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一种治疗心脑血管疾病的中药颗粒剂
    【技术领域】
     本发明涉及一种治疗心脑血管疾病的中药颗粒剂， 特别是涉及一种治疗高血脂 症、 高血压病的中药颗粒剂及其制备方法和质量控制方法。背景技术
    
     心脑血管疾病就是心脏血管和脑血管的基本统称， 心脑血管疾病是一种 严重威胁人类， 特别是 50 岁以上中老年人健康的常见病， 即使应用目前最先进、 完善的治 疗手段， 仍有 50% 以上的脑血管意外幸存者生活不能完全自理， 全世界每年死于心脑血管 疾病的人高达 1500 万人， 居各种死因首位。心脑血管疾病已成为人类死亡病因最高的头号 杀手， 也是人们健康的 “无声凶煞” ， 心脑血管疾病具有 “发病高、 致残率高、 死亡率高、 复发 率高、 并发症高” 四高一多的特点 ； 心脑血管疾病中的高血脂症是一种全身性疾病， 是指血 中胆固醇 （TC） 和／或甘油三酯 （TG） 过高或高密度脂蛋白胆固醇 （HDL-C） 过低， 现代医学称 之为血脂异常 ； 高血脂症是导致动脉硬化的元凶， 而动脉硬化是导致心脑血管疾病最主要 的罪魁祸首 ； 心脑血管疾病中的高血压病是指在静息状态下动脉收缩压和 / 或舒张压增高 （>=140/90mmHg） ， 常伴有脂肪和糖代谢紊乱以及心、 脑、 肾和视网膜等器官功能性或器质性 改变， 高血压病是一种以动脉血压持续升高为主要表现的慢性疾病， 常引起心、 脑、 肾等重 要器官的病变并出现相应的后果。目前用于治疗高血脂症的药物主要有西药品种他汀类、 贝特类、 烟酸类等， 中药品种有山庄降脂片、 降脂灵胶囊、 维脂康胶囊等 ； 治疗高血压病的药 物主要有西药品种地平类、 普利类、 利尿降压剂等， 中药品种有牛黄降压片， 山楂降压片， 菊 明降压片等。 蒽醌糖苷是决明子降血脂的主要成分之一， 其蒽醌苷元主要为大黄酚和大黄素， 蒽醌糖苷能减少肠道对胆固醇的吸收， 增加排泄， 通过反馈调节 LDL 代谢， 降低血清胆固醇 水平， 延缓和抑制动脉粥样硬化斑块的形成， 临床上常以水煎浸膏或原生药细粉入药 ； 山楂 中的三萜酸以齐墩果酸和熊果酸为代表， 具有一定的降血脂和抗动脉粥样硬化的作用， 服 后血脂显著下降， 眼球脂质斑块沉着明显减轻， 主动脉块面积减少， 主动脉、 冠状动脉粥样 硬化病变减轻。山楂中总黄酮能够降低高血脂大鼠血清中胆固醇、 甘油三酯和低密度脂蛋 白胆固醇的含量， 升高大鼠血清中高密度脂蛋白胆固醇的含量 ； 荷叶具有调节血脂的功能， 主要活性成分为黄酮和生物碱， 作用特点主要是促进胆固醇的代谢， 其水煎剂能降低全血 脂比粘度， 红细胞压积， 从而改善血液浓粘状态， 对于防治高血脂症、 肥胖以及动脉粥样硬 化等并发症具有重要意义。
     由上述各药材活性成分的资料可见， 中药制剂中各活性成分含量的高低将直接影 响到中药制剂的疗效， 最大程度上提高制剂中的活性成分极为重要。现有技术中山庄降脂 片是将决明子、 山楂、 荷叶三味药材水煎煮三次， 滤过， 滤液减压浓缩至稠膏， 加入辅料适 量， 混匀， 减压干燥， 粉碎成细粉， 制粒， 干燥， 压片， 包糖衣制备而成。 该工艺繁琐， 生产效率 低下。本发明人起初将决明子、 山楂、 荷叶三味药材采用传统的多功能提取罐水煎煮， 提取 液经浓缩后， 用喷雾干燥器喷雾干燥成干膏粉， 加入适宜的辅料混合制粒制备颗粒剂， 极大
     地简化了生产工艺， 生产效率也得到了明显提升， 然而喷雾干燥进风温度达 200~300℃， 其 使物料成为雾滴分散在热空气中， 物料于热空气呈并流、 逆流或混流的方式互相接触， 使水 分迅速蒸发， 达到干燥的目的， 但喷雾干燥有热效率低， 一般为 30~50%， 体积庞大， 生产能力 低， 投资高等缺点， 在中药浸膏的干燥过程中易出现粘壁和结块问题， 造成提取液中有效成 分被破坏， 极大的降低了物料中活性成分的含量， 采用现有技术制成的颗粒剂， 在服用相同 剂量的前提下， 其治疗效果将大打折扣。 此外， 现有技术中山庄降脂片质量控制方法仅采用 决明子对照药材进行了薄层色谱鉴别， 无法有效控制产品质量， 患者用药安全性和产品治 疗效果都得不到保证。发明内容 本发明目的之一是提供一种治疗心脑血管疾病的中药颗粒剂。
     本发明目的之二是提供一种治疗心脑血管疾病的中药颗粒剂的制备方法。
     本发明目的之三是提供一种治疗心脑血管疾病的中药颗粒剂的质量控制方法。
