 甲氧基 -1， 12b- 二氢环丙并 [d]1 -1a(2H)- 甲酸甲酯。 H NMR(300MHz， CD3OD) ： δppm 0.23(m，吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂0.35H)， 1.14-1.53(m， 10H)， 1.60-1.79(m， 3H)， 1.91(m， 3H)， 2.09(m， 1.65H)， 2.18(m， 3H)， 2.81-2.98(m ， 3H) ， 3.41-3.46(m ， 0.65H) ， 3.50(m ， 2H) ， 3.71-3.79(m ， 2H) ， 3.88(s ， 3H) ， 3.99-4.04(m， 0.35H)， 5.25(m， 0.35H)， 5.45(m， 0.65H)， 6.97-7.02(m， 1H)， 7.13(m， 0.35H)， 7.21(m， 0.65H)， 7.26-7.32(m， 1H)， 7.55-7.65(m， 1H)， 7.85-7.92(m， 1H)， 8.11(s， 0.35H)， 8.32(s， 0.65H)。LC/MS ： m/z 605.42， Rf ： 2.223 分钟， 99.2％纯度。
     8- 环己基 -5-(( 环戊基磺酰基 ) 氨甲酰基 )-11- 甲氧基 -1， 12b- 二氢环丙并 [d]1 -1a(2H)- 甲酸甲酯。 H NMR(300MHz， CD3OD) ： δppm 0.23(m，吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂0.35H)， 1.27(m， 2.65H)， 1.39(m， 2H)， 1.60-1.79(m， 7H)， 1.91-2.19(m， 8H)， 2.67-2.97(m， 2H)， 3.47(m， 0.65H)， 3.50(m， 3H)， 3.78-3.87(m， 3H)， 4.10(m， 0.35H)， 4.29(m， 1H)， 5.22(m， 0.35H)， 5.43(m， 0.65H)， 6.98-7.02(m， 1H)， 7.14(m， 0.35H)， 7.21(m， 0.65H)， 7.26-7.32(m， 1H)， 7.55-7.65(m， 1H)， 7.85-7.91(m， 1H)， 8.10(s， 0.35H)， 8.32(s， 0.65H).LC/MS ： m/z 591.33， Rf ： 2.200 分钟， 100％纯度。
     8- 环己基 -11- 甲氧基 -5-(((3， 3， 3- 三氟丙基 ) 磺酰基 ) 氨甲酰基 )-1， 12b- 二 -1a(2H)- 甲酸甲酯。1H NMR(300MHz， CD3OD) ：氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂δppm 0.19(m， 0.35H)， 1.25(m， 1.65H)， 1.41(m， 2H)， 1.65(m， 1H)， 1.76(m， 2H)， 1.94(m， 2H) ， 2.04(m ， 1H) ， 2.61-2.84(m ， 6H) ， 2.88-2.96(m ， 1H) ， 3.35-3.40(m ， 0.65H) ， 3.48(m ， 2H) ， 3.80(m ， 2H) ， 3.86(m ， 3H) ， 3.89-3.98(m ， 0.35H) ， 5.18(m ， 0.35H) ， 5.38(m ， 0.65H) ， 6.96-7.01(m， 1H)， 7.13(m， 0.35H)， 7.20(m， 0.65H)， 7.24-7.30(m， 1H)， 7.58-7.69(m， 1H)， 7.84-7.90(m， 1H)， 8.13(s， 0.35H)， 8.34(s， 0.65H)。LC/MS ： m/z 619.32， Rf ： 2.188 分 钟， 99.5％纯度。
     8- 环己基 -11- 甲氧基 -5-(((2， 2， 2- 三氟乙基 ) 磺酰基 ) 氨甲酰基 )-1， 12b- 二氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂-1a(2H)- 甲酸甲酯。1H NMR(300MHz， CD3OD) ：δ ppm 0.13(m ， 0.35H) ， 1.18(m ， 1.65H) ， 1.38(m ， 2H) ， 1.57-1.62(m ， 2H) ， 1.73(m ， 2H) ， 1.87(m， 2H)， 1.96-2.05(m， 1H)， 2.60-2.90(m， 1.35H)， 3.17-3.22(m， 0.65H)， 3.45(m， 2H)， 3.74(m， 1H)， 3.84(m， 2H)， 4.04-4.10(m， 3H)， 4.38-4.53(m， 2H)， 5.06(m， 0.35H)， 5.18(m， 0.65H)， 6.90-6.96(m， 1H)， 7.06(m， 0.35H)， 7.13(m， 0.65H)， 7.16-7.22(m， 1H)， 7.63(m， 0.65H)， 7.70-7.80(m， 1.35H)， 8.14(s， 0.35H)， 8.33(s， 0.65H)。LC/MS ： m/z 605.29， Rf ： 2.178 分钟， 96.5％纯度。
     8- 环己基 -5-(( 异丁基磺酰基 ) 氨甲酰基 )-11- 甲氧基 -1， 12b- 二氢环丙并 [d]1 -1a(2H)- 甲酸甲酯。 H NMR(300MHz， CD3OD) ： δppm 0.17(m，吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂0.35H)， 1.09(m， 6H)， 1.22(m， 1.65H)， 1.38(m， 2H)， 1.49-1.60(m， 1H)， 1.73(m， 2H)， 1.87(m， 2H)， 1.96-2.05(m， 2H)， 2.15-2.39(m， 1H)， 2.61-2.87(m， 2H)， 2.96(d， J ＝ 6.22Hz， 2H)， 3.19(m， 2H)， 3.43(m， 2H)， 3.70(m， 2H)， 3.84(m， 2H)， 5.06-5.11(m， 1H)， 6.90-6.95(m， 1H)， 7.05-7.11(m， 1H)， 7.16-7.23(m， 1H)， 7.67-782(m， 2H)， 8.20(s， 0.35H)， 8.39(s， 0.65H)。 LC/MS ： m/z579.30， Rf ： 2.190 分钟， 96.2％纯度。
     用于将式的 I 酯转化成相应的酰胺的一般方法。
     向 100 毫升圆底烧瓶中加入 1N 氢氧化钠 (3 当量， 1.583 毫升， 1.583 毫摩尔 ) 和 桥接的酯 1(1 当量， 0.528 毫摩尔 ) 于甲醇 (4.00 毫升 ) 和 THF(4.00 毫升 ) 中的溶液， 得到 黄色溶液。将混合物在室温搅拌 3 小时。然后加入 3 当量 1N HCl， 产物用乙酸乙酯稀释， 然后萃取， 用盐水洗涤并用 MgSO4 干燥。过滤并， 然后对挥发物进行蒸发， 以近乎定量的收 率得到羧酸 2。向在配备有 TeflonTM 内衬螺纹帽的 2 打兰小瓶中的 0.10 毫摩尔羧酸 2 于 1 毫升无水 N， N- 二甲基甲酰胺 (DMF) 中的溶液中加入 0.3 毫摩尔 (3 当量 )2-(1H- 苯并三 唑 -1- 基 )-1， 1， 3， 3， - 四甲基 四氟硼酸盐 (TBTU) 于 1.0 毫升无水 DMF 中的溶液， 然后加 入 0.2 毫摩尔 (2 当量 ) 胺 3 于 1.0 毫升无水 DMF 中的溶液和 0.4 毫摩尔纯净的 N， N- 二异 丙基乙胺。 在室温将反应混合物在 VWR Vortex-Genie 2 混合器上振摇过夜。 然后在 Savant Speedvac 中减小反应混合物体积， 将粗产物吸收在 1.2 毫升甲醇中并通过 Shimadzu 制备 性 HPLC 使用如下条件来纯化 ： 甲醇 / 水和 0.1％三氟乙酸缓冲剂， Phenomenex Luna， C18， 30mm×100mm， 10μm 柱， 梯度为 40-100％ B， 且流速为 40 毫升 / 分钟， 历时 10 分钟， 然后保 持 5-10 分钟， 得到甲酰胺 4， 其为黄色无定形固体 (65 ％ -70 ％收率 )。在 Shimadzu 分析 性 LC/Micromass Platform LC(ESI+)(220nm) 上使用如下一组条件来得到纯化后的 LC/MS 数据 ： 柱 I(Phenomenex 10μm C18， 4.6×30mm)， 溶剂系统 I( 梯度为 0-100％ B， 其中 B ＝ 90％ HPLC 级甲醇 /0.1％三氟乙酸 /10％用 PLC 级水 )， 历时 2 分钟， 然后保持 1 分钟， 流速为 5 毫升 / 分钟。
     8- 环己基 -11- 甲氧基 -1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰 基 )-N-((2， 2， 2- 三氟乙基 ) 磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2]
     苯并氮杂-5- 甲 酰 胺。1H NMR(300MHz， CD3OD) ： δppm 0.16(m， 0.20H)， 1.22-1.37(m，2.80H) ， 1.45(m ， 3H) ， 1.62(m ， 1H) ， 1.78(m ， 3H) ， 1.92-2.21(m ， 5H) ， 2.52-2.69(m ， 1H) ， 2.81(m， 3H)， 2.94(m， 2H)， 3.16(m， 1H)， 3.39(m， 2H)， 3.51-3.65(m， 2H)， 3.85-3.92(m， 3H)， 4.15-4.37(m， 1H)， 4.66(m， 3H)， 5.10(m， 1H)， 6.97-7.05(m， 1H)， 7.15(d， J ＝ 1.83Hz， 0.20H)， 7.19(d， J ＝ 1.83Hz， 0.80H)， 7.30(d， J ＝ 8.42Hz， 1H)， 7.53-7.63(m， 1H)， 7.89(d， 98.0％纯度。 J ＝ 8.42Hz， 1H)， 7.99-8.08(m， 1H)。LC/MS ： m/z 699.35， Rf ： 1.810 分钟，
