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ATP- 结合弹夹转运蛋白的调控剂
    本申请是申请号为 200580028055.2(PCT/US 2005/022768)、 申请日为 2005 年 6 月 24 日、 发明名称为 “ATP- 结合弹夹转运蛋白的调控剂” 的中国专利申请的分案申请。
     相关申请的交叉参考
     本 申 请 根 据 35U.S.C.§119 要 求 如 下 专 利 申 请 的 优 先 权 ： 美国临时申请 No.60/582,676， 2004 年 6 月 24 日提交， 题为 “ATP- 结合弹夹转运蛋白的调控剂” ； 美国临 时申请 No.60/630,127， 2004 年 11 月 22 日提交， 题为 “ATP- 结合弹夹转运蛋白的调控剂” ； 美国临时申请 No.60/635,674， 2004 年 12 月 13 日提交， 题为 “ATP- 结合弹夹转运蛋白的调 控剂” ； 美国临时申请 No.60/658,219， 2005 年 3 月 3 日提交， 题为 “ATP- 结合弹夹转运蛋白 的调控剂” ； 和美国临时申请 No.60/661,311， 2005 年 3 月 11 日提交， 题为 “ATP- 结合弹夹 转运蛋白的调控剂” ， 每个上述申请的完整内容引用在此作为参考。
     技术领域
     本发明涉及 ATP- 结合弹夹 (ABC) 转运蛋白或其片段的调控剂、 包括囊性纤维化 跨膜电导调节剂 (CFTR)、 其组合物和与之有关的方法。本发明也涉及使用这类调控剂治疗 ABC 转运蛋白介导的疾病的方法。 背景技术 ABC 转运蛋白是膜转运蛋白家族， 调节多种药理成分、 潜在毒性药物和异生素以及 阴离子的转运。 ABC 转运蛋白是同源性膜蛋白， 它们结合和利用细胞三磷酸腺苷 (ATP) 供它 们的特异性活性。这些转运蛋白中有些被发现是多药耐受性蛋白 ( 象 MDR1-P 糖蛋白或多 药耐受性蛋白 MRP1)， 为恶性癌细胞防御性化学治疗剂。迄今已经鉴别了 48 种 ABC 转运蛋 白， 基于它们的序列同一性和功能分为 7 个家族。
     ABC 转运蛋白在体内扮演多种重要的生理角色， 并且提供对有害环境化合物的防 御。因为如此， 它们代表重要的潜在药物靶， 用于治疗与该转运蛋白缺陷有关的疾病， 防止 药物从靶细胞中转运出去， 和干预其他其中 ABC 转运蛋白活性的调控可能是有益的疾病。
     普遍与疾病有关的一种 ABC 转运蛋白家族成员是 cAMP/ATP- 介导的阴离子通道 CFTR。 CFTR 在多种细胞类型中被表达， 包括吸收性和分泌性上皮细胞， 在那里它调节阴离子 的跨膜流动以及其他离子通道和蛋白质的活性。在上皮细胞中， CFTR 的正常功能发挥是维 持电解质在体内各处转运的关键， 包括呼吸和消化组织。CFTR 由大约 1480 个氨基酸组成， 它们编码由跨膜结构域的串联重复要素所构成的蛋白质， 各自含有六个跨膜螺旋和一个核 苷酸结合结构域。两个跨膜结构域通过大型极性调节性 (R)- 结构域连接， 具有多个调节通 道活性和细胞运输的磷酸化位点。
     编 码 CFTR 的 基 因 已 被 鉴 别 和 测 序 ( 参 见 Gregory， R.J.et al.(1990)Nature 347 ： 382-386 ； Rich， D.P.et al.(1990)Nature347 ： 358-362 ； Riordan， J.R.et al.(1989) Science 245 ： 1066-1073)。这种基因的缺陷引起 CFTR 突变， 导致囊性纤维化 (CF)， 这是人 类最常见的致命性遗传疾病。囊性纤维化影响大约两千五百分之一的美国新生儿。在全部
     美国人口中， 多达一千万人携带有缺陷基因的单一副本， 没有明显的疾病效应。相反， 带有 两个 CF 相关基因副本的个体遭受 CF 的衰弱与致命性效应， 包括慢性肺疾病。
     在囊性纤维化患者中， 在呼吸道上皮中被内源性表达的 CFTR 的突变引起顶端阴 离子分泌减少， 导致离子和体液转运的失衡。所致阴离子转运疾病对肺中粘液蓄积增强和 伴随微生物感染起作用， 最终导致 CF 患者死亡。除了呼吸疾病以外， CF 患者通常患有胃肠 问题和胰腺机能不全， 如果不加治疗则导致死亡。另外， 大多数囊性纤维化男性是不育的， 囊性纤维化女性的生育力降低。与两个 CF 相关基因副本的严重效应相反， 带有单一 CF 相 关基因副本的个体表现对霍乱和腹泻所致脱水的抗性增加——这也许解释了人群内相对 高频率的 CF 基因的原因。
     CF 染色体 CFTR 基因的序列分析已经揭示了多种致病性突变 (Cutting， G.R.et al.(1990)Nature 346 ： 366-369 ； Dean， M.etal.(1990)Cell 61 ： 863 ： 870 ； and Kerem， B-S. et al.(1989)Science 245 ： 1073-1080 ； Kerem， B-S et al.(1990)Proc.Natl.Acad.Sci. USA 87 ： 8447-8451)。 迄 今 已 经 鉴 别 了 1000 种 以 上 致 病 性 CF 基 因 突 变 (http://www. genet.sickkids.on.ca/cftr/)。 最常见的突变是 CFTR 氨基酸序列 508 位苯丙氨酸的缺失， 普遍被称为 ΔF508-CFTR。这种突变发生在大约 70％的囊性纤维化病例中， 与严重的疾病 有关。
     ΔF508-CFTR 中 508 残基的缺失防止初生蛋白正确地折叠。这导致该突变蛋 白不能退出 ER 和运输至质膜。其结果是， 膜中通道数量远远少于表达野生型 CFTR 的细 胞。除了运输减低以外， 突变还导致有缺陷的通道门控。总之， 膜中通道数量减少和有 缺陷的门控引起跨越上皮的阴离子转运减少， 引起有缺陷的离子和体液转运 (Quinton， P.M.(1990)， FASEB J.4 ： 2709-2727)。不过， 研究已经显示， 膜中 ΔF508-CFTR 的数量减少 是功能性的， 尽管少于野生型 CFTR(Dalemanset al.(1991)， Nature Lond.354 ： 526-528 ； Denning et al.， supra ； Pasyk and Foskett(1995)， J.Cell.Biochem.270 ： 12347-50)。除 了 ΔF508-CFTR 以外， 其他导致有缺陷的运输、 合成和 / 或通道门控的致病性 CFTR 突变可 能被增量或减量调节， 以改变阴离子分泌和修改疾病进展和 / 或严重性。
     尽管 CFTR 除了阴离子以外还转运多种分子， 不过显然这种角色 ( 阴离子的转运 ) 代表了跨越上皮转运离子和水的重要机理中的一种要素。其他要素包括上皮 Na+ 通道、 ENaC、 Na+/2Cl-/K+ 共同转运蛋白、 Na+-K+-ATP 酶泵和基底外侧膜 K+ 通道， 它们负责摄取氯化 物进入细胞。
     这些要素一起工作， 经由它们在细胞内的选择性表达和定位实现跨越上皮的定向 转运。借助存在于顶端膜上的 ENaC 与 CFTR 和在细胞基底外侧表面上表达的 Na+-K+-ATP 酶 泵与 Cl- 通道的协调活性， 发生氯化物的吸收。氯化物从腔侧的次级主动转运引起细胞内 氯化物的蓄积， 然后可以被动地经由 Cl- 通道离开细胞， 导致向量转运。Na+/2Cl-/K+ 共同转 运蛋白、 Na+-K+-ATP 酶泵和基底外侧膜 K+ 通道在基底外侧表面上的排列和腔侧上的 CFTR 协 调氯化物经由腔侧上 CFTR 的分泌。因为水可能从不主动转运自己， 它跨越上皮的流动依赖 于由钠和氯的大量流动所生成的微小跨上皮渗透梯度。
     除了囊性纤维化以外， CFTR 活性的调控也可以有益于其他不直接由 CFTR 突变所 导致的疾病， 例如分泌性疾病和其他由 CFTR 介导的蛋白质折叠疾病。这些疾病包括但不限 于慢性阻塞性肺疾病 (COPD)、 干眼病和斯耶格伦氏综合征。COPD 是以气流受限为特征的，它是进行性的， 不是完全可逆的。气流受限是由于粘液分泌过多、 肺气肿和细支气管炎。突 变或野生型 CFTR 的活化剂提供 COPD 常见的粘液分泌过多和粘液纤毛廓清率减低的潜在治 疗。具体而言， 增加跨越 CFTR 的阴离子分泌可以有利于体液转运进入气道表面液体， 以水 化粘液， 优化纤毛周围的体液粘度。这将引起粘液纤毛廓清率增强和与 COPD 有关的症状减 少。干眼病是以泪水产生降低和异常泪膜脂质、 蛋白质与粘蛋白行为为特征的。干眼有很 多原因， 其中一些包括年龄、 Lasik 眼手术、 关节炎、 药物治疗、 化学 / 热灼伤、 变态反应和疾 病， 例如囊性纤维化和斯耶格伦氏综合征。增加经由 CFTR 的阴离子分泌将增强体液从角膜 内皮细胞和眼周围分泌腺体的转运， 以增加角膜的水化作用。这将有助于缓解与干眼病有 关的症状。斯耶格伦氏综合征是一种自身免疫疾病， 其中免疫系统攻击体内各处产生水分 的腺体， 包括眼、 口、 皮肤、 呼吸组织、 肝、 阴道和肠。 症状包括眼、 口和阴道干燥以及肺疾病。 该疾病也与类风湿性关节炎、 系统性狼疮、 系统性硬化和多肌炎 / 皮肤肌炎有关。有缺陷的 蛋白质运输据信会导致该疾病， 治疗选择是有限的。CFTR 活性调控剂可以水化各种受疾病 影响的器官， 帮助改善有关症状。
     正如上文所讨论的， 据信 ΔF508-CFTR 中 508 残基的缺失防止初生蛋白正确地折 叠， 导致这种突变蛋白不能退出 ER 和运输至质膜。其结果是， 存在于质膜的成熟蛋白数量 不足， 上皮组织内氯化物的转运显著减少。事实上， 这种 ABC 转运蛋白被 ER 机构有缺陷的 ER 加工的细胞现象已被显示不仅是 CF 疾病的基础， 而且是广泛的其他孤立性与遗传性疾 病的基础。 ER 机构可能发生故障的两种方式要么是与蛋白质的 ER 输出的偶联丧失， 引起降 解， 要么是这些有缺陷 / 误折叠的蛋白质的 ER 蓄积 [Aridor M， et al.， Nature Med.， 5(7)， pp 745-751(1999) ； Shastry， B.S.， et al.， Neurochem.International， 43， pp1-7(2003) ； Rutishauser， J.， et al.， Swiss Med Wkly， 132， pp 211-222(2002) ； Morello， JP et al.， TIPS， 21， pp.466-469(2000) ； BrossP.， et al.， Human Mut.， 14， pp.186-198(1999)]。与 前一类 ER 故障有关的疾病有囊性纤维化 ( 由误折叠的 ΔF508-CFTR 引起， 正如上文所讨论 的 )、 遗传性肺气肿 ( 由 α1- 抗胰蛋白酶非 Piz 变体引起 )、 遗传性血色素沉着、 凝血 - 纤 维蛋白溶解缺陷 ( 例如 C 蛋白缺陷 )、 1 型遗传性血管性水肿、 脂质加工缺陷 ( 例如家族 性高胆固醇血 )、 1 型乳糜微粒血、 β- 脂蛋白血、 溶酶体贮存疾病 ( 例如 I- 细胞疾病 / 伪 -Hurler)、 粘多糖病 ( 由溶酶体加工酶引起 )、 Sandhof/Tay-Sachs( 由 β- 己糖胺酶引 起 )、 Crigler-Najjar II 型 ( 由 UDP- 葡糖醛基 -sialyc- 转移酶引起 )、 多内分泌病 / 高胰 岛素血、 糖尿病 ( 由胰岛素受体引起 )、 Laron 侏儒 ( 由生长激素受体引起 )、 髓过氧化物酶 缺陷、 原发性甲状旁腺机能减退 ( 由前促甲状旁腺激素引起 )、 黑素瘤 ( 由酪氨酸酶引起 )。 与后一类 ER 故障有关的疾病有聚糖病 (Glycanosis)CDG1 型、 遗传性肺气肿 ( 由 α1- 抗胰 蛋白酶 PiZ 变体引起 )、 先天性甲状腺机能亢进、 成骨不全 ( 由 I、 II、 IV 型前胶原引起 )、 遗传性低纤维蛋白原血 ( 由纤维蛋白原引起 )、 ACT 缺陷 ( 由 α1- 抗凝乳蛋白酶引起 )、 尿 崩症 (DI)、 后叶激素运载蛋白性 DI( 由后叶加压素 /V2- 受体引起 )、 肾原性 DI( 由水通道 蛋白 II 引起 )、 夏 - 马二氏神经性进行性肌肉萎缩综合征 ( 由外周髓磷脂蛋白 22 引起 )、 佩 - 梅二氏病、 神经变性疾病 ( 例如阿尔茨海默氏病 ( 由 βAPP 和早老蛋白引起 )、 帕金森氏 病、 肌萎缩性侧索硬化、 进行性核上性麻痹、 皮克氏病 )、 若干聚谷氨酰胺神经病学障碍 ( 例 如亨廷顿氏病、 I 型脊髓小脑性共济失调、 脊髓与延髓肌肉萎缩、 齿状红核 pallidoluysian 和肌强直性营养不良 ) 以及海绵状脑病 ( 例如遗传性克 - 雅二氏病 ( 由朊病毒蛋白加工缺陷引起 )、 法布里氏病 ( 由溶酶体 α- 半乳糖苷酶 A 引起 ) 和斯 - 施二氏综合征 ( 由 Prp 加 工缺陷引起 ))。
     除了 CFTR 活性的增量调节以外， 减少 CFTR 分泌阴离子也可以有益于分泌性腹泻 的治疗， 其中作为促分泌性活化的氯化物转运的结果， 上皮水转运急骤地增加。 该机理牵涉 cAMP 的升高和 CFTR 的刺激。
     尽管腹泻有大量原因， 不过由过量氯化物转运所致腹泻性疾病的主要后果是共同 的， 包括脱水、 酸中毒、 生长减退和死亡。
     急性与慢性腹泻在世界很多地区代表了主要的医学问题。 腹泻在不到五岁的儿童 中既是营养不良的显著因素， 又是死亡的主导原因 (5,000,000 例死亡 / 年 )。
     分泌性腹泻也是获得性免疫缺陷综合征 (AIDS) 和慢性炎性肠疾病 (IBD) 患者中 的危险病症。每年从工业化国家到发展中国家旅行的人中有一千六百万人患上腹泻， 腹泻 病例的严重性和数量因旅行的国家和地区而异。
     牲畜和宠物、 例如牛、 猪、 马、 绵羊、 山羊、 猫和狗的腹泻也称为家畜腹泻病， 是这些 动物死亡的主要原因。 腹泻可以由任何重大转变所致， 例如断奶或身体运动， 以及响应于多 种细菌或病毒感染， 一般发生在动物寿命的前几个小时内。 最常见的致腹泻性细菌是肠毒原性大肠杆菌 (ETEC)， 具有 K99 毛发抗原。腹泻的 常见病毒原因包括轮状病毒和冠形病毒。其他感染性成分包括隐孢子虫、 兰伯氏贾第虫和 沙门氏菌等等。
     轮状病毒感染的症状包括水样便的排泄、 脱水和虚弱。冠形病毒导致更严重的新 生动物疾病， 具有比轮状病毒感染更高的死亡率。不过经常是年幼动物可能同时感染有一 种以上病毒或者病毒与细菌微生物的组合。这急骤地增加疾病的严重性。
     因此， 需要 ABC 转运蛋白活性的调控剂及其组合物， 它们能够用于调控哺乳动物 细胞膜中 ABC 转运蛋白的活性。
     需要使用这类 ABC 转运蛋白活性调控剂治疗 ABC 转运蛋白介导的疾病的方法。
     需要调控来自体内的哺乳动物细胞膜中 ABC 转运蛋白活性的方法。
     需要 CFTR 活性的调控剂， 它们能够用于调控哺乳动物细胞膜中 CFTR 的活性。
     需要使用这类 CFTR 活性调控剂治疗 CFTR- 介导的疾病的方法。
     需要调控来自体内的哺乳动物细胞膜中 CFTR 活性的方法。
     发明内容
     现已发现， 本发明化合物及其药学上可接受的盐可用作 ABC 转运蛋白活性的调控 剂。这些化合物具有通式 I ：
     或其药学上可接受的盐， 其中 R1、 R 2、 R3、 R4、 R5、 R6、 R7 和 Ar1 是如一般性和下文大类与小类所描述的。
     这些化合物和药学上可接受的组合物可用于治疗多种疾病、 障碍或病症或者减轻 其严重性， 包括但不限于囊性纤维化、 遗传性肺气肿、 遗传性血色素沉着、 凝血 - 纤维蛋白 溶解缺陷 ( 例如 C 蛋白缺陷 )、 1 型遗传性血管性水肿、 脂质加工缺陷 ( 例如家族性高胆固 醇血 )、 1 型乳糜微粒血、 β- 脂蛋白血、 溶酶体贮存疾病 ( 例如 I- 细胞疾病 / 伪 -Hurler)、 粘多糖病、 Sandhof/Tay-Sachs、 Crigler-Najjar II 型、 多内分泌病 / 高胰岛素血、 糖尿 病、 Laron 侏儒、 髓过氧化物酶缺陷、 原发性甲状旁腺机能减退、 黑素瘤、 聚糖病 CDG1 型、 遗 传性肺气肿、 先天性甲状腺机能亢进、 成骨不全、 遗传性低纤维蛋白原血、 ACT 缺陷、 尿崩 症 (DI)、 后叶激素运载蛋白性 DI、 肾原性 DI、 夏 - 马二氏神经性进行性肌肉萎缩综合征、 佩 - 梅二氏病、 神经变性疾病 ( 例如阿尔茨海默氏病、 帕金森氏病、 肌萎缩性侧索硬化、 进行 性核上性麻痹、 皮克氏病 )、 若干聚谷氨酰胺神经病学障碍 ( 例如亨廷顿氏病、 I 型脊髓小脑 性共济失调、 脊髓与延髓肌肉萎缩、 齿状红核苍白球丘脑下部核 (pallidoluysian) 和肌强 直性营养不良 ) 以及海绵状脑病 ( 例如遗传性克 - 雅二氏病、 法布里氏病和斯 - 施二氏综 合征 )、 COPD、 干眼病和斯耶格伦氏病。
     发明详细内容
     I、 本发明化合物的一般说明 ：
     本发明涉及可用作 ABC 转运蛋白活性调控剂的式 I 化合物 ：
     或其药学上可接受的盐， 其中 ： 1
     Ar 是 5-6 元芳族单环， 具有 0-4 个独立选自氮、 氧或硫的杂原子， 其中所述环可选 地稠合于 5-12 元单环或二环的芳族、 部分不饱和或饱和的环， 其中每个环含有 0-4 个独立 1 选自氮、 氧或硫的杂原子， 其中 Ar 具有 m 个取代基， 各自独立地选自 -WRW ；
     W 是价键或者可选被取代的 C1-C6 亚烷基链， 其中 W 的至多两个亚甲基单元可选地 和独立地被 -CO-、 -CS-、 -COCO-、 -CONR′ -、 -CONR′ NR′ -、 -CO2-、 -OCO-、 -NR′ CO2-、 -O-、 -NR ′ CONR′ -、 -OCONR′ -、 -NR′ NR′、 -NR′ NR′ CO-、 -NR′ CO-、 -S-、 -SO、 -SO2-、 -NR′ -、 -SO2NR′ -、 NR′ SO2- 或 -NR′ SO2NR′ - 所代替 ；
     RW 独立地是 R′、 卤代基、 NO2、 CN、 CF3 或 OCF3 ；
     m 是 0-5 ；
     每个 R1、 R2、 R3、 R4 和 R5 独立地是 -X-RX ；
     X 是价键或者可选被取代的 C1-C6 亚烷基链， 其中 X 的至多两个亚甲基单元可选地 和独立地被 -CO-、 -CS-、 -COCO-、 -CONR′ -、 -CONR′ NR′ -、 -CO2-、 -OCO-、 -NR′ CO2-、 -O-、 -NR ′ CONR′ -、 -OCONR′ -、 -NR′ NR′、 -NR′ NR′ CO-、 -NR′ CO-、 -S-、 -SO、 -SO2-、 -NR′ -、 -SO2NR′ -、 NR′ SO2- 或 -NR′ SO2NR′ - 所代替 ；
     RX 独立地是 R′、 卤代基、 NO2、 CN、 CF3 或 OCF3 ； 6
     R 是氢、 CF3、 -OR′、 -SR′或者可选被取代的 C1-6 脂族基团 ；
     R7 是氢或者可选被 -X-RX 取代的 C1-6 脂族基团 ；
     R′独立地选自氢或者可选被取代的基团， 选自 C1-C8 脂族基团 ； 3-8- 元饱和、 部分 不饱和或完全不饱和的单环， 具有 0-3 个独立选自氮、 氧或硫的杂原子 ； 或者 8-12 元饱和、 部分不饱和或完全不饱和的二环环系， 具有 0-5 个独立选自氮、 氧或硫的杂原子 ； 或者两次 出现的 R′与它们所键合的原子一起构成可选被取代的 3-12 元饱和、 部分不饱和或完全不 饱和的单环或二环， 具有 0-4 个独立选自氮、 氧或硫的杂原子。
     在某些其他实施方式中， 提供式 I 化合物 ：
     或其药学上可接受的盐， 其中 ： 1
     Ar 是 5-6 元芳族单环， 具有 0-4 个独立选自氮、 氧或硫的杂原子， 其中所述环可选 地稠合于 5-12 元单环或二环的芳族、 部分不饱和或饱和的环， 其中每个环含有 0-4 个独立 1 选自氮、 氧或硫的杂原子， 其中 Ar 具有 m 个取代基， 各自独立地选自 -WRW ；
     W 是价键或者可选被取代的 C1-C6 亚烷基链， 其中 W 的至多两个亚甲基单元可选地 和独立地被 -CO-、 -CS-、 -COCO-、 -CONR′ -、 -CONR′ NR′ -、 -CO2-、 -OCO-、 -NR′ CO2-、 -O-、 -NR ′ CONR′ -、 -OCONR′ -、 -NR′ NR′、 -NR′ NR′ CO-、 -NR′ CO-、 -S-、 -SO、 -SO2-、 -NR′ -、 -SO2NR′ -、 NR′ SO2- 或 -NR′ SO2NR′ - 所代替 ；
     RW 独立地是 R′、 卤代基、 NO2、 CN、 CF3 或 OCF3 ；
     m 是 0-5 ；
     每个 R1、 R2、 R3、 R4 和 R5 独立地是 -X-RX ；
     X 是价键或者可选被取代的 C1-C6 亚烷基链， 其中 X 的至多两个亚甲基单元可选地 和独立地被 -CO-、 -CS-、 -COCO-、 -CONR′ -、 -CONR′ NR′ -、 -CO2-、 -OCO-、 -NR′ CO2-、 -O-、 -NR ′ CONR′ -、 -OCONR′ -、 -NR′ NR′、 -NR′ NR′ CO-、 -NR′ CO-、 -S-、 -SO、 -SO2-、 -NR′ -、 -SO2NR′ -、 NR′ SO2- 或 -NR′ SO2NR′ - 所代替 ；