     本发明的治疗心脑血管疾病的中药颗粒剂， 由决明子、 山楂、 荷叶、 糊精、 阿司帕坦 和杂果粉末香精组成， 其配制方法为 ： 先将决明子 1240g、 山楂 620g、 荷叶 420g 三味中药材 水煎， 用其提取物制成 1000g 中药颗粒剂干膏粉， 再用该干膏粉按以下分量配制 ： 干膏粉 430~500g 糊精 450~550g 阿司帕坦 5~40g 杂果粉末香精 2~10g 将上述成分制成 1000g 中药颗粒剂。
     本发明所述治疗心脑血管疾病的中药颗粒剂较好的配方为 ： 干膏粉 450g 糊精 539g 阿司帕坦 8g 杂果粉末香精 3g 所述的阿司帕坦为一种蛋白型非糖甜味剂， 其甜味是蔗糖甜度的 180 ～ 200 倍， 无现有 技术产品中人造甜味品的苦味、 土味、 化学味及金属味， 且含热量低， 本发明中药颗粒剂配 方中加入甜味剂阿司帕坦， 其口感与现有技术制备的颗粒剂相比得到了显著改善， 提高了 患者用药的顺应性。
     本发明所述的治疗心脑血管疾病的中药颗粒剂的制备方法包括如下步骤 ： 步骤 1、 将决明子、 山楂、 荷叶用多功能提取罐水煎煮 3 次， 第一次加 10 倍药材量的水， 煎煮 2 小时 ； 第二次加 8 倍药材量的水， 煎煮 2 小时， 第三次加 8 倍药材量的水， 煎煮 2 小时， 每次提取均控制在微沸状态， 蒸汽压力控制在 0.05~0.1Mpa， 温度控制在 98~102℃， 合并三 次提取液 ； 步骤 2、 将上述提取液过滤后， 用三效浓缩器浓缩成浸膏， 浓缩时温度控制在 60~90℃， 蒸汽压力控制在 0.05~0.1Mpa， 真空度控制在 0.02~0.1Mpa， 浓缩至相对密度为 1.20~1.30 ； 步骤 3、 将浸膏进行真空带式干燥成干浸膏， 干燥时物料温度控制在 40~70℃， 真空压 力控制在 -0.08Mpa~-0.12Mpa， 进料速度控制在 15~20L/h， 料带传送速度控制在 20~30cm/ min， 优选物料温度为 50~60 ℃， 真空压力为 -0.1Mpa， 进料速度为 15L/h， 料袋传送速度为 25cm/min ； 步骤 4、 将干浸膏过 60~80 目筛， 制备出干浸膏粉 ； 步骤 5、 将干膏粉与糊精、 阿司帕坦、 杂果粉末香精， 置于湿法制粒机中， 干混 3~8 分钟， 加入 50%~95% 乙醇， 制粒 2~5 分钟， 干燥， 制得本发明中药颗粒剂， 其中干混时间优选 5 分 钟， 乙醇浓度优选 75%， 制粒时间优选 4 分钟。真空带式干燥机是一种连续进料、 连续出料形式的接触式真空干燥设备， 由于物 料直接进入高真空度下经过一段时间逐步干燥， 干燥后所得的颗粒有一定程度的结晶效 益， 同时从微观结构上看内部有微孔， 直接粉碎到所需要的粒径后， 颗粒的外观好， 对于速 溶产品， 可以大大提升产品的档次 ； 采用真空带式干燥机可以直接将浓缩浸膏送入干燥机 中进行干燥， 无需添加任何辅料， 这样可以减少最终产品的服药量， 提高产品档次， 产品在 整个干燥过程中， 处于真空、 封闭环境， 干燥过程温和， 本发明治疗心脑血管疾病的中药颗 粒剂的制备方法中， 浓缩后的浸膏由现有技术的喷雾干燥改变成真空带式干燥， 使本发明 中药颗粒剂中主要活性成分比现有技术颗粒剂大幅提高 ： 大黄酚含量提高了 55%， 熊果酸 含量提高了 150%， 总黄酮含量提高了 58%， 用本发明方法制备的中药颗粒剂可以最大限度 的保留原材料中的有效成分 ； 在产能上， 用真空带式干燥机制备的治疗心脑血管疾病的中 药颗粒剂干膏粉为 80~100kg/ 小时， 用喷雾干燥机制备的中药颗粒剂干膏粉为 20~25kg/ 小 时， 生产能力提高了 4 倍， 生产过程能耗降低了 50% 以上。本发明所述的治疗心脑血管疾病 的中药颗粒剂的质量控制方法包括以下内容 ： 1、 性状 本品为棕褐色至褐色的颗粒 ； 味甜、 微酸。
     2、 鉴别与测定 （1） 决明子的鉴别 ： 取本发明中药颗粒剂 5g， 研细， 加乙醇 20ml， 在功率为 250W， 频率 为 40KHz 的条件下超声处理 1 小时， 冷却至室温， 滤过， 滤液蒸干， 残渣加稀盐酸 10ml 使 溶解， 再加氯仿 20ml 加热回流 30 分钟， 冷却至室温， 移至分液漏斗中， 分取氯仿层， 酸液 用氯仿提取 2 次， 每次 10ml， 合并氯仿液， 蒸干， 残渣加甲醇 1ml 使溶解， 作为供试品溶液 ； 另取决明子对照药材 1g（购自中国食品药品检定研究院， 本品为豆科植物决明子 Cassia obtusifolia L. 