一种儿童功能饮料技术领域
本发明属于医药保健领域，具体涉及一种儿童功能饮料。
背景技术
目前，市场上销售的儿童饮料大多数不具备保健功能，有些碳酸饮料长期饮用会
对儿童的身体健康造成许多负面的影响。 而如钙奶类饮品，也主要以补充活性钙和维生素
A、 C、 D 等为主要目的，其作用效果单一，吸收效果缓慢，在某种程度上还不属真正意义的
保 健功能性饮料。
发明内容
有鉴于此，本发明提供一种儿童功能饮料，本发明的功能饮料营养丰富，口感好，
富含人体所需的免疫调节因子，可促进机体生长发育，调节胃肠功能，提高机体免疫力，提
神醒脑，增强抗疲劳能力，对心、脑血管及颈椎等疾病具有明显保健效果。 本发明适合广大
人群特别是少年儿童饮用，对少年儿童生长发育、补充体能起到显著的促进作用。
本发明的技术方案为：一种儿童功能饮料，以重量份计，由以下组分组成：活性组
分A 40-50，氯化钾1-3，木糖醇5-8，柠檬酸钠2-4，白砂糖10-30，活性组分B 11-15，活性组
分 C 9-13，磷酸氢钠2-6，哈密瓜香精0.3-0.5，葡聚糖3-5，水105-135。
进一步的，所述的儿童，以重量份计，由以下组分组成：活性组分A 43，氯化钾2，木
糖醇6，柠檬酸钠3，白砂糖14，活性组分B 13，活性组分 C 11，磷酸氢钠4，哈密瓜香精0.4，
葡聚糖4，水 118。
进一步的，所述活性组分A为凤尾鱼酶解产物，所述凤尾鱼酶解产物的制备方法
为：S1.取凤尾鱼鱼糜，使料水比为1:2-1:8(w/v)，用2 mol/L盐酸将溶液pH值调至2.0-3.5
以呈现胃部酸碱环境，以酶与底物浓度比为1200-1500U/g加入胃蛋白酶，在恒温水浴振荡
器中保持37 ℃、100-130 r/min振荡酶解1.5-2.5 h，在此条件下获得经胃蛋白酶酶解的初
产物；S2.用2 mol/L的氢氧化钠将经胃蛋白酶酶解后的酶解液pH值调至8.0-9.0，保持37
℃酶解温度，复合酶添加量为4500-6000 U/g， 所述复合酶中胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶的
质量比为4:1-6:1，所述料水比1:3-1:6，酶解时间为3-4.5 h，酶解结束后，在100℃沸水浴
中灭酶10min；将S2中的酶解产物通过真空冷冻干燥，设置干燥条件为预冷温度-30℃,预冷
时间2h，加热温度从-10℃开始18h后缓慢升温,达到25℃,并保持到干燥终点，得到凤尾鱼
酶解产物。
更进一步的，所述活性组分A为凤尾鱼酶解产物，所述凤尾鱼酶解产物的制备方法
为：S1.取凤尾鱼鱼糜，使料水比为1:3(w/v)，用2 mol/L盐酸将溶液pH值调至2.5以呈现胃
部酸碱环境，以酶与底物浓度比为1300 U/g加入胃蛋白酶，在恒温水浴振荡器中保持37
℃、110 r/min振荡酶解2 h，在此条件下获得经胃蛋白酶酶解的初产物；S2.用2 mol/L的氢
氧化钠将经胃蛋白酶酶解后的酶解液pH值调至8.5，保持37 ℃酶解温度，复合酶添加量为
5200 U/g， 所述复合酶中胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶的质量比为5:1，所述料水比1:4.5，酶
解时间为3.5 h，酶解结束后，在100℃沸水浴中灭酶10min；将S2中的酶解产物通过真空冷
冻干燥，设置干燥条件为预冷温度-30℃,预冷时间2h，加热温度从-10℃开始18h后缓慢升
温,达到25℃,并保持到干燥终点，得到凤尾鱼酶解产物。
进一步的，所述活性组分B为泥蚶酶解产物，所述泥蚶酶解产物的制备方法为：S1.
