N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺衍生物， 它们的制 备和它们的治疗应用 技术领域 本发明涉及咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺衍生物、 它们的制备和它们在治疗或 预防牵涉 Nurr-1 核受体 ( 也称作 NR4A2、 NOT、 TINUR、 RNR-1 和 HZF3) 的疾病中的治疗性应 用。
发明内容
本发明的主题是碱形式或与酸形成的加成盐形式的式 (I) 化合物 ：其中 ：
X 表示苯基， 所述苯基被以下基团取代 ： 氰基、 (C1-C6) 烷氧基羰基、 被一个或多个 卤素取代的 (C1-C6) 烷氧基或被一个或多个卤素取代的 (C1-C6) 烷基， 所述苯基任选被卤素 再次取代 ；
R1 表示氢原子、 卤素、 (C1-C6) 烷氧基、 (C1-C6) 烷基或 -NRaRb 基团， 所述烷基和烷 氧基任选被一个或多个以下基团取代 ： 卤素、 羟基、 氨基或 (C1-C6) 烷氧基 ；
R2 表示如下基团之一 ：
·氢原子，
·(C1-C6) 烷基， 所述 (C1-C6) 烷基任选被一个或多个彼此独立选自如下的基团取 代： 羟基、 卤素、 氨基、 -NRaRb 基团、 (C1-C6) 烷氧基或苯基，
· (C1-C6) 烷氧基， 所述 (C1-C6) 烷氧基任选被一个或多个彼此独立选自如下的基团 取代 ： 羟基、 卤素、 氨基或 -NRaRb 基团，
·(C2-C6) 烯基，
·(C2-C6) 炔基，
·-CO-R5 基团，
·-CO-NR6R7 基团，
·-CO-O-R8 基团，
·-NR9-CO-R10 基团，
·-NR11R12 基团， ·-N ＝ CH-NRaRb 基团， ·卤素原子，·氰基、 硝基、 羟基亚氨基烷基或烷氧基亚氨基烷基，
·(C1-C6) 烷基硫基，
·(C1-C6) 烷基亚磺酰基，
·(C1-C6) 烷基磺酰基，
·((C1-C6) 烷基 )3 甲硅烷基乙炔基，
·-SO2-NR9R10 基团，
·苯基， 所述苯基任选被一个或多个彼此独立选自如下的基团取代 ： 卤素、 (C1-C6) 烷氧基、 氰基、 -NRaRb、 -CO-R5、 -CO-NR6R7、 -CO-O-R8 或任选被一个或多个羟基或 -NRaRb 基 团取代的 (C1-C6) 烷基 ；
R3 表示氢原子、 (C1-C6) 烷基、 (C1-C6) 烷氧基或卤素原子 ；
R4 表示氢原子、 (C1-C4) 烷基、 (C1-C4) 烷氧基或氟原子 ；
R5 表示氢原子、 苯基或 (C1-C6) 烷基 ；
R6 和 R7 相同或不同， 且表示氢原子或 (C1-C6) 烷基， 或者 R6 和 R7 与它们所连接的 氮原子形成任选含有选自 N、 O 或 S 的额外杂原子的 4- 至 7- 元环 ；
R8 表示 (C1-C6) 烷基 ； R9 和 R10 相同或不同， 且表示氢原子或 (C1-C6) 烷基 ；
R11 和 R12 相同或不同， 且表示氢原子或 (C1-C6) 烷基， 或者 R11 和 R12 与它们所连接 的氮原子形成任选含有选自 N、 O 或 S 的额外杂原子的 4- 至 7- 元环 ；
Ra 和 Rb 彼此独立地表示氢原子或 (C1-C6) 烷基， 或者 Ra 和 Rb 与它们所连接的氮 原子形成 4- 至 7- 元环 ；
所述化合物不包括其中 R1 表示甲基或 R2 表示氯原子或 R3 表示甲基的化合物，
所述化合物不包括如下化合物 ：
N-(3- 氯 -4- 氰基苯基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺，
3-({[ 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ] 羰基 } 氨基 ) 苯甲酸甲酯，
2-({[ 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ] 羰基 } 氨基 ) 苯甲酸甲酯，
N-[2-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺，
N-[3-( 三氟甲氧基 ) 苯基 -6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺，
N-[3-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ]-6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺， 和
N-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺。
WO 2008/003856 披露了对上述受体具有活性的化合物。将化合物 N-[3-( 三氟甲 氧基 ) 苯基 ]-6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺 ( 实施例 76)、 N-[3-( 二氟 甲氧基 ) 苯基 ]-6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺 ( 实施例 82) 和 N-[3-( 三 氟甲基 ) 苯基 ]-6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺 ( 实施例 83) 专门从本 发明的通式 (I) 中排除出去。