     8- 环己基 -11- 甲氧基 -1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰 基 )-N-((3， 3， 3- 三氟丙基 ) 磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2]
     苯并氮杂-5- 甲 酰 胺。1H NMR(300MHz， CD3OD) ： δppm 0.14(m， 0.20H)， 1.19-1.33(m，2.80H) ， 1.42(m ， 3H)1.60(m ， 1H) ， 1.76(m ， 3H) ， 2.00(m ， 5H) ， 2.54(m ， 1H) ， 2.65(m ， 1H) ， 2.72-2.86(m， 5H)， 2.87-3.01(m， 2H)， 3.30-3.44(m， 2H)， 3.49-3.63(m， 2H)， 3.78-3.89(m， 5H)， 4.17-4.29(m， 1H)， 4.64(m， 1H)， 5.07(m， 1H)， 6.96-7.03(m， 1H)， 7.13(d， J ＝ 2.56Hz， 0.20H)， 7.17(d， J ＝ 2.56Hz， 0.80H)， 7.28(d， J ＝ 8.42Hz， 1H)， 7.54(d， J ＝ 8.42Hz， 0.80H)， 7.59(d， J ＝ 8.42Hz， 0.20H)， 7.83-7.90(m， 1H)， 7.97(s， 0.80H)， 8.07(s， 0.20H)。 LC/MS ： m/z 713.36， Rf ： 1.822 分钟， 98.7％纯度。
     N-( 仲 丁 基 磺 酰 基 )-8- 环 己 基 -11- 甲 氧 基 -1a-((3- 甲 基 -3， 8- 二 氮 杂 二 环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰 基 )-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 环 丙 并 [d] 吲 哚 并 [2， 1-a][2] 苯 并 氮
     杂-5- 甲 酰 胺。1H NMR(300MHz， CD3OD) ： δppm 0.17(m， 0.20H)， 1.08(t， J ＝ 7.50Hz，3H) ， 1.19-1.34(m ， 1.80H) ， 1.38-1.53(m ， 6H) ， 1.70(m ， 5H) ， 2.08(m ， 5H) ， 2.40(m ， 1H) ， 2.67(m， 1H)， 2.82(m， 3H)， 2.94(m， 3H)， 3.27(m， 1H)， 3.32-3.46(m， 2H)， 3.49-3.65(m， 2H)， 3.74(m， 1H)， 3.84-3.92(m， 3H)， 4.21(m， 1H)， 4.65(m， 1H)， 5.10(m， 1H)， 6.97-7.05(m， 1H)， 7.14-7.20(m， 1H)， 7.30(m， 1H)， 7.55(m， 1H)， 7.87-7.92(m， 1H)， 7.97-8.05(m， 1H)。LC/MS ： m/z 673.32， Rf ： 1.820 分钟， 98.2％纯度。
     异 构 体 A 和 异 构 体 B 通 过 对 由 手 性 乙 酯 制 备 的 (1aR， 12bS)-N-( 仲 丁 基 磺 酰 基 )-8- 环己基 -11- 甲氧基 -1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺进行 SFC 手性分离 来得到。SFC 分离条件 ： 柱： ChiralPak AD-H， 30×250mm， 5μm ； 流动相 ： 25％异丙醇 /75％ CO2 ； 压力 ： 100 巴 ； 温度 ： 35℃ ； 流速 ： 70 毫升 / 分钟 ； UV ： 260nm ； 注射 ： 2 毫升 ( 浓度为～ 5 毫克 / 毫升的 9 ∶ 1 IPA ∶ ACN 溶液 ) ； 收集 ： 异构体 A( 峰 1)35.0-41.5 分钟 ； 异构体 B( 峰 2)43.5-52.5 分钟。
     异构体 A.
     使用 UV 检测在 254nm 和 256nm 的 Shimadzu-VP 仪器进行分析性 HPLC。 分析性 HPLC 方法 ： 溶剂 A ＝ 5 ％ MeCN-95 ％ H2O-0.1 ％ TFA， 溶剂 B ＝ 95 ％ MeCN-5 ％ H2O-0.1 ％ TFA， 起 始％ B ＝ 10， 最终％ B ＝ 100， 梯度时间＝ 10 分钟， 流速＝ 1 毫升 / 分钟， 柱： Waters Sunfire C-18， 4.6×150mm， 3.5μm， Rt ＝ 7.86 分钟。使用 Shimadzu-VP 仪器 (UV 检测在 220nm) 和 Waters Micromass 进行 LC/MS。HPLC 方法 ： 溶剂 A ＝ 10％ MeOH-90％ H2O-0.1％ TFA， 溶剂 B ＝ 90％ MeOH-10％ H2O-0.1％ TFA， 起始％ B ＝ 0， 最终％ B ＝ 100， 梯度时间＝ 2 分钟， 流速 + + ＝ 5 毫升 / 分钟， 柱： Xterra MS C18 S7 3.0×50mm ； (ES )m/z(M+H) ＝ 673.56， HPLC Rt ＝ 1.637 分钟。HPLC 方法 ： 溶剂 A ＝ 5％ MeCN-95％ H2O-10mM NH4OAc， 溶剂 B ＝ 95％ MeCN-5％ H2O-10mMNH4OAc， 起始％ B ＝ 0， 最终％ B ＝ 100， 梯度时间＝ 2 分钟， 流速＝ 5 毫升 / 分钟， + + 柱： Phenomenex Lina C18 5μm 3.0×50mm ； (ES )m/z(M+H) ＝ 673.54， HPLCRt ＝ 1.255 分 钟。旋光度 ： -74.75° (3.21 毫克 / 毫升的 MeOH 溶液， 589nm， 50mm 样品池 )。
     异构体 B.
     使用 UV 检测在 254nm 和 256nm 的 Shimadzu-VP 仪器进行分析性 HPLC。 分析性 HPLC 方法 ： 溶剂 A ＝ 5 ％ MeCN-95 ％ H2O-0.1 ％ TFA， 溶剂 B ＝ 95 ％ MeCN-5 ％ H2O-0.1 ％ TFA， 起 始％ B ＝ 10， 最终％ B ＝ 100， 梯度时间＝ 10 分钟， 流速＝ 1 毫升 / 分钟， 柱： Waters Sunfire C-18， 4.6×150mm， 3.5μm， Rt ＝ 8.35 分钟。使用 Shimadzu-VP 仪器 (UV 检测在 220nm) 和Waters Micromass 进行 LC/MS。HPLC 方法 ： 溶剂 A ＝ 10％ MeOH-90％ H2O-0.1％ TFA， 溶剂 B ＝ 90％ MeOH-10％ H2O-0.1％ TFA， 起始％ B ＝ 0， 最终％ B ＝ 100， 梯度时间＝ 2 分钟， 流速 + + ＝ 5 毫升 / 分钟， 柱： Xterra MS C18 S7 3.0×50mm ； (ES )m/z(M+H) ＝ 673.53， HPLC Rt ＝ 1.650 分钟。HPLC 方法 ： 溶剂 A ＝ 5％ MeCN-95％ H2O-10mM NH4OAc， 溶剂 B ＝ 95％ MeCN-5％ H2O-10mMNH4OAc， 起始％ B ＝ 0， 最终％ B ＝ 100， 梯度时间＝ 2 分钟， 流速＝ 5 毫升 / 分钟， + + 柱： Phenomenex Lina C185μm 3.0×50mm ； (ES )m/z(M+H) ＝ 673.54， HPLCRt ＝ 1.263 分 钟。旋光度 ： -75.36° (3.29 毫克 / 毫升的 MeOH 溶液， 589nm， 50mm 样品池 )。
     13- 环己基 -3- 甲氧基 -6-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰 -10- 甲酸叔丁酯 . -6- 甲酸 (670 毫克， 1.37 毫摩尔 ) 和 将 HATU(680 毫 克， 1.8 毫 摩 尔 ) 加 到 搅 拌 的 10-( 叔 丁 氧 基 羰 基 )-13- 环 己基 )-7H- 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     基 -3- 甲氧基 -7H- 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷二盐酸盐 (560 毫克， 2.81 毫摩尔 ) 于 DMF(6 毫升 ) 和 TEA(1.2 毫升， 8.2 毫摩尔 ) 中的溶液中， 将反应混合物搅拌 30 分钟 ( 通过 LCMS 确定反 应完成 )。反应混合物用水 ( ～ 35 毫升 ) 稀释 ( 形成沉淀物 ) 并搅拌过夜 (ON)。过滤收集 沉淀物， 用水冲洗并在 55℃高真空干燥， 得到 13- 环己基 -3- 甲氧基 -6-((3- 甲基 -3， 8- 二 氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-7H- 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂1-10- 甲酸叔丁酯(775 毫克， 1.30 毫摩尔， 95％收率 )， 其为浅黄色固体。所得物质不经进一步纯化即使用。 H NMR(300MHz， CDCl3)δppm 1.14-3.95(m， 24H)， 1.59(s， 9H)， 3.86(s， 3H)， 4.21-5.26(m， 2H)， 6.82(s， 1H)， 6.88(d， J ＝ 2.6Hz， 1H)， 7.01(dd， J ＝ 8.8， 2.6Hz， 1H)， 7.47(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.66(dd， J ＝ 8.4， 1.1Hz， 1H)， 7.80(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 8.02( 宽单峰， 1H)。 LC-MS + 保留时间 ： 3.72 分钟 ； m/z 596(MH )。在配备有 Phenomenex-Luna 10μC18 3.0×50mm 柱 的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据， 其中使用检测器波长为 220nm 的 SPD-10AV UV-Vis 检测器。使用以下洗脱条件 ： 流速为 5 毫升 / 分钟， 梯度为 100％溶剂 A/0％溶剂 B 至 0％溶剂 A/100％溶剂 B， 梯度时间为 4 分钟， 保持时间为 1 分钟， 且分析时间为 5 分钟， 其 中溶剂 A 为 10％ MeOH/90％ H2O/0.1％三氟乙酸， 且溶剂 B 为 10％ H2O/90％ MeOH/0.1％三 氟乙酸。使用针对 LC 的 Micromass Platform 以电喷雾模式来确定 MS 数据。
