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作为肽酶效应物用于医学用途的新型化合物
    技术领域 本发明涉及新型化学化合物。并且， 本发明涉及所述新型化学化合物， 其能够 通过与活性位点的直接作用和 / 或通过新限定的功能相关的酶结合位点协同地抑制胞 外酶二肽基肽酶 IV(DPIV) 和丙氨酸氨基肽酶 N(APN)(“双重抑制剂” )[ 欧洲专利申请 No.10156805.3， 2010 年 3 月 17 日申请 ]。 所述新型化合物对呈现出与二肽基肽酶 IV(DPIV) 类似的酶作用 (“DPIV 类似酶作用” ) 的胞外酶具有作用和 / 或对具有与丙氨酸氨基肽酶 N(APN) 类似的酶作用 (“APN- 类似酶作用” ) 的胞外酶具有作用。
     此外， 本发明涉及制备新型 DPIV 和 APN 的双重抑制剂的方法。
     本发明还涉及所述新型化学化合物在医学领域中的用途。
     并且， 本发明涉及所述新型化学化合物， 用于预防和治疗显示出过度免疫应答 和具有炎症起源的疾病、 神经病和引起大脑损伤的疾病、 肿瘤疾病、 皮肤病、 I 型糖尿病和 SARS 的用途。
     背景技术 酶二肽基肽酶 IV(DPIV， CD26， EC 3.4.14.5) 是普遍存在的丝氨酸蛋白酶， 其 特异性地催化 N- 末端第二个位置的脯氨酸之后以及较低程度的丙氨酸之后或限制性地 更多氨基酸 ( 如， 丝氨酸、 苏氨酸、 缬氨酸和甘氨酸 ) 之后的肽水解。属于具有 DPIV 类 似酶作用的酶基因家族的酶特别地是 DP II、 DP 8、 DP9 和 FAP/ 重组成纤维细胞激活蛋 白 (seprase)[T.Chen 等 人 ： Adv.Exp.Med.Biol.524， 79， 2003]。 吸 引 素 (attractin)( 红 木蛋白 (Mahagonyprotein)) 也发现类似于 DPIV 的底物特异性 [J.S.Duke-Cohan 等人 ： J.Immunol.156， 1714， 1996]。所述酶也受到 DPIV 抑制剂的抑制。
     二肽基肽酶 IV 以两种形式存在， 在血液和其他体液中以可溶形式存在， 在细胞上 和组织中以膜结合形式存在。膜结合形式代表 99％以上的总 DPIV。可溶形式必须被看做 是由于膜酶的蛋白分解脱落的人工制品。
     相同的情况也适用于氨基肽酶 N。
     可溶性和膜结合的 DPIV 和 APN 的分子机理以及功能不同。这是由于底物通过位 于细胞膜对面的中心孔优先接近膜结合 DPIV 上的活性位点。
     DPIV 中心孔的分析惊人地显示出通过离该酶活性位点大约 2.17nm 的中心孔内的 结合位点， 强烈地调节了膜 DPIV。该位点的合适配体阻断底物接近活性位点并调节 DPIV 的细胞作用， 如细胞周期停止于 G1/S 期和细胞因子产生。因此， 占据中心孔结合位点， 而不是通过活性位点直接抑制 DPIV， 是抑制 DPIV 细胞功能的先决条件 [ 欧洲专利申请 No.10156805.3]。
     研究来自大肠杆菌 (Escherichia coli) 的氨基肽酶 N 的晶体结构模型， 发现了 APN 的相似情况 [K.Ito 等人， 2006， J.Biol.Chem.281， 33664-33676]。
     属于丙氨酰氨基肽酶组的 ( 也普遍存在 ) 为主要表现为 II 型膜蛋白的氨基肽 酶 N(APN， CD13， EC 3.4.11.2)， 和细胞溶质可溶性丙氨酰氨基肽酶 (EC 3.4.11.14， 嘌呤霉
     素 - 灵敏性氨基肽酶、 氨基肽酶 PS、 脑啡肽降解氨基肽酶 )。丙氨酰氨基肽酶 ( 包括上述 两种氨基肽酶 ) 依赖金属起作用， 例如依赖锌， 并催化寡肽 N- 末端氨基酸后的肽键的水解， 在 APN 的情况下， 优选 N- 末端的丙氨酸 [A.J.Barrett 等人 ： Handbook of Proteo-lytic Enzymes， Academic Press 1998]。氨基肽酶 N 的所有抑制剂也抑制细胞溶质的丙氨酰氨 基肽酶， 虽然存在细胞溶质氨基肽酶的特异性抑制剂 [M.Komodo 等人 ： Bioorg.and Med. Chem.9， 121， 2001]。
     与 DPIV 相同， 鉴定了 APN 分子的两种接近途径。除了活性位点， 通过对接方法 (docking approaches) 识别了中心孔内用于底物和抑制剂的结合位点， 该另一个位点位 于邻近膜的 APN 的 N- 末端部分的对面 [H.B.Rasmussen 等人， 2003， Nat.Struct.Biol.10， 3-5 ； Ito 等人， 2006， J.Biol.Chem.281， 33664-33676 ； 参考 2010 年 3 月 17 日提交的欧洲专 利申请 No.10156805.3]。 APN 抑制剂结合该中心孔结合位点 ( 离接近位点 1.51nm)， 与 DPIV 的情况相同， 在空间上阻断底物接近 APN 的活性位点。因此， 通过这种肽酶的这些中心孔结 合位点也调节 APN 的功能特性。
     图 1 中通过图显示了 APN 和 DPIV 的两种接近途径的相对位置。
     对于两组酶， DPIV 以及 APN， 在不同的细胞系统中证明了重要的生物功能。这对于 如下的系统特别真实 ： 免疫系统 [S.Ansorge 等人， 2009， Clin.Chem.Lab.Med.47， 253-261 ； U.Lendeckel 等 人 ： Intern.J.Mol.Med.4， 17， 1999 ； T. 等人： Intern.J.Mol.Med.4， 3， 1999 ； I.De Meester 等 人 ： Advanc.Exp.Med.Biol.524， 3， 2002 ； 国 际 专 利 申 请 No.WO 01/89,569 ； 国际专利申请 No.WO 02/053,170 ； 国际专利申请 No.PCT/EP 03/07,199] ； 神 经元系统 [ 国际专利申请 No.WO02/053,169 和德国专利申请 No.10337074.9] ； 成纤维细胞 [ 德国专利申请 No.10330842.3] ； 角质形成细胞 [ 国际专利申请 No.WO02/053,170] ； 皮脂 腺的细胞 (sebaceous gland cells)/ 皮脂腺细胞 (sebocytes)[ 国际专利申请 No.PCT/EP 03/02,356] ； 肿瘤以及病毒引起的感染， 例如冠状病毒引起的感染 [D.P.Kontoyiannis 等 人： Lancet 361， 1558， 2003]。
     血液中可溶性 DPIV 特异性灭活内分泌激素 GIP 和 GLP 的能力导致用于治疗葡萄 糖代谢失调的新型治疗概念的发展 [D.M.Evans ： Drugs 5， 577， 2002]。
     对于两组酶， 已知不同的抑制剂 [ 综述参见 ： D.M.Evans ： Drugs 5， 577， 2002 ； 和 见 M.-C.Foumie-Zaluski 和 B.P.Roques ： 见 J.Langner and S.Ansorge ： Ectopeptidases， Kluwer Academic/PlenumPublishers， p.51， 2002]。 大部分是基于对可溶性肽酶的作用， 而 不是对膜结合细胞 DPIV 和 APN 的作用。
     丙氨酰氨基肽酶和二肽基肽酶 IV 的单独抑制以及具有类似底物特异性的酶的抑 制， 特别是这两组酶的酶组合抑制， 导致免疫细胞和其他细胞 ( 例如， 皮肤细胞和肿瘤细 胞 ) 中的 DNA 合成的强烈抑制， 并因此导致细胞增殖的强烈抑制以及导致细胞因子产生的 变化， 特别是导致免疫抑制细胞因子 TGF-β1 的诱导 [ 国际专利申请 No.WO 01/89,569 ； 国 际专利申请 No.WO 02/053,170] 以及导致 TH1 型 ( 例如， 白细胞间介素 -2(IL-2))、 TH2 型 ( 例如白细胞间介素 -4(IL-4) 和 TH17 型 ( 例如， IL-17) 炎症细胞因子的产生和释放的抑 制 [ 国际专利申请 No.WO 02/053,170 和德国专利申请 No.10102392.8 ； S.Ansorge 等人， 2009， Clin.Chem.Lab.Med.47， 253-261]。
     而且， DPIV 能够灭活血管活性肠肽 (VIP)、 垂体腺苷酸环化酶 - 活化多肽 (PACAP)以及神经肽 Y(NPY)， 其各自具有免疫抑制和神经保护或神经发生特性。VIP 还已经显示 在体外和体内激活 T 调节细胞 (Treg)(P. Anderson 和 E.Gonzalez-Rey， 2010， Mol.Cell. Biol.30， 2537-2551 ； E.Gonzalez-Rey 等 人， 2007， Ann.Rheum.Dis.66， 70-76 ； J.Holler 等 人， 2008， J.Immunol.181， 6909-6912 ； J.-R.Zhou 等 人， 2008， Neurosci.Bull.24， 155-159)。 因此， 这些细胞因子灭活的抑制保护它们以免失去其免疫抑制和神经保护特性， 并且诱导抗炎和神经保护状态， 这是神经退化病 ( 如多发性硬化、 帕金森病和阿尔茨海默 氏病 ) 治疗的先决条件。
     丙 氨 酰 氨 基 肽 酶 的 抑 制 剂 实 现 调 节 T 细 胞 中 TGF-β1 强 烈 诱 导 [ 国 际 专 利 申 请 No.PCT/EP03/07,199] 和 调 节 T 细 胞 的 免 疫 抑 制 表 型 的 激 活 [ 德 国 专 利 申 请 No.102006703942]。在神经元系统中， 通过两种酶系统的抑制证明了急性和慢性脑损伤过 程的减轻或阻滞 [ 国际专利申请 No.WO 02/053,169 和德国专利申请 No.10337074.9]。而 且， 对于成纤维细胞 [ 德国专利申请 No.10330842.3]、 角质形成细胞 [ 国际专利申请 No.WO 02/053,170) 和皮脂腺细胞 [ 国际专利申请 No.PCT/EP 03/02,356]， 证明了丙氨酰氨基肽 酶 N 和 DPIV 的组合抑制实现了细胞生长的抑制和细胞因子产生的变化。
     这产生了惊人的事实 ： 丙氨酰氨基肽酶和二肽基肽酶 IV 以及具有类似酶作用的 酶在不同的器官和细胞系统中执行基本的中心生物功能。 因此， 这两组酶的组合抑制， 特别 是通过中心孔结合位点， 代表用于治疗各种 ( 大多数情况 ) 慢性炎症疾病和肿瘤疾病的新 的有效的治疗原理。
     在公认的动物模式中， 申请人同时显示出， 也在体内， 特别地组合给予两组所述肽 酶的抑制剂， 导致对不同细胞系统的生长抑制和过度免疫应答、 慢性炎性过程和脑损伤的 抑制 [ 国际专利申请 No.WO 01/89,569]。单独给予单一的已知抑制剂导致减弱的作用。
     之前报道的结果主要是通过单独的丙氨酰氨基肽酶 N 和二肽基肽酶 IV 的已知抑 制剂得到的， 但特别通过两组酶的抑制剂的组合得到， 所述抑制剂在文献中描述， 并且部分 可购得。
     在文献 EP-A 1948627(WO-A 2007/057,128) 中， 报道了新型、 主要是非肽的低分 子量物质， 其可以用作前药， 并且在生理和病理条件下作为有效的药剂或有效药剂的混合 物， 其以双重的方式， 抑制丙氨酰氨基肽酶 N 和具有类似底物特异性的酶， 并且抑制二肽基 肽酶 IV 和具有类似底物特异性的酶。前药的转化是通过 -S-S- 或 -Se-Se- 桥的还原进行 的， 优选通过细胞硫醇 ( 带有 -SH- 基团的化合物 ) 进行。
     在 2009 年 9 月 2 日提交的欧洲专利申请 No.09169269.9 中， 报道了另一组用于医 学用途的新型多功能肽酶抑制剂。 发明内容
     本发明的目的是提供新型化学化合物。
     本发明的另一个目的是提供适宜作为上述两组肽酶的双重抑制剂的新型化学 化合物， 上述两组肽酶即 (ia) 二肽基肽酶 IV(DPIV) 以及 (ib) 具有类似于二肽基肽酶 IV(DPIV) 的酶作用 ( “DPIV 类似酶作用” ) 的肽酶和 / 或 (iia) 丙氨酰氨基肽酶 N(APN) 以 及 (iib) 具有类似于丙氨酰氨基肽酶 N(APN) 的酶作用 (“APN- 类似酶作用” ) 的肽酶。
     本发明进一步目的是提供适合于医学领域中应用的新型化学化合物。此外， 本发明的目的是提供新型化学化合物， 其适合于用于预防和治疗显示出过 度免疫应答和具有炎症起源的疾病、 神经病和引起大脑损伤的疾病、 肿瘤疾病、 皮肤病、 I型 糖尿病和 SARS 的用途。
     惊人地， 发现申请人在他们抑制胞外肽酶的研究中发现的新物质能够特异性抑制 二肽基肽酶 IV 和丙氨酰氨基肽酶 N， 因此， 在一种物质中结合两组肽酶协同的 ( “双重” )抑 制的能力。当然， 本发明的新型物质可以单独抑制一种肽酶， 即， (ia) 二肽基肽酶 IV(DPIV) 以及 (ib) 具有类似于二肽基肽酶 IV(DPIV) 的酶作用 ( “DPIV 类似酶作用” ) 的肽酶或 (iia) 丙氨酰氨基肽酶 N(APN) 以及 (iib) 具有类似于丙氨酰氨基肽酶 N(APN) 的酶作用 ( “APN- 类 似酶作用” ) 的肽酶。
     此外， 本发明惊人地发现所述新型化合物不仅能够与这些肽酶的活性位点相互作 用， 而且也可以， 或作为选择地， 能够与这些肽酶的中心孔结合位点相互作用。如对于 DPIV 所示的， 位于细胞膜对面的中心孔入口的前厅处的该结合位点有助于底物接近酶的活性位 点。该位点的占据在空间上阻断了底物接近活性位点并抑制细胞酶的功能。该结合位点介 导细胞 DPIV 的自体空间调节， 并且是其调节细胞功能的最关键的靶位点， 如生长调节和细 胞因子产生 [ 欧洲专利申请 No.10156805.3， 2010 年 3 月 17 日提交 ]。
     同时， 对于丙氨酰氨基肽酶 N， 也发现了相似的机理。相应的数据是基于来自大肠 杆菌的 APN 的晶体结构 [K.Ito 等人， 2006， J.Biol.Chem.281， 33664-33676]。
     应当提及的是， 与 APN 和 DPIV 的 “传统” 抑制剂形成对比， 传统抑制剂通过抑制常 数 ( 如 IC50 值 ) 来限定 [ 详见以上提及的专利申请 ]， 如此处所述的与细胞肽酶的中心孔 结合位点相互作用的抑制剂 / 配体的主要特征在于对接方法。用于这些特征的酶常规试验 尚无可随意使用的。因此， 这些特性主要通过配体和 DPIV 或 APN 各自的中心孔结合位点之 间相互作用的自由能 ( 千卡 / 摩尔 ) 来限定。
     为了阐明 DPIV 以及 APN 的空间抑制， 对于不具有酶抑制和与活性位点相互作 用的潜能的抑制剂物质的两种酶的中心孔途径的阻断示例性地显示在图 2 中。在两个 实施例中， 中心孔结合位点被各自酶的潜在抑制剂占据 ； 在 DPIV 情况中， 为西他列汀 (sitagliptin)， 在 APN 情况中， 为苯丁抑制素 (Bestatin)。
     此外， 本发明惊人地发现新型化学物质本身可以用于， 而且也可以用作其他物质 的起始材料用于， 预防和治疗具有过度免疫应答的疾病 ( 自体免疫疾病、 过敏症和移植排 斥、 脓毒症 )、 其他慢性炎症疾病 ( 包括动脉硬化 )、 神经病和大脑损伤 ( 特别是多发性硬 化、 阿尔茨海默氏病和帕金森病 )、 皮肤病 ( 特别是痤疮和牛皮癣 )、 肿瘤疾病和特异性病毒 感染 ( 特别是 SARS) 以及 I 型糖尿病。
     这些肽酶抑制剂 / 配体的新型化学实体用于预防和 / 或治疗各种炎症疾病和肿瘤 疾病中的基本原理如下 ：