此 外， 对 于 化 合 物 N-(3- 氯 -4- 氰 基 苯 基 ) 咪 唑 并 [1， 2-a] 吡 啶 -2- 甲 酰 胺 ( 数据库登记号 ： 924038-88-0)、 3-({[ 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ] 羰基 } 氨基 ) 苯甲 酸甲酯 (No.924031-00-5)、 2-({[ 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ] 羰基 } 氨基 ) 苯甲酸甲 酯 (No.924102-15-8) 和 N-[2-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ]- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
(No.924040-86-8)， 没有说明它们的药理活性或治疗活性， 因此也将这些化合物从本发明 的所述式 (I) 中专门排除出去。
式 (I) 化合物可含有一个或多个非对称碳原子。因此， 它们可以以对映异构体或 非对映异构体的形式存在。这些对映异构体或非对映异构体和它们的混合物 ( 包括外消旋 混合物 ) 在本发明范围内。
式 (I) 化合物可以以碱形式或与酸形成的加成盐形式存在。所述加成盐在本发明 范围内。
这些盐可用可药用酸制备， 但是与其它酸 ( 例如在式 (I) 化合物纯化或分离中使 用的酸 ) 形成的盐也在本发明范围内。
所述式 (I) 化合物也可以水合物或者溶剂化物的形式存在， 即与一个或者多个水 分子或者溶剂缔合或结合的形式。所述水合物或溶剂化物也在本发明范围内。
在本发明的上下文中 ：
- 卤素原子理解为是指氟、 氯、 溴或碘 ；
- 烷基理解为是指饱和的、 直链或支链或环状脂肪族基团， 所述脂肪族基团任选被 饱和的、 直链或支链或环状烷基取代。 作为实例可提到甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基、 异丁 基、 叔丁基、 环丙基、 环丁基、 环戊基、 环己基或甲基环丙基等 ； - 烯基理解为直链的或者支链的， 单 - 或者多不饱和的脂肪族基团， 其包括， 例如， 一个或者两个不饱和烯键 (ethylenic unsaturations) ；
- 烷氧基理解为是指 -O- 烷基， 其中烷基如上文所定义 ；
- 炔基理解为直链的或者支链的， 单 - 或者多不饱和的脂肪族基团， 其包括， 例如， 一个或者两个不饱和炔键 (ethylynic unsaturations)。
根据本发明另一个方面， 其主题是式 (I) 化合物， 其中 X 和 R1 至 R4 如上所定义 ( 应 当理解的是 R1、 R 2、 R3 和 R4 中的至少一个不是氢原子 )， 所述化合物为碱形式或与酸形成的 加成盐形式
所述化合物不包括其中 R1 表示甲基或 R2 表示氯原子或 R3 表示甲基的化合物，
所述化合物不包括如下化合物 ：
N-[3-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ]-6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺，
N-[3-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ]-6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺， 和
N-[3-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺。
根据本发明另一个方面， 其主题是式 (I) 化合物， 其中 X 和 R1 至 R4 如上所定义 ( 应 当理解为 R1、 R 2、 R3 和 R4 中的至少一个不是氢原子 )， 所述化合物为碱形式或与酸形成的加 成盐形式，
所述化合物不包括其中 R1 表示甲基或 R2 表示氯原子或 R3 表示甲基的化合物，
所述化合物不包括其中 R2 表示 N- 二甲基和 X 表示如下基团的化合物 ：
·被甲氧基取代的苯基， 所述甲氧基本身被两个或三个氟原子取代， 或者
·被甲基取代的苯基， 所述甲基本身被三个氟原子取代。
根据本发明另一个方面， 其主题是第一组式 (I) 化合物， 其中 ：
X 表示被以下基团取代的苯基 ： 氰基、 (C1-C6) 烷氧基羰基或被数个卤素取代的
(C1-C6) 烷氧基， 所述苯基任选被卤素再次取代 ；
R2 表示 -NR11R12 基团或被 (C1-C6) 烷基取代苯基， 所述 (C1-C6) 烷基本身被羟基取 代；
R1、 R3 和 R4 表示氢原子 ；
R11 和 R12 相同或不同， 且表示 (C1-C6) 烷基 ；
所述化合物为碱形式或与酸形成的加成盐形式，
所述化合物不包括其中 R1 表示甲基或 R2 表示氯原子或 R3 表示甲基的化合物，
所述化合物不包括如下化合物 ：
N-[3-( 三氟甲氧基 ) 苯基 ]-6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺， 和
N-[3-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ]-6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺。
