收藏
下载资源 加入会员免费下载

用作CCR2受体拮抗剂的巯基咪唑.pdf

上传人：00****42 文档编号：449408 上传时间：2018-02-17 格式：PDF 页数：93 大小：3.63MB
返回 下载 相关 举报
摘要
申请专利号：

CN200580016555.4

 申请日：

2005.05.24
公开号：

CN1956980A

 公开日：

2007.05.02
当前法律状态：

撤回

 有效性：

无权
法律详情：

发明专利申请公布后的视为撤回|||实质审查的生效|||公开
IPC分类号：

C07D417/06(2006.01); C07D417/04(2006.01); C07D233/84(2006.01); C07D233/90(2006.01); C07D409/04(2006.01); C07D413/04(2006.01); C07D403/04(2006.01); C07D401/04(2006.01); C07C211/29(2006.01); A61K31/4439(2006.01); A61K31/501(2006.01); A61K31/502(2006.01); A61K31/427(200

 主分类号：

C07D417/06
申请人：

詹森药业有限公司;
发明人：

G·M·博克克斯; G·R·E·范龙门; J·G·P·－O·多扬; E·科塞曼斯
地址：

比利时比尔斯
优先权：

2004.05.26 EP PCT/EP2004/050933
专利代理机构：

中国专利代理(香港)有限公司

 代理人：

刘冬;林森
PDF下载： PDF下载
内容摘要

本发明涉及式(I)的化合物，其N－氧化物、药学可接受加成盐、季胺、多晶型或立体化学异构形式，其中R1表示氢、C1－6烷基、C3－7环烷基、C1－6烷氧基C1－6烷基、二－(C1－6烷基)氨基C1－6烷基、芳基或杂芳基；每个R2独立表示卤素、C1－6烷基、C1－6烷氧基、C1－6烷硫基、多卤代C1－6烷基、多卤代C1－6烷氧基、氰基、氨基羰基、氨基、单－或二(C1－4烷基)氨基、硝基、芳基或芳氧基；R3表示氢、氰基、任选取代的C1－6烷基、C(＝O)－O－R5、C(＝O)－NR6aR6b、C(＝S)－NR6aR6b、S(＝O)2－NR6aR6b或C(＝O)－R7；R4表示氢或C1－6烷基；n为1、2、3、4或5；Z表示环状环系。本发明还涉及制备式(I)化合物的方法，它们作为CCR2拮抗剂的用途和包含它们的药用组合物。

权利要求书

1.  一种下式的化合物

其N-氧化物、药学可接受加成盐、季胺、多晶型或立体化学异构形式，其中
R1表示氢、C1-6烷基、C3-7环烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、芳基或杂芳基；
每个R2独立表示卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、硝基、芳基或芳氧基；
R3表示氢、氰基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b或C(＝O)-R7；
R4表示氢或C1-6烷基；
R5表示氢、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基或芳基；
R6a和R6b各自独立表示氢、C1-6烷基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、芳基NH-、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基、氨基羰基氨基、C1-6烷氧基、羰基氨基或羟基C1-6烷基；或者
R6a和R6b与连接它们的氮共同形成吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基或被C1-6烷基取代的哌嗪基；
R7表示氢、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基、芳基或杂芳基；
Z表示选自下列的环系

每个R8独立表示氢、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、羟基C1-6烷基氨基、芳基、芳氧基、哌啶基、哌啶基氨基、吗啉基、哌嗪基或硝基；
每个R9独立表示氢、卤素或C1-6烷基；
n为1、2、3、4或5；
芳基表示苯基或被一个、两个、三个、四个或五个各自独立选自下述基团的取代基取代的苯基：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、苯氧基或硝基；
杂芳基表示呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异唑基、异噻唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基，每个所述杂环任选被一个或两个各自独立选自下述基团的取代基取代：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基或硝基；
条件是不包括
1-(3，4-二甲氧基苄基)-4-苯基-1H-咪唑-2-硫醇；和
1-(邻-氯苄基)-5-乙基-4-苯基-咪唑-2-硫醇。

2.  权利要求1的化合物，其中R2表示卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基或多卤代C1-6烷基。

3.  权利要求2的化合物，其中R2表示卤素或多卤代C1-6烷基。

4.  权利要求3的化合物，其中R2表示卤素。

5.  权利要求4的化合物，其中R2表示氟。

6.  前述权利要求任一项的化合物，其中n为2或3。

7.  权利要求6的化合物，其中n为2。

8.  权利要求7的化合物，其中n为2，且所述两个R2取代基位于间位和对位。

9.  前述权利要求任一项的化合物，其中Z表示式(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-9)、(a-10)、(a-12)、(a-13)、(a-14)或(a-16)的基团。

10.  权利要求9的化合物，其中Z表示式(a-1)、(a-2)、(a-9)、(a-10)或(a-13)的基团。

11.  权利要求10的化合物，其中Z表示式(a-9)的基团。

12.  前述权利要求任一项的化合物，其中R3表示氢、氰基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b，或C(＝O)-R7。

13.  权利要求12的化合物，其中R3表示氰基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b或C(＝O)-R7。

14.  权利要求13的化合物，其中R3表示C(＝O)-O-R5。

15.  权利要求14的化合物，其中R3表示甲氧羰基。

16.  前述权利要求任一项的化合物，其中R1表示C1-6烷基或C1-6烷氧基烷基。

17.  权利要求16的化合物，其中R1表示C1-6烷基。

18.  权利要求17的化合物，其中R1表示乙基。

19.  前述权利要求任一项的化合物，其中R4表示氢。

20.  权利要求1或2的化合物，其中R1表示C1-6烷基或C1-6烷氧基烷基；R2表示卤素；R3表示氢、氰基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝O)-R7；Z表示选自下列的环系：(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-9)、(a-10)、(a-12)、(a-13)、(a-14)或(a-16)；R4表示氢；n为2。

21.  前述权利要求任一项的化合物，其中所述化合物为立体化学纯。

22.  前述权利要求任一项的化合物，其中所述化合物具下式


23.  权利要求1的化合物，其中所述化合物具下式


其N-氧化物、药学可接受加成盐、季胺或多晶型。

24.  权利要求1的化合物，其中所述化合物为(S)-3-[1-(3，4-二氟-苯基)-丙基]-5-异唑-5-基-2-硫代-2，3-二氢-1H-咪唑-4-甲酸甲酯、其N-氧化物、药学可接受加成盐、季胺或多晶型。

25.  权利要求24的化合物，其中所述化合物为(S)-3-[1-(3，4-二氟-苯基)-丙基]-5-异唑-5-基-2-硫代-2，3-二氢-1H-咪唑-4-甲酸甲酯或其N-氧化物。

26.  权利要求24的化合物，其中所述化合物为(S)-3-[1-(3，4-二氟-苯基)-丙基]-5-异唑-5-基-2-硫代-2，3-二氢-1H-咪唑-4-甲酸甲酯或其药学可接受加成盐。

27.  权利要求24的化合物，其中所述化合物为(S)-3-[1-(3，4-二氟-苯基)-丙基]-5-异唑-5-基-2-硫代-2，3-二氢-1H-咪唑-4-甲酸甲酯或其季胺。

28.  权利要求24的化合物，其中所述化合物为(S)-3-[1-(3，4-二氟-苯基)-丙基]-5-异唑-5-基-2-硫代-2，3-二氢-1H-咪唑-4-甲酸甲酯。

29.  权利要求24的化合物，其中所述化合物为(S)-3-[1-(3，4-二氟-苯基)-丙基]-5-异唑-5-基-2-硫代-2，3-二氢-1H-咪唑-4-甲酸甲酯，其熔点为128.5℃。

30.  前述权利要求任一项的化合物，用作药物。

31.  一种化合物在生产预防或治疗由CCR2受体活化介导的疾病的药物中的用途，其中所述化合物为式(I)的化合物

其N-氧化物、药学可接受加成盐、季胺、多晶型或立体化学异构形式，其中
R1表示氢、C1-6烷基、C3-7环烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、芳基或杂芳基；
每个R2独立表示卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、硝基、芳基或芳氧基；
R3表示氢、氰基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b或C(＝O)-R7；
R4表示氢或C1-6烷基；
R5表示氢、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基或芳基；
R6a和R6b各自独立表示氢、C1-6烷基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、芳基NH-、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基、氨基羰基氨基、C1-6烷氧基、羰基氨基或羟基C1-6烷基；或者
R6a和R6b与连接它们的氮共同形成吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基或被C1-6烷基取代的哌嗪基；
R7表示氢、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基、芳基或杂芳基；
Z表示选自下列的环系

每个R8独立表示氢、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、羟基C1-6烷基氨基、芳基、芳氧基、哌啶基、哌啶基氨基、吗啉基、哌嗪基或硝基；
每个R9独立表示氢、卤素或C1-6烷基；
n为1、2、3、4或5；
芳基表示苯基或被一个、两个、三个、四个或五个各自独立选自下述基团的取代基取代的苯基：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、苯氧基或硝基；
杂芳基表示呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异唑基、异噻唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基，每个所述杂环任选被一个或两个各自独立选自下述基团的取代基取代：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基或硝基。

32.  权利要求1-29中任一项的化合物在生产用于预防或治疗由CCR2受体活化介导的疾病的药物中的用途。

33.  权利要求31或32的用途，其中所述疾病为炎性疾病。

34.  一种药用组合物，所述组合物包含药学可接受载体和作为活性成分的治疗有效量的权利要求1-29中任一项的化合物。

35.  一种制备权利要求34的组合物的方法，其特征在于药学可接受载体与治疗有效量的权利要求1-29中任一项的化合物充分混合。

36.  一种制备如权利要求1定义的化合物的方法，其特征为
a)将式(II-a)或(II-b)的中间体与KSCN在合适的酸和合适的溶剂存在下反应，

其中R1、R2、R4、Z和n如权利要求1定义；
b)将式(III)的中间体与其中W1表示合适的离去基团的式(IV)的中间体在KSCN、合适的酸、合适的溶剂和合适的碱存在下反应，

其中R1、R2、R4、Z和n如权利要求1定义，R3′表示不为氢的R3；
c)将式(V)的中间体与合适的碱在合适的溶剂存在下反应

d)将式(VI)的中间体与三氯氧磷或Burgess’试剂任选在合适的溶剂存在下反应

其中R1、R2、R3、R4、R8和n如权利要求1定义；
e)将其中W2表示合适的离去基团的式(VII)的中间体与其中R5′表示C1-6烷基或羟基C1-6烷基的式HO-R5′的合适的醇在合适的溶剂存在下反应

其中R1、R2、R4、Z和n如权利要求1定义；
f)将其中W2表示合适的离去基团的式(VII)的中间体与式(VIII)的中间体在合适的溶剂存在下反应

其中R1、R2、R4、R6a、R6b、Z和n如权利要求1定义；
g)将式(VII)的中间体与合适的还原剂在合适的溶剂存在下反应
其中R1、R2、R4、R6a、R6b、Z和n如权利要求1定义；
g)将式(VII)的中间体与合适的还原剂在合适的溶剂存在下反应

其中R1、R2、R4、Z和n如权利要求1定义；
或者，如果需要，按本领域已知的转化方法将式(I)化合物互相转化，并且，如果需要，可进一步通过用酸处理将式(I)化合物转化为治疗活性无毒酸加成盐，或通过用碱处理转化为治疗活性无毒碱加成盐，或反之，通过用碱处理将酸加成盐形式转化为游离碱，或通过用酸处理将碱加成盐转化为游离酸；并且如果需要，制备其立体化学异构形式、季胺或N-氧化物形式。

37.  一种制备权利要求22中定义的化合物的方法，其特征为按照权利要求36的方法从其中带有R1和R4取代基的碳原子具有(S)构型的中间体开始进行反应。

38.  一种式(IX-b-1-1)的化合物

其N-氧化物、药学可接受加成盐或季胺，
其中Alk表示甲基、乙基或正丙基，且R2a和R2b各自独立表示氯、氟或三氟甲基，条件是当R2a和R2b都为氯时，则Alk不为乙基。

39.  权利要求38的化合物，其中所述化合物为

说明书

用作CCR2受体拮抗剂的巯基咪唑
本发明涉及具有CCR2受体拮抗特性的巯基咪唑衍生物。此外本发明还涉及它们的制备方法和包含它们的药物组合物。本发明还涉及上述化合物在制备用于预防或治疗CCR2受体(特别是CCR2b受体)活化介导疾病的药物中的用途。
WO 02/066458描述了对细胞因子特别是TNF-α和IL-β的释放具有免疫调节和/或抑制活性的2-硫代-取代咪唑衍生物。
FR 1,487,326涉及用作止痛剂的硫代-咪唑衍生物及其血管舒张活性。
FR 6,751 M描述了作为镇静剂和止痛剂的硫代-咪唑衍生物。
US3,850,944描述了具有抗炎活性的2-巯基-5-(3-吡啶基)-咪唑衍生物。
Bull.Soc.Chim.Belg.，73，pp181-188(1964)描述了α-芳基烷基胺的合成和性质。
Archiv der Pharmazie，305(12)，pp891-901(1972)描述了N-氯酰基(chloracyl)-苄基胺的合成和药理学。
Annales pharmaceutiques francaises，29(1)，pp 63-70(1971)描述了咪唑衍生物的合成。
本发明化合物与现有技术的化合物相比，其结构、药理活性和/或药理强度都不同。
本发明的一个方面涉及下式化合物

其N-氧化物、药学可接受加成盐、季胺、多晶型或立体化学异构形式，其中
R1表示氢、C1-6烷基、C3-7环烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、二-(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、芳基或杂芳基；
每个R2独立表示卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、硝基、芳基或芳氧基；
R3表示氢、氰基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b或C(＝O)-R7；
R4表示氢或C1-6烷基；
R5表示氢、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基或芳基；
R6a和R6b各自独立表示氢、C1-6烷基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、芳基NH-、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基、氨基羰基氨基、C1-6烷氧基、羰基氨基或羟基C1-6烷基；或者
R6a和R6b与连接它们的氮共同形成吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基或被C1-6烷基取代的哌嗪基；
R7表示氢、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基、芳基或杂芳基；
Z表示选自下列的环系

每个R8独立表示氢、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、羟基C1-6烷基氨基、芳基、芳氧基、哌啶基、哌啶基氨基、吗啉基、哌嗪基或硝基；
每个R9独立表示氢、卤素或C1-6烷基；
n为1、2、3、4或5；
芳基表示苯基或被一个、两个、三个、四个或五个各自独立选自下述基团的取代基取代的苯基：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、苯氧基或硝基；
杂芳基表示呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异唑基、异噻唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基，每个所述杂环任选被一个或两个各自独立选自下述基团的取代基取代：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基或硝基；
条件是不包括
1-(3，4-二甲氧基苄基)-4-苯基-1H-咪唑-2-硫醇；和
1-(邻-氯苄基)-5-乙基-4-苯基-咪唑-2-硫醇。
本发明还涉及用于生产预防或治疗由CCR2受体活化介导的疾病(特别是炎性疾病)的药物的化合物的用途，其中所述化合物为式(I)的化合物

