一种以石斛纤维为基质的羊肚菌菌丝体的制备方法.pdf

本发明提供了一种铁皮石斛羊肚菌菌丝体的制备方法。该制备方法采用固体培养基进行培养，该固体培养基各配方组分最适质量分数为：铁皮石斛经粉碎提取浸膏后的纤维素渣滓70％-90％、玉米5％-20％、加入0.5％-1％亚硒酸纳和0.5％-1％二氧化锗、磷酸二氢钾0.01％-0.2％、含水量50％-60％、pH值自然。本发明固体培养基中铁皮石斛纤维素具有蓬松多孔隙的特点，有利于羊肚菌气生菌丝的生长，提高了羊肚菌菌丝体的产出率，培养基中富含无机硒、锗等元素提高了羊肚菌菌丝体中有机锗、有机硒的含量。本发明培养基，整体可以食用，可直接用于保健品和食品原料，发明工艺成熟稳定，羊肚菌菌丝体产量高，生产周期短，大大降低了生产的成本。

1.  一种以石斛纤维为基质的羊肚菌菌丝体的制备方法，其特征在于，所述石斛羊肚菌菌丝体固体培养基各配方组分最适质量分数为：铁皮石斛经粉碎提取浸膏后的纤维素渣滓70％-90％、玉米5％-20％、加入0.5％-1％亚硒酸纳、0.5％-1％二氧化锗、磷酸二氢钾0.01％-0.2％、含水量50％-60％、PH值自然。

2.  一种以石斛纤维为基质的羊肚菌菌丝体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取玉米，将玉米粉碎成米粒大小淘洗干净后置于清水中浸泡，然后滤心水，放入蒸锅内隔水蒸至过白心。
(2)取粉碎成的铁皮石斛纤维素和步骤(1)中物料充分混匀。
(3)取磷酸二氢钾、亚硒酸纳和二氧化锗，加入适量的比例的纯净水在温水下溶解，调节培养基的含水量。倒入步骤(2)中混均的物料，充分搅拌均匀。
(4)步骤(3)中的培养基，装瓶后进行杀菌，自然冷却后取出接种羊肚菌菌种。
(5)培养条件的优化：在培养基固定的前提下，羊肚菌菌丝生长主要与温度、培养时间、湿度这个三个条件有关。为了得到更佳适宜铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝体生长条件，设计L₉(3⁴)正交试验表。每个因素设3个添加量水平。最终优选出最佳的适宜石斛纤维素羊肚菌菌丝的生长条件。
(6)在优化出的培养条件下培养。长满菌丝后即成铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝体。

3.  如权利要求2一种铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝体的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中玉米粒要求，无霉变、无坏粒的优质玉米。粉碎后浸泡时间为24个小时。

4.  如权利要求2一种铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝体的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中铁皮石斛纤维素，再进一步粉碎，使其蓬松便于吸水。

5.  如权利要求2一种铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝体的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)磷酸二氢钾、亚硒酸纳和二氧化锗用温水45℃溶解，用水进行稀释便于搅拌均匀，控制湿度。

6.  如权利要求2一种铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝体的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)杀菌的方法采用高压蒸汽灭菌，其条件为：在0.14Mpa下，126℃下维持2h。自然冷却是指冷却至30℃以下，进行接种

7.  如权利要求2一种铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝体的制备方法，其特征在于，所述步骤(5)进行培养条件的优选，得到最佳的培养条件为：温度为24℃，湿度55％，培养时间为20天时候，为菌丝制备的最优条件。

8.  如权利要求2一种铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝体的制备方法，其特征在于，所述步骤(6)培养的条件应该在黑暗条件下进行培养，所得菌丝体可以直接用于保健品和食品原料，无需另外加工。