     炎症疾病 ：
     所有炎症疾病的特征在于物理、 生物或化学激发的免疫系统的激活。免疫应答的 第一步对于抗原是先天性和非特异性的。接着是抗原特异性的、 适应性的免疫应答。同样 在慢性炎症的情况中， 公认免疫应答对于来自体外的或来自自体的抗原都是特异性的， 其 没有排除非特异性的相互作用。除了通过非特异性细胞 ( 如粒细胞和巨噬细胞 ) 激活的非 特异性应答以外， 抗原特异性 T 和 B 淋巴细胞是特异性免疫应答的主要细胞工具。关键的过程是抗原特异性 T 和 B 淋巴细胞的激活和克隆扩增 / 增殖， 以得到用于足够免疫应答的 足够高的细胞潜能。后者接着是炎症细胞因子的产生， 并且最终通过抗炎细胞因子终止该 过程。
     在慢性炎症疾病的情况中， 终止没有适当地运行。这导致免疫细胞的持久增殖和 炎症细胞因子的持续产生， 其随后通过这些致病免疫细胞破坏相关细胞和组织。
     显著地， 还公知通过表征为所谓的 “激活标记” 的 APN/CD13 和 DPIV/CD26 的表达 上调来完成免疫系统的激活。
     最常见的慢性炎症疾病是 ：
     - 自体免疫疾病组， 例如多发性硬化、 动脉硬化、 牛皮癣、 帕金森病和类风湿性关节 炎， 只是提及了近百种这样疾病中的一些突出的疾病。
     - 过敏症组， 例如支气管哮喘和枯草热 ；
     - 异源移植的排斥 ； 和
     - 其他 ( 尚未完全了解 ) 炎症疾病， 如阿尔茨海默氏病和糖尿病。
     由于引起所有炎症疾病的共同机理， 目前公认抵制或处理这些作用的最有效方法 之一是抑制激活的淋巴细胞的增殖和抑制炎症细胞因子 ( 例如， IL-2、 IL-17、 IL-4) 的产生 以及诱导抗炎症细胞因子 ( 例如， TGF-β1、 II-10、 NPY、 II-16) 的产生。通过淋巴细胞生长 的抑制起作用的药物中广泛认可的免疫抑制物质是环孢霉素 A(cyclosporine A)、 FK506 和 雷帕霉素 (rapamycin)。所有三种化合物通过结合于称为亲免素 (immunophilins) 的胞内 蛋白家族的成员发挥它们的药物作用， 形成干扰对于淋巴细胞克隆扩增重要的信号通路的 复合物 [Immunobiology， 2001， C.Janaway 等人， “Immunobiology” ， Garland Publishing， Churchill Livingstone， p565-566]。 DPIV 和 APN 的抑制剂 / 配体也满足这些需求并且是有前景的新一类的用于治疗 炎症疾病的物质 [S.Ansorge 等人， 2009， Clin.Chem.Lab.Med.47， 253-261 ； T. 等人， 1999， Int.J.Mol.Med.1999， 3-15 ； U.Lendeckel 等 人， 1999， Int.J.Mol.Med.1999， 17-27 ； D.M.T.Yu 等人， 2010， FEBS J.2010， 1-19)]。已经提出了证据 ： 所有 DPIV 和 APN 抑制剂， 即 使它们的分子具有非常不同的化学结构并且彼此不同， 如果它们显示出与这些肽酶的活性 位点和 / 或中心孔结合位点的充分相互作用， 则能够抑制 DNA 合成并满足这些需要来进行， [S.Ansorge 等人， 2009， Clin.Chem.Lab.Med.47， 253-261 ； 欧洲专利申请 No.10156805.3， 2010 年 3 月 17 日提交 ]。
     肿瘤疾病 ：
     肿瘤的特征在于不受控制的细胞生长和 DNA 合成， 以及过度激活的血管新生， 即 为生长中的肿瘤细胞提供营养必需的小血管的产生。
     大部分肿瘤细胞在其表面上表达 DPIV 或 / 和 APN。显著地， DPIV 和 APN 抑制剂 / 配体能够抑制肿瘤细胞的 DNA 合成 [D.M.T.Yu 等人， 2010， FEBS J.2010， 1-19 ； N.Petrovic 等人， 2004， 见： N.Hooper 和 U.Lendeckel， Aminopeptidases in biology and diseases， Kluwer Academic/Plenum Publishers， New York， p 179-200]。特别地， APN 抑制剂显示出 是血管生成的强烈拮抗剂 [R.Pasqualini 等人， 2000， Cancer Res.60， 722-727 ； R.Rangel 等人， 2007， Proc.Nat.Acad.Sci.104， 4588-4593 ； N.Petrovic 等人， 2004， 见： N.Hooper 和 U.Lendeckel， Aminopeptidases in biology and diseases， Kluwer Academic/Plenum
     Publishers， New York p179-200]。
     因此， DPIV 和 APN 的抑制剂 / 配体满足抗争肿瘤的主要需求， 因为它们通过各自 代表性的抑制剂或配体与这些肽酶的活性位点和 / 或中心孔结合位点的相互作用而抑制 肿瘤细胞的 DNA 合成、 血管生成和转移。惊人地发现这种能力与抑制剂 / 配体分子的特异 性分子结构无关。
     本发明涉及通式 (I) 的化合物，
     以下将详细说明和解释以上通式 (I) 中的残基 B、 E、 C 和 Y 的含义。 除非特别指出或从结构式看是明显的， 允许相关实施方案的所有可能的立体异构体。 通式 (I) 的化合物的优选实施方案获自子集 2( 表 1)。
     可以通过以下对单种化合物或化合物组举例详细描述的公知的有机化学的合成 方法来合成以上通式 (I) 的化合物。这样的合成方法是有机合成领域的技术人员公知的。 特别地， 公知这些方法形成高收率和高纯度的目标化合物。还已知根据这些已知合成方法 得到的化合物的纯度不仅是足够的， 而且特别适于在医学应用中使用这些化合物， 特别是 给予需要给药这样的一种化合物或两种或多种这样的化合物的病人。
     本发明还涉及将用于医学中的以上通式 (I) 的和以下详述的至少一种化合物。
     本发明还涉及以上提及的通式 (I) 的和以下详细描述的至少一种化合物， 用于医 学用途， 所述用途是用于预防和治疗具有过度免疫应答和炎症起源的疾病 ( 包括动脉硬 化 )、 神经元病、 大脑疾病、 皮肤病、 肿瘤疾病、 病毒引起的疾病和 I 型糖尿病。
     本发明还涉及药物或化妆品制剂， 其包含根据权利要求 1 或 2 之一和根据以下详 细描述的至少一种通式 (I) 的化合物， 任选结合一种或多种药学上或化妆品上有效的化合 物， 并且进一步任选结合一种或多种药学上或化妆品上可接受的载体、 辅助化合物和 / 或 佐剂。
     本发明还涉及药物制剂， 其包含至少一种根据权利要求 1 或 2 之一和根据以下详 细描述的化合物， 用于医学用途， 。
     此外， 本发明涉及药物制剂， 其包含至少一种根据权利要求 1 或 2 之一和根据以下 详细描述的化合物， 用于医学用途， 所述用途是用于预防和治疗具有过度免疫应答和炎症 起源的疾病 ( 包括动脉硬化 )、 神经元病、 大脑疾病、 皮肤病、 肿瘤疾病、 病毒引起的疾病和 I 型糖尿病。
     最后， 本发明还涉及至少一种以上通式 (I) 的化合物用于化妆品使用的用途。
     附图说明
     图 1 是显示 DPIV 和 APN 的单体分子中实质距离 ( 以埃计 ) 的略图 ；图 2DPIV 和 APN 的中心孔结合位点处的配体结合 ：
     a) 活性位点中具有西他列汀 ( 暗区填充表示 ) 的 DPIV ；
     b) 活性位点中具有西他列汀 ( 暗区填充表示 ) 的 DPIV 和中心孔结合位点中的 C26.001 结合 ( 浅灰色区填充表示 ) ； 阻断接近活性位点 ；
     c) 活性位点中具有苯丁抑制素 ( 暗区填充表示 ) 的 APN ；
     d) 活性位点中具有苯丁抑制素 ( 暗区填充表示 ) 的 APN 和中心孔结合位点中的 C26.001 结合 ( 浅灰色区填充表示 ) ； 阻断接近活性位点。 具体实施方式
     在下文中， 详细描述本发明。 在该描述中参照本发明的优选实施方案， 其以示例性 的方式描述了本发明， 用以更好地理解本发明， 并且甚至描述了目前已知的本发明的最佳 模式。然而， 本发明不限于为了更好地理解而提供的实施例。
     根据本发明， 新化合物具有通式 (1) ：
     其 中 残 基 R1、 R2、 R3 和 R4 可 以 相 同 或 不 同， 并 且 独 立 地 选 自 -H ； - 卤素 ( 即， -F、 -Cl、 -Br、 -I) ； 具有 1 至 25 个碳原子的烷基， 该烷基可以是直链或支链， 饱和或一 次、 两次或多次不饱和 (-C ＝ C- 双键和 / 或 -C ≡ -C- 三键 )， 非取代或由残基 R1、 R2、 R3 和 / 或 R4 中的任意一个取代的， 和 / 或连续的或由残基 -O-、 -NH-、 -NR5-、 -S- 中的任意一 个中断的 ； ＞ C( ＝ O)、 -C( ＝ O)O-、 -O-C( ＝ O)-、 -C( ＝ O)NH-、 -C( ＝ O)NR5-、 -NHC( ＝ O)-、 -NR5(C ＝ O)-、＞ C( ＝ S)、 -C( ＝ S)O-、 -O-C( ＝ S)-、 -C( ＝ S)NH-、 -C( ＝ S) NR5-、 -NHC( ＝ S)-、 -NR5(C ＝ S)-、 -PH-、 -PR5-、 ＞ P( ＝ O)H2、 ＞ P( ＝ O)H、 ＞ P( ＝ O)R5、 ＞ P( ＝ O)(OH)、 ＞ P( ＝ O)OR5 ； 具有 3 至 9 个环成员的环烷基， 该环烷基可以是饱和或一 次、 两次或多次不饱和的 (-C ＝ C- 双键和 / 或 -C ≡ -C- 三键 )， 非取代或由残基 R1、 R2、 R3 和 / 或 R4 中的任意一个取代的， 和 / 或在环结构内可以包含一个或几个杂原子， 该杂原 子可以选自 -O-、 未取代或烷基取代的 -N ＜、 -S- 和 -P ＜ ； 具有 3 至 9 个环成员的芳基， 该 芳基可以是非取代或由残基 R1、 R2、 R3 和 / 或 R4 中的任意一个取代的， 和 / 或在环结构内 可以包含一个或几个杂原子， 该杂原子可以选自 -O-、 非取代或烷基取代的 -N ＜、 -S- 和 -P ＜； 所述环烷基和 / 或芳基可以形成非稠合的环系统或包含一个、 两个或多个稠合环的 环系统， 稠合环选自环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳环 ； -OH、 -OR5、 -NH2、 -NHR5、 -NR5R6、 -C ( ＝ O)H、 -C( ＝ O)R5、 -C( ＝ O)OH、 -C( ＝ O)OR5、 -C( ＝ O)NH2、 -C( ＝ O)NHR5、 -C( ＝ O) NR5R6、 -NH-C( ＝ O)H、 -NR5(C ＝ O)H、 -NH-C( ＝ O)R5、 -NR5(C ＝ O)R5、 -C( ＝ S)OH、 -C( ＝ S)OR5、 -C( ＝ S)NH2、 -C( ＝ S)NHR5、 -C( ＝ S)NR5R6、 -O-C( ＝ O)H、 -OC( ＝ O)R5、 -NH(C ＝ O)R5、 -NR5(C ＝ O)R6、 -C( ＝ O)(NHOH)、 -C(C ＝ O)(NR5OH)、 -C(C ＝ O)(NR5OR6)、 -C(C ＝ O) NHOR5、 -PH2、 -PHR5、 -PR5R6、 -P( ＝ O)H2、 -P( ＝ O)R5H、 -P( ＝ O)R5R6、 -P( ＝ O)(OH)2、 -P( ＝
     O)R5OH、 -P( ＝ O)OR5OR6 ；
     其中 R5 和 R6 可以相同或不同， 并且可以选自以上由 R1、 R2、 R3 和 R4 限定的残基 ；
     E 可以代表选自 -O-、 -S-、 -NH- 或 -NR7- 的基团， 其中 R7 是可以选自以上由 R1、 R2、 R3 和 R4 限定的残基 ；
     Y 可以代表选自 -O-、 -NH-、 -NR8-、 -S-、 -CH2-、 -CHR8- 和 -CR8R9- 的基团， 其中 R8 和 R9 可以相同或不同， 并且可以选自以上由 R1、 R2、 R3 和 R4 限定的残基 ；
     B 可以代表具有通式 (II) 的基团
     其中
     Cy1 可以表示具有 3 至 9 个环成员的稠合或非稠合、 芳香族或非芳香族的同型或杂 环系统， 并且在稠合系统的情况中， 每个部分环中 3 至 9 个环成员， 其在非芳香族部分的情 况中， 可以是饱和的或一次、 两次或多次不饱和的 (-C ＝ C- 双键和 / 或 -C ≡ -C- 三键 )， 并 且 Cy1 可以是非取代或由残基 R1、 R2、 R3 和 / 或 R4 中的任意一个取代的， 和 / 或可以在环结 构内包含一个或多个杂原子， 该杂原子可以选自 -O-、 非取代或烷基取代的 -N ＜、 -S- 和 -P ＜； 具有 3 至 9 个环成员的芳基， 并且在稠合系统的情况中， 每个部分环中的 3 至 9 个成员， 该芳基可以是非取代或由残基 R1、 R2、 R3 和 / 或 R4 中的任意一个取代的， 和 / 或可以在环结 构内包含一个或多个杂原子， 该杂原子可以选自 -O-、 非取代或烷基取代的 -N ＜、 -S- 和 -P ＜； 该环烷基和 / 或芳基可以形成非稠合环系统或包含一个、 两个或多个稠合环的环系统， 杂环烷基、 芳基或杂芳基环 ； 所述稠合环选自环烷基、
     X 可以代表单键、 -O-、 -S-、 -NH-、 -NR10-、 -CH2-、 -CHR10-、 -CR10R11-、 ＞ C( ＝ O)、 ＞ C( ＝ S)、 ＞ C( ＝ NH)、 ＞ C( ＝ NR10)、 -C( ＝ O)O-、 -C( ＝ S)O-、 -C( ＝ NH)NH-、 -C( ＝ O)NH-、 -C( ＝ O)NR10-、 -O(C ＝ O)-、 -NH(C ＝ O)-、 -NR10(C ＝ O)-、 -O(C ＝ S)-、 -NH(C ＝ S)- 或 -NR10(C ＝ S)-， 其中 R10 和 R11 可以相同或不同， 并且可以选自以上由 R1、 R2、 R3 和 R4 限定的残基 ；
     k 和 l 可以相同或不同， 并且代表零 (0) 或可以是 1 至 5 范围内的整数 ；
     C 可以代表具有通式 (III) 的基团
     其中
     m 可以相同或不同， 并且代表零 (0) 或可以是 1 至 5 范围内的整数 ；
     作为整体的序列 A-L1-J-L2 可以是单键， 或
     A 可以不存在或可以选自如以上对 R1 限定的残基， 前提条件是碳链可以具有 1 至 10 个碳原子 ； 和