取泥蚶全脏器搅碎成肉糜，使料水比为1:1-1:2(w/v)，用2 mol/L盐酸将溶液pH值调至2.0
以呈现胃部酸碱环境，以酶与底物浓度比为800-1000U/g加入胃蛋白酶，在恒温水浴振荡器
中保持37 ℃、75-105 r/min振荡酶解1-1.5 h，在此条件下获得经胃蛋白酶酶解的初产物；
S2.用2 mol/L的氢氧化钠将经胃蛋白酶酶解后的酶解液pH值调至8.0-9.0，保持37 ℃酶解
温度，复合酶添加量为2500-3500 U/g， 所述复合酶中胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶的质量比
为6:1-8:1，所述料水比1:2-1:4，酶解时间为2.5-3.5 h，酶解结束后，在100℃沸水浴中灭
酶10min；将S2中的酶解产物通过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃,进样速
度为50ml/min,离心雾化器转速为25000r/min，得到泥蚶酶解产物。
更进一步的，所述活性组分B为泥蚶酶解产物，所述泥蚶酶解产物的制备方法为：
S1.取泥蚶全脏器搅碎成肉糜，使料水比为1:1.5(w/v)，用2 mol/L盐酸将溶液pH值调至2.0
以呈现胃部酸碱环境，以酶与底物浓度比为880U/g加入胃蛋白酶，在恒温水浴振荡器中保
持37 ℃、85 r/min振荡酶解1.3 h，在此条件下获得经胃蛋白酶酶解的初产物；S2.用2
mol/L的氢氧化钠将经胃蛋白酶酶解后的酶解液pH值调至8.2，保持37 ℃酶解温度，复合酶
添加量为2900 U/g， 所述复合酶中胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶的质量比为7:1，所述料水比
1:2.5，酶解时间为2.8 h，酶解结束后，在100℃沸水浴中灭酶10min；将S2中的酶解产物通
过喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃,进样速度为50ml/min,离心雾化器转
速为25000r/min，得到泥蚶酶解产物。
进一步的，所述活性组分C为车前草菌体粗提物，所述车前草菌体粗提物的制备方
法为：取新鲜植物的根、茎、叶分别洗净至没有明显的杂质，表面消毒处理后，接种至 PDA
（分离内生真菌）和高氏一号培养基（分离内生放线菌）上培养 5-7 d，然后分离获取菌落；
从活化斜面中挑取菌丝块接种于装有 100 mL 发酵培养基的锥形瓶中，置 30℃，150 r/
min 摇床振荡培养3 d；发酵培养物除去菌体，滤液用等体积乙酸乙酯萃取 3 次，合并有机
相，45 ℃ 减压浓缩蒸干，即为混合菌液粗提物；离心和过滤得到的菌体，用适量 95%乙醇
冷凝回流 3 次，合并乙醇相，减压浓缩蒸干，即为菌体粗提物。
上述技术方案中，所述的运动功能饮料的制备方法为 ：按配比，将各组分混合，搅
拌分散均匀后即可得成品。
本发明原材料易于采购，制作简单 ；并富含丰富的蛋白质、 维生素与矿物质 ；便
于携带，方便饮用，快速消除饥饿感，口感柔和，味道独特 ；尤其适合儿童饮用。本发明经验
证，长久饮用可达到增强免疫力和美白的效果，基于本发明中主要活性组分采用模拟人体
胃肠消化的方式制得，配合从植物体内提取出的活性菌体成分，活性菌体成分进入肠道内，
一方面可以在肠道内定殖，维持肠道微生物菌群的平衡；另一方面是活性菌体成分与凤尾
鱼酶解产物以及泥蚶酶解产物共同作用于宿主的免疫系统，诱发肠道免疫，并刺激胸腺，脾
脏等免疫器官，促进巨噬细胞活性，通过增强B、T淋巴细胞对抗原刺激的反应性，发挥特异
性免疫活性，从而增强机体的免疫功能，易于被人体吸收，条件98%低龄人群长期服用无不
适症状。
具体实施方式