一种以石斛纤维为基质的羊肚菌菌丝体的制备方法
技术领域
本发明属于生物工程技术领域。具体说涉及一种以石斛纤维素为基质的羊肚菌菌丝体的方法。
背景技术
铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)又称铁吊兰，为兰科石斛属药用植物，其干品为铁皮枫斗。铁皮石斛是一种名贵濒危珍稀中草药，具有除弊下气，补五脏劳赢瘦，强阴滋精之功效，在临床及保健品中被广泛使用。铁皮石斛浸膏的制备过程中，铁皮石斛在水提后的药渣一般都被扔掉，其主要为纤维素，含有少量一些未被提取的活性成分，可以食用。这大大浪费了这一濒危珍稀药材的利用率。
羊肚菌(morechella.spp)是子囊菌种著名的食、药两用珍稀真菌资源，分类上属于子囊菌亚门、盘菌纲、盘菌目、马鞍菌科、羊肚菌属(morechella)，其子实体和菌丝体因富含鲜味物质而出名。羊肚菌的菌丝体含有丰富的氨基酸及其它矿物质营养元素，特别是人体必需氨基酸含量较高，其中决定鲜味和营养功能的谷氨酸、赖氨酸、天冬氨酸的含量尤为突出，还含有胱氨酸、赖氨酸、精氨酸可促进儿童生长与智力，支链氨基酸有利于多种肝脏病的防治。羊肚菌发酵液及菌丝体动物实验表明，其菌丝体种含有的羊肚菌菌多糖、硒元素、有机锗在提高动物免疫、抗肿瘤过程中起着重要的作用。
羊肚菌的人工栽培小试偶有成功的报道，但栽培试验的重复性差，至今尚不能进行商业化栽培，市场上的羊肚菌均来自野生。分离、纯化，直接应用于羊肚菌的栽培或菌丝体生产。羊肚菌孢子萌发形成菌丝，羊肚菌菌丝不断地分解，吸收养份，在合适的光照、空气、温度等其它条件配合时就形成了羊肚菌实体。羊肚菌子实体所需要的构成物质，有一半以上的营养物质来源于菌丝体中的贮存养份，所以菌丝体的营养含量一般上会比子实体高出许多倍。
采用成熟的真菌培养工艺技术，大量生产菌丝体，开发野生羊肚菌菌丝体产品，是解决羊肚菌供需矛盾的最经济有效的途径之一。鉴于上述因素，开发一种可食、药两用的石斛纤维素羊肚菌菌丝体，具有重要意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种可药、食两用的铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝体的制作方法。
本发明为了达到上述目的，是通过这样的技术方案来实现的。提供一种铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝体的固体培养方法。该固体培养基各配方组分最适质量分数为：
铁皮石斛经超细粉碎提取浸膏后的纤维素渣滓70％-90％、玉米5％-20％、加入0.5％-1％亚硒酸钠、0.5％-1％二氧化锗、磷酸二氢钾0.01％-0.2％、含水量50％-60％、PH值自然。
本发明石斛羊肚菌菌丝体的制备方法由以下步骤实现：
(1)取玉米，将玉米粉碎成米粒大小淘洗干净后置于清水中浸泡，然后滤心水，放入蒸锅内隔水蒸至过白心。
(2)取铁皮石斛提取后药渣的下脚料和步骤(1)中物料充分混匀。
(3)取磷酸二氢钾、亚硒酸纳、二氧化锗，加入适量的比例的纯净水，调节培养基的含水量。倒入步骤(2)中混均的物料，充分搅拌均匀。
(4)步骤(3)中的培养基，装瓶后进行杀菌，自然冷却后取出接种羊肚菌菌种。
(5)培养条件的优化：在培养基固定的前提下，羊肚菌菌丝生长主要与温度、培养时间、湿度这个三个条件有关。为了得到更佳适宜铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝体生长条件，设计L₉(3⁴)正交试验表。每个因素设3个添加量水平。最终优选出最佳的适宜石斛纤维素羊肚菌菌丝的生长条件。
(6)在优化出的培养条件下培养。长满菌丝后即成铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝体。
优选地，所述步骤(1)中玉米粒要求，无霉变、无坏粒的优质玉米。粉碎后浸泡时间为24个小时。
优选地，所述步骤(2)铁皮石斛加工后的药渣的下脚料，干燥后使其蓬松。
优选地，所述步骤(3)磷酸二氢钾、亚硒酸纳和二氧化锗用45℃温水溶解，用水进行稀释便于搅拌均匀，控制湿度。
优选地，所述步骤(4)杀菌的方法采用高压蒸汽灭菌，其条件为：在0.14Mpa下，126℃下维持2h。自然冷却是指冷却至30℃以下，进行接种
优选地，所述步骤(5)进行培养条件的优选，得到最佳的培养条件为：温度为24℃，湿度55％，培养时间为20天时候，为菌丝制备的最优条件。
优选地，所述步骤(6)培养的条件应该在黑暗条件下进行培养。