其N-氧化物、药学可接受加成盐、季胺、多晶型或立体化学异构形式，其中
R1表示氢、C1-6烷基、C3-7环烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、二-(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、芳基或杂芳基；
每个R2独立表示卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、硝基、芳基或芳氧基；
R3表示氢、氰基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b或C(＝O)-R7；
R4表示氢或C1-6烷基；
R5表示氢、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基或芳基；
R6a和R6b各自独立表示氢、C1-6烷基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、芳基NH-、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基、氨基羰基氨基、C1-6烷氧基、羰基氨基或羟基C1-6烷基；或者
R6a和R6b与连接它们的氮共同形成吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基或被C1-6烷基取代的哌嗪基；
R7表示氢、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基、芳基或杂芳基；
Z表示选自下列的环系

每个R8独立表示氢、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、羟基C1-6烷基氨基、芳基、芳氧基、哌啶基、哌啶基氨基、吗啉基、哌嗪基或硝基；
每个R9独立表示氢、卤素或C1-6烷基；
n为1、2、3、4或5；
芳基表示苯基或被一个、两个、三个、四个或五个各自独立选自下述基团的取代基取代的苯基：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、苯氧基或硝基；
杂芳基表示呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异唑基、异噻唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基，每个所述杂环任选被一个或两个各自独立选自下述基团的取代基取代：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基或硝基；
更具体而言，本发明还涉及化合物的在生产预防或治疗由CCR2受体活化介导的疾病(特别是炎性疾病)的药物中的用途，其中所述化合物为式(I)的化合物

其N-氧化物、药学可接受加成盐、季胺、多晶型或立体化学异构形式，其中
R1表示氢、C1-6烷基、C3-7环烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、二-(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、芳基或杂芳基；
每个R2独立表示卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、硝基、芳基或芳氧基；
R3表示氢、氰基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b或C(＝O)-R7；
R4表示氢或C1-6烷基；
R5表示氢、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基或芳基；
R6a和R6b各自独立表示氢、C1-6烷基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、芳基NH-、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基、氨基羰基氨基、C1-6烷氧基、羰基氨基或羟基C1-6烷基；或者
R6a和R6b与连接它们的氮共同形成吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或硫代吗啉基或被C1-6烷基取代的哌嗪基；
R7表示氢、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基、芳基或杂芳基；
Z表示选自下列的环系

每个R8独立表示氢、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、羟基C1-6烷基氨基、芳基、芳氧基、哌啶基、哌啶基氨基、吗啉基、哌嗪基或硝基；
每个R9独立表示氢、卤素或C1-6烷基；
n为1、2、3、4或5；
芳基表示苯基或被一个、两个、三个、四个或五个各自独立选自下述基团的取代基取代的苯基：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、苯氧基或硝基；
杂芳基表示呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异唑基、异噻唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基，每个所述杂环任选被一个或两个各自独立选自下述基团的取代基取代：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基或硝基；
条件是不包括
1-(3，4-二甲氧基苄基)-4-苯基-1H-咪唑-2-硫醇；和
1-(邻-氯苄基)-5-乙基-4-苯基-咪唑-2-硫醇。
本发明的一个特殊的实施方案为如上文或下文定义的式(I)的化合物，条件是不包括1-(3，4-二甲氧基苄基)-4-苯基-1H-咪唑-2-硫醇；1-(邻-氯苄基)-5-乙基-4-苯基-咪唑-2-硫醇或其药学可接受加成盐。
本文上下文中作为基团或基团部分使用的C1-4烷基定义为具有1-4个碳原子的直链或支链饱和烃基，如甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基、丁基；作为基团或是基团部分的C1-6烷基定义为具有1-6个碳原子的直链或支链饱和烃基，如C1-4烷基定义的基团、戊基、己基、2-甲基丁基等；C3-7环烷基为环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基；C2-6烯基定义为具有2-6个碳原子、包含双键的直链和支链烃基，如乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基等；C2-6炔基为具有2-6个碳原子、含有三键的直链或支链烃基，如乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基等。
本文前面使用的术语(＝O)与碳原子相连时形成羰基部分，与硫原子相连时则形成亚砜部分，2个所述术语与同一硫原子相连时则形成砜基部分。
术语卤素为氟、氯、溴和碘。本文上下文中作为基团或基团部分使用的多卤代甲基定义为单或多卤素取代的甲基，特别是携带一个或多个氟原子的甲基，例如，二氟代甲基或三氟代甲基；作为基团或基团部分的多卤代C1-6烷基定义为单或多卤素取代的C1-6烷基，例如，多卤代甲基中定义的基团、1，1-二氟-乙基等。当多卤代甲基或多卤代C1-6烷基定义中的烷基上连有多于一个卤原子时，卤原子可以相同或不同。
R1或R7定义中的术语杂芳基包括杂环所有可能的异构形式，如包括1H-吡咯基和2H-吡咯基的吡咯基。
如果不另外说明，本文上下文中提到的式(I)化合物的取代基定义中列出的芳基、杂芳基、杂环环系或环状环系(参见例如R1、R5、R7和Z)可经任何合适的环碳原子或杂原子连接于式(I)分子的剩余部分上。因此，例如，当杂芳基是咪唑基时，其可以是1-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基等。
当任何变量(例如R6a、R6b)在任何成分中出现一次以上时，各定义是独立的。
从取代基划到环状环系中的线表示键可以连接到任何适合的环原子上。当所述线划到双环环系上时，其表示该键可与双环环系上两个环的任一个的任何合适的环原子相连。
对治疗用途来说，式(I)化合物的盐为其中抗衡离子为药学可接受的盐。然而，也可使用非药学可接受的酸和碱的盐，例如，在制备或纯化药学可接受化合物中使用。所有的盐，不论其是否药学可接受，均包括在本发明的范围之内。
上文提到的药学可接受加成盐包括由式(I)化合物可形成的治疗活性无毒酸加成盐形式。通过用适当的酸处理碱形式容易得到后者，所述酸如无机酸，例如，氢卤酸如氢氯酸，氢溴酸等；硫酸；硝酸；磷酸等；或有机酸，例如乙酸、丙酸、羟基乙酸、2-羟基丙酸、2-氧代丙酸、草酸、丙二酸、丁二酸、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、2-羟基-1，2，3-丙烷三羧酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、4-甲基苯磺酸、环己氨磺酸、2-羟基苯甲酸、4-氨基-2-羟基苯甲酸等。反之盐形式可用碱处理转化成游离碱形式。
包括酸性质子的式(I)化合物通过用适当的有机或无机碱处理可以转化为它们的治疗活性无毒金属或胺加成盐形式。适当的碱盐形式包括如铵盐；碱和碱土金属盐，如锂、钠、钾、镁、钙盐等；有机碱的盐，如伯、仲和叔脂肪族和芳胺，如甲胺、乙胺、丙胺、异丙胺、四个丁胺异构体、二甲胺、二乙胺、二乙醇胺、二丙胺、二异丙胺、二正丁胺、吡咯烷、哌啶、吗啉、三甲胺、三乙胺、三丙胺、奎宁环、吡啶、喹啉和异喹啉、二苄基乙二胺、N-甲基-D-葡糖胺、2-氨基-2-(羟甲基)-1，3-丙二醇、羟钴胺的盐，与氨基酸如精氨酸、赖氨酸等的盐。反之盐形式可通过用酸处理转化成游离酸形式。
术语加成盐也包括式(I)化合物可形成的水合物和溶剂加成形式。这种形式的实例例如为水合物、醇合物等。
上文所用的术语“季胺”定义为通过式(I)化合物的碱性氮与适当的季胺化剂(如任选取代的烷基卤、芳基卤或芳烷基卤，如甲基碘、苯甲基碘)之间的反应，可由式(I)化合物形成的季铵盐。也可采用具有优良离去基团的其它反应物，如三氟甲磺酸烷基酯、甲磺酸烷基酯和对甲苯磺酸烷基酯。季胺有带正电的氮。药学可接受抗衡离子包括氯、溴、碘、三氟乙酸根和乙酸根。选择的抗衡离子可用离子交换树脂引入。
本化合物的N-氧化物形式包括其中一个或多个叔氮原子被氧化成所指的N-氧化物的式(I)化合物。
应理解的是，某些式(I)化合物和其N-氧化物、加成盐、季胺、多晶型或立体化学异构形式可包含一个或多个手性中心，以立体化学异构形式存在。
上文或下文所用的“立体化学异构形式”定义为式(I)化合物其N-氧化物、加成盐、季胺、多晶型或生理官能衍生物可能具有的所有立体异构形式。除非另有所指或说明，化合物的化学名称指所有可能的立体化学异构形式的混合物，所述混合物包括所有基本分子结构的非对映异构体和对映异构体，以及式(I)的各单一异构形式其N-氧化物、盐、溶剂合物、季胺或多晶型基本上不含其它异构形式，即包含少于10％，优选少于5％，特别是少于2％，最优选少于1％的其它异构体。因此，例如当式(I)化合物指定为(E)时，意为该化合物基本没有(Z)异构体。
具体的说，立构中心可具有R-或S-构型；二价环状(部分)饱和基团上的取代基可具有顺-或反-构型。含双键的化合物在其双键上可具有E(entgegen)或Z(zusammen)-立体化学。术语顺、反、R、S、E和Z为本领域技术人员所熟知。
式(I)化合物的立体化学异构形式显然包括在本发明范围之内。
本发明化合物的多晶型也落在本发明的范围内。上文或下文中所用的术语“多晶型”是指特定化合物的所有可能的晶体排列。化合物的多晶型为相同的化学实体，但晶体排列有所不同。术语“多晶型”为本领域中熟练技术人员众所周知的。
致力于开发合适剂型的人们可能对药用化合物的多晶型感兴趣，因为如果多晶型在临床和稳定性试验中不能保持恒定，则一批与下一批使用或测定的确切剂量没有可比性。一旦生产出药用化合物备用，认清其在每个剂型中的多晶型是非常重要的，以确保在生产过程中使用相同的晶型，并在每个剂量中包含相同量的药物。因此，必须明确其以单一晶型存在或以一些已知组合形式的多晶型存在。另外，某些多晶型可展现出提高的热力学稳定性，且比其它多晶型更适于包含在药用制剂中。
某些式(I)化合物也可以互变异构形式存在。尽管这种形式没有明确的表现在上面的式(I)中，但包含于本发明的范围之内。例如，式(I)包括为的互变异构形式。因此，本发明化合物包括下式化合物：

无论何时使用，下文的术语“式(I)化合物”也包含其N-氧化物、其加成盐、其季胺、其多晶型或其立体化学异构形式。特别重要的是立体化学纯的式(I)化合物。
无论上下文何时使用，取代基可各自独立在多种定义的列表中选择，例如对R6a或R6b而言，包括化学上可能的所有可能组合。
本发明第一个令人感兴趣的实施方案涉及下式的化合物

其N-氧化物、药学可接受加成盐、季胺、或立体化学异构形式，其中
R1表示氢、C1-6烷基、C3-7环烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、二-(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、芳基或杂芳基；
每个R2独立表示卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、硝基、芳基或芳氧基；
R3表示氢、氰基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b或C(＝O)-R7；
R4表示氢或C1-6烷基；
R5表示氢、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基或芳基；
R6a和R6b各自独立表示氢、C1-6烷基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、芳基NH-、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基、氨基羰基氨基、C1-6烷氧基、羰基氨基或羟基C1-6烷基；或者
R6a和R6b与连接它们的氮共同形成吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基或被C1-6烷基取代的哌嗪基；
R7表示氢、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基、芳基或杂芳基；
Z表示选自下列的环系

每个R8独立表示氢、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、羟基C1-6烷基氨基、芳基、芳氧基、哌啶基、哌啶基氨基、吗啉基、哌嗪基或硝基；
每个R9独立表示氢、卤素或C1-6烷基；
n为1、2、3、4或5；
芳基表示苯基或被一个、两个、三个、四个或五个各自独立选自下述基团的取代基取代的苯基：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、苯氧基或硝基；
杂芳基表示呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异唑基、异噻唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基，每个所述杂环任选被一个或两个各自独立选自下述基团的取代基取代：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基或硝基；
条件是不包括
1-(3，4-二甲氧基苄基)-4-苯基-1H-咪唑-2-硫醇；和
1-(邻-氯苄基)-5-乙基-4-苯基-咪唑-2-硫醇。
本发明第二个令人感兴趣的实施方案涉及下式的化合物

其中
R1表示氢、C1-6烷基、C3-7环烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、二-(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、芳基或杂芳基；
每个R2独立表示卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、硝基、芳基或芳氧基；
R3表示氢、氰基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b或C(＝O)-R7；
R4表示氢或C1-6烷基；
R5表示氢、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基或芳基；
R6a和R6b各自独立表示氢、C1-6烷基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、芳基NH-、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基、氨基羰基氨基、C1-6烷氧基、羰基氨基或羟基C1-6烷基；或者
R6a和R6b与连接它们的氮共同形成吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基或被C1-6烷基取代的哌嗪基；
R7表示氢、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基、芳基或杂芳基；
Z表示选自下列的环系