     J 可 以 不 存 在 或 可 以 选 自 具 有 1 至 10 个 碳 原 子 的 亚 烃 基， 该亚烃基可以是 直 链 或 支 链、 饱 和 或 一 次、 两 次 或 多 次 不 饱 和 的 (-C ＝ C- 双 键 和 / 或 -C ≡ -C- 三 键 )、 非取代或由残基 R1、 R2、 R3 和 / 或 R4 中的任意一个取代的、 和 / 或连续的或由残 基 -O-、 -NH-、 -NR5-、 -S- 中的任意一个中断的 ； ＞ C( ＝ O)、 -C( ＝ O)O-、 -O-C( ＝ O)-、 -C( ＝ O)NH-、 -C( ＝ O)NR5-、 -NHC( ＝ O)-、 -NR5(C ＝ O)-、 ＞ C( ＝ S)、 -C( ＝ S)O-、 -O-C( ＝ S)-、 -C( ＝ S)NH-、 -C( ＝ S)NR5-、 -NHC( ＝ S)-、 -NR5(C ＝ O)-、 -PH-、 -PR5-、 ＞ P( ＝ O)H2、 ＞ P( ＝ O)H、 ＞ P( ＝ O)R5、 ＞ P( ＝ O)(OH)、 ＞ P( ＝ O)OR5 ； 具有 3 至 9 个环成员的环亚烃 基， 该环亚烃基可以是饱和或一次、 两次或多次不饱和的 (-C ＝ C- 双键和 / 或 -C ≡ -C- 三 键 )、 非取代或由残基 R1、 R2、 R3 和 / 或 R4 中的任意一个取代的、 和 / 或在环结构内可以包 含一个或几个杂原子， 该杂原子可以选自 -O-、 非取代或烷基取代的 -N ＜、 -S- 和 -P ＜ ； 具 有 3 至 9 个环成员的亚芳基， 该亚芳基可以是非取代或由残基 R1、 R2、 R3 和 / 或 R4 中的任 意一个取代的、 和 / 或在环结构内可以包含一个或几个杂原子， 该杂原子可以选自 -O-、 非 取代或烷基取代的 -N ＜、 -S- 和 -P ＜ ； 该环亚烃基和 / 或亚芳基可以形成非稠合的环系统 或包含一个、 两个或多个稠合环的环系统， 所述稠合环选自环烷基、 杂环烷基、 芳基或杂芳 环； -NH、 -NR5、 -C( ＝ O)-、 -C( ＝ O)O-、 -C( ＝ O)R5-、 -C( ＝ O)NH-、 -C( ＝ O)NR5-、 -NH-C( ＝ O)-、 -NR5-C( ＝ O)-、 -C( ＝ S)O-、 -C( ＝ S)R5-、 -C( ＝ S)NH-、 -C( ＝ S)NHR5-、 -C( ＝ S) NR5-、 -NH-C( ＝ O)-、 -NR5-C( ＝ O)-、 -C( ＝ O)(NHO)-、 -C( ＝ O)(NR5O)-、 -PH-、 -PR5-、 -P( ＝ O)H-、 -P( ＝ O)R5-、 -P( ＝ O)(OH)-、 -P( ＝ O)OR5- ； 其中 R5 和 R6 可以相同或不同， 并且可 以选自以上由 R1、 R2、 R3 和 R4 限定的残基 ；
     L1 和 L2 可 以 相 同 或 不 同， 并且可以代表单键或可以代表各自独立地选 自 -CH2-、 -O-、 ＞ C ＝ O、 -NH-、 -NR12-、 -S-、 ＞ C ＝ S、 -SO2-、 -C( ＝ O)-O-、 -C( ＝ S)-O-、 -C( ＝ O)-S-、 -C( ＝ S)-S-、 -C( ＝ O)NH-、 -C( ＝ O)NR14-、 -C( ＝ S)NH-、 -C( ＝ S)NR14-、 -C( ＝ NH)-、 -C( ＝ NH)-NH-、 C( ＝ NH)-NR14-、 -C( ＝ NR1)-NR14- 的部分， 其中 R12、 R13 和 R14 可 以相同或不同， 并且可以选自以上由 R1、 R2、 R3 和 R4 限定的残基 ； 和
     D 代表结构 (IVa) 或 (IVb) 的任意一个
     其中
     Cy2 是同型 - 或杂环的、 非芳香族或芳香族的、 非稠合或一次或两次稠合的、 环并 的结构元素， 并且直接结合结构的剩余部分， 其在杂芳香族残基的情况中， 可以含有基团 -N ＝、 -NH-、 -NR1-、 -S-、 -O-、 -S( ＝ O)-、 -S( ＝ O)2-、 P ＝、 -PH-、 -PR15-、 -P( ＝ O)-、 -OP( ＝ O)- 和 -P( ＝ O)O- 作为环成员， 其中碳或杂原子部分可以是结构部分 C(IVa) 和＝ A2(IVb) 各自的连接单位， 其中， 在非芳香族部分 Cy2 的情况中， 构成 Cy2 的环结构可以是饱和的， 可 以是部分不饱和的， 可以是非取代的或在任何化学上可能的位置上由以上对环脂肪族和芳 香族残基的取代基所限定的任意一个取代基来取代一次、 两次或多次， 并且 Cy2 可以包含 3 至 9 个环成员， 并且在稠合系统的情况中， 每个部分环中 3 至 9 个环成员 ； 和
     A2 可以代表选自＝ C、 ＝ CH、 ＝ CR16、 -O-、 -S-、 -NH- 和 -NR16-， 其中 R15 和 R16 可
     以相同或不同， 并且可以选自以上由 R1、 R2、 R3 和 R4 限定的残基。
     以上通式 (I) 的新型化合物作为由以上的通式 (I) 表示的中性分子可以是现有 的， 或可以合成， 或可以用于任何领域中， 特别是医学领域。作为选择地， 通式 (I) 的新型化 合物作为与生理学或药物学上可接受的有机或无机酸的酸式加成盐可以是现有的， 或可以 合成， 或可以用于任何领域中， 特别是医学领域。用于本发明通式 (I) 的化合物的这种酸式 加成盐的酸没有特别限制， 但合适地选自盐酸、 三氟醋酸、 酒石酸、 琥珀酸、 甲酸和 / 或柠檬 酸， 因此形成选自盐酸盐、 三氟醋酸盐、 酒石酸盐、 琥珀酸盐、 甲酸盐和 / 或柠檬酸盐的通式 (I) 的化合物的酸式加成盐。
     惊人地发现了对于以下详细描述的酶， 以上通式 (I) 的化合物本身具有抑制作 用。此外， 所述化合物在限定条件下反应成其他化合物， 因此是这些其他化合物的前体。这 些其他的化合物依次也是二肽基肽酶 IV(DPIV) 和具有类似酶作用的肽酶的酶的抑制剂 / 配体， 并且也是丙氨酰氨基肽酶 N(APN) 和具有类似酶作用的肽酶的酶的抑制剂 / 配体。
     在本发明的说明书和权利要求中所用的术语 “包含 (comprise)” ， 例如， 在权利要 求 15 或权利要求 17 中， 具有如下含义 ： 本发明所述组合物可以包含 (i) 至少一种通式 (I) 的化合物或可以包含 (ii) 两种或多种通式 (I) 的化合物， 或含义是 (iii) 该组合物还可以 包含更多成分 ( 以下将更具体地限定 )。 然而， 在本发明的说明书和权利要求中所用的术语 “包含 (comprise)” 还包括其 中本发明的组合物主要由 (i) 至少一种通式 (I) 的化合物组成或主要由 (ii) 两种或多种 通式 (I) 的化合物组成， 任选地与本领域技术人员可以引入至该组合物的任何所需成分一 起， 以实现本发明的目的的情况， 或可能甚至包括其中本发明的组合物仅由 (i) 至少一种 通式 (I) 的化合物组成或仅由 (ii) 两种或多种通式 (I) 的化合物组成的情况， 任选地与本 领域技术人员可以引入至该组合物中的任何所需成分一起， 以实现本发明目的的情况。
     换言之， 术语 “包含 (comprise)” 或 “包含 (comprises)” 或 “包含 (comprising)” 在本发明的说明书和权利要求中可能具有描述要素的穷举性或替换地非穷举性的列举的 含义。
     在以下说明书和权利要求中使用的术语 “二 肽 基 肽 酶 IV” (DPIV， CD26， EC 3.4.14.5)， 认为丝氨酸蛋白酶特异性地催化肽的 N- 末端第二个位置的脯氨酸之后以及较 低程度的丙氨酸之后或限制性地其他氨基酸 ( 如， 丝氨酸、 苏氨酸、 缬氨酸和甘氨酸 ) 各自 之后的肽键水解。
     在本发明的说明书和在权利要求中使用的术语 “具有二肽基肽酶 IV 类似酶作用 的肽酶” ， 认为该肽酶特异性地催化 N- 术端第二个位置的脯氨酸或丙氨酸之后的肽水解。 具有二肽基肽酶 IV 类似酶作用的肽酶的例子为， 并非限定本发明于， DP 8、 DP 9 和 FAP/ Seprase[T.Chen 等人， a.a.O.] 和吸引素 ( 红木蛋白 )[J.S.Duke-Cohan 等人， a.a.O.]。
     在本发明的说明书和权利要求中使用的术语 “丙氨酰氨基肽酶 N” (APN， CD13， EC 3.4.11.2)， 认为该蛋白酶以金属 -( 锌 -) 依赖性起作用， 并且特异性催化肽的 N- 末端氨基 酸之后的肽键的水解， 优选 N- 末端的丙氨酸。
     在本发明的说明书和权利要求中使用的术语 “具有丙氨酰氨基肽酶 N 类似酶作用 的肽酶” ， 认为该肽酶与 APN 相似， 以金属依赖性地起作用， 并且特异性催化肽的 N- 末端氨 基酸之后的肽键的水解， 优选 N- 末端的丙氨酸。具有丙氨酰氨基肽酶 N 类似酶作用的肽
     酶的例子为， 并非限定本发明于， 细胞溶质可溶性丙氨酰氨基肽酶 (EC 3.4.11.14， 嘌呤霉 素 - 灵敏性氨基肽酶、 氨基肽酶 PS、 脑啡肽降解氨基肽酶 )[A.J.Barret 等人， a.a.O.]。
     在本发明的说明书和在权利要求中使用的术语 “抑制剂” 和 “配体” ， 认为这样的 天然来源、 合成来源或天然来源用合成修饰的化合物对酶或一组酶具有调节， 特别是抑制 作用。 这样的调节或特别是抑制作用可以是主要地或部分地作用于酶的中心孔结合位点或 酶。
     这没有排除在转化成具有限定的药学 ( 例如， 抑制 ) 作用的药物之前， 本身能够产 生药学作用 ( 例如， 抑制上述两种酶之一或两种酶 ) 的前体。
     在本发明的说明书和权利要求中使用的术语 “烷基残基” ， 认为是由通过单键彼此 连接的碳原子和结合碳原子的氢原子形成的单价直链 (“非支链” ) 或支链残基。因此， 根 据本发明的烷基残基是饱和的单价烃残基。优选地通式 (1) 化合物中的烷基残基包含 1 至 18 个碳原子， 并且因此选自残基甲基、 乙基、 正 - 丙基、 异 - 丙基以及大量以下残基的不同直 链和支链异构体 ： 丁基、 戊基、 己基、 庚基、 辛基、 壬基、 癸基、 十一烷基、 十二烷基、 十三烷基、 十四烷基、 十五烷基、 十六烷基、 十七烷基和十八烷基。特别优选的为具有 1 至 12 个碳原子 的直链和支链烷基残基。甚至更优选具有 1 至 6 个碳原子的直链和支链烷基残基。在本发 明的说明书和权利要求中， 具有 1 至 6 个碳原子的烷基残基有时也指 “低级烷基” 残基。最 优选的烷基残基为残基甲基、 乙基、 正 - 丙基、 异 - 丙基、 正 - 丁基、 异 - 丁基、 仲丁基和叔丁 基。 因此， 在本发明的说明书和权利要求中， 对于术语 “烯基残基” 和 “炔基残基” ， 认为 是通过单键和至少一个双键或三键的彼此连接的碳原子的单价直链 (“非支链” ) 或支链 残基， 单键、 双键或三键各自在分子中任何的但限定的位置， 氢原子结合碳原子的剩余键， 所述分子具有至少 2 个碳原子并且高达 18 个碳原子。优选地通式 (1) 化合物中的烯基残 基或炔基残基包含 2 至 18 个碳原子， 因此选自残基乙烯基 / 乙炔基、 正 - 丙烯基 / 丙炔基、 异 - 丙烯基 / 丙炔基， 以及大量以下残基的不同直链和支链异构体 ： 丁烯基 / 丁炔基、 戊烯 基 / 戊炔基、 己烯基 / 己炔基、 庚烯基 / 庚炔基、 辛烯基 / 辛炔基、 壬烯基 / 壬炔基、 癸烯基 / 癸炔基、 十一烯基 / 十一炔基、 十二烯基 / 十二炔基、 十三烯基 / 十三炔基、 十四烯基 / 十四 炔基、 十五烯基 / 十五炔基、 十六烯基 / 十六炔基、 十七烯基 / 十七炔基和十八烯基 / 十八 炔基。特别优选的是具有 1 至 12 个碳原子的直链和支链烯基 / 炔基残基。甚至更优选具 有 1 至 6 个碳原子的直链和支链烯基 / 炔基。在本发明的说明书和权利要求中， 具有 1 至 6 个碳原子的烯基 / 炔基残基有时也指 “低级烯基” 或 “低级炔基” 残基。最优选的烯基 / 乙炔基、 正 - 丙烯基、 烯丙基、 正 - 丙炔 炔基残基是残基乙烯基 (ethenyl)、 乙烯基 (vinyl)、 基、 异 - 丙烯基、 异 - 丙炔基、 正 - 丁烯基、 正 - 丁炔基、 异 - 丁烯基、 异 - 丁炔基、 仲 - 丁烯 基、 仲 - 丁炔基、 叔 - 丁烯基和叔 - 丁炔基。根据本发明的烯基和炔基残基还可以含有一个 多 C-C 键以上。这样的多 C-C- 键可以是分离的 C-C 多键 ( 即， 一个 C-C 单键以上在两个 C-C 多键之间 ) 或可以是轭合的 C-C 多键。轭合的 C-C 多键的常见例子可以在 1.3- 丁间二 烯 -3- 基残基中找到。然而， 含有碳 - 碳多键的残基不限于以上特意提及的所述残基。
     在本发明的说明书和权利要求中， 认为术语 “亚烃基残基” 是通过单键彼此连接的 碳原子的二价直链 (“非支链” ) 或支链残基， 其具有结合碳原子剩余键但没有结合另一个 碳原子的氢原子。因此， 根据本发明亚烃基残基为饱和的二价烃残基。优选地通式 (1) 和
     (2) 的化合物中的亚烃基残基包含 1 至 18 个碳原子， 并且选自残基亚甲基、 亚乙基、 正-亚 丙烯基、 2， 2- 亚丙基、 1， 2- 亚丙基和大量以下残基的不同直链和支链异构体 ： 亚丁基、 亚戊 基、 亚己基、 亚庚基、 亚辛基、 亚壬基、 亚癸基、 亚十一烷基、 亚十二烷基、 亚十三烷基、 亚十四 烷基、 亚十五烷基、 亚十六烷基、 亚十七烷基和亚十八烷基。特别优选的是具有 1 至 12 个碳 原子的直链和支链亚烃基残基。更优选具有 1 至 6 个碳原子的直链和支链亚烃基残基。在 本发明的说明书和权利要求中， 具有 1 至 6 个碳原子的亚烃基残基有时也指 “低级亚烃基” 残基。最优选的是残基亚甲基、 亚乙基、 正 - 亚丙基、 2， 2- 亚丙基、 1， 2- 亚丙基和大量不同 的亚丁基位置异构体。
     根据本发明的烷基残基和 / 或亚烃基残基可以是通式 (1) 的化合物的一部分， 碳 原子的链可以由 O- 原子、 N- 原子、 S- 原子或 P- 原子打断。因此， 在链的中间， 代替一个或 多个 -CH2- 基团可能存在一个或多个基团 -O-、 -NH-、 -S- 和 -P-， 而在链中， 通常不存在两 个 -O-、 -NH-、 -S- 和 / 或 -P- 基团彼此相接。所述一个或多个基团 -O-、 -NH-、 -S- 或 -P- 可 以插入分子中的任意位置。优选地， 如果存在同类 (ilk) 的杂基团， 则同类基团存在于分子 中。
     在进一步的实施方案中， 根据本发明的通式 (1) 的化合物中的直链以及支链烷 基 - 或亚烃基 - 残基可以是取代的， 具有一个或多个取代基， 优选一个取代基。甚至更优 选， 取代基选自以上对 R1、 R2、 R3 和 R4 所限定的那些残基。取代基可以位于由碳原子形成 的主链的任意位置， 并且优选地， 并非限制本发明于此， 选自卤素原子， 如氟、 氯、 溴和碘， 特 别优选氯和溴 ； 各自具有 1 至 6 个碳原子的烷基， 特别优选具有 1 至 4 个碳原子的烷基 ； 在 烷基残基中具有 1 至 6 个碳原子的烷氧基， 优选在烷基残基中具有 1 至 3 个碳原子的烷氧 基； 彼此独立地非取代的或 - 具有含有 1 至 6 个碳原子的一个或两个烷基残基， 优选 1 至 3 个碳原子 - 取代的氨基 ； 羰基和羧基。后者也可以以与具有 1 至 6 个碳原子的醇的盐或酯 形式存在于烷基残基中 ； 因此， 术语 “羧基” 包括通式结构 -COO-M+(M ＝单价金属原子， 如碱 金属原子， 或相应当量的多价金属原子， 如半当量的二价金属原子， 如碱土金属原子 ) 或通 式结构 -COORx(Rx ＝具有 1 至 6 个碳原子的烷基基团 )。取代的烷基基团选自以上详细提 及的烷基基团， 并且特别优选甲基、 乙基、 正 - 丙基、 异 - 丙基、 正 - 丁基、 异 - 丁基、 仲丁基 或叔丁基。
     烷氧基为通过 O- 原子键合至由碳原子形成的主链上的上述定义的烷基。优选选 自残基甲氧基、 乙氧基、 正 - 丙氧基、 异 - 丙氧基、 正 - 丁氧基、 异 - 丁氧基、 仲丁氧基和叔丁 氧基。
     氨基是通式结构 -NRxRy 的基团， 其中残基 Rx 和 Ry 可以彼此独立地指定为 ： 氢或具 有 1 至 6 个碳原子， 优选具有 1 至 3 个碳原子的烷基 ( 根据前述定义 )， 其中残基 Rx 和 Ry 可 以彼此相同或不同。 作为取代基特别优选的这样的氨基为 -NH2、 -NH(CH3)、 -N(CH3)2、 -NH(C2H “氨基” 还包含作为季钱离子存在的上述定义结构的基团， 或因为与有 5) 和 -N(C2H5)2。术语 + 机酸或无机酸形成盐 ( 例如， 结构 RxRyRzN Q 的残基， 其中 Rx、 Ry 和 Rz 可以相同或不同， 优选 相同， 并且 Rx 和 Ry 可具有上述定义的含义， 且至少一个残基是来自与有机酸或无机酸季铵 化的氢， Q 为来自有机酸或无机酸的酸的酸残基 ) 或者是因为与适当的本领域技术人员已 知的季铵化试剂形成盐， 所述季铵试剂例如 ( 但不限于 ) 烷基卤化物。