本发明的优势：(1)本发明固体培养基中铁皮石斛纤维素具有蓬松多孔隙的特点，有利于羊肚菌气生菌丝的生长，提高了羊肚菌菌丝体的产出率。石斛纤维所具有的滋阴，提高人体免疫力的功效在本产品中亦能够充分体现出来。(2)本发明羊肚菌菌丝体的营养丰富，菌丝体得率高。(3)本发明培养基中富含硒和锗元素，长成后的羊肚菌菌丝体富含有机硒和有机锗，使羊肚菌菌丝体提高人体免疫力和抗肿瘤的作用更加明显。(4)本发明有效成分羊肚菌多糖、鲜味氨基酸、矿物质元素等与天然羊肚菌子实体相当。完全可以作为羊肚菌子实体的替代品。缓解了羊肚菌这一未实现人工栽培的珍稀菌的供需矛盾。并且本发明培养基，整体可以食用。可直接用于食材和保健品原料。(5)本发明工艺成熟，羊肚菌菌丝体产量高，生产周期短，生产工艺简单，大大降低了生产的成本。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明方案，下面结合实施方式对本发明所述的铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝的制备方法作进一步的详细说明。
实施例1
铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝体的制备方法由下述步骤制得：
(1)按配方称量各营养物质
铁皮石斛提取后的干燥药渣(提取后下脚料，一般弃为垃圾)70％、玉米20％、0.5％亚硒酸纳、0.5％二氧化锗磷酸二氢钾0.1％、含水量50％、PH值自然。
(2)取玉米(无霉变，无坏粒的)，将玉米粉碎成米粒大小淘洗干净后置于清水中浸泡，然后滤心水，放入蒸锅内隔水蒸至过白心，沥干水分后捞出。
(3)将辅料磷酸二氢钾、亚硒酸纳和二氧化锗使其在45℃温水中溶解，稀释一定倍数。与玉米粒和纤维素拌匀。
(4)闷1-2个小时(夏季时间不宜过长)待料充分吸足水后装瓶，装料至瓶肩，上紧下松压平料面，擦净瓶口，封口。
(5)装锅灭菌高压灭菌于126℃、压力位0.14Mpa维持2小时出锅，冷却至30℃以下待接种。
(6)将接种后的菌种，与黑室下培养。
上述步骤制备铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝体的方法中，
实施例2
铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝体的制备方法由下述步骤制得：
(1)按配方称量各营养物质
铁皮石斛提取后的干燥药渣(提取后下脚料，一般弃为垃圾)80％、玉米10％、加入1％亚硒酸纳、1％二氧化锗、磷酸二氢钾0.1％、含水量55％、PH值自然。
(2)取玉米(无霉变，无坏粒的)，将玉米粉碎成米粒大小淘洗干净后置于清水中浸泡，然后滤心水，放入蒸锅内隔水蒸至过白心，沥干水分后捞出。
(3)将辅料磷酸二氢钾、亚硒酸纳和二氧化锗使其在45℃温水中充分溶解，稀释一定倍数。与玉米粒和纤维素拌匀。
(4)闷1-2个小时(夏季时间不宜过长)待料充分吸足水后装瓶，装料至瓶肩，上紧下松压平料面，擦净瓶口，封口。
(5)装锅灭菌高压灭菌于126℃、压力位0.14Mpa维持2小时出锅，冷却至30℃以下待接种。
(6)将接种后的菌种，与黑室下培养。
上述步骤制备铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝体的方法中，
实施例3
铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝体的制备方法由下述步骤制得：
(1)按配方称量各营养物质
铁皮石斛提取后的干燥药渣(提取后下脚料，一般弃为垃圾)90％、玉米5％、加入0.5％亚硒酸纳、0.5％二氧化锗、磷酸二氢钾0.2％、含水量60％、PH值自然。
(2)取玉米(无霉变，无坏粒的)，将玉米粉碎成米粒大小淘洗干净后置于清水中浸泡，然后滤心水，放入蒸锅内隔水蒸至过白心，沥干水分后捞出。
(3)将辅料磷酸二氢钾、亚硒酸纳和二氧化锗使其在45℃温水中充分溶解，稀释一定倍数。与玉米粒和纤维素拌匀。
(4)闷1-2个小时(夏季时间不宜过长)待料充分吸足水后装瓶，装料至瓶肩，上紧下松压平料面，擦净瓶口，封口。
(5)装锅灭菌高压灭菌于126℃、压力位0.14Mpa维持2小时出锅，冷却至30℃以下待接种。
(6)将接种后的菌种，与黑室下培养。
铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝培养条件的优化方法如下：
设计L₉(3⁴)正交试验表，3个因素分别为：培养温度(因素A)、培养时间(因素B)、湿度(因素C)，它们的添加量水平分别如下：

从实验结果可知，A₂B₃C₂，菌丝体长势最好，羊肚菌包外多糖含量高。因此铁皮石斛纤维素羊肚菌菌丝体最佳的培养条件为：温度为24℃，培养时间为20天，培养基湿度为55％时。