     RX 独立地是 R′、 卤代基、 NO2、 CN、 CF3 或 OCF3 ；
     R6 是氢、 CF3、 -OR′、 -SR′或者可选被取代的 C1-C8 脂族基团 ； 7
     R 是氢或者可选被 -X-RX 取代的 C1-C6 脂族基团 ；
     R′独立地选自氢或者可选被取代的基团， 选自 C1-C8 脂族基团 ； 3-8- 元饱和、 部分 不饱和或完全不饱和的单环， 具有 0-3 个独立选自氮、 氧或硫的杂原子 ； 或者 8-12 元饱和、 部分不饱和或完全不饱和的二环环系， 具有 0-5 个独立选自氮、 氧或硫的杂原子 ； 或者两次 出现的 R′与它们所键合的原子一起构成可选被取代的 3-12 元饱和、 部分不饱和或完全不 饱和的单环或二环， 具有 0-4 个独立选自氮、 氧或硫的杂原子 ；
     其条件是 ：
     i) 若 R1、 R2、 R3、 R4、 R5、 R6 和 R7 是氢， 则 Ar1 不是苯基、 2- 甲氧基苯基、 4- 甲氧基苯基、 2- 甲基苯基、 2， 6- 二氯苯基、 2， 4- 二氯苯基、 2- 溴苯基、 4- 溴苯基、 4- 羟基苯基、 2， 4- 二硝
     基苯基、 3， 5- 二羧酸苯基、 2， 4- 二甲基苯基、 2， 6- 二甲基苯基、 2- 乙基苯基、 3- 硝基 -4- 甲 基苯基、 3- 羧酸苯基、 2- 氟苯基、 3- 氟苯基、 3- 三氟甲基苯基、 3- 乙氧基苯基、 4- 氯苯基、 3- 甲氧基苯基、 4- 二甲氨基苯基、 3， 4- 二甲基苯基、 2- 乙基苯基或 4- 乙氧羰基苯基 ； 1 2 3 5 6 7 4
     ii) 若 R 、 R、 R、 R、 R 和 R 是氢， R 是甲氧基， 则 Ar1 不是 2- 氟苯基或 3- 氟苯基 ；
     iii) 若 R1、 R3、 R4、 R5、 R6 和 R7 是氢， R2 是 1， 2， 3， 4- 四氢异喹啉 -1- 基 - 磺酰基， 则 1 Ar 不是 3- 三氟甲基苯基 ；
     iv) 若 R1、 R2、 R3、 R4、 R5 和 R7 是氢， R6 是甲基， 则 Ar1 不是苯基 ；
     v) 若 R1、 R 4、 R5、 R6 和 R7 是氢， R2 和 R3 一起是亚甲二氧基， 则 Ar1 不是 4- 氯苯基、 4- 溴苯基、 4- 硝基苯基、 4- 乙酯基苯基、 6- 乙氧基 - 苯并噻唑 -2- 基、 6- 乙酯基 - 苯并 噻唑 -2- 基、 6- 卤代 - 苯并噻唑 -2- 基、 6- 硝基 - 苯并噻唑 -2- 基或 6- 硫氰基 - 苯并噻 唑 -2- 基 ；
     vi) 若 R1、 R 4、 R5、 R6 和 R7 是氢， R2 和 R3 一起是亚甲二氧基， 则 Ar1 不是 4- 取代的 苯基， 其中所述取代基是 -SO2NHRXX， 其中 RXX 是 2- 吡啶基、 4- 甲基 -2- 嘧啶基、 3， 4- 二甲 基 -5- 异
     唑基 ；vii) 若 R1、 R2、 R3、 R4、 R5、 R6 和 R7 是氢， 则 Ar1 不是噻唑 -2- 基、 1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 或 1H-1， 3， 4- 三唑 -2- 基 ； viii) 若 R1、 R2、 R3、 R5、 R6 和 R7 是氢， 且 R4 是 CF3、 OMe、 氯、 SCF3 或 OCF3， 则 Ar1 不 唑 -3- 基、 噻唑 -2- 基、 4- 氟苯基、 嘧啶 -2- 基、 1- 甲基 -1， 2-(1H)- 吡 是 5- 甲基 -1， 2-唑 -5- 基、 吡啶 -2- 基、 苯基、 N- 甲基 - 咪唑 -2- 基、 咪唑 -2- 基、 5- 甲基 - 咪唑 -2- 基、 1， 3唑 -2- 基或 1， 3， 5-(1H)- 三唑 -2- 基 ； ix) 若 R1、 R 2、 R3、 R 4、 R5、 R6 和 R7 各自是氢， 则 Ar1 不是嘧啶 -2- 基、 4， 6- 二甲基 - 嘧 啶 -2- 基、 4- 甲氧基 -6- 甲基 -1， 3， 5- 三嗪 -2- 基、 5- 溴 - 吡啶 -2- 基、 吡啶 -2- 基或 3， 5- 二氯 - 吡啶 -2- 基 ；
     x) 若 R1、 R2、 R3、 R4、 R5 和 R7 各自氢， R6 是羟基， 则 Ar1 不是 2， 6- 二氯 -4- 氨基磺酰 基 - 苯基 ；
     xi) 若 R2 或 R3 是可选被取代的 N- 哌嗪基、 N- 哌啶基或 N- 吗啉基， 则 Ar1 不是选自 如下的可选被取代的环 ： 噻唑 -2- 基、 吡啶基、 苯基、 噻二唑基、 苯并噻唑 -2- 基或吲唑基 ； 2 1
     xii) 若 R 是可选被取代的环己氨基， 则 Ar 不是可选被取代的苯基、 吡啶基或噻 二唑基 ；
     xiii)Ar1 不是可选被取代的四唑基 ；
     xiv) 若 R2、 R4、 R5、 R6 和 R7 各自氢， 且 R1 和 R3 同时都是 CF3、 氯、 甲基或甲氧基， 则 Ar1 不是 4， 5- 二氢 -1， 3- 噻唑 -2- 基、 噻唑 -2- 基或 [3， 5- 双 ( 三氟甲基 )-1H- 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ；
     xv) 若 R1、 R4、 R5、 R6 和 R7 各自氢， 且 Ar1 是噻唑 -2- 基， 则 R2 和 R3 都不是异丙基、 氯或 CF3 ；
     xvi) 若 Ar1 是 4- 甲氧基苯基、 4- 三氟甲基苯基、 2- 氟苯基、 苯基、 或 3- 氯苯基， 则：
     a) 若 R1、 R2、 R4、 R5、 R6 和 R7 各自氢， 则 R3 不是甲氧基 ； 或者 1 3 4 5 6 7 2
     b) 若 R 、 R、 R、 R、 R 和 R 各自氢， 则 R 不是氯 ； 或者
     c) 若 R1、 R2、 R3、 R5、 R6 和 R7 各自氢， 则 R4 不是甲氧基 ； 或者 1 3 4 6 7 5 2
     d) 若 R 、 R、 R、 R 和 R 各自氢， 且 R 是乙基， 则 R 不是氯 ； 1 2 4 5 6 7 3
     e) 若 R 、 R、 R、 R、 R 和 R 各自氢， 则 R 不是氯 ； 1 3 4 5 6 7
     xvi) 若 R 、 R、 R、 R、 R 和 R 各自氢， 且 R2 是 CF3 或 OCF3， 则 Ar1 不是 [3， 5- 双 ( 三 氟甲基 )-1H- 吡唑 -1- 基 ] 苯基 ；
     xvii) 若 R1、 R2、 R4、 R5、 R6 和 R7 各自氢， 且 R3 是氢或 CF3， 则 Ar1 不是被 -OCH2CH2Ph 取代的苯基、 -OCH2CH2(2- 三氟甲基 - 苯基 )、 -OCH2CH2-(6， 7- 二甲氧基 -1， 2， 3， 4- 四氢异喹 啉 -2- 基 ) 或取代的 1H- 吡唑 -3- 基 ； 和
     xviii) 排除下列两种化合物 ：
     2、 化合物和定义 ：
     本发明化合物包括如上一般性描述的那些， 并且进一步如本文公开的大类、 小类 和品种所述。下列定义应当适用本文所用， 另有指示除外。
     本文所用的术语 “ABC- 转运蛋白” 表示包含至少一个结合结构域的 ABC- 转运蛋白 或其片段， 其中所述蛋白质或其片段是体内或体外存在的。本文所用的术语 “结合结构域” 表示 ABC- 转运蛋白上能够与调控剂结合的结构域。例如参见 Hwang， T.C.et al.， J.Gen. Physiol.(1998) ： 111(3)， 477-90。
     本文所用的术语 “CFTR” 表示囊性纤维化跨膜调节剂或其有其调节剂活性的部分 或完整突变体， 包括但不限于 ΔF508CFTR 和 G551D-CFTR( 例如参见 http://www.genet. sickkids.on.ca/cftr/ 关于 CFTR 突变 )。
     本文所用的术语 “调控” 表示增加或降低可测量的量。
     出 于 本 发 明 的 目 的， 化 学 元 素 符 合 Periodic Table of theElements， CAS th version， Handbook of Chemistry and Physics， 75 Ed。另外， 有机化学的一般原理参 见 ″ Organic Chemistry ″， ThomasSorrell， University Science Books， Sausalito ： th 1999， and″ March′ s Advanced Organic Chemistry″， 5 Ed.， Ed. ： Smith， M.B.and March， J.， John Wiley & Sons， New York ： 2001， 其完整内容引用在此作为参考。
     正如本文所述， 本发明化合物可以可选地被一个或多个取代基取代， 例如上面概 述所阐述的， 或者如本发明的特定大类、 小类和品种所例证的。 将被领会的是， 措辞 “可选被 取代的” 与措辞 “取代或未取代的” 是可互换使用的。一般而言， 术语 “取代” 无论前面有无 术语 “可选” ， 都表示给定结构中的氢原子团被指定取代基的原子团所代替。 除非另有指示， 可选被取代的基团可以在该基团每个可取代的位置上具有取代基， 若任意给定结构中一个
     以上位置可以被一个以上选自指定组的取代基所取代， 则取代基可以在每个位置上是相同 或不同的。 本发明所关注的取代基组合优选地是能形成稳定的或化学上可行的化合物的那 些。本文所用的术语 “稳定的” 表示在受到用于它们制备、 检测、 优选回收、 纯化的条件和用 于一种或多种本文所公开的目的时基本上不变的化合物。在有些实施方式中， 稳定的化合 物或化学上可行的化合物是在没有水分或其他化学反应性条件的存在下、 在 40℃或以下的 温度下保持至少一周而基本上不发生变化的化合物。
     本文所用的术语 “脂族基” 或 “脂族基团” 表示直链 ( 即未分支 ) 或支链的取代或 未取代的烃链， 它是完全饱和的或者含有一个或多个不饱和单元， 或者表示单环烃或二环 烃， 它是完全饱和的或者含有一个或多个不饱和单元， 但是不是芳族的 ( 本文也称之为 “碳 环” 、 “环脂族基” 或 “环烷基” )， 它具有单一的与分子其余部分连接的点。除非另有说明， 脂 族基团含有 1-20 个脂族碳原子。 在有些实施方式中， 脂族基团含有 1-10 个脂族碳原子。 在 其他实施方式中， 脂族基团含有 1-8 个脂族碳原子。在其他实施方式中， 脂族基团含有 1-6 个脂族碳原子， 在其他实施方式中， 脂族基团含有 1-4 个脂族碳原子。在有些实施方式中， “环脂族基” ( 或者 “碳环” 或 “环烷基” ) 表示单环 C3-C8 烃或二环 C8-C14 烃， 它是完全饱和 的或者含有一个或多个不饱和单元， 但不是芳族的， 它具有单一的与分子其余部分连接的 点， 其中所述二环环系中任意单一的环是 3-7 元环。适合的脂族基团包括但不限于直链或 支链的取代或未取代的烷基、 烯基、 炔基及其杂合物， 例如 ( 环烷基 ) 烷基、 ( 环烯基 ) 烷基 或 ( 环烷基 ) 烯基。适合的环脂族基团包括环烷基、 二环环烷基 ( 例如十氢萘 )、 桥连二环 烷基 ( 例如降冰片基或 [2.2.2] 二环辛基 ) 或桥连三环烷基 ( 例如金刚烷基 )。 本文所用的术语 “杂脂族基” 表示其中一个或两个碳原子独立地被一个或多个氧、 硫、 氮、 磷或硅代替的脂族基团。 杂脂族基团可以是取代或未取代的、 直链或支链的、 环状或 无环的， 包括 “杂环” 、 “杂环基” 、 “杂环脂族” 或 “杂环的” 基团。
     本文所用的术语 “杂环” 、 “杂环基” 、 “杂环脂族” 或 “杂环的” 表示非芳族的、 单环、 二环或三环环系， 其中一个或多个环成员是独立选择的杂原子。在有些实施方式中， “杂 环” 、 “杂环基” 、 “杂环脂族” 或 “杂环的” 基团具有三至十四个环成员， 其中一个或多个环成 员是独立选自氧、 硫、 氮或磷的杂原子， 该系统中每个环含有 3 至 7 个环成员。
     术语 “杂原子” 表示一个或多个氧、 硫、 氮、 磷或硅 ( 包括氮、 硫、 磷或硅的任意氧化 形式 ； 任意碱性氮或杂环可取代氮的季铵化形式， 例如 N( 如在 3， 4- 二氢 -2H- 吡咯基中 )、 + NH( 如在吡咯烷基中 ) 或 NR ( 如在 N- 取代的吡咯烷基中 ))。
     本文所用的术语 “不饱和的” 意味着该部分具有一个或多个不饱和单元。
     本文所用的术语 “烷氧基” 或 “硫代烷基” 表示如前文所定义的烷基通过氧 (“烷 氧基” ) 或硫 (“硫代烷基” ) 原子与主体碳链连接。
     术语 “卤代脂族基” 和 “卤代烷氧基” 表示被一个或多个卤原子取代的脂族基或 烷氧基， 视情况而定。术语 “卤素” 或 “卤代” 表示 F、 Cl、 Br 或 I。卤代脂族基的实例包 括 -CHF2、 -CH2F、 -CF3、 -CF2- 或全卤代烷基， 例如 -CF2CF3。
     单独或者作为更大部分 “芳烷基” 、 “芳烷氧基” 或 “芳氧基烷基” 的一部分使用的 术语 “芳基” 表示具有总计五至十四个环成员的单环、 二环和三环环系， 其中该系统中至少 一个环是芳族的， 并且其中该系统中每一环含有 3 至 7 个环成员。术语 “芳基” 可以与术语 “芳基环” 互换使用。术语 “芳基” 也表示如下所定义的杂芳基环系。
     单独或者作为更大部分 “杂芳烷基” 或 “杂芳基烷氧基” 的一部分使用的术语 “杂芳 基” 表示具有总计五至十四个环成员的单环、 二环和三环环系， 其中该系统中至少一个环是 芳族的， 该系统中至少一个环含有一个或多个杂原子， 并且其中该系统中每一环含有 3 至 7 个环成员。术语 “杂芳基” 可以与术语 “杂芳基环” 或术语 “杂芳族基” 互换使用。
     芳基 ( 包括芳烷基、 芳烷氧基、 芳氧基烷基等 ) 或杂芳基 ( 包括杂芳烷基和杂 芳烷氧基等 ) 可以含有一个或多个取代基。芳基或杂芳基的不饱和碳原子上适合的取 代基一般选自卤素、 -Ro、 -ORo、 -SRo、 1， 2- 亚甲二氧基、 1， 2- 亚乙二氧基、 可选被 Ro 取代 的 苯 基 (Ph)、 可 选 被 Ro 取 代 的 -O(Ph)、 可 选 被 Ro 取 代 的 -(CH2)1-2(Ph)、 可 选 被 Ro 取 代 的 -CH ＝ CH(Ph)、 -NO2、 -CN、 -N(Ro)2、 -NRoC(O)Ro、 -NRoC(O)N(Ro)2、 -NRoCO2Ro、 -NRoNRoC(O) Ro、 -NRoNRoC(O)N(Ro)2、 -NRoNRoCO2Ro、 -C(O)C(O)Ro、 -C(O)CH2C(O)Ro、 -CO2Ro、 -C(O)Ro、 -C(O) o o o o o o o o o N(R )2、 -OC(O)N(R )2、 -S(O)2R 、 -SO2N(R )2、 -S(O)R 、 -NR SO2N(R )2、 -NR SO2R 、 -C( ＝ S) 0 o o o N(R )2、 -C( ＝ NH)-N(R )2 或 -(CH2)0-2NHC(O)R ， 其中每次独立出现的 R 选自氢、 可选被取代 的 C1-6 脂族基团、 未取代的 5-6 元杂芳基或杂环、 苯基、 -O(Ph) 或 -CH2(Ph)， 或者尽管有如上 o o 定义， 在相同取代基或不同取代基上两次独立出现的 R 与每个 R 基团所键合的原子一起构 成 5-8 元杂环基、 芳基或杂芳基环， 或者 3-8- 元环烷基环， 具有 0-3 个独立选自氮、 氧或硫 o 的杂原子。R 的脂族基团上可选的取代基选自 NH2、 NH(C1-4 脂族基团 )、 N(C1-4 脂族基团 )2、 卤素、 C1-4 脂族基团、 OH、 O(C1-4 脂族基团 )、 NO2、 CN、 CO2H、 CO2(C1-4 脂族基团 )、 O( 卤代 C1-4 脂 o 族基团 ) 或卤代 C1-4 脂族基团， 其中 R 的每个上述 C1-4 脂族基团是未取代的。
     脂族或杂脂族基团或者非芳族杂环可以含有一个或多个取代基。脂族或杂脂族 基团或者非芳族杂环的饱和碳原子上适合的取代基选自上面关于芳基或杂芳基不饱和碳 所列举的那些， 并且另外包括下列基团 ： ＝ O、 ＝ S、 ＝ NNHR*、 ＝ NN(R*)2、 ＝ NNHC(O)R*、 ＝ * * NNHCO2( 烷基 )、 ＝ NNHSO2( 烷基 ) 或＝ NR ， 其中每个 R 独立地选自氢或可选被取代的 C1-C6 * 脂族基团。R 的脂族基团上可选的取代基选自 NH2、 NH(C1-4 脂族基团 )、 N(C1-4 脂族基团 )2、 卤素、 C1-4 脂族基团、 OH、 O(C1-4 脂族基团 )、 NO2、 CN、 CO2H、 CO2(C1-4 脂族基团 )、 O( 卤代 C1-4 脂 * 族基团 ) 或卤代 C1-4 脂族基团， 其中 R 的每个上述 C1-4 脂族基团是未取代的。
     非 芳 族 杂 环 氮 上 可 选 的 取 代 基 选 自 -R+、 -N(R+)2、 -C(O)R+、 -CO2R+、 -C(O)C(O) + + + + + + R、 -C(O)CH2C(O)R 、 -SO2R 、 -SO2N(R )2、 -C( ＝ S)N(R )2、 -C( ＝ NH)-N(R )2 或 -NR+SO2R+ ； 其 + 中 R 是氢、 可选被取代的 C1-6 脂族基团、 可选被取代的苯基、 可选被取代的 -O(Ph)、 可选被 取代的 -CH2(Ph)、 可选被取代的 -(CH2)1-2(Ph)、 可选被取代的 -CH ＝ CH(Ph) 或者未取代的 5-6 元杂芳基或杂环， 具有一至四个独立选自氧、 氮或硫的杂原子， 或者尽管有如上定义， 在 + + 相同取代基或不同取代基上两次独立出现的 R 与每个 R 基团所键合的原子一起构成 5-8 元杂环基、 芳基或杂芳基环， 或者 3-8- 元环烷基环， 具有 0-3 个独立选自氮、 氧或硫的杂原 + 子。 R 的脂族基团或苯基环上可选的取代基选自 NH2、 NH(C1-4 脂族基团 )、 N(C1-4 脂族基团 )2、 卤素、 C1-4 脂族基团、 OH、 O(C1-4 脂族基团 )、 NO2、 CN、 CO2H、 CO2(C1-4 脂族基团 )、 O( 卤代 C1-4 脂 + 族基团 ) 或卤代 C1-4 脂族基团， 其中 R 的每个上述 C1-4 脂族基团是未取代的。
     术语 “亚烷基链” 表示直链或支链碳链， 它可以是完全饱和的或者具有一个或多个 不饱和单元， 并且具有两个与分子其余部分连接的点。 术语 “亚螺环烷基” 表示如下的碳环， 它可以是完全饱和的或者具有一个或多个不饱和单元， 并且具有两个与分子其余部分连接 的点。如上所述， 在有些实施方式中， 两次独立出现的 Ro( 或者 R+ 或任何其他在本文中 有类似定义的变量 ) 与每个变量所键合的原子一起构成 5-8- 元杂环基、 芳基或杂芳基环或 者 3-8- 元环烷基环， 具有 0-3 个独立选自氮、 氧或硫的杂原子。两次独立出现的 Ro( 或者 R+ 或任何其他在本文中有类似定义的变量 ) 与每个变量所键合的原子一起所构成的示范 性环包括但不限于下列 ： a) 两次独立出现的 Ro( 或者 R+ 或任何其他在本文中有类似定义的 变量 ) 键合于同一原子， 并且与该原子一起构成一个环， 例如 N(Ro)2， 其中出现的两个 Ro 与 氮原子一起构成哌啶 -1- 基、 哌嗪 -1- 基或吗啉 -4- 基 ； 和 b) 两次独立出现的 Ro( 或者 R+ 或任何其他在本文中有类似定义的变量 ) 键合于不同原子， 并且与这些原子一起构成一个 环， 例如
     其中苯基被两次出现的 ORo 取代， 这两次出现的 Ro 与它们所键合的氧原子一起构 成稠合的 6- 元含氧环 ：
     将被领会的是， 两次独立出现的 Ro( 或者 R+ 或任何其他在本文中有类似定义的变 量 ) 与每个变量所键合的原子一起可以构成多种其他环， 并且上述详细实例不打算是限制 性的。
     取代基键合在例如下示二环环系中意味着该取代基可以附着于该二环环系任一 环上任意可取代的环原子 ：
     除非另有规定， 本文所描绘的结构也意味着包括该结构的所有异构 ( 例如对映异 构、 非对映异构和几何异构 ( 或构象异构 )) 形式 ； 例如每个不对称中心的 R 与 S 构型， (Z) 与 (E) 双键异构体， 和 (Z) 与 (E) 构象异构体。因此， 这些化合物的单一立体化学异构体以 及对映异构、 非对映异构和几何异构 ( 或构象异构 ) 混合物都属于本发明的范围。除非另 有规定， 本发明化合物的所有互变异构形式都属于本发明的范围。例如， 当式 I 化合物中的 5 R 是氢时， 式 I 化合物可以存在互变体 ：
     另外， 除非另有规定， 本文所描绘的结构也意味着包括仅在一个或多个同位素富 集原子的存在上有所不同的化合物。例如， 除了氢被氘或氚代替或者碳被 13C- 或 14C- 富集
     的碳代替以外具有本发明结构的化合物都属于本发明的范围。 这类化合物例如可用作生物 学测定法中的分析工具或探针。
     3、 示范性化合物的说明 ：
     在本发明的有些实施方式中， Ar1 选自 ：
     其中环 A1 是 5-6 元芳族单环， 具有 0-4 个独立选自氮、 氧或硫的杂原子 ； 或者
     A1 和 A2 一起是 8-14 元芳族二环或三环的芳基环， 其中每个环含有 0-4 个独立选 自氮、 氧或硫的杂原子。