根据本发明另一个方面， 其主题是另一组式 (I) 化合物， 其中 ：
X 表示被氰基、 -CO2Me 或 -OCHF2 取代的苯基， 并且所述苯基任选被氟原子再次取 代；
R1、 R3 和 R4 表示氢原子 ；
R2 表示 N- 二甲基或被羟甲基取代的苯基 ；
所述化合物为碱形式或与酸形成的加成盐形式，
所述化合物不包括 N-[3-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ]-6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺。
在本发明主题的式 (I) 化合物中特别提到如下化合物和它们与酸形成的加成盐 ：
· N-(3- 氰基 -5- 氟苯基 )-6-[3-( 羟甲基 ) 苯基 J 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰 胺，
·N-(3- 氰基苯基 )-6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺，
· 3-({[6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ] 羰基 } 氨基 ) 苯甲酸甲酯，
· N-[3-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ]-6-[3-( 羟甲基 ) 苯基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲 酰胺
·N-(3- 氰基苯基 )-6-[3-( 羟甲基 ) 苯基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺，
·N-(4- 氰基 -2- 氟苯基 )-6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺，
·N-(2- 氰基 -3- 氟苯基 )-6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺，
· N-(2- 氰基 -3- 氟苯基 )-6-[3-( 羟甲基 ) 苯基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰 胺， 和
·N-(3- 氰基 -5- 氟苯基 )-6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺。
根据本发明， 可根据方案 1 描述的方法制备通式 (I) 化合物。
方案 1
通 过 类 似 于 J-J.Bourguignon 等 人 在 Aust.J.Chem.， 50， 719(1997) 和 J.G.Lombardino in J.Org.Chem.， 30， 2403(1965) 中描述的方法， 途径 A 包括根据本领域 技术人员已知的方法制备式 (II) 的 2- 氨基吡啶， 以及包括通过与 2- 氧代 -N- 芳基丙酰胺 衍生物 (III) 缩合形成咪唑并 [1， 2-a] 吡啶环， 其中 Hal 表示氯、 溴或碘原子， 以及 X 如上 所定义。可根据由 R.Kluger et al.in J.Am.Chem.Soc.， 106， 4017(1984) 描述的方法获得 2- 氧代 -N- 芳基丙酰胺 (III) 的卤化衍生物。
第二种合成途径 B 和 C 包括 ： 根据本领域技术人员已知的方法， 将式 (IV) 的咪唑 并吡啶 -2- 羧酸或其衍生物之一 ( 其中 Y 表示羟基、 卤素原子或 (C1-C6) 烷氧基 ) 偶联至芳 基胺 X-NH2(VI)( 其中 X 如上所定义 )。 因此， 可将所述酸预先转化成其反应性衍生物例如酰 卤、 酸酐、 混合酸酐或活性酯之一， 以及然后在碱例如二异丙基乙基胺、 三乙胺或吡啶存在 下， 在惰性溶剂例如 THF( 四氢呋喃 )、 DMF( 二甲基甲酰胺 ) 或二氯甲烷中与胺 (VI) 反应。 所述偶联反应也可在偶联剂例如 CDI( 羰基二咪唑 )、 EDCI、 HATU(2-(7- 氮杂 -1H- 苯并三
唑 -1- 基 )-1， 1， 3， 3- 四甲基六氟磷酸盐 ) 或 HBTU 存在下在相同条件下进行， 不分离反应性中间体。可选择地， 在催化剂例如三甲基铝 ( 根据 Weinreb， S.et al.(Tet.Lett.， 18， 4171(1977)) 描述的方法 ) 或叔丁酰基锆 (zirconiumtert-butoxide) 存在下， 所述胺 (VI) 可与式 (IV) 酸的酯反应。可通过如下方法得到式 (IV) 的咪唑并吡啶 -2- 羧酸和它们的衍 生物 ： 根据由 J.G.Lombardino inJ.Org.Chem.， 30(7)， 2403(1965) 描述的方法， 使合适的 2- 氨基吡啶与 3- 卤代 -2- 氧代丙酸的酯缩合， 以及然后通过使酯脱保护得到酸， 和如果合 适， 将所述酸转化为其衍生物之一。
在需要和必要时， 可对式 (I) 产物及其前体即式 (II) 或者 (IV) 产物按任意顺序 进行一种或多种下述的转化反应， 从而得到式 (I) 的产物或者转化为式 (I) 的其它产物 ：
a) 用于将酸官能团酯化或酰胺化的反应，b) 用于将胺官能团酰胺化的反应，
c) 用于将酯官能团水解得到酸官能团的反应，
d) 用于将羟基官能团转化成烷氧基官能团的反应，
e) 用于将醇官能团氧化得到醛或酮官能团的反应，