每个R8独立表示氢、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、羟基C1-6烷基氨基、芳基、芳氧基、哌啶基、哌啶基氨基、吗啉基、哌嗪基或硝基；
每个R9独立表示氢、卤素或C1-6烷基；
n为1、2、3、4或5；
芳基表示苯基或被一个、两个、三个、四个或五个各自独立选自下述基团的取代基取代的苯基：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基、苯氧基或硝基；
杂芳基表示呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异唑基、异噻唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基，每个所述杂环任选被一个或两个各自独立选自下述基团的取代基取代：卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多卤代C1-6烷基、多卤代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、单-或二(C1-4烷基)氨基或硝基；
条件是不包括
1-(3，4-二甲氧基苄基)-4-苯基-1H-咪唑-2-硫醇；和
1-(邻-氯苄基)-5-乙基-4-苯基-咪唑-2-硫醇。
第三个令人感兴趣的实施方案为式(I)或上文中作为令人感兴趣的实施方案提到的其任何亚组的化合物，其中R3表示氢、氰基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b或C(O)-R7。
第四个令人感兴趣的实施方案为式(I)或上文中作为令人感兴趣的实施方案提到的其任何亚组的化合物，其中R3表示氰基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b或C(＝O)-R7。第五个令人感兴趣的实施方案为式(I)或上文中作为令人感兴趣的实施方案提到的其任何亚组的化合物，其中R3表示氰基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b或C(＝O)-R7。
第六个令人感兴趣的实施方案为式(I)或上文中作为令人感兴趣的实施方案提到的其任何亚组的化合物，其中R3表示氢、氰基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b或C(＝O)-R7；优选C(＝O)-O-R5；更优选C(＝O)-O-C1-6烷基；最优选C(＝O)-O-CH3。
第七个令人感兴趣的实施方案为式(I)或上文中作为令人感兴趣的实施方案提到的其任何亚组的化合物，其中Z不为3-吡啶基。
第八个令人感兴趣的实施方案为式(I)或上文中作为令人感兴趣的实施方案提到的其任何亚组的化合物，其中Z为选自下列的环状环系：上文定义的(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-9)、(a-10)、(a-11)、(a-12)、(a-13)、(a-14)、(a-15)或(a-16)；优选为选自下列的环状环系：(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-9)、(a-10)、(a-12)、(a-13)、(a-14)、(a-16)或(a-18)；更优选为选自下列的环状环系：(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-9)、(a-10)、(a-12)、(a-13)、(a-14)或(a-16)；甚至更优选为选自下列的环状环系：(a-1)、(a-2)、(a-9)、(a-10)或(a-13)；最优选为式(a-9)的环状环系。
第九个令人感兴趣的实施方案为式(I)或上文中作为令人感兴趣的实施方案提到的其任何亚组的化合物，其中Z为选自下列的环状环系：(a-2)、(a-7)或(a-9)或选自下列的环状环系：(a-2)、(a-8)或(a-10)；优选其中Z为选自下列的环状环系：(a-2)、(a-7)或(a-9)；更优选其中Z为选自下列的环状环系：(a-2)、(a-7)或(a-9)且其中R3表示C(＝O)-O-R5。
第十个令人感兴趣的实施方案为式(I)或上文中作为令人感兴趣的实施方案提到的其任何亚组的化合物，其中n为2或3；优选其中n为2。
第十一个令人感兴趣的实施方案为式(I)或上文中作为令人感兴趣的实施方案提到的其任何亚组的化合物，其中n为2且所述两个R2取代基位于间位和对位。
第十二个令人感兴趣的实施方案为式(I)或上文中作为令人感兴趣的实施方案提到的其任何亚组的化合物，其中R2表示卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基或多卤代C1-6烷基；优选卤素或多卤代C1-6烷基，特别是氯、氟或三氟甲基；最优选卤素，特别是氯或氟，更特别为氟。
第十三个令人感兴趣的实施方案为式(I)或上文中作为令人感兴趣的实施方案提到的其任何亚组的化合物，其中R1为氢、甲基、乙基、正丙基、甲氧基甲基、环己基、环丙基、二甲基氨基甲基、2-噻吩基、3，4-二氯苯基；优选R1为C1-6烷基或C1-6烷氧基C1-6烷基，特别是甲基、乙基、丙基、甲氧基甲基，更特别为甲基、乙基、正丙基或甲氧基甲基；更优选R1为C1-6烷基，特别是甲基、乙基和丙基，更特别为甲基、乙基或正丙基；最优选的R1为乙基。
第十四个令人感兴趣的实施方案为式(I)或上文中作为令人感兴趣的实施方案提到的其任何亚组的化合物，其中R4为氢。
第十五个令人感兴趣的实施方案为式(I)或上文中作为令人感兴趣的实施方案提到的其任何亚组的化合物，其中所述化合物为立体化学纯。
第十六个令人感兴趣的实施方案为式(I)或上文中作为令人感兴趣的实施方案提到的其任何亚组的化合物，其中带有R1和R4取代基的碳原子具有(S)构型，即式(I’)的化合物

其N-氧化物、药学可接受加成盐、季胺、多晶型或立体化学异构形式。
还有令人感兴趣的式(I)化合物，其中适用一条或多条下列限制条件，优选适用所有下列限制条件：
a)R1表示C1-6烷基或C1-6烷氧基C1-6烷基，特别是甲基、乙基、丙基或甲氧基甲基；
b)R2表示卤素、多卤代C1-6烷基或芳氧基，特别是卤素，如氯或氟；
c)R3表示氢、氰基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b或C(O)-R7；
d)Z表示选自下列的环系：(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-9)、(a-10)、(a-11)、(a-12)、(a-13)、(a-14)、(a-15)或(a-16)；
e)R4表示氢；
f)n为2或3。
还令人感兴趣的化合物为其中适用下列条件中的一条或多条的式(I)化合物：
a)R1表示C1-6烷基或C1-6烷氧基C1-6烷基，特别是甲基、乙基、丙基或甲氧基甲基；
b)R2表示卤素，特别是氯或氟；
c)R3表示氢；氰基；C(＝O)-O-R5，其中R5优选为氢、C1-6烷基或C1-6烷氧基C1-6烷基；C(＝O)-NR6aR6b，其中R6a和R6b优选为氢或羟基C1-6烷基；C(＝O)-R7，其中R7优选任选取代的噻唑基；
d)Z表示选自下列的环系：(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-9)、(a-10)、(a-12)、(a-13)、(a-14)、(a-16)或(a-18)；
e)R4表示氢；
f)n为2。
再令人感兴趣的化合物为其中适用下列条件中的一条或多条的式(I)化合物，：
a)R1表示C1-6烷基，特别是乙基或丙基；
b)R2表示卤素，特别是氯或氟；
c)R3表示C(O)-O-R5或C(＝O)-NR6aR6b；
d)Z表示选自下列的环状环系：(a-1)、(a-2)、(a-9)、(a-10)或(a-13)；
e)R4表示氢；
f)n为2。
再又令人感兴趣的化合物为其中适用下列条件中的一条或多条的式(I)化合物，：
a)R1表示乙基或丙基；
b)R2表示氯或氟；
c)R3表示C(＝O)-O-R5，特别是C(＝O)-O-CH3；
d)Z表示环状环系(a-9)；
e)R4表示氢；
f)n为2。
优选的式(I)化合物为化合物31、6、27、9、24、40、25、7、26、45、48、49、43、36、16、28、33、32、34、51、52或53；其N-氧化物、药学可接受加成盐、季胺、多晶型或立体化学异构形式。
更优选的式(I)化合物为化合物26、48、43、52或53，特别是化合物26、43或53；其N-氧化物、药学可接受加成盐、季胺、多晶型或立体化学异构形式。
最优选的为下列任一化合物：
式(I)的化合物，其中所述化合物为(S)-3-[1-(3，4-二氟-苯基)-丙基]-5-异唑-5-基-2-硫代(thioxo)-2，3-二氢-1H-咪唑-4-甲酸甲酯，其N-氧化物、药学可接受加成盐、季胺或多晶型；
式(I)的化合物，其中所述化合物为(S)-3-[1-(3，4-二氟-苯基)-丙基]-5-异唑-5-基-2-硫代-2，3-二氢-1H-咪唑-4-甲酸甲酯或其N-氧化物；
式(I)的化合物，其中所述化合物为(S)-3-[1-(3，4-二氟-苯基)-丙基]-5-异唑-5-基-2-硫代-2，3-二氢-1H-咪唑-4-甲酸甲酯或其药学可接受加成盐；
式(I)的化合物，其中所述化合物为(S)-3-[1-(3，4-二氟-苯基)-丙基]-5-异唑-5-基-2-硫代-2，3-二氢-1H-咪唑-4-甲酸甲酯或其季胺；
式(I)的化合物，其中所述化合物为(S)-3-[1-(3，4-二氟-苯基)-丙基]-5-异唑-5-基-2-硫代-2，3-二氢-1H-咪唑-4-甲酸甲酯；或
式(I)的化合物，其中所述化合物为(S)-3-[1-(3，4-二氟-苯基)-丙基]-5-异唑-5-基-2-硫代-2，3-二氢-1H-咪唑-4-甲酸甲酯，其熔点为128.5℃。
一般而言，式(I)的化合物，其中R3表示氢，所述化合物由式(I-a)表示，可通过将式(II-a)或(II-b)的中间体与KSCN在合适的酸如盐酸等，和合适的溶剂如醇如乙醇的存在下，任选在水的存在下反应来制备。

式(I)的化合物，其中R3不为氢，所述R3由R3’表示，所述化合物由式(I-b)表示，可通过将式(III)的中间体与其中W1表示合适的离去基团如C1-6烷氧基如甲氧基或叔丁氧基，或卤素如氯等的式(IV)的中间体，在KSCN，合适的酸如盐酸等，合适的溶剂如四氢呋喃或四氢呋喃与合适的醇如乙醇的混合物和合适的碱如t-BuONa、LiN(异丙基)2或NH[Si(CH3)3]的存在下反应来制备。

式(I-b)的化合物还可通过将式(V)的中间体与合适的碱如氢氧化钠等，在合适的溶剂如醇如乙醇的存在下反应来制备。

式(I)的化合物，其中Z表示任选取代的1，3，4-二唑，所述化合物由式(I-c)表示，可通过将式(VI)的中间体与三氯氧磷(phosphorictrichloride)或Burgess’试剂任选在合适的溶剂如四氢呋喃的存在下反应来制备。

式(I)的化合物，其中R3表示C(＝O)-O-R5’，其中R5’表示C1-6烷基或羟基C1-6烷基，所述化合物由(I-d)表示，可通过将其中W2表示合适的离去基团如卤素如氯等的式(VII)的中间体与合适的式HO-R5’的醇在合适的溶剂如四氢呋喃存在下反应来制备。

式(I)的化合物，其中R3表示C(＝O)-NR6aR6b，所述化合物由式(I-e)表示，可通过将式(VII)的中间体与式(VIII)的中间体如NH3(或乙酸铵盐)、吡咯烷等，在合适的溶剂如丙酮、四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺等存在下反应来制备。

式(I)的化合物，其中R3表示CH2-OH，所述化合物由式(I-f)表示，可通过将式(VII)的中间体与合适的还原剂如NaBH4在合适的溶剂如四氢呋喃存在下反应来制备。

式(I’)的化合物可按照上述反应但从其中带有R1和R4取代基的碳原子具有(S)构型的中间体开始来制备。
或者，其中带有R1和R4取代基的碳原子具有(R)构型的式(I)的化合物可按照上述反应但从其中带有R1和R4取代基的碳原子具有(R)构型的中间体开始来制备。
式(I)的化合物还可按照本领域已知的基团转化反应将式(I)化合物互相转化来制备。式(I)的化合物可按本领域已知的将三价氮转化为其N-氧化物形式的方法被转化为相应的N-氧化物形式。所述N-氧化反应通常可通过将式(I)的起始原料与合适的有机或无机过氧化物反应来进行。合适的无机过氧化物包括，如过氧化氢、碱金属或碱土金属过氧化物如过氧化钠、过氧化钾；合适的有机过氧化物可包括过氧酸如过氧苯甲酸(benzenecarboperoxoic acid)或卤素取代的过氧苯甲酸，如3-氯过氧苯甲酸，过氧烷基酸(peroxoalkanoic acids)，如过氧乙酸(peroxoacetic acid)，烷基过氧化氢(alkylhydroperoxides)，如叔丁基过氧化氢。合适的溶剂如水、低级醇如乙醇等、烃类如甲苯、酮类如2-丁酮、卤代烃类，如二氯甲烷，以及这些溶剂的混合物。
其中R3表示C(＝O)-O-C1-6烷基的式(I)化合物，可通过与合适的还原剂如LiHBEt3在合适的溶剂如四氢呋喃存在下反应，被转化为其中R3表示CH2-OH的式(I)化合物。
其中R3表示C(＝O)-O-C1-6烷基的式(I)化合物，还可通过与合适的碱如NaOH，在合适的溶剂如H2O、四氢呋喃或合适的醇如甲醇等的存在下反应，被转化为其中R3表示C(＝O)-OH的式(I)化合物。
其中R3表示C(＝O)-O-C1-6烷基的式(I)化合物，还可通过与合适的式NHR6aR6b的碱在合适的溶剂如H2O存在下反应，被转化为其中R3表示C(＝O)-NR6aR6b的式(I)化合物。
其中R3表示C(＝O)-O-H的式(I)化合物，还可通过与合适的式NHR6aR6b的碱在N′-(乙基亚氨代甲酰基(ethylcarbonimidoyl))-N，N-二甲基-1，3-丙二胺、1-羟基-1H-苯并三唑和合适的溶剂如N，N-二甲基甲酰胺存在下反应，被转化为其中R3表示C(＝O)-NR6aR6b的式(I)化合物。
其中R3表示C(＝O)-O-H的式(I)化合物，还可通过与NH4OH在SOCl2存在下反应，被转化为其中R3表示C(＝O)-NH2的式(I)化合物。
其中R3表示C(＝O)-O-C1-6烷基的式(I)化合物，还可通过与HO-C1-6烷基-O-C1-6烷基在NaBH4存在下反应，被转化为其中R3表示C(＝O)-O-C1-6烷基-O-C1-6烷基的式(I)化合物。
其中R3表示氰基或C(＝O)-O-C1-6烷基的式(I)化合物，可通过与NH4OH反应，被转化为其中R3表示氨基羰基的式(I)化合物。
其中R3表示氰基的式(I)化合物，可通过与硫化氢在N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺在合适的溶剂如吡啶存在下反应，被转化为其中R3表示C(＝S)-NR6aR6b的式(I)化合物。
其中R3表示C(＝O)-NR6aR6b的式(I)化合物，可通过与氯C1-6烷基镁在合适的溶剂如四氢呋喃中反应，被转化为其中R3表示C(＝O)-O-C1-6烷基的式(I)化合物。
其中R3表示C(＝O)-C1-6烷基的式(I)化合物，可通过与合适的还原剂如NaBH4在合适的溶剂如甲醇存在下反应，被转化为其中R3表示羟基C1-6烷基的式(I)化合物。
本发明中的一些式(I)化合物和一些中间体可包含不对称碳原子。可应用本领域已知的方法获得所述化合物和所述中间体的纯立体化学异构形式。如，可通过物理方法如选择性结晶或色谱技术如逆流分布、液相色谱等方法分离非对映异构体。可通过首先将所述外消旋混合物用合适的拆分剂如手性酸转化为非对映异构体盐或化合物的混合物；然后通过如选择性结晶或色谱技术如液相色谱等方法物理分离所述非对映异构体盐或化合物；最后将所述分离的非对映异构体盐或化合物转化为相应的对映异构体。还可从合适的中间体和起始原料的纯立体化学异构形式来获得纯立体化学异构形式，条件是该中间反应(intervening reactions)为立体特异性的。
分离式(I)化合物和中间体的对映异构体的可选择的方式涉及液相色谱法，特别是使用手性固定相的液相色谱法。
一些中间体和起始原料为已知化合物并可通过购买得到，或可按照本领域已知方法制备。
式(II-a)的中间体可通过将其中W3表示合适的离去基团如卤素如溴的式(VIII)的中间体与式(IX)的中间体在合适的碱如N，N-二异丙基乙胺和合适的溶剂如四氢呋喃存在下反应来制备。

式(IX)的中间体，其中R4表示氢，所述中间体由式(IX-a)表示，可通过将式(X)的中间体与合适的还原剂如H2，在合适的催化剂如Raney镍，合适的催化毒物如噻吩溶液和合适的碱如NH3的存在下反应来制备。