     在有些实施方式中， A1 是可选被取代的 6 元芳族环， 具有 0-4 个杂原子， 其中所述 杂原子是氮。在有些实施方式中， A1 是可选被取代的苯基。或者， A1 是可选被取代的吡啶 基、 嘧啶基、 吡嗪基或三嗪基。或者， A1 是可选被取代的吡嗪基或三嗪基。或者， A1 是可选 被取代的吡啶基。
     在有些实施方式中， A1 是可选被取代的 5- 元芳族环， 具有 0-3 个杂原子， 其中所述 杂原子是氮、 氧或硫。在有些实施方式中， A1 是可选被取代的 5- 元芳族环， 具有 1-2 个氮原 子。在一种实施方式中， A1 是除噻唑基以外的可选被取代的 5- 元芳族环。
     在有些实施方式中， A2 是可选被取代的 6 元芳族环， 具有 0-4 个杂原子， 其中所述 杂原子是氮。在有些实施方式中， A2 是可选被取代的苯基。或者， A2 是可选被取代的吡啶 基、 嘧啶基、 吡嗪基或三嗪基。
     在有些实施方式中， A2 是可选被取代的 5- 元芳族环， 具有 0-3 个杂原子， 其中所述 杂原子是氮、 氧或硫。在有些实施方式中， A2 是可选被取代的 5- 元芳族环， 具有 1-2 个氮原 子。在某些实施方式中， A2 是可选被取代的吡咯基。
     在有些实施方式中， A2 是可选被取代的 5-7 元饱和或不饱和的杂环， 具有 1-3 个独 立选自氮、 硫或氧的杂原子。示范性的这类环包括哌啶基、 哌嗪基、 吗啉基、 硫吗啉基、 吡咯 烷基、 四氢呋喃基等。
     在有些实施方式中， A2 是可选被取代的 5-10 元饱和或不饱和的碳环。在一种实施 方式中， A2 是可选被取代的 5-10 元饱和碳环。示范性的这类环包括环己基、 环戊基等。
     在有些实施方式中， 环 A2 选自 ：
     其中环 A2 通过两个相邻环原子稠合于环 A1。在其他实施方式中， W 是价键或者可选被取代的 C1-C6 亚烷基连， 其中一个或两个 亚甲基单元可选地和独立地被 O、 NR′、 S、 SO、 SO2、 或 COO、 CO、 SO2NR′、 NR′ SO2、 C(O)NR′、 W NR′ C(O)、 OC(O)、 OC(O)NR′所代替， 且 R 是 R′或卤代基。 在其他实施方式中， 每次出现的 W WR 独立地是 -C1-C3 烷基、 C1-C3 全卤代烷基、 -O(C1-C3 烷基 )、 -CF3、 -OCF3、 -SCF3、 -F、 -Cl、 -Br、 或 -COOR ′、 -COR ′、 -O(CH2)2N(R ′ )(R ′ )、 -O(CH2)N(R ′ )(R ′ )、 -CON(R ′ ) (R′ )、 -(CH2)2OR′、 -(CH2)OR′、 可选被取代的单环或二环芳族环、 可选被取代的芳基砜、 可选被取代的 5- 元杂芳基环、 -N(R′ )(R′ )、 -(CH2)2N(R′ )(R′ ) 或 -(CH2)N(R′ )(R′ )。
     在有些实施方式中， m 是 0。或者， m 是 1。或者， m 是 2。在有些实施方式中， m是 3。在其他实施方式中， m 是 4。
     在一种实施方式中， R5 是 X-RX。在有些实施方式中， R5 是氢。或者， R5 是可选被取 代的 C1-C8 脂族基团。在有些实施方式中， R5 是可选被取代的 C1-C4 脂族基。或者， R5 是苄 基。
     在有些实施方式中， R6 是氢。或者， R6 是可选被取代的 C1-C8 脂族基团。在有些实 施方式中， R6 是可选被取代的 C1-C4 脂族基。在某些其他实施方式中， R6 是 -(O-C1-C4 脂族 基 ) 或 -(S-C1-C4 脂族基 )。优选地， R6 是 -OMe 或 -SMe。在某些其他实施方式中， R6 是 CF3。
     在本发明的一种实施方式中， R1、 R2、 R3 和 R4 同时是氢。在另一种实施方式中， R6 和 R7 同时都是氢。
     在本发明的另一种实施方式中， R1、 R2、 R 3、 R4 和 R5 同时是氢。在本发明的另一种实 施方式中， R1、 R2、 R3、 R4、 R5 和 R6 同时是氢。
     在本发明的另一种实施方式中， R2 是 X-RX， 其中 X 是 -SO2NR′ -， 且 RX 是 R′； 也就 2 是说， R 是 -SO2N(R′ )2。在一种实施方式中， 其中的两个 R′一起构成可选被取代的 5-7 元环， 具有另外 0-3 个选自氮、 氧或硫的杂原子。或者， R1、 R3、 R4、 R5 和 R6 同时是氢， 且 R2 是 SO2N(R′ )2。
     在有些实施方式中， X 是价键或者可选被取代的 C1-C6 亚烷基连， 其中一个或 两个不相邻的亚甲基单元可选地和独立地被 O、 NR ′、 S、 SO2、 或 COO、 CO 所代替， 且 RX 是 R ′ 或 卤 代 基。 在 其 他 实 施 方 式 中， 每 次 出 现 的 XRX 独 立 地 是 -C1-3 烷 基、 -O(C1-3 烷 基 )、 -CF3、 -OCF3、 -SCF3、 -F、 -Cl、 -Br、 OH、 -COOR′、 -COR′、 -O(CH2)2N(R′ )(R′ )、 -O(CH2) N(R′ )(R′ )、 -CON(R′ )(R′ )、 -(CH2)2OR′、 -(CH2)OR′、 可选被取代的苯基、 -N(R′ ) (R′ )、 -(CH2)2N(R′ )(R′ ) 或 -(CH2)N(R′ )(R′ )。
     在有些实施方式中， R7 是氢。在某些其他实施方式中， R7 是 C1-C4 直链或支链脂族 基。
     在有些实施方式中， RW 选自卤代基、 氰基、 CF3、 CHF2、 OCHF2、 Me、 Et、 CH(Me)2、 CHMeEt、 正丙基、 叔丁基、 OMe、 OEt、 OPh、 O- 氟苯基、 O- 二氟苯基、 O- 甲氧基苯基、 邻 - 甲苯基、 O- 苄 基、 SMe、 SCF3、 SCHF2、 SEt、 CH2CN、 NH2、 NHMe、 N(Me)2、 NHEt、 N(Et)2、 C(O)CH3、 C(O)Ph、 C(O)NH2、 SPh、 SO2-( 氨基 - 吡啶基 )、 SO2NH2、 SO2Ph、 SO2NHPh、 SO2-N- 吗啉代基、 SO2-N- 吡咯烷基、 N- 吡 咯基、 N- 吗啉代基、 1- 哌啶基、 苯基、 苄基、 ( 环己基 - 甲基氨基 ) 甲基、 4- 甲基 -2， 4- 二 氢 - 吡唑 -3- 酮 -2- 基、 苯并咪唑 -2- 基、 呋喃 -2- 基、 4- 甲基 -4H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基、 3-(4’ - 氯苯基 )-[1， 2， 4] 二唑 -5- 基、 NHC(O)Me、 NHC(O)Et、 NHC(O)Ph、 NHSO2Me、 2- 吲 哚基、 5- 吲哚基、 -CH2CH2OH、 -OCF3、 O-(2， 3- 二甲基苯基 )、 5- 甲基呋喃基、 -SO2-N- 哌啶基、2- 甲苯基、 3- 甲苯基、 4- 甲苯基、 O- 丁基、 NHCO2C(Me)3、 CO2C(Me)3、 异丙烯基、 正丁基、 O-(2， 4- 二氯苯基 )、 NHSO2PhMe、 O-(3- 氯 -5- 三氟甲基 -2- 吡啶基 )、 苯基羟甲基、 2， 5- 二甲基 吡咯基、 NHCOCH2C(Me)3、 O-(2- 叔丁基 ) 苯基、 2， 3- 二甲基苯基、 3， 4- 二甲基苯基、 4- 羟甲 基苯基、 4- 二甲氨基苯基、 2- 三氟甲基苯基、 3- 三氟甲基苯基、 4- 三氟甲基苯基、 4- 氰甲基 苯基、 4- 异丁基苯基、 3- 吡啶基、 4- 吡啶基、 4- 异丙基苯基、 3- 异丙基苯基、 2- 甲氧基苯基、 3- 甲氧基苯基、 4- 甲氧基苯基、 3， 4- 亚甲二氧基苯基、 2- 乙氧基苯基、 3- 乙氧基苯基、 4- 乙 氧基苯基、 2- 甲硫基苯基、 4- 甲硫基苯基、 2， 4- 二甲氧基苯基、 2， 5- 二甲氧基苯基、 2， 6- 二 甲氧基苯基、 3， 4- 二甲氧基苯基、 5- 氯 -2- 甲氧基苯基、 2-OCF3- 苯基、 3- 三氟甲氧基 - 苯 基、 4- 三氟甲氧基苯基、 2- 苯氧基苯基、 4- 苯氧基苯基、 2- 氟 -3- 甲氧基 - 苯基、 2， 4- 二甲 氧基 -5- 嘧啶基、 5- 异丙基 -2- 甲氧基苯基、 2- 氟苯基、 3- 氟苯基、 4- 氟苯基、 3- 氰基苯 基、 3- 氯苯基、 4- 氯苯基、 2， 3- 二氟苯基、 2， 4- 二氟苯基、 2， 5- 二氟苯基、 3， 4- 二氟苯基、 3， 5- 二氟苯基、 3- 氯 -4- 氟 - 苯基、 3， 5- 二氯苯基、 2， 5- 二氯苯基、 2， 3- 二氯苯基、 3， 4- 二氯 苯基、 2， 4- 二氯苯基、 3- 甲氧羰基苯基、 4- 甲氧羰基苯基、 3- 异丙氧羰基苯基、 3- 乙酰氨基 苯基、 4- 氟 -3- 甲基苯基、 4- 甲亚磺酰基 - 苯基、 4- 甲磺酰基 - 苯基、 4-N-(2-N， N- 二甲氨 基乙基 ) 氨甲酰基苯基、 5- 乙酰基 -2- 噻吩基、 2- 苯并噻吩基、 3- 苯并噻吩基、 呋喃 -3- 基、 4- 甲基 -2- 噻吩基、 5- 氰基 -2- 噻吩基、 N′ - 苯基羰基 -N- 哌嗪基、 -NHCO2Et、 -NHCO2Me、 N- 吡咯烷基、 -NHSO2(CH2)2N- 哌啶、 -NHSO2(CH2)2N- 吗啉、 -NHSO2(CH2)2N(Me)2、 COCH2N(Me) COCH2NHMe、 -CO2Et、 O- 丙 基、 -CH2CH2NHCO2C(Me)3、 羟 基、 氨 甲 基、 戊 基、 金 刚 烷 基、 环戊 基、 乙 氧 基 乙 基、 C(Me)2CH2OH、 C(Me)2CO2Et、 -CHOHMe、 CH2CO2Et、 -C(Me)2CH2NHCO2C(Me)3、 O(CH2)2OEt、 O(CH2)2OH、 CO2Me、 羟 甲 基、 1- 甲 基 -1- 环 己 基、 1- 甲 基 -1- 环 辛 基、 1- 甲 基 -1- 环 庚 基、 C(Et)2C(Me)3、 C(Et)3、 CONHCH2CH(Me)2、 2- 氨 甲 基 - 苯 基、 乙 烯 基、 1- 哌 啶基羰基、 乙炔基、 环己基、 4- 甲基哌啶基、 -OCO2Me、 -C(Me)2CH2NHCO2CH2CH(Me)2、 -C(Me) -C(Me)2CH2NHCO2Et、 -C(Me)2CH2NHCO2Me、 -C(Me)2CH2NHCO2CH2C(Me)3、 -CH 2CH2NHCO2CH2CH2CH3、 -CH2NHCO2C(Me)3、 -C(Me)2CH2NHCO2(CH2)3CH3、 C(Me)2CH2NHCO2(CH2)2OMe、 C(OH) 2NHCOCF 3、 (CF3)2、 -C(Me)2CH2NHCO2CH2- 四氢呋喃 -3- 基、 C(Me)2CH2O(CH2)2OMe 或 3- 乙基 -2， 6- 二氧代 哌啶 -3- 基。
     在一种实施方式中， R′是氢。
     在一种实施方式中， R ′是 C1-C8 脂族基团， 可选地被至多 3 个选自卤代基、 CN、 CF3、 CHF2、 OCF3 或 OCHF2 的 取 代 基 取 代， 其 中 所 述 C1-C8 脂 族 基 的 至 多 两 个 亚 甲 基 单 元 可 选 地 被 -CO-、 -CONH(C1-C4 烷 基 )-、 -CO2-、 -OCO-、 -N(C1-C4 烷 基 )CO2-、 -O-、 -N(C1-C4 烷 基 )CON(C1-C4 烷 基 )-、 -OCON(C1-C4 烷 基 )-、 -N(C1-C4 烷 基 )CO-、 -S-、 -N(C1-C4 烷 基 )-、 -SO2N(C1-C4 烷基 )-、 N(C1-C4 烷基 )SO2- 或 -N(C1-C4 烷基 )SO2N(C1-C4 烷基 )- 所代替。
     在一种实施方式中， R ′是 3-8 元饱和、 部分不饱和或完全不饱和的单环， 具有 0-3 个独立选自氮、 氧或硫的杂原子， 其中 R ′可选地被至多 3 个选自卤代基、 CN、 CF3、 CHF2、 OCF3、 OCHF2 或 C1-C6 烷基的取代基取代， 其中所述 C1-C6 烷基的至多两个亚甲基单 元可选地被 -CO-、 -CONH(C1-C4 烷基 )-、 -CO2-、 -OCO-、 -N(C1-C4 烷基 )CO2-、 -O-、 -N(C1-C4 烷 基 )CON(C1-C4 烷 基 )-、 -OCON(C1-C4 烷 基 )-、 -N(C1-C4 烷 基 )CO-、 -S-、 -N(C1-C4 烷 基 )-、 -SO2N(C1-C4 烷基 )-、 N(C1-C4 烷基 )SO2- 或 -N(C1-C4 烷基 )SO2N(C1-C4 烷基 )- 所代替。
     在一种实施方式中， R′是 8-12 元饱和、 部分不饱和或完全不饱和的二环环系， 具有 0-5 个独立选自氮、 氧或硫的杂原子， 其中 R′可选地被至多 3 个选自卤代基、 CN、 CF3、 CHF2、 OCF3、 OCHF2 或 C1-C6 烷基的取代基取代， 其中所述 C1-C6 烷基的至多两个亚甲基单 元可选地被 -CO-、 -CONH(C1-C4 烷基 )-、 -CO2-、 -OCO-、 -N(C1-C4 烷基 )CO2-、 -O-、 -N(C1-C4 烷 基 )CON(C1-C4 烷 基 )-、 -OCON(C1-C4 烷 基 )-、 -N(C1-C4 烷 基 )CO-、 -S-、 -N(C1-C4 烷 基 )-、 -SO2N(C1-C4 烷基 )-、 N(C1-C4 烷基 )SO2- 或 -N(C1-C4 烷基 )SO2N(C1-C4 烷基 )- 所代替。
     在一种实施方式中， 两次出现的 R ′与它们所键合的原子一起构成可选被取代 的 3-12 元饱和、 部分不饱和或完全不饱和的单环或二环， 具有 0-4 个独立选自氮、 氧或硫 的杂原子， 其中 R′可选地被至多 3 个选自卤代基、 CN、 CF3、 CHF2、 OCF3、 OCHF2 或 C1-C6 烷基 的取代基取代， 其中所述 C1-C6 烷基的至多两个亚甲基单元可选地被 -CO-、 -CONH(C1-C4 烷 基 )-、 -CO2-、 -OCO-、 -N(C1-C4 烷基 )CO2-、 -O-、 -N(C1-C4 烷基 )CON(C1-C4 烷基 )-、 -OCON(C1-C4 烷基 )-、 -N(C1-C4 烷基 )CO-、 -S-、 -N(C1-C4 烷基 )-、 -SO2N(C1-C4 烷基 )-、 N(C1-C4 烷基 ) SO2- 或 -N(C1-C4 烷基 )SO2N(C1-C4 烷基 )- 所代替。
     按照一种实施方式， 本发明提供式 IIA 或式 IIB 化合物 ：
     按照另一种实施方式， 本发明提供式 IIIA、 式 IIIB、 式 IIIC、 式 IIID 或式 IIIE 化合物 ：
     其中每个 X1、 X2、 X3、 X4 和 X5 独立地选自 CH 或 N ； 且 X6 是 O、 S 或 NR′。 在一种实施方式中， 式 IIIA、 式 IIIB、 式 IIIC、 式 IIID 或式 IIIE 化合物具有 y 次出现的取代基 X-RX， 其中 y 是 0-4。或者， y 是 1。或者， y 是 2。
     在式 IIIA 的有些实施方式中， X1、 X2、 X3、 X4 和 X5 与 WRW 和 m 一起是可选被取代的 苯基。
     在式 IIIA 的有些实施方式中， X1、 X2、 X3、 X4 和 X5 一起是可选被取代的环， 选自 ：
     在式 IIIB、 式 IIIC、 式 IIID 或式 IIIE 的有些实施方式中， X1、 X2、 X3、 X4、 X5 或 X6 与 环 A2 一起是可选被取代的环， 选自 ：
     在有些实施方式中， RW 选自卤代基、 氰基、 CF3、 CHF2、 OCHF2、 Me、 Et、 CH(Me)2、 CHMeEt、正丙基、 叔丁基、 OMe、 OEt、 OPh、 O- 氟苯基、 O- 二氟苯基、 O- 甲氧基苯基、 邻 - 甲苯基、 O- 苄 基、 SMe、 SCF3、 SCHF2、 SEt、 CH2CN、 NH2、 NHMe、 N(Me)2、 NHEt、 N(Et)2、 C(O)CH3、 C(O)Ph、 C(O)NH2、 SPh、 SO2-( 氨基 - 吡啶基 )、 SO2NH2、 SO2Ph、 SO2NHPh、 SO2-N- 吗啉代基、 SO2-N- 吡咯烷基、 N- 吡 咯基、 N- 吗啉代基、 1- 哌啶基、 苯基、 苄基、 ( 环己基 - 甲基氨基 ) 甲基、 4- 甲基 -2， 4- 二 氢 - 吡唑 -3- 酮 -2- 基、 苯并咪唑 -2- 基、 呋喃 -2- 基、 4- 甲基 -4H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基、 3-(4′ - 氯苯基 )-[1， 2， 4]
     二唑 -5- 基、 NHC(O)Me、 NHC(O)Et、 NHC(O)Ph 或 NHSO2Me。在有些实施方式中， X 和 RX 一起是 Me、 Et、 卤代基、 CN、 CF3、 OH、 OMe、 OEt、 SO2N(Me) ( 氟代苯基 )、 SO2-(4- 甲基 - 哌啶 -1- 基或 SO2-N- 吡咯烷基。
     按照另一种实施方式， 本发明提供式 IVA、 式 IVB 或式 IVC 化合物 ：
     在一种实施方式中， 式 IVA、 式 IVB 和式 IVC 化合物具有 y 次出现的取代基 X-RX， 其中 y 是 0-4。或者， y 是 1。或者， y 是 2。
     在一种实施方式中， 本发明提供式 IVA、 式 IVB 和式 IVC 化合物， 其中 X 是价键， 且 X R 是氢。
     在一种实施方式中， 本发明提供式 IVB 和式 IVC 化合物， 其中环 A2 是可选被取代 的饱和、 不饱和或芳族七元环， 具有 0-3 个选自 O、 S 或 N 的杂原子。示范性环包括氮杂环庚 烷基、 5， 5- 二甲基氮杂环庚烷基等。
     在一种实施方式中， 本发明提供式 IVB 和式 IVC 化合物， 其中环 A2 是可选被取代 的饱和、 不饱和或芳族六元环， 具有 0-3 个选自 O、 S 或 N 的杂原子。示范性环包括哌啶基、 4， 4- 二甲基哌啶基等。
     在一种实施方式中， 本发明提供式 IVB 和式 IVC 化合物， 其中环 A2 是可选被取代 的饱和、 不饱和或芳族五元环， 具有 0-3 个选自 O、 S 或 N 的杂原子。
     在一种实施方式中， 本发明提供式 IVB 和式 IVC 化合物， 其中环 A2 是可选被取代 的五元环， 具有一个氮原子， 例如吡咯基或吡咯烷基。
     按照式 IVA 的一种实施方式， 提供下列式 VA-1 化合物 ：
     其 中 每 个 WRW2 和 WRW4 独 立 地 选 自 氢、 CN、 CF3、 卤 代 基、 C1-C6 直 链 或 支 链 烷 基、 3-12 元 环 脂 族 基、 苯 基、 C5-C10 杂 芳 基 或 C3-C7 杂 环 基， 其中所述杂芳基或杂环基 W2 具 有 至 多 3 个 选 自 O、 S 或 N 的 杂 原 子， 其 中 所 述 WR 和 WRW4 独 立 地 和 可 选 地 被 至 多 三个选自如下的取代基取代 ： -OR ′、 -CF3、 -OCF3、 SR ′、 S(O)R ′、 SO2R ′、 -SCF3、 卤代 基、 CN、 -COOR ′、 -COR ′、 -O(CH2)2N(R ′ )(R ′ )、 -O(CH2)N(R ′ )(R ′ )、 -CON(R ′ ) (R ′ )、 -(CH2)2OR ′、 -(CH2)OR ′、 CH2CN、 可 选 被 取 代 的 苯 基 或 苯 氧 基、 -N(R ′ ) (R′ )、 -NR′ C(O)OR′、 -NR′ C(O)R′、 -(CH2)2N(R′ )(R′ ) 或 -(CH2)N(R′ )(R′ ) ； 而 W5
     WR 选 自 氢、 -OH、 NH2、 CN、 CHF2、 NHR ′、 N(R ′ )2、 -NHC(O)R ′、 -NHC(O)OR ′、 NHSO2R′、 -OR′、 CH2OH、 CH2N(R′ )2、 C(O)OR′、 SO2NHR′、 SO2N(R′ )2 或 CH2NHC(O)OR′。 W4 W5 含有 O-3 个选自 N、 O 或 S 的杂原子， 其中所述环可选 或者 WR 和 WR 一起构成 5-7 元环， W 地被至多三个 WR 取代基取代。
     在一种实施方式中， 式 VA-1 化合物具有 y 次出现的 X-RX， 其中 y 是 0-4。在一种 实施方式中， y 是 0。
     在一种实施方式中， 本发明提供式 VA-1 化合物， 其中 X 是价键， 且 RX 是氢。
     在一种实施方式中， 本发明提供式 VA-1 化合物， 其中 ： W2 W4
     其中每个 WR 和 WR 独立地选自氢、 CN、 CF3、 卤代基、 C1-C6 直链或支链烷基、 3-12 W2 W4 元环脂族基或苯基， 其中所述 WR 和 WR 独立地和可选地被至多三个选自如下的取代基取 代： -OR′、 -CF3、 -OCF3、 -SCF3、 卤代基、 -COOR′、 -COR′、 -O(CH2)2N(R′ )(R′ )、 -O(CH2) N(R′ )(R′ )、 -CON(R′ )(R′ )、 -(CH2)2OR′、 -(CH2)OR′、 可选被取代的苯基、 -N(R′ ) (R′ )、 -NC(O)OR′、 -NC(O)R′、 -(CH2)2N(R′ )(R′ ) 或 -(CH2)N(R′ )(R′ ) ； 而 W5