f) 用于通过还原或通过有机金属化合物例如有机镁化合物的作用将醛或酮官能 团转化为醇的反应，
g) 用于转化醛或酮官能团得到肟衍生物的反应，
h) 用于转化腈基得到醛官能团的反应，
i) 用于转化腈基得到酮官能团的反应，
j) 用于氧化烯基得到醛或酮官能团的反应，
k) 用于烯化醛或酮官能团得到烯基的反应，
l) 用于使羟基烷基脱水得到烯基的反应，
m) 用于使烯基或炔基全部或部分氢化得到烯基或烷基的反应，
n) 用于使有机金属衍生物例如硼、 锡或硅衍生物与卤化衍生物催化性偶联， 目的 是引入烷基、 烯基、 炔基或芳基取代基的反应， o) 用于还原硝基得到伯氨基的反应，
p) 用于通过还原氨化或烷基化将伯氨基或仲氨基转化成仲氨基或叔氨基的反应，
q) 用于将伯氨基转化成脒基的反应，
r) 用于氧化硫醚官能团得到亚砜或砜官能团的反应，
s) 用于保护反应性官能团的反应，
t) 用于除去受保护的反应性官能团可能携带的保护性基团的反应，
u) 用于通过无机酸或有机酸或碱成盐， 目的是得到相应盐的反应，
v) 用于拆分外消旋形式得到对映异构体的反应，
因此， 如果合适， 以所有可能的异构体形式 ( 外消旋形式、 对映异构体形式、 非对 映异构体形式和互变异构体形式 ) 得到所述式 (I) 产物。
在方案 1 中， 当没有描述起始化合物和试剂的制备方法时， 所述起始化合物和试 剂是商购的或描述在文献中或可根据所述文献中描述的方法或本领域技术人员已知的方 法制备。
下面的实施例描述了本发明一些化合物的制备。这些实施例不是限制性的， 并且 仅用于说明本发明。所举例化合物的编号参考在下面表格中给出的那些， 其中说明了本发 明一些化合物的化学结构和物理性质。
实施例 1 ： N-(3- 氰基 -5- 氟苯基 )-6-[3-( 羟甲基 ) 苯基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡 啶 -2- 甲酰胺
将 253μl 浓度为 2M 的三甲基铝于甲苯中的溶液滴加到冷却至 0℃的于 1ml 甲苯 中的 55mg 3- 氨基 -5- 氟苯甲腈中， 然后， 在返回至 20℃后， 加入 100mg6-[3-( 羟甲基 ) 苯 基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酸乙酯。将反应混合物在回流温度搅拌 30 小时， 然后冷却 并用 2ml 水稀释， 用 2N 盐酸酸化至 pH 3， 先后用 5ml 乙酸乙酯和 5ml 二氯甲烷萃取。合并 的有机相用硫酸钠干燥， 过滤并减压浓缩。 残余物 ( 在界面处与分离出来的不溶物质结合 ) 用乙醚、 乙醚 / 二氯甲烷 (1/1) 和二氯甲烷 / 甲醇 (99/1) 混合物及甲醇连续洗涤， 得到 63mg
N-(3- 氰基 -5- 氟苯基 )-6-[3-( 羟甲基 ) 苯基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺， 其为白 色固体形式。
实施例 2 ： N-(3- 氰基苯基 )-6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
将 147mg 3- 氨基苯甲腈、 474mg 1-[ 双 ( 二甲基氨基 ) 亚甲基 ]-1H-1， 2， 3- 三唑 并 [4， 5-b] 吡啶鎓 1- 氧化物六氟磷酸盐 (HATU)、 169mg 1- 羟基 -7- 氮杂苯并三唑 (HOAt) 和 424μl 二异丙基乙基胺加到 200mg 6- 二甲基氨基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酸于 4ml N， N- 二甲基甲酰胺中的溶液中。将反应混合物在 50℃加热 48 小时， 用 3ml 水和 5ml 饱和 碳酸氢钠水溶液稀释并搅拌 30 分钟， 以及然后用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用硫酸钠干 燥， 过滤并减压浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物， 用己烷、 乙酸乙酯和甲醇 ( 从 60/37/3 至 0/85/15) 进行梯度洗脱， 得到 61mg N-(3- 氰基苯基 )-6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺。
实施例 3 ： 3-({[6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ] 羰基 } 氨基 ) 苯 甲酸甲酯
将 265mg 3- 氨基苯甲酸甲酯加到放置在氩气中的 120mg 6- 二甲基氨基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酸和 224mg 1-(3- 二甲基氨基 - 丙基 )-3- 乙基碳二亚胺盐酸盐于 2ml 无水吡啶中的溶液中。将反应混合物在 50℃搅拌 48 小时， 然后减压浓缩至干。将残余物吸 收在 5ml 氯仿中， 用 2ml 水洗涤。 有机相用硫酸镁干燥并减压浓缩至干。 通过硅胶色谱法纯 化残余物 ( 用己烷、 乙酸乙酯和甲醇 ( 从 85/15/0 至 0/85/15) 进行梯度洗脱 ) 得到 105mg 3-({[6-( 二甲基氨基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ] 羰基 } 氨基 ) 苯甲酸甲酯。 下述中间体用在本发明化合物的制备中。