式(X)的中间体可通过将式(XI)的中间体与HO-NH2在合适的碱如Na2CO3和合适的溶剂如醇如乙醇和水的存在下反应来制备。

式(II-b)的中间体可通过将式(VIII)的中间体与式(XII)的中间体在合适的溶剂如乙腈存在下反应来制备。

式(XII)的中间体可通过将式(XIII)的中间体与三甲基氧和四氟硼酸盐在合适的溶剂如二氯甲烷存在下反应来制备。

式(XIII)的中间体，其中R4为氢，所述中间体由式(X111-a)表示，可通过将式(XIV)的中间体与HC(＝O)-NH2在合适的酸如甲酸存在下反应来制备。

式(III)的中间体可由式(XV)的中间体在甲酸或甲酸酯如甲酸正丁酯和合适的溶剂如二甲苯存在下制备。

式(XV)的中间体可通过将式(IX)的中间体与其中W4表示合适的离去基团如卤素如氯等的式(XVI)的中间体，在合适的碱如N，N-二乙基乙胺和合适的溶剂如N，N-二甲基甲酰胺或四氢呋喃的存在下反应来制备。式(IX)的中间体可在带有R1和R4取代基的碳原子处包含手性中心，这取决于表示R1和R4的取代基。所述式(IX)的立体特异性中间体由式(IX-b)表示。当所述反应从式(IX-b)的立体特异性中间体开始进行时，得到式(XV)的立体特异性中间体，所述中间体由(XV-a)表示。

*表示所述手性中心可为(R)或(S)，这取决于R1和R4取代基
式(XV-a)的立体特异性中间体还可通过将式(XV)的中间体与合适的拆分剂如[S-(R*，R*)]-2，3-双[(4-甲基苯甲酰基)氧基]-丁二酸，在合适的溶剂如醇如2-丙醇的存在下反应来制备。
当式(XV-a)的立体特异性中间体进一步按照上文中描述的方法反应时，所得中间体也为立体特异性的，且最终所得的终化合物也为立体特异性的。
其中R4表示氢的式(XV)的中间体，该中间体由式(XV-b)表示，还可通过将式(XXVI)的中间体与式(XXVII)的中间体在合适的还原剂如H2，合适的催化剂如Pd/C，合适的催化毒物如噻吩溶液，合适的弱碱如KF或乙酸钾，合适的酸如盐酸以及合适的溶剂如醇如甲醇存在下反应来制备。

式(IX-b)的中间体可通过将式(XVII)的中间体与三苯基膦在合适的溶剂如四氢呋喃和水存在下反应，或将式(XVII)的中间体与合适的还原剂如H2在合适的催化剂如Pt/C或Pd/C以及合适的溶剂如醇如甲醇的存在下反应来制备。

*表示所述手性中心可为(R)或(S)，这取决于R1和R4取代基
当式(IX-b)的立体特异性中间体进一步按照上文中描述的方法反应时，所得中间体也为立体特异性的，且最终所得终化合物也为立体特异性的。
式(XVII)的中间体可通过将式(XVIII)的中间体与二苯基磷酰基叠氮化物在2，3，4，6，7，8，9，10-八氢-嘧啶并[1，2-a]氮杂和合适的溶剂如甲苯的存在下反应来制备。

*表示所述手性中心可为(R)或(S)，这取决于R1和R4取代基
其中R4为氢和R1为甲基、乙基或正丙基的式(XVIII)的立体特异性中间体，该R1由Alk表示，且该中间体由式(XVIII-a)和(XVIII-b)表示，可通过将式(XIX)的中间体与其中Alk表示甲基、乙基或正丙基的ZnAlk2分别在立体特异性催化剂如N，N’-(1R，2R)-1，2-环己烷二基双[1，1，1-三氟]-甲磺酰胺、N，N’-(1S，2S)-1，2-环己烷二基双[1，1，1-三氟]-甲磺酰胺，Ti(iPrO)4和合适的溶剂如甲苯的存在下反应来制备。

式(V)的中间体可通过将其中W5表示合适的离去基团如卤素如氯等的式(XX)的中间体与式(IX)的中间体和式(XXI)的中间体在合适的碱如N，N-二异丙基乙胺和合适的溶剂如四氢呋喃的存在下反应来制备。

式(VI)的中间体可通过将其中W6表示合适的离去基团如卤素如氯的式(XXII)的中间体与式(XXIII)的中间体在合适的溶剂如四氢呋喃存在下，任选在合适的碱如N，N-二乙基乙胺的存在下反应来制备。

其中W6表示氯的式(XXII)的中间体，该中间体由式(XXII-a)表示，可通过将式(XXIV)的中间体与SOCl2任选在合适的溶剂如二氯甲烷存在下反应来制备。

式(XXIV)的中间体可通过将式(III)的中间体与式(XXVI)的中间体在KSCN、NaOC(CH3)3，合适的酸如盐酸以及合适的溶剂如四氢呋喃的存在下反应来制备。用该反应还可进行式(XXV)中间体的制备。

式(XXIV)的中间体还可通过将式(XXV)的中间体在合适的碱如氢氧化钠的存在下，在合适的溶剂如醇如甲醇和水的存在下水解来制备。式(XXIV)的中间体还可通过将式(XXV)的中间体在合适的酸如三氟乙酸存在下，在合适的溶剂如二氯甲烷的存在下水解来制备。
在本发明化合物的制备中，令人感兴趣的中间体为式(IX)的中间体

其N-氧化物、药学可接受加成盐、季胺或立体化学异构形式。
如上文已经表明，式(IX)的中间体可在带有R1和R4取代基的碳原子处包含手性中心，这取决于R1和R4表示的取代基。如果所述碳原子表示手性中心，则式(IX)的中间体的优选的实施方案为其中所述中间体为立体特异性的中间体，即其中所述中间体在带有R1和R4取代基的碳原子处具有(R)或(S)构型(式(IX-b)的中间体)。特别优选的为具有(S)构型的式(IX-b)的中间体(式(IX-b-1)的中间体)。
因此本发明还涉及式(IX-b-1)的中间体

其N-氧化物、药学可接受加成盐或季胺。
本发明还涉及式(IX-b-1)的中间体，条件是当n＝2且每个R2为氯且所述两个氯取代基位于间位和对位时，R1不为乙基。
另一优选的实施方案为式(IX-b-1)的中间体，其中每个R2独立选自卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基或多卤代C1-6烷基。条件是当n＝2且每个R2为氯且所述两个氯取代基位于间位和对位时，R1不为乙基。
另一实施方案为式(IX-b-1)的中间体，其中n为1、2或3，特别是2，条件是当n＝2且每个R2为氯且所述两个氯取代基位于间位和对位时，R1不为乙基。
再另一实施方案为式(IX-b-1)的中间体，其中n为2且两个R2取代基位于间位和对位，条件是当每个R2为氯时，R1不为乙基。
另一实施方案为如上文所述的式(IX-b-1)的中间体，其中R4为氢。
还令人感兴趣的为式(IX)和(IX-b-1)的中间体，其中R1为氢、甲基、乙基、正丙基、甲氧基甲基、环己基、环丙基、二甲基氨基甲基、2-噻吩基、3，4-二氯苯基，特别是甲基、乙基、正丙基、甲氧基甲基，更特别为甲基、乙基和正丙基，条件是当n为2且R2表示氯且所述两个氯取代基位于间位和对位，且R4为氢时，R1不为乙基、环丙基苯基，和条件是当n为2且R2表示氯且所述两个氯取代基位于间位和对位，且R4为甲基时，R1不为甲基，和条件是当n为2且所述两个R2取代基位于间位和对位，且位于间位的R2为三氟甲基，且位于对位的R2为氟，且R4为氢时，R1不为乙基。
还令人感兴趣的为如上文所述的式(IX)和(IX-b-1)的中间体，其中R2为氯、氟或三氟甲基，特别是氯或氟，更特别为氟。
特别令人感兴趣的中间体为具有下式的式(IX-a)或(IX-b-1)的中间体

其N-氧化物、药学可接受加成盐或季胺，其中Alk如上文所定义，即Alk表示甲基、乙基和正丙基，且每个R2a和R2b独立表示氯、氟或三氟甲基。
一个令人感兴趣的实施方案为式(IX-a-1)的中间体，条件是当R2a和R2b都为氯或当R2a为三氟甲基且R2b为氟时，Alk不为乙基。
还令人感兴趣的式(IX-a-1)的中间体为式(IX-a-1)的中间体，条件是当R2a和R2b都为氯时，Alk不为甲基、乙基、正丙基，和条件是当R2a和R2b都为氟或R2a为三氟甲基且R2b为氟或R2a为氟且R2b为三氟甲基时，Alk不为乙基。
也令人感兴趣的为式(IX-b-1-1)的中间体，条件是当R2a和R2b都为氯时，Alk不为乙基。
特别令人感兴趣的为式(IX-b-1-1)的中间体，其中R2a和R2b都为氟且Alk表示乙基，即式((IX-b-1-1-a)的化合物。

式(I)和(I′)的化合物显示出CCR2受体拮抗特性。
该C-C趋化因子受体2(CCR2)及其配体单核细胞趋化蛋白(MCP-1；在新趋化因子命名法中也称作CCL2)被识别为涉及急性和慢性炎症过程。
趋化因子(“趋化性细胞因子”的缩写)是白细胞运输最重要的调节剂。通过在靶细胞上与偶联于异二聚G蛋白的七-跨膜-域受体相互作用，发挥此生物作用。依据氨基端附近两个保守半胱氨酸残基(表示为C)之间的氨基酸(表示为X)的存在，趋化因子主要被分为2个家族(C-C或C-X-C家族)。通常，来自C-C家族的趋化因子吸引单核细胞、巨噬细胞、T细胞和NK细胞。
一种通过CCR2受体发挥作用的趋化因子为上述MCP-1。因此，该CCR2受体也称为MCP-1受体。
MCP-2和MCP-3也可，至少是部分，通过该受体发挥作用。
人们认识到CCR2受体和MCP-1在各种炎性疾病的病理生理学中起作用。因此，阻断CCR2受体的CCR2受体拮抗剂具有用作药物的潜力，来对抗炎性疾病如关节炎、骨关节炎、类风湿性关节炎、肾小球肾炎、糖尿病性肾病变、肺纤维化、特发性肺纤维变性、结节病、脉管炎、肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、脑部炎性疾病如阿尔兹海默症、再狭窄、肺泡炎、哮喘、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、动脉粥样硬化、牛皮癣、皮肤迟发型超敏反应、炎症性肠病、急性或慢性脑炎如多发性硬化、自身免疫性脑脊髓炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、葡萄膜炎、皮炎、特应性皮炎。CCR2受体拮抗剂可用于治疗自体免疫疾病如糖尿病或移植排斥、中风、再灌注损伤、缺血癌症、心肌梗死、疼痛特别是神经性疼痛。
本发明的化合物也可用于抑制人类免疫缺陷病毒(HIV)进入单核细胞和淋巴细胞，因此在AIDS(获得性免疫缺陷综合症)的治疗中具有治疗作用。
CCR2受体以两种异构型(isoform)存在，即CCR2A和CCR2B受体。
由于其CCR2受体拮抗活性，尤其是其CCR2B受体拮抗活性，式(I)化合物、其N-氧化物、药学可接受加成盐、季胺、多晶型或立体化学异构形式可用于治疗或预防特别是治疗CCR2受体、尤其是CCR2B受体活化介导的疾病和症状。涉及CCR2受体活化的疾病和症状包括炎性病症如关节炎、骨关节炎、类风湿性关节炎、肾小球肾炎、糖尿病性肾病变、肺纤维化、特发性肺纤维变性、结节病、脉管炎、肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、脑部炎性疾病如阿尔兹海默症、再狭窄、肺泡炎、哮喘、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、动脉粥样硬化、牛皮癣、皮肤迟发型超敏反应、炎症性肠病、急性或慢性脑炎如多发性硬化、自身免疫性脑脊髓炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、葡萄膜炎、皮炎、特应性皮炎、自体免疫疾病如糖尿病或移植排斥、中风、再灌注损伤、缺血、癌症、心肌梗死、疼痛(神经性疼痛)。具体的说，式(I)化合物可用于炎性疾病和自体免疫疾病的治疗或预防，尤其是类风湿性关节炎、动脉粥样硬化、多发性硬化、炎症性肠病和慢性阻塞性肺病(COPD)。式(I)的化合物还对治疗或预防牛皮癣、哮喘、类风湿性关节炎或疼痛(神经性疼痛)特别有效，更具体为牛皮癣、哮喘或类风湿性关节炎。
考虑到上述药理学性质，式(I)化合物、其N-氧化物、药学可接受加成盐、季胺和立体化学异构形式可用作药物。具体的说，本发明化合物可用于制备治疗或预防CCR2受体、尤其是CCR2B受体活化介导疾病的药物。更具体的说，本发明的化合物可用于制备治疗或预防炎性疾病，尤其是类风湿性关节炎、动脉粥样硬化、多发性硬化、炎症性肠病和慢性阻塞性肺病(COPD)的药物。本发明的化合物还可特别用于生产治疗或预防牛皮癣、哮喘、类风湿性关节炎或疼痛(神经性疼痛)，更具体为牛皮癣、哮喘或类风湿性关节炎的药物。
考虑到式(I)化合物的用途，提供了治疗或预防温血动物(包括人类)遭受CCR2受体尤其是CCR2B受体活化介导疾病的方法。所述方法包括给予温血动物(包括人类)有效量的式(I)化合物、其N-氧化物形式、药学可接受加成盐、季胺或可能的立体化学异构形式。
本发明式(I)化合物阻断CCR2受体，抑制了MCP-1的正常机能。因此，本化合物也可描述为MCP-1抑制剂，因此可以用于预防或治疗由MCP-1介导的疾病。
本发明还提供了预防或治疗CCR2受体、尤其是CCR2B受体活化介导疾病的组合物。所述组合物包含治疗有效量的式(I)化合物和药学可接受载体或稀释剂。
为了给药，本发明的化合物被配制为各种药物形式。合适组合物可指所有常用于系统性给药的组合物。为制备本发明的药物组合物，有效量的具体化合物、任选以加成盐形式作为活性成分与药学可接受的载体组合为紧密的混合物，该载体根据给药所需的制剂形式可采用各种形式。这种药物组合物期望是单剂量形式，尤其适合口服、直肠、经皮或通过胃肠外注射给药。例如，在制备口服给药形式的组合物时，可使用任何常用的药物介质，例如对于口服液体制剂如悬浮剂、糖浆剂、酏剂、乳剂和溶液剂等为水、乙二醇、油、醇等；或者对于散剂、丸剂、胶囊剂和片剂为固体载体如淀粉、糖、高岭土、稀释剂、滑润剂、粘合剂、崩解剂等。由于易服用，片剂和胶囊剂表示最利于口服的剂量单位形式，在该情况中显然使用固体药物载体。对于胃肠外组合物，载体常包含无菌水，至少是大部分，但是也可包含其他成分，如助溶剂。可制备可注射溶液，例如，其中载体包括盐溶液、葡萄糖溶液或盐和葡萄糖的混和溶液。可制备可注射悬浮剂，其中可使用合适的液体载体、悬浮剂等。还包括固体形式的制剂，其在临用前能转化成液体形式制剂。在适合经皮给药的组合物中，载体任选包含渗透促进剂和/或适当润湿剂，任选与少量任何性质的适当添加剂组合，且该添加剂不对皮肤带来明显有害作用。所述添加剂可利于对皮肤给药和/或有助于所需组合物的制备。这些组合物可以各种方式给药，如透皮贴剂、喷滴剂(spot-on)、软膏剂。
本发明的化合物也可通过本领域用于吸入或吹入的制剂和方法，通过这种途径给药。因此，通常本发明的化合物可以以溶液、悬浮液或干粉形式给药至肺中。任何开发为通过口或鼻腔吸入或吹入来传递溶液、悬浮液或干粉的系统都适合本发明化合物的给药。
本发明的化合物也可以滴剂、尤其是滴眼剂形式局部给药。所述滴眼剂可以为溶液或悬浮液形式。任何开发作为滴眼液来传递溶液或悬浮液的系统都适用于本发明化合物的给药。
将前述药物组合物配制为单位剂量形式特别有利，以易于给药并保持剂量的均匀度。
本文使用的单位剂量形式将适合的物理不连续单位称为单位剂量，每个单位包含预定量的活性成分和所需药物载体的组合，该活性成分经计算可产生所需疗效。这种单位剂型的实例为片剂(包括刻痕片或包衣片)、胶囊剂、丸剂、散剂包、糯米纸囊剂、栓剂、可注射溶液剂或悬浮剂等，以及其分隔开的复合型制剂。
给药的准确剂量和频率依赖于所使用的具体式(I)化合物、治疗的具体疾病、治疗疾病的严重程度、年龄、体重、性别、紊乱程度和该具体患者全面的身体状况，以及该个体摄取的其他药物，如本领域技术人员所熟知的。此外，显然所述有效每日用量可根据所治疗的受试者的反应和/或开出本发明化合物处方的医师的评估减少或增加。
式(I)化合物也可与其他常规抗炎或免疫抑制药联合使用，例如类固醇、环加氧酶-2抑制剂、非甾体抗炎药、TNF-α抗体，例如乙酰水杨酸、丁苯羟酸、双氯芬酸钾、舒林酸、双氯芬酸钠、酮咯酸氨丁三醇、托美丁、布洛芬、萘普生、萘普生钠片、噻洛芬酸、氟比洛芬、甲芬那酸、尼氟酸、甲氯芬那酸、吲哚美辛、丙谷美辛、酮洛芬、萘丁美酮、对乙酰氨基酚、吡罗昔康、替诺昔康、尼美舒利、fenylbutazon、曲马多、丙酸倍氯米松、倍他米松、倍氯米松、布地奈德、氟替卡松、莫米松、地塞米松、氢化可的松、甲泼尼松龙、泼尼松龙、泼尼松、曲安西龙、塞来考昔、罗非考昔、伐地考昔、英夫利昔单抗、来氟米特、依那西普、CPH82、甲氨蝶呤、柳胺磺吡啶、抗淋巴细胞免疫球蛋白、抗胸腺细胞免疫球蛋白、硫唑嘌呤、环孢菌素、他克莫司物质、子囊霉素、雷帕霉素、莫罗单抗-CD3等。
因此，本发明也涉及式(I)化合物与其它抗炎或免疫抑制剂的组合。所述组合可用做药物。本发明也涉及包含(a)式(I)化合物以及(b)其它抗炎或免疫抑制化合物的产品，作为组合制剂同时、单独或依次用于治疗CCR2受体、尤其是CCR2B受体活化介导的疾病。这种产品中不同的药物可与药学可接受载体组合在单一制剂中。或者，这种产品可包含，例如，药盒包括装有含式(I)化合物的适当组合物的容器，以及装有含其它抗炎或免疫抑制化合物的组合物的容器。这种产品有利于医师基于对待治疗患者的诊断来选择每种组分的合适量及其给药顺序和时间。
下列实施例将举例说明本发明。
实验部分
下文中″RT″是指室温，″THF″是指四氢呋喃，″DIPE″是指二异丙基醚，″TFA″是指三氟乙酸，″DBU″是指2，3，4，6，7，8，9，10-八氢嘧啶并[1，2-a]氮杂，″DMF″是指N，N-二甲基甲酰胺。
A.中间化合物的制备
实施例A1
a.中间体1的制备