     在本发明的说明书和权利要求中， 术语 “环烷基” 用于以闭合环形式的彼此连接的非取代或取代的单价残基 -CH2- 基团。根据本发明， 所述环优选可以含有 3 至 8 个成环原 子， 可以或者只含有碳原子 (“碳环碳烷基残基” ) 或者含有一个或多个杂原子 (“杂环残 基” )， 所述杂原子选自 -O-、 -S- 和 -NRx-， 其中 Rx 是氢或具有 1 至 6 个碳原子的烷基残基 ( 如上定义 )。在将杂原子插入环中的情况中， 所述杂原子可以是 - 在一个杂原子以上的情 况中 - 相同或不同。优选， 在杂原子存在的情况中， 将一个杂原子插入环中。在纯碳环中特 别优选的是残基环戊基、 环戊烯基、 环戊二烯基、 环己基、 环己烯基、 环己二烯基、 环庚基、 环 庚烯基、 环庚二烯基和环庚三烯基。含杂原子的环烷基 - 残基 (“杂环残基” ) 的例子为残 基四氢呋喃基、 吡咯烷基、 吡唑烷基、 咪唑烷基、 哌啶基、 哌嗪基和吗啉基。
     在碳环或杂环环烷基残基上的可能取代基可以优选， 并非限制本发明于此， 选自 上述用于直链烷基的取代基。特别优选的用于环烷基的取代基是取代基 -Cl、 -Br、 -甲 基、 - 乙基、 - 正 - 丙基、 - 异 - 丙基、 - 正 - 丁基、 - 异 - 丁基、 - 仲丁基或 - 叔丁基、 - 甲氧 基、 - 乙氧基、 - 正 - 丙氧基、 - 异 - 丙氧基、 - 正 - 丁氧基、 - 异 - 丁氧基、 - 仲丁氧基和 - 叔 丁氧基、 -NH2、 -NH(CH3)、 -N(CH3)2、 -NH(C2H5) 和 -N(C2H5)2、 - 羰基和 - 羧基。
     在本发明的说明书和权利要求中， 术语 “环亚烃基” 用于连接闭合环的非取代或取 代的二价残基 -CH2- 基团。根据本发明， 这些可以优选在环中含有 3 至 8 个原子， 并且可以 或者只由碳原子组成或着含有一个或多个杂原子， 杂原子选自 -O-、 -S- 和 -NRx-， 其中 Rx 为 氢或具有 1 至 6 个碳原子的烷基 - 残基 ( 如上定义 )。特别优选的纯碳环为残基环亚戊基、 环亚戊烯基、 环亚戊二烯基、 环亚己基、 环亚己烯基、 环亚己二烯基、 环亚庚基、 环亚庚烯基、 环亚庚二烯基和环亚庚三烯基。此外， 上述关于环烷基定义的杂环基团可以以二价残基形 式的基团 “B” 出现在通式 (I) 的化合物中， 并且特别优选其中一个基团 -O- 或 -NRx- 插入环 中的环二价残基。在那些情况中， 两个化合价位于环中的任意碳原子上。优选， 一个杂原子 或两个杂原子插入环中， 并且在该基团特别优选的实施方案中， 二价残基衍生自四氢呋喃、 吡咯烷、 吡唑烷、 咪唑啉、 哌啶、 哌嗪和吗啉。
     在这些碳环或杂环环亚烃基残基上的可能取代基可以优选， 并非限制本发明 于此， 选自上述用于直链烷基的取代基。特别优选的用于环亚烃基的取代基为取代 基 -Cl、 -Br、 - 甲基、 - 乙基、 - 正 - 丙基、 - 异 - 丙基、 - 正 - 丁基、 - 异 - 丁基、 - 仲丁基或 - 叔 丁基、 - 甲氧基、 - 乙氧基、 - 正 - 丙氧基、 - 异 - 丙氧基、 - 正 - 丁氧基、 - 异 - 丁氧基、 -仲 丁氧基和 - 叔丁氧基、 -NH2、 -NH(CH3)、 -N(CH3)2、 -NH(C2H5) 和 -N(C2H5)2、 - 羰基和 - 羧基。
     在本发明的说明书和权利要求中， 使用术语 “芳基残基” ， 认为是衍生自具有芳香 特征 ( 在环形轨域中离域的 4n+2π- 电子 ) 的环状分子的单价烃残基， 其可以是非取代或 取代。这种芳基残基的环结构可以是具有一个环的五、 六或七元环结构， 或由两个或多个 (“环并的” ) 环彼此键合形成的结构， 其中环并的环具有相同或不同数量的环成员， 特别是 碳原子。 在由至少两个彼此稠合的环组成的系统的情况下， 苯并稠合环是特别优选的， 即其 中至少一个环是芳香的、 仅含有 C- 原子的六元环 ( 例如， 苯环 ) 的环系统。芳基环的典型 但非限制性的例子为环戊二烯基 - 残基 (C5H5 )( 为五元芳基环 )、 苯基 - 残基 ( 为六元芳基 + 环 )、 环庚三烯基 - 残基 (C7H7 )( 为七元芳基环 )、 萘基 - 残基 ( 为包含两个环并的六元环 的环系统 ) 以及衍生自蒽和菲 ( 为三个环并的六元环 ) 的单价残基。根据本发明， 最优选 的芳基残基为苯基 - 和萘基 - 残基。
     碳环芳基 - 残基的可能取代基可以优选选自以上对于直链烷基提及的取代基， 并非限制本发明于这些取代基。 特别优选的用于芳基的取代基为取代基 -Cl、 -Br、 - 甲基、 -乙 基、 - 正 - 丙基、 - 异 - 丙基、 - 正 - 丁基、 - 异 - 丁基、 - 仲丁基或 - 叔丁基、 - 甲氧基、 -乙 氧基、 - 正 - 丙氧基、 - 异 - 丙氧基、 - 正 - 丁氧基、 - 异 - 丁氧基、 - 仲丁氧基和 - 叔丁氧基 、 -NH2、 -NH(CH3)、 -N(CH3)2、 -NH(C2H5) 和 -N(C2H5)2、 - 羰基和 - 羧基。根据本发明， 该基团的 一个或多个彼此相同或不同的取代基可以键合一个芳基残基。在芳环 ( 系统 ) 上的取代位 置可以任意地选择。
     与芳基残基应用于本发明的说明书和权利要求的情况相似， 关于术语 “亚芳基残 基” 的定义具有相当的定义 ： 在这点上， 认为二价残基的元素组成、 选择和取代基与上述芳 基残基的定义相当， 除了其是可以在两个任意碳原子进行插入的二价残基。
     在本发明的说明书和权利要求中， 认为术语 “杂芳基残基” 是含有一个或多个杂原 子 ( 优选选自基团 O、 N 或 S) 且没有丧失分子芳香特征的环结构的芳基 - 残基 ( 根据上述 提及的定义 )。这样的杂芳基 - 残基的环结构可以或者是具有一个环的五、 六或七元环结 构， 或者由两个或多个 (“环并的” ) 环彼此键合形成的结构， 其中所述环并的环可具有相同 或不同数量的环成员。所述杂原子可以存在于环系统的一个单独的环中或超过一个环中， 或杂原子甚至存在于两个环并的环之间的 “桥” 上。
     杂芳基残基优选由一个或两个环组成。 在由一个以上环 ( 例如， 两个环 ) 彼此稠合 组成系统的情况中， 尤其优选苯并稠合环， 即其中至少一个环是芳香族碳环的 ( 即， 只含有 碳原子 ) 六元环的环系统。特别优选的杂芳基 - 残基选自呋喃基、 噻吩基、 吡啶基、 吲哚基、 2- 氧代 -1- 苯并吡喃基 (cumaronyl)、 硫萘次甲基、 喹啉基 ( 苯并吡啶基 )、 喹唑啉基 ( 苯并 嘧啶基 ) 或喹喔啉基 ( 苯并吡嗪基 )。
     根据本发明， 杂芳基残基可以是非取代或取代的。在这些杂芳基残基上的可能取 代基可以优选选自上述用于直链烷基的取代基的基团， 并非限制本发明于这些取代基。用 于杂芳基的特别优选的取代基为取代基 -Cl、 -Br、 - 甲基、 - 乙基、 - 正 - 丙基、 -异-丙 基、 - 正 - 丁基、 - 异 - 丁基、 - 仲丁基或 - 叔丁基、 - 甲氧基、 - 乙氧基、 - 正 - 丙氧基、 -异-丙 氧基、 - 正 - 丁氧基、 - 异 - 丁氧基、 - 仲丁氧基和 - 叔丁氧基、 -NH2、 -NH(CH3)、 -N(CH3)2、 -NH (C2H5) 和 -N(C2H5)2、 - 羰基和 - 羧基。根据本发明， 基团的一个或多个取代基， 其可以彼此 相同或不同， 可以键合到杂芳基 - 残基上。在杂芳基环 (- 系统 ) 上的取代位置可以任意地 选择。
     与杂芳基残基应用于本发明的说明书和权利要求的情况相似， 关于术语 “杂亚芳 基残基” 的定义具有相当的定义 ： 在这点上， 认为二价残基的一般组成、 选择和取代基与上 述 “杂芳基残基” 的定义相当， 除了其是各自地可以在环或环系统的两个任意碳原子或在氮 原子进行插入的二价残基。
     在本发明的说明书和权利要求的上下文中， 术语 “芳烷基残基” 、 “杂芳烷基残基” 、 “杂环烷基残基” 、 “芳基氨基烷基残基” 和 “杂芳基氨基烷基残基” 意思是根据上述一般和特 定定义的在它们与芳基残基 ( 根据上述一般和特定定义 )、 杂芳基残基 ( 根据上述一般和特 定定义 )、 杂环基残基 ( 根据上述由杂原子取代的环烷基残基的一般和特定定义 )、 芳基氨 基残基 ( 根据以下的一般和特定定义 ) 或杂芳基氨基残基 ( 根据以下的一般和特定定义 ) 的键之一上取代的烷基残基 ( 或 - 更具体地 - 亚烃基残基 )。这些残基可以是非取代或取 代的。在本发明的优选实施方案中， 芳烷基残基是其中芳基残基是苯基残基、 取代的苯 基残基、 萘基残基或取代的萘基残基的残基， 并且所述亚烃基是直链或支链的， 并且可以具 有 1 至 6 个碳原子。以非常特别和有利的方式， 残基苄基、 苯乙基、 萘甲基和萘乙基可以用 作芳烷基残基， 其中特别优选苄基。
     在芳烷基残基的芳基上的可能取代基优选选自以上对于直链烷基所述的取代基 基团， 并非限制本发明于那些取代基。特别优选的用于芳烷基残基的芳基的取代基是取 代基 -Cl、 -Br、 - 甲基、 - 乙基、 - 正 - 丙基、 - 异 - 丙基、 - 正 - 丁基、 - 异 - 丁基、 - 仲丁基 或 - 叔丁基、 - 甲氧基、 - 乙氧基、 - 正 - 丙氧基、 - 异 - 丙氧基、 - 正 - 丁氧基、 - 异 - 丁氧 基、 - 仲丁氧基和 - 叔丁氧基、 -NH2、 -NH(CH3)、 -N(CH3)2、 -NH(C2H5) 和 -N(C2H5)2、 - 羰基和 - 羧 基。根据本发明， 该基团的一个或多个彼此相同或不同的取代基可以键合芳烷基残基的一 个芳基。在芳环 ( 系统 ) 上的取代位置可以任意地选择。
     在本发明的优选实施方案中， 杂芳烷基残基是如下的残基 ： 其中根据本发明的杂 芳烷基残基的杂芳基残基是取代的， 并且所述亚烃基是直链或支链亚烃基并且可以具有 1 至 6 个碳原子。这样的杂芳基残基的环结构可以是具有一个环的环结构或由彼此键合的两 个或两个以上 (“环并的” ) 的环形成的结构， 其中环并的环可能具有相同或不同数量的环 成员。杂原子可以出现在环系统的一个或多个环中。杂芳基烷基残基的杂芳基优选由一个 或两个环组成。在由至少两个彼此稠合的环组成的杂芳基烷基系统的情况中， 苯并稠合的 环尤其优选， 即， 其中至少一个环是芳香族碳环六元环的环系统。 特别优选的杂芳基烷基残 基选自呋喃基甲基和 - 乙基、 硫代苯甲基和 - 乙基、 吡啶基甲基和 - 乙基、 吲哚基甲基和 - 乙 基、 2- 氧代 -1- 苯并吡喃基 (cumaronyl) 甲基和 - 乙基、 硫代萘甲基和 - 乙基、 喹啉基 -( 苯 并吡啶基 -) 甲基和 - 乙基、 喹唑啉基 -( 苯并嘧啶基 -) 和喹喔啉基 -( 苯并吡嗪基 -) 甲基 和 - 乙基。
     在杂芳基烷基 - 残基的这些杂芳基上可能的取代基可以优选选自以上对于直链 烷基所述的取代基基团， 并非限制本发明于此。特别优选的用于杂芳基的取代基是取代 基 -Cl、 -Br、 - 甲基、 - 乙基、 - 正 - 丙基、 - 异 - 丙基、 - 正 - 丁基、 - 异 - 丁基、 - 仲丁基或 - 叔 丁基、 - 甲氧基、 - 乙氧基、 - 正 - 丙氧基、 - 异 - 丙氧基、 - 正 - 丁氧基、 - 异 - 丁氧基、 -仲 丁氧基和 - 叔丁氧基、 -NH2、 -NH(CH3)、 -N(CH3)2、 -NH(C2H5) 和 -N(C2H5)2、 - 羰基和 - 羧基。根 据本发明， 该基团的一个或多个彼此相同或不同的取代基可以键合杂芳基烷基残基。在杂 芳环 ( 系统 ) 上的取代位置可以任意地选择。
     在本发明的优选实施方案中， 杂环烷基残基是根据上述一般和特定定义的环烷基 残基， 其含有一个或多个选自 -O-、 -S- 和 -NRx- 的杂原子， 其中 Rx 是氢或具有 1 至 6 个碳原 子的烷基残基 ( 如上定义 )， 并且杂环烷基残基的亚烃基是直链或支链的， 并且可以具有 1 至 6 个碳原子。在至少两个杂原子插入环中的情况中， 这些可以相同或不同。优选， 一个杂 原子并入环中。在本发明进一步的实施方案中， 含有也指杂环烷基残基的环烷基残基的杂 原子的优选例子是残基四氢呋喃基、 吡咯啉基、 吡唑烷基、 咪唑烷基、 哌啶基、 哌嗪基和吗啉 基。
     在这些杂环烷基残基上可能的取代基优选选自以上对于直链烷基所述的取代基， 并非限制本发明于那些取代基。特别优选的用于杂芳基的取代基是取代基 -Cl、 -Br、 -甲 基、 - 乙基、 - 正 - 丙基、 - 异 - 丙基、 - 正 - 丁基、 - 异 - 丁基、 - 仲丁基或 - 叔丁基、 - 甲氧基、 - 乙氧基、 - 正 - 丙氧基、 - 异 - 丙氧基、 - 正 - 丁氧基、 - 异 - 丁氧基、 - 仲丁氧基和 - 叔 丁氧基、 -NH2、 -NH(CH3)、 -N(CH3)2、 -NH(C2H5) 和 -N(C2H5)2、 - 羰基和 - 羧基。根据本发明， 该 基团的一个或多个彼此相同或不同的取代基可以键合一个杂环烷基残基。在杂环烷基环 ( 系统 ) 上的取代位置可以任意地选择。
     在本发明的说明书和权利要求中， 使用术语 “芳基氨基烷基 - 残基” 和 “杂芳基氨 基烷基 - 残基” ， 认为是在其一个键上由通式 Ar-NRx-C( ＝ O)- 或通式 Ar-C( ＝ O)-NRx- 的 芳基氨基 - 残基或杂芳基氨基 - 残基取代的根据上述一般和特定定义的烷基残基 ( 更确切 地： 亚烃基 - 残基 )， 其中 Rx 为氢或具有 1 至 6 个碳原子的烷基， Ar 为根据上述一般或特定 定义的任意的芳基残基或杂芳基残基。这些芳基或杂芳基残基可以是非取代或取代的。芳 基氨基烷基残基的优选例子， 并非限制本发明， 为 2-、 3- 或 4- 苯甲酸 - 氨基 - 正 - 丁基残 基或 2- 硝基 -3-、 -4-、 -5- 或 -6- 苯甲酸 - 氨基 - 正 - 丁基 - 残基 ； 优选但非限制性的杂 芳基氨基烷基残基的例子为 2-、 4-、 5- 或 6- 吡啶 -3- 碳酸 - 氨基 - 正 - 丁基残基。
     在这些芳基氨基烷基残基和杂芳基氨基烷基残基上可能的取代基可以优选选自 对于直链烷基所述的取代基， 并非限制本发明于那些取代基。特别优选的用于芳基氨基烷 基残基和杂芳基氨基烷基残基的芳基或杂芳基的取代基是取代基 -Cl、 -Br、 - 甲基、 -乙 基、 - 正 - 丙基、 - 异 - 丙基、 - 正 - 丁基、 - 异 - 丁基、 - 仲丁基或 - 叔丁基、 - 甲氧基、 -乙 氧基、 - 正 - 丙氧基、 - 异 - 丙氧基、 - 正 - 丁氧基、 - 异 - 丁氧基、 - 仲丁氧基和 - 叔丁氧基 、 -NH2、 -NH(CH3)、 -N(CH3)2、 -NH(C2H5) 和 -N(C2H5)2、 - 羰基和 - 羧基。根据本发明， 该基团的 一个或多个彼此相同或不同的取代基可以键合芳基氨基烷基残基或杂芳基氨基烷基残基 的芳基或杂芳基基团。在芳香环 (- 系统 ) 上的取代位置可以任意地选择。