干燥成熟种子） ， 加入乙醇 10ml， 用上述方法制成对照药材溶液， 再取大黄 素 （购自中国食品药品检定研究院 ； 大黄素 （Emodin） 对照品系供中国药典一部大黄、 首乌 藤、 七宝美髯颗粒、 更年安片、 夜宁糖浆、 胃肠安丸、 首乌丸、 卫生部药品标准中药成分制剂 第 4 册清血内消丸、 第 5 册复方首乌补液、 第 7 册胜济鳖甲丸、 第 8 册小败毒膏、 第 10 册安眠 补脑糖浆、 第 12 册茵莲清肝合剂、 第 13 册生血宝颗粒、 第 15 册复方消痔栓、 第 17 册巴戟补 酒、 第 19 册独圣活血片等品种项下鉴别或含量测定用） 、 大黄酚 （购自中国食品药品检定研 究院 ； 大黄酚 （Chrysophanol） 对照品系供中国药典一部大黄项下含量测定， 含量以 99.6% 计） 对照品， 加甲醇制成每毫升中含 1mg 大黄素和 1mg 大黄酚的混合溶液， 作为对照品溶液， 按照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液 5μl， 对照品、 对照药材溶液各 2μl， 分别点于同一 以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G 薄层板上， 以沸程为 30~60℃的石油醚 - 甲酸乙酯 - 甲 酸的上层溶液为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 置紫外线波长为 365nm 的紫外光灯下检视， 所述 的石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸比例为 15 ∶ 5 ∶ 1， 供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应的位 置上， 显相同的橙黄色荧光斑点， 置氨气中熏后， 日光下检视， 斑点变为红色。
     （2） 山楂的鉴别 ： 取本发明中药颗粒剂 40g， 研细， 加乙醚 150ml， 水浴加热回流 2 小时， 滤过， 滤液挥干， 残渣用 10ml 沸程为 30~60℃的石油醚浸泡 2 分钟， 倾去石油醚， 残渣 加无水乙醇 1ml 使溶解， 作为供试品溶液 ； 另取熊果酸对照品 （购自中国食品药品检定研究 院； 熊果酸 （Ursolicacid） 对照品供中国药典夏枯草、 七味都气丸、 大山楂丸、 山楂化滞丸、 六味地黄丸， 卫生部药品标准中药成方制剂第 5 册麦味地黄片、 杞菊地黄片、 第 8 册调胃舒 肝丸、 第 11 册六味地黄丸 （浓缩丸） 、 第 12 册小儿胃宝丸、 第 13 册温中止泻丸、 第 15 册心可舒胶囊、 第 16 册心可舒片、 第 17 册降脂灵片等品种项下鉴别或含量测定用） ， 加无水乙醇制 成每毫升含 0.5mg 的溶液， 作为对照品溶液。 按照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液 10μl， 对照品溶液 2μl， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G 薄层板上， 以甲苯 - 醋 酸乙酯 - 甲酸为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 喷以 10% 硫酸乙醇溶液， 在 105℃加热至斑点显 色清晰， 置紫外线波长为 365nm 的紫外光灯下检视， 所述的甲苯∶醋酸乙酯∶甲酸比例为 20 ∶ 4 ∶ 0.5， 供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应的位置上， 显橙黄色荧光斑点。
     （3） 荷叶的鉴别 ： 取本发明中药颗粒剂 5g， 研细， 加甲醇 50ml， 在功率为 250W， 频率 为 40KHz 的条件下超声处理 30 分钟， 滤过， 滤液蒸干， 残渣加水 25ml 使溶解， 用 40% 氢氧化 钠溶液调节 pH 值至 10， 置分液漏斗中， 用氯仿振摇提取 3 次， 每次 15ml， 合并氯仿液， 蒸干， 残渣加甲醇 1ml 使溶解， 作为供试品液。另取荷叶对照药材 2g（购自中国食品药品检定研 究院 ； 本品为睡莲科植物 Nelumbo nucifera Gaertn. 的干燥叶的粉末， 系供国家药品监督 管理局 《国家中成药标准汇编 （中成药地方标准上升国家标准部分） 》 内科心系分册降脂宁 胶囊 WS-11287（ZD-1287） -2002， 降脂宁颗粒 （WS-11122（ZD-1122） -2002） 项下薄层色谱 鉴别用） ， 同法制成对照药材溶液， 按照薄层色谱法试验， 吸取上述两种溶液各 5μl， 分别点 于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G 薄层板上， 以环己烷 - 醋酸乙酯 - 二乙胺为展 开剂， 展开， 取出， 晾干， 置 105℃烘 10 分钟， 喷以改良碘化铋钾试液， 所述的环己烷∶醋酸 乙酯∶二乙胺比例为 6 ∶ 4 ∶ 1。