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1、10申请公布号CN104293713A43申请公布日20150121CN104293713A21申请号201410521271122申请日20140930C12N1/20200601C12R1/44520060171申请人青岛康合伟业商贸有限公司地址266000山东省青岛市市南区南京路167号72发明人王玉静刘永祥74专利代理机构北京市百伦律师事务所11433代理人姜莹54发明名称一种甘露醇卵黄培养基及其应用57摘要本发明为微生物领域，特别涉及一种甘露醇卵黄培养基，所述培养基的组分包括201G/L75氯化钠肉汤、80G/LD甘露醇、0032G/L酚红、05G/L磷酸二氢钾、652G/L卵黄乳液。
2、，PH值为7276；所述75氯化钠肉汤为每升75氯化钠肉汤中含有胰蛋白胨100G、牛肉粉50G、氯化钠750G、磷酸氢二钾20G。本发明培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；菌生长迅速，变异率低；便于观察，分析。51INTCL权利要求书1页说明书2页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书2页10申请公布号CN104293713ACN104293713A1/1页21一种甘露醇卵黄培养基，其特征在于所述培养基的组分包括201G/L75氯化钠肉汤、80G/LD甘露醇、0032G/L酚红、05G/L磷酸二氢钾、652G/L卵黄乳液，PH值为7276。2根据权。
3、利要求1所述的甘露醇卵黄培养基，其特征在于所述75氯化钠肉汤为每升75氯化钠肉汤中含有胰蛋白胨100G、牛肉粉50G、氯化钠750G、磷酸氢二钾20G。3一种根据权利要求1所述的甘露醇卵黄培养基的应用，其特征在于用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。权利要求书CN104293713A1/2页3一种甘露醇卵黄培养基及其应用技术领域0001本发明为微生物领域，特别涉及一种甘露醇卵黄培养基及其应用。背景技术0002金黄色葡萄球菌，也称“金葡菌”，细胞壁含90的肽聚糖和10的磷壁酸。其肽聚糖的网状结构比革兰氏阴性菌致密，染色时结晶紫附着后不被酒精脱色故而呈现紫色，相反，阴性菌的细胞壁肽聚糖层薄、交联度差。
4、，脂类含量高，所以紫色复合物被酒精冲掉然后附着了沙黄的红色。金黄色葡萄球菌与青霉素的发现有很大的渊源。当年弗莱明就是在他的金黄色葡萄球菌的培养皿中发现有些球菌被杀死了，于是发现了青霉素。而研究也表明青霉素只对以金黄色葡萄球菌为代表的革兰氏阳性菌作用明显。这也是由肽聚糖层的厚度和结构造成的。新出现的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，被称作超级细菌，几乎能抵抗人类所有的药物，但是万古霉素可以对付它。典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径08M左右，显微镜下排列成葡萄串状。0003金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长。
5、温度37，最适生长PH74,干燥环境下可存活数周。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径0510MM。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在1015NACL肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物、青霉素、红霉素、土霉素、新霉素等抗生素敏感，但易产生耐药性，原因是由于这些菌株产生青霉素酶等。对碱性染料敏感，十万分之一的龙胆紫液即可抑制生长。0004目前还不能完全从生化反应的基本原理来推断和计算出适合某一菌种的培养基配方，只。
6、能用生物化学、细胞生物学、微生物学等的基本理论，参照前人所使用的较适合某一类菌种的经验配方，再结合所用菌种和产品的特性，采用摇瓶、玻璃罐等小型发酵设备，按照一定的实验设计和实验方法选择出较为适合的培养基。0005培养基设计的基本步骤是0006根据前人的经验和培养基成分确定时一些必须考虑的问题，初步确定可能的培养基成分0007通过单因子实验最终确定出最为适宜的培养基成分0008当培养基成分确定后，剩下的问题就是各成分最适的浓度，由于培养基成分很多，为减少实验次数常采用一些合理的实验设计方法。这些实验往往基于多因子实验，包含均匀设计、正交实验设计、响应面分析等。发明内容0009本发明克服现有技术中。
7、的不足，提供一种甘露醇卵黄培养基及其应用。0010本发明运用生物化学，微生物学及无机、有机、分析化学和荧光技术的原理，对不说明书CN104293713A2/2页4同的碳源、氮源、无机盐类、维生素、生长促进剂等诸类营养组分的组合进行筛选，对培养基的PH值、离子强度、氧化还原电势、表面张力、气体环境等物化因子进行了比较，研究出了本发明的培养基。0011本发明所采用的技术方案为0012一种甘露醇卵黄培养基，所述培养基的组分包括201G/L75氯化钠肉汤、80G/LD甘露醇、0032G/L酚红、05G/L磷酸二氢钾、652G/L卵黄乳液，PH值为7276；0013在以上方案的基础上，所述75氯化钠肉汤。
8、为每升75氯化钠肉汤中含有胰蛋白胨100G、牛肉粉50G、氯化钠750G、磷酸氢二钾20G。0014本发明还公开了所述的甘露醇卵黄培养基的应用，用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。0015蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子；D甘露醇为可发酵糖类；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；酚红为PH指示剂。0016称取本品1125G，溶解于1000ML蒸馏水中，煮沸1分钟,121高压灭菌15分钟，冷却至4550时，无菌操作加入卵黄乳液3，摇匀，倾入无菌平皿。0017本发明的有益效果00181、培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；00192、菌生长迅速，变异率低；0020。
9、3、便于观察，分析。具体实施方式0021实施例10022一种甘露醇卵黄培养基，所述培养基的组分包括201G/L75氯化钠肉汤、80G/LD甘露醇、0032G/L酚红、05G/L磷酸二氢钾、652G/L卵黄乳液，PH值为7276。0023所述75氯化钠肉汤为每升75氯化钠肉汤中含有胰蛋白胨100G、牛肉粉50G、氯化钠750G、磷酸氢二钾20G。0024蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子；D甘露醇为可发酵糖类；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；酚红为PH指示剂。0025称取本品1125G，溶解于1000ML蒸馏水中，煮沸1分钟,121高压灭菌15分钟，冷却至4550时，无菌操作加入卵黄乳液3，摇匀，倾入无菌平皿。0026在361培养1824小时0027质控菌株生长情况其它特征金黄色葡萄球菌生长良好菌落周围产生溶血环大肠埃希氏菌生长良好溶血乙型溶血性链球菌生长良好菌落周围产生溶血环肺炎链球菌生长良好菌落周围产生溶血环说明书CN104293713A。