     与芳烷基残基、 杂芳基烷基残基、 杂环烷基残基、 芳基氨基烷基残基和杂芳基氨 基烷基残基应用于本发明的说明书和权利要求的上下文情况相似， 关于术语 “芳亚烷基残 基” 、 “杂芳亚烷基残基” 、 “杂环亚烷基残基” 、 “芳基氨基亚烷基残基” 和 “杂芳基氨基亚烷基 残基” 的定义具有相当的定义 ： 将这些理解为其一般组成及其选择和取代基与上述 “芳烷 基残基” 、 “杂芳基烷基残基” 、 “杂环烷基残基” 、 “芳基氨基烷基残基” 和 “杂芳基氨基烷基残 基” 的定义相当的二价残基， 除了在任何情况中， 二价残基中可以各自地在亚烃基环或环系 统的两个任意碳原子， 或在杂芳基或杂环基环系统的氮原子进行插入。
     根据本发明， 通式 (I) 的化合物以中性分子的形式存在， 并且根据本发明， 以中性 分子应用。 作为选择地， 通式 (I) 的化合物也可以作为与有机酸和 / 或无机酸的酸式加成盐 的形式存在。由于分子中碱性原子 ( 即， 带有游离的电子对 ； 大部分碱性氮原子 ) 的存在， 的分子来形成这样的酸式加成 通过加入一种或多种 H- 酸化合物 ( 质子酸 盐， 优选一种 H- 酸化合物的分子， 并且提供分子提高的在极性介质上 ( 例如， 水中 ) 的溶解 性。
     后一种特征对于这些产生药学作用的化合物具有特别的影响。
     在本发明的优选实施方案中， 酸式加成盐是从通式 (I) 化合物的盐酸盐、 三氟醋 酸盐、 酒石酸盐、 琥珀酸盐、 甲酸盐和 / 或柠檬酸盐有利地选择 ( 但没有限制本发明 ) 药学 上可接受酸的盐。 在本发明特别优选的实施方案中， 存在制备的多种示例性 ( 非限制性 ) 通式 (I) 的化合物， 其显示和概括于随后的表 1 中。根据公认的有机化学的合成方法来制备化合物。
     在以下本说明书的实验部分描述了特定的合成实施例。 然而， 所述的合成途径是示例性的， 并且仅仅是为了更好地理解本发明而提供， 并非限制本发明。
     1、 酶测量 1.1、 酶活性以及 DPIV 和相关酶的抑制的测量通过使用纯化的重组人 DPIV( 从转染的 Sf9 细胞纯化， 最终的酶浓度大约 1nM) 以 及纯化的重组 DP8 和 DP9( 购自 Biomol) 测量了 DPIV 和相关酶的酶活性的抑制。在补充了 0.05％曲通 (v/v)、 0.05％ BSA(w/v)、 2mM MgCl2 的 pH7.5 的 0.05MTRIS/HCl 缓冲液中进行 了试验。
     通过荧光底物 H-Gly-Pro-4- 氨基 -7- 甲基香豆素 ( 缩写为荧光基团 AMC ； 购自 Bachem) 或 (Ala-Pro)2- 若丹明 110( 缩写为 R110) 的水解来测定 DPIV 的酶活性。最终的 底物浓度各自为 50μM 或 1μM。
     在用于荧光测量的白色微滴定平板中进行了试验。将测试物质、 底物和酶稀释于 试验缓冲液中。所用的最高测试物质浓度为 25μM。为了计算 IC50 值， 分析了至少 16 个 log2- 稀释度的每种测试物质。 作为对照， 测定了不存在测试物质以及底物的自发性水解下 的 DPIV 活性。
     在加入底物后立即以及 30、 60 和 120min， 在 380nm 的激发波长和 460nm 的发射波 长下测量了荧光水解产物 AMC 的释放。在 488nm 的激发波长和 530nm 的发射波长下测定了 底物 (Ala-Pro)2- 若丹明 110 的水解。
     1.2、 酶活性和氨基肽酶抑制的测量
     通过使用纯化的重组人酶 ( 从转染的 ECV 细胞纯化， 最终的酶浓度大约为 1nM)， 测 量了氨基肽酶 N(APN) 的酶活性的抑制。从不表达 APN 的 Jurkat 细胞纯化了细胞溶质氨基 肽酶 (cAAP)。在补充了 0.05 ％曲通 (v/v)、 0.05 ％ BSA(w/v)、 2mMMgCl2 的 pH7.5 的 0.05M TRIS/HCl 缓冲液中进行了试验。
     通过荧光底物 H-Ala-4- 氨基 -7- 甲基香豆素 ( 缩写为荧光基团 AMC ； 购自 Bachem) 或 (Ala-Pro)2- 若丹明 110( 缩写为 R110) 的水解来测定氨基肽酶活性。最终的底物浓度 各自再次为 50 和 1μM。
     在用于荧光测量的白色微滴定平板中进行了试验。将测试物质、 底物和酶稀释于 试验缓冲剂中。所用的最高测试物质浓度为 25μM。为了计算 IC50 值， 分析了至少 16 个 log2- 稀释度的每种测试物质。 作为对照， 测定了不存在测试物质以及底物自发性水解下的 DPIV 活性。
     如以上对于 DPIV 底物所述的， 测量了荧光水解产物 AMC 和 R110 的释放。
     2、 评价测试物质对不同细胞类型中的 DNA 合成的作用
     2.1、 人外周血单核细胞和 T 淋巴细胞增殖的抑制
     通过密度梯度离心来新鲜分离来自健康人志愿者的外周血单核细胞 (PBMC)。 通过 尼龙丝吸附从 PBMC 级分中分离出 T 淋巴细胞 (T 细胞 )。在无血清淋巴细胞培养基 (AIMV 培养基， Invitrogen) 中培养两种细胞群， 并在 96 孔平底微滴定平板中通过加入 1μg/ml 植 物血球凝集素来刺激 48 小时。在整个试验过程中， 加入从 0.1 至高达 250μM 浓度范围的 测试化合物。
     通过结合核苷酸类似物溴脱氧尿苷 (BrdU) 测定增殖 PBMC 的 DNA 合成， 随后根据 TM 制造商的方案， 通过 ELISA 技术 (Cell Proliferation Biotrak ELISA 系统， GE Health Care) 检测 BrdU。通过结合放射性标记的氚胸苷嘧啶和随后的放射性检测测定增殖 T 细胞 的 DNA 合成。
     数据输出是基于原始数据以及关于在测试化合物不存在下 (100％对照 ) 的 PHA 激活 T 细胞的相对增殖应答的计算。通过图形评价测定增殖抑制的 IC50 值。
     2.2、 DNA 合成和正常人表皮角化细胞 (NHEK) 增殖的抑制
     NHEK 细胞 ( 来自 30 岁女性高加索人的初级细胞 ) 购自 PromoCell。对于这些试 验， 在平底微滴定平板中， 在补充了表皮生长因子 (EGF) 和牛垂体提取物的无血清角化细 胞生长培养基 2 中将粘附细胞培养 48 小时。加入从 0.1 至高达 100μM 浓度的测试物质。
     通过结合溴脱氧尿苷 (BrdU) 测定 DNA 合成， 随后通过 ELISA 技术检测 BrdU。基于 这些原始数据， 计算了关于在测试化合物不存在下 (100％对照 ) 培养的细胞的相对增殖应 答。通过计算机辅助图形评价测定了增殖抑制的 IC50 值。
     2.3、 DNA 合成和不朽人皮脂腺细胞增殖的抑制
     不 朽 人 皮 脂 腺 细 胞 系 SZ95 由 Prof.C Zouboulis 提 供 [CC Zouboulis， H Seltmann， H Neitzel， CE Orfanos， Establishment and characterization of an immortalized human sebaceous gland cell line(SZ95)， J.Invest.Dermatol.113(6) ： 1011-1020(1999)]。 在 无 血 清 人 皮 脂 腺 细 胞 系 SZ95 完 全 培 养 基 (Sebomed Complete) (Biochrom) 中培养这些粘附生长细胞。 加入重组 EGF， 以刺激 SZ95 细胞的 DNA 合成和增殖。 以 0.1 至高达 100μM 的浓度加入测试物质。
     通过结合放射性标记的氚胸腺嘧啶 (3HT) 并在 β 计数器上计数检测增殖细胞的 DNA 合成。基于这些原始数据， 计算了关于在测试化合物不存在下 (100％对照 ) 培养的细 胞的相对增殖应答。通过计算机辅助图形评价测定了增殖抑制的 IC50 值。
     3、 计算分析
     所有酶数据与 DPIV 晶体结构相关， 通过 H.B.Rasmussen 等人， 2003 解答。
     活性位点袋周围的蛋白表面的详细研究揭示了活性位点袋和中心通路之间的中 心孔 ( 通道 ) 内的浅谷。用已知的 DPIV 抑制剂运行的几个对接， 包括在此讨论的活性位点 袋和浅谷区域周围的区域， 产生在对于活性位点袋内的各自抑制剂的结合得到的那些一个 或两个数量级内的浅谷区域的结合常数得到。 对接程序内考虑过的区域限制和对宽范围化 合物的应用证明该浅谷是可能的作为选择的结合位点。 将该结合位点命名为中心孔结合位 点。
     对于几何研究， 活性位点袋由 GLU205、 GLU206 和 ARG358 来表示， 中心孔结合位点 GLU361、 HIS363 和 GLU408。
     该模型中包括了两个关键距离。 用于表征中心孔结合位点内小分子朝向活性位点 袋的位置的第一个距离是 ARG206 的羧基碳和抑制剂 / 配体的坐标中心之间 (ras)。第二个 是 DPIV 中心孔的中心通道点和抑制剂 / 配体物质中心之间 (rcpbs)， 其表征朝向中心孔入口 的抑制剂 / 配体的位置。抑制剂 / 配体的 van der Waals 表面 AvdW 表示 DPIV 中心通道孔 的阻碍。另外， 抑制剂 / 配体和代表中心孔结合位点的至少两个残基之间的短极性接触对 于稳定的热力学相互作用是关键的。
     4、 分子对接和量子化学计算
     使用 Windows XP 下的 4CPU 计算机系统上的 Autodock 4 包 [www.Scripps.edu] 进行对接研究。
     对于对接程序， 我们使用二聚 DPIV 晶体结构的 A- 单体。之前除去了此处考虑的 单体区域内的水分子。对于所有对接， 进行了 256 个一般算法运行。使用 ChemSketch 软件包 [www.acdlabs.com] 中执行的力场程序预先优化了配体 / 抑制剂分子。用 ChemSketch 软件包 [www.acdlabs.com] 中作为任选附加 (add-on) 的方 法计算 LogP 值。
     使 用 MOPAC2002[http://cache.fujitsu.com/mopac/index.shtml] 中 进 行 的 COSMO 方法 [A.Klamt 等人， Journal of the Chemical Society， Perkin Transaction 2， 799(1993)] 得到得到分子体积和表面。
     5、 作为 T 细胞增殖抑制模型的多线性回归分析
     我们根据以下等式研发了 T 细胞增殖抑制的三个描述符线性回归分析 ：
     Ln[ 计算的 DNA-Supp.] ＝ c0+c1[Ln[KCPBS]+c2[r2AS-r2CPBS]+c3[NA]
     使用以下缩写 ：
     DNA-Supp. 是 T- 细胞 DNA- 合成抑制的 IC50 ；
     KCPBS 是中心孔结合位点的表观亲和性 ；
     AS 意思是活性位点 ；
     CPBS 表示中心孔结合位点 ；
     r2AS-r2CPBS 是中心孔结合位点和活性位点的平方距离与中心孔结合位点和通道位 点之间的平方距离之间的差异。
     通过 Glu206 残基的羧基碳原子的坐标来限定活性位点， 通过结合 His363 附近的 中心孔结合位点的配体的坐标中心来限定中心孔结合位点， 通过 Glu464 附近的中心孔通 道的大致中心点来限定通道位点。
     对于在此讨论的模型， 最有利的距离相关参数是在此考虑的两个平方距离的差 2 2 异， r as-r CPBS。它们以平方形式的表示似乎对于避免不同位置的相等差异的出现是必须的， 因为这对于简单的距离差异是可能的。NA 是氨基的数目。C0、 C1、 C2 和 C3 是通过根据最小平 方方法的回归计算确定的线性系数。
     由于其热力学和动力学背景， 以上引入的回归等式使用了 DNA-Supp 和 KCPBS 的天然 算法。以 μM 给出它们的值。校准数据组含有 41 个结构上不同的化合物的总数， 使用 3.23 至 200 的 DNA-Supp 值。相关系数 R 是 0.8213， 标准偏差 ( 对数 ) 是 0.7647。
     在附图中显示了根据本发明的通式 (I) 的新型化合物和示例性酶二肽酰肽酶 (DPIV) 和氨基肽酶 N(APN) 之间的相互作用的基本原理。
     根据本发明， 以上通式 (I) 中概括的化合物， 或上述根据表 1 的化合物， 是用于医 学领域中的化合物。在本发明说明书和权利要求中， 对于以上通式 (I) 概括的一种化合物 或以上通式 (I) 概括的的两种或多种化合物或上述根据表 1 的化合物的用途以最宽意思来 理解术语 “用于医学领域中” ， 其是用于医学领域的任何用途， 例如， 作为在身体 ( 优选哺乳 动物身体， 更优选人体 ) 中具有医学作用的物质的效应物 ； 作为其自身具有医学作用的物 质， 所述医学作用取决于其对需要这样的对抗疾病或病理状况的物质的身体 ( 优选哺乳动 物身体， 更优选人体 ) 的作用 ； 作为药物或药学有效制剂的成分， 所述药物或药学有效制剂 对需要这样的对抗疾病或病理状况的药物或药学有效制剂的身体 ( 优选哺乳动物身体， 更 优选人体 ) 发挥作用 ； 或作为诊断制剂的陈分， 所述诊断制剂对给药或施用这些在诊断上 有效的对抗疾病或病理状况的制剂的身体 ( 优选哺乳动物身体， 更优选人体 ) 发挥作用或 寻找作用。在医学领域中的用途的例子 ( 其没有限制本发明 ) 是疾病或病理状况的治疗 ；疾病或病理状况影响的预防 ； 身体从疾病或病理状况中的恢复状态的改善 ； 预防身体在其 他时间免受之前身体已经遭受的疾病或病理状况 ； 用于测试身体受到对抗疾病或病理状况 的保护、 受到疾病或病理状况的影响或从疾病或病理状况恢复的状态的诊断程序， 这只是 列举了一些所具有的例子。
     发现以上通式 (I) 中概括的所有化合物， 或所有以上提及的根据表 1 的化合物， 适 合于医学领域中应用。对于通式 (I) 概括的化合物或上述根据表 1 的化合物中的任何一种 或多种在医学领域中的应用， 代表性化合物作用的特定机理可以是由本发明说明书提出的 机理。 然而， 说明书中描述的作用机理不被解释为是本发明的限制， 而只是具有示例性特征 并且代表形成本发明时本发明的最佳方式， 而且可以是除了以上所述以外的另一种 ( 任选 相关的 ) 机理。
     具体地， 以上通式 (I) 概括的化合物或上述根据表 1 的化合物的特征在于通过抑 制 T 淋巴细胞、 角化细胞和皮脂腺细胞的 DNA 合成 ( 增殖 ) 或通过结合中心孔结合位点和 阻断物质进入细胞 APN 和 DPIV 的活性位点， 酶抑制 DPIV 和 APN 的能力。这通过对接方法， 使用两种肽酶和通式 (I) 概括的化合物或上述根据表 1 的化合物的晶体结构来限定。
     更具体地， 以上通式 (I) 概括的化合物或上述根据表 1 的化合物用作二肽酰肽酶 IV 或具有 DPIV 类似酶作用的肽酶和丙氨酰氨基肽酶 N(APN) 和具有 APN 类似酶作用的肽酶 的双重抑制剂或中心孔结合配体。甚至更具体地， 以上通式 (I) 的化合物用于在体外和体 内抑制 DNA 合成和炎症细胞因子产生以及刺激抗炎细胞因子产生。
     本发明人惊人地发现根据选自二肽酰肽酶 IV 和具有 DPIV 类似酶作用的肽酶和丙 氨酰氨基肽酶 N(APN) 和具有 APN 类似酶作用的肽酶的胞外肽酶的抑制的一般原理， 通式 (I) 概括的化合物， 或上述根据表 1 的化合物， 适合于用于预防和治疗自体免疫疾病、 具有 过度免疫应答和 / 或炎症起源的疾病， 包括动脉硬化、 神经元疾病、 大脑损伤、 皮肤病、 肿瘤 疾病、 移植排斥、 移植对宿主疾病 (Graft-versus-Host Diseases)(GvHD) 和病毒或细菌引 起的疾病。
     此外， 在本发明的优选实施方案中， 通式 (I) 概括的化合物或上述根据表 1 的化合 物， 适合于用于预防和治疗选自多发性硬化、 克罗恩病、 溃疡性结肠炎、 I 型糖尿病、 风湿性 关节炎、 动脉粥样硬化、 动脉炎、 支架 - 再狭窄和其他自体免疫疾病以及炎症疾病的疾病或 病症。