供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应的位置上， 显相同 颜色的斑点 ； （4） 含量测定 按照高效液相色谱法测定 ： 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂， 甲醇 -0.1% 磷酸为流 动相， 检测波长为 254nm， 理论塔板数按大黄酚计算不低于 5000， 所述的甲醇 -0.1% 磷酸的 比例优选 84 ∶ 16 ； 精密称取大黄酚对照品， 加无水乙醇 - 醋酸乙酯溶解并稀释成每毫升 含有 25μg 溶液， 即得对照品溶液， 所述的无水乙醇∶醋酸乙酯的比例优选 2 ∶ 1 ； 取装量 差异项下的本发明中药颗粒剂， 置研钵中研磨， 精密称取 0.65g 置 100ml 锥形瓶中， 精密加 入甲醇 25ml， 称重， 在功率为 250W、 频率为 40KHz 的条件下超声处理 45 分钟， 取出， 冷却至 室温， 用甲醇补足减失重量， 滤过， 精密量取续滤液 20ml 置烧瓶中， 水浴蒸干， 加 10% 盐酸 20ml、 氯仿 20ml， 水浴回流水解 1 小时， 取出， 冷却至室温， 置分液漏斗中， 分取氯仿液， 回流 瓶用氯仿冲洗 3 次， 每次 20ml， 每次冲洗液置分液漏斗中， 强力振摇萃取 3 次， 合并氯仿液， 水浴蒸干， 再加无水乙醇 - 醋酸乙酯溶解并定容至 10ml， 摇匀， 用 0.45μm 微孔滤膜滤过， 取 续滤液， 即得供试品溶液， 所述无水乙醇∶醋酸乙酯比例优选 2 ∶ 1 ； 分别精密吸取对照品 溶液与供试品溶液各 20μl， 注入液相色谱仪， 测定峰面积， 计算大黄酚的含量。
     本发明治疗心脑血管疾病的中药颗粒剂每袋 8g 含决明子以大黄酚计， 不少于 4.0mg。
     现有技术的山庄降脂片质量标准中仅对决明子进行薄层鉴别， 未制定含量测定 项， 在当今对药品质量与安全要求越来越高的环境下， 该质量标准已明显不能满足产品质 量监控的要求。本发明所述的治疗心脑血管疾病的中药颗粒剂的质量控制方法采用薄层 色谱法检测决明子、 山楂、 荷叶中的有效成分， 并增加了高效液相色谱法对大黄酚的含量测 定。 与现有技术的山庄降脂片质量标准相比， 本发明中药颗粒剂质量控制方法增加了山楂、 荷叶的薄层鉴别， 并对决明子、 山楂、 荷叶薄层鉴别方法中供试品和对照品溶液的制备方法， 薄层展开条件进行了改进提高 ； 增加了决明子中大黄酚的含量测定， 并对方法中供试品 和对照品溶液的制备方法、 测定条件也进行了改进提高， 采用本发明中药颗粒剂质量控制 方法能更有效的对产品中多个有效成分同时进行控制， 有效的保证了产品质量， 提高了产 品疗效和患者用药安全性。
     本发明采用高效液相色谱法测定两种工艺制得的中药颗粒剂中的活性成分含量， 并结合药效学试验比较了两种工艺制得的中药颗粒剂的产品试验结果， 证明了采用本发明 方法制备的中药颗粒剂， 在处方中各味药材所含活性成分、 制备工艺和适宜的辅料共同作 用下， 较现有技术制得的颗粒剂治疗效果有了显著的提升。
     下面通过试验数据证明本发明具有的积极效果 ： 所选择的样品 ： R1 为现有技术山庄降脂颗粒， 由决明子、 山楂、 荷叶三味药材用多功能 提取罐水煎煮， ， 滤过， 浓缩成浸膏后， 用喷雾干燥器喷雾干燥制成干膏粉， 再与适宜的辅料 混合制粒、 干燥制得 ； R2 为本发明中药颗粒剂。
     第一部分 ： R1 与 R2 的主要活性成分含量测定比较 ： 采用高效液相色谱法对 R1 与 R2 各 10 批次进行检验， 比较两种颗粒剂中主要活性成分 的含量， 结果见表 1、 表 2、 表 3。 1、 R1 与 R2 中大黄酚的含量测定 ： 步骤 1、 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂， 甲醇 -0.1% 磷酸为流动相， 检测波长为 254nm， 理论塔板数按大黄酚计算不低于 5000， 所述的甲醇 -0.1% 磷酸的比例为 84 ： 16。
     步骤 2、 精密称取大黄酚对照品， 加无水乙醇 - 醋酸乙酯溶解并稀释成每毫升含有 25μg 溶液， 即得对照品溶液， 所述的无水乙醇∶醋酸乙酯的比例为选 2 ： 1。