以下结合具体实施例来对本发明作进一步的描述。
实施例1
一种儿童功能饮料，以重量份计，由以下组分组成：活性组分A 43，氯化钾2，木糖醇6，
柠檬酸钠3，白砂糖14，活性组分B 13，活性组分 C 11，磷酸氢钠4，哈密瓜香精0.4，葡聚糖
4，水 118。
进一步的，所述活性组分A为凤尾鱼酶解产物，所述凤尾鱼酶解产物的制备方法
为：S1.取凤尾鱼鱼糜，使料水比为1:3(w/v)，用2 mol/L盐酸将溶液pH值调至2.5以呈现胃
部酸碱环境，以酶与底物浓度比为1300 U/g加入胃蛋白酶，在恒温水浴振荡器中保持37
℃、110 r/min振荡酶解2 h，在此条件下获得经胃蛋白酶酶解的初产物；S2.用2 mol/L的氢
氧化钠将经胃蛋白酶酶解后的酶解液pH值调至8.5，保持37 ℃酶解温度，复合酶添加量为
5200 U/g， 所述复合酶中胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶的质量比为5:1，所述料水比1:4.5，酶
解时间为3.5 h，酶解结束后，在100℃沸水浴中灭酶10min；将S2中的酶解产物通过真空冷
冻干燥，设置干燥条件为预冷温度-30℃,预冷时间2h，加热温度从-10℃开始18h后缓慢升
温,达到25℃,并保持到干燥终点，得到凤尾鱼酶解产物。
进一步的，所述活性组分B为泥蚶酶解产物，所述泥蚶酶解产物的制备方法为：S1.
取泥蚶全脏器搅碎成肉糜，使料水比为1:1.5(w/v)，用2 mol/L盐酸将溶液pH值调至2.0以
呈现胃部酸碱环境，以酶与底物浓度比为880U/g加入胃蛋白酶，在恒温水浴振荡器中保持
37 ℃、85 r/min振荡酶解1.3 h，在此条件下获得经胃蛋白酶酶解的初产物；S2.用2 mol/L
的氢氧化钠将经胃蛋白酶酶解后的酶解液pH值调至8.2，保持37 ℃酶解温度，复合酶添加
量为2900 U/g， 所述复合酶中胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶的质量比为7:1，所述料水比1:
2.5，酶解时间为2.8 h，酶解结束后，在100℃沸水浴中灭酶10min；将S2中的酶解产物通过
喷雾干燥的方式，设置干燥条件为进风温度160℃,进样速度为50ml/min,离心雾化器转速
为25000r/min，得到泥蚶酶解产物。
进一步的，所述活性组分C为车前草菌体粗提物，所述车前草菌体粗提物的制备方
法为：取新鲜植物的根、茎、叶分别洗净至没有明显的杂质，表面消毒处理后，接种至 PDA
（分离内生真菌）和高氏一号培养基（分离内生放线菌）上培养 5-7 d，然后分离获取菌落；
从活化斜面中挑取菌丝块接种于装有 100 mL 发酵培养基的锥形瓶中，置 30℃，150 r/
min 摇床振荡培养3 d；发酵培养物除去菌体，滤液用等体积乙酸乙酯萃取 3 次，合并有机
相，45 ℃ 减压浓缩蒸干，即为混合菌液粗提物；离心和过滤得到的菌体，用适量 95%乙醇
冷凝回流 3 次，合并乙醇相，减压浓缩蒸干，即为菌体粗提物。
实施例2
本实施例提供一种儿童功能饮料，以重量份计，由以下组分组成：活性组分A 40，氯化
钾2，木糖醇6，柠檬酸钠3，白砂糖14，活性组分B 11，活性组分 C 9，磷酸氢钠4，哈密瓜香精
0.4，葡聚糖4，水 118。本实施例中活性组分A、活性组分B、活性组分C的成分及制备方式与
实施例1一致。
实施例3
本实施例提供一种儿童功能饮料，以重量份计，由以下组分组成：活性组分A 50，氯化
钾2，木糖醇6，柠檬酸钠3，白砂糖14，活性组分B 15，活性组分 C 13，磷酸氢钠4，哈密瓜香
精0.4，葡聚糖4，水 118。本实施例中活性组分A、活性组分B、活性组分C的成分及制备方式
与实施例1一致。
实施例4