     WR 选 自 氢、 -OH、 NH2、 CN、 NHR ′、 N(R ′ )2、 -NHC(O)R ′、 -NHC(O)OR ′、 NHSO2R′、 -OR′、 CH2OH、 C(O)OR′、 SO2NHR′或 CH2NHC(O)O-(R′ )。
     在一种实施方式中， 本发明提供式 VA-1 化合物， 其中 ： W2
     WR 是苯基环， 可选地被至多三个选自如下的取代基取代 ： -OR ′、 -CF3、 -OCF3、 SR′、 S(O)R′、 SO2R′、 -SCF3、 卤代基、 CN、 -COOR′、 -COR′、 -O(CH2)2N(R′ )(R′ )、 -O(CH2)
     N(R′ )(R′ )、 -CON(R′ )(R′ )、 -(CH2)2OR′、 -(CH2)OR′、 CH2CN、 可选被取代的苯基或苯氧 基、 -N(R′ )(R′ )、 -NR′ C(O)OR′、 -NR′ C(O)R′、 -(CH2)2N(R′ )(R′ ) 或 -(CH2)N(R′ ) (R′ ) ；
     WRW4 是 C1-C6 直链或支链烷基 ； 而 W5
     WR 是 OH。
     在一种实施方式中， 每个 WRW2 和 WRW4 独立地选自 CF3 或卤代基。在一种实施方式 中， 每个 WRW2 和 WRW4 独立地选自可选被取代的氢、 C1-C6 直链或支链烷基。在某些实施方式 W2 W4 中， 每个 WR 和 WR 独立地选自可选被取代的正丙基、 异丙基、 正丁基、 仲丁基、 叔丁基、 1， 1- 二甲基 -2- 羟基乙基、 1， 1- 二甲基 -2-( 乙氧羰基 )- 乙基、 1， 1- 二甲基 -3-( 叔丁氧羰基 - 氨基 ) 丙基或正戊基。
     在一种实施方式中， 每个 WRW2 和 WRW4 独立地选自可选被取代的 3-12 元环脂族 基。这类环脂族基的示范性实施方式包括环戊基、 环己基、 环庚基、 降冰片基、 金刚烷基、 [2.2.2] 二环 - 辛基、 [2.3.1] 二环 - 辛基或 [3.3.1] 二环 - 壬基。
     在某些实施方式中， WRW2 是氢， 且 WRW4 是 C1-C6 直链或支链烷基。在某些实施方式 中， WRW4 选自甲基、 乙基、 丙基、 正丁基、 仲丁基或叔丁基。 W4
     在某些实施方式中， WR 是氢， 且 WRW2 是 C1-C6 直链或支链烷基。在某些实施方式 中， WRW2 选自甲基、 乙基、 丙基、 正丁基、 仲丁基、 叔丁基或正戊基。 W2 W4
     在某些实施方式中， 每个 WR 和 WR 是 C1-C6 直链或支链烷基。在某些实施方式 W2 W4 中， 每个 WR 和 WR 选自甲基、 乙基、 丙基、 正丁基、 仲丁基、 叔丁基或戊基。 W5
     在 一 种 实 施 方 式 中， WR 选 自 氢、 CHF2、 NH2、 CN、 NHR ′、 N(R ′ )2、 W5 CH2N(R′ )2、 -NHC(O)R′、 -NHC(O)OR′、 -OR′、 C(O)OR′或 SO2NHR′。或者， WR 是 -OR′， 例如 OH。
     在 某 些 实 施 方 式 中， WRW5 选 自 氢、 NH2、 CN、 CHF2、 NH(C1-C6 烷 基 )、 N(C1-C6 烷 基 )2、 -NHC(O)(C1-C6 烷基 )、 -CH2NHC(O)O(C1-C6 烷基 )、 -NHC(O)O(C1-C6 烷基 )、 -OH、 -O(C1-C6 W5 烷基 )、 C(O)O(C1-C6 烷基 )、 CH2O(C1-C6 烷基 ) 或 SO2NH2。 在另一种实施方式中， WR 选自 -OH、 OMe、 NH2、 -NHMe、 -N(Me)2、 -CH2NH2、 CH2OH、 NHC(O)OMe、 NHC(O)OEt、 CN、 CHF2、 -CH2NHC(O)O( 叔 丁基 )、 -O-( 乙氧基乙基 )、 -O-( 羟基乙基 )、 -C(O)OMe 或 -SO2NH2。
     在一种实施方式中， 式 VA-1 化合物具有一个、 优选多个、 或者更优选全部下列特 性：
     i)WRW2 是氢 ；
     ii)WRW4 是 C1-C6 直链或支链烷基或者单环或二环脂族基 ； 和 W5
     iii)WR 选自氢、 CN、 CHF2、 NH2、 NH(C1-C6 烷基 )、 N(C1-C6 烷基 )2、 -NHC(O)(C1-C6 烷 基 )、 -NHC(O)O(C1-C6 烷基 )、 -CH2C(O)O(C1-C6 烷基 )、 -OH、 -O(C1-C6 烷基 )、 C(O)O(C1-C6 烷 基 ) 或 SO2NH2。
     在一种实施方式中， 式 VA-1 化合物具有一个、 优选多个、 或者更优选全部下列特 性：
     i)WRW2 是卤代基、 C1-C6 烷基、 CF3、 CN 或可选被至多 3 个选自如下的取代基取代的 苯基 ： C1-C4 烷基、 -O(C1-C4 烷基 ) 或卤代基 ； W4
     ii)WR 是 CF3、 卤代基、 C1-C6 烷基或 C6-C10 环脂族基 ； 和 W5
     iii)WR 是 OH、 NH2、 NH(C1-C6 烷基 ) 或 N(C1-C6 烷基 )。
     在一种实施方式中， X-RX 位于喹啉环的 6- 位。在某些实施方式中， X-RX 一起是 C1-C6 烷基、 -O-(C1-C6 烷基 ) 或卤代基。
     在一种实施方式中， X-RX 位于喹啉环的 5- 位。 在某些实施方式中， X-RX 一起是 -OH。
     在另一种实施方式中， 本发明提供式 VA-1 化合物， 其中 WRW4 和 WRW5 一起构成 5-7 元环， 含有 0-3 个选自 N、 O 或 S 的杂原子， 其中所述环可选地被至多三个 WRW 取代基取代。
     在某些实施方式中， WRW4 和 WRW5 一起构成可选被取代的 5-7 元饱和、 不饱和或芳族 W4 W5 环， 含有 0 个杂原子。在其他实施方式中， WR 和 WR 一起构成可选被取代的 5-7 元环， 含 W4 W5 有 1-3 个选自 N、 O 或 S 的杂原子。在某些其他实施方式中， WR 和 WR 一起构成可选被取代的饱和、 不饱和或芳族 5-7 元环， 含有 1 个氮杂原子。在某些其他实施方式中， WRW4 和 WRW5 一起构成可选被取代的 5-7 元环， 含有 1 个氧杂原子。
     在另一种实施方式中， 本发明提供式 V-A-2 化合物 ：
     其中 ：
     Y 是 CH2、 C(O)O、 C(O) 或 S(O)2 ；
     m 是 0-4 ； 和 X
     X、 R、 W 和 RW 是如上所定义的。
     在一种实施方式中， 式 VA-2 化合物具有 y 次出现的 X-RX， 其中 y 是 0-4。在一种 实施方式中， y 是 0。或者， y 是 1。或者， y 是 2。
     在一种实施方式中， Y 是 C(O)。 在另一种实施方式中， Y 是 C(O)O。 或者， Y 是 S(O)2。 或者， Y 是 CH2。
     在一种实施方式中， m 是 1 或 2。或者， m 是 1。或者， m 是 0。
     在一种实施方式中， W 是价键。
     在另一种实施方式中， RW 是 C1-C6 脂族基、 卤代基、 CF3 或可选被如下取代基取代的 苯基 ： C1-C6 烷基、 卤代基、 氰基或 CF3， 其中所述 C1-C6 脂族基或 C1-C6 烷基的至多两个亚甲基 单元可选地被 -CO-、 -CONR′ -、 -CO2-、 -OCO-、 -NR′ CO2-、 -O-、 -NR′ CONR′ -、 -OCONR′ -、 -NR ′ CO-、 -S-、 -NR′ -、 -SO2NR′ -、 NR′ SO2- 或 -NR′ SO2NR′ - 所代替。 在另一种实施方式中， W 上述 R′是 C1-C4 烷基。WR 的示范性实施方式包括甲基、 乙基、 丙基、 叔丁基或 2- 乙氧基苯 基。
     在另一种实施方式中， Y-RW 中的 RW 是 C1-C6 脂族基， 可选地被 N(R″ )2 取代， 其中 R″是氢、 C1-C6 烷基， 或者两个 R″一起构成 5-7 元杂环， 具有至多 2 个另外选自 O、 S 或 NR′ 的杂原子。示范性的这类杂环包括吡咯烷基、 哌啶基、 吗啉基或硫吗啉基。
     在另一种实施方式中， 本发明提供式 V-A-3 化合物 ：
     其中 ： Q是W； RQ 是 RW ；m 是 0-4 ；
     n 是 0-4 ； 和 X
     X、 R、 W 和 RW 是如上所定义的。
     在一种实施方式中， 式 VA-3 化合物具有 y 次出现的 X-RX， 其中 y 是 0-4。在一种 实施方式中， y 是 0。或者， y 是 1。或者， y 是 2。
     在一种实施方式中， n 是 0-2。
     在另一种实施方式中， m 是 0-2。在一种实施方式中， m 是 0。在一种实施方式中， m 是 1。或者， m 是 2。
     在一种实施方式中， QRQ 一起是卤代基、 CF3、 OCF3、 CN、 C1-C6 脂族基、 O-C1-C6 脂族 基、 O- 苯基、 NH(C1-C6 脂族基 ) 或 N(C1-C6 脂族基 )2， 其中所述脂族基和苯基可选地被至多 三个选自 C1-C6 烷基、 O-C1-C6 烷基、 卤代基、 氰基、 OH 或 CF3 的取代基取代， 其中所述 C1-C6 脂族基或 C1-C6 烷基的至多两个亚甲基单元可选地被 -CO-、 -CONR′、 -CO2-、 -OCO-、 -NR′ CO2-、 -O-、 -NR′ CONR′ -、 -OCONR′ -、 -NR′ CO-、 -S-、 -NR′ -、 SOR′、 SO2R′、 -SO2NR′ -、 NR′ SO2- 或 -NR′ SO2NR′ - 所代替。在另一种实施方式中， 上述 R′是 C1-C4 烷基。 Q
     示范性 QR 包括甲基、 异丙基、 仲丁基、 羟甲基、 CF3、 NMe2、 CN、 CH2CN、 氟、 氯、 OEt、 OMe、 SMe、 OCF3、 OPh、 C(O)OMe、 C(O)O-iPr、 S(O)Me、 NHC(O)Me 或 S(O)2Me。
     在另一种实施方式中， 本发明提供式 V-A-4 化合物 ：
     其中 X、 RX 和 RW 是如上所定义的。
     在一种实施方式中， 式 VA-4 化合物具有 y 次出现的 X-RX， 其中 y 是 0-4。在一种 实施方式中， y 是 0。或者， y 是 1。或者， y 是 2。 W
     在一种实施方式中， R 是 C1-C12 脂族基、 C5-C10 环脂族基或 C5-C7 杂环， 其中所述脂 族基、 环脂族基或杂环可选地被至多三个选自 C1-C6 烷基、 卤代基、 氰基、 氧代基、 OH 或 CF3 的 取代基取代， 其中所述 C1-C6 脂族基或 C1-C6 烷基的至多两个亚甲基单元可选地被 -CO-、 -CON R′ -、 -CO2-、 -OCO-、 -NR′ CO2-、 -O-、 -NR′ CONR′ -、 -OCONR′ -、 -NR′ CO-、 -S-、 -NR′ -、 SOR′、 SO2R′、 -SO2NR′ -、 NR′ SO2- 或 -NR′ SO2NR′ - 所代替。在另一种实施方式中， 上述 R′ 是 C1-C4 烷基。
     示范性 RW 包括甲基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 正丁基、 仲丁基、 叔丁基、 正戊基、 乙烯 基、 氰甲基、 羟甲基、 羟基乙基、 羟基丁基、 环己基、 金刚烷基或 -C(CH3)2-NHC(O)O-T， 其中 T 是 C1-C4 烷基、 甲氧基乙基或四氢呋喃基甲基。
     在另一种实施方式中， 本发明提供式 V-A-5 化合物 ：
     其中 ：
     m 是 0-4 ； 和 X
     X、 R、 W、 RW 和 R′是如上所定义的。
     在一种实施方式中， 式 VA-5 化合物具有 y 次出现的 X-RX， 其中 y 是 0-4。在一种 实施方式中， y 是 0。或者， y 是 1。或者， y 是 2。
     在一种实施方式中， m 是 0-2。或者， m 是 1。或者， m 是 2。
     在另一种实施方式中， 两个 R′都是氢。 或者， 一个 R′是氢， 另一个 R′是 C1-C4 烷 基， 例如甲基。或者， 两个 R′都是 C1-C4 烷基， 例如甲基。
     在另一种实施方式中， m 是 1 或 2， 且 RW 是卤代基、 CF3、 CN、 C1-C6 脂族基、 O-C1-C6 脂 族基或苯基， 其中所述脂族基和苯基可选地被至多三个选自 C1-C6 烷基、 O-C1-C6 烷基、 卤代 基、 氰基、 OH 或 CF3 的取代基取代， 其中所述 C1-C6 脂族基或 C1-C6 烷基的至多两个亚甲基单
     元可选地被 -CO-、 -CONR′ -、 -CO2-、 -OCO-、 -NR′ CO2-、 -O-、 -NR′ CONR′ -、 -OCONR′ -、 -NR′ CO-、 -S-、 -NR′ -、 -SO2NR′ -、 NR′ SO2- 或 -NR′ SO2NR′ - 所代替。在另一种实施方式中， 上述 R′是 C1-C4 烷基。
     RW 的示范性实施方式包括氯、 CF3、 OCF3、 甲基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 正丁基、 叔丁 基、 甲氧基、 乙氧基、 丙氧基或 2- 乙氧基苯基。
     在另一种实施方式中， 本发明提供式 V-A-6 化合物 ：
     其中 ：
     环 B 是 5-7 元单环或二环的杂环或杂芳基环， 可选地被至多 n 次出现的 -Q-RQ 取 代， 其中 n 是 0-4， 且 Q 和 RQ 是如上所定义的 ； 和 Q X W
     Q、 R、 X、 R、 W 和 R 是如上所定义的。
     在一种实施方式中， 式 VA-6 化合物具有 y 次出现的 X-RX， 其中 y 是 0-4。在一种 实施方式中， y 是 0。或者， y 是 1。或者， y 是 2。
     在一种实施方式中， m 是 0-2。或者， m 是 0。或者， m 是 1。
     在一种实施方式中， n 是 0-2。或者， n 是 0。或者， n 是 1。
     在另一种实施方式中， 环 B 是 5-7 元单环杂环， 具有至多 2 个选自 O、 S 或 N 的杂原 Q 子， 可选地被至多 n 次出现的 -Q-R 取代。示范性杂环包括 N- 吗啉基、 N- 哌啶基、 4- 苯甲
     酰基 - 哌嗪 -1- 基、 吡咯烷 -1- 基或 4- 甲基 - 哌啶 -1- 基。
     在另一种实施方式中， 环 B 是 5-6 元单环杂芳基环， 具有至多 2 个选自 O、 S或N的 Q 杂原子， 可选地被至多 n 次出现的 -Q-R 取代。示范性的这类环包括苯并咪唑 -2- 基、 5- 甲 基 - 呋喃 -2- 基、 2， 5- 二甲基 - 吡咯 -1- 基、 吡啶 -4- 基、 吲哚 -5- 基、 吲哚 -2- 基、 2， 4- 二 甲氧基 - 嘧啶 -5- 基、 呋喃 -2- 基、 呋喃 -3- 基、 2- 酰基 - 噻吩 -2- 基、 苯并噻吩 -2- 基、 4- 甲基 - 噻吩 -2- 基、 5- 氰基 - 噻吩 -2- 基、 3- 氯 -5- 三氟甲基 - 吡啶 -2- 基。
     在另一种实施方式中， 本发明提供式 V-B-1 化合物 ：
     其中 ：Q1 和 Q3 之一是 N(WRW)， Q1 和 Q3 的另一个是选自 O、 S 或 N(WRW) ；
     Q2 是 C(O)、 CH2-C(O)、 C(O)-CH2、 CH2、 CH2-CH2、 CF2 或 CF2-CF2 ；
     m 是 0-3 ； 和 X
     X、 W、 R 和 RW 是如上所定义的。
     在一种实施方式中， 式 V-B-1 化合物具有 y 次出现的 X-RX， 其中 y 是 0-4。在一种 实施方式中， y 是 0。或者， y 是 1。或者， y 是 2。 W
     在一种实施方式中， Q3 是 N(WR ) ； 示范性 WRW 包括氢、 C1-C6 脂族基、 C(O)C1-C6 脂族 基或 C(O)OC1-C6 脂族基。
     在另一种实施方式中， Q3 是 N(WRW)， Q2 是 C(O)、 CH2、 CH2-CH2， 且 Q1 是 O。
     在另一种实施方式中， 本发明提供式 V-B-2 化合物 ：
     其中 ：
     RW1 是氢或 C1-C6 脂族基 ；
     每个 RW3 是氢或 C1-C6 脂族基 ； 或者
     两个 RW3 一起构成 C3-C6 环烷基或杂环， 具有至多两个选自 O、 S 或 NR′的杂原子， W 其中所述环可选地被至多两个 WR 取代基取代 ；
     m 是 0-4 ； 和 X
     X、 R、 W 和 RW 是如上所定义的。
     在一种实施方式中， 式 V-B-2 化合物具有 y 次出现的 X-RX， 其中 y 是 0-4。在一种
     实施方式中， y 是 0。或者， y 是 1。或者， y 是 2。 W1
     在一种实施方式中， WR 是氢、 C1-C6 脂族基、 C(O)C1-C6 脂族基或 C(O)OC1-C6 脂族 基。
     在另一种实施方式中， 每个 RW3 是氢、 C1-C4 烷基。或者， 两个 RW3 一起构成 C3-C6 环 脂族环或 5-7 元杂环， 具有至多两个选自 O、 S 或 N 的杂原子， 其中所述环脂族基或杂环可选 W1 地被至多三个选自 WR 的取代基取代。 示范性的这类环包括环丙基、 环戊基、 可选被取代的 哌啶基等。
     在另一种实施方式中， 本发明提供式 V-B-3 化合物 ：
     其中 ：
     Q4 是价键、 C(O)、 C(O)O 或 S(O)2 ；
     RW1 是氢或 C1-C6 脂族基 ；
     m 是 0-4 ； 和
     X、 W、 RW 和 RX 是如上所定义的。
     在一种实施方式中， 式 V-B-3 化合物具有 y 次出现的 X-RX， 其中 y 是 0-4。在一种 实施方式中， y 是 0。
     在一种实施方式中， Q4 是 C(O)。或者， Q4 是 C(O)O。在另一种实施方式中， RW1 是 C1-C6 烷基。示范性 RW1 包括甲基、 乙基或叔丁基。
     在另一种实施方式中， 本发明提供式 V-B-4 化合物 ：
     其中 ：
     m 是 0-4 ； 和 X
     X、 R、 W 和 RW 是如上所定义的。
     在一种实施方式中， 式 V-B-4 化合物具有 y 次出现的 X-RX， 其中 y 是 0-4。在一种 实施方式中， y 是 0。或者， y 是 1。或者， y 是 2。
     在一种实施方式中， m 是 0-2。或者， m 是 0。或者， m 是 1。
     在另一种实施方式中， 所述环脂族环是 5- 元环。或者， 所述环是 6- 元环。
     在另一种实施方式中， 本发明提供式 V-B-5 化合物 ：
     其中 ：
     环 A2 是苯基或 5-6 元杂芳基环， 其中环 A2 和与之稠合的苯基环一起具有至多 4 个 W 独立选自 WR 的取代基 ；
     m 是 0-4 ； 和 W
     X、 W、 R 和 RX 是如上所定义的。
     在一种实施方式中， 式 V-B-5 化合物具有 y 次出现的 X-RX， 其中 y 是 0-4。在一种 实施方式中， y 是 0。或者， y 是 1。或者， y 是 2。
     在一种实施方式中， 环 A2 是可选被取代的 5- 元环， 选自吡咯基、 呋喃基、 噻吩基、
     吡唑基、 咪唑基、 噻唑基、 唑基、 噻二唑基、 二唑基或三唑基。
     在一种实施方式中， 环 A2 是可选被取代的 5- 元环， 选自吡咯基、 吡唑基、 噻二唑基、 咪唑基、 唑基或三唑基。示范性的这类环包括 ：
     其中所述环可选地是如上所述取代的。
     在另一种实施方式中， 环 A2 是可选被取代的 6- 元环。示范性的这类环包括吡啶 基、 吡嗪基或三嗪基。在另一种实施方式中， 所述环是可选被取代的吡啶基。
     在一种实施方式中， 环 A2 是苯基。
     在另一种实施方式中， 环 A2 是吡咯基、 吡唑基、 吡啶基或噻二唑基。
     式 V-B-5 中示范性 W 包括价键、 C(O)、 C(O)O 或 C1-C6 亚烷基。 W
     式 V-B-5 中 示 范 性 R 包 括 氰 基、 卤 代 基、 C1-C6 脂 族 基、 C3-C6 环 脂 族 基、 芳 基、 5-7 元杂环， 具有至多两个选自 O、 S 或 N 的杂原子， 其中所述脂族基、 苯基和杂环独立地和 可选地被至多三个选自 C1-C6 烷基、 O-C1-C6 烷基、 卤代基、 氰基、 OH 或 CF3 的取代基取代， 其中所述 C1-C6 脂族基或 C1-C6 烷基的至多两个亚甲基单元可选地被 -CO-、 -CONR′ -、 -CO -OCO-、 -NR′ CO2-、 -O-、 -NR′ CONR′ -、 -OCONR′ -、 -NR′ CO-、 -S-、 -NR′ -、 -SO2NR′ -、 2-、 NR′ SO2- 或 -NR′ SO2NR′ - 所代替。在另一种实施方式中， 上述 R′是 C1-C4 烷基。