     步骤 3、 取装量差异项下的中药颗粒剂， 置研钵中研磨， 精密称取 0.65g 置 100ml 锥 形瓶中， 精密加入甲醇 25ml， 称重， 在功率为 250W、 频率为 40KHZ 条件下超声处理 45 分钟， 取出， 冷却至室温， 用甲醇补足减失重量， 滤过， 精密量取续滤液 20ml 置烧瓶中， 水浴蒸干， 加 10% 盐酸 20ml、 氯仿 20ml， 水浴回流水解 1 小时， 取出， 冷却至室温， 置分液漏斗中， 分取 氯仿液， 回流瓶用氯仿冲洗 3 次， 每次 20ml， 每次冲洗液置分液漏斗中， 强力振摇萃取 3 次， 合并氯仿液， 水浴蒸干， 再加无水乙醇 - 醋酸乙酯溶解并定容至 10ml， 摇匀， 用 0.45μm 微孔 滤膜滤过， 取续滤液， 即得供试品溶液， 所述的无水乙醇∶醋酸乙酯的比例为选 2 ： 1。
     步骤 4、 测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 20μl， 注入液相色谱 仪， 测定峰面积， 计算大黄酚的含量。
     2、 R1 与 R2 中熊果酸的含量测定 ： 步骤 1、 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂， 以甲醇 - 水 - 磷酸 - 三乙胺为流动相， 检测 波长为 210nm， 理论塔板数按熊果酸计算不低于 3000， 所述的甲醇 - 水 - 磷酸 - 三乙胺比例 为 87 ： 13 ： 0.2 ： 0.04。
     步骤 2、 精密称取熊果酸对照品， 加甲醇水溶液溶解并稀释制成每 1ml 含有 10μg 的对照品溶液。
     步骤 3、 取装量差异项下的中药颗粒剂， 置研钵中研磨， 精密称取 1.0g， 置 100ml 量 瓶中， 精密加入甲醇 50ml， 称重， 在功率为 250W、 频率为 40KHZ 条件下超声处理 30 分钟， 取 出， 冷却至室温， 用甲醇稀释至刻度， 摇匀， 滤过， 取续滤液， 即得供试品溶液。
     步骤 4、 测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 20μl， 注入液相色谱
     仪， 测定峰面积， 计算熊果酸的含量。
     3、 R1 与 R2 中总黄酮的含量测定 ： 步骤 1、 精密称取芦丁对照品 0.0266g， 置于 50ml 量瓶中， 加乙醇适量， 在功率为 250W、 频率为 40KHZ 条件下超声处理使溶解， 放冷至室温， 加乙醇至刻度， 摇匀， 精密量取 20ml， 置 于 50ml 量瓶中， 加水稀释至刻度， 摇匀， 即得对照品溶液 ； 步骤 2、 取装量差异项下的中药颗粒剂， 置研钵中研磨， 精密称取 1.0g， 加乙醇适量， 在 功率为 250W、 频率为 40KHZ 条件下超声处理使溶解， 冷却至室温， 加乙醇至刻度， 摇匀， 滤 过， 即得供试品溶液 ； 步骤 3、 精密量取对照品溶液和供试品溶液各 2ml， 分别置 25ml 量瓶中， 以乙醇为空白， 按照紫外 - 可见分光光度法试验在 500nm 的波长处测定吸光度， 计算总黄酮含量。
     表1 R1 与 R2 中大黄酚的含量测定结果 单位 ： mg/g表2R1 与 R2 中熊果酸的含量测定结果单位 ： mg/g表3R1 与 R2 中总黄酮的含量测定结果单位 ： mg/g试验数据分析说明 ： R2 由于采用了真空带式干燥机对浸膏进行干燥， 最大程度上保留 了药材中的活性成分， 对提高本发明中药颗粒剂的疗效具有积极的作用。 R2 比 R1 的主要活 性成分提高幅度为 ： 大黄酚 55%， 熊果酸 150%， 总黄酮 58%。
     第二部分 ： R1 与 R2 的药效学研究 1、 抗高血脂作用 考察了 R1 与 R2 对高脂血症小鼠血脂的影响， 采用小鼠高脂血症模型， 灌胃 （ig） 给药 进行了比较研究， R1 与 R2 对高脂血症小鼠的血脂影响结果见表 4。
     实验方法 ： 取健康小鼠 48 只， 雌雄各半， 随机分为 4 组。正常对照组 ： 每天上午灌 -1 -1 胃 2% 吐温溶液 20ml·kg ， 下午灌胃蒸馏水 20ml·kg ， 连续 7 天 ； 高脂血症模型对照组 ： -1 每天上午灌胃 2% 吐温溶液 20 ml·kg ， 下午灌胃脂肪乳剂 20 ml·kg-1， 连续 7 天 ； R1 给 -1 药组 ： 每天上午灌胃 R1 2% 吐温溶液， 以颗粒剂重量计， 剂量为 5g·kg ， 下午灌胃脂肪乳剂 -1 20ml·kg ， 连续 7 天。R2 给药组 ： 每天上午灌胃 R2 2% 吐温溶液， 以颗粒剂重量计， 剂量为 -1 -1 5g·kg ， 下午灌胃脂肪乳剂 20ml·kg ， 连续 7 天。各组灌胃体积均为 1ml/100g， 各组动物 最后一次灌胃后， 禁食不禁水 12h 后， 眼眶取血， 分离血清。采用酶试剂 CE-COD-POD 法测定 血清总胆固醇 （TC） 和酶试剂 GPO-POD 法测定血清甘油三脂 （TG） 。