本实施例提供一种儿童功能饮料，以重量份计，由以下组分组成：活性组分A 50，氯化
钾2，木糖醇6，柠檬酸钠3，白砂糖14，活性组分B 15，活性组分 C 9，磷酸氢钠4，哈密瓜香精
0.4，葡聚糖4，水 118。
本实施例中活性组分A、活性组分B、活性组分C的成分及制备方式与实施例1一致。
实施例5
本实施例提供一种儿童功能饮料，以重量份计，由以下组分组成：活性组分A 40，氯化
钾2，木糖醇6，柠檬酸钠3，白砂糖14，活性组分B 11，活性组分 C 13，磷酸氢钠4，哈密瓜香
精0.4，葡聚糖4，水 118。
本实施例中活性组分A、活性组分B、活性组分C的成分及制备方式与实施例1一致。
效果实施例
1.增强免疫力效果实验
将通过实施例1制得的功能饮料浓缩脱水干燥，制备成粉末状，作为测试样品。
对照品：天美健牌大豆肽蛋白粉；来源：北京同仁堂健康药业股份有限公司；成人
临床推荐用量：0.167g.kg-1.d-1。
受试动物品系和级别：BALB/c小鼠，Hartley豚鼠，SPF级；数量及性别：BALB/c 小
鼠60只，雄性； Hartley豚鼠6只，均可。购入体重BALB/c小鼠17-19g，Hartley豚鼠250-
350g。由广东省医学实验动物中心提供，实验动物使用许可证号：SYXK（粤）2013-0002。实验
期间，小鼠自由进食饮水，每天观察小鼠状态。
根据样品的基本情况进行剂量设计，样品低、中、高按成人临床用量的5倍、10倍、
20倍设计剂量，分别为0.15g.kg-1.d-1、 0.30g.kg-1.d-1 、0.60g.kg-1.d-1；阳性对照组剂量
按成人推荐剂量的5倍设计，为0.835g.kg-1.d-1。将60只雄性小鼠随机各分为5组（阴性对照
组、阳性对照组、受试样品低、中、高剂量组），每组12只，其中2只作为备用动物。各组小鼠每
天按0.1mL/10g体重灌胃相应样品液，阴性对照组给予等量纯净水，每天1次，连续给药30
天。试验开始、试验结束均称量体重1次，试验期间每周称量体重1次。
小鼠淋巴细胞转化实验
末次给药1h，无菌取脾置于盛有RPMI-1640培养液的培养皿中，并放置200目筛网，用注
射器活塞在其上方研磨制成脾细胞悬液，分装脾细胞悬液至加有淋巴细胞分离液的离心管
中。400g，20℃下离心20min，离心完毕，取出离心管中淋巴细胞层离心管，加入RPMI-1640培
养液洗涤数次，250g，4℃下离心10min。洗涤完毕后，弃去上清液，加入完全培养基，吹打均
匀，用台盼兰染色计数保证95%以上活细胞率，将细胞浓度调整为3×106个/ml。
将每份脾细胞悬液分两孔加入48孔培养板中，每孔0.5ml，一孔加25 ul ConA液
（相当于5ug/ml），另一孔作为对照，置于5%CO2,37℃CO2孵箱中培养48h后每孔轻轻吸去上清
液0.3 ml，加入0.3 mlRPMI-1640培养液，同时加入CCK 8 试剂50 ul/孔，继续培养2 h。结
束培养后，吹打均匀，然后分装到96孔培养板中，每孔作3个平行实验，用酶标仪测450 nm波
长下的光密度值。淋巴细胞的增殖能力由加ConA孔的光密度值与不加ConA 孔的光密度值
的差值表示。
小鼠体液免疫功能（血清溶血素）影响
给药25天，用生理盐水洗涤(2000r/min，10min)已脱纤维的羊血3次，在压积SRBC中加
入生理盐水配成2%（v/v）的细胞悬液，每只小鼠腹腔注射0.2ml，第30天时，给药1h后，称重，
所有小鼠摘除眼球取血0.8ml于离心管，静置1h，离心2000r/min，10min，收集血清。颈椎脱
臼处死小鼠。用SA缓冲液稀释300倍的血清取1ml置试管内，再一次加入10%（v/v）
SRBC0.5ml、用SA缓冲液稀释9倍的补体1ml，设置对照管（用SA代替血清），37℃恒温水浴