     在本发明进一步优选的实施方案中， 通式 (I) 概括的化合物或上述根据表 1 的化 合物， 用于预防和治疗肿瘤以及转移。
     本发明进一步优选的实施方案涉及通式 (I) 概括的化合物或上述根据表 1 的化合 物， 用于预防和治疗选自皮肽 - 和粘膜 - 相关疾病、 牛皮癣、 痤疮以及具有高增殖和改变的 成纤维细胞分化状况的皮肤病、 良性纤维化和硬化性皮肤病和恶性高增殖成纤维细胞病症 的疾病或病症。
     在本发明进一步优选的实施方案中， 通式 (I) 概括的化合物或上述根据表 1 的化 合物， 用于预防和治疗支气管哮喘和其他过敏性疾病以及慢性梗阻性肺病 (COPD) 的疾病 或病症。
     作为进一步优选的实施方案， 本发明包括通式 (I) 概括的化合物， 或上述根据表 1 的化合物， 用于治疗和预防选自急性神经元疾病、 缺血或出血性卒中后的缺血引起的大脑损伤、 颅脑损伤、 心搏停止、 心脏病发作或作为心外手术干预的结果、 慢性神经元疾病 ( 例 如， 阿尔茨海默氏病 )、 Pick- 病、 渐进性上核瘫痪、 皮质基底核退化、 额颞痴呆、 帕金森病 ( 尤其是与染色体 17 相关的帕金森病 )、 亨廷顿病、 朊病毒引起的病症或疾病和肌萎缩性侧 索硬化的疾病和病症。
     此外， 在进一步优选的实施方案中， 本发明包括通式 (I) 概括的化合物， 或上述根 据表 1 的化合物， 用于治疗和防止 / 预防异基因或异种基因移植器官、 组织和细胞 ( 如骨 髓、 肾脏、 心脏、 肝、 胰腺、 皮肤或干细胞 ) 和支架、 关节移植物 ( 膝关节移植物、 臀关节移植 物 )、 骨移植物、 心脏起搏器或其他植入物、 气管球囊的排斥， 以及移植对宿主疾病 (GvHD)。
     此外， 本发明进一步优选的实施方案包括通式 (I) 概括的化合物， 或上述根据表 1 的化合物， 用于防止 / 预防和治疗选自炎性传染病 ( 如疟疾 )、 严重急性呼吸综合症 (SARS) 和脓毒病和脓毒病样病症的疾病或病症。
     通式 (I) 概括的化合物， 或上述根据表 1 的化合物， 可以作为合成的或在本领域 技术人员已知的合适纯化后来使用， 将化合物用于医学领域中， 作为一种化合物单独使用 或作为两种乃至更多种化合物来使用。通式 (I) 概括的化合物， 或上述根据表 1 的化合 物， 可以单独使用或， 作为选择地， 可以结合一种或多种药学上可接受的载体、 辅助物质和 / 或佐剂来使用。根据本发明， 可以使用一种药学上可接受的载体和 / 或辅助物质和 / 或 佐剂， 或可以使用两种乃至更多种药学上可接受的载体和 / 或辅助物质和 / 或佐剂。这样 的药学上可接受的载体、 辅助物质和 / 或佐剂通常是医学领域已知的， 在此不需要详细描 述。此外， 可以参考涉及适用于医学领域的载体、 辅助物质和 / 或佐剂的标准教科书， 并且 其中之一是 “Remington， The Science and Practice ofPhatmacy ； Lippincott， Williams & Wilking( 编辑 )， 2000” 。
     在另一个实施方案中， 本发明还涉及药物制剂， 其包含至少一种根据以上详细定 义和概述的通式 (I) 的化合物， 或至少一种上述根据表 1 的化合物。在本发明和权利要求 中， 认为术语 “药物制剂” 意思是含有一种或两种或甚至更多种对身体 ( 尤其是哺乳动物身 体， 更优选人体 ) 具有任何药学作用的物质， 如果需要这样的物质或制剂， 该制剂可以以任 何途径给予所述身体， 目的在于发挥药学作用。本发明的药物制剂可以包含一种通式 (I) 的化合物， 或可以包含两种或甚至更多种通式 (I) 的化合物， 作为药学上有效的物质。根据 本发明， 优选的是包含一种通式 (I) 概括的化合物或一种上述根据表 1 的化合物的药物制 剂。
     在本发明进一步的可以引起特定药学作用的实施方案中， 本发明的药物制剂除了 至少一种通式 (I) 概括的化合物以外或除了至少一种上述根据表 1 的化合物以外， 可以包 含至少一种 ( 优选一种 ) 其他的药学上有效的化合物。这种其他的药学上有效的化合物可 以对本发明以上定义的通式 (I) 化合物的相同领域具有药学作用或对不同于上述通式 (I) 化合物发挥其药学作用的领域的一个领域或几个领域具有一种 ( 或几种 ) 药学作用。
     在本发明的药物制剂中， 通式 (I) 概括的一种或多种化合物， 或上述根据表 1 的 一种或多种化合物， 可以单独使用或， 作为选择地， 可以结合一种或多种药学上可接受的载 体、 辅助物质和 / 或佐剂使用。在本发明的药物制剂中， 可以使用一种药学上可接受的载 体和 / 或辅助物质和 / 或佐剂， 或根据本发明可以使用两种或甚至更多种药学上可接受 的载体和 / 或辅助物质和 / 或佐剂。可以用于本发明药物制剂中的药物学上可接受的载体、 辅助物质和 / 或佐剂通常是医学领域已知的， 并且在此不需要详细的描述。此外， 可 以参考涉及适用于医学或药学领域的载体、 辅助物质和 / 或佐剂的标准教科书， 并且其中 之一是 “Remington， The Science and Practice of Phatmacy ； Lippincott， Williams & Wilking( 编辑 )， 2000” 。
     包含至少一种以上通式 (I) 概括的化合物或包含至少一种上述根据表 1 的化合 物的本发明的药物制剂可以例如是用于局部途径给药的制剂， 其以例如以下形式 ： 霜剂、 膏 剂、 糊剂、 凝胶、 溶液、 喷雾剂、 脂质体和纳米体、 震荡合剂、 “聚乙二醇化” 制剂、 可降解 ( 例 如， 在生理条件下可以降解 ) 贮藏基质、 水状胶体 - 绷带、 膏药、 微 - 海绵、 预聚合物和相似 的载体物质、 射流喷射或包括灌注应用的其他皮肤成分 / 载体。作为选择地， 药物制剂可以 用于口服、 经皮、 静脉内、 皮下、 皮内、 肌内、 鞘内途径的全身给药， 其可以在合适的制剂或合 适的盖伦形式中进行， 例如， 以片剂、 糖衣丸 (dragees)、 糖果锭剂 (lozenges)、 胶囊、 气溶 胶、 喷雾剂、 溶液、 乳剂和悬浮剂的形式。
     根据本发明并且在其优选的实施方案中， 至少一种通式 (I) 概括的化合物或至少 一种上述根据表 1 的化合物在本发明的药物制剂中的含量可以广泛选择， 对熟练的职业医 师没有强加任何限制。特别可能的是， 根据常用的参数， 例如根据待治疗的人员、 所述人员 的状况、 疾病或病症的严重性和其他常用参数， 由医学领域的技术人员仅仅通过一些定向 实验容易地确定待给药的含量。具体地， 对于至少一种通式 (I) 概括的化合物， 或至少一种 上述根据表 1 的化合物， 每施用单位， 含量可以在 0.01 至 1000mg 的范围中 ( 并非将本发明 限制于那些含量 )， 优选每施用单位 0.1 至 100mg 的范围。
     在另一个实施方案中， 本发明还涉及包含至少一种根据以上详细定义和概括描述 的通式 (I) 的化合物， 或至少一种上述根据表 1 的化合物的化妆品制剂。 在本发明的说明书 和权利要求中， 认为术语 “化妆品制剂” 意思是含有一种或两种或甚至更多种对身体 ( 特别 是哺乳动物身体， 并且更优选人体 ) 具有任何化妆作用的制剂， 如果期望施用目的在于发 挥化妆作用的这样的物质或这样的制剂， 该制剂可以以任何途径施用于所述身体。本发明 的化妆品制剂可以包含一种通式 (I) 的化合物， 或可以包含两种或甚至更多种通式 (I) 的 化合物， 作为化妆上有效的物质。根据本发明， 优选的是包含一种通式 (I) 概括的化合物， 或一种上述根据表 1 的化合物的化妆品制剂。
     在引起特定的化妆品作用的其它实施方案中， ， 除了至少一种通式 (I) 概括的化 合物， 或除了至少一种上述根据表 1 的化合物， 本发明的化妆品制剂可以包含至少一种 ( 优 选一种 ) 其他的化妆上有效的化合物。这样的其他的化妆上有效的化合物可以对以上限定 的通式 (I) 的本发明的化合物的相同领域具有一种化妆作用 ( 或可以具有几种化妆作用 ) 或对不同于上述通式 (I) 化合物发挥其化妆作用的领域的一个领域或几个领域具有一种 ( 或几种 ) 化妆作用。
     在本发明的化妆品制剂中， 通式 (I) 概括的一种或多种化合物， 或上述根据表 1 的 一种或多种化合物， 可以单独使用或， 作为选择地， 可以结合一种或多种化妆品上可接受的 载体、 辅助物质和 / 或佐剂使用。在本发明这样的化妆品制剂中， 可以使用一种化妆品上可 接受的载体和 / 或辅助物质和 / 或佐剂， 或根据本发明可以使用两种或甚至更多种化妆品 上可接受的载体和 / 或辅助物质和 / 或佐剂。可以用于本发明化妆品制剂中的化妆品上可 接受的载体、 辅助物质和 / 或佐剂通常是化妆品领域已知的， 并且在此不需要详细的描述。此外， 可以参考涉及适用于化妆品领域的载体、 辅助物质和 / 或佐剂的标准教科书， 并且其 中之一是 “G.A.Nowak， Die kosmetischen 第2册： Die kosmetischen -Rezepturen， Rohstoffe， wissen-schaftliche Grundlagen， Verlag für Chemische Industrie H.Ziolkowsky KG， Augsburg” 。
     包含至少一种以上通式 (I) 概括的化合物或包含至少一种上述根据表 1 的化合物 的本发明的化妆品制剂可以例如是用于局部途径施用的制剂， 其以例如以下形式 ： 霜剂、 膏 剂、 糊剂、 凝胶、 溶液、 喷雾剂、 脂质体和纳米体、 震荡合剂、 “聚乙二醇化” 制剂、 可降解 ( 例 如， 在生理条件下可以降解 ) 贮藏基质、 水状胶体 - 绷带、 膏药、 微 - 海绵、 预聚合物和相似 的载体物质、 射流喷射或包括灌注应用的其他皮肤成分 / 载体。作为选择地， 化妆品制剂可 以用于口服、 经皮、 静脉内、 皮下、 皮内、 肌内、 鞘内途径的全身施用， 其可以在合适的制剂或 合适的盖伦形式中进行， 例如， 片剂、 糖衣丸 (dragees)、 糖果锭剂 (lozenges)、 胶囊、 气溶 胶、 喷雾剂、 溶液、 乳剂和悬浮剂的形式。 在化妆品领域中， 本发明制剂优选以任何局部途径 施用。
     根据本发明并且在其优选的实施方案中， 本发明化妆品制剂中的至少一种通式 (I) 概括的化合物或至少一种上述根据表 1 的化合物的含量可以广泛选择， 对熟练的职业 医师没有强加任何限制。特别可能的是， 根据常用的参数， 例如根据待治疗的人员、 所述人 员的皮肤状况和其他常用参数， 由化妆品领域的技术人员仅仅通过一些定向实验容易地确 定待施用 ( 或甚至给予 ) 的含量。具体地， 对于至少一种通式 (I) 概括的化合物， 或至少一 种上述根据表 1 的化合物， 每施用单位， 含量可以在 0.01 至 1000mg 的范围中 ( 并非将本发 明限制于那些含量 )， 优选每施用单位 0.1 至 100mg 的范围。
     以下， 将通过实施例来进一步解释本发明。这些实施例涉及本发明的优选实施方 案， 给出这些实施例主要是举例说明和解释本发明， 以用于更好地理解。然而， 实施例不应 当解释为限制本发明。
     实施例
     实施例 1
     通式 (I) 的化合物的制备
     制备通式 (I) 的化合物时， 选择了以下方案 1 至 17 的合成途径 ； 以下方案中显示 了用于所选步骤的反应条件 ：
     方案 1 ：
     试剂和条件 ： a)1.LiAlH4， THF， rfl.( 回 流 ) ； 2.NaOH/H2O， Boc2O， DCM， RT ； b)1、 (COCl)2， DMSO， DCM， -78℃至＞ -10℃ ； 2、 溴化乙烯基 - 镁， DCM， THF， RT ； c)Ac2O， 吡啶， DCM， 0℃至＞ RT ； d)NaIO4， cat.( 催化量 )RuCl3， CH3CN， EtOAc， H2O ； e)DCC， HOBt， DCM， 17,0℃至 ＞ RT ； f)LiOH， MeOH， H2O ； g)aq.( 含水 )HCl(37％ )， EtOH。
     方案 2 ：
     试剂和条件 ： a)H2， Pd/C， MeOH ； b)NaH， NaI， PMB-Cl， THF ； c)LiOH， MeOH， H2O ； d) n-C7H13COCl， TEA， DMAP， DCM， RT ； e)f)
     方案 3 ：
     试剂和条件 ： a)RCOCl， TEA， DMAP， DCM ； b)LiOH， MeOH， H2O ； c)ROCOCl， NaHCO3， H2O， 1， 4- 二氧六环。方案 4 ：试剂和条件 ： a)1、 TBS-Cl， 咪唑， DMF ； 2、 H2， Pd/C， 甲醇 ； b) 嘌呤， PPh3， DIAD， THF ； c)aq.HCl(37％ )， EtOH。
     方案 5 ：
     试剂和条件 ： a)t-Bu-COCl， TEA， DMAP， DCM。 方案 6 ：
     试剂和条件 ： a)NBD-F， EtOH， rfl.。 方案 7 ：试剂和条件 ： a)1、 TFA， DCM ； 2、 BnOCOCl， NaHCO3， H2O， 1.4- 二氧六环 ； b)DCC， HOBt， 1， 3- 二氨基 -2， 2- 二甲基丙烷， DCM， 0℃至＞ RT ； c)DCC， HOBt， 13， DCM， 0℃至＞ RT ； d)LiOH， MeOH， H2O ； e)aq.HCl(37％ )， EtOH ； f)H2， Pd/C， MeOH ； g) 丙酮， MS NaCNBH3， THF ； h)1、 LiOH， MeOH， H2O ； 2、 aq.HCl(37％ )， EtOH。
     方案 8 ：
     试 剂 和 条 件： a)DCC， HOBt， 13， DCM， 0 ℃ 至 ＞ RT ； b)LiOH， MeOH， H2O ； c))aq.HCl(37％ )， EtOH ； d)n-C3H7-COCl， TEA， DMAP， DCM。
     方案 9 ：
     试剂和条件 ： a)H2， Pd/C， MeOH ； b)NaH， NaI， PMB-Cl， THF。 方案 10 ：试剂和条件 ： a)EDC， DIPEA， . 噻唑烷， DCM， 0℃至＞ RT ； b)H2， Pd/C， MeOH ； c)DCC， HOBt， 72， DCM， 0℃至＞ RT ； d)LiOH， MeOH， H2O ； e)aq.HCl(37％ )， EtOH ； f)1、 MsCl， TEA， DCM ； 2、 KSAc， DMF， 60℃ ； g)LiOH， MeOH， H2O ； h)aq.HCl(37％ )， EtOH。
     方案 11 ：
     试剂和条件 ： a)TFAA， 吡啶， DCM ； b)1、 SOCl2， DMF ； 2、 TEA， 71， DCM ； c)LiOH， MeOH， H2O ； d)DCC， HOBt， 72， DCM， 0℃至＞ RT ； e)LiOH， MeOH， H2O ； f)aq.HCl(37％ )， EtOH。
     方案 12 ：
     试剂和条件： a)BnOCOCl， NaHCO3， H2O， 1， 4- 二 氧 六 环 ； b)DCC， HOBt， 71， DCM， 0 ℃ 至 ＞ RT ； c)H2， Pd/C， MeOH ； d)DCC， HOBt， 72， DCM， 0 ℃ 至 ＞ RT ； e)LiOH， MeOH， H2O ； f) aq.HCl(37％ )， EtOH。