6- 二甲基氨基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酸乙酯
将 26.2ml 溴代丙酮酸乙酯加到 19.05g 5- 二甲基氨基吡啶 -2- 胺 (J.Chem.Soc. Perkin 1， 68(1973)) 于 380ml 二甲氧基乙烷中的溶液中。将反应混合物在 20℃搅拌 6 小 时， 然后在加入 380ml 乙醇后， 在回流温度搅拌 20 小时， 最后， 冷却后减压浓缩。将固体吸 收在 350ml 回流乙醚中并趁热过滤， 重复两次， 然后吸收在 350ml 回流乙酸乙酯中并趁热过 滤， 重复两次， 得到 39.66g 粗制 6- 二甲基氨基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酸乙酯氢溴酸盐。 将该盐吸收在 800ml 水中， 在剧烈搅拌下用固体碳酸钠处理直到达到 pH 8-9。 水相用 500ml 二氯甲烷萃取三次， 合并的有机相用硫酸镁干燥， 过滤并浓缩至干。 通过快速硅胶色谱法纯 化残余物 ( 用己烷和乙酸乙酯 ( 从 5/1 至 1/1) 的混合物进行洗脱 ) 得到 16.7g 6- 二甲基 氨基咪唑并 [1， 2-a]- 吡啶 -2- 甲酸乙酯， 其为绿色油状物形式。 1
H NMR 谱 (d6-DMSO， δ( 以 ppm 为 单 位 )) ： 8.35(s， 1H)， 7.81(d， J ＝ 2.2， 1H)， 7.45(d， J ＝ 10， 1H)， 7.34(dd， J ＝ 2.4， 10， 1H)， 4.27(q， J ＝ 7.1， 2H)， 2.84(s， 6H)， 1.31(t， J ＝ 7， 1， 3H)。
6- 二甲基氨基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酸
在 0℃， 将 107ml 2N 氢氧化锂水溶液加到 16.7g 6- 二甲基氨基咪唑并 [1， 2-a] 吡 啶 -2- 甲酸乙酯于 220ml 四氢呋喃和 9.5ml 甲醇的混合物中的悬浮液中。随后将反应混合 物再加热至 20℃并搅拌 4 小时。将 2N 盐酸滴加到冷却至 0℃的反应混合物中直到达到 pH 4-5。过滤出沉淀物并用 50ml 乙醚洗涤两次， 得到 14.8g 6- 二甲基氨基咪唑并 [1， 2-a] 吡 啶 -2- 甲酸， 其为黄色固体形式。
12101910176 A CN 101910182
1说明书8/13 页H NMR 谱 (d6-DMSO， δ( 以 ppm 为 单 位 )) ： 8.67(s， 1H)， 8.18(d， J ＝ 2， 1H)， 7.88(dd， J ＝ 2.4， 10， 1H)， 7.75(d， J ＝ 10， 1H)， 2.96(s， 6H)， ( 酸的 1 个氢不是非常可见 )。
6-[3-( 羟甲基 ) 苯基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酸乙酯
在氩气气氛中， 将事先脱气过的 475ml 甲苯和水 (5/1) 的混合物加到 25g6- 溴咪 唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酸乙酯、 13g 3-( 羟甲基 ) 苯基硼酸、 5g 2-( 二环己基膦基 ) 联苯、 1.6g 醋酸钯和 19g 磷酸钾的混合物中。将反应混合物在 80℃搅拌 16 小时， 然后冷却并用 水稀释。用 200ml 二氯甲烷萃取两次后， 合并的有机相用硫酸钠干燥， 过滤并浓缩至干。残 余物通过快速色谱法在硅胶柱上纯化 ( 用乙酸乙酯和甲醇 ( 从 100/0 至 96/4) 的混合物进 行洗脱 )， 得到 16.1g6-[3-( 羟甲基 ] 苯基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酸乙酯， 其为浅黄 色固体形式。 1
H NMR 谱 (d6-DMSO， δ( 以 ppm 为单位 )) ： 8.93(s， 1H)， 8.55(s， 1H)， 7.71-7.66(m， 3H)， 7.57(d， J ＝ 7.7， 1H)， 7.48(t， J ＝ 7.6， 1H)， 7.39(d， J ＝ 7.5， 1H)， 5.29(t， J ＝ 5.7， 1H)， 4.61(d， 5.66， 2H)， 4.32(q， J ＝ 7.1， 2H)， 1， 34(t， J ＝ 7.1， 3H)。
6-[3-( 羟甲基 ) 苯基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酸
将 90ml 2N 氢氧化锂水溶液加到 17.9g 6-[3-( 羟甲基 ) 苯基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酸乙酯于 180ml 四氢呋喃和 9ml 甲醇的混合物中的悬浮液中。随后将反应混合 物在 20℃搅拌 30 分钟。向冷却至 0℃的反应混合物中滴加 2N 盐酸直到达到 pH4-5。过滤 出沉淀物， 用 50ml 乙醚洗涤两次， 得到 15.3g 6-[3-( 羟甲基 ] 苯基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡 啶 -2- 甲酸， 其为白色固体形式。 1