     13- 环己基 -3- 甲氧基 -6-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰 -10- 甲酸三氟乙酸盐 . -10- 甲酸叔丁酯 (300 毫克， 0.504 毫摩尔 ) 溶 将 13- 环己基 -3- 甲氧基 -6-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 )基 )-7H- 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     羰基 )-7H- 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂解在 DCE(5 毫升 ) 中， 然后加入 TFA(700μl， 9.09 毫摩尔 )( 反应混合物变为绿色 )， 将反 应混合物在室温搅拌 1 小时 ( 通过 LCMS 确定～ 70％转化 )。再加入 TFA(700μl， 9.09 毫 摩尔 )， 将反应混合物搅拌 1 小时 ( 通过 LCMS 确定反应完成 )。将反应混合物在旋转蒸发 仪上浓缩， 用乙醚稀释并再次浓缩， 如此进行两次， 得到 13- 环己基 -3- 甲氧基 -6-((3- 甲 基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-7H- 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂1-10- 甲酸三氟乙酸盐 (362 毫克， 0.55 毫摩尔， 定量 )， 其为深黄色固体。不经进一步纯化即使用。 H NMR(300MHz， DMSO-d6)δppm 1.06-2.13(m， 21H)， 2.68-2.86(m， 1H)， 3.36-3.50(m， 2H)， 3.90(s， 3H)， 4.11-5.35(m， 2H)， 7.14(s， 1H)， 7.18-7.28(m， 2H)， 7.53(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.61(dd， J ＝ 8.4， 1.1Hz， 1H)， 7.87(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 8.21( 宽单峰， 1H)， 9.55( 宽单峰， + LC-MS 保留时间 ： 2.50 分钟 ； 538m/z(MH-)。 1H)。 LC-MS 保留时间 ： 3.72 分钟 ； m/z 596(MH )。 在配备有 Phenomenex-Luna 10μC18 4.6×50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据， 其中使用检测器波长为 220nm 的 SPD-10AV UV-Vis 检测器。使用以下洗脱条件 ： 流速为 5 毫升 / 分钟， 梯度为 100％溶剂 A/0％溶剂 B 至 0％溶剂 A/100％溶剂 B， 梯度时间 为 4 分钟， 保持时间为 1 分钟， 且分析时间为 5 分钟， 其中溶剂 A 为 5％乙腈 /95％ H2O/10mM 乙酸铵， 溶剂 B 为 5％ H2O/95％乙腈 /10mM 乙酸铵。使用针对 LC 的 Micromass Platform 以 电喷雾模式来确定 MS 数据。
     8- 环己基 -11- 甲氧基 -1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰 -5- 甲酸叔丁酯 .基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     将碘化三甲基氧化锍 (375 毫克， 1.69 毫摩尔 ) 分三份加到搅拌的 60％ NaH 分散体 (68 毫克， 1.7 毫摩尔 ) 于 DMSO(1.5 毫升 ) 中的浆液中 ( 发生起泡 )。将反应混合物搅拌 20 分钟， 然后加入 13- 环己基 -3- 甲氧基 -6-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-7H- 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -10- 甲酸叔丁酯 (438 毫克， 0.735 毫摩尔 ) 于DMSO(2.5 毫升 ) 中的溶液， 将反应混合物搅拌 1 小时 (LCMS 表明没有所需产物 )。 将反应混 合物在 90℃加热 3 小时 (LCMS 表明反应完成 )， 冷却至室温， 用 0.25M HCl 水溶液 (20 毫升 ) 淬灭， 并用 EtOAc(2×20 毫升 ) 萃取。合并的有机层用盐水 (20 毫升 ) 洗涤， 干燥 (MgSO4)， 过滤并浓缩， 得到 72009-057， 其为橙色油状物。所述油状物不经进一步纯化即用作制备 8- 环己基 -11- 甲氧基 -1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酸三氟乙酸盐的起始原料。 分离化合物， 其为对映异构体的混合物。LC-MS 保留时间 ： 3.68 分钟 ； m/z 610(MH+)。在配 备有 Phenomenex-Luna 10μC18 3.0×50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数 据， 其中使用检测器波长为 220nm 的 SPD-10AV UV-Vis 检测器。使用以下洗脱条件 ： 流速为 5 毫升 / 分钟， 梯度为 100％溶剂 A/0％溶剂 B 至 0％溶剂 A/100％溶剂 B， 梯度时间为 4 分 钟， 保持时间为 1 分钟， 且分析时间为 5 分钟， 其中溶剂 A 为 10％ MeOH/90％ H2O/0.1％三氟 乙酸， 且溶剂 B 为 10％ H2O/90％ MeOH/0.1％三氟乙酸。 使用针对 LC 的 Micromass Platform 以电喷雾模式来确定 MS 数据。
     8- 环己基 -11- 甲氧基 -1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰 -5- 甲酸三氟乙酸盐 .基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     将起始原料 (448 毫克， 0.735 毫摩尔 ) 溶解在 DCE(6 毫升 ) 中， 然后加入 TFA(1.5 毫升， 19 毫摩尔 )( 反应混合物变为深红色 )， 将反应混合物在室温搅拌 2 小时 (LCMS 表明 反应完成 )。将反应混合物在旋转蒸发仪上浓缩， 用乙醚稀释并再次浓缩， 如此进行两次， 得到橙色油状物。残余物用乙醚浆化， 过滤收集固体 (360 毫克黄色固体 )， 用己烷冲洗。 从滤液中收集额外的固体 (52 毫克黄色固体 )， 用己烷冲洗。合并的固体经证实为 8- 环 己基 -11- 甲氧基 -1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酸三氟乙酸盐 (412 毫克， 0.62 毫摩尔， 84 ％ )。分离化合物， 其为对映异构体的混合物并以旋转异构体或阻转异构体的 1 1 ∶ 5 混合物的形式存在。主要异构体 ： H NMR(300MHz， CDCl3)δppm0.81-1.01(m， 2H)， 1.13-2.65(m， 18H)， 2.62(s， 3H)2.69-3.70(m， 2H)， 3.60(d， J ＝ 15.4Hz， 1H)， 3.87(s， 3H)， 4.36-5.30(m， 3H)， 6.95(dd， J ＝ 8.8， 2.2Hz， 1H)， 7.09(d， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 7.28(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.75(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.86(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 8.08(s， 1H)。 LC-MS 保留时间 ： + 3.24 分钟 ； 554m/z(MH )。在配备有 Phenomenex-Luna 10μC18 3.0×50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据， 其中使用检测器波长为 220nm 的 SPD-10AV UV-Vis 检测 器。使用以下洗脱条件 ： 流速为 5 毫升 / 分钟， 梯度为 100％溶剂 A/0％溶剂 B 至 0％溶剂 A/100％溶剂 B， 梯度时间为 4 分钟， 保持时间为 1 分钟， 且分析时间为 5 分钟， 其中溶剂 A 为 10％ MeOH/90％ H2O/0.1％三氟乙酸， 且溶剂 B 为 10％ H2O/90％ MeOH/0.1％三氟乙酸。使 用针对 LC 的 Micromass Platform 以电喷雾模式来确定 MS 数据。
     8- 环己基 -11- 甲氧基 -1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰 -5- 甲基 )-N-( 丙基磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 酰胺 .