     方案 13 ：
     试剂和条件 ： a)(1)TBS-Cl， 咪唑， DMF ； (2)Na2CO3， H2O， 甲醇 ； b)DPPA， TEA， 甲苯， 苯 甲醇 ； c)96， Pd(PPh3)4， CsCO3， DME ； d)aq.HCl(37％ )， EtOH ； e)LiOH， MeOH， H2O ； f)62， DCC， HOBt， DCM ； g)H2， Pd/C， MeOH。
     方案 14 ：
     试剂和条件 ： a)TEA， DCM ； b)NaN3， DMF， 60 ℃ ； c)H2， Pd/C， MeOH ； d)DCC， HOBt， 72， DCM， 0℃至＞ RT ； e)LiOH， MeOH， H2O ； f)aq.HCl(37％ )， EtOH。
     方案 15 ：
     试剂和条件： a)Z-Cl， NaHCO3， H2O， 1， 4- 二 氧 六 环 ； b)DCC， HOBt， 103， DCM， 0℃ 至 ＞ RT ； c)H2， Pd/C， MeOH ； d)DCC， HOBt， 72， DCM， 0 ℃ 至 ＞ RT ； e)LiOH， MeOH， H2O ； f) aq.HCl(37％ )， EtOH。
     方案 16 ：
     试剂和条件 ： a)DCC， DMAP， L- 甲醇， DCM， 0℃至＞ RT。 方案 17 ：试剂和条件 ： a)1、 CH3SO2Cl， TEA， DCM ； 2、 KSAc， DMF ； b) 硫酸氢钾， n-Bu4NOH， H2O， 甲 醇； c)SOCl2， DMF， DCM ； d)1， 4- 二氨基丁烷， TEA， DCM ； e)DCC， HOBt， 72， DCM， 0℃至＞ RT ； f) LiOH， MeOH， H2O。
     一般步骤 A ： 使用 DCC 和 HOBt 的肽偶联
     将二氯甲烷 (10ml/mmol) 中的羧酸 (1.0 当量 ) 溶液冷却至 0℃， 并加入 1- 羟基苯 并三唑 (1.3 当量 ) 和 N， N’ - 二环己基 - 碳化二亚胺 (1.5 当量 )。在该温度 1 小时后， 加 入胺 (1.0 当量 )， 并且将温度升至环境温度。将悬浮液搅拌 18 小时， 并且在过滤前用乙酸 乙酯 (5ml/ml 二氯甲烷 ) 稀释。然后用饱和含水 NaHCO3 和饱和含水 NaCl 洗涤滤液。将有 机相干燥 (MgSO4) 并蒸发。通过硅胶上的快速色谱法纯化粗产物 ( 洗脱液 ： 二氯甲烷 / 二 乙醚或二氯甲烷 / 乙酸乙酯 )。
     一般步骤 B ： 使用 LiOH 的酯裂解
     用 LiOH*H2O(5.0 当量 ) 处理甲醇 / 水 (9 ∶ 1， 10ml/mmol) 中的酯 (1.0 当量 ) 溶 液， 并于环境温度搅拌， 直至 TLC 控制显示起始材料不存在。将甲醇蒸发， 并将残余物在乙 酸乙酯和盐水之间分布。将层分离， 并将有机相干燥 (MgSO4)。如果需要， 使用合适的洗脱 液， 通过硅胶上的快速色谱法纯化粗产物。
     一般步骤 C ： 使用 EtOH 中的含水 HCL 的 Boc 脱保护
     用乙醇和盐酸 (37％ )(1.5ml/mmol) 的 8 ∶ 1 混合物处理 Boc 保护的化合物 (1.0 当量 )。将所得到的溶液于环境温度搅拌， 直至 TLC 控制显示起始材料不存在。蒸发溶剂， 并将残余物在高真空下干燥。作为盐酸盐得到得到所得到的胺。
     一般步骤 D ： 用酰基氯的 N- 和 O- 乙酰化
     将氨基和 / 或羟基化合物 (1.0 当量 ) 溶解于二氯甲烷 (2.5ml/mmol) 和三乙 胺 (2.5 当量每可酰化官能度 ) 中， 并加入 4-N， N- 二甲基氨基吡啶 (0.2 当量 ) 和酰基氯 (2.0 当量每可酰化官能度 )。分离相， 并用二氯甲烷萃取含水相三次。将合并的有机相干 燥 (MgSO4) 并蒸发。通过硅胶上的快速色谱法纯化粗产物 ( 洗脱液 ： 二氯甲烷 / 二乙醚 )。
     3和4： ( 方案 1) ： 将相应的 O- 苄基保护的 D- 或 L- 丝氨酸 1 或 2(5.00g， 25.6mmol) 缓慢加入 THF(100ml) 中的 LiAlH4(1.46g， 38.5mmol) 的混悬液中。将 所得到的混合物在回流下加热 5 小时， 然后冷却至 0 ℃。随后用 10 ％含水 NaOH(6ml) 和 水 (6ml) 猝灭过量的 LiAH4。将浆液于环境温度搅拌 30 分钟， 加入二氯甲烷 (20ml) 中的 Boc2O(6.15g， 28.2mmol)。将反应混合物搅拌过夜， 并通过短的硅胶通路过滤。溶剂的蒸发 和从 MTBE 和戊烷的重结晶提供了产物 3 或 4(8.18g)。
     5、 6、 7 和 8( 方 案 1) ： 用 于 冰 / 丙 酮 将 二 氯 甲 烷 (3ml/mmol) 中的草酰氯 (1.1 当量 ) 溶液冷却至 -78℃， 并且经过 10 分钟的时间加入二氯甲烷 (3ml/mmol) 中的二甲基亚砜 (2.4 当量 ) 溶液。将混合物搅拌 15 分钟， 然后经过 20 分钟 的时间加入二氯甲烷 (3ml/mmol) 中的 3 或 4(1.0 当量 ) 溶液。将混合物搅拌 30 分钟， 然 后加入乙基 - 二异丙基 - 胺 (4.0 当量 )。将温度缓慢升至 -10℃， 然后将反应混合物再次 冷却至 -78℃。通过使用双端针将冷的混合物转移至溴化乙烯镁 (5.0 当量， 0.5M 四氢呋喃 / 二氯甲烷 1 ∶ 1 的溶液 ) 的混合物中。将得到的混合物于环境温度搅拌一小时， 然后用 KHSO4( 水中的 1M 溶液 ) 淬灭。分离相， 并用二氯甲烷将含水相萃取三次。将合并的有机相 干燥 (MgSO4) 并蒸发。通过硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ： 戊烷 / 二乙醚 ) 以 57％的总收 率从起始材料 3 分离出差向异构体产物 5 和 6( 或从 4 分离出 7 和 8)(5 ∶ 6 和 7 ∶ 8 的比 例各自为 3 ∶ 1)。通过硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ： 戊烷 / 二乙醚 ) 各自部分地分离差 向异构体 5 和 6、 7 和 8。
     9、 10、 11 和 12( 方案 1) ： 将四氢呋喃中的 5、 6、 7 或 8(1.0当量 ) 的溶液 (2.5ml/mmol) 冷却至 0℃， 缓慢加入吡啶 (4.0 当量 )、 醋酸酐 (2.0 当量 ) 和 N， N- 二甲基氨基吡啶 (0.2 当量 )。将反应混合物于环境温度搅拌过夜。将溶液倾倒入含 水盐酸中 (10ml/mmol)， 并分离相。用乙酸乙酯将含水相萃取两次。用饱和的含水 NaHCO3 洗涤合并的有机层， 并干燥 (MgSO4)。溶剂的蒸发和硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ： 戊烷 / 二乙醚 ) 提供了产物。
     13、 14、 15 和 16( 方案 1) ： 用 NaIO4(4.0 当量 ) 和 RuCl3水合物 (0.02 当量 ) 处理乙腈 / 乙酸乙酯 / 水 (2 ∶ 2 ∶ 3， 10ml/mmol) 中的 9、 10、 11 或12(1.0 当量 ) 溶液。将所得溶液于环境温度搅拌 18 小时。加入饱和的含水 NaCl(10ml/ mmol)， 用乙酸乙酯将混合物萃取三次。将合并的有机相干燥 (MgSO4)， 并将溶剂蒸发。未经 进一步纯化使用所得到的产物。
     使用一般步骤 A 从 13、14、 15 或 16 得到 18、 19、 20 和 21( 方案 1)。
     使 用 一 般 步 骤 B 从 18、19、 20 或 21 得到 22、 23、 24 和 25( 方案 1)。
     使用一般步骤 C 从 22、23、 24 或 25 得到 26、 27、 28 和 29( 方案 1)。
     30( 方 案 2) ： 将木炭上的钯(10％， 0.2 当量 ) 加入 18(1.0 当量 ) 的乙醇溶液 (10ml/mmol) 中。将所得的混悬液在氢气 氛下搅拌 18h。通过短路径的硅藻土将固体过滤， 并且将滤液蒸发得到 30。
     31( 方案 2) ： 向冷却的 (0℃ )30(1.0 当量 ) 的 THF(3ml/mmol) 溶液中按序加入氢化钠 (60％， 1.5 当量 )、 碘 化钠 (2.0 当量 ) 和 p- 甲氧基苄基氯 (4.0 当量 )。将反应混合物于环境温度搅拌 19h。用 饱和的含水 NH4Cl(5ml/mlTHF) 淬灭反应， 并分离层。 用乙酸乙酯将含水层萃取两次， 并用盐 水洗涤合并的有机相。溶剂的干燥 (MgSO4) 和蒸发后， 通过硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ：二氯甲烷 / 二乙醚 ) 纯化 31。
     使用一般步骤 B 从31 得到 32( 方案 2)。
     使用一般步骤 D 从 32和辛酰氯得到 33( 方案 2)。
     使用一般步骤 C 从32 得到 34 和 35(1 ∶ 1) 的混合物。
     35( 方案 2) ： 用 BBr3(1M 二氯甲烷中的溶液， 0.5ml) 处理 32(26.7mg) 的二氯甲烷 (1.5ml) 溶液。于环境温度三小时后， 加入 甲醇 (10ml)， 并将挥发物蒸馏掉。将该步骤重复三次得到 35(21.9mg)。
     使用一般步骤 D 从 26 和丁酰氯得到 36( 方案 3)。
     使用一般步骤 D 从 26 和己酰氯得到 37( 方案 3)。
     使用一般步骤 D 从 26 和辛酰氯得到 38( 方案 3)。
     使用一般步骤 D 从 26和十四酰氯得到 39( 方案 3)。
     使用一般步骤 D 从 26 和特戊酰氯得到 40( 方案 3)。
     使用一般步骤 B 从 36 得到 41( 方案 3)。
     使用一般步骤 B 从 37 和己酰氯得到 42( 方案 3)。
     使用一般步骤 B 从 38 得到 43( 方案 3)。
     使用一般步骤 B 从 39 得到 44( 方案 3)。
     使用一般步骤 B 从 40 得到 45( 方案 3)。
     46( 方案 3) ： 向 26(1.0当量 ) 的 NaHCO3(5.0 当量 ) 的水 (5ml/mmol) 溶液中， 加入氯甲酸苄酯 (2.5 当量 ) 的 1， 4- 二氧六环 (5ml/mmol) 溶液。将反应混合物于环境温度搅拌七小时， 然后将挥发物蒸发。 将残余物在乙酸乙酯和水之间分布， 并将层分离。 用乙酸乙酯将含水相萃取两次， 并用盐水 洗涤合并的有机相。溶剂的干燥 (MgSO4) 并且蒸发后， 通过硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ： 二氯甲烷 / 二乙醚 ) 纯化 46。
     47( 方案 3) ： 向 26(1.0当量 ) 的 NaHCO3(5.0 当量 ) 的水 (5ml/mmol) 溶液中加入氯甲酸乙酯 (2.5 当量 ) 的 1， 4- 二 氧六环 (5ml/mmol) 溶液。将反应混合物于环境温度搅拌七小时， 然后将挥发物蒸发。将残 余物在乙酸乙酯和水之间分布， 并将层分离。 用乙酸乙酯将含水相萃取两次， 并用盐水洗涤 合并的有机相。溶剂的干燥 (MgSO4) 并且蒸发后， 通过硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ： 二氯 甲烷 / 二乙醚 ) 纯化 47。
     48( 方案 4) ： 将 22(1.0 当量 )、 咪唑 (1.4 当量 ) 和 t- 丁基二甲基氯硅烷 (1.2 当量 ) 的 N， N- 二甲基甲酰胺 (1ml/mmol) 溶 液搅拌过夜， 并且通过短路径的硅胶过滤 ( 洗脱液 ： 戊烷 / 二乙醚 )。将滤液蒸发， 并且将 残余物吸收于甲醇中。加入木炭上的钯 (10％， 0.05 当量 )， 并将混悬液在氢气气氛下搅拌 18h。将反应混合物过滤并蒸发。通过硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ： 二氯甲烷 / 二乙醚 ) 纯化 48。
     49( 方案 4) ： 将 THF(8ml/mmol) 中的 48(1.0 当量 )、 嘌呤 (1.5 当量 ) 和三苯基膦 (3 当量 ) 溶液冷却至 0℃， 并加入 偶氮二甲酸二异丙酯 (2.5 当量 )。将混合物搅拌 24h， 并加入三丁基膦 (3 当量 ) 和偶氮二 甲酸二异丙酯 (2.5 当量 )。另外 24h 后， 将溶液倾倒入盐水中， 并用乙酸乙酯萃取三次。通 过硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ： 乙酸乙酯 / 甲醇 ) 分离产物。
     使用一般步骤 C 从 49 得到 50( 方案 4)。
     使用一般步骤 D 从 22 和新戊酰氯得到 51( 方案 5)。
     52( 方 案 ) ： 将乙醇(20ml/mmol) 中的 26(1.0 当量 )、 4- 氟 -7- 硝基苯并呋呫 (2.2 当量 ) 和 N- 乙基二异丙基 胺 (4.2 当量 ) 溶液加热至回流， 持续三分钟。将挥发物蒸发， 并且使残余物接受快速色谱 法 ( 洗脱液 ： 二氯甲烷 / 乙酸乙酯 )。
     54( 方案 7) ： 将 53(1.0 当量 ) 与三氟醋酸 / 二氯甲烷(1 ∶ 1， 2ml/mmol) 于环境温度搅拌四小时， 然后将挥发物蒸发。将残余物溶解于水 (5ml/ mmol) 和 NaHCO3(2.5 当量 ) 以及 1， 4- 二氧六环 (5ml/mmol) 中的氯甲酸苄酯 (1.2 当量 ) 溶液中。将反应混合物搅拌 17h， 接着在减压下将溶剂蒸馏掉。将残余物在乙酸乙酯和水 之间分布， 并且将层分离。用乙酸乙酯将含水相萃取两次， 并用盐水洗涤合并的有机相。溶 剂的干燥 (MgSO4) 并蒸发后， 通过硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ： 二氯甲烷 / 二乙醚 ) 纯化 54。
     55( 方 案 7) ： 将 54(1.0 当 量 ) 的 二 氯 甲 烷(10ml/mmol) 溶液冷却至 0℃， 并加入 1- 羟基苯并三唑 (1.3 当量 ) 和 N， N’ - 二环己基碳 化二亚胺 (1.5 当量 )。于该温度 1 小时后， 加入 1， 2- 二氨基 -2， 2- 二甲基丙烷 (5 当量 )， 并将该温度升至环境温度。将混悬液搅拌 18 小时， 然后用乙酸乙酯稀释过滤 (5ml/ml 二氯 甲烷 )。随后用饱和的含水 NaHCO3 和饱和的含水 NaCl 洗涤滤液。将有机相干燥 (MgSO4) 并 蒸发。通过硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ： 二氯甲烷 / 甲醇 / 三乙胺 ) 分离 55。
     使用一般步骤 A 从 55 和13 得到 56( 方案 7)。
     使用一般步骤 B 从 56 得到 57( 方案 7)。
     使用一般步骤 C 从 57 得到 58( 方案 7)。
     59( 方案 7) ： 将木炭上的钯 (10％， 0.05 当量 ) 加入 56(1.0 当量 ) 的甲醇 (10ml/mmol) 溶液中。将得到混悬液在 氢气气氛下搅拌一小时。通过短途径的硅藻土滤出固体， 并将滤液蒸发， 得到 59。