20min，再冰浴，然后离心2000r/min，10min。取上清液1ml于新试管，加3.75ml都氏试剂、
0.25ml10%（v/v）SRBC，充分混匀，静置10min，以对照管为空白，540nm处分别测定各管光密
度值，溶血素的量以半数溶血值（HC50）表示。
小鼠体液免疫（抗体生成细胞）的影响
给药25天，用生理盐水洗涤已脱纤维的羊血3次，每次离心2000r/min，10min，在压积
SRBC中加入生理盐水配成2%（v/v）的细胞悬液，每只小鼠腹腔注射0.2ml，第30天时，给药1h
后，称重。颈椎脱臼处死小鼠后，取出脾脏，置于放有Hank’s液平皿中，经过200目筛网过滤
后，再用Hank’s液洗涤两次，加入到5mL RPMI-1640培养液中将细胞悬浮，计数细胞，且调整
细胞浓度为5×106个/mL。
将1g琼脂糖加双蒸水至100mL形成的表层培养基加热溶解后，40-45℃水浴保温.
与PH7.2-7.4、2倍Hank’s液等体积混合，摇匀，每管0.5mL分装不同的试管，继续向每管加入
用SA缓冲液配制成的10％SRBC(v/v） 50ul和脾细胞悬液 20ul，快速混匀，倾倒于涂有一层
薄薄的琼脂糖的薄片上，做平行片，等到琼脂糖凝固后，将薄片水平扣放在片架上，放入二
氧化碳培养箱培养1-1.5h后，将用SA缓冲液稀释了9倍的补体加到玻片架的凹槽内，继续培
养1-1.5h，然后计数溶血空斑数。
小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能及免疫器官影响的测定
末次给药1h，按体重从尾静脉注射用生理盐水1:3稀释的印度墨汁（10mL/kg），待墨汁
注入，立即计时。注入墨汁后2、10min，分别从眼眶静脉丛采血20µL，并立即加到2mL 0.1％
Na2CO3溶液中，以Na2CO3溶液作空白对照，用分光光度计在600nm波长处测定光密度值（OD），
计算吞噬指数a。
小鼠采血后脱臼处死，解剖取肝脏、脾脏和胸腺，滤纸吸干脏器周围血液后，精密
称重，计算脏器/体重比值。
NK细胞活性测定
末次给药1h，无菌取脾，无菌取脾置于盛有RPMI-1640培养液的培养皿中，并放置200目
筛网，用注射器活塞在其上方研磨制成脾细胞悬液，分装脾细胞悬液至加有淋巴细胞分离
液的离心管中。400g，20℃下离心20min，离心完毕，取出离心管中淋巴细胞层离心管，加入
RPMI-1640培养液洗涤数次，250g，4℃下离心10min。洗涤完毕后，弃去上清液，加入完全培
养基，吹打均匀，用台盼兰染色计数活细胞数（应在95%以上），最后用RPMI 1640完全培养液
调整细胞浓度为2×107个/mL。
按比例将效应细胞和靶细胞（50:1）各100ul加入U型96孔板；靶细胞和培养液各
100ul加入靶细胞自然释放孔；靶细胞和0.25%Triton各100ul加入靶细胞最大释放孔。每组
均设3个平行孔，37℃,5%CO2培养箱培养4h后，离心1500rpm,5min。每孔吸取上清液100ul于
平底96孔板，加入LDH基质液100ul/孔，反应3-10min，加入1mol/ml HCL 30ul/孔，酶标
490nm测定光密度值。
所有数据采用SPSS 16.0软件进行统计分析，测试结果如下表所示。
表1实施例样品与对照组对小鼠淋巴细胞转化的影响
注：采用方差分析方法进行统计分析，与阴性对照组比较，”a”: p<0.05;与阳性对照组
比较, “b”: p<0.01
表2 实施例样品与对照组对小鼠抗体水平（血清溶血素）的影响
注：采用方差分析方法进行统计分析，与阴性对照组比较，”a”: p<0.05;与阳性对照组
比较, “b”: p<0.01表3实施例样品与对照组对小鼠溶血空斑数的影响
注：采用方差分析方法进行统计分析，与阴性对照组比较，”a”: p<0.05;与阳性对照组
