一种从木瓜中提取生物蛋白酶的方法.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201410264506.3

申请日:

2014.06.16

公开号:

CN104087569A

公开日:

2014.10.08

当前法律状态:

撤回

有效性:

无权

法律详情:

发明专利申请公布后的视为撤回IPC(主分类):C12N 9/50申请公布日:20141008|||实质审查的生效IPC(主分类):C12N 9/50申请日:20140616|||公开

IPC分类号:

C12N9/50

主分类号:

C12N9/50

申请人:

张丽

发明人:

张丽

地址:

255314 山东省淄博市张店联通路西首淄博职业学院西校区护理学院

优先权:

专利代理机构:

代理人:

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内容摘要

本发明公开了一种从木瓜中提取生物蛋白酶的方法,其具体步骤为:(1)挑选优质的番木瓜,将之洗净、去皮,然后采用榨汁设备采集番木瓜的纯浆液。(2)将采集的番木瓜浆液用过滤设备将之过滤。(3)将过滤之后的滤液去杂质,并放入干燥设备内进行干燥处理而得粗酶制品。(4)将粗酶制品加适量半胱氨酸,然后放入研磨机进行研磨。(5)将研磨后所得混合液调PH后进行过滤。(6)将所得滤液放入硫酸铵和氯化钠进行三次盐析。(7)将盐析无放入低温半胱氨酸溶液中进行结晶(8)结晶体通过重结晶而得生物蛋白酶。由于采用了研磨、盐析、结晶等精细方法,所得生物蛋白酶的纯度可大大提高,能完全适用于工业以及医学领域。

权利要求书

1.  一种从木瓜中提取生物蛋白酶的方法,其特征在于,其具体步骤为:
(1)挑选优质的番木瓜,将之洗净、去皮,然后采用榨汁设备采集番木瓜的纯浆液;
(2)将采集的番木瓜浆液用过滤设备将之过滤;
(3)将过滤之后的滤液去杂质,并放入干燥设备内进行干燥处理而得粗酶制品;
(4)将粗酶制品加适量半胱氨酸,然后放入研磨机进行研磨;
(5)将研磨后所得混合液调PH后进行过滤;
(6)将所得滤液放入硫酸铵和氯化钠进行三次盐析;
(7)将盐析无放入低温半胱氨酸溶液中进行结晶;
(8)结晶体通过重结晶而得生物蛋白酶。

说明书

一种从木瓜中提取生物蛋白酶的方法
技术领域
本发明涉及一种生物蛋白的提取方法,尤其涉及一种从水果中提取生物蛋白酶的方法,属于基础医学生物领域。
背景技术
木瓜生物蛋白酶广泛存在于木瓜、尤其是番木瓜的茎叶和果实中,其具有很强的蛋白水解催化活性,可被广泛运用于肉类嫩化、啤酒澄清、蚕茧脱胶等方面,同时在医学方面主要用于治疗消化不良、各种炎症和水肿,防止腹膜粘连等。由此,越来越多的厂家开始从事从木瓜中提取生物蛋白酶的产业,但目前从番木瓜中提取的生物蛋白酶的纯度不是特别高,究其原因是相关提取的工艺相对落后,近年来,由于木瓜生物蛋白酶在工业和医学上的应用日趋广泛,对其纯度要求要更高,因此,有必要对提取纯化工艺作进一步研究。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是,提供一种从番木瓜中提取高纯度生物蛋白酶的方法。
1、为解决上述技术问题,本发明提供了一种从木瓜中提取生物蛋白酶的方法,其具体步骤为:
(1)挑选优质的番木瓜,将之洗净、去皮,然后采用榨汁设备采集番木瓜的纯浆液。
(2)将采集的番木瓜浆液用过滤设备将之过滤。
(3)将过滤之后的滤液去杂质,并放入干燥设备内进行干燥处理而得粗酶制品。
(4)将粗酶制品加适量半胱氨酸,然后放入研磨机进行研磨。
(5)将研磨后所得混合液调PH后进行过滤。
(6)将所得滤液放入硫酸铵和氯化钠进行三次盐析。
(7)将盐析无放入低温半胱氨酸溶液中进行结晶
(8)结晶体通过重结晶而得生物蛋白酶。
采用上述步骤后,由于采用了研磨、盐析、结晶等精细方法,所得生物蛋白酶的纯度可大大提高,能完全适用于工业以及医学领域。
具体实施方式
下面对本发明作进一步详细地说明。
本发明提供了一种从木瓜中提取生物蛋白酶的方法,其具体步骤为:
(1)挑选优质的番木瓜,应挑选绿色的未成熟的果实,这样其浆液会更多,将之洗净、去皮,然后采用榨汁设备采集番木瓜的纯浆液。
(2)将采集的番木瓜浆液用过滤设备将之过滤。在此步骤中,最好要加入一些保护剂,如亚硫酸氢钠,这样能有效保护木瓜生物蛋白酶中的活性巯基。
(3)将过滤之后的滤液去杂质,并放入干燥设备内进行干燥处理而得粗酶制品。
(4)将粗酶制品加适量半胱氨酸,然后放入研磨机进行研磨。
(5)将研磨后所得混合液将其PH值调到9.0后进行过滤。
(6)将所得滤液放入硫酸铵和氯化钠进行三次盐析。
(7)将盐析无放入低温半胱氨酸溶液中,在2-4℃的温度下进行结晶。
(8)结晶体通过重结晶而得生物蛋白酶。