     表4R1 与 R2 对高脂血症小鼠血脂的影响 (±S)# ## 注 ：*P<0.05， **P<0.01， 与正常对照组相比较 ； P<0.05， P<0.01， 与高脂血症模型组 比较。TC 降低率、 GT 降低率与高脂血症模型组相比较。
     结果表明 ： （1） 高脂血症模型组与正常对照组比较， 能显著升高 TC （**P<0.01)， TG（*P <0.05） ， 说明本方法造模成功。 （2） 与高脂血症模型组相比较， R1 给药组与 R2 给药组 ## # 均能显著降低高血症小鼠的 TC（ P<0.01） 和 TG（ P<0.05） ， 降低率分别为 44.56%、 51.19% 和 16.50%、 29.61%。然而在 TC 和 TG 降低程度上， R2 给药组明显优于 R1 给药组， 表明 R2 对 高脂血症的治疗具有更加显著的疗效。
     2、 抗高血压作用 考察了 R1 与 R2 对自发性高血压大鼠的降血压作用， 选择 SHR 大鼠 24 只， 雌雄各半， 体 重为 220±20g。测试前将大鼠放入 37±1℃电热恒温箱内加温， 10min 后用 CRB- Ⅱ型大鼠 电脑血压心率仪间接测定大鼠尾动脉收缩压 （SBP） 及心率 （HR） 。正式试验前每天测压训练 一次， 约 2 周， 待大鼠适应环境、 血压稳定后， 按体重和血压随机分成 3 组， 每组 8 只， 分别灌 -1 胃服蒸馏水， R1 以颗粒剂重量计， 剂量为 5g·kg ， R2 以颗粒剂重量计， 剂量为 5g·kg-1， 灌 胃体积均为 1ml/100g， 对照组灌服蒸馏水， 连续给药 14 天， 测定给药前及给药后 1h 的收缩 压和心率， 采用两组间 t 检验进行统计学处理， 各给药组均与对照组比较收缩压 （SBP） 及心 率 （HR） 均数差异的显著性。R1 与 R2 对自发性高血压大鼠的降血压作用结果见表 5。
     表5R1 与 R2 对自发性高血压大鼠的降血压作用结果 (±S)注： 收缩压下降 1.33 kPa 为有效， 与对照组比较， *P<0.05。
     结果表明， 对照组大鼠在试验期中血压逐步上升。两组颗粒剂给药组连续灌服给 药后， 血压缓慢下降， R1 给药组和 R2 给药组 14d 中收缩压平均下降值分别为 1.73±0.42 和 2.70±0.39kPa， 与对照组相比有显著差异， P 值均＜ 0.01。如以 14d 平均收缩压下降 1.33kPa 作为有效降压指标， SHR 给予 R1 与 R2 5g/kg 后， 其血压下降的有效率分别为 75% 和 100%， 两组颗粒剂对 SHR 心率无明显影响。上述结果表明， R2 每日 5g/kg， 连续给药 14d， 对自发性高血压大鼠的降压作用优于 R1。
     本发明对 R1 与 R2 进行了抗高血脂、 抗高血压等试验比较， 结果表明 ： 在抗高血脂 作用方面， R2 给药组和 R1 给药组均能显著降低高血症小鼠的 TC 和 TG， 但在 TC 和 TG 降低 程度上， R2 给药组明显优于 R1 给药组， 表明 R2 对高脂血症的治疗具有更加显著的疗效。 在 抗高血压作用方面， R2 给药组有优于 R1 给药组对自发性高血压大鼠的降血压作用。此外， R2 相关活性成分含量测定结果也证实其能在更大程度上保留主要活性成分， 对提高本发明 中药颗粒剂疗效具有积极的效果。
     若非特指， 本发明所用的原材料均为市售商品， 所有化学试剂均可从普通试剂商 店购得。具体实施方式
     以下实施例旨在说明本发明， 而不是限制本发明。
     实施例 1 一种治疗心脑血管疾病的中药颗粒剂， 是先将决明子 1240g、 山楂 620g、 荷叶 420g 三味 中药材水煎， 用其提取物制成 1000g 中药颗粒剂干膏粉， 再用该干膏粉按以下分量配制 ： 干膏粉 443g 糊精 550g 阿司帕坦 5g 杂果粉末香精 2g 将干膏粉与糊精、 阿司帕坦、 杂果粉末香精， 置于湿法制粒机中， 干混 3 分钟， 加入 95% 乙醇制粒 5 分钟， 干燥， 按照 8g/ 袋分装成袋， 制得本发明中药颗粒剂。