H NMR 谱 (d6-DMSO， δ( 以 ppm 为单位 )) ： 8.97(s， 1H)， 8.52(s， 1H)， 7.77-7.67(m， 3H)， 7.57(d， J ＝ 7.7， 1H)， 7.48(t， J ＝ 7.6， 1H)， 7.39(d， J ＝ 7.5， 1H)， 5.7-4.8( 宽单峰， 1H)， 4.60(s， 2H)， ( 酸的 1 个氢不是非常可见 )。
在下面的表中说明本发明一些化合物实例的化学结构 ( 表 1) 和光谱特征 ( 表 2)。
表1
表2特征 H NMR 谱 (d6-DMSO， δ( 以 ppm 为单位 )) ： 4.61( 宽双峰， J ＝ 5.5Hz， 2H)， 5.29 ( 宽三峰， J ＝ 5.5Hz， 1H)， 7.40( 宽双峰， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.49(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 从 7.52 至 7.63(m， 2H)， 7.69( 宽单峰， 1H)， 7.77(m， 2H)， 8.21(td， J ＝ 1.5 和 11.5Hz， 1H)， 8.28(t， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 8.60(s， 1H)， 9.00(t， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 10.95(s， 1H). + 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 387[M+H] .1实施例 0114101910176 A CN 1019101821说明书10/13 页H NMR 谱 (d6-DMSO， δ( 以 ppm 为单位 )) ： 2.87(s， 6H)， 7.36(dd， J ＝ 9.9， 2.502 Hz， 1H)， 7.45-7.60(m， 3H)， 7.89(dd， J ＝ 2.5， 1.1Hz， 1H)， 8.21(dt， J ＝ 7.1 和 2.2 Hz， 1H)， 8.33-8.41(m， 2H)， 10.56(s， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 304[M-H]-， m/z 306[M+H]+.
实施例特征1H NMR 谱 (d6-DMSO， δ( 以 ppm 为单位 )) ： 2.87(s， 6H)， 3.87(s， 3H)， 7.3603 (dd， J ＝ 10.0 和 2.4Hz， 1H)， 7.47(t， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.51(dt， J ＝ 10.0 和 0.8Hz， 1H)， 7.67(ddd， J ＝ 8.0， 2.0 和 1.0Hz， 1H)， 7.90(dd， J ＝ 2.4 和 0.8Hz， 1H)， 8.06(ddd， J ＝ 8.0， 2.0 和 1.0Hz， 1H)， 8.35(d， J ＝ 0.8Hz， 1H)， 8.66(t， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 10.40(s， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 339[M+H]+.1H NMR 谱 (d6-DMSO， δ( 以 ppm 为单位 )) ： 4.61(d， J ＝ 5.5Hz， 2H)， 5.29(t，04 J ＝ 5.5Hz， 1H)， 6.90(dd， J ＝ 2.0 和 7.5Hz， 1H)， 7.21(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.39(m， 2H)， 7.49(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.60( 宽双峰， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.69( 宽单峰， 1H)， 7.74 (s， 2H)， 7.79(dd， J ＝ 2.0 和 7.5Hz， 1H)， 7.90(t， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 8.55(s， 1H)， 8.99(t， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 10.5(s， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 410[M+H]+.1H NMR 谱 (d6-DMSO， δ( 以 ppm 为单位 )) ： 4.60(d， J ＝ 5.5Hz， 2H)， 5.29(t，05 J ＝ 5.5Hz， 1H)， 7.39( 宽双峰， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.49(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 从 7.52 至 7.64(m， 3H)， 7.69( 宽单峰， 1H)， 7.76(m， 2H)， 8.24(m， 1H)， 8.40(m， 1H)， 8.59 (s， 1H)， 