     将 CDI(21.3 毫克， 0.131 毫摩尔 ) 加到搅拌的 8- 环己基 -11- 甲氧基 -1a-((3- 甲 基 -3， 8- 二 氮 杂 二 环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰 基 )-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 环 丙 并 [d] 吲 哚 并 -5- 甲酸三氟乙酸盐 (56 毫克， 0.10 毫摩尔 )) 于 THF(0.5 毫升 )[2， 1-a][2] 苯并氮杂中的溶液中， 将反应混合物在 60 ℃加热 1.5 小时。将反应混合物冷却至室温， 先后加入 丙烷 -1- 磺酰胺 (16 毫克， 0.13 毫摩尔 ) 和 DBU(0.025 毫升， 0.15 毫摩尔， 浓度为 20 ％ 的 THF 溶液 )。将反应混合物在室温搅拌 1 小时， 再加入 DBU( ～ 0.025 毫升 )。将反应 混合物在室温搅拌 2 小时， 在 60 ℃加热 1 小时， 然后在室温搅拌过夜。向反应混合物中 再加入 DBU(0.025 毫升 ) 和丙烷 -1- 磺酰胺 (16.20 毫克， 0.131 毫摩尔 )， 并在室温继续 搅拌 3 天。反应混合物用 EtOAc(2 毫升 ) 稀释， 用 1M HCl(2 毫升 ) 洗涤。用氮气气流将 有机层浓缩至干， 溶解在 MeOH(1.5 毫升 ) 中， 过滤并通过制备性 HPLC(CH3CN/H2O( 含有 10mMNH4OAc)) 来纯化， 得到 8- 环己基 -11- 甲氧基 -1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-N-( 丙基磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯 并氮杂 -5- 甲酰胺 (9.0 毫克， 0.014 毫摩尔， 14 ％收率 )， 其为黄色固体。分离化合物， 其为对映异构体的混合物并以旋转异构体或阻转异构体的 1 ∶ 2 混合物的形式存在。1H NMR(500MHz， CDCl3)δppm-0.37 至 -0.20(m， 0.33H)， 0.24-0.29(m， 0.33H)， 0.89-3.03(m， 31.33H)， 3.54-3.64(m， 2H)， 3.89(s， 2H)， 3.90(s， 1H)， 4.04-4.67(m， 1H)， 4.74(d， J ＝ 14.7Hz， 0.33H)， 5.19(d， J ＝ 15.0Hz， 0.67H)， 6.93(dd， J ＝ 8.6， 2.4Hz， 0.33H)， 6.96(dd， J ＝ 8.6， 2.4Hz， 0.67H)， 7.00(d， J ＝ 2.4Hz， 0.33H)， 7.12(d， J ＝ 2.4Hz， 0.67H)， 7.29(d， J ＝ 8.6Hz， 0.67H)， 7.30(d， J ＝ 8.6Hz， 0.33H)， 7.55(d， J ＝ 8.2Hz， 0.33H)， 7.64(br d， J＝ 8.2Hz， 0.67H)， 7.87(d， J ＝ 8.2Hz， 0.67H)， 7.88(d， J ＝ 8.2Hz， 0.33H)， 7.98(s， 1H)。LC-MS + 保留时间 ： 3.13 分钟 ； 659m/z(MH )。在配备有 Phenomenex-Luna 10μC18 3.0×50mm 柱 的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据， 其中使用检测器波长为 220nm 的 SPD-10AV UV-Vis 检测器。使用以下洗脱条件 ： 流速为 5 毫升 / 分钟， 梯度为 100％溶剂 A/0％溶剂 B 至 0％溶剂 A/100％溶剂 B， 梯度时间为 4 分钟， 保持时间为 1 分钟， 且分析时间为 5 分钟， 其 中溶剂 A 为 10％ MeOH/90％ H2O/0.1％三氟乙酸， 且溶剂 B 为 10％ H2O/90％ MeOH/0.1％三 氟乙酸。使用针对 LC 的 Micromass Platform 以电喷雾模式来确定 MS 数据。
     13- 环己基 -10-( 甲氧基羰基 )-7H- 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂-6- 甲酸 .将四丁基氢氧化铵 (9.1 毫升， 浓度为 40％的水溶液 ) 滴加到经冷却的 (0℃， 冰 -6， 10- 二甲酸二甲酯和 THF(463浴 ) 含有 13- 环己基 -7H- 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂毫升 ) 的溶液中。 在连续冷却下将所述溶液保持 50 分钟， 然后浓缩至体积为约 50 毫升。 所 得溶液用乙酸乙酯 (250 毫升 ) 稀释， 用 HCl 水溶液 (0.5N， 3×150 毫升 ) 洗涤， 用盐水 (150 毫升 ) 洗涤， 干燥 ( 硫酸镁 )， 过滤并浓缩， 得到黄色固体。LCMS ： 保留时间 ： 1.698 分钟。在 配备有 Phenomenex-Luna 10μC184.6×50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数 据， 其中使用检测器波长为 220nm 的 SPD-10AV UV-Vis 检测器。使用以下洗脱条件 ： 流速为 4 毫升 / 分钟， 梯度为 100％溶剂 A/0％溶剂 B 至 0％溶剂 A/100％溶剂 B， 梯度时间为 4 分 钟， 保持时间为 1 分钟， 且分析时间为 5 分钟， 其中溶剂 A 为 5％ CH3CN/95％ H2O/10mM 乙酸 铵， 且溶剂 B 为 5％ H2O/95％ CH3CN/10mM 乙酸铵。使用针对 LC 的 Micromass P1atform 以 电喷雾模式来确定 MS 数据 ： m/z416(MH+)。1H NMR(300MHz， DMSO-D6)δppm ： 12.97(s， 1H)， 8.17(m， 1H)， 7.91(m， 2H)， 7.63(m， 5H)， 5.56(s， 1H)， 4.51(m， 1H)， 3.89(m， 3H)， 2.80(m， 1H)， 1.99(m， 6H)， 1.30(m， 4H)。
     13- 环己基 -6-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-7H- 吲哚 -10- 甲酸甲酯 . -6- 甲酸 (100 毫克， 0.241 毫摩尔 )、 DIEA(0.17 在室温将 TBTU(115 毫克， 0.361 毫摩尔 ) 一次性加到含有 13- 环己基 -10-( 甲氧基并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     羰基 )-7H- 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂毫升， 0.964 毫摩尔 )、 3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷二盐酸盐 (115 毫克， 0.289 毫 摩尔 ) 和 DMF(2.4 毫升 ) 的溶液中。将溶液保持 18 小时并浓缩。向所得残余物中加入二氯 甲烷 (30 毫升 )， 用水 (4×15 毫升 ) 洗涤， 用盐水 (15 毫升 ) 洗涤， 干燥 ( 硫酸镁 )， 过滤并 浓缩， 得到黄色固体， 其不经进一步纯化即用于下一步骤。LCMS ： 保留时间 ： 2.272 分钟。在 配备有 Phenomenex-Luna 10μC18 4.6×50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据， 其中使用检测器波长为 220nm 的 SPD-10AV UV-Vis 检测器。使用以下洗脱条件 ： 流速 为 4 毫升 / 分钟， 梯度为 100％溶剂 A/0％溶剂 B 至 0％溶剂 A/100％溶剂 B， 梯度时间为 4 分钟， 保持时间为 1 分钟， 且分析时间为 5 分钟， 其中溶剂 A 为 5％ CH3CN/95％ H2O/10mM 乙酸铵， 且溶剂 B 为 5％ H2O/95％ CH3CN/10mM 乙酸铵。使用针对 LC 的 Micromass Platform 以 电喷雾模式来确定 MS 数据 ： m/z 524(MH+)。 粗物质的 1H NMR(300MHz， CDCl3)δppm ： 8.19(s， 1H)， 7.92(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.77(dd， J ＝ 8.78Hz， J ＝ 1.46Hz， 1H)， 7.61(m， 1H)， 7.49(m， 3H)， 6.96(s， 1H)， 5.2(s， 1H)， 4.41(s， 1H)， 2.81(m， 4H)， 2.51(s， 1H)， 1.95(m， 15H)， 1.29(m， 11H)， 0.76(m， 2H)。
     8- 环己基 -1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-1， 1a， 2， -5- 甲酸甲酯 .12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     在室温和氮气气氛下将氢化钠 ( 浓度为 60 ％的分散体， 573 毫克， 14.3 毫摩尔 ) 加到搅拌的含有碘化三甲基氧化锍 (3.15 克， 14.3 毫摩尔 )/ 无水 DMSO(6.9 毫升 ) 的悬浮 液中。将所得混合物在室温搅拌 1 小时。然后分小份加入 13- 环己基 -6-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-7H- 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -10- 甲酸甲酯 (1.5 克， 2.86 毫摩尔 )。悬浮液用 DMSO(2 毫升 ) 稀释， 然后在搅拌下在 90℃加热 1.5 小时。使反应混合物冷却至室温， 加入水 (1 毫升 )。将混合物倒入水 (40 毫升 ) 中并用乙 酸乙酯 (3×50 毫升 ) 萃取。合并的有机层用盐水 (20 毫升 ) 洗涤， 干燥 ( 硫酸镁 )， 过滤 并浓缩， 得到黄色固体， 其不经进一步纯化即使用。LCMS ： 保留时间 ： 2.238 分钟。在配备有 Phenomenex-Luna10μC18 4.6×50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据， 其 中使用检测器波长为 220nm 的 SPD-10AV UV-Vis 检测器。使用以下洗脱条件 ： 流速为 4 毫 升 / 分钟， 梯度为 100％溶剂 A/0％溶剂 B 至 0％溶剂 A/100％溶剂 B， 梯度时间为 4 分钟， 保 持时间为 1 分钟， 且分析时间为 5 分钟， 其中溶剂 A 为 5％ CH3CN/95％ H2O/10mM 乙酸铵， 且 溶剂 B 为 5％ H2O/95％ CH3CN/10mM 乙酸铵。使用针对 LC 的 Micromass Platform 以电喷雾 模式来确定 MS 数据 ： m/z538(MH+)。
     8- 环己基 -1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-1， 1a， 2， -5- 甲酸 . 将三溴化硼 ( 浓度为 1.0M 的 CH2Cl2 溶液， 9.6 毫升 ) 滴加到经冷却的 (-20℃， 干10012b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     CN 101918410 A说明书97/109 页冰 / 丙酮 ) 含有 8- 环己基 -1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酸甲酯和二氯甲烷 (17 毫升 ) 的溶液中。在连续冷却下将混合物搅拌 10 分钟， 从冷却装置中取出并在环境温度搅 拌 1.5 小时。将溶液再次冷却 (0℃， 冰浴 ) 并用水 (2 毫升 ) 淬灭。所得混合物用乙酸乙 酯 (50 毫升 ) 稀释， 然后缓慢加入饱和碳酸氢钠水溶液 (50 毫升 ) 并搅拌 30 分钟。对所得 两相混合物进行分配， 有机层用水 (3×10 毫升 ) 洗涤， 用盐水 (10 毫升 ) 洗涤， 干燥 ( 硫酸 镁 )， 过滤并浓缩， 得到黄色固体。 LCMS ： 保留时间 ： 2.187 分钟。 在配备有 Phenomenex-Luna 10μC184.6×50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据， 其中使用检测器波 长为 220nm 的 SPD-10AV UV-Vis 检测器。使用以下洗脱条件 ： 流速为 4 毫升 / 分钟， 梯度 为 100％溶剂 A/0％溶剂 B 至 0％溶剂 A/100％溶剂 B， 梯度时间为 4 分钟， 保持时间为 1 分 且溶剂 B 为 5％ 钟， 且分析时间为 5 分钟， 其中溶剂 A 为 5％ CH3CN/95％ H2O/10mM 乙酸铵， H2O/95％ CH3CN/10mM 乙酸铵。 使用针对 LC 的 Micromass Platform 以电喷雾模式来确定 MS + 数据 ： m/z524(MH )。
     (1aR， 12bS)-8- 环 己 基 -N-( 异 丙 基 磺 酰 基 )-1a-((3- 甲 基 -3， 8- 二 氮 杂 二 环[3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺和 (1aS， 12bR)-8- 环己基 -N-( 异丙基磺酰基 )-1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二 环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 .