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资源描述

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1、10申请公布号CN104087569A43申请公布日20141008CN104087569A21申请号201410264506322申请日20140616C12N9/5020060171申请人张丽地址255314山东省淄博市张店联通路西首淄博职业学院西校区护理学院72发明人张丽54发明名称一种从木瓜中提取生物蛋白酶的方法57摘要本发明公开了一种从木瓜中提取生物蛋白酶的方法,其具体步骤为1挑选优质的番木瓜,将之洗净、去皮,然后采用榨汁设备采集番木瓜的纯浆液。2将采集的番木瓜浆液用过滤设备将之过滤。3将过滤之后的滤液去杂质,并放入干燥设备内进行干燥处理而得粗酶制品。4将粗酶制品加适量半胱氨酸,然后。

2、放入研磨机进行研磨。5将研磨后所得混合液调PH后进行过滤。6将所得滤液放入硫酸铵和氯化钠进行三次盐析。7将盐析无放入低温半胱氨酸溶液中进行结晶8结晶体通过重结晶而得生物蛋白酶。由于采用了研磨、盐析、结晶等精细方法,所得生物蛋白酶的纯度可大大提高,能完全适用于工业以及医学领域。51INTCL权利要求书1页说明书2页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书2页10申请公布号CN104087569ACN104087569A1/1页21一种从木瓜中提取生物蛋白酶的方法,其特征在于,其具体步骤为1挑选优质的番木瓜,将之洗净、去皮,然后采用榨汁设备采集番木瓜的纯浆液;2将采集的。

3、番木瓜浆液用过滤设备将之过滤;3将过滤之后的滤液去杂质,并放入干燥设备内进行干燥处理而得粗酶制品;4将粗酶制品加适量半胱氨酸,然后放入研磨机进行研磨;5将研磨后所得混合液调PH后进行过滤;6将所得滤液放入硫酸铵和氯化钠进行三次盐析;7将盐析无放入低温半胱氨酸溶液中进行结晶;8结晶体通过重结晶而得生物蛋白酶。权利要求书CN104087569A1/2页3一种从木瓜中提取生物蛋白酶的方法技术领域0001本发明涉及一种生物蛋白的提取方法,尤其涉及一种从水果中提取生物蛋白酶的方法,属于基础医学生物领域。背景技术0002木瓜生物蛋白酶广泛存在于木瓜、尤其是番木瓜的茎叶和果实中,其具有很强的蛋白水解催化活性。

4、,可被广泛运用于肉类嫩化、啤酒澄清、蚕茧脱胶等方面,同时在医学方面主要用于治疗消化不良、各种炎症和水肿,防止腹膜粘连等。由此,越来越多的厂家开始从事从木瓜中提取生物蛋白酶的产业,但目前从番木瓜中提取的生物蛋白酶的纯度不是特别高,究其原因是相关提取的工艺相对落后,近年来,由于木瓜生物蛋白酶在工业和医学上的应用日趋广泛,对其纯度要求要更高,因此,有必要对提取纯化工艺作进一步研究。发明内容0003本发明所要解决的技术问题是,提供一种从番木瓜中提取高纯度生物蛋白酶的方法。00041、为解决上述技术问题,本发明提供了一种从木瓜中提取生物蛋白酶的方法,其具体步骤为00051挑选优质的番木瓜,将之洗净、去皮。

5、,然后采用榨汁设备采集番木瓜的纯浆液。00062将采集的番木瓜浆液用过滤设备将之过滤。00073将过滤之后的滤液去杂质,并放入干燥设备内进行干燥处理而得粗酶制品。00084将粗酶制品加适量半胱氨酸,然后放入研磨机进行研磨。00095将研磨后所得混合液调PH后进行过滤。00106将所得滤液放入硫酸铵和氯化钠进行三次盐析。00117将盐析无放入低温半胱氨酸溶液中进行结晶00128结晶体通过重结晶而得生物蛋白酶。0013采用上述步骤后,由于采用了研磨、盐析、结晶等精细方法,所得生物蛋白酶的纯度可大大提高,能完全适用于工业以及医学领域。具体实施方式0014下面对本发明作进一步详细地说明。0015本发明。

6、提供了一种从木瓜中提取生物蛋白酶的方法,其具体步骤为00161挑选优质的番木瓜,应挑选绿色的未成熟的果实,这样其浆液会更多,将之洗净、去皮,然后采用榨汁设备采集番木瓜的纯浆液。00172将采集的番木瓜浆液用过滤设备将之过滤。在此步骤中,最好要加入一些保护剂,如亚硫酸氢钠,这样能有效保护木瓜生物蛋白酶中的活性巯基。00183将过滤之后的滤液去杂质,并放入干燥设备内进行干燥处理而得粗酶制品。说明书CN104087569A2/2页400194将粗酶制品加适量半胱氨酸,然后放入研磨机进行研磨。00205将研磨后所得混合液将其PH值调到90后进行过滤。00216将所得滤液放入硫酸铵和氯化钠进行三次盐析。00227将盐析无放入低温半胱氨酸溶液中,在24的温度下进行结晶。00238结晶体通过重结晶而得生物蛋白酶。说明书CN104087569A。

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