     在一种实施方式中， 本发明提供式 V-B-5-a 化合物 ：
     其中 ：
     G4 是氢、 卤代基、 CN、 CF3、 CHF2、 CH2F、 可选被取代的 C1-C6 脂族基、 芳基 -C1-C6 烷基 或苯基， 其中 G4 可选地被至多 4 个 WRW 取代基取代 ； 其中所述 C1-C6 脂族基或 C1-C6 烷基的 至多两个亚甲基单元可选地被 -CO-、 -CONR′ -、 -CO2-、 -OCO-、 -NR′ CO2-、 -O-、 -NR′ CONR′ 、 -OCONR′ -、 -NR′ CO-、 -S-、 -NR′ -、 -SO2NR′ -、 NR′ SO2- 或 -NR′ SO2NR′ - 所代替 ；
     G5 是氢或者可选被取代的 C1-C6 脂族基 ；
     其中所述吲哚环系进一步可选地被至多 3 个独立选自 WRW 的取代基取代。
     在一种实施方式中， 式 V-B-5-a 化合物具有 y 次出现的 X-RX， 其中 y 是 0-4。在一 种实施方式中， y 是 0。或者， y 是 1。或者， y 是 2。
     在一种实施方式中， G4 是氢。或者， G5 是氢。
     在另一种实施方式中， G4 是氢， 且 G5 是 C1-C6 脂族基， 其中所述脂族基可选地被 C1-C6 烷基、 卤代基、 氰基或 CF3 取代， 其中所述 C1-C6 脂族基或 C1-C6 烷基的至多两个亚甲基 单元可选地被 -CO-、 -CONR′ -、 -CO2-、 -OCO-、 -NR′ CO2-、 -O-、 -NR′ CONR′ -、 -OCONR′ -、 -NR ′ CO-、 -S-、 -NR′ -、 -SO2NR′ -、 NR′ SO2- 或 -NR′ SO2NR′ - 所代替。 在另一种实施方式中， 上述 R′是 C1-C4 烷基。
     在另一种实施方式中， G4 是氢， 且 G5 是氰基、 甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基、 仲丁 基、 叔丁基、 氰甲基、 甲氧基乙基、 CH2C(O)OMe、 (CH2)2-NHC(O)O- 叔丁基或环戊基。
     在另一种实施方式中， G5 是氢， 且 G4 是卤代基、 C1-C6 脂族基或苯基， 其中所述脂族 基或苯基可选地被 C1-C6 烷基、 卤代基、 氰基或 CF3 取代， 其中所述 C1-C6 脂族基或 C1-C6 烷基 的至多两个亚甲基单元可选地被 -CO-、 -CONR′ -、 -CO2-、 -OCO-、 -NR′ CO2-、 -O-、 -NR′ CONR ′ -、 -OCONR′ -、 -NR′ CO-、 -S-、 -NR′ -、 -SO 2NR′ -、 NR′ SO2- 或 -NR′ SO2NR′ - 所代替。 在另一种实施方式中， 上述 R′是 C1-C4 烷基。
     在另一种实施方式中， G5 是氢， 且 G4 是卤代基、 CF3、 乙氧羰基、 叔丁基、 2- 甲氧基 苯基、 2- 乙氧基苯基、 (4-C(O)NH(CH2)2-NMe2)- 苯基、 2- 甲氧基 -4- 氯 - 苯基、 吡啶 -3- 基、 4- 异丙基苯基、 2， 6- 二甲氧基苯基、 仲丁基氨基羰基、 乙基、 叔丁基或哌啶 -1- 基羰基。
     在另一种实施方式中， G4 和 G5 都是氢， 所述吲哚环的氮环原子被 C1-C6 脂族基、 C(O)(C1-C6 烷基 ) 或苄基取代， 其中所述脂族基或苄基可选地被 C1-C6 烷基、 卤代基、 氰基或 CF3 取代， 其中所述 C1-C6 脂族基或 C1-C6 烷基的至多两个亚甲基单元可选地被 -CO-、 -CONR′ -、 -CO2-、 -OCO-、 -NR′ CO2-、 -O-、 -NR′ CONR′ -、 -OCONR′ -、 -NR′ CO-、 -S-、 -NR′ -、 -SO2NR′ -、 NR′ SO2- 或 -NR′ SO2NR′ - 所代替。在另一种实施方式中， 上述 R′是 C1-C4 烷基。
     在另一种实施方式中， G4 和 G5 都是氢， 所述吲哚环的氮环原子被酰基、 苄基、 C(O) CH2N(Me)C(O)CH2NHMe 或乙氧羰基取代。
     在另一种实施方式中， 本发明提供式 I′化合物 ：
     或其药学上可接受的盐，
     其中 R1、 R2、 R3、 R4、 R5、 R6、 R7 和 Ar1 是如上关于式 I′化合物所定义的。
     在一种实施方式中， 式 I′化合物中的每个 R1、 R2、 R3、 R4、 R5、 R6、 R7 和 Ar1 独立地是 如上关于式 I 化合物的任意实施方式所定义的。
     代表性的本发明化合物如下表 1 所述。
     表1
     No. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 名称 N-[5-(5- 氯 -2- 甲氧基 - 苯基 )-1H- 吲哚 -6- 基 ]-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-(3- 甲氧基 -4- 叔丁基 - 苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-[2-(2- 甲氧基苯氧基 )-5-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-(2- 吗啉代苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-[4-(2- 羟基 -1， 1- 二甲基 - 乙基 ) 苯基 ]-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-[3-( 羟甲基 )-4- 叔丁基 - 苯基 ]-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-(4- 苯甲酰氨基 -2， 5- 二乙氧基 - 苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-(3- 氨基 -4- 乙基 - 苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 4- 氧代 -N-(3- 氨磺酰基苯基 )-1H- 喹啉 -3- 羧酰胺
     72CN 101935301 A181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205说明书38/218 页4- 氧代 -N-[2-( 对 - 甲苯基 ) 苯基 ]-1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-[2-(4- 氟苯基 ) 苯基 ]-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 7-[(4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 基 ) 碳酰氨基 ]-1， 2， 3， 4- 四氢喹啉 -1- 羧酸叔丁基酯 N-(1H- 吲哚 -6- 基 )-4- 氧代 -2-( 三氟甲基 )-1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-(3- 吗啉代磺酰基苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-(3- 环戊基 -1H- 吲哚 -6- 基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-(1- 乙酰基 -1H- 吲哚 -6- 基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 6-[(4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 基 ) 碳酰氨基 ]-1H- 吲哚 -5- 羧酸乙基酯 N-(4- 苄氧基苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-[2-(3- 氯 -4- 氟 - 苯基 ) 苯基 ]-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 4- 氧代 -N-(5- 喹啉基 )-1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-(3- 甲基 -2- 吡啶基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-(2， 6- 二甲氧基 -3- 吡啶基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-(4- 氰基苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-(5- 甲基 -2- 吡啶基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-[5-(3， 3- 二甲基丁酰氨基 )-2- 叔丁基 - 苯基 ]-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 4- 氧代 -N-[6-( 三氟甲基 )-3- 吡啶基 ]-1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-(4- 氟苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-[2-( 邻 - 甲苯基 ) 苯基 ]-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 1， 4- 二氢 -N-(1， 2， 3， 4- 四氢 -1- 羟基萘 -7- 基 )-4- 氧代喹啉 -3- 羧酰胺 N-(2- 氰基 -3- 甲基 - 苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-[2-(5- 氯 -2- 甲氧基 - 苯基 ) 苯基 ]-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-(1- 苄基 -1H- 吲哚 -6- 基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-(4， 4- 二甲基色满 -7- 基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-[2-(4- 甲氧基苯氧基 )-5-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺73CN 101935301 A206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217说明书39/218 页N-[2-(2， 3- 二甲基苯氧基 )-3- 吡啶基 ]-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 2-[6-[(4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 基 ) 碳酰氨基 ]-1H- 吲哚 -3- 基 ] 乙酸乙基酯 N-[4-(2- 金刚烷基 )-5- 羟基 -2- 甲基 - 苯基 ]-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-[4-( 羟甲基 ) 苯基 ]-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 2， 4- 二甲氧基 -N-(2- 苯基苯基 )- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-(2- 甲氧基 -5- 叔丁基 - 苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-[3-(3- 甲基 -5- 氧代 -1， 4- 二氢吡唑 -1- 基 ) 苯基 ]-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-[2-(2， 5- 二氯苯基 ) 苯基 ]-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-(3- 甲磺酰氨基苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 4- 氧代 -N- 苯基 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-(3H- 苯并咪唑 -2- 基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 N-(1H- 吲唑 -5- 基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺
     在另一种实施方式中， 本发明提供可用作式 I 化合物合成中间体的化合物。在一 种实施方式中， 这类化合物具有式 A-I ：或其盐， 其中 ：
     G1 是氢、 R′、 C(O)R′、 C(S)R′、 S(O)R′、 S(O)2R′、 Si(CH3)2R′、 P(O)(OR′ )3、 P(S)(OR′ )3 或 B(OR′ )2 ；
     G2 是卤代基、 CN、 CF3、 异丙基或苯基， 其中所述异丙基或苯基可选地被至多 3 个独 W W 立选自 WR 的取代基取代， 其中 W 和 R 是如上关于式 I 及其实施方式所定义的 ；
     G3 是异丙基或 C3-C10 环脂族环， 其中所述 G3 可选地被至多 3 个独立选自 WRW 的取 代基取代， 其中 W 和 RW 是如上关于式 I 及其实施方式所定义的 ；
     其条件是若 G1 是甲氧基， G3 是叔丁基， 则 G2 不是 2- 氨基 -4- 甲氧基 -5- 叔丁基 - 苯
     基。 在一种实施方式中， 本发明提供式 A-I 化合物， 其条件是若 G2 和 G3 各自是叔丁基， 则 G1 不是氢。
     在另一种实施方式中 ：
     G1 是氢 ；
     G2 是卤代基或异丙基， 其中所述异丙基可选地被至多 3 个独立选自 R′的取代基 取代 ； 和
     G3 是异丙基或 C3-C10 环脂族环， 其中所述 G3 可选地被至多 3 个独立选自 R′的取 代基取代。
     在另一种实施方式中 ：
     G1 是氢 ；
     G2 是卤代基， 优选氟 ； 和
     G3 是 C3-C10 环脂族环， 其中所述 G3 可选地被至多 3 个独立选自甲基、 乙基、 丙基或 丁基的取代基取代。
     在另一种实施方式中 ：
     G1 是氢 ；
     G2 是 CN、 卤代基或 CF3 ； 和
     G3 是异丙基或 C3-C10 环脂族环， 其中所述 G3 可选地被至多 3 个独立选自 R′的取 代基取代。
     在另一种实施方式中 ：
     G1 是氢 ；
     G2 是苯基， 可选地被至多 3 个独立选自 -OC1-C4 烷基、 CF3、 卤代基或 CN 的取代基取 代； 和
     G3 是异丙基或 C3-C10 环脂族环， 其中所述 G3 可选地被至多 3 个独立选自 R′的取 代基取代。
     示范性 G3 包括可选被取代的环戊基、 环己基、 环庚基或金刚烷基。 或者， G3 是 C3-C8 支链脂族链。示范性 G3 包括异丙基、 叔丁基、 3， 3- 二乙基 - 丙 -3- 基或 3， 3- 二乙基 -2， 2- 二甲基 - 丙 -3- 基。
     在另一种实施方式中 ：
     G1 是氢 ；
     G2 是叔丁基 ； 和
     G3 是叔丁基。
     在另一种实施方式中， 本发明提供式 A-II 化合物 ：
     或其盐， 其中 ：G4 是氢、 卤代基、 CN、 CF3、 CHF2、 CH2F、 可选被取代的 C1-C6 脂族基、 芳烷基或者可选 W 被至多 4 个 WR 取代基取代的苯基环 ；
     G5 是氢或者可选被取代的 C1-C6 脂族基 ；
     其条件是 G4 和 G5 不同时是氢 ；
     其中所述吲哚环系进一步可选地被至多 3 个独立选自 WRW 的取代基取代。
     在一种实施方式中， G4 是氢。或者， G5 是氢。
     在另一种实施方式中， G4 是氢， 且 G5 是 C1-C6 脂族基， 其中所述脂族基可选地被 C1-C6 烷基、 卤代基、 氰基或 CF3 取代， 且其中所述 C1-C6 脂族基或 C1-C6 烷基的至多两个亚甲 基单元可选地被 -CO-、 -CONR′ -、 -CO2-、 -OCO-、 -NR′ CO2-、 -O-、 -NR′ CONR′ -、 -OCONR′ -、 NR′ CO-、 -S-、 -NR′ -、 -SO2NR′ -、 NR′ SO2- 或 -NR′ SO2NR′ - 所代替。 在另一种实施方式 中， 上述 R′是 C1-C4 烷基。
     在另一种实施方式中， G4 是氢， 且 G5 是氰基、 甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基、 仲丁 基、 叔丁基、 氰甲基、 甲氧基乙基、 CH2C(O)OMe、 (CH2)2-NHC(O)O- 叔丁基或环戊基。
     在另一种实施方式中， G5 是氢， 且 G4 是卤代基、 C1-C6 脂族基或苯基， 其中所述脂族 基或苯基可选地被 C1-C6 烷基、 卤代基、 氰基或 CF3 取代， 其中所述 C1-C6 脂族基或 C1-C6 烷 基的至多两个亚甲基单元可选地被 -CO-、 -CONR′ -、 -CO2-、 -OCO-、 -NR′ CO2-、 -O-、 -NR′ CON R′ -、 -OCONR′ -、 -NR′ CO-、 -S-、 -NR′ -、 -SO2NR′ -、 NR′ SO2- 或 -NR′ SO2NR′ - 所代替。 在另一种实施方式中， 上述 R′是 C1-C4 烷基。
     在另一种实施方式中， G5 是氢， 且 G4 是卤代基、 乙氧羰基、 叔丁基、 2- 甲氧基苯基、 2- 乙氧基苯基、 4-C(O)NH(CH2)2-NMe2、 2- 甲氧基 -4- 氯 - 苯基、 吡啶 -3- 基、 4- 异丙基苯基、 2， 6- 二甲氧基苯基、 仲丁基氨基羰基、 乙基、 叔丁基或哌啶 -1- 基羰基。
     在式 A-II 的相关实施方式中， 所述吲哚环的氮环原子被 C1-C6 脂族基、 C(O)(C1-C6 烷基 ) 或苄基取代， 其中所述脂族基或苄基可选地被 C1-C6 烷基、 卤代基、 氰基或 CF3 取代， 其中所述 C1-C6 脂族基或 C1-C6 烷基的至多两个亚甲基单元可选地被 -CO-、 -CONR′ -、 -CO -OCO-、 -NR′ CO2-、 -O-、 -NR′ CONR′ -、 -OCONR′ -、 -NR′ CO-、 -S-、 -NR′ -、 -SO2NR′ -、 2-、 NR′ SO2- 或 -NR′ SO2NR′ - 所代替。在另一种实施方式中， 上述 R′是 C1-C4 烷基。
     在另一种实施方式中， 所述吲哚环的氮环原子被酰基、 苄基、 C(O)CH2N(Me)C(O) CH2NHMe 或乙氧羰基取代。
     4、 一般合成流程 ：
     本发明化合物容易借助本领域已知的方法制备。 下文阐述本发明化合物的示范性 制备方法。
     下列流程阐述本发明化合物的酸前体的合成。
     酸前体 P-IV-A、 P-IV-B 或 P-IV-C 的合成 ：
     a)(CO2Et)2CH2 ； b)(CO2Et)2CH ＝ CH(OEt) ； c)CF3CO2H， PPh3， CCl4， Et3N ； d)MeI ； e)PPA 或二苯基醚 ； f)NaOH. 酸前体 P-IV-A、 P-IV-B 或 P-IV-C 的合成 ：a)AcONH4 ； b)EtOCHC(CO2Et)2， 130 ℃ ； c)Ph2O， ΔT ； d)I2， EtOH ； e)NaOH 酸 前 体 P-IV-A、 P-IV-B 或 P-IV-C 的合成 ：
     POCl3 ； b)R’ ONa ； c)n-BuLi， ClCO2Et ； d)NaOH 胺前体 P-III-A 的合成 ：
     (CH3)2SO4 ； b)K3Fe(CN)6， NaOH， H2O ； c)HNO3， H2SO4 ； d)RCOCH3， MeOH， NH3 ； e)H2， 阮内 Ni 胺前体 P-IV-A 的合成 ：
     HNO3， HOAc ； b)Na2S2O4， THF/H2O ； c)H2， Pd/C. 胺前体 P-V-A-1 的合成 ：
     KNO3， H2SO4 ； b)NaNO2， H2SO4-H2O ； c)NH4CO2H， Pd-C ； d)R’ X； e)NH4CO2H， Pd-C 胺前体 P-V-A-1 的合成 ：a)SO2Cl2， R2 ＝ Cl ； b)R2OH， R2 ＝ 烷基 ； c)NBS， R1 ＝ Br ； d)ClCO2R， TEA ； e)HNO3， H2SO4 ； f) 碱 ； g)ArB(OH)2， R1 ＝ Br ； h)[H] ； l)R’ X， R1 ＝ Br ； j)ClCF2CO2Me ； k)[H] ； l)[H].
