卵白蛋白酶解物及其制备方法 本发明涉及一种蛋白质酶解物及其制备方法。
白蛋白是一种十分重要的蛋白质，广泛存在于人和动物的血清中，其主要功能是维持血浆胶体渗透压，增加血溶量，可用于治疗低白蛋白血症患者，如严重的肝藏疾病及由低白蛋白引起的水肿和腹水等，临床上主要是采用注射人血清白蛋白的方法治疗，此法除价格昂贵外，其最大弊端是容易引起血源性疾病，如艾滋病、乙肝等，给患者造成极大的不可逆的危害。而科学研究已证明蛋中的卵白蛋白与人血清白蛋白的氨基酸组成成份极为相似(见表1)，仅由于其分子量较大(43000～49000)，不易被人体的胃肠及细胞所吸收，影响了卵白蛋白制品的开发和应用，为此，人们提出了多种将卵白蛋白水解成易被人体吸收和利用的氨基酸和小分子多肽的方法，如1、酸或碱水解法，该法往往会造成氨基酸部分或全部被破坏，并且会增加分离纯化工作的难度及造成环境污染；2、酶水解法，如中国CN1101377A号介绍的木瓜蛋白酶水解法，该法虽然能够克服酸或碱水解法的缺点，有利形成小分子多肽，但工艺较复杂，酶解接触面较小，酶的切位点亦较少，使得酶解不充分，细化程度较低，尤其是其酶解物在胃肠道内的吸收率不高。
本发明的目的是提供一种制造成本低、无毒付作用，小分子多肽和氨基酸地含量高、且在胃肠道内的吸收率高的卵白蛋白酶解物及其生产工艺简单、酶解切位点多、酶解充分、细化程度高的制备方法。
本发明采用的酶为从动物胰脏中提取的胰酶，其中含有胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶及胰凝乳蛋白酶等成份。由于该酶是一种混合酶，因此酶解切位点多，能使肽健中碱性氨基酸的羧基端同基它氨基酸的氨基形成的肽键水解，其酶解碎片C末端是赖氨酸或精氨酸，使芳香族氨基酸的羧基端的肽键水解，其酶解碎片羧基末端是苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸，还能水解蛋白质中的酰胺类和脂类等化合物。尤其是采用胰酶所得到的酶解物中的小分子多肽的含量较高，使得酶解物在胃肠道内的吸收率高于木瓜蛋白酶酶解物和游离氨基酸的吸收率，这是因为科学研究证实小肠除具有游离氨基酸运输体系外，更具有特异的小分子多肽运输体系，其吸收机制包括1、小分子多肽在细胞表面(刷状缘)水解为氨基酸、其水解率很高；2、进入细胞内水解为氨基酸；3、经上皮脱屑细胞水解为氨基酸。
本发明的卵白蛋白酶解物所含的氨基酸的分子量在1000以下，氨基酸的含量为(mg/100mg)：赖氨酸2.72～6.02、组氨酸0.88～1.8、精氨酸1.41～2.25、苏氨酸1.42～3.93、丝氨酸0.58～5.4、谷氨酸2.02～13.72、脯氨酸1.59～2.02、甘氨酸0.14～3.17、丙氨酸1.63～6.27、胱氨酸0.25、缬氨酸2.48～5.84，异亮氨酸1.81～5.42、亮氨酸5.0～7.56、酪氨酸0.21～0.58、苯丙氨酸4.45、蛋氨酸2.42～3.49、天门冬氨酸6.66～8.54，氨基酸总量为30.97～80.71mg/100mg。
本发明是这样实现的：先将经加热变性处理并去掉蛋黄和蛋壳的卵白蛋白加水搅拌成乳状，然后在温度为55℃±1℃、PH值为7～8的条件下加胰酶进行酶解，酶解时间为7～8小时，最后将酶解液离心分离成清液和残渣，去掉残渣，将清液加热至沸后冷却至室温备用。
将上述备用清液进行喷雾干燥浓缩即得粉状卵白蛋白酶解物。
由于本发明在酶解前对卵白蛋白进行了加热变性处理，因此酶解接触面大，从而保证酶解充分、细化程度高。按照上述方法制备的卵白蛋白酶解物中的小分子多肽的含量采用G15方法检测可达到70％以上，最大一个分子团的分子量约为3500，其余的分子量均在1000以下。其酶解物可作为保健品添加剂，制成口服液或胶囊，其残渣可作为饲料用。
附图为本发明工艺流程框图。
实施例1：取鸡蛋5Kg，加热变性后去掉蛋黄和蛋壳，将蛋白加水后用搅拌机将其搅成乳状，在温度为55℃±1℃、PH值为7～8的条件下加胰酶32g(药用级)酶解8小时，用离心机分离清液和残渣，去掉残渣，将清液加热至沸后冷却至室温，最后采用喷雾干燥法浓缩清液即得到190g粉状卵白蛋白酶解物，取100g酶解物用氨基酸自动分析仪检测，其测定结果见表2的测定结果1。
实施例2：
取鸡蛋3kg，胰酶18g、酶解时间7小时，其它条件和操作步骤同例1，得粉状卵白蛋白酶解物110g，其测定结果见表2的测定结果2。
表1人血清白蛋与卵白蛋白氨基酸的百分组成氨基酸 人血清白蛋白 卵白蛋白天门冬氨酸天门冬酰胺谷氨酸谷氨酰胺赖氨酸精氨酸组氨酸甘氨酸丙氨酸蛋氨酸缬氨酸亮氨酸异亮氨酸丝氨酸苏氨酸 39 15 60 23 58 23 16 12 63 6 39 61 8 22 30 14 16 33 15 20 15 7 19 36 16 32 31 25 38 15苯丙氨酸酪氨酸色氨酸脯氨酸半胱氨酸 30 18 1 25 35 20 10 3 14 6
表2 测定结果1(mg/100mg) 测定结果2(mg/100mg)赖氨酸 6.02 2.72组氨酸 1.8 0.88精氨酸 2.25 1.41苏氨酸 3.93 1.42丝氨酸 5.4 0.58谷氨酸 13.72 2.02脯氨酸 2.02 1.59甘氨酸 3.17 0.14丙氨酸 6.27 1.63胱氨酸 0.25缬氨酸 5.84 2.48异亮氨酸 5.42 1.81亮氨酸 7.56 5.0酪氨酸 0.58 0.21苯丙氨酸 4.45蛋氨酸 3.49 2.42天门冬氨酸 8.54 6.66氨基酸总量 80.71 30.97