9.00(t， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 10.75(s， 1H). + 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 369[M+H] .1H NMR 谱 (d6-DMSO， δ( 以 ppm 为单位 )) ： 2.87(s， 6H)， 7.40(dd， J ＝ 10.0 和06 2.4Hz， 1H)， 7.57(dt， J ＝ 10.0 和 0.9Hz， 1H)， 7.74(ddd， J ＝ 8.4， 2.0 和 1.0Hz， 1H)， 7.87(dd， J ＝ 2.4 和 0.9Hz， 1H)， 7.97(dd， J ＝ 10.9 和 2.0Hz， 1H)， 8.36-8.47(m， 2H) 9.92(d， J ＝ 2.8Hz， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 322[M-H]-， m/z 324[M+H]+.15101910176 A CN 1019101821说明书11/13 页H NMR 谱 (d6-DMSO， δ( 以 ppm 为单位 )) ： 2.88(s， 6H)， 7.30(m， 1H)， 7.3907 (dd， J ＝ 10.0 和 2.4Hz， 1H)， 7.55(dt， J ＝ 10.0 和 0.9Hz， 1H)， 7.78(td， J ＝ 8.5 和 6.6 Hz， 1H)， 7.86-7.95(m， 2H)， 8.42(d， J ＝ 0.9Hz， 1H)， 10.40(s， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 322[M-H]-， m/z 324[M+H]+.1H NMR 谱 (d6-DMSO， δ( 以 ppm 为单位 )) ： 4.60(d， J ＝ 5.5Hz， 2H)， 5.29(t，08 J ＝ 5.5Hz， 1H)， 7.34(m， 1H)， 7.39( 宽双峰， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.49(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.61( 宽双峰， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.70( 宽单峰， 1H)， 从 7.74 至 7.89(m， 4H)， 8.61(s， 1H)， 9.00(t， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 10.6(s， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 387[M+H]+.1H NMR 谱 (d6-DMSO， δ( 以 ppm 为单位 )) ： 2.87(s， 6H)， 7.37(dd， J ＝ 10.0 和09 2.4Hz， 1H)， 7.46-7.56(m， 2H)， 7.89(dd， J ＝ 2.5 和 1.0Hz， 1H)， 8.19(ddd， J ＝ 11.8， 2.8 和 2.0Hz， 1H)， 8.24(t， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 8.39(d， J ＝ 1.0Hz， 1H)， 10.79(s， 1H). + 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 322[M-H] ， m/z 324[M+H] .对本发明的化合物进行了药理学试验以测定其对 NOT 的调节作用。
对 N2A 细胞的体外活性评价
对本发明的化合物对细胞系 (N2A) 的活性进行了评价， 该细胞系内源性地表达小 鼠 Nurr1 受体并用 NOT 结合响应元件 (NBRE， NOT binding responseelement) 稳定转染， 该 NBRE 与萤光素酶报道基因 (luciferase reporter gene) 偶联。EC50 值在 0.01 和 1000nM 之间。该试验根据下述的方法进行。
Neuro-2A 细胞系来自标准商业来源 (ATCC)。Neuro-2A 克隆系由源自根据 R.J Klebe 等的白化体小鼠 A 系 (a strain of albino mice A) 的自生瘤 (spontaneous tumor) 得到。Neuro-2A 细胞系随后用 8NBRE- 萤光素酶稳定地转染。N2A-8NBRE 细胞在 75cm2 的培 养瓶中培养至融合， 该培养瓶含有补充有 10％胎牛血清、 4.5g/l 葡萄糖和 0.4mg/ml 遗传霉 素的 DMEM。培养一周后， 细胞用 0.25％胰蛋白酶复原 30 秒， 然后重新悬浮在无酚红的且含 有 4.5g/l 葡萄糖和 10％ Hyclone 脱脂血清的 DMEM 中， 并置于白色的、 底部透明的 96 孔板 中。在加入产物前， 75μl 的细胞以比例为每孔 60000 个细胞静置 24 小时。加入 25μl 产 物并再孵育 24 小时。 在测量当天， 向每个孔中加入等体积 (100μl) 的 Steadylite， 等候 30 分钟以得到细胞的完全溶解和信号的最大产生。在用粘性膜密封之后， 将细胞板在微量培 -2 养板发光计数器上进行测量。产物以 10 M 的储备液形式制备， 然后在 100％ DMSO 中稀释。