     胺前体 P-V-A-1 的合成 ：
     KNO3 ； b)[H] ； c)KNO3 ； d)AcCl ； e)[H] ； f)i)NaNO2 ； ii)H2O ； g)HCl 胺前体 P-V-A-1 的合成 ：
     HNO3， H2SO4 ； b)[H] ； c) 保护 ； d)R’ CHO ； e) 脱保护 ； f)[H] ； g)Na2S， S， H2O ； h) 硝化 ； i)(BOC)2O ； j)[H] ； k)RX ； l)[H] ； PG ＝保护基团
     胺前体 P-V-A-1 或 P-V-A-2 的合成 ：
     a)Br2 ； b)Zn(CN)2， Pd(PPh)3 ； c)[H] ； d)BH3 ； e)(BOC)2O ； f)[H] ； g)H2SO4， H2O ； h)R’ X； i)[H] ； j)LiAlH4
     胺前体 P-V-A-1 或 P-V-A-2 的合成 ：
     (i)NaNO2， HCl ； ii)Na2SO3， CuSO4， HCl ； b)NH4Cl ； c)[H] 胺前体 P-V-A-1 的合成 ：
     a)CHCl2OMe ； b)KNO3， H2SO4 ； c) 脱氧 - 氟化 ； d)Fe 胺前体 P-V-A-3 的合成 ：
     Ar ＝芳基或杂芳基 a) 硝化 ； b)ArB(OH)2， Pd ； c)BH3 ； d)(BOC)2O 胺前体 P-V-B-1 的合成 ：a)AcCl ； b)DEAD ； c)AlCl3 ； d)NaOH 胺前体 P-V-B-1 的合成 ：
     a)ClCH2COCl ； b)[H] ； c) 保护 ； d)[H] PG ＝保护基团 胺前体 P-V-B-1 的合成 ：
     a)HSCH2CO2H ； b)[H] 胺前体 P-V-B-2 的合成 ：
     a)AlCl3 ； b)[H] ； c)i)R1R2CHCOCH2CH2Cl ； ii)NaBH4 ； d)NH2OH ； e)DIBAL-H ； f) 硝化 ； g) 保护 ； h)[H] PG ＝保护基团 胺前体 P-V-B-3 的合成 ：
     a) 硝化 ； b) 保护 ； c)[H] PG ＝保护基 胺前体 P-V-B-5 的合成 ：a) 当 X ＝ Cl， Br， I： RX， K2CO3， DMF 或 CH3CN ； 当 X ＝ OH ： RX， TFFH， DIEA， THF b)H2， Pd-C， EtOH 或 SnCl2.2H2O， EtOH 或 SnCl2.2H2O， DIEA， EtOH.
     胺前体 P-V-B-5 的合成 ：
     a)RCOCl， Et3N， CH2Cl2 ； b)n-BuLi， THF ； c)NaBH4， AcOH ； d)KNO3， H2SO4 ； e)DDQ， 1， 4- 二 烷； f)NaNO2， HCl， SnCl2.2H2O， H 2O ； g)MeCOR， EtOH ； h)PPA ； i)LiAlH4， THF 或 H2， 阮内 Ni， EtOH 或 MeOH
     胺前体 V-B-5 的合成 ：
     a)NaNO2， HCl， SnCl2.2H2O， H2O ； b)RCH2COR， AcOH， EtOH ； c)H3PO4 甲苯 ； d)H2， Pd-C， 胺前体 P-V-B-5 的合成 ：EtOH
     a)NaNO2， HCl， SnCl2.2H2O， H2O ； b)RCH2COH， AcOH， EtOH ； c)H3PO4， 甲苯 ； d)H2， Pd-C， 胺前体 P-V-B-5 的合成 ：EtOH
     三氟甲
     a)RX(X ＝ Br， I)， 磺酸锌 TBAI， DIEA， 甲苯 ； b)H2， 阮内 Ni， EtOH 或 H2， Pd-C， EtOH 或 SnCl2.2H2O， EtOH ； c)ClSO2NCO， DMF， CH3CN ； d)Me2NH， H2CO， AcOH ； e)MeI， DMF， THF， H2O ； f) MNu(M ＝ Na， K， Li ； Nu ＝亲核试剂 )
     胺前体 P-V-B-5 的合成 ：
     a)HNO3， H2SO4 ； b)Me2NCH(OMe)2， DMF ； c)H2， 阮内 Ni， EtOH 胺前体 P-V-B-5 的合成 ：
     a)When PG ＝ SO2Ph ： PhSO2Cl， Et3N， DMAP， CH2Cl2 ； When PG ＝ Ac ： AcCl， NaHCO3，CH2Cl2 ； b)When R ＝ RCO ： (RCO)2O， AlCl3， CH2Cl2 ； When R ＝ Br ： Br2， AcOH ； c)HBr 或 HCl ； d)KNO3， H2SO4 ； e)MnO2， CH2Cl2 或 DDQ， 1， 4- 二 烷 ； f)H2， 阮内 Ni， EtOH.
     胺前体 P-V-B-5 的合成 ：
     a)NBS， DMF ； b)KNO3， H2SO4 ； c)HC ≡ CSiMe3， Pd(PPh3)2Cl2， CuI， Et3N， 甲苯， H2O ； d) CuI， DMF ； e)H2， 阮内 Ni， MeOH
     胺前体 P-V-A-3 和 P-V-A-6 的合成 ：
     a)ArB(OH)2， Pd(PPh3)4， K2CO3， H2O， THF 或 ArB(OH)2， Pd2(dba)3， P(tBu)3， KF， THF 胺 前体 P-V-A-4 的合成 ：
     R ＝ CN， CO2Et ； a)MeI， NaOtBu， DMF ； b)HCO2K， Pd-C， EtOH 或 HCO2NH4， Pd-C， EtOH 胺前体 P-V-A-4 的合成 ：
     a)ArBr， Pd(OAc)2， PS-PPh3， K2CO3， DMF 胺前体 P-V-B-4 的合成 ：
     a)H2， Pd-C， MeOH 胺前体 P-V-B-4 的合成 ：a)NaBH4， MeOH ； b)H2， Pd-C， MeOH ； c)NH2OH， Pyridine ； d)H2， Pd-C， MeOH ； e)Boc2O， Et3N， MeOH
     式 I 化合物的合成 ：
     a)Ar1R7NH， 偶联试剂， 碱， 溶剂。所用条件的实例 ： HATU， DIEA ； BOP， DIEA， DMF ； HBTU， Et3N， CH2Cl2 ； PFPTFA， 吡啶。 式 I′化合物的合成 ：
     R5 ＝脂肪族 ： a)R5X(X ＝ Br， I)， Cs2CO3， DMF 式 V-B-5 化合物的合成 ：
     a)NaOH， THF ； b)HNR2， HATU， DIEA， DMF 式 V-B-5 化合物的合成 ：
     WRw ＝芳基或杂芳基 ： a)ArB(OH)2， (dppf)PdCl2， K2CO3， DMF 式 V-A-2 & V-A-5 化合物的合成 ：a)SnCl2.2H2O， EtOH ； b)PG ＝ BOC ： TFA， CH2Cl2 ； c)CH2O， NaBH3CN， CH2Cl2， MeOH ； d) RXCl， DIEA， THF or RXCl， NMM， 1， 4- 二 烷或 RXCl， CH2Cl2， DMF ； e)R’ R” NH， LiClO4， CH2Cl2， iPrOH
     式 V-B-2 化合物的合成 ：
     a) 当 PG ＝ BOC ： TFA， CH2Cl2 ； 当 PG ＝ Ac ： NaOH 或 HCl， EtOH 或 THF 式 V-A-2 化合物的合成 ：
     a) 当 PG ＝ BOC ： TFA， CH2Cl2
     a) 当 PG ＝ BOC ： TFA， CH2Cl2 ； b)ROCOCl， Et3N， DMF 式 V-A-4 化合物的合成 ：a) 当 PG ＝ BOC ： TFA， CH2Cl2 ； b) 当 Rw ＝ CO2R ： ROCOCl， DIEA， MeOH
     在上述流程中， 其中所采用的原子团 R 是取代基， 例如如上所定义的 RW。本领域技 术人员将容易领会到， 适合于本发明各种取代基的合成途径是这样的， 所采用的反应条件 和步骤不会修改目标取代基。
     5、 用途、 制剂和给药 ：
     药学上可接受的组合物
     正如上文所讨论的， 本发明提供这样的化合物， 它们可用作 ABC 转运蛋白的调控 剂， 因而可用于治疗疾病、 障碍或病症， 例如囊性纤维化、 遗传性肺气肿、 遗传性血色素沉
     着、 凝血 - 纤维蛋白溶解缺陷 ( 例如 C 蛋白缺陷 )、 1 型遗传性血管性水肿、 脂质加工缺陷 ( 例如家族性高胆固醇血 )、 1 型乳糜微粒血、 β- 脂蛋白血、 溶酶体贮存疾病 ( 例如 I- 细 胞疾病 / 伪 -Hurler)、 粘多糖病、 Sandhof/Tay-Sachs、 Crigler-Najjar II 型、 多内分泌病 / 高胰岛素血、 糖尿病、 Laron 侏儒、 髓过氧化物酶缺陷、 原发性甲状旁腺机能减退、 黑素瘤、 聚糖病 CDG 1 型、 先天性甲状腺机能亢进、 成骨不全、 遗传性低纤维蛋白原血、 ACT 缺陷、 尿 崩症 (DI)、 后叶激素运载蛋白性 DI、 肾原性 DI、 夏 - 马二氏神经性进行性肌肉萎缩综合征、 佩 - 梅二氏病、 神经变性疾病 ( 例如阿尔茨海默氏病、 帕金森氏病、 肌萎缩性侧索硬化、 进行 性核上性麻痹、 皮克氏病 )、 若干聚谷氨酰胺神经病学障碍 ( 例如亨廷顿氏病、 I 型脊髓小 脑性共济失调、 脊髓与延髓肌肉萎缩、 齿状红核 pallidoluysian 和肌强直性营养不良 ) 以 及海绵状脑病 ( 例如遗传性克 - 雅二氏病 ( 由朊病毒蛋白加工缺陷引起 )、 法布里氏病和 斯 - 施二氏综合征 )、 COPD、 干眼病或斯耶格伦氏病。
     因此， 在本发明的另一方面， 提供药学上可接受的组合物， 其中这些组合物包含任 意如本文所述的化合物， 并且可选地包含药学上可接受的载体、 助剂或赋形剂。 在某些实施 方式中， 这些组合物可选地进一步包含一种或多种附加治疗剂。
     也将被领会的是， 某些本发明化合物能够以游离形式存在供治疗， 或者酌情为其 药学上可接受的衍生物。按照本发明， 药学上可接受的衍生物包括但不限于药学上可接受 的盐、 酯、 这类酯的盐、 或者任意其他加合物或衍生物， 一旦对需要的患者给药即能够直接 或间接提供如本文所述的化合物或者其代谢产物或残余物。
     本文所用的术语 “药学上可接受的盐” 表示这样的盐， 在合理的医学判断范围内， 它们适合用于与人体和低等动物组织接触， 没有不适当的毒性、 刺激性、 变态反应等， 与合 理的利益 / 风险比相称。 “药学上可接受的盐” 表示本发明化合物的任意无毒性盐或酯盐， 一旦对接受者给药， 即能够直接或间接提供本发明化合物或者其抑制活性代谢产物或残余 物。
     药学上可接受的盐是本领域熟知的。例如， S.M.Berge 等在 J.Pharmaceutical Sciences， 1977， 66， 1-19 中详细描述了药学上可接受的盐， 引用在此作为参考。 本发明化合 物的药学上可接受的盐包括从适合的无机与有机酸与碱衍生的那些。 药学上可接受的无毒 性酸加成盐的实例是与无机酸或有机酸生成的氨基盐， 无机酸例如盐酸、 氢溴酸、 磷酸、 硫 酸和高氯酸， 有机酸例如乙酸、 草酸、 马来酸、 酒石酸、 柠檬酸、 琥珀酸或丙二酸， 或者利用本 领域所用的其他方法， 例如离子交换形成的盐。 其他药学上可接受的盐包括己二酸盐、 藻酸 盐、 抗坏血酸盐、 天冬氨酸盐、 苯磺酸盐、 苯甲酸盐、 硫酸氢盐、 硼酸盐、 丁酸盐、 樟脑酸盐、 樟 脑磺酸盐、 柠檬酸盐、 环戊烷丙酸盐、 二葡糖酸盐、 十二烷基硫酸盐、 乙磺酸盐、 甲酸盐、 富马 酸盐、 葡庚酸盐、 甘油磷酸盐、 葡糖酸盐、 半硫酸盐、 庚酸盐、 己酸盐、 氢碘酸盐、 2- 羟基乙磺 酸盐、 乳糖酸盐、 乳酸盐、 月桂酸盐、 月桂基硫酸盐、 苹果酸盐、 马来酸盐、 丙二酸盐、 甲磺酸 盐、 2- 萘磺酸盐、 烟酸盐、 硝酸盐、 油酸盐、 草酸盐、 棕榈酸盐、 扑酸盐、 果胶酸盐、 过硫酸盐、 3- 苯基丙酸盐、 磷酸盐、 苦味酸盐、 新戊酸盐、 丙酸盐、 硬脂酸盐、 琥珀酸盐、 硫酸盐、 酒石酸 盐、 硫氰酸盐、 对 - 甲苯磺酸盐、 十一烷酸盐、 戊酸盐等。从适当的碱衍生的盐包括碱金属、 + 碱土金属、 铵和 N (C1-4 烷基 )4 盐。本发明也涵盖如本文所公开的化合物的任意碱性含氮基 团的季铵化作用。借助这类季铵化作用可以得到可溶于水或油或可分散在水或油中的产 物。代表性碱金属或碱土金属盐包括钠、 锂、 钾、 钙、 镁等。当适当的时候， 其他药学上可接受的盐包括无毒的铵盐、 季铵盐和胺阳离子盐， 利用抗衡离子生成， 例如卤化物、 氢氧化物、 羧酸盐、 硫酸盐、 磷酸盐、 硝酸盐、 低级烷基磺酸盐和芳基磺酸盐。
     如上所述， 本发明的药学上可接受的组合物另外包含药学上可接受的载体、 助剂 或赋形剂， 正如本发明中所述， 它们包括适合于所需的特定剂型的任意和所有溶剂、 稀释 剂或其他液体赋形剂、 分散或悬浮助剂、 表面活性剂、 等渗剂、 增稠或乳化剂、 防腐剂、 固 体粘合剂、 润滑剂等。Remington ′ s Pharmaceutical Sciences， Sixteenth Edition， E.W.Martin(Mack Publishing Co.， Easton， Pa.， 1980) 公开了用于配制药学上可接受的组 合物的各种载体和用于其制备的已知技术。 除了任何常规载体介质与本发明化合物不相容 以外， 例如产生任何不可取的生物学效应或者以有害方式相互作用于药学上可接受的组合 物的任何其他组分， 它的使用涵盖在本发明的范围内。能够充当药学上可接受的载体的材 料的一些实例包括但不限于离子交换剂 ； 氧化铝 ； 硬脂酸铝 ； 卵磷脂 ； 血清蛋白质， 例如血 清白蛋白 ； 缓冲物质， 例如磷酸盐 ； 甘氨酸 ； 山梨酸或山梨酸钾 ； 饱和植物脂肪酸的偏甘油 酯混合物 ； 水； 盐或电解质， 例如硫酸鱼精蛋白、 磷酸氢二钠、 磷酸氢钾、 氯化钠、 锌盐 ； 胶体 二氧化硅 ； 三硅酸镁 ； 聚乙烯吡咯烷酮 ； 聚丙烯酸酯 ； 蜡类 ； 聚乙烯 - 聚氧化丙烯 - 嵌段聚合 物； 羊毛脂 ； 糖类， 例如乳糖、 葡萄糖和蔗糖 ； 淀粉， 例如玉米淀粉和马铃薯淀粉 ； 纤维素及 其衍生物， 例如羧甲基纤维素钠、 乙基纤维素和乙酸纤维素 ； 粉碎的黄蓍胶 ； 麦芽 ； 明胶 ； 滑 石； 赋形剂， 例如可可脂和栓剂用蜡 ； 油类， 例如花生油、 棉籽油、 红花油、 芝麻油、 橄榄油、 玉米油和大豆油 ； 二醇， 例如丙二醇或聚乙二醇 ； 酯类， 例如油酸乙酯和月桂酸乙酯 ； 琼脂 ； 缓冲剂， 例如氢氧化镁和氢氧化铝 ； 藻酸 ； 无热原的水 ； 等渗盐水 ； 林格氏溶液 ； 乙醇 ； 磷酸 盐缓冲溶液 ； 以及其他无毒的可相容的润滑剂， 例如月桂基硫酸钠和硬脂酸镁 ； 根据制剂 人员的判断， 在组合物中也可以存在着色剂、 释放剂、 包衣剂、 甜味剂、 调味剂和香料、 防腐 剂和抗氧化剂。
     化合物和药学上可接受的组合物的用途
     另一方面， 本发明提供治疗牵涉 ABC 转运蛋白活性、 例如 CFTR 的病症、 疾病或障碍 的方法。在某些实施方式中， 本发明提供治疗牵涉 ABC 转运蛋白活性缺陷的病症、 疾病或障 碍的方法， 该方法包括对有需要的受治疗者、 优选哺乳动物给予包含式 I 化合物的组合物。
     在某些实施方式中， 本发明提供治疗如下疾病的方法 ： 囊性纤维化、 遗传性肺气 肿、 遗传性血色素沉着、 凝血 - 纤维蛋白溶解缺陷 ( 例如 C 蛋白缺陷 )、 1 型遗传性血管性水 肿、 脂质加工缺陷 ( 例如家族性高胆固醇血 )、 1 型乳糜微粒血、 β- 脂蛋白血、 溶酶体贮存疾 病 ( 例如 I- 细胞疾病 / 伪 -Hurler)、 粘多糖病、 Sandhof/Tay-Sachs、 Crigler-Najjar II 型、 多内分泌病 / 高胰岛素血、 糖尿病、 Laron 侏儒、 髓过氧化物酶缺陷、 原发性甲状旁腺机 能减退、 黑素瘤、 聚糖病 CDG 1 型、 先天性甲状腺机能亢进、 成骨不全、 遗传性低纤维蛋白原 血、 ACT 缺陷、 尿崩症 (DI)、 后叶激素运载蛋白性 DI、 肾原性 DI、 夏 - 马二氏神经性进行性肌 肉萎缩综合征、 佩 - 梅二氏病、 神经变性疾病 ( 例如阿尔茨海默氏病、 帕金森氏病、 肌萎缩性 侧索硬化、 进行性核上性麻痹、 皮克氏病 )、 若干聚谷氨酰胺神经病学障碍 ( 例如亨廷顿氏 病、 I 型脊髓小脑性共济失调、 脊髓与延髓肌肉萎缩、 齿状红核 pallidoluysian 和肌强直性 营养不良 ) 以及海绵状脑病 ( 例如遗传性克 - 雅二氏病 ( 由朊病毒蛋白加工缺陷引起 )、 法 布里氏病和斯 - 施二氏综合征 )、 COPD、 干眼病或斯耶格伦氏病， 包含对所述哺乳动物给予 有效量的包含本发明化合物的组合物的步骤。按照替代的优选实施方式， 本发明提供治疗囊性纤维化的方法， 包括对所述哺乳 动物给予有效量的包含本发明化合物的组合物的步骤。
     按照本发明， 化合物或药学上可接受的组合物的 “有效量” 是有效治疗一种或多 种如下疾病或者减轻其严重性的量 ： 囊性纤维化、 遗传性肺气肿、 遗传性血色素沉着、 凝 血 - 纤维蛋白溶解缺陷 ( 例如 C 蛋白缺陷 )、 1 型遗传性血管性水肿、 脂质加工缺陷 ( 例 如家族性高胆固醇血 )、 1 型乳糜微粒血、 β- 脂蛋白血、 溶酶体贮存疾病 ( 例如 I- 细胞疾 病 / 伪 -Hurler)、 粘多糖病、 Sandhof/Tay-Sachs、 Crigler-Najjar II 型、 多内分泌病 / 高 胰岛素血、 糖尿病、 Laron 侏儒、 髓过氧化物酶缺陷、 原发性甲状旁腺机能减退、 黑素瘤、 聚 糖病 CDG 1 型、 先天性甲状腺机能亢进、 成骨不全、 遗传性低纤维蛋白原血、 ACT 缺陷、 尿崩 症 (DI)、 后叶激素运载蛋白性 DI、 肾原性 DI、 夏 - 马二氏神经性进行性肌肉萎缩综合征、 佩 - 梅二氏病、 神经变性疾病 ( 例如阿尔茨海默氏病、 帕金森氏病、 肌萎缩性侧索硬化、 进行 性核上性麻痹、 皮克氏病 )、 若干聚谷氨酰胺神经病学障碍 ( 例如亨廷顿氏病、 I 型脊髓小 脑性共济失调、 脊髓与延髓肌肉萎缩、 齿状红核 pallidoluysian 和肌强直性营养不良 ) 以 及海绵状脑病 ( 例如遗传性克 - 雅二氏病 ( 由朊病毒蛋白加工缺陷引起 )、 法布里氏病和 斯 - 施二氏综合征 )、 COPD、 干眼病或斯耶格伦氏病。