     在室温将 EDCI(275 毫克， 1.43 毫摩尔 ) 一次性加到含有 8- 环己基 -1a-((3- 甲 基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， -5- 甲酸 (500 毫克， 0.955 毫摩尔 )、 DMAP(58 毫克， 0.477 毫摩尔 )、1-a][2] 苯并氮杂异丙基磺酰胺 (176 毫克， 1.43 毫摩尔 ) 和二氯甲烷 (9.5 毫升 ) 的溶液中。将溶液在室 温保持 24 小时， 用额外的二氯甲烷 (50 毫升 ) 稀释， 用饱和碳酸氢钠水溶液 (2×20 毫 升 ) 洗涤， 用水 (20 毫升 ) 洗涤， 干燥 ( 硫酸镁 )， 过滤并浓缩。所得橙色残余物通过制备 性反相 HPLC 来纯化， 得到黄色固体， 其为 TFA 盐。LCMS ： 保留时间 ： 2.380 分钟。在配备有 Phenomenex-Luna 10μC18 4.6×50mm 柱的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据， 其 中使用检测器波长为 220nm 的 SPD-10AV UV-Vis 检测器。 使用以下洗脱条件 ： 流速为 4 毫升 / 分钟， 梯度为 100％溶剂 A/0％溶剂 B 至 0％溶剂 A/100％溶剂 B， 梯度时间为 4 分钟， 保持 时间为 1 分钟， 且分析时间为 5 分钟， 其中溶剂 A 为 5％ CH3CN/95％ H2O/10mM 乙酸铵， 且溶剂 B 为 5％ H2O/95％ CH3CN/10mM 乙酸铵。使用针对 LC 的 Micromass P1atform 以电喷雾模式 来确定 MS 数据 ： m/z629(MH+)。使用手性 HPLC 在 ChiralPak AS-H， 5 微米， 4.6×250mm 柱上( 流动相为 12％ MeOH/88％ CO2) 来分离对映异构体。保留时间 ： 12.60 分钟和 19.05 分钟。 1 H NMR(300MHz， MeOD)δppm ： 8.01(m， 2H)， 7.65(m， 2H)， 7.47(m， 3H)， 5.09(m， 1H)， 4.70(s， 1H)， 4.26(m， 1H)， 3.97(m， 1H).3.70(m， 1H)， 3.56(m， 0.5H)， 3.44(t， 2H)， 3.30(m 0.5H)， 3.20-2.55( 重叠的系列多重峰， 6H)， 2.53-1.7( 重叠的系列多重峰， 11H)， 1.6-0( 重叠的系 列多重峰， 12H)。
     (1aR， 12bS)-8- 环己基 -N-( 二甲基氨磺酰基 )-1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环[3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺和 (1aS， 12bR)-8- 环己基 -N-( 二甲基氨磺酰基 )-1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二 环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 . 在与就 (1aR， 12bS)-8- 环己基 -N-( 异丙基磺酰基 )-1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂 二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮
     杂 杂-5- 甲酰胺和 (1aS， 12bR)-8- 环己基 -N-( 异丙基磺酰基 )-1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂 -5- 甲酰胺所述相似的条件下由 8- 环己基 -1a-((3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] -5- 甲酸来二环 [3.2.1] 辛 -8- 基 ) 羰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮 辛 -8- 基 ) 羰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂制备这些化合物。通过制备性反相 HPLC 对所得黄色残余物进行纯化， 得到黄色固体， 其为 TFA 盐。LCMS ： 保留时间 ： 2.746 分钟。在配备有 Phenomenex-Luna 10μC18 4.6×50mm 柱 的 Shimadzu LC-10AS 液相色谱上记录 LC 数据， 其中使用检测器波长为 220nm 的 SPD-10AV UV-Vis 检测器。使用以下洗脱条件 ： 流速为 4 毫升 / 分钟， 梯度为 100％溶剂 A/0％溶剂 B 至 0％溶剂 A/100％溶剂 B， 梯度时间为 4 分钟， 保持时间为 1 分钟， 且分析时间为 5 分钟， 其中溶剂 A 为 5％ CH3CN/95％ H2O/10mM 乙酸铵， 且溶剂 B 为 5％ H2O/95％ CH3CN/10mM 乙酸 铵。使用针对 LC 的 Micromass Platform 以电喷雾模式来确定 MS 数据 ： m/z 630(MH+)。使 用手性 HPLC 在 ChiralPak AS-H， 5 微米， 4.6×250mm 柱上 ( 流动相为 12％ MeOH/88％ CO2) 来分离对映异构体。 保留时间 ： 13.16 分钟和 20.63 分钟。 下述所有化合物和实施例通过以 下 LC 方法来分析 ： 柱： PHENOMENNEX-LUNA 3.0×50mm S10 ； 流动相 ： (A)10 ∶ 90 甲醇 - 水 ； (B)90 ∶ 10 甲醇 - 水 ； 缓冲剂 ： 0.1％ TFA ； 梯度范围 ： 0-100％ B ； 梯度时间 ： 2 分钟 ； 流速 ： 4 + 毫升 / 分钟 ； 分析时间 ： 3 分钟 ； 检测 ： 检测器 1 ： UV(220nm) ； 检测器 2 ： MS(ESI )。
     (+/-)-8- 环己基 -N-(N- 环丙基 -N- 甲基氨磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲 氧基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a]
     [2] 苯并氮杂
     -N- 甲基 -5- 甲酰胺 .将 纯 净 的 CDI(49 毫 克， 0.302 毫 摩 尔 ) 加 到 搅 拌 的 单 酸 (92 毫 克， 0.200 毫 摩 尔 ) 于无水 THF(1 毫升 ) 中的溶液中， 将混合物在 50 ℃加热 30 分钟， 然后使其冷却至室 温。然后连续加入 N- 环丙基 -N- 甲基硫酰胺 (45.1 毫克， 0.300 毫摩尔 ) 和 DBU(0.060 毫 升， 0.400 毫摩尔 )。混合物用超声波处理 1-2 小时， 然后在室温搅拌过夜。反应混合物用 MeOH(0.5 毫升 ) 淬灭， 然后用 1N HCl 酸化并用 EtOAc(2×25 毫升 ) 萃取， 用水和盐水洗涤 并干燥 (Na2SO4)。粗产物 (123 毫克 ) 通过硅胶快速色谱 (5 ％ MeOH/DCM) 来纯化， 得到酰 胺 - 酯， 其为灰白色固体 (101 毫克 )。在氮气气氛下向搅拌的酰胺 - 酯 (98 毫克， 0.166 毫 摩尔 ) 于 THF-MeOH 中的溶液中加入 1N NaOH(2 毫升， 2.000 毫摩尔 )。将混合物在室温搅 拌 2 小时， 然后用 1N HCl(3 毫升 ) 酸化， 用 EtOAc(2×25 毫升 ) 萃取， 用水和盐水洗涤并干 燥 (MgSO4)。蒸发溶剂， 得到酰胺 - 酸， 其为灰白色固体 (94 毫克 )。在氮气气氛下将纯净 的 2-(1H- 苯并三唑 -1- 基 )-1， 1， 3， 3- 四甲基 四氟硼酸盐 (53.5 毫克， 0.167 毫摩尔 ) 加到搅拌的酰胺 - 酸 (74 毫克， 0.128 毫摩尔 )、 3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷二 盐酸盐 (26.4 毫克， 0.128 毫摩尔 ) 和 TEA(0.071 毫升， 0.512 毫摩尔 ) 于 DCM(2 毫升 ) 中 的混合物中。将混合物在室温搅拌 1 小时， 用 MeOH(0.5 毫升 ) 淬灭， 然后蒸干并通过反相 HPLC 来纯化， 得到二酰胺， 以单 TFA 盐 (61.3 毫克 ) 的形式分离， 其为米色固体。LC/MS ： 保 + 1 留时间 ： 1.857 分钟 ； m/e 686(MH )。通过以下 H NMR 观察到产物以相互转化的旋转异构体 1 的形式存在 ： HNMR(500MHz， 氯仿 -D)δppm0.72-0.84(m， J ＝ 1.83Hz， 2H)， 0.85-0.96(m， J ＝ 2.44Hz， 2H)， 1.19-1.31(m， 1H)， 1.33-1.48(m， 2H)， 1.50-1.62(m， 1H)， 1.69-1.89(m， 8H)， 1.92-2.23(m， 10H)， 2.56-2.69(m， 2H)， 2.77-2.90(m， 1H)， 2.90-3.02(m， 1H)， 3.04-3.14(m， 4H)， 3.11-3.54(m， 1H)， 3.60-3.71(m， J ＝ 15.26Hz， 1H)， 3.82-3.96(m， 3H)， 5.06-5.22(m， 1H)， 6.92-7.01(m， J ＝ 8.55， 2.44Hz， 1H)， 7.07-7.14(m， J ＝ 2.14Hz， 1H)， 7.27-7.33(m， J ＝ 8.55Hz， 1H)， 7.40-7.49(m， 1H)， 7.86-7.94(m， J ＝ 8.24Hz， 1H)， 7.98-8.06(m， 1H)。