在与细胞一起孵育之前， 预先在培养液中稀释每种产物浓度， 因此含有终浓度为 0.625％的 DMSO。
例如， 编号 5 和 8 的化合物分别显示了 27nM 和 0.4nM 的 EC50 值。
因此， 根据本发明的化合物对 NOT 具有调节作用。
因此， 本发明的化合物可用于药物的制备， 该药物的治疗性应用是治疗或预防涉 及 NOT 受体的疾病。因此， 根据另一方面， 本发明的一个主题是含有式 (I) 化合物或者其与药用酸的 加成盐的药物。
根据本发明另一个方面， 本发明的主题是药物， 所述药物含有选自如上定义的式 (I) 化合物的化合物和 N-(3- 氯 -4- 氰基苯基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺、 3-({[ 咪 唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ] 羰基 } 氨基 ) 苯甲酸甲酯、 2-({[ 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ] 羰基 } 氨基 ) 苯甲酸甲酯和 N-[2-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺 以及这些化合物与可药用酸形成的加成盐。
这些药物具有治疗性的用途， 特别是治疗和预防以下疾病 ： 神经变性疾病， 例如 帕金森病、 阿尔茨海默病、 tau 病变 (tauopathy)( 例如， 进行性核上性麻痹、 额颞痴呆、 皮 质基底变性 (corticobasal degeneration)、 皮克病 ) ； 脑外伤 (cerebral traumas)， 例如 局部缺血和颅创伤和癫痫 ； 精神病， 例如精神分裂症、 抑郁、 精神活性物质依赖 (substance dependence)、 注意力缺陷伴多动症 ； 中枢神经系统的炎性疾病， 例如多发性硬化症、 脑炎、 脊髓炎和脑脊髓炎以及其它炎性疾病， 例如血管病状 (vascular pathology)、 动脉粥样硬 化、 关节炎症 (joint inflammation)、 关节病、 类风湿性关节炎、 骨关节炎、 克罗恩病、 溃 疡性结肠炎 ； 过敏性炎性疾病， 例如哮喘、 自身免疫性疾病， 例如 I 型糖尿病、 狼疮、 硬皮病 (scleroderma)、 格林 - 巴利综合征 (Guillain-Barrésyndrome)、 阿狄森 ( 氏 ) 综合征和其 它免疫介导的疾病 ； 骨质疏松症 ； 癌症。
因此， 本发明涉及选自如上定义的式 (I) 化合物的化合物和 N-(3- 氯 -4- 氰基苯 基 ) 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺、 3-({[ 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ] 羰基 } 氨基 ) 苯 甲酸甲酯、 2-({[ 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 基 ] 羰基 } 氨基 ) 苯甲酸甲酯和 N-[2-( 二氟甲 氧基 ) 苯基 ] 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺和这些化合物与可药用酸形成的加成盐， 用 于治疗上述疾病、 障碍或病症之一。
根据本发明另一方面， 本发明涉及选自上述的化合物在制备用于治疗和预防上述 疾病、 障碍或病症之一的药物中的用途。
这些化合物也可用作移植物和 / 或干细胞移植术结合的疗法。
根据另一个方面， 本发明涉及药物组合物， 其含有作为活性成分的本发明的化合 物。这些药物组合物含有有效剂量的至少一种本发明的化合物， 或者所述化合物的其药用 盐， 和至少一种药用赋形剂。
根据药物形式和理想的给药方法， 所述的赋形剂选自本领域的技术人员所知的常 用赋形剂。
在用于口服、 舌下给药、 皮下给药、 肌内给药、 静脉内给药、 表面给药 (topical)、 局 部给药 (local)、 气管内给药、 鼻内给药、 经皮给药或者直肠给药的本发明药物组合物中， 上 述的式 (I) 的活性成分或者其盐， 可作为单位给药的形式给药， 作为与常规药物赋形剂的 混合物的形式给药， 给予人类和动物， 以用于预防或者治疗上述的症状或者疾病。
适当的单位给药形式包括口服给药形式， 例如片剂、 软胶囊剂或者硬胶囊剂、 粉末 剂、 颗粒剂和口服溶液剂或者混悬剂、 舌下给药、 口腔给药、 气管内给药、 眼内给药和鼻内给 药或者吸入给药形式， 表面给药、 经皮给药、 皮下给药、 肌内给药或者静脉内给药形式， 直肠 给药形式和埋植剂 (implant)。 对于表面给药， 根据本发明的化合物可在乳膏剂、 凝胶剂、 软 膏剂或者洗剂 (lotion) 中使用。作为举例， 片剂形式的本发明化合物的单位给药形式可包括以下组分 ：
本发明的化合物 50.0mg
甘露醇 223.75mg
交联甲羧纤维素钠 6.0mg
玉米淀粉 15.0mg
羟丙基甲基纤维素 2.25mg
硬脂酸镁 3.0mg
对于特殊情况， 高剂量或者低剂量均适用 ； 这些剂量没有超出本发明的内容。 根据 常规实践， 适于每个患者的剂量由医生根据给药方法和所述的患者的体重和反应来确定。
根据另一方面， 本发明也涉及上面指出的用于治疗病状的方法， 该方法包括给予 患者有效剂量的本发明化合物或者其药用盐。18