将Na2CO3(0.52mol的一部分)的H2O(150ml)溶液加入到搅拌的1-(3，4-二氯苯基)-1-丙酮(0.345mol)的乙醇溶液p.a.(150ml)的混合物中，然后加入剩余的Na2CO3，并在剧烈搅拌下分批加入羟胺单盐酸盐(0.345mol)。将反应混合物加热至回流温度，再加入H2O(75ml)，然后将该反应混合物搅拌回流6小时。再加入羟胺单盐酸盐(2.4g)并将该混合物再回流18小时。再次加入羟胺单盐酸盐(3g)；将反应混合物回流24小时，然后在室温下搅拌2天。滤出固体，用EtOH/H2O(1/1)洗涤并在56C干燥(真空，空气流)。产量：71.8g中间体1(95.4％)。
b.中间体2和3的制备

            中间体2              中间体3
将中间体1(0.3mol)的CH3OH/NH3(7N)(500ml)溶液在14℃用Raney镍(催化量)作为催化剂在噻吩溶液(6ml)存在下氢化。当吸收H2(2当量)后，滤出催化剂，蒸发滤液，然后与甲苯共蒸(co-evaporated)2次。将残留物在沸腾的2-丙醇(250ml)中搅拌，所得混合物趁热过滤出。滤液放至室温，在剧烈搅拌下缓慢加入HCl/2-丙醇(6N，150ml)。蒸除溶剂，所得残留物在DIPE中搅拌，然后过滤出，洗涤并在60℃干燥(真空)。产量：53g中间体2(73.4％)。将该流分的一部分转化为其游离碱：将中间体2(18.0g)在CH2Cl2(200ml)中搅拌，加入15％K2CO3水溶液，然后将所得混合物搅拌1小时，加入50％NaOH溶液以升高pH。分离有机层，用H2O洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，蒸除溶剂。产量：51g中间体3。
实施例A2
a.中间体4的制备

将中间体3(按照A1.b制备)(0.00208mol)溶于THF(15ml)中，加入N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺(0.0052mol)，然后加入1-(2-氨基-4-甲基-5-噻唑基)-2-溴-乙酮单氢溴酸盐(0.00104mol)。在室温下搅拌该反应混合物18小时，加入苯甲酰基异硫氰酸酯(0.003mol)，然后将该混合物在室温下搅拌2小时，将其倒入冰水(60ml)中。所得产物用CH2Cl2萃取，然后分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤。最后，蒸除溶剂。产量：1.38g中间体4。
b.中间体5的制备

将中间体3(按照A1.b制备)(208mg)溶于用分子筛干燥的(dried onmolecular sieves)THF，p.a.，(15ml)中，然后加入N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺(0.0016mol)，接着加入1-(2-氨基-4-甲基-5-噻唑基)-2-溴-乙酮单氢溴酸盐(0.00095mol)。将反应混合物在室温下搅拌18小时，过滤所得沉淀，用THF洗涤，真空干燥。产量：330mg中间体5。
实施例A3
a.中间体6的制备

将1-(3，4-二氯苯基)-1-丙酮(0.0748mol)的甲酰胺(45ml)和甲酸(30ml)溶液搅拌回流22小时，然后将反应混合物降至室温。将该混合物加热至50℃，倒入冰水(400ml)中，用EtOAc萃取。分离有机层，用H2O洗涤，用NaHCO3水溶液洗涤，再次用水和盐水洗涤，然后干燥(MgSO4)，过滤。蒸除溶剂，残留油状物静置过夜。过滤出所得固体，在DIPE中搅拌，再次过滤出，洗涤，在50℃干燥(真空)。产量：14.0g中间体6(80.6％)。
b.中间体7的制备

在室温下将中间体6(0.0032mol)的CH2Cl2p.a.(5ml)溶液在N2下搅拌，然后加入三甲基氧四氟硼酸盐(0.00331mol)的CH2Cl2p.a.(5ml)溶液。将反应混合物在室温下搅拌24小时，缓慢倒入NaOH水溶液和冰中，然后加入CH2Cl2。用NaOH-微丸干燥分离的有机层，过滤，蒸除溶剂，得到用于下一步骤的中间体7。
c.中间体8的制备

在N2下将2-溴-1-(3，4-二氯苯基)乙酮(0.00284mol)加入到搅拌的中间体7(0.00569mol)的无水CH3CN，p.a.(35ml)溶液中，然后将该溶液搅拌回流24小时。将所得反应混合物静置过周末，蒸除溶剂。残留物用硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱：CH2Cl2/CH3OH 100/0-＞99.5/0.5-＞99/1)。收集产物流分，蒸除溶剂。产量：1.1g流分1。将该流分的一部分(0.55g)用反相高效液相色谱法纯化(CH3CN)。收集产物流分，蒸除有机溶剂。所得水状浓缩物用CH2Cl2萃取，分离有机层，蒸发。产量：0.12g中间体8。
实施例A4
a.中间体9的制备

在室温下将中间体2(按照A1.b制备)(0.0748mol)和氯乙酸甲酯(0.08mol)的用分子筛干燥的DMF，p.a.，(150ml)溶液在N2下搅拌，缓慢加入Et3N(0.224mol)，然后将反应混合物在室温下搅拌20小时，再加入氯乙酸甲酯(3.3ml)。将该混合物在室温下再搅拌20小时，再次加入氯乙酸甲酯(2ml)。所得混合物搅拌24小时，然后过滤出所得固体，用DMF洗涤。加入Et2O(800ml)，将混合物用H2O(500ml)洗涤3次。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸除溶剂，；与甲苯共蒸发。所得残留油状物(23.4g)用硅胶过滤(洗脱液：CH2Cl2/CH3OH99/1)。收集产物流分，蒸除溶剂，最后与甲苯共蒸发。产量：20.6g中间体9(99.7％)。
b.中间体10的制备

将甲酸(7.5ml)和中间体9(0.0746mol)的二甲苯，p.a.(225ml)溶液搅拌回流4小时，然后将反应混合物放至室温。将该混合物用H2O(2×200ml)洗涤2次，用饱和NaHCO3水溶液(200ml)和盐水(200ml)洗涤，然后将分离的有机层干燥(MgSO4)，过滤出。最后，蒸除溶剂。产量：21.3g中间体10(93.9％）
实施例A5
a.中间体11和20的制备

     中间体11                      中间体20
将N，N′-(1R，2R)-1，2-环己烷二基双[1，1，1-三氟甲磺酰胺](0.005mol)和Ti(i-PrO)4(0.030mol)的甲苯(q.s.)溶液除气并置于空气流下，然后将反应混合物在40℃搅拌20分钟，冷至-78℃。滴加Et2Zn(0.030mol)，20分钟后，滴加3，4-二氯苯甲醛(0.0250mol)在甲苯(q.s.)中的混合物。将反应混合物放至0℃。在室温下搅拌该混合物过夜，然后用HCl(2N)猝灭反应。将该混合物用CH2Cl2萃取。洗涤分离的有机层，干燥，过滤，蒸除溶剂。残留物用硅胶柱色谱法纯化(洗脱液CH2Cl2/CH3OH98/2)。收集产物流分，蒸除溶剂。产量：5.1g中间体11。
可用N，N′-(1S，2S)-1，2-环己烷二基双[1，1，1-三氟甲磺酰胺]作为催化剂通过上述反应来制备中间体20。
b-1).中间体12的制备

将中间体11(0.025mol；按照A5.a制备)和二苯基磷酰基叠氮化物(0.030mol)在甲苯(50ml)中的混合物在0℃下搅拌，加入2，3，4，6，7，8，9，10-八氢嘧啶并[1，2-a]氮杂(0.030mol)。将该反应混合物在0℃下搅拌2小时，然后在室温下搅拌过夜。所得混合物用水和甲苯稀释。分离有机层，用水洗涤一次，用5％HCl洗涤一次，蒸除溶剂，得到中间体12(定量产量；用于下一反应步骤)。
b-2).中间体21的制备

将中间体20(按照A5.a制备)(0.127mol)和二苯基磷酰基叠氮化物(0.153mol)的甲苯(q.s.)溶液的混合物在0℃下搅拌，滴加2，3，4，6，7，8，9，10-八氢嘧啶并[1，2-a]氮杂(0.153mol)，将反应混合物在0℃下搅拌1小时，然后在室温下搅拌2小时，然后在50℃下搅拌3小时。冷却该溶液混合物，用水、0.5M HCl、水洗涤，干燥，过滤，蒸除溶剂。残留物用快速硅胶柱色谱法纯化(洗脱液：CH2Cl2/CH3OH99.5/0.5)。收集产物流分，蒸除溶剂。产量：23.5g中间体21。
c-1.中间体13的制备

将中间体12(0.025mol；按照A5.b-1制备)、三苯基膦(0.027mol)的THF(70ml)和H2O(20ml)混合物在室温下搅拌过夜。蒸除溶剂。残留物用10％HCl处理。将酸性层用DIPE洗涤，然后碱化，接着用CH2Cl2萃取。干燥分离的有机层，过滤，蒸除溶剂。残留物用硅胶柱色谱法纯化。收集产物流分，蒸除溶剂。产量：1.1g中间体13。
c-2.中间体22的制备

将中间体21(按照A5.b-2制备)(0.122mol；23.5g)在甲醇(q.s.)中混合物用Pd/C 5％(5g)作为催化剂在50℃下氢化。吸收H2之后，滤出催化剂，蒸发滤液。产量：21g中间体22。
d.中间体14的制备

将中间体3(按照A1.b制备)(0.0116mol)的Et3N(0.013mol)溶液和用分子筛干燥的DMF，p.a.，(20ml)在冰浴下搅拌。滴加氯乙腈(0.0128mol)的用分子筛干燥的DMF，p.a.，(2.5ml)溶液。所得反应混合物在室温下搅拌6小时。再滴加氯乙腈(0.0063mol)的用分子筛干燥的DMF，p.a.，(1ml)溶液，所得反应混合物再搅拌24小时。再加入Et3N(1ml)，然后再滴加氯乙腈(0.0079mol)的用分子筛干燥的DMF，p.a.，(1ml)溶液。将所得反应混合物搅拌20小时。滤出沉淀物。将滤液倒入Et2O(200ml)中，用H2O/NaHCO3(10％；100ml)和H2O(2x)洗涤。干燥分离的有机层(MgSO4)，过滤，蒸除溶剂，与甲苯共蒸发。残留物用硅胶纯化(洗脱液：CH2Cl2/MeOH 99∶1)。收集所需流分，蒸除溶剂，与甲苯共蒸发。产量：2.3g中间体14(81.6％)。
e.中间体15的制备