     按照本发明的方法， 化合物和组合物可以使用就治疗一种或多种如下疾病或者减 轻其严重性而言有效的任意量和任意给药途径给药 ： 囊性纤维化、 遗传性肺气肿、 遗传性血 色素沉着、 凝血 - 纤维蛋白溶解缺陷 ( 例如 C 蛋白缺陷 )、 1 型遗传性血管性水肿、 脂质加 工缺陷 ( 例如家族性高胆固醇血 )、 1 型乳糜微粒血、 β- 脂蛋白血、 溶酶体贮存疾病 ( 例如 I- 细胞疾病 / 伪 -Hurler)、 粘多糖病、 Sandhof/Tay-Sachs、 Crigler-Najjar II 型、 多内分 泌病 / 高胰岛素血、 糖尿病、 Laron 侏儒、 髓过氧化物酶缺陷、 原发性甲状旁腺机能减退、 黑 素瘤、 聚糖病 CDG 1 型、 先天性甲状腺机能亢进、 成骨不全、 遗传性低纤维蛋白原血、 ACT 缺 陷、 尿崩症 (DI)、 后叶激素运载蛋白性 DI、 肾原性 DI、 夏 - 马二氏神经性进行性肌肉萎缩综 合征、 佩 - 梅二氏病、 神经变性疾病 ( 例如阿尔茨海默氏病、 帕金森氏病、 肌萎缩性侧索硬 化、 进行性核上性麻痹、 皮克氏病 )、 若干聚谷氨酰胺神经病学障碍 ( 例如亨廷顿氏病、 I型 脊髓小脑性共济失调、 脊髓与延髓肌肉萎缩、 齿状红核 pallidoluysian 和肌强直性营养不 良 ) 以及海绵状脑病 ( 例如遗传性克 - 雅二氏病 ( 由朊病毒蛋白加工缺陷引起 )、 法布里氏 病和斯 - 施二氏综合征 )、 COPD、 干眼病或斯耶格伦氏病。
     在一种实施方式中， 本发明的化合物和组合物可用于治疗患者囊性纤维化或者减 轻其严重性。
     在某些实施方式中， 本发明的化合物和组合物可用于治疗囊性纤维化或者减轻其 严重性， 其中患者在呼吸与非呼吸上皮顶膜中表现残留 CFTR 活性。残留 CFTR 活性在上皮 表面上的存在可以利用本领域已知的方法检测， 例如标准电生理学、 生物化学或组织化学 技术。 这类方法利用体内或来自体内的电生理技术、 汗液或唾液 Cl 浓度测量或者来自体内 的监测细胞表面密度的生物化学或组织化学技术来鉴定 CFTR 活性。利用这类方法， 可以在 多种不同突变杂合或纯合的患者中容易地检测残留 CFTR 活性， 包括最常见突变 ΔF508 杂 合或纯合的患者。
     在另一种实施方式中， 本发明的化合物和组合物可用于治疗患者囊性纤维化或者 减轻其严重性， 所述患者因为采用药理方法或基因疗法而诱导或增加残留 CFTR 活性。这类方法增加存在于细胞表面上的 CFTR 量， 由此诱导患者中尚不存在的 CFTR 活性或者增加患 者中残留 CFTR 活性的现有水平。
     在一种实施方式中， 本发明的化合物和组合物可用于治疗患者囊性纤维化或者减 轻其严重性， 所述患者处于某些表现残留 CFTR 活性的遗传型内， 例如 III 类突变 ( 调节或 门控减低 )、 IV 类突变 ( 电导改变 ) 或 V 类突变 ( 合成减少 )(Lee R.Choo-Kang， Pamela L.， Zeitlin， Type I， II， III， IV， and V cystic fibrosis Tansmembrane Conductance Regulator Defects and Opportunities of Therapy ； Current Opinion in Pulmonary Medicine 6 ： 521-529， 2000)。其他表现残留 CFTR 活性的患者遗传型包括这些种类之一纯 合或者任意其他突变种类杂合的患者， 包括 I 类突变、 II 类突变或未分类的突变。
     在一种实施方式中， 本发明的化合物和组合物可用于治疗患者囊性纤维化或者减 轻其严重性， 所述患者处于某些临床遗传型内， 例如通常与上皮顶膜中残留 CFTR 活性的量 相关的适中至轻微的临床遗传型。 这类遗传型包括表现胰腺功能充足的患者或者被诊断为 胰腺炎和先天性两侧输精管缺乏或轻微肺疾病的患者。
     所需确切的量将因受治疗者而异， 取决于受治疗者的种类、 年龄与一般状态、 感染 的严重性、 特定药物、 其给药的方式等。本发明化合物优选地被配制成剂量单元形式， 有易 于给药和剂量的一致性。本文所用的表达方式 “剂量单元形式” 表示物理上离散的药物单 元， 对所治疗的患者而言是适当的。 不过将被理解的是， 本发明化合物和组合物的总每日用 量将由主治医师在合理的医学判断范围内决定。任意特定患者或生物体的具体有效剂量 水平将依赖于多种因素， 包括所治疗的病症和病症的严重性 ； 所采用的具体化合物的活性 ； 所采用的具体组合物 ； 患者的年龄、 体重、 一般健康状况、 性别和饮食 ； 给药的时间、 给药的 途径和所采用的具体化合物的排泄速率 ； 治疗的持续时间 ； 与所采用的具体化合物联合或 同时使用的药物 ； 和医药领域熟知的其他因素。本文所用的术语 “患者” 表示动物， 优选哺 乳动物， 最优选人。
     本发明的药学上可接受的组合物可以对人和其他动物口服、 直肠、 肠胃外、 脑池 内、 阴道内、 腹膜内、 局部 ( 以粉剂、 软膏剂或滴剂 )、 颊、 以口用或鼻用喷雾剂等方式给药， 这依赖于所治疗感染的严重性。在某些实施方式中， 本发明化合物可以被口服或肠胃外给 药， 剂量水平为每天约 0.01mg/kg 至约 50mg/kg、 优选约 1mg/kg 至约 25mg/kg 受治疗者体 重， 一天一次或多次， 以获得所需的治疗效果。
     口服给药的液体剂型包括但不限于药学上可接受的乳剂、 微乳剂、 溶液、 悬液、 糖 浆剂和酏剂。 除了活性化合物以外， 液体剂型可以含有本领域常用的惰性稀释剂， 例如水或 其他溶剂， 增溶剂和乳化剂， 例如乙醇、 异丙醇、 碳酸乙酯、 乙酸乙酯、 苄醇、 苯甲酸苄基酯、 丙二醇、 1， 3- 丁二醇、 二甲基甲酰胺、 油 ( 特别是棉籽油、 花生油、 玉米油、 麦胚油、 橄榄油、 蓖麻油和芝麻油 )、 甘油、 四氢糠醇、 聚乙二醇和脱水山梨醇的脂肪酸酯， 和它们的混合物。 除了惰性稀释剂以外， 口服组合物还可以包括助剂， 例如湿润剂、 乳化与悬浮剂、 甜味剂、 矫 味剂和香料。
     使用适合的分散或湿润剂和悬浮剂， 可以按照已知技术配制可注射制剂， 例如无 菌可注射的水性或油性悬液。 无菌可注射制剂也可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或 溶剂中的无菌可注射溶液、 悬液或乳液， 例如在 1， 3- 丁二醇中的溶液。可以采用的可接受 的载体和溶剂有水、 林格氏溶液、 U.S.P. 和等渗氯化钠溶液。另外， 常规上采用无菌的不挥发油作为溶剂或悬浮介质。为此， 可以采用任何温和的固定油， 包括合成的单 - 或二 - 甘油 酯。另外， 在注射剂的制备中也可以使用脂肪酸， 例如油酸。
     可注射制剂可以这样进行灭菌， 例如通过细菌截留性滤器过滤， 或者掺入无菌固 体组合物形式的灭菌剂， 可以在使用前将其溶解或分散在无菌的水或其他无菌可注射介质 中。
     为了延长本发明化合物的作用， 经常需要延缓化合物在皮下或肌内注射后的吸 收。这可以利用水溶性差的结晶性或无定形物质的液体悬液来实现。化合物的吸收速率取 决于它的溶解速率， 后者反过来又可能取决于晶体大小和晶型。 作为替代选择， 将化合物溶 解或悬浮在油类载体中， 实现肠胃外给药化合物形式的延迟吸收。可注射的储库形式是这 样制备的， 在生物可降解的聚合物中， 例如聚交酯 - 聚乙醇酸交酯， 生成化合物的微囊包封 基质。根据化合物与聚合物的比例和所采用特定聚合物的属性， 可以控制化合物的释放速 率。其他生物可降解聚合物的实例包括聚 ( 原酸酯 ) 和聚 ( 酸酐 )。储库型可注射制剂也 可以将化合物包合在与机体组织相容的脂质体或微乳中来制备。
     直肠或阴道给药组合物优选地是栓剂， 它们可以这样制备， 将本发明化合物与适 合的无刺激性赋形剂或载体混合， 例如可可脂、 聚乙二醇或栓剂用蜡， 它们在环境温度下是 固体， 但是在体温下是液体， 因此在直肠或阴道腔中融化， 释放出活性化合物。
     口服给药的固体剂型包括胶囊剂、 片剂、 丸剂、 粉剂和颗粒剂。
     在这类固体剂型中， 将活性化合物与至少一种惰性的药学上可接受的赋形剂或载 体混合， 例如柠檬酸钠或磷酸二钙， 和 / 或 a) 填充剂或增容剂， 例如淀粉、 乳糖、 蔗糖、 葡萄 糖、 甘露糖醇和硅酸， b) 粘合剂， 例如羧甲基纤维素、 藻酸盐、 明胶、 聚乙烯吡咯烷酮、 蔗糖和 阿拉伯胶， c) 润湿剂， 例如甘油， d) 崩解剂， 例如琼脂、 碳酸钙、 马铃薯或木薯淀粉、 藻酸、 某 些硅酸盐和碳酸钠， e) 溶解迟延剂， 例如石蜡， f) 吸收促进剂， 例如季铵化合物， g) 湿润剂， 例如鲸蜡醇和甘油单硬脂酸酯， h) 吸收剂， 例如高岭土和膨润土， 和 i) 润滑剂， 例如滑石、 硬脂酸钙、 硬脂酸镁、 固体聚乙二醇、 月桂基硫酸钠及其混合物。 在胶囊剂、 片剂和丸剂的情 况下， 该剂型还可以包含缓冲剂。
     也可以采用相似类型的固体组合物作为软或硬的填充的明胶胶囊剂中的填充剂， 胶囊所用赋形剂例如乳糖或奶糖以及高分子聚乙二醇等。片剂、 锭剂、 胶囊剂、 丸剂和颗粒 剂等固体剂型可以带有包衣和外壳， 例如肠溶衣和药物配制领域熟知的其他包衣。它们可 以可选地含有遮光剂， 也可以是仅仅或优先在肠道某一部分释放活性成分的组合物， 可选 地为延迟的方式。可以使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡类。也可以采用相似类 型的固体组合物作为软与硬的填充的明胶胶囊剂中的填充剂， 胶囊所用赋形剂例如乳糖或 奶糖以及高分子聚乙二醇等。
     活性化合物也可以是微囊包封的形式， 其中含有一种或多种上述赋形剂。 片剂、 锭 剂、 胶囊剂、 丸剂和颗粒剂等固体剂型可以带有包衣和外壳， 例如肠溶衣、 释放控制性包衣 和药物配制领域熟知的其他包衣。在这类固体剂型中， 可以将活性化合物与至少一种惰性 稀释剂混合， 例如蔗糖、 乳糖或淀粉。在正常情况下， 这类剂型还可以包含除惰性稀释剂以 外的其他物质， 例如压片润滑剂和其他压片助剂， 例如硬脂酸镁和微晶纤维素。在胶囊剂、 片剂和丸剂的情况下， 剂型还可以包含缓冲剂。 它们可以可选地含有遮光剂， 也可以是仅仅 或优先在肠道某一部分释放活性成分的组合物， 可选地为延迟的方式。可以使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡类。
     本发明化合物的局部或透皮给药剂型包括软膏剂、 糊剂、 霜剂、 洗剂、 凝胶剂、 粉 剂、 溶液、 喷雾剂、 吸入剂或贴剂。将活性组分在无菌条件下与药学上可接受的载体和任何 必需的防腐剂或缓冲剂混合， 根据需要而定。 眼科制剂、 滴耳剂和滴眼剂也被涵盖在本发明 的范围内。另外， 本发明涵盖透皮贴剂的使用， 它们具有控制化合物向机体递送的附加优 点。这类剂型可以通过将化合物溶解或分散在恰当的介质中来制备。还可以使用吸收增强 剂以增加化合物穿过皮肤的通量。 可以通过提供速率控制膜或者将化合物分散在聚合物基 质或凝胶中来控制速率。
     正如上文一般性描述的， 本发明化合物可用作 ABC 转运蛋白的调控剂。因而， 不希 望受任意特定理论所限， 化合物和组合物特别可用于治疗疾病、 病症或障碍或者减轻其严 重性， 其中 ABC 转运蛋白的活性过高或无活性在该疾病、 病症或障碍中有牵连。当 ABC 转运 蛋白的活性过高或无活性在特定疾病、 病症或障碍中有牵连时， 该疾病、 病症或障碍也可以 被称为 “ABC 转运蛋白 - 介导的疾病、 病症或障碍” 。因此， 在另一方面， 本发明提供治疗疾 病、 病症或障碍或者减轻其严重性的方法， 其中 ABC 转运蛋白的活性过高或无活性在该疾 病状态中有牵连。
     在本发明中用作 ABC 转运蛋白调控剂的化合物的活性可以按照本领域和本文实 施例所一般描述的方法加以测定。
     也将被领会的是， 本发明的化合物和药学上可接受的组合物可以用在联合疗法 中， 也就是说， 化合物和药学上可接受的组合物可以在一种或多种其他所需治疗剂或医药 程序同时、 之前或随后给药。用在联合方案中的特定疗法组合 ( 治疗剂或程序 ) 将考虑所 需治疗剂和 / 或程序与所要达到的所需治疗效果的可相容性。也将被领会的是， 所用疗法 可以对同一病症达到所需效果 ( 例如， 本发明化合物可以与另一种用于治疗同一病症的药 物同时给药 )， 或者它们可以达到不同的效果 ( 例如控制任何副作用 )。正如本文所用的， 在正常情况下给药以治疗或预防特定疾病或病症的附加治疗剂被称为 “就所治疗的疾病或 病症而言是适当的” 。
     在一种实施方式中， 附加成分选自粘液溶解剂、 支气管扩张剂、 抗生素、 抗感染剂、 抗炎剂、 除本发明化合物以外的 CFTR 调控剂或营养剂。
     附加治疗剂在本发明组合物中的含量将不超过在包含该治疗剂作为唯一活性成 分的组合物中通常的给药量。优选地， 附加治疗剂在目前所公开的组合物中的量将是通常 的包含该药物作为唯一治疗活性成分的组合物中的含量的约 50％至 100％。
     本发明化合物或其药学上可接受的组合物也可以引入到涂覆可植入医药装置的 组合物中， 例如假肢、 人工瓣膜、 脉管移植物、 支架和导管。因此， 本发明在另一方面包括 涂覆可植入装置的组合物， 包含如上一般性描述和在本文大类与小类中所述的本发明化合 物， 和适合于涂覆所述可植入装置的载体。 在另一方面， 本发明包括涂有组合物的可植入装 置， 所述组合物包含如上一般性描述和在本文大类与小类中所述的本发明化合物， 和适合 于涂覆所述可植入装置的载体。 适合的涂料和涂覆可植入装置的一般制备方法描述在美国 专利 6,099,562、 5,886,026 和 5,304,121 中。涂料通常是生物可相容的聚合材料， 例如水 凝胶聚合物、 聚甲基二硅氧烷、 聚己内酯、 聚乙二醇、 聚乳酸、 乙烯 - 乙酸乙烯酯共聚物和它 们的混合物。涂料可以可选地进一步被适合的氟硅酮、 多糖、 聚乙二醇、 磷脂或其组合的表层所覆盖， 以赋予组合物的控释特征。
     本发明的另一方面涉及在生物样品或患者中调控 ABC 转运蛋白活性 ( 例如体外或 体内 )， 该方法包括对患者给予或者使所述生物样品接触式 I 化合物或包含所述化合物的 组合物。本文所用的术语 “生物样品” 非限制性地包括细胞培养物及其提取物 ； 从哺乳动物 或其提取物获得的活组织检查材料 ； 和血液、 唾液、 尿、 粪便、 精液、 泪液或其他体液或其提 取物。
     在生物样品中调控 ABC 转运蛋白活性、 例如 CFTR， 可用于本领域技术人员已知的 多种目的。这类目的的实例包括但不限于生物与病理现象中的 ABC 转运蛋白研究 ； 和新的 ABC 转运蛋白调控剂的对比评价。
     在另一种实施方式中， 提供了体外或体内调控阴离子通道活性的方法， 包括使所 述通道与式 (I) 化合物接触的步骤。在优选的实施方式中， 该阴离子通道是氯化物通道或 碳酸氢盐通道。在其他优选的实施方式中， 该阴离子通道是氯化物通道。
     按照替代的实施方式， 本发明提供增加细胞膜中功能性 ABC 转运蛋白数量的方 法， 包括使所述细胞与式 (I) 化合物接触的步骤。本文所用的术语 “功能性 ABC 转运蛋白” 表示能够发挥转运活性的 ABC 转运蛋白。在优选的实施方式中， 所述功能性 ABC 转运蛋白 是 CFTR。
     按照另一种优选的实施方式， 通过测量跨膜电位来测量 ABC 转运蛋白的活性。测 量生物样品中跨膜电位的手段可以采用本领域已知的任意已知方法， 例如光学膜电位测定 法或其他电生理方法。
     光学膜电位测定法采用如 Gonzalez 和 Tsien 所述的电压 - 敏感性 FRET 传感 器 ( 参 见， Gonzalez， J.E.and R.Y.Tsien(1995) ″ Voltage sensing by fluorescence resonance energy transfer in single cells ″ Biophys J 69(4) ： 1272-80， and Gonzalez， J.E.and R.Y.Tsien(1997) ″ Improved indicators of cell membrane potential that use fluorescence resonance energy transfer ″ Chem Biol 4(4) ： 269-77) 与 测 量 荧 光 变 化 的 仪 器 的 组 合， 例 如 电 压 / 离 子 探 针 读 数 器 (VIPR)( 参 见， Gonzalez， J.E.， K.Oades， et al.(1999)″ Cell-based assays and instrumentation for screeningion-channel targets″ Drug Discov Today 4(9) ： 431-439)。
     这些电压敏感性测定法基于膜溶性、 电压敏感性染剂 DiSBAC2(3) 与荧光磷脂 CC2-DMPE 之间荧光共振能量转移 (FRET) 的变化， 所述荧光磷脂连接于质膜的外部小叶， 充 当 FRET 供体。 膜电位 (Vm) 的变化导致带负电的 DiSBAC2(3) 跨越质膜重新分布， 从 CC2-DMPE TM 转移的能量相应地改变。 荧光发射的变化可以利用 VIPR II 监测， 它是一种整合的液体处 理器和荧光检测器， 被设计用来在 96- 或 384- 孔微量滴定平板中进行细胞类筛选。
     另一方面， 本发明提供药盒， 用于体外或体内测量生物样品中 ABC 转运蛋白或其 片段的活性， 包含 ： (i) 包含式 (I) 化合物或任意上述实施方式的组合物 ； 和 (ii) 关于如下 内容的指导 ： a) 使组合物与生物样品接触 ； 和 b) 测量所述 ABC 转运蛋白或其片段的活性。 在一种实施方式中， 药盒进一步包含关于如下内容的指导 ： a) 使附加组合物与生物样品接 触； b) 在所述附加化合物的存在下测量所述 ABC 转运蛋白或其片段的活性 ； 和 c) 比较在附 加化合物存在下的 ABC 转运蛋白活性与在式 (I) 组合物存在下的 ABC 转运蛋白密度。在优 选的实施方式中， 药盒用于测量 CFTR 的密度。为了可以更加充分地理解本文所述发明， 提供下列实施例。 应当理解， 这些实施例 仅供说明， 不以任何方式被解释为限制本发明。 实施例
     实施例 1 制备酸片段的一般流程 ：
     具体实例 ： 2- 苯基氨基亚甲基 - 丙二酸二乙基酯将 苯 胺 (25.6g， 0.28mol) 与 二 乙 基 2-( 乙 氧 基 亚 甲 基 ) 丙 二 酸 酯 (62.4g， 0.29mol) 的 混 合 物 在 140-150 ℃ 下 加 热 2h。 将 混 合 物 冷 却 至 室 温， 在 减 压 下 干 燥， 得 到 2- 苯基氨基亚甲基 - 丙二酸二乙基酯， 为固体， 无需进一步纯化即可用于下一步。1H NMR(d-DMSO)δ11.00(d， 1H)， 8.54(d， J ＝ 13.6Hz， 1H)， 7.36-7.39(m， 2H)， 7.13-7.17(m， 3H)， 4.17-4.33(m， 4H)， 1.18-1.40(m， 6H).