     60( 方案 7) ： 将 59(1.0当量 ) 和丙酮 (1.2 当量 ) 的 THF(20ml/mmol) 溶液用分子筛 (0.3nm ； 1g/mmol) 搅拌两小 时。 加入氰基硼氢钠 (5.0 当量 )， 并将反应继续 17h。 加入饱和的含水 NaHCO3(20ml/mmol)， 并用乙酸乙酯将混合物萃取三次。 将合并的有机相干燥 (MgSO4)， 并在蒸发后通过硅胶上的 快速色谱法 ( 洗脱液 ： 二氯甲烷 / 甲醇 ) 分离 60。
     通 过 应 用 一 般 步 骤 B，接着使用一般步骤 C， 从 60 得到 61( 方案 7)。
     使用一般步骤 A 从 62 和13 得到 63( 方案 8)。
     使用一般步骤 B 从 63 得到 64( 方案 8)。
     使用一般步骤 C 从 64 得到 65( 方案 8)。
     使用一般步骤 D 从 64 和丁酰氯得到 66( 方案 8)。
     67( 方 案 9) ： 将木炭上的钯(10％， 0.2 当量 ) 加入至 45(1.0 当量 ) 的甲醇 (10ml/mmol) 溶液中。将得到的混悬液在氢 气气氛下搅拌 18h。通过短途径的硅藻土滤出固体， 并将滤液蒸发， 得到 67。
     68( 方案 9) ： 向 67(1.0当量 ) 的冷却 (0℃ )THF(3ml/mmol) 溶液中按序加入氢化钠 (60％， 2.5 当量 )、 碘化钠 (4.0 当量 ) 和 p- 甲氧基苄基氯 (5.0 当量 )。将反应混合物于环境温度搅拌 19h。用饱和的含 水 NH4Cl(5ml/ml THF) 淬灭反应， 并将层分离。用乙酸乙酯将含水相萃取两次， 并用盐水洗 涤合并的有机相。溶剂干燥 (MgSO4) 和蒸发后， 通过硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ： 二氯甲 烷 / 二乙醚 ) 纯化 68。
     70( 方 案 10) ： 将 69(1.0 当 量 )的二氯甲烷 (10ml/mmol) 溶液冷却至 0℃， 并加入 1- 羟基苯并三唑 (1.0 当量 ) 和 N-(3- 二 甲基氨基丙基 )-N’ - 乙基碳化二亚胺 (1.2 当量 )。在温度 1 小时后， 加入噻唑烷 (1.2 当 量 )， 并将温度升至环境温度。将混悬液搅拌 18 小时， 然后加入盐酸 (2ml/mmol)。将相分 离， 并用二氯甲烷萃取含水层两次。将合并的有机相干燥 (MgSO4) 和蒸发。通过硅胶上的 快速色谱法 ( 洗脱液 ： 二乙醚 ) 纯化粗产物。
     71( 方案 10) ： 将木炭上的钯 (10％， 0.05 当量 ) 加入 70(1 当量 ) 的甲醇 (10ml/mmol) 溶液中。将得到的混悬液在氢气气氛下搅拌 18h。通过 短途径的硅藻土滤出固体， 并将滤液蒸发。通过硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ： 二氯甲烷 / 甲醇 / 三乙胺 ) 纯化粗 71。
     使 用 一 般 步 骤 A 从 71 和 72 得 到73( 方案 10)。
     使用一般步骤 B 从 73 得到 74( 方案10)。
     使用一般步骤 C 从 74 得到 75( 方案 10)。
     76( 方案 10) ： 将 74(1.0 当量 )、 三乙胺 (3.0 当量 )、 甲磺酰氯 (2.4 当量 ) 和 4-N， N- 二甲基 - 氨基吡啶 (0.2 当量 ) 的二氯 甲烷 (15ml/mmol) 溶液于环境温度搅拌过夜。用盐酸 (1M， 15ml/mmol) 淬灭反应， 将层分 离并用二氯甲烷萃取含水层两次。将合并的有机相干燥 (MgSO4) 并蒸发。将粗产物溶于 DMF(2ml/mmol) 中， 并加入硫代醋酸钾 (5 当量 )。将反应混合物在惰性气氛下在 60℃搅拌 17h。加入水和二氯甲烷， 并将层分离。用二氯甲烷萃取含水层两次， 并将合并的有机相干 燥 (MgSO4) 并蒸发。通过硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ： 二氯甲烷 / 二乙醚 ) 纯化 76。
     使用一般步骤 B 从 76 得到 77( 方案10)。
     使用一般步骤 C 从 77 得到 78( 方案10)。
     80( 方案 11) ： 用吡啶 (1.2 当量 ) 和三氟醋酸酐 (1.1 当量 ) 处理冷却 (0℃ ) 的 79(1.0 当量 ) 的二氯甲烷 (1.5ml/mmol) 悬浮液。将反应混合物于 环境温度搅拌四小时。加入盐酸 (1M， 3ml/mmol)， 并将层分离。用乙酸乙酯萃取含水层三 次， 并将合并的有机相干燥 (MgSO4) 并蒸发。粗产物显示出足够纯以用于进一步的转化。
     81( 方 案 11) ： 用亚硫酰二氯(2.25 当量 ) 处理 80(1.5 当量 ) 的 DMF(1ml/mmol) 溶液， 并于环境温度搅拌三小时。 用饱和 含水 NaHCO3 淬灭反应， 并用乙酸乙酯萃取三次。将合并的有机相干燥 (MgSO4)， 并在减压下 蒸发。在二氯甲烷 (10ml/mmol) 中吸收残余物， 加入 71(1.0 当量 ) 和三乙胺 (2.5 当量 )， 并将混合物搅拌过夜。加入盐酸 (1M， 3ml/mmol)， 将层分离。用二氯甲烷萃取含水层， 并且 将合并的有机相干燥 (MgSO4) 并蒸发。通过硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ： 二氯甲烷 / 二 乙醚 ) 纯化 81。
     使 用 一 般 步 骤 B 从 81 得 到 82( 方 案11)。
     使用一般步骤 A 从 82和 72 得到 83( 方案 11)。
     使用一般步骤 B 从 83得到 84( 方案 11)。
     使用一般步骤 C 从 84得到 85( 方案 11)。
     87( 方案 12) ： 向水 (5ml/mmol) 中 NaHCO3(2.0 当量 ) 的 86 溶液中加入氯甲酸苄酯 (1.0 当量 ) 的 1， 4- 二氧六环 (5ml/mmol) 溶液。将反应 混合物于环境温度搅拌七小时， 然后将挥发物蒸发。 将残余物在乙酸乙酯和水之间分布， 并 将层分离。用乙酸乙酯萃取含水相两次， 并用盐水洗涤合并的有机相。溶剂的干燥 (MgSO4) 并且蒸发后， 从 MTBE/ 戊烷重结晶粗产物。
     使用一般步骤 A 从 87 和71 得到 88( 方案 12)。
     82( 方 案 12) ： 将 木 炭 上 的 钯 (10 ％，0.05 当量 ) 加入 70(1.0 当量 ) 的甲醇 (10ml/mmol) 溶液中。 将得到的混悬液在氢气氛下搅 拌 18h。通过短路径的硅藻土滤出固体， 将滤液蒸发， 未经进一步纯化使用得到的产物 82。
     使用一般步骤 A 从 89和 72 得到 90( 方案 12)。
     使用一般步骤 B 从 90得到 91( 方案 12)。
     使用一般步骤 C 从 91得到 92( 方案 12)。
     94( 方案 13) ： 用叔 - 丁基 - 二甲基 - 甲硅烷氯 (3.28g，21.8mmol) 和咪唑 (2.68g， 39.8mmol) 处理 93(3， 00g， 9.06mmol) 的 DMF(9ml) 溶液三小时。 用 1M 盐酸淬灭反应并用乙酸乙酯萃取两次。蒸发合并的有机相， 并且将残余物与 0.5M 100ml) 搅拌。两小时后， 用浓盐酸将 pH 调节至 2， 并将混合物萃取 K2CO3(MeOH/ 水 3 ∶ 1 ； 至二乙醚中。干燥 (MgSO4) 合并的有机相并在减压下蒸发溶剂。通过硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ： 戊烷 / 二乙醚 ) 得到 94(2.75g， 68％ )。
     95( 方案 13) ： 将甲苯 (20ml) 中的 94(2.51g， 5.64mmol)、三乙胺 (934μl， 6.77mmol) 和 DPPA(1.34ml， 6.20mmol) 溶液加热至 80℃。两小时后， 加入 苯甲醇 (1.75ml， 16.9mmol)， 并持续加热三小时。冷却至环境温度后， 加入水 (100ml)， 用乙 酸乙酯萃取混合物。干燥 (MgSO4) 合并的有机相， 并在减压下将溶剂蒸发。通过硅胶上的 快速色谱 ( 洗脱液 ： 戊烷 / 二乙醚 ) 得到 95(2.44g， 78％ )。
     97( 方 案 13) ： 将 DME(10ml) 中 的 65(909mg，1.65mmol)、 96(510mg， 2.47mmol) 和 CsCO3(809mg， 2.47mmol) 溶液通过用氮净化 15 分钟脱 气。加入 Pd(PPh3)4(95mg， 83μmol)， 将得到的混合物在封管中加热至 120℃四小时。冷却 至环境温度后， 加入 1M 盐酸 (50ml)， 并用乙酸乙酯萃取混合物。干燥 (MgSO4) 合并的有机 相， 并在减压下蒸发溶剂。通过硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ： 二乙醚 ) 得到 97(865mg， 96％ )。
     使用一般步骤 C 从 97 得到 98( 方案 13)。
     使用一般步骤 B 从 97 得到 99( 方案 13)。
     使用一般步骤 A 从 99 和 62 得到100( 方案 13)。
     101( 方 案 13) ： 将木炭上的钯(10％， 0.2 当量 ) 加入 100(1.0 当量 ) 的甲醇 (10ml/mmol) 溶液中。将得到的混悬液在氢 气气氛下搅拌 18h。通过短路径的硅藻土滤出固体， 并将滤液蒸发得到 101。
     104( 方 案 14) ： 将 二 氯 甲 烷 (5ml) 中 的 102(282mg，0.986mmol)、 103(144μl， 1.18mmol) 和三乙胺 (206μl， 1.50mmol) 溶液于环境温度搅拌过 夜。 加入 1M 盐酸 (10ml)， 并用二氯甲烷萃取混合物。 干燥 (MgSO4) 合并的有机相， 并在减压 下蒸发溶剂。通过硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ： 戊烷 / 二乙醚 ) 得到 104(300mg， 71％ )。
     105( 方 案 14) ： 将 104(299mg， 0.7mmol) 和 NaN3(91mg，1.4mmol) 的 DMF(7ml) 溶液在 50 ℃搅拌过夜。冷却至环境温度后， 加入水 (50ml)， 并用 二氯甲烷萃取混合物。干燥 (MgSO4) 合并的有机相， 并在减压下蒸发溶剂， 以得到纯的 105(300mg， 定量 )。
     106( 方案 14) ： 将木炭上的钯 (10％， 0.2 当量 ) 加入105(1.0 当量 ) 的甲醇 (10ml/mmol) 溶液中。将得到的混悬液在氢气气氛下搅拌 18h。通 过短路径的硅藻土滤出固体， 并将滤液蒸发， 得到 105。
     使用一般步骤 A 从 106 和 72 得到 107( 方案 14)。
     使用一般步骤 B 从 107 得到 108( 方案14)。
     使 用 一 般 步 骤 C 从 108 得 到 109( 方 案14)。
     111( 方案 15) ： 将 110(6.19g， 60.1mmol) 溶解于水 (25ml)， 并加入 NaHCO3(5.55g， 66.1mmol) 以及氯甲酸苄酯 (8.12ml， 57.1mmol) 的 1， 4- 二氧六环 (25ml) 溶液。将反应混合物搅拌 17h， 然后在减压下蒸馏掉溶剂。将残余物在乙酸乙酯和 1M 盐 酸之间分布， 并将层分离。用乙酸乙酯萃取含水相两次， 用盐水洗涤合并的有机相， 并干燥 (MgSO4)。溶剂的蒸发产生了醇的纯的 111(12.8g， 95％ )。
     使用一般步骤 A 从 111 和 103 得到 112( 方案 15)。
     113( 方案 15) ： 将木炭上的钯 (10％， 0.2 当量 ) 加入112(1.0 当量 ) 的甲醇 (10ml/mmol) 溶液中。将得到的混悬液在氢气气氛下搅拌 18h。通 过短途径硅藻土滤出固体， 并将滤液蒸发， 得到 113。
     使用一般步骤 A 从 113 和 72 得到 114( 方案 15)。
     使用一般步骤 B 从 114 得到 115( 方案15)。
     使用一般步骤 C 从 115 得到 116( 方案15)。
     117( 方案 16) ： 将 53(104mg， 330μmol) 的二氯甲烷 (5ml)溶液、 L- 甲醇 (103mg， 660μmol) 和 DMAP(44.3mg， 363μmol) 冷却至 0℃， 并加入 N， N’ -二 环己基碳化二亚胺 (88.6mg， 429μmol)。于该温度 1 小时后， 将温度升至环境温度。将混悬 液搅拌 18 小时， 用乙酸乙酯 (25ml) 稀释后过滤。随后用 1M 盐酸、 饱和含水 NaHCO3 和饱和 含水 NaCl 洗涤滤液。将有机相干燥 (MgSO4) 并蒸发。通过硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ： 戊烷 / 二乙醚 ) 纯化粗产物， 产生 117(122mg， 82％ )。
     119( 方 案 17) ： 将 118(2.05g， 7.14mmol) 的 二 氯 甲 烷 (20ml)溶液冷却至 0℃。加入三乙胺 (1.19ml， 8.57mmol) 和甲烷磺酰氯 (608μl， 7.86mmol)。将 得到的混合物于环境温度搅拌两小时。加入 1M 盐酸 (20ml)， 并用二氯甲烷萃取混合物。 干燥 (MgSO4) 合并的有机相， 并在减压下蒸发溶剂。将残余物溶解于 DMF(6ml) 中， 并加 入 KSAc(979mg， 8.57mmol)。将反应混合物于环境温度搅拌过夜。在二乙醚和水之间分布 混合物， 并且将层分离。用二乙醚萃取含水相两次， 并用盐水洗涤合并的有机相， 并干燥 (MgSO4)。 通过硅胶上的快速色谱法 ( 洗脱液 ： 戊烷 / 二乙醚 ) 纯化粗产物， 得到 119(1.84g， 75％ )。
     120( 方 案 17) ： 将 水 (160ml) 中 的 硫 酸 氢 钾 (oxone)(8.2g， 13.3mmol) 加入 119(1.84g， 5.33mmol) 的甲醇 (160ml) 溶液中， 并于环境温度搅拌 30 分钟。加入水 (40ml) 中的 n-Bu4NOH(8.2ml， 水中 40％ )， 并将得到的溶液搅拌过夜。几 乎完全蒸发甲醇， 并且用二氯甲烷萃取含水残余物四次。 用盐水洗涤合并的有机相， 并干燥 (MgSO4)。溶剂的蒸发产生了粗 120(3.75g)， 将其使用， 未经进一步纯化。 122( 方 案 17) ： 将 120(200mg ， 337 μ mol) 、
     675μmol) 的二氯甲烷溶液于环境温度搅拌过夜。 DMF(98μl， 1.35mmol) 和 SOCl2(52.2μl， 蒸发所有挥发物， 以得到粗 121， 将其在二氯甲烷 (10ml) 中吸收。加入 1， 4- 二氨基丁烷 (339μl， 3.37mmol)， 并将得到的混合物于环境温度搅拌 17 小时。用饱和含水 NaHCO3 淬灭 反应， 并将层分离， 用二氯甲烷萃取含水层三次。 将合并的有机相干燥 (MgSO4)， 并且溶剂的 蒸发产生粗 122(81mg)， 将其使用， 未经进一步纯化。
     使 用 一 般 步 骤 A 从 122 和 72 得 到123( 方案 17)。
     使用一般步骤 B 从 123 得到 124( 方案17)。