将中间体14(0.00946mol)和正丁基甲酸酯(15ml)的混合物搅拌回流4天。蒸除溶剂，然后与甲苯共蒸发。产量：2.68g中间体15。
实施例A6
a.中间体16和17的制备

           中间体16                              中间体17
将中间体10(按照A4.b制备)(0.0618mol)和二甲基乙二酸酯(0.11mol)的用分子筛干燥的THF，p.a.，(100ml)溶液在N2下搅拌，然后加入2-甲基-2-丙醇钠盐(0.066mol)，所得反应混合物在室温下搅拌18小时和另外24小时。最后将混合物在60℃搅拌4小时。再加入2-甲基-2-丙醇钠盐(4g)和二甲基乙二酸酯(6g)，将反应混合物在室温下搅拌过周末。蒸除溶剂，残留物溶于H2O(250ml)，用Et2O洗涤2次。分离水层，加入CH3OH(200ml)、硫氰酸钾盐(10g)和HCl(36％，p.a.)(q.s.)，然后将混合物在60℃下搅拌18小时。蒸除部分溶剂，浓缩物用CH2Cl2萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸除溶剂。残留物(5g)用硅胶过滤纯化(洗脱液：CH2Cl2/CH3OH 99/1)。收集产物流分，蒸除溶剂。残留物在己烷下研磨，过滤，洗涤，然后干燥(真空，50℃)。产量：5.2g中间体16。合并包含副产物的流分，蒸除溶剂，然后与己烷/DIPE共蒸发。残留物在Et2O/己烷中搅拌，滤出沉淀物，用己烷洗涤，然后干燥(真空，50℃)。产量：0.28g中间体17。
b.中间体18的制备

将中间体17(0.000257mol)的亚硫酰氯(5ml)混合物在室温下搅拌过夜，然后蒸除溶剂，与甲苯(p.a.)共蒸发，得到用于下一步骤的中间体18。
c.中间体19的制备

将中间体18(0.000257mol)的用分子筛干燥的THF，p.a.，(10ml)溶液在N2下搅拌，然后加入肼甲醛(hydrazinecarboxaldehyde)(0.0125mol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时，蒸除溶剂。残留物在H2O(10ml)和CH2Cl2/CH3OH(15ml，95/5)中搅拌。分离有机层，用HCl(1N)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，蒸除溶剂，然后与甲苯共蒸发。产量：800mg中间体19。
实施例A7
a-1.中间体24的制备

将(按照A6.a制备的中间体23)(0.0015mol)和1NNaOH(0.030mol)的H2O(20ml)和甲醇(50ml)的混合物在室温下搅拌20小时，然后再加入1N NaOH(10ml)，将反应混合物在室温下搅拌5小时。蒸除一半溶剂，加入1N HCl(40ml)，用CH2Cl2萃取沉淀的产物。分离有机层，干燥，过滤，蒸除溶剂。产量：5.6g中间体24。
a-2.中间体28的制备

将(按照A6.a制备的中间体27A6.a)(0.0012mol)的TFA(2ml)和CH2Cl2(70ml)混合物在室温下搅拌1天，然后将反应混合物浓缩，得到中间体28。
b.中间体25的制备

将中间体24(按照A7.a-1制备)(0.0075mol)和SOCl2(0.015mol)的CH2Cl2(50ml)溶液的混合物在油浴下搅拌回流3小时，然后蒸除溶剂。残留物溶于甲苯，再次蒸除溶剂。产量：2.9g中间体25。
c.中间体26的制备

将乙酰肼(hydrazide acetic acid)(0.011mol)和Et3N(0.015mol)的THF(30ml)溶液的混合物搅拌丙在冰浴下冷至0-5℃，然后在0-5℃下经30分钟滴加入中间体25(按照A7.b制备)(0.0075mol)的THF(20ml)溶液。将反应混合物在0-5℃搅拌1小时，然后加入H2O，所得混合物用CH2Cl2萃取。分离有机层，干燥，过滤，蒸除溶剂。所得残留物用硅胶过滤(洗脱液：CH2Cl2/CH3OH 97/3)，然后收集产物流分，蒸除溶剂。产量：1.25g中间体26。
实施例A8

将N，N’-(1S，2S)-1，2-环己烷二基双[1，1，1-三氟甲磺酰胺](催化量)和四(2-丙醇)钛(tetrakis(2-propanolato)titanium)(0.415mol)的甲苯(p.a)(500ml)溶液在氩气下除气，然后在140℃搅拌20分钟。将该混合物在2-丙醇/CO2浴下冷至-78℃，经15分钟滴加二乙基锌(0.415mol)。所得混合物在-78℃下搅拌15分钟，然后经20分钟滴加3，4-二氟苯甲醛(0.345mol)的甲苯(p.a.)(q.s)溶液。将反应混合物在-78℃下再搅拌30分钟，然后缓慢达到0℃。用1N HCl猝灭反应混合物，用CH2Cl2萃取。将有机层和水层一起用代卡立特(dicalite)过滤，分离所得滤液中的有机层，然后用H2O洗涤，干燥(MgSO4)，过滤。最后，蒸除溶剂。产量：57.7g中间体30。
b.中间体31的制备

在冰浴下在0℃下将中间体30(0.331mol)和二苯基磷酰基叠氮化物(0.4mol)的甲苯(p.a.)(500ml)溶液在N2下搅拌，然后滴加DBU(0.4mol)，将反应混合物在0℃下搅拌1小时。待混合物达到室温，然后在45℃下搅拌1小时，在室温下过夜。将所得混合物倒入H2O(500ml)中，用Et2O(500ml)萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸除溶剂。残留物用硅胶过滤(洗脱液：CH2Cl2 100％)。收集产物流分，然后蒸除溶剂，与甲苯共蒸发。产量：57.2g中间体31。
c.中间体32的制备

将中间体31(0.29mol)的CH3OH(600ml)混合物用Pd/C 10％(2g)作为催化剂氢化。吸收H2(1当量)之后，滤出催化剂，蒸发滤液。残留物溶于CH2Cl2(300ml)，然后在冰浴下剧烈搅拌该溶液，缓慢加入1N HCl。该萃取之后，用50％NaOH溶液将水层碱化至pH＞10，所得混合物用CH2Cl2萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸除溶剂。产量：40.0g中间体32。
d.中间体33的制备

将溴乙酸甲酯(Brome acetic acid methyl ester)(0.28mol)加入到搅拌的中间体32(0.233mol)和N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺(0.466mol)的THF(350ml)溶液中，所得反应混合物在室温下搅拌5天。滤出所得沉淀，用THF洗涤，然后蒸发滤液。所得残留物在CH2Cl2中搅拌，然后用半饱和的NaHCO3的水溶液和水洗涤。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，然后蒸除溶剂，与甲苯共蒸发。产量：中间体33。
e.中间体34的制备

将甲酸(23ml)加入的搅拌的中间体33(0.23mol)的二甲苯(p.a)(400ml)溶液中，然后将所得然后混合物用Dean-Stark仪器搅拌回流4小时。将混合物达到室温，蒸除溶剂。残留物用硅胶过滤(洗脱液：CH2Cl2/CH3OH 99/1)。收集纯度＞95％的产物流分，然后蒸除溶剂，与甲苯共蒸发。产量：15.2g中间体34。
实施例A9
a.中间体35的制备

以下程序重复三次。[将1-(3，4-二氟苯基)-1-丙酮(0.43mol)、甘氨酸甲酯、氯化氢(0.5mol)和KF(0.43mol)的CH3OH(700ml)混合物在50℃下用Pd/C 10％(5g)作为催化剂在噻吩溶液(2ml)存在下氢化。吸收H2(1当量)完成后，滤出催化剂，蒸发滤液。残留物在水中搅拌，然后用NaHCO3(q.s.)处理，所得产物用CH2Cl2萃取。分离有机层，干燥，过滤，蒸除溶剂。将残留物溶于2-丙醇(1000ml)，用6N HCl/2-丙醇转化为盐酸盐。滤出沉淀，用DIPE洗涤(以除去2-丙醇)，然后在水中搅拌。加入CH2Cl2，所得混合物用K2CO3(q.s.)处理。分离各层。干燥有机层，过滤，蒸除溶剂。]产量：221g中间体35。
b.中间体36的制备

[S-(R*，R*)]-2，3-双[(4-甲基苯甲酰基)氧基]丁二酸
将中间体35(0.9mol)的2-丙醇(1500ml)混合物在室温下搅拌。一次性加入[S-(R*，R*)]-2，3-双[(4-甲基苯甲酰基)氧基]-丁二酸(0.9mol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。滤出沉淀，溶于回流的2-丙醇(1500ml)中。然后将该混合物在室温下搅拌，使化合物再次沉淀。滤出沉淀，然后再溶于沸腾的2-丙醇中。将混合物冷至室温，滤出所得沉淀，干燥。产量：231.4g中间体36(96％(S))。
c.中间体37的制备

加入NH4OH/CH2Cl2，将中间体36(370g，0.588mol)转化为游离碱。提取所得产物得到游离碱残留物A*。将*(132g，0.543mol)的甲酸(150ml)和二甲苯(750ml)混合物在120℃搅拌回流5小时。蒸除溶剂。残留物在水中搅拌，用NaHCO3处理，然后用CH2Cl2萃取。分离有机层，干燥，过滤，蒸除溶剂。产量：146g中间体37，不需进一步纯化用于下一反应步骤)。
表1列出了可按照上面实施例(Ex.No.)之一制备的式(IX)的中间体

  中间体  Ex.No.  R2a  R2b  R1  R4  立体化学描  述*  1.1  A1b  Cl  Cl  H  H  1.2  A1b  Cl  Cl  CH3  H  (RS)  1.3  A5c-2)  Cl  Cl  CH3  H  (S)  3  A1b  Cl  Cl  CH2CH3  H  (RS)  22  A5c-2)  Cl  Cl  CH2CH3  H  (S)  1.4  A1b  Cl  Cl  CH2CH2CH3  H  (RS)  1.5  A5c-2)  Cl  Cl  CH2CH2CH3  H  (S)  1.6  A1b  Cl  Cl  苯基  H  (RS)  1.7  A1b  Cl  Cl  3，4-二氯苯基  H  (RS)  1.8  A1b  Cl  Cl  环己基  H  (RS)  1.9  A1b  Cl  Cl  环丙基  H  (RS)  1.10  A1b  Cl  Cl  CH2-N(CH3)2  H  (RS)  1.11  A1b  Cl  Cl  CH2-O-CH3  H  (RS)  1.12  A1b  Cl  Cl  2-噻吩基  H  (RS)  2.1  A1b  Cl  H  H  H  2.2  A1b  Cl  H  CH3  H  (RS)  2.3  A5c-2)  Cl  H  CH3  H  (S)  2.4  A1b  Cl  H  CH2CH3  H  (RS)  2.5  A5c-2)  Cl  H  CH2CH3  H  (S)  2.6  A1b  Cl  H  CH2CH2CH3  H  (RS)  2.7  A5c-2)  Cl  H  CH2CH2CH3  H  (S)  2.8  A1b  Cl  H  苯基  H  (RS)  2.9  A1b  Cl  H  3，4-二氯苯基  H  (RS)  2.10  A1b  Cl  H  环己基  H  (RS)  2.11  A1b  Cl  H  环丙基  H  (RS)  2.12  A1b  Cl  H  CH2-N(CH3)2  H  (RS)  2.13  A1b  Cl  H  CH2-O-CH3  H  (RS)  2.14  A1b  Cl  H  2-噻吩基  H  (RS)  3.1  A1b  H  Cl  H  H  3.2  A1b  H  Cl  CH3  H  (RS)  3.3  A5c-2)  H  Cl  CH3  H  (S)  3.4  A1b  H  Cl  CH2CH3  H  (RS)  3.5  A5c-2)  H  Cl  CH2CH3  H  (S)  3.6  A1b  H  Cl  CH2CH2CH3  H  (RS)
  中间体  Ex.No.  R2a  R2b  R1  R4  立体化学描  述*  3.7  A5c-2)  H  Cl  CH2CH2CH3  H  (S)  3.8  A1b  H  Cl  苯基  H  (RS)  3.9  A1b  H  Cl  3，4-二氯苯基  H  (RS)  3.10  A1b  H  Cl  环己基  H  (RS)  3.11  A1b  H  Cl  环丙基  H  (RS)  3.12  A1b  H  Cl  CH2-N(CH3)2  H  (RS)  3.13  A1b  H  Cl  CH2-O-CH3  H  (RS)  3.14  A1b  H  Cl  2-噻吩基  H  (RS)  4.1  A1b  CH3  CH3  H  H  4.2  A1b  CH3  CH3  CH3  H  (RS)  4.3  A5c-2)  CH3  CH3  CH3  H  (S)  4.4  A1b  CH3  CH3  CH2CH3  H  (RS)  4.5  A5c-2)  CH3  CH3  CH2CH3  H  (S)  4.6  A1b  CH3  CH3  CH2CH2CH3  H  (RS)  4.7  A5c-2)  CH3  CH3  CH2CH2CH3  H  (S)  4.8  A1b  CH3  CH3  苯基  H  (RS)  4.9  A1b  CH3  CH3  3，4-二氯苯基  H  (RS)  4.10  A1b  CH3  CH3  环己基  H  (RS)  4.11  A1b  CH3  CH3  环丙基  H  (RS)  4.12  A1b  CH3  CH3  CH2-N(CH3)2  H  (RS)  4.13  A1b  CH3  CH3  CH2-O-CH3  H  (RS)  4.14  A1b  CH3  CH3  2-噻吩基  H  (RS)  5.1  A1b  CH3O  CH3O  H  H  5.2  A1b  CH3O  CH3O  CH3  H  (RS)  5.3  A5c-2)  CH3O  CH3O  CH3  H  (S)  5.4  A1b  CH3O  CH3O  CH2CH3  H  (RS)  5.5  A5c-2)  CH3O  CH3O  CH2CH3  H  (S)  5.6  A1b  CH3O  CH3O  CH2CH2CH3  H  (RS)  5.7  A5c-2)  CH3O  CH3O  CH2CH2CH3  H  (S)  5.8  A1b  CH3O  CH3O  苯基  H  (RS)  5.9  A1b  CH3O  CH3O  3，4-二氯苯基  H  (RS)  5.10  A1b  CH3O  CH3O  环己基  H  (RS)  5.11  A1b  CH3O  CH3O  环丙基  H  (RS)  5.12  A1b  CH3O  CH3O  CH2-N(CH3)2  H  (RS)
  中间体  Ex.No.  R2a  R2b  R1  R4  立体化学描  述*  5.13  A1b  CH3O  CH3O  CH2-O-CH3  H  (RS)  5.14  A1b  CH3O  CH3O  2-噻吩基  H  (RS)  6.1  A1b  F  F  H  H  6.2  A1b  F  F  CH3  H  (RS)  6.3  A5c-2)  F  F  CH3  H  (S)  6.4  A1b  F  F  CH2CH3  H  (RS)  6.5  A5c-  2)/A8c  F  F  CH2CH3  H  (S)  6.6  A1b  F  F  CH2CH2CH3  H  (RS)  6.7  A5c-2)  F  F  CH2CH2CH3  H  (S)  6.8  A1b  F  F  苯基  H  (RS)  6.9  A1b  F  F  3，4-二氯苯基  H  (RS)  6.10  A1b  F  F  环己基  H  (RS)  6.11  A1b  F  F  环丙基  H  (RS)  6.12  A1b  F  F  CH2-N(CH3)2  H  (RS)  6.13  A1b  F  F  CH2-O-CH3  H  (RS)  6.14  A1b  F  F  2-噻吩基  H  (RS)  7.1  A1b  Br  Br  H  H  7.2  A1b  Br  Br  CH3  H  (RS)  7.3  A5c-2)  Br  Br  CH3  H  (S)  7.4  A1b  Br  Br  CH2CH3  H  (RS)  7.5  A5c-2)  Br  Br  CH2CH3  H  (S)  7.6  A1b  Br  Br  CH2CH2CH3  H  (RS)  7.7  A5c-2)  Br  Br  CH2CH2CH3  H  (S)  7.8  A1b  Br  Br  苯基  H  (RS)  7.9  A1b  Br  Br  3，4-二氯苯基  H  (RS)  7.10  A1b  Br  Br  环己基  H  (RS)  7.11  A1b  Br  Br  环丙基  H  (RS)  7.12  A1b  Br  Br  CH2-N(CH3)2  H  (RS)  7.13  A1b  Br  Br  CH2-O-CH3  H  (RS)  7.14  A1b  Br  Br  2-噻吩基  H  (RS)  8.1  A1b  F  CF3  H  H  8.2  A1b  F  CF3  CH3  H  (RS)  8.3  A5c-2)  F  CF3  CH3  H  (S)
  中间体  Ex.No.  R2a  R2b  R1  R4  立体化学描  述*  8.4  A1b  F  CF3  CH2CH3  H  (RS)  8.5  A5c-2)  F  CF3  CH2CH3  H  (S)  8.6  A1b  F  CF3  CH2CH2CH3  H  (RS)  8.7  A5c-2)  F  CF3  CH2CH2CH3  H  (S)  8.8  A1b  F  CF3  苯基  H  (RS)  8.9  A1b  F  CF3  3，4-二氯苯基  H  (RS)  8.10  A1b  F  CF3  环己基  H  (RS)  8.11  A1b  F  CF3  环丙基  H  (RS)  8.12  A1b  F  CF3  CH2-N(CH3)2  H  (RS)  8.13  A1b  F  CF3  CH2-O-CH3  H  (RS)  8.14  A1b  F  CF3  2-噻吩基  H  (RS)  9.1  A1b  CF3  F  H  H  9.2  A1b  CF3  F  CH3  H  (RS)  9.3  A5c-2)  CF3  F  CH3  H  (S)  9.4  A1b  CF3  F  CH2CH3  H  (RS)  9.5  A5c-2)  CF3  F  CH2CH3  H  (S)  9.6  A1b  CF3  F  CH2CH2CH3  H  (RS)  9.7  A5c-2)  CF3  F  CH2CH2CH3  H  (S)  9.8  A1b  CF3  F  苯基  H  (RS)  9.9  A1b  CF3  F  3，4-二氯苯基  H  (RS)  9.10  A1b  CF3  F  环己基  H  (RS)  9.11  A1b  CF3  F  环丙基  H  (RS)  9.12  A1b  CF3  F  CH2-N(CH3)2  H  (RS)  9.13  A1b  CF3  F  CH2-O-CH3  H  (RS)  9.14  A1b  CF3  F  2-噻吩基  H  (RS)