比较, “b”: p<0.01 。
表4 实施例样品与对照组对小鼠吞噬指数的影响
注：采用方差分析方法进行统计分析，与阴性对照组比较，”a”: p<0.05;与阳性对照组
比较, “b”: p<0.01 。
表6 实施例样品与对照组对小鼠NK细胞活性的影响
注：采用方差分析方法进行统计分析，与阴性对照组比较，”a”: p<0.05;与阳性对照组
比较, “b”: p<0.01 。
同样，对其余实施例和本发明的实施例其余配比进行相同实验，结果与实施例1的
效果类似。
2.抗疲劳效果验证
将通过实施例1制得的功能饮料浓缩脱水干燥，制备成粉末状，作为测试样品。将生理
盐水为空白对照组，以支链氨基酸的水溶液为阴性对照组。
实验对象：选用SD大鼠，由北京实验动物中心提供，雌雄各 半，180 只，220±18g，
约 3 月龄，在实验室饲养一个月后，经过初步游泳训练随机分为空白对照组、阴性对照组
和样品组。
试验方法
（1) 力竭性试验 ： 取样品粉末，用蒸馏水溶解，样品的浓度分别为分别为0.15g.kg
-1.d-1、 0.30g.kg-1.d-1 、0.60g.kg-1.d-1 ，样品组每天按0.1mL/10g体重灌胃；阴性对照组为
支链氨基酸 （亮氨酸∶异亮氨酸∶缬氨酸按质量比2：1:1混合后获得）的水溶液，配成浓
0.60g.kg-1.d-1，每天按0.1mL/10g体重灌胃； 各组末次灌喂 30min 后，进行大鼠负重
（5％体重）游泳试验至力竭 （力竭标准 ：负重大鼠游泳动作明显失调，不能再坚持或沉入
水底超过 3s 不能回水面为力竭 )。
（2) 血清尿素氮试验 ：取样品粉末，用蒸馏水溶解，样品的浓度分别为分别为
0.15g.kg-1.d-1、 0.30g.kg-1.d-1 、0.60g.kg-1.d-1 ，样品组每天按0.1mL/10g体重灌胃；阴性
对照组为支链氨基酸 （亮氨酸∶异亮氨酸∶缬氨酸按质量比2：1:1混合后获得）的水溶液，配
成浓0.60g.kg-1.d-1，每天按0.1mL/10g体重灌胃； 各组连续灌喂 30d 后，进行大鼠游泳试
验（无负重），90min后，拔眼球采血，用尿素氮测定试剂盒（二乙酰肼一肟法，北京化工厂生
产）检测血清尿素氮。
试验结果
实施例样品与对照组对大鼠负重游泳时间的影响见表7。
表 7实施例样品与对照组对大鼠负重游泳时间的影响对比
注：采用方差分析方法进行统计分析，与阴性对照组比较，”a”: p<0.05;与阳性对照组
比较, “b”: p<0.01 。
表 8 实施例样品与对照组对大鼠运动后血清尿素氮含量的影响
注：采用方差分析方法进行统计分析，与阴性对照组比较，”a”: p<0.05;与阳性对照组
比较, “b”: p<0.01 。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在
不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论
从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权
利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有
变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包
含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当
将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员
可以理解的其他实施方式。对于本发明中所有未详尽描述的技术细节，均可通过本领域任
一现有技术实现。