     实施例 2 一种治疗心脑血管疾病的中药颗粒剂， 是先将决明子 1240g、 山楂 620g、 荷叶 420g 三味 中药材水煎， 用其提取物制成 1000g 中药颗粒剂干膏粉， 再用该干膏粉按以下分量配制 ： 干膏粉 450g 糊精 539g 阿司帕坦 8g 杂果粉末香精 3g 将干膏粉与糊精、 阿司帕坦、 杂果粉末香精， 置于湿法制粒机中， 干混 5 分钟， 加入 75% 乙醇制粒 4 分钟， 干燥， 按照 8g/ 袋分装成袋， 制得本发明中药颗粒剂。 实施例 3 一种治疗心脑血管疾病的中药颗粒剂， 是先将决明子 1240g、 山楂 620g、 荷叶 420g 三味 中药材水煎， 用其提取物制成 1000g 中药颗粒剂干膏粉， 再用该干膏粉按以下分量配制 ： 干膏粉 500g 糊精 485g 阿司帕坦 10g 杂果粉末香精 5g 将干膏粉与糊精、 阿司帕坦、 杂果粉末香精， 置于湿法制粒机中， 干混 5 分钟， 加入 75% 乙醇制粒 4 分钟， 干燥， 按照 8g/ 袋分装成袋， 制得本发明中药颗粒剂。
     实施例 4 一种治疗心脑血管疾病的中药颗粒剂， 是先将决明子 1240g、 山楂 620g、 荷叶 420g 三味 中药材水煎， 用其提取物制成 1000g 中药颗粒剂干膏粉， 再用该干膏粉按以下分量配制 ： 干膏粉 430g 糊精 550g 阿司帕坦 10g 杂果粉末香精 10g 将干膏粉与糊精、 阿司帕坦、 杂果粉末香精， 置于湿法制粒机中， 干混 8 分钟， 加入 50% 乙醇制粒 2 分钟， 干燥， 按照 8g/ 袋分装成袋， 制得本发明中药颗粒剂。
     实施例 5 一种治疗心脑血管疾病的中药颗粒剂， 是先将决明子 1240g、 山楂 620g、 荷叶 420g 三味 中药材水煎， 用其提取物制成 1000g 中药颗粒剂干膏粉， 再用该干膏粉按以下分量配制 ： 干膏粉 500g 糊精 450g 阿司帕坦 40g 杂果粉末香精 10g 将干膏粉与糊精、 阿司帕坦、 杂果粉末香精， 置于湿法制粒机中， 干混 5 分钟， 加入 75% 乙醇制粒 4 分钟， 干燥， 按照 8g/ 袋分装成袋， 制得本发明中药颗粒剂。
     实施例 6 由决明子 1240g、 山楂 620g、 荷叶 420g， 用多功能提取罐水煎煮 3 次， 第一次加 10 倍 药材量的水， 控制微沸状态， 蒸汽压力控制在 0.05~0.1Mpa， 温度控制在 98~102 ℃， 煎煮 2 小时 ； 第二次加 8 倍药材量的水， 控制微沸状态， 蒸汽压力控制在 0.05~0.1Mpa， 温度控 制在 98~102 ℃， 煎煮 2 小时 ； 第三次加 8 倍药材量的水， 控制微沸状态， 蒸汽压力控制在 0.05~0.1Mpa， 温度控制在 98~102℃， 煎煮 2 小时， 合并三次提取液。将提取液过滤后， 用三 效浓缩器浓缩成浸膏 ； 浓缩时温度控制在 60~90℃， 蒸汽压力控制在 0.05~0.1Mpa， 真空度 控制在 0.02~0.1Mpa， 浓缩至相对密度为 1.20~1.30 的浸膏 ； 将浸膏进行真空带式干燥成干 浸膏， 干燥时物料温度控制在 50~60℃， 真空压力控制在 -0.1Mpa， 进料速度控制在 15L/h， 料带传送速度控制在 25cm/min ； 干燥后将干浸膏粉碎过 60 目筛， 制备出 1000g 本实施例中 药颗粒剂干浸膏粉。
     通过不同批次或产地的药材重复试验， 制备 1000g 的本发明中药颗粒剂干膏粉重 量在 430~500g 范围内。
     实施例 7 本发明中药颗粒剂的质量控制方法 【性状】 本品为棕褐色至褐色的颗粒 ； 味甜、 微酸。
     【鉴别】 （1） 决明子的鉴别 ： 取本发明实施例 2 的中药颗粒剂 5g， 研细， 加乙醇 20ml， 在功率为 250W， 频率为 40KHz 的条件下超声处理 1 小时， 冷却至室温， 滤过， 滤液蒸干， 残渣 加稀盐酸 10ml 使溶解， 再加氯仿 20ml 加热回流 30 分钟， 冷却至室温， 移至分液漏斗中， 分 取氯仿层， 酸液用氯仿提取 2 次， 每次 10ml， 合并氯仿液， 蒸干， 残渣加甲醇 1ml 使溶解， 作 为供试品溶液。另取决明子对照药材 1g， 加入乙醇 10ml， 按照上述方法制成对照药材溶液。 再取大黄素、 大黄酚对照品， 加甲醇制成每毫升中含 1mg 大黄素和 1mg 大黄酚的混合溶液， 作为对照品溶液。按照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液 5μl， 对照品、 对照药材溶液各 2μl， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G 薄层板上， 以沸程为 30~60℃的石 油醚 - 甲酸乙酯 - 甲酸的上层溶液为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 置紫外线波长为 365nm 的紫 外光灯下检视， 所述的石油醚 ： 甲酸乙酯 ： 甲酸比例为 15 ： 5： 1。供试品色谱中， 在与对照药 材色谱相应的位置上， 显相同的橙黄色荧光斑点， 置氨气中熏后， 日光下检视， 斑点变为红 色。