B.终化合物的制备
实施例B1
化合物1的制备

将1N NaOH(0.006mol)加入到中间体4(按照A2.a制备)(0.0026mol)的乙醇，p.a.(10ml)溶液中，然后将该溶液在50℃搅拌1小时，放至室温。将反应混合物倒入H2O(30ml)中，缓慢加入1N HCl(7ml)。滤出所得沉淀物，用H2O洗涤，在60℃干燥(真空)。用高效液相色谱法纯化(洗脱液：(0.5％NH4OAc的H2O溶液)/CH3CN 90/10)该粗产物的一部分(0.78g中的0.68g)。收集产物流分，蒸除有机溶剂。水性浓缩物用二氯甲烷萃取，然后分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤。最后，蒸除溶剂。产量：0.24g化合物1。
实施例B2
a.化合物2的制备

将硫氰酸钾盐(0.00285mol)的H2O(10ml)溶液加入到中间体5(按照A2.b制备)(0.00095mol)的甲醇(10ml)搅拌溶液中，然后加入36％HCl，p.a.*(0.00475mol)，将反应混合物在55℃搅拌4小时。再加入硫氰酸钾盐(0.1g)。将该混合物在55℃在搅拌18小时。使所得混合物达到室温，静置1小时。滤出形成的沉淀，用CH3OH/H2O(1/1)洗涤，在60℃干燥(真空)。产量：0.16g化合物2(m.p.：301.8-303.3℃)。
b-1.化合物3的制备

将H2O(2.5ml)，接着是硫氰酸钾盐(0.00328mol)，然后是浓HCl(0.5ml)加入到中间体8(按照A3.c制备)(0.0013mol)的甲醇(15ml)溶液中，将反应混合物在室温下搅拌20小时，然后将该混合物在55℃搅拌48小时，再加入浓HCl(0.75ml)。所得混合物在60℃下搅拌24小时，加入H2O，所得混合物用CH2Cl2萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸除溶剂。残留物用反相高效液相色谱法纯化(NH4OAc 10％CH3CN)。收集产物流分，蒸除一半溶剂。所得沉淀物用H2O洗涤，在50℃下干燥(真空)。产量：0.061g化合物3。
b-2.化合物4的制备

将硫氰酸钾盐(0.000314mol)，然后是HCl，1N(0.00086mol)加入到(按照A3.c制备)(0.000286mol)的甲醇，p.a.(3ml)溶液中，将该混合物在室温搅拌4小时。加入HCl(0.5ml，浓)，将所得混合物在55℃下搅拌18小时，然后再加入硫氰酸钾盐(0.000515mol)，将反应混合物在55℃下搅拌7小时。将该混合物静置18小时，加入H2O(15ml)，所得产物用CH2Cl2萃取。分离有机层，蒸发。残留物用反相快速高效液相色谱法纯化。收集产物流分，蒸除有机挥发物。产物用CH2Cl2萃取，蒸发分离的有机层。产量：0.005g化合物4。
实施例B3
a.化合物5的制备

在0℃下将中间体10(按照A4.b制备)(0.002mol)加入到N-(1-甲基乙基)-2-丙胺锂盐(0.0025mol)的THF(40ml)溶液中反应30分钟，加入3，4-二氯苯甲酰氯(0.0033mol)，然后将反应混合物反应1小时，用水猝灭反应。用EtOAc萃取所得混合物，干燥，蒸除溶剂。残留物用CH3OH稀释，然后加入浓HCl(q.s.)和硫氰酸钾盐(1g)。所得混合物在70℃加热48小时，然后在水和CH2Cl2之间分配。分离有机层，干燥，蒸除溶剂残留物用高效液相色谱法纯化。收集产物流分，蒸除溶剂。产量：0.180g化合物5。
b.化合物6的制备

方法1
将中间体10(按照A4.b制备)(0.003mol的10ml THF溶液)滴加到冷(-78℃)N-(1-甲基乙基)-2-丙胺锂盐(0.0036mol，2M的THF溶液)的THF(5ml)溶液中。30分钟后，加入2-噻吩羰基氯(thiophenecarbonylchloride)(0.0031mol)将反应混合物静置1小时。用NH4Cl猝灭反应混合，用EtOAc萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸除溶剂。残留物用甲醇(25ml)洗涤，然后加入硫氰酸钾盐(1g)和浓HCl(1ml)。所得混合物在70℃下加热过夜，蒸除溶剂。使残留物在EtOAc和水之间分配，然后将分离的有机层干燥，蒸除溶剂。残留物用高效液相色谱法纯化；收集产物流分，蒸除溶剂。产量：0.040g化合物6。
c.化合物6的制备

方法2
在0℃将t-BuONa(0.150g)加入到中间体10(按照A4.b制备)(0.00082mol)的THF(5ml)混合物中，然后加入2-噻吩羰基氯(0.001mol)，30分钟后加入硫氰酸钾盐(0.250g)和浓HCl(1ml)。将反应混合物在70℃下加热18小时，用水/CH2Cl2处理。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸除溶剂。残留物用高效液相色谱法纯化，然后收集产物流分，蒸除溶剂。残留物用快速柱色谱法，然后用正相高效液相色谱法纯化。收集产物流分，蒸除溶剂。产量：45mg化合物6。
d-1.化合物7的制备

在-78℃下将N-(1-甲基乙基)-2-丙胺锂盐在N2下滴加到中间体29(按照A4.b制备)(0.00924mol)的THF(q.s.)冷混合物中。30分钟后，加入5-异唑羰基氯(isoxazolecarbonyl chloride)(0.0110mol)，然后使反应混合物缓慢达到室温。用NH4Cl猝灭反应，蒸除溶剂。残留物用CH3OH洗涤，用H2O洗涤，然后加入硫氰酸钾盐(3g)和浓HCl。将反应混合物在80℃下加热过夜，然后冷却，用K2CO3猝灭，用CH2Cl2萃取。分离有机层，干燥，蒸除溶剂。残留物用硅胶柱色谱法纯化(梯度洗脱液：CH2Cl2/CH3OH 100/0-＞90/10)。收集两种产物流分，蒸除溶剂，得到残留物(I)和残留物(II)。残留物(I)用反相高效液相色谱法纯化，收集产物流分，蒸除溶剂。所得残留物用CH2Cl2稀释，用1N HCl洗涤3次。分离有机层，干燥，蒸除溶剂。产量：0.290g化合物7。
d-2.化合物43的制备

在N2下将中间体34(按照A8.e制备)(0.0169mol)的用分子筛干燥的THF，p.a.，(80ml)的溶液在2-丙醇/CO2冷却浴下搅拌，然后在-78℃下缓慢滴加N-(1-甲基乙基)-2-丙胺锂盐(0.0179mol；2M的THF/庚烷溶液)，将反应混合物再搅拌5分钟。缓慢滴加5-异唑羰基氯(0.02mol)的用分子筛干燥的THF，p.a.，(5ml)溶液，将所得溶液在-78℃下搅拌90分钟，然后使其达到10℃。加入KSCN(0.051mol)的H2O(30ml)溶液，接着加入CH3OH(40ml)，然后加入浓HCl(14ml)。将反应混合物在60℃下搅拌4小时，在70℃下18小时，然后使混合物达到室温。将该混合物倒入H2O中，用CH2Cl2萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸除溶剂。残留物用高效液相色谱法(反相法″NH4OAc 10％CH3CN-CH3OH″)纯化。收集产物流分，然后蒸除有机溶剂，水性浓缩物用CH2Cl2萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸除溶剂。产量：0.269g终化合物43。
d-3.化合物53的制备

搅拌中间体37(按照A9.c制备)(0.54mol)的THF(1000ml)混合物在CO2/2-丙醇-浴下冷至-78℃。加入5-异唑羰基氯(0.75mol)。然后经30分钟加入1，1，1-三甲基-N-(三甲基甲硅烷基)-甲硅烷胺锂盐(silanamine lithium salt)，1M/THF(0.8mol，800ml)。将混合物在-78℃搅拌4小时。然后，将反应温度升至-20℃。经15分钟滴加浓HCl(66ml)的水(400ml)溶液。蒸除有机溶剂(THF)。加入水(400ml)。然后加入浓HCl(280ml)，接着加入甲醇(800ml)，然后加入KSCN(0.8mol)。将反应混合物在60℃下搅拌22小时。加入水。将该混合物冷至室温，然后用K2CO3和NaHCO3处理。将所得混合物用CH2Cl2萃取。干燥分离的有机层，过滤，蒸除溶剂。残留物(±200g)用高效液相色谱法纯化。收集产物流分，蒸除溶剂。残留物从DIPE(2x)结晶。滤出沉淀，干燥。产量：45.5g终化合物53(mp：128.5℃)。
实施例B4
化合物8的制备

将中间体15(根据A5.e制备)(0.00369mol)的用分子筛干燥的THF，p.a.，(20ml)溶液在2-丙醇/CO2冷却浴下搅拌，然后在-78℃下缓慢加入N-(1-甲基乙基)-2-丙胺锂盐(0.0074mol)。将所得混合物搅拌15分钟，缓慢加入5-异唑羰基氯(0.0037mol)。将该混合物在-78℃下搅拌10分钟，然后使其达到室温。加入硫氰酸钾盐(0.011mol)的H2O(15ml)溶液，接着加入CH3OH(10ml)，然后加入36％HCl(1.3ml)，将所得反应混合物在60℃下搅拌4小时，倒入冰-水中，用CH2Cl2/CH3OH(98/2)萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸除溶剂。残留物用反相高效液相色谱法(洗脱液：(0.5％NH4OAc的H2O溶液)/CH3CN 10/90)纯化。收集产物流分，蒸除有机溶剂。水性残留物用快速管(flash tubes)通过快速柱色谱法纯化(洗脱液：CH2Cl2/THF92/8)。收集产物流分，在CH2Cl2/CH3OH(98/2)中搅拌，滤除硅胶。最后，蒸发滤液。产量：0.020g化合物8。
实施例B5
化合物9的制备

将中间体19(按照A6.c制备)(0.00025mol)的氧氯化磷(5ml)溶液在60℃下搅拌18小时，然后蒸除溶剂。残留物在冰-水中搅拌，用CH2Cl2萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸除溶剂。残留物在2-丙酮(5ml)中搅拌，所得混合物用SO2气体处理15分钟。蒸除溶剂，残留物用高效液相色谱法纯化。收集产物流分，蒸除有机溶剂。水性浓缩物用CH2Cl2萃取；分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤，蒸除溶剂。产量：0.010g化合物9。
实施例B6
化合物10的制备

将化合物5(按照B3.a制备)(0.00025mol)的1N NaOH(1ml)和甲醇(3ml)的混合物在70℃下反应过夜，然后蒸除溶剂。残留物用HCl处理，过滤所得混合物，然后干燥所需产物(真空干燥箱)。产量：0.070g化合物10。
实施例B7
a.化合物11的制备