     4- 羟基喹啉 -3- 羧酸乙基酯
     向装有机械搅拌器的 1L 三颈烧瓶加入 2- 苯基氨基亚甲基 - 丙二酸二乙基酯 (26.3g， 0.1mol)、 多磷酸 (270g) 和磷酰氯 (750g)。将混合物加热至约 70℃， 搅拌 4h。将混 合物冷却至室温， 过滤。将残余物用 Na2CO3 水溶液处理， 过滤， 用水洗涤， 干燥。得到 4- 羟 基喹啉 -3- 羧酸乙基酯， 为淡褐色固体 (15.2g， 70％ )。粗产物无需进一步纯化即可用于下 一步。
     A-1 ； 4- 氧代 -1， 4- 二氢喹啉 -3- 羧酸
     将 4- 羟基喹啉 -3- 羧酸乙基酯 (15g， 69mmol) 悬浮在氢氧化钠溶液 (2N， 150mL) 中， 在回流下搅拌 2h。冷却后， 将混合物过滤， 滤液用 2N HCl 酸化至 pH 4。过滤收集所得 沉淀， 用水洗涤， 在真空下干燥， 得到 4- 氧代 -1， 4- 二氢喹啉 -3- 羧酸 (A-1)， 为苍白色固体 (10.5g， 92％ )。 1
     H NMR(d-DMSO)δ15.34(s， 1H)， 13.42(s， 1H)， 8.89(s， 1H)， 8.28(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.88(m， 1H)， 7.81(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.60(m， 1H).
     具体实例 A-2 ； 6- 氟 -4- 羟基 - 喹啉 -3- 羧酸
     按照上述一般流程合成 6- 氟 -4- 羟基 - 喹啉 -3- 羧酸 (A-2)， 始于 4- 氟 - 苯基 胺。总收率 (53％ )。 1
     H NMR(DMSO-d6)δ
     15.2(br s ， 1H) ， 8.89(s ， 1H) ， 7.93-7.85(m ， 2H) ， 7.80-7.74(m ， 1H) ； ESI-MS + 207.9m/z(MH ).
     实施例 2
     2- 溴 -5- 甲氧基 - 苯基胺
     将 1- 溴 -4- 甲氧基 -2- 硝基 - 苯 (10g， 43mmol) 与阮内镍 (5g) 在乙醇 (100mL) 中的混合物在 H2(1atm) 和室温下搅拌 4h。滤出阮内镍， 在减压下浓缩滤液。所得固体经过 柱色谱纯化， 得到 2- 溴 -5- 甲氧基 - 苯基胺 (7.5g， 86％ )。
     2-[(2- 溴 -5- 甲氧基 - 苯基氨基 )- 亚甲基 ]- 丙二酸二乙基酯
     将 2- 溴 -5- 甲氧基 - 苯基胺 (540mg， 2.64mmol) 与二乙基 2-( 乙氧基亚甲基 ) 丙 二酸酯 (600mg， 2.7mmol) 的混合物在 100℃下搅拌 2h。 冷却后， 使反应混合物从甲醇 (10mL) 中重结晶， 得到 2-[(2- 溴 -5- 甲氧基苯基氨基 )- 亚甲基 ]- 丙二酸二乙基酯， 为黄色固体 (0.8g， 81％ )。
     8- 溴 -5- 甲氧基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸乙基酯
     在 120℃下， 向多磷酸 (30g) 缓慢加入 2-[(2- 溴 -5- 甲氧基 - 苯基氨基 )- 亚甲 基 ]- 丙二酸二乙基酯 (9g， 24.2mmol)。 将混合物在该温度下搅拌另外 30min， 然后冷却至室 温。加入绝对乙醇 (30mL)， 使所得混合物回流 30min。在 25℃下将混合物用含水碳酸氢钠 碱化， 用 EtOAc 萃取 (4x100mL)。合并有机层， 干燥， 蒸发溶剂， 得到 8- 溴 -5- 甲氧基 -4- 氧 代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸乙基酯 (2.3g， 30％ )。
     5- 甲氧基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸乙基酯
     将 8- 溴 -5- 甲氧基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸乙基酯 (2.3g， 7.1mmol)、 乙酸钠 (580mg， 7.1mmol) 与 10％ Pd/C(100mg) 在冰乙酸 (50mL) 中的混合物在 H2(2.5atm)
     下搅拌过夜。 过滤除去催化剂， 在减压下浓缩反应混合物。 将所得油溶于 CH2Cl2(100mL)， 用 碳酸氢钠水溶液和水洗涤。将有机层干燥， 过滤， 浓缩。粗产物经过柱色谱纯化， 得到 5- 甲 氧基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸乙基酯， 为黄色固体 (1g， 57％ )。
     A-4 ； 5- 甲氧基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸
     将 5- 甲氧基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸乙基酯 (1g， 7.1mmol) 在 10 ％ NaOH 溶液 (50mL) 中的混合物加热至回流过夜， 然后冷却至室温。混合物用醚萃取。分离 水相， 用浓 HCl 溶液酸化至 pH 1-2。过滤收集所得沉淀， 得到 5- 甲氧基 -4- 氧代 -1， 4- 二 氢 - 喹啉 -3- 羧酸 (A-4)(530mg， 52％ )。 1
     HNMR(DMSO)δ ： 15.9(s， 1H)， 13.2(br， 1H)， 8.71(s， 1H)， 7.71(t， J ＝ 8.1Hz， 1H)， + 7.18(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 6.82(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 3.86(s， 3H) ； ESI-MS 219.9m/z(MH ).
     实施例 3
     钠 2-( 巯基 - 苯基氨基 - 亚甲基 )- 丙二酸二乙基酯
     在室温下， 向 NaH(60％矿物油分散体， 6g， 0.15mol) 的 Et2O 悬液历经 30 分钟滴加 丙二酸乙酯 (24g， 0.15mol)。然后历经 30min 滴加异硫氰酸苯基酯 (20.3g， 0.15mol)， 同时 搅拌。将混合物回流 1h， 然后在室温下搅拌过夜。分离固体， 用无水醚 (200mL) 洗涤， 在真 空下干燥， 得到钠 2-( 巯基 - 苯基氨基 - 亚甲基 )- 丙二酸二乙基酯， 为淡黄色粉末 (46g， 97％ )。
     2-( 甲硫基 - 苯基氨基 - 亚甲基 )- 丙二酸二乙基酯
     历经 30min 将甲基碘 (17.7g， 125mmol) 滴加到在冰浴中冷却的钠 2-( 巯基 - 苯基 氨基 - 亚甲基 )- 丙二酸二乙基酯 (33g， 104mmol) 的 DMF(100mL) 溶液中。将混合物在室温 下搅拌 1h， 然后倒入冰水 (300mL) 中。过滤收集所得固体， 用水洗涤， 干燥， 得到 2-( 甲硫
     基 - 苯基氨基 - 亚甲基 )- 丙二酸二乙基酯， 为淡黄色固体 (27g， 84％ )。
     4- 羟基 -2- 甲硫基 - 喹啉 -3- 羧酸乙基酯
     将 2-( 甲硫基 - 苯基氨基 - 亚甲基 )- 丙二酸二乙基酯 (27g， 87mmol) 在 1， 2- 二氯 苯 (100mL) 中的混合物加热至回流达 1.5h。 在减压下除去溶剂， 油性残余物用己烷研制， 得 到淡黄色固体， 经过制备型 HPLC 纯化， 得到 4- 羟基 -2- 甲硫基 - 喹啉 -3- 羧酸乙基酯 (8g， 35％ )。
     A-16 ； 2- 甲硫基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸
     将 4- 羟基 -2- 甲硫基 - 喹啉 -3- 羧酸乙基酯 (8g， 30mmol) 在回流的 NaOH 溶液 (10％， 100mL) 中加热 1.5h。 冷却后， 混合物用浓 HCl 酸化至 pH 4。 过滤收集所得固体， 用水(100mL) 和 MeOH(100mL) 洗涤， 得到 2- 甲硫基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸 (A-16)， 为白色固体 (6g， 85％ )。 1
     HNMR(CDCl3)δ16.4(brs， 1H)， 11.1(br s， 1H)， 8.19(d， J ＝ 8Hz， 1H)， 8.05(d， J ＝ 8Hz， 1H)， 7.84(t， J ＝ 8， 8Hz， 1H)， 7.52(t， J ＝ 8Hz， 1H)， 2.74(s， 3H) ； ESI-MS 235.9m/ + z(MH ).
     实施例 4
     a)PPh3， Et3N， CCl4， CF3CO2H ； b) 丙二酸二乙酯 ；； c)T ～ 200℃ ； d)10％ NaOH
     2， 2， 2- 三氟 -N- 苯基 - 亚氨基乙酰氯
     将 Ph3P(138.0g， 526mmol)、 Et3N(21.3g， 211mmol)、 CCl4(170mL) 与 TFA(20g， 175mmol) 的混合物在冰浴中搅拌 10min。加入苯胺 (19.6g， 211mmol) 的 CCl4(20mL) 溶液。 将混合物在回流下搅拌 3h。在真空下除去溶剂， 加入己烷。滤出沉淀 (Ph3PO 和 Ph3P)， 用己
     烷洗涤。在减压下蒸馏滤液， 得到 2， 2， 2- 三氟 -N- 苯基 - 亚氨基乙酰氯 (19g)， 无需进一步 纯化即可用于下一步。
     2-(2， 2， 2- 三氟 -1- 苯基亚氨基 - 乙基 )- 丙二酸二乙基酯
     在 0℃下， 向 NaH(3.47g， 145mmol， 60％矿物油分散体 ) 的 THF(200mL) 悬液加入丙 二酸二乙酯 (18.5g， 116mmol)。将混合物在该温度下搅拌 30min， 在 0℃下加入 2， 2， 2- 三 氟 -N- 苯基 - 亚氨基乙酰氯 (19g， 92mmol)。使反应混合物升温至室温， 搅拌过夜。将混合 物用 CH2Cl2 稀释， 用饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤。合并有机层， 经 Na2SO4 干燥， 过滤， 浓 缩， 得到 2-(2， 2， 2- 三氟 -1- 苯基亚氨基 - 乙基 )- 丙二酸二乙基酯， 无需进一步纯化即可 用于下一步。
     4- 羟基 -2- 三氟甲基 - 喹啉 -3- 羧酸乙基酯
     将 2-(2， 2， 2- 三氟 -1- 苯基亚氨基 - 乙基 )- 丙二酸二乙基酯在 210℃下搅拌 1h， 同时连续搅拌。 混合物经过柱色谱纯化 ( 石油醚 )， 得到 4- 羟基 -2- 三氟甲基 - 喹啉 -3- 羧 酸乙基酯 (12g， 3 步收率 24％ )。
     A-15 ； 4- 羟基 -2- 三氟甲基 - 喹啉 -3- 羧酸
     将 4- 羟基 -2- 三氟甲基 - 喹啉 -3- 羧酸乙基酯 (5g， 17.5mmol) 在 10 ％ NaOH 水 溶液中的悬液在回流下加热 2h。冷却后， 加入二氯甲烷， 分离水相， 用浓 HCl 酸化至 pH 4。 过滤收集所得沉淀， 用水和 Et2O 洗涤， 得到 4- 羟基 -2- 三氟甲基 - 喹啉 -3- 羧酸 (A-15) (3.6g， 80％ )。 1
     HNMR(DMSO-d6)δ8.18-8.21(d， J ＝ 7.8Hz， 1H)， 7.92-7.94(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， + 7.79-7.83(t， J ＝ 14.4Hz， 1H)， 7.50-7.53(t， J ＝ 15Hz， 1H) ； ESI-MS 257.0m/z(MH ).
     实施例 5
     a)CH3C(O)ONH4， 甲苯 ； b)EtOCHC(CO2Et)2， 130 ℃ ； c)Ph2O ； d)I2， EtOH ； e)NaOH3- 氨 基 - 环己 -2- 烯酮
     利用 Dean-stark 设备， 将环己烷 -1， 3- 二酮 (56.1g， 0.5mol) 与 AcONH4(38.5g， 0.5mol) 在甲苯中的混合物在回流下加热 5h。分离所得油性层， 在减压下浓缩， 得到 3- 氨 基 - 环己 -2- 烯酮 (49.9g， 90％ )， 无需进一步纯化即可用于下一步。
     2-[(3- 氧代 - 环己 -1- 烯基氨基 )- 亚甲基 ]- 丙二酸二乙基酯
     将 3- 氨基 - 环己 -2- 烯酮 (3.3g， 29.7mmol) 与二乙基 2-( 乙氧基亚甲基 ) 丙二 酸酯 (6.7g， 31.2mmol) 的混合物在 130℃下搅拌 4h。在减压下浓缩反应混合物， 所得油经 过柱色谱纯化 ( 硅胶， 乙酸乙酯 )， 得到 2-[(3- 氧代 - 环己 -1- 烯基氨基 )- 亚甲基 ]- 丙二 酸二乙基酯 (7.5g， 90％ )。
     4， 5- 二氧代 -1， 4， 5， 6， 7， 8- 六氢 - 喹啉 -3- 羧酸乙基酯
     将 2-[(3- 氧代 - 环己 -1- 烯基氨基 )- 亚甲基 ]- 丙二酸二乙基酯 (2.8g， 1mmol) 与二苯醚 (20mL) 的混合物回流 15min。 冷却后， 加入正己烷 (80mL)。 过滤分离所得固体， 从 甲醇中重结晶， 得到 4， 5- 二氧代 -1， 4， 5， 6， 7， 8- 六氢 - 喹啉 -3- 羧酸乙基酯 (1.7g， 72％ )。
     5- 羟基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸乙基酯
     向 4， 5- 二氧代 -1， 4， 5， 6， 7， 8- 六氢 - 喹啉 -3- 羧酸乙基酯 (1.6g， 6.8mmol) 的乙 醇 (100mL) 溶液加入碘 (4.8g， 19mmol)。将混合物回流 19h， 然后在减压下浓缩。将所得固 体用乙酸乙酯、 水和丙酮洗涤， 然后从 DMF 中重结晶， 得到 5- 羟基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹 啉 -3- 羧酸乙基酯 (700mg， 43％ )。
     A-3 ； 5- 羟基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸
     将 5- 羟基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸乙基酯 (700mg， 3mmol) 在 10 ％ NaOH(20mL) 中的混合物在回流下加热过夜。冷却后， 混合物用醚萃取。分离水相， 用浓 HCl 酸化至 pH 1-2。过滤收集所得沉淀， 得到 5- 羟基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢喹啉 -3- 羧酸 (A-3) (540mg， 87％ )。H NMR 1
     H NMR(DMSO-d6)δ13.7(br， 1H)， 13.5(br， 1H)， 12.6(s， 1H)， 8.82(s， 1H)， 7.68(t， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 7.18(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 6.82(d， J ＝ 8.4Hz， 1H) ； ESI-MS 205.9m/z(MH+).
     实施例 6
     a)POCl3 ； b)MeONa ； c)n-BuLi， ClCO2Et ； d)NaOH
     2， 4- 二氯喹啉
     将喹啉 -2， 4- 二醇 (15g， 92.6mmol) 的 POCl3 悬液在回流下加热 2h。冷却后， 在减 压下除去溶剂， 得到 2， 4- 二氯喹啉， 无需进一步纯化即可使用。
     2， 4- 二甲氧基喹啉
     向 2， 4- 二氯喹啉的 MeOH 悬液 (100mL) 加入甲醇钠 (50g)。将混合物在回流下加 热 2 天。冷却后， 过滤混合物。在减压下浓缩滤液， 得到残余物， 将其溶于水， 用 CH2Cl2 萃 取。合并有机层， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到 2， 4- 二甲氧基喹啉， 为白色固体 (13g， 2 步收率
     74％ )。 乙基 2， 4- 二甲氧基喹啉 -3- 羧酸酯
     在 0 ℃ 下， 向 2， 4- 二 甲 氧 基 喹 啉 (11.5g， 60.8mmol) 的 无 水 THF 溶 液 滴 加 n-BuLi(2.5M 己烷溶液， 48.6mL， 122mmol)。在 0℃下搅拌 1.5h 后， 将混合物加入到氯甲酸 乙酯的无水 THF 溶液中， 在 0℃下搅拌另外 30min， 然后在室温下搅拌过夜。将反应混合物 倒入水中， 用 CH2Cl2 萃取。将有机层经 Na2SO4 干燥， 在真空下浓缩。所得残余物经过柱色谱 纯化 ( 石油醚 /EtOAc ＝ 50/1)， 得到乙基 2， 4- 二甲氧基喹啉 -3- 羧酸酯 (9.6g， 60％ )。
     A-17 ； 2， 4- 二甲氧基喹啉 -3- 羧酸
     将乙基 2， 4- 二甲氧基喹啉 -3- 羧酸酯 (1.5g， 5.7mmol) 在回流的 NaOH 溶液 (10％， 100mL) 中加热 1h。冷却后， 混合物用浓 HCl 酸化至 pH 4。过滤收集所得沉淀， 用水和醚洗 涤， 得到 2， 4- 二甲氧基喹啉 -3- 羧酸 (A-17)， 为白色固体 (670mg， 50％ )。 1
     HNMR(CDCl3)δ8.01-8.04(d， J ＝ 12Hz， 1H)， 7.66-7.76(m， 2H)， 7.42-7.47(t， J＝ + 22Hz， 2H)， 4.09(s， 3H).3.97(s， 3H) ； ESI-MS 234.1m/z(MH ).
     商业上可得到的酸
     酸 A-5 A-6 A-7名称 6， 8- 二氟 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸 6-[(4- 氟 - 苯基 )- 甲基 - 氨磺酰基 ]-4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸 6-(4- 甲基 - 哌啶 -1- 磺酰基 )-4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸A-8 A-10 A-11 A-12 A-13 A-14 A-20 A-21 A-22 A-23 A-24
     4- 氧代 -6-( 吡咯烷 -1- 磺酰基 )-1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸 6- 乙基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸 6- 乙氧基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸 4- 氧代 -7- 三氟甲基 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸 7- 氯 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸 4- 氧代 -5， 7- 双 - 三氟甲基 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸 1- 甲基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸 1- 异丙基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸 1， 6- 二甲基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸 1- 乙基 -6- 甲氧基 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸 6- 氯 -4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 羧酸 胺片段 N-1 取代的 6- 氨基吲哚 实施例 1 一般流程 ：
     a)RX(X ＝ Cl， Br， I)， K2CO3， DMF or CH3CN ； b)H2， Pd-C， EtOH or SnCl2· 2H2O， EtOH. 具体实例 ：1- 甲基 -6- 硝基 -1H- 吲哚
     向 6- 硝基吲哚 (4.05g， 25mmol) 的 DMF(50mL) 溶液加入 K2CO3(8.63g， 62.5mmol) 和 MeI(5.33g， 37.5mmol)。在室温下搅拌过夜后， 将混合物倒入水中， 用乙酸乙酯萃取。合并 有机层， 经 Na2SO4 干燥， 在真空下浓缩， 得到产物 1- 甲基 -6- 硝基 -1H- 吲哚 (4.3g， 98％ )。
     B-1 ； 1- 甲基 -1H- 吲哚 -6- 基胺
     将 1- 甲 基 -6- 硝 基 -1H- 吲 哚 (4.3g， 24.4mmol) 与 10 ％ Pd-C(0.43g) 的 EtOH(50mL) 悬液在 H2(1atm) 和室温下搅拌过夜。过滤后， 浓缩滤液， 用 HCl-MeOH(4mol/ L) 酸化， 得到 1