     （2） 山楂的鉴别 ： 取本发明实施例 2 的中药颗粒剂 40g， 研细， 加乙醚 150ml， 水浴 加热回流 2 小时， 滤过， 滤液挥干， 残渣用 10ml 沸程为 30~60℃的石油醚浸泡 2 分钟， 倾去石 油醚， 残渣加无水乙醇 1ml 使溶解， 作为供试品溶液。另取熊果酸对照品， 加无水乙醇制成 每毫升含 0.5mg 的溶液， 作为对照品溶液。 按照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液 10μl， 对 照品溶液 2μl， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G 薄层板上， 以甲苯 - 醋 酸乙酯 - 甲酸为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 喷以 10% 硫酸乙醇溶液， 在 105℃加热至斑点显 色清晰， 置紫外线波长为 365nm 的紫外光灯下检视， 所述的甲苯∶醋酸乙酯∶甲酸比例为 20 ∶ 4 ∶ 0.5。供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应的位置上， 显橙黄色荧光斑点。
     （3） 荷叶的鉴别 ： 取本发明实施例 2 的中药颗粒剂 5g， 研细， 加甲醇 50ml， 在功率 为 250W， 频率为 40KHz 的条件下超声处理 30 分钟， 滤过， 滤液蒸干， 残渣加水 25ml 使溶解， 用 40% 氢氧化钠溶液调节 pH 值至 10， 置分液漏斗中， 用氯仿振摇提取 3 次， 每次 15ml， 合并 氯仿液， 蒸干， 残渣加甲醇 1ml 使溶解， 作为供试品液。 另取荷叶对照药材 2g， 用上述方法制成对照药材溶液。 按照薄层色谱法试验， 吸取上述两种溶液各 5μl， 分别点于同一以羧甲基 纤维素钠为黏合剂的硅胶 G 薄层板上， 以环己烷 - 醋酸乙酯 - 二乙胺为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 置 105℃烘 10 分钟， 喷以改良碘化铋钾试液， 所述的环己烷∶醋酸乙酯∶二乙胺比例 为 6 ∶ 4 ∶ 1。供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应的位置上， 显相同颜色的斑点。
     【含量测定】 按照高效液相色谱法测定。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 ； 甲 醇 -0.1% 磷酸为流动相， 检测波长为 254nm， 理论塔板数按大黄酚计算不低于 5000， 所述的 甲醇 -0.1% 磷酸的比例为 84 ∶ 16 ； 精密称取大黄酚对照品， 加无水乙醇 - 醋酸乙酯溶解并 稀释成每毫升含有 25μg 溶液， 即得对照品溶液， 所述的无水乙醇 - 醋酸乙酯比例为 2 ： 1； 取装量差异项下的本发明实施例 2 的中药颗粒剂， 置研钵中研磨， 精密称取 0.65g 置 100ml 锥形瓶中， 精密加入甲醇 25ml， 称重， 在功率为 250W、 频率为 40KHz 的条件下超声处理 45 分 钟， 取出， 冷却至室温， 用甲醇补足减失重量， 滤过， 精密量取续滤液 20ml 置烧瓶中， 水浴蒸 干， 加 10% 盐酸 20ml、 氯仿 20ml， 水浴回流水解 1 小时， 取出， 冷却至室温， 置分液漏斗中， 分 取氯仿液， 回流瓶用氯仿冲洗 3 次， 每次 20ml， 每次冲洗液置分液漏斗中， 强力振摇萃取 3 次， 合并氯仿液， 水浴蒸干， 再加无水乙醇 - 醋酸乙酯溶解并定容至 10ml， 摇匀， 用 0.45μm 微孔滤膜滤过， 取续滤液， 即得供试品溶液， 所述的无水乙醇 - 醋酸乙酯比例为 2 ： 1； 分别精 密吸取对照品溶液与供试品溶液各 20μl， 注入液相色谱仪， 测定峰面积， 计算大黄酚的含 量。
     本发明颗粒剂每袋 8g 含决明子以大黄酚计， 不少于 4.0mg。14