将化合物10(按照B6制备)(0.00015mol)的SOCl2(5ml)的混合物在70℃下加热4小时，然后将反应混合物冷却，蒸除溶剂。残留物用THF稀释，一次性加入NH4OH(3ml)水溶液。将反应混合物搅拌15分钟，蒸除溶剂。残留物用CH2Cl2萃取，然后干燥有机层，蒸除溶剂。残留物置入2-丙酮中，向混合物中通SO2(气体)10分钟。蒸除溶剂，残留物用快速柱色谱法纯化(洗脱液：CH2Cl2/CH3CN 95/5)。收集产物流分，蒸除溶剂。产量：15mg化合物11。
b.化合物13的制备

将化合物12(按照B6制备)(0.0012mol)、N′-(乙基亚氨代甲酰基)-N，N-二甲基-1，3-丙二胺(0.0013mol)和1-羟基-1H-苯并三唑(0.0013mol)的DMF(8ml)溶液的混合物在室温下搅拌30分钟，向溶液中通NH3(气体)15分钟，将所得反应混合物搅拌1小时。蒸除溶剂，所得残留物在H2O中搅拌，然后将混合物用CH2Cl2萃取。分离有机层，干燥，过滤，蒸除溶剂。残留物用硅胶柱色谱法纯化(洗脱液：CH2Cl2/CH3OH 96/4)。收集纯产物流分，蒸除溶剂。残留物在DIPE中搅拌，收集所得固体。产量：0.190g。该流分用高效液相色谱法纯化，然后收集纯产物流分，蒸除溶剂。所得量为在DIPE中搅拌，然后滤出所需产物，干燥。产量：0.091g化合物13(m.p.：228-229℃)。
实施例B8
化合物14的制备

将化合物12(按照B6制备)(0.0012mol)、N′-(乙基亚氨代甲酰基)-N，N-二甲基-1，3-丙二胺(0.0012mol)和1-羟基-1H-苯并三唑(0.0012mol)的DMF(8ml)溶液的混合物在室温下搅拌30分钟，然后加入2-氨基乙醇(0.0024mol)，然后将反应混合物在室温下搅拌3小时。蒸除溶剂，所得残留物用硅胶柱色谱法纯化(洗脱液：CH2Cl2/CH3OH96/4)。收集纯产物流分，蒸除溶剂。残留物在DIPE中搅拌，然后滤出所得固体，干燥。产量：0.155g化合物14(m.p.：165-166℃)。
实施例B9
化合物16的制备

将化合物15(按照B3制备)(0.00029mol)和NaBH4(0.00211mol)的2-甲氧基乙醇(5ml)溶液的混合物在100℃下加热24小时，然后蒸除溶剂。残留物用反相高效液相色谱法纯化。收集产物流分，蒸除溶剂。产量：0.020g化合物16。
实施例B10
化合物50的制备

将中间体26(按照A7.c制备)(0.00125mol)和Burgess′试剂(0.00375mol)的THF(10ml)混合物在室温下搅拌3小时，然后加入CH2Cl2，所得混合物用H2O洗涤。分离有机层，干燥，过滤，蒸除溶剂。所得残留物用硅胶过滤(洗脱液：CH2Cl2/CH3OH 98/2)，然后收集产物流分，蒸除溶剂。残留物在DIPE中搅拌，滤出所需产物，干燥。产量：0.082g终化合物50(m.p.：102.8-102.90C)。
表2和3列出了按照上述样本(Ex.No.)之一制备的式(I)化合物。
表2



表3


1：[α]20D浓度为0.030g/100ml的CHCl3的溶液；
2：[α]20D浓度为0.5g/100ml的CHCl3的溶液；
C.分析部分
LCMS条件1
HPLC梯度洗脱在装有设定在40℃的柱加热器的Waters AllianceHT 2790系统上进行。从柱中流出的液体分别进入Waters 996光电二极管列阵(PDA)检测器和装有以正和负离子化模式操作的电喷射离子源的Waters-Micromass ZQ质谱仪中。反相HPLC在流速为1.6ml/分钟Xterra MS C18柱(3.5μm，4.6×100mm)(12分钟柱)上进行。采用三种流动相(流动相A：95％25mM乙酸铵+5％乙腈；流动相B：乙腈；流动相C：甲醇)进行梯度洗脱，梯度：6.5分钟内从100％A到50％B和50％C，在1分钟内到100％B，100％B持续1分钟，用100％A再平衡1.5分钟。采用10μL的注射体积。
质谱通过采用0.1s的驻留时间在1s内从100扫描到1000获得。毛细管针电压(caapillary needle voltage)为3kV，源温度保持在140℃。氮作为喷雾气体。正离子化模式的锥电压为10V，负离子化模式的锥电压为20V。使用Waters-Micromass MassLynx-Openlynx数据系统获取数据。
快速分析的LCMS条件2
HPLC梯度洗脱通过装有设定在50℃的柱加热器的WatersAlliance 2690系统上进行。从柱中流出的液体分别进入Waters 996光电二极管列阵(PDA)检测器和装有以正和负离子化模式操作的电喷射离子源的Waters-Micromass ZQ质谱仪中。反相HPLC在流速为3ml/min的Xterra MS C18柱(2.5μm，4.6×20mm)上进行。采用三种流动相(流动相A 95％25mM乙酸铵+5％乙腈；流动相B：乙腈；流动相C：甲醇)进行梯度洗脱，梯度：0.9分钟内从100％A到50％B和50％C，在0.37分钟内到100％B，100％B持续0.18分钟，用100％A再平衡0.2分钟。采用2μL的注射体积。
质谱通过采用0.1s的驻留时间在1s内从100扫描到1000获得。毛细管指针电压(capillary needle voltage)为3kV，源温度保持在140℃。氮作为喷雾气体。正离子化模式的锥电压为10V，负离子化模式的锥电压为20V。使用Waters-Micromass MassLynx-Openlynx数据系统获取数据。
表4：LCMS母峰([M+]定义化合物的质量)和保留时间(分钟)  化合物编号  [MH+]  保留时间  LCMS条件  31  421  6.24  1  6  427  6.24  1  27  427  5.02  1  5  488  6.35  1  9  413  4.82  1  11  473  5.45  1  4  397  6.54  1  19  364*  5.54  1  17  370*  6.20  1  3  433  4.76  1  24  443  5.34  1  40  441  5.12  1  35  473  5.91  1  1  503  5.65  1  20  364*  4.57  1  18  367  5.24  1  25  412  5.60  1  2  399*  5.51  1  21  394  4.81  1  10  475  4.40  1  8  377(-)  5.34  1  7  378  5.59  1  38  410  4.95  1  15  393  5.61  1  45  396  5.74  1  47  378  3.57  1  46  514  6.62  1  16  437  5.33  1  51  422  1.02  2

[M+]定义化合物的质量
*相应碱的质量
D.药理学实例
人类THP-1细胞中MCP-1诱导的钙流量的抑制
在某些细胞系中MCP-1与CCR2受体的结合诱导快速和短暂的细胞内Ca2+(第二信使)释放(Charo等，PNAS 1994)。游离Ca2+水平可用Ca2+敏感染料测定。当CCR2受体被CCR2受体拮抗剂阻断时，MCP-1诱导的Ca2+释放被抑制。
人类THP-1细胞(单核细胞系，ATCC TIB-202)培养在加有10％胎牛血清(FCS)、1％L-谷氨酸、青霉素(50U/ml)和链霉素(50μg/ml)(完全GIBCO BRL，Gent)的RPMI 1640培养基中。离心后，用Ca2+敏感荧光染料Fluo-3AM(Molecular Probes，Leiden，Netherlands)装载细胞30分钟(在包含4μM Fluo-3AM、20mM HEPES、0.1％牛血清白蛋白(BSA)和5mM丙磺舒的RPMI培养基中为2×106细胞/ml)。用3倍缓冲液(5mM HEPES，140mM NaCl，1mM MgCl2，5mM KCl，10mM葡萄糖，2.5mM丙磺舒，1.25mM CaCl2，0.1％BSA；在此缓冲液中完成所有进一步孵育)洗涤除去过量染料。细胞以150000细胞/孔置于黑壁96-孔板(Costar，Cambridge，MA)，离心沉降(1分钟)。用待测化合物预孵育细胞20分钟。然后，加入10-7M hMCP-1(Bachem，Bubendorf，Switserland)。细胞内游离Ca2+浓度的变化用荧光图像读板器(FLIPR，Molecular Devices，Munchen，Germany)测定。从加入MCP-1前10秒钟开始每秒记录一次荧光，直到加入后2分钟(第一分钟：以一秒间隔记录60次，第二分钟以3秒间隔记录20次)。在该时间框中获得的最大荧光用于进一步计算。
表5报导了待测式(I)化合物进行上述试验所获得的pIC50值。pIC50定义为-logIC50，其中IC50是待测试化合物抑制50％特异性MCP-1诱导Ca2+流的摩尔浓度。
表5  化合物编号  pIC50  31  7.12  24  7.14  6  7.26  40  7.36  36  7.4  51  7.4  9  7.45  27  7.48  45  7.5  16  7.5  49  7.6  32  7.6  34  7.6  28  7.8  25  7.88  48  7.9  33  7.9  7  7.93  26  8.1  43/53  8.1

放射性配基结合试验
125I-MCP-1结合试验在96-孔板上进行，每个孔中有40μg蛋白质。将化合物在DMSO中溶解并稀释至100X。在结合缓冲液(10％DSMO)中制备10X浓度范围的化合物。包含下列成分的竞争结合测定总体积为250μl∶25μl适当化合物的稀释液(终浓度为1％DMSO)，溶于结合缓冲液的得自CCR2B-转染的CHO细胞的200μl细胞膜和25μl 125I-MCP-I(Bolton和Hunter标记的，Amersham，比活＝2000Ci/mmol，0.15nM最终)。结合缓冲液由25mM HEPES、5mM MgCl2、1mM CaCl2、0.5％不含蛋白酶的牛血清白蛋白(protease-free bovineserum albumin)组成，pH 7.4。在25℃孵育90分钟后，用在0.5％聚乙烯亚胺(polyethylenimine)中预浸渍的GF/B滤器上采集细胞膜，然后用包含25mM HEPES、5mM MgCl2、1mM CaCl2、5mM NaCl、pH 7.4的缓冲液洗涤。用液体闪烁计数确定滤器结合放射性。计算EC50值(μM)和Ki值(μM)。EC50值表示受试化合物与MCP-1竞争特异性结合位点的一半时的浓度；Ki值表示平衡解离常数，即在没有放射性配基或其它竞争物时受试化合物与结合位点的一半结合达到平衡浓度。使用Graphpad Prism中的非线性回归计算EC50值和Ki值。Prism使用Cheng和Prusoff方程式(Biochem.Pharmacol.1973，22：3099-3108)计算Ki或竞争药物对受体的亲和力。低Ki表示受体化合物对受体的高度亲和力。

其中Kd表示放射性配基对受体的亲和力，即在没有其它竞争物存在时，放射性配基与结合位点的一半结合达到平衡时的浓度。
表6列出了上述对式(I)化合物的试验得出的Ki值(μM)。
表6：  化合物编号  Ki值  13  0.30  15  0.35  26  0.05  28  0.01  31  0.07  36  0.07  43/53  0.03

趋化反应
本发明化合物的CCR2拮抗活性还可通过检测在趋化因子如MCP-1的存在下化合物对细胞的趋化反应效果来确定。
采用Ficoll-Paque梯度离心法(Amersham Biosciences)分离人肝素化外周血单核细胞(PBMC)。采用具有5-μm孔径的聚碳酸酯(polycarbonate)(PVP-free)滤膜的一次性(disposable)96-孔趋化房(chemotaxis chambers)(ChemoTx，Neuro Probe)来进行趋化反应的测定。单核细胞在37℃下被5μg/ml钙黄绿素-AM(分子探针，Eugene，OR)荧光标记30分钟。将被标记的细胞洗涤两次，以5×106细胞/ml再悬浮于添加有0.2％牛血清白蛋白的Hanks′平衡盐溶液(Gibco BRL)中。随后，将细胞与连续稀释的化合物的DMSO(二甲亚砜)溶液(终DMSO浓度为0.2％)在室温下预孵育10分钟。在趋化房的底部孔装入28μl含有30ng/ml重组hMCP-1(R&D)或只含有缓冲液的介质。在滤器(20μl)的上部分一式三份加入预处理的细胞(100.000细胞)，在37℃下在包含5％CO2的潮湿空气中孵育。孵育105分钟后，用纸巾轻轻擦拭滤器从滤器顶部除去未迁移的细胞。用荧光分析仪(λ激发光＝485nm；λ发射光＝538nm)测定迁移细胞。趋化反应可用趋化指数(C.I.)表示，为MCP-1存在下迁移细胞的均值与无趋化因子存在下迁移细胞的均值的比率。用下式计算抑制百分率：

关于F样品，荧光细胞与10、1、0.1、0.01或0.001μM的化合物预孵育，在底部孔中向30ng/ml的MCP-1迁移；FMCP-1，与缓冲液-0.2％DMSO预孵育并向30ng/ml的MCP-1迁移的细胞的荧光；F缓冲液，与缓冲液-0.2％DMSO预孵育并在底部孔中自发向缓冲液迁移的细胞的荧光。表7列出了式(I)化合物在上述试验中获得的IC50值(μM)。测定进行一式三份，并重复2-7次。
表7：  化合物编号  IC50(μM)  23  0.024  53  0.108  31  0.214  36  0.244  28  0.367  51  0.474  15  0.798

用作CCR2受体拮抗剂的巯基咪唑.pdf_第1页
第1页 / 共93页
用作CCR2受体拮抗剂的巯基咪唑.pdf_第2页
第2页 / 共93页
用作CCR2受体拮抗剂的巯基咪唑.pdf_第3页
第3页 / 共93页
点击查看更多>>
资源描述

《用作CCR2受体拮抗剂的巯基咪唑.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《用作CCR2受体拮抗剂的巯基咪唑.pdf（93页珍藏版）》请在专利查询网上搜索。

本发明涉及式(I)的化合物，其N氧化物、药学可接受加成盐、季胺、多晶型或立体化学异构形式，其中R1表示氢、C16烷基、C37环烷基、C16烷氧基C16烷基、二(C16烷基)氨基C16烷基、芳基或杂芳基；每个R2独立表示卤素、C16烷基、C16烷氧基、C16烷硫基、多卤代C16烷基、多卤代C16烷氧基、氰基、氨基羰基、氨基、单或二(C14烷基)氨基、硝基、芳基或芳氧基；R3表示氢、氰基、任选取代的C。

展开阅读全文
相关资源
猜你喜欢
相关搜索

当前位置：首页 > 化学；冶金 > 有机化学〔2〕


copyright@ 2017-2020 zhuanlichaxun.net网站版权所有
经营许可证编号:粤ICP备2021068784号-1