     将纯净的硫代乙酸钾 (1.371 克， 12.00 毫摩尔 ) 加到搅拌的 2- 溴 -1， 1- 二氟 乙烷 (1.45 克， 10.00 毫摩尔 ) 于 DMF(6 毫升 ) 中的溶液中， 将混合物搅拌过夜。产物 用乙醚 (2×25 毫升 ) 萃取， 用水和盐水洗涤并干燥 (Na2SO4)。蒸发乙醚， 得到中间体
     HCF2CH2SCOCH3(1.18 克， 84.3％ )， 其为浅棕色油状物， 将所述油状物溶解在 DCM(10 毫升 ) 中， 与水 (10 毫升 ) 混合。将氯气鼓泡到搅拌的冷的 (0 ℃ )HCF2CH2SCOCH3(1.18 克 ) 的两 相溶液中直到恒定的绿色得以维持， 且保持 1-2 小时。分离 DCM 层， 用 10％ NaHSO3、 水和盐 水洗涤并干燥 (MgSO4)。蒸发 DCM， 得到中间体 HCF2CH2SO2Cl(1.13 克 )， 其为浅黄色油状物， 所述油状物在 0℃用无水 NH3 溶液 ( 浓度为 0.5M 的二噁烷溶液， 40 毫升 ) 处理 1 小时。使 所沉淀的 NH4Cl 过滤通过硅胶塞， 然后蒸干滤液， 得到 2， 2- 二氟乙磺酰胺， 其为浅黄色油状 1 物 (736 毫克 )。 H NMR(400MHz， 氯仿 -D)δppm ～ 2.04( 宽单峰， 2H)， 3.78(m， 2H)， 5.23(m， 1H)。
     (+/-)-8- 环 己 基 -N-(2， 2- 二 氟 乙 基 磺 酰 基 )-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 .将纯净的 CDI(24.60 毫克， 0.152 毫摩尔 ) 加到搅拌的酸 - 酰胺 (56 毫克， 0.101 毫摩尔 ) 于无水 THF(1 毫升 ) 中的溶液中， 将混合物在 50℃加热 30 分钟并使其冷却至室 温。然后连续加入 2， 2- 二氟乙磺酰胺 (29.4 毫克， 0.202 毫摩尔 ) 和 DBU(0.046 毫升， 0.303 毫摩尔 ) 且混合物用超声波处理 2-3 小时。反应混合物用甲醇 (1 毫升 ) 淬灭并 用几滴 TFA 酸化， 通过反相制备性 HPLC 来纯化， 得到产物并以单 TFA 盐的形式分离， 其为 + 1 米色固体。LC/MS ： 保留时间 ： 2.861 分钟 ； m/e 681(MH )。通过以下 H NMR 观察到产物 1 以相互转化的旋转异构体的形式存在 ： H NMR(500MHz， 氯仿 -D)δppm 1.12-1.31(m， J＝ 4.27Hz， 3H)， 1.32-1.55(m， 4H)， 1.63-1.87(m， 3H)， 1.87-2.11(m， 5H)， 2.14-2.34(m， 1H)， 2.34-2.90(m， 8H)， 2.91-3.06(m， 2H)， 3.35-3.54(m， 1H)， 3.56-3.70(m， J ＝ 14.95Hz， 1H)， 3.83-3.95(m， 3H)， 3.93-4.14(m， 1H)， 4.14-4.34(m， 1H)， 4.36-4.64(m， 1H)， 5.11-5.30(m， 1H)， 6.11-6.41(m， 1H)， 6.94-7.02(m， J ＝ 8.39， 2.59Hz， 1H)， 7.08-7.15(m， J ＝ 2.44Hz， 1H)， 7.27-7.33(m， 1H)， 7.56-7.72(m， 1H)， 7.89-7.97(m， J ＝ 8.55Hz， 1H)， 7.99-8.08(m， 1H)。
     将甲磺酰氯 (1.714 毫升， 22.00 毫摩尔 ) 于 DCM(5 毫升 ) 中的溶液滴加到搅拌的 冷的 (0 ℃ )3- 氟丙烷 -1- 醇 (1.562 克， 20 毫摩尔 ) 和 TEA(3.35 毫升， 24.00 毫摩尔 ) 于 DCM(20 毫升 ) 中的溶液中。将混合物在 0-5℃搅拌～ 2 小时并用水、 饱和 NaHCO3、 水和盐 水洗涤， 干燥 (MgSO4)。蒸发 DCM， 得到甲磺酸 (3- 氟丙基 ) 酯， 其为无色油状物 (2.92 克，
     93.6％ )。向搅拌的甲磺酸 (3- 氟丙基 ) 酯 (2.9 克 ) 于 DMSO(20 毫升 ) 中的溶液中加入纯 净的硫代乙酸钾 (2.74 克， 24.00 毫摩尔 )， 将混合物搅拌过夜。产物用乙醚 (2×25 毫升 ) 萃取， 用水和盐水洗涤并干燥 (MgSO4)。蒸发乙醚， 得到硫代乙酸 S-(3- 氟丙基 ) 酯， 其为浅 棕色油状物。将氯气鼓泡到搅拌的冷的 (-10℃ ) 硫代乙酸 S-(3- 氟丙基 ) 酯 (1.0 克， 7.34 毫摩尔 ) 于 DCM(5 毫升 ) 和水 (5.00 毫升 ) 中的两相溶液中直到在水相中出现绿色， 且保 持 1-2 小时。分离各层且水层用 DCM(2×10 毫升 ) 再次萃取。合并的 DCM 萃取物用 10％ NaHSO3 溶液、 水和盐水洗涤并干燥 (MgSO4)。 蒸发 DCM， 得到中间体 3- 氟丙烷 -1- 磺酰氯， 其 为浅棕色油状物 (405 毫克， 34％ )， 所述油状物用无水 NH3 溶液 (10 毫升， 浓度为 0.5M 的二 噁烷溶液 ) 处理并搅拌 30-45 分钟。滤出所沉淀的 NH4Cl， 蒸干滤液， 得到 3- 氟丙烷 -1- 磺 酰胺， 其为浅棕色油状物 (265 毫克 )。
     (+/-)-8- 环 己 基 -N-(3- 氟 丙 基 磺 酰 基 )-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2]
     苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .将纯净的 CDI(24.60 毫克， 0.152 毫摩尔 ) 加到搅拌的酸 - 酰胺 (56 毫克， 0.101 毫摩尔 ) 于无水 THF(1 毫升 ) 中的溶液中， 将混合物在 50℃加热 30 分钟， 使其冷却至室温。 然后连续加入 3- 氟丙烷 -1- 磺酰胺 (28.6 毫克， 0.202 毫摩尔 ) 和 DBU(0.046 毫升， 0.303 毫摩尔 )， 混合物用超声波处理 2-3 小时。反应混合物用甲醇 (1 毫升 ) 淬灭并用几滴 TFA 酸化， 通过反相制备性 HPLC 来纯化， 得到产物， 以单 TFA 盐的形式分离， 其为米色固体。LC/ + 1 MS ： 保留时间 ： 2.835 分钟 ； m/e 677(MH )。通过以下 H NMR 观察到产物以相互转化的旋转 1 异构体的形式存在 ： H NMR(400MHz， 氯仿 -D)δppm 0.13-0.37(m， 1H)， 1.08-1.31(m， 2H)， 1.31-1.61(m， 4H)， 1.70-1.86(m， 2H)， 1.86-2.11(m， 6H)， 2.13-2.36(m， 3H)， 2.38-2.68(m， 1H)， 2.69-3.01(m， 3H)， 3.03-3.34(m， J ＝ 68.99Hz， 1H)， 3.35-3.84(m， 7H)， 3.84-3.95(m， 3H)， 3.95-4.12(m， 1H)， 4.44-4.57(m， J ＝ 5.20， 5.20， 5.20Hz， 2H)， 4.58-4.72(m， J ＝ 5.29， 5.29Hz， 2H)， 5.03-5.30(m， 1H)， 6.91-7.02(m， 1H)， 7.08-7.15(m， J ＝ 2.27Hz， 1H)， 7.27-7.35(m， 1H)， 7.52-7.69(m， J ＝ 31.98Hz， 1H)， 7.85-7.97(m， J ＝ 7.93， 7.93Hz， 1H)， 8.04-8.13(m， 1H)。
     (-)-8- 环己基 -N-( 丙烷 -2- 磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 .
     向酸 - 酰胺 (341 毫克， 0.62 毫摩尔 ) 和 3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷二 盐酸盐 (148 毫克， 0.743 毫摩尔 ) 于二氯甲烷 (5 毫升 ) 中的混合物中加入 TEA(0.259 毫升， 1.858 毫摩尔 ) 和 HBTU(282 毫克， 0.743 毫摩尔 )。 将混合物在室温搅拌过夜。 用 EtOAc(150 毫升 ) 稀释并用 0.3M NaHCO3 水溶液 (2×10 毫升 )、 水和盐水洗涤， 干燥 (MgSO4)， 除去溶剂 并通过 Biotage 25M 柱 (0 至 25％ MeOH/DCM) 来纯化。将收集物溶解在 100 毫升 EtOAc 中， 用 HCl 水溶液 (3×20 毫升， 0.1M)、 0.3M NaHCO3 溶液和盐水洗涤， 干燥 (MgSO4)， 除去溶剂， 得到产物， 其为黄色固体 (0.280 克， 68％ )。LC-MS 保留时间 ： 3.105 ； MSm/z(M+H)659。通过 1 1 以下 H NMR 观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在 ： H NMR(400MHz， MeOD)δppm 1.37(10H， m)， 2.37(15H， m)， 3.76(8H， m)， 3.88(3H， m)， 4.36(2H， m)， 5.06(1H， m)， 6.97(1H， m)， 7.17(1H， d， J ＝ 1.76Hz)， 7.27(1H， m)， 7.55(1H， d， J ＝ 8.56Hz)， 7.85(1H， m)， 7.98(1H， 宽单峰 )。
     8- 环己基 -N-( 甲基磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-(3- 甲基 -3， -5- 甲8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 酰胺 .
     步骤 1 ： 外消旋体通过 ChiralCel OJ-H 柱 (15 ％ EtOH/85 ％ CO2) 来分离， 得到 光学纯的对映异构体。步骤 2 ： 对对映异构体进行水解， 得到相应的酸。LC-MS 保留时间 ： 3.426 ； MS m/z(M+H)523。步骤 3 ： 酰胺衍生物通过制备性 HPLC 来纯化并分离， 其为 TFA 盐。 LC-MS 保留时间 ： 2.913 ； MSm/z(M+H)631。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存 1 在。 HNMR(400MHz， 氯仿 -d)δppm 1.36(6H， m)， 1.7-3.2(16H， m)， 3.48(2H， m)， 3.43(3H， s)，3.67(2H， m)， 3.91(3H， m)， 4.59(2H， m)， 5.24(1H， m)， 6.96(1H， m)， 7.12(1H， d， J ＝ 2.52Hz)， 7.27(1H， m)， 7.62(1H， m)， 7.90(1H， m)， 8.22(1H， 宽单峰 )。
     (+/-)-8- 环己基 -N-(2， 2- 二甲基丙烷 -1- 磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲 氧基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a] -5- 甲酰胺 .[2] 苯并氮杂
     通过制备性 HPLC 来纯化起始原料并分离， 其为 TFA 盐。LC-MS 保留时间 ： 3.263 分 1 钟； MS m/z(M+H)687。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。 H NMR(500MHz， 氯 仿 -d)δppm 1.21(9H， s)， 1.41(5H， m)， 1.99(11H， m)， 2.40-4.50(14H， m)， 3.89(3H， s)， 5.17(1H， m)， 6.97(1H， m)， 7.11(1H， d， J ＝ 2.44Hz)， 7.30(1H， m)， 7.51(1H， 宽单峰 )， 7.89(1H， d， J ＝ 7.93Hz)， 8.07(1H， m)。
     (+/-)-8- 环己基 -N- 环丁烷磺酰基 -1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 .
     产物通过制备性 HPLC 来纯化并分离， 其为 TFA 盐。 LC-MS 保留时间 ： 3.138 分钟 ； MS 1 m/z(M+H)671。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。 H NMR(400MHz， 氯仿 -d) δppm 1.37(7H， m)， 2.01(10H， m)， 2.63(14H， m)， 3.46(1H， d)， 3.62(1H， d， J ＝ 15.11Hz)， 3.89(3H， s)， 4.59(2H， m)， 5.18(1H， m)， 6.97(1H， m)， 7.11(1H， d， J ＝ 2.52Hz)， 7.29(1H， m)， 7.62(1H， m)， 7.89(1H， m)， 8.05(1H， s)。
     (+/-)-8- 环己基 -N- 环戊烷磺酰基 -1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 .
     产物通过制备性 HPLC 来纯化并分离， 其为 TFA 盐。LC-MS 保留时间 ： 3.190 分钟 ； MS m/z(M+H)685。
     (+/-)-8- 环己基 -N- 环己烷磺酰基 -1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 .
     产物通过制备性 HPLC 来纯化并分离， 其为 TFA 盐。 LC-MS 保留时间 ： 3.261 分钟 ； MS 1 m/z(M+H)699。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。 H NMR(400MHz， 氯仿 -d) δppm 1.61(22H， m)， 2.86(12H， m)， 3.48(1H， m)， 3.63(1H， d， J ＝ 15.11Hz)， 3.74(1H， m)， 3.89(3H， s)， 4.56(2H， m)， 5.24(1H， m)， 6.98(1H， m)， 7.11(1H， d， J ＝ 2.27Hz)， 7.30(1H， m)， 7.60(1H， m)， 7.90(1H， m)， 8.08(1H， 宽单峰 )。
     (+/-)-8- 环 己 基 -N-(2- 甲 基 丙 烷 -1- 磺 酰 基 )-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .产物通过制备性 HPLC 来纯化并分离， 其为 TFA 盐。LC-MS 保留时间 ： 3.210 分钟 ； 1 MS m/z(M+H)673。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。 H NMR(500MHz， 氯 仿 -d)δppm 1.14(6H， m)， 1.32(3H， m)， 1.46(4H， m)， 1.62(1H， m)， 1.80(3H， m)， 2.07(8H， m)， 2.33(2H， m)， 2.68(1H， m)， 2.95(5H， m)， 3.33(3H， m)， 3.49(2H， m)， 3.66(1H， d， J ＝ 15.26Hz)， 3.89(3H， s)， 4.21(1H， m)， 4.65(1H， m)， 5.15(0H， d， J ＝ 14.95Hz)， 7.02(1H， dd， J ＝ 8.55， 2.44Hz)， 7.18(0H， d， J ＝ 1.83Hz)， 7.32(1H， d， J ＝ 8.55Hz)， 7.58(0H， m)， 7.91(1H， m)， 7.99(0H， 宽单峰 )。
     (+/-)-8- 环 己 基 -N-(2- 甲 基 丙 烷 -2- 磺 酰 基 )-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2]
     苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .产物通过制备性 HPLC 来纯化并通过制备性 TLC 来进一步纯化。LC-MS 保留时间 ： 3.226 分钟 ； MS m/z(M+H)685。
     (+/-)-8- 环己基 -N-( 丁烷磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 .
     产物通过制备性 HPLC 来纯化并分离， 其为 TFA 盐。LC-MS 保留时间 ： 3.245 分钟 ； 1 MS m/z(M+H)673。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。 H NMR(400MHz， 氯 仿 -d)δppm 0.94(3H， t， J ＝ 7.30Hz)， 1.24(2H， m)， 1.46(6H， m)， 1.90(14H， m)， 2.72(4H， m)， 3.02(2H， m)， 3.41(1H， m)， 3.62(3H， m)， 3.88(3H， s)， 4.39(2H， m)， 5.18(1H， m)， 6.98(1H，m)， 7.11(1H， d， J ＝ 2.52Hz)， 7.30(1H， m)， 7.62(1H， m)， 7.90(1H， m)， 8.05(1H， s)。
     (+/-)-8- 环己基 -N-[(+/-)-( 三氟甲烷磺酰基 )]-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧 基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 .产物通过制备性 HPLC 来纯化并分离， 其为 TFA 盐。LC-MS 保留时间 ： 3.203min ； MS 1 m/z(M+H)685。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。 H NMR(400MHz， 氯仿 -d) δppm 1.34(5H， m)， 2.05(8H， m)， 3.02(12H， m)， 3.59(1H， d， J ＝ 15.11Hz)， 3.89(3H， s)， 4.51(2H， m)， 5.16(1H， m)， 6.98(1H， m)， 7.11(1H， d， J ＝ 2.27Hz)， 7.29(1H， d， J ＝ 8.56Hz)， 7.58(1H， m)， 7.86(1H， m)， 8.05(1H， 宽单峰 )。
     (+/-)-8- 环 己 基 -N-( 戊 烷 -3- 磺 酰 基 )-1， 1a， 2， 12b- 四 氢 -11- 甲 氧 基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2]
     苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .产物通过制备性 HPLC 来纯化并分离， 其为 TFA 盐。 LC-MS 保留时间 ： 3.250 分钟 ； MS 1 m/z(M+H)687。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。 H NMR(400MHz， 氯仿 -d) δppm 1.39(37H， m)， 2.84(2H， m)， 3.28(0H， 宽单峰 )， 3.59(0H， m)， 3.73(0H， m)， 3.89(3H， m)， 4.23(2H， m)， 5.18(0H， 宽单峰 )， 6.99(1H， m)， 7.11(1H， 宽单峰 )， 7.25(1H， m)， 7.69(0H， 宽单峰 )， 7.86(2H， 宽单峰 )。
     8- 环己基 -N-( 环丙基磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-(3- 甲基 -3， -5- 甲8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 酰胺 .
     步骤 1 ： 使用 ChiralPak AS-H， 30×250mm， 5μm 柱 (15 ％ EtOH/85 ％ CO2) 将外消 旋的起始原料分离成光学纯的对映异构体， 得到 (-)- 对映异构体 ( 第一个峰 ) 和 (+)- 对 映异构体 ( 第二个峰 )。步骤 2 ： 向一种异构体 (0.397 克， 0.706 毫摩尔 ) 于 THF(4 毫升 ) 和 MeOH(4 毫升 ) 中的溶液中加入 1N NaOH(2 毫升， 2.000 毫摩尔 )。将混合物在室温搅拌 2 小时。用 EtOAc 稀释， 用冷的 HCl(1N) 和盐水洗涤， 干燥 (MgSO4) 并真空除去溶剂， 得到 化合物酸 - 酰胺， 其为黄色固体 (0.387 克， 100 ％ )。LC-MS 保留时间 ： 3.473 分钟 ； MS m/ z(M+H)549。步骤 3 ： 对二酰胺进行纯化并分离， 其为 TFA 盐。LC-MS 保留时间 ： 2.991 分钟 ； MSm/z(M+H)657。
     8- 环己基 -N- 环丁烷磺酰基 -1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-(3- 甲基 -3， -5- 甲8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 酰胺 .
     步骤 1 ： 向化合物二酯 (0.63 克， 1.189 毫摩尔 ) 于 DCM(1 毫升 ) 中的悬浮液中加 入 TFA(1 毫升， 12.98 毫摩尔 )， 在室温搅拌 2.5 小时， 真空除去溶剂， 得到化合物单酸， 其为 深棕色固体。LC-MS 保留时间 ： 3.686 ； MS m/z(M+H)474。
     步骤 2 ： 向在小瓶中的化合物单酸 (100 毫克， 0.211 毫摩尔 )、 环丁烷磺酰胺 (57.1 毫克， 0.422 毫摩尔 )、 DMAP(103 毫克， 0.845 毫摩尔 ) 和 1-(3- 二甲基氨基丙基 )-3- 乙基 碳二亚胺盐酸盐 (60.7 毫克， 0.317 毫摩尔 ) 的混合物中加入 DCM(1 毫升 )。将混合物在室 温搅拌过夜并通过 Biotage 25S 柱 (0 至 25％ MeOH/DCM) 来纯化， 得到化合物酰胺 - 酯， 其 为黄色固体 (0.086 克， 68％ )。LC-MS 保留时间 ： 3.528 ； MS m/z(M+H)591。步骤 3 ： 向该化合物 (86 毫克， 0.146 毫摩尔 ) 于 THF(2 毫升 ) 和 MeOH(1 毫升 ) 中的溶液中加入 1N NaOH(1 毫升， 1.0 毫摩尔 )。将混合物在室温搅拌 2 小时。用 EtOAc 稀释， 用冷的 HCl(1N) 和盐水 洗涤， 干燥 (MgSO4) 并真空除去溶剂， 得到单酸， 其为棕色固体。LC-MS 保留时间 ： 3.463 ； MS m/z(M+H)563。步骤 4 ： 二酰胺通过制备性 HPLC 来纯化并分离， 其为 TFA 盐。LC-MS 保留时 间： 3.128 ； MS m/z(M+H)671。
     在 0℃向异氰酸氯磺酰基酯 (1.230 毫升， 14.13 毫摩尔 ) 于 DCM(10 毫升 ) 中的溶 液中滴加叔丁醇 (1.351 毫升， 14.13 毫摩尔 )。将混合物在室温搅拌 1 小时并在 0℃加入 N- 甲基丙烷 -2- 胺 (1.57 毫升， 14.13 毫摩尔 ) 和 TEA(2.167 毫升， 15.54 毫摩尔 ) 于 DCM(3 毫升 ) 中的溶液。将混合物在室温搅拌 2 小时， 用 EtOAc 稀释， 用冷的 1N HCl 和盐水洗涤， 干燥 (MgSO4)， 除去溶剂并通过 Biotage40M 柱 (5％至 100％ [EtOAc-MeOH(90-10)]/ 己烷 ) 来纯化， 得到无色胶状物 (2.3 克， 64.5％ )。1H NMR(400MHz， 氯仿 -d)δppm 1.19(d， J＝ 6.55Hz， 6H)1.49(s， 9H)2.90(s， 3H)4.05-4.26(m， 1H)7.02( 宽单峰， 1H)。 向 N- 异丙基 -N- 甲 基氨磺酰基氨基甲酸叔丁酯 (2.3 克， 9.12 毫摩尔 ) 中加入冷的 HCl( 二噁烷溶液， 6 毫升， 24.00 毫摩尔 ) 并在室温搅拌 2 小时， 除去溶剂， 得到 N- 异丙基 -N- 甲基硫酰胺， 其为浅黄褐 1 色固体 (1.38 克， 99％ )。 H NMR(400MHz， 氯仿 -d)δppm 1.16(d， J ＝ 6.80Hz， 5H)2.72(s， 3H)4.16(dt， J ＝ 13.53， 6.70Hz， 1H)4.43( 宽单峰， 1H)。
     (+/-)-8- 环己基 -N-(N- 异丙基 -N- 甲基氨磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲 氧基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a]
     [2] 苯并氮杂
     -5- 甲酰胺 .步骤 1 ： 向化合物酸 - 酯 (0.25 克， 0.544 毫摩尔 ) 于 THF(4 毫升 ) 中的溶液中加入 CDI(0.132 克， 0.816 毫摩尔 ) 并在 50℃加热 0.5 小时。 冷却下来并加入 N- 异丙基 -N- 甲基 硫酰胺 (0.083 克， 0.544 毫摩尔 ) 和 DBU(0.123 毫升， 0.816 毫摩尔 )。将混合物在室温搅 拌过夜。加入另一份 N- 异丙基 -N- 甲基硫酰胺 (0.050 克， 0.326 毫摩尔 ) 和 DBU(0.123 毫 升， 0.816 毫摩尔 )。将混合物再搅拌一天并加入几滴 MeOH， 用 EtOAc 稀释， 用冷的 HCl(1N) 通过 Biotage 25M 柱 [5 ％至 100 ％ {EtOAc-MeOH(90-10)}/ 己 和盐水洗涤， 干燥 (MgSO4)， 烷 ] 来纯化， 得到单酰胺， 其为无色固体 (0.261 克， 81％ )。LC-MS 保留时间 ： 3.635 分钟 ； 1 MSm/z(M+H)594。 H NMR 表明存在旋转异构体。 步骤 2 ： 向化合物单酰胺 (0.258 克， 0.435 毫摩尔 ) 于 THF(4 毫升 ) 和 MeOH(2 毫升 ) 中的溶液中加入 NaOH(2 毫升， 2.000 毫摩尔 )。将 混合物在室温搅拌 2 小时， 用 EtOAc 稀释， 用冷的 HCl(1N) 和盐水洗涤， 干燥 (MgSO4) 并除去 溶剂， 得到酰胺 - 酸 (0.22 克， 87％ )。LC-MS 保留时间 ： 3.608min ； MS m/z(M+H)580。观察 1 到酰胺 - 酸以相互转化的旋转异构体的形式存在。 H NMR(400MHz， 氯仿 -d)δppm 0.41(t， J ＝ 6.30Hz， 1H)1.08-2.15(m， 17H)2.63-2.80(m， 1H)2.84-2.96(m， 1H)3.04(s， 3H)3.84(s， 3H)4.03(d， J ＝ 14.86Hz， 1H)4.22-4.41(m， 1H)5.35(d， J ＝ 15.11Hz， 1H)6.86(dd， J ＝ 8.44， 2.39Hz， 1H)6.98(d， J ＝ 2.27Hz， 1H)7.20(d， J ＝ 8.56Hz， 1H)7.67(d， J ＝ 8.31Hz， 1H)7.81-7.89(m， 1H)8.10(s， 1H)。步骤 3 ： 对二酰胺进行纯化并分离， 其为 TFA 盐。LC-MS 保留时间 ： 3.146 分钟 ； MS m/z(M+H)688。观察到二酰胺以相互转化的旋转异构体的形式 1 存 在。 H NMR(400MHz，氯 仿 -d)δppm1.14-1.18(m， 6H)1.19-2.12(m， 16H)2.19-3.77(m， 9H)2.95(s， 3H)3.89(s， 3H)3.95-5.02(m， 4H)5.03-5.24(m， 1H)6.97(dd， J ＝ 8.81， 2.77Hz， 1H)7.11(d， J ＝ 2.52Hz， 1H)7.28(d， J ＝ 8.56Hz， 1H)7.40-7.64(m， 1H)7.88(d， J ＝ 8.31Hz， 1H)8.07( 宽单峰， 1H)。
     (+)-8- 环己基 -N-( 丙烷 -2- 磺酰基 )-1， 1a， 2， 12b- 四氢 -11- 甲氧基 -1a-(3- 甲基 -3， 8- 二氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 -8- 羰基 ) 环丙并 [d] 吲哚并 [2， 1-a][2] 苯并氮杂 -5- 甲酰胺 .
     步骤 1 ： 向化合物酰胺 - 酯 (0.276 克， 0.489 毫摩尔 ) 于 THF(4 毫升 ) 和 MeOH(2 毫升 ) 中的溶液中加入 1N NaOH(1.955 毫升， 1.955 毫摩尔 )。 将混合物在室温搅拌 4 小时。 用 EtOAc 稀释， 用冷的 HCl(1N) 和盐水洗涤， 干燥 (MgSO4) 并真空除去溶剂， 得到酰胺 - 酸， 其为黄色固体 (0.269 克 .100％ )。LC-MS 保留时间 ： 3.480 分钟 ； MS m/z(M+H)551。观察到 1 此化合物以相互转化的旋转异构体的形式存在。 H NMR(400MHz， MeOD)δppm 1.33(10H， m)， 1.71(3H， m)， 2.01(6H， m)， 2.80(2H， m)， 3.40(1H， d， J ＝ 15.11Hz)， 3.86(3H， s)， 3.97(1H， m)， 5.42(1H， d， J ＝ 14.60Hz)， 6.96(1H， m)， 7.18(1H， s)， 7.26(1H， m)， 7.52(1H， d， J ＝ 8.31Hz)， 7.85(1H， m)， 8.27(1H， s)。步骤 2 ： 对二酰胺进行纯化并分离， 其为 TFA 盐。LC-MS 保留时间 ： 3.146 分钟 ； MS m/z(M+H)688。 观察到二酰胺以相互转化的旋转异构体的形式存 1 在。 H NMR(400MHz， 氯仿 -d)δppm1.31(13H， m)， 2.14(17H， m)， 2.79(1H， m)， 2.95(1H， s)， 3.58(1H， d， J ＝ 15.11Hz)， 3.89(3H， m)， 4.04(1H， s)， 4.41(1H， s)， 5.17(1H， m)， 6.95(1H， m)， 7.11(1H， s)， 7.29(1H， m)， 7.72(1H， s)， 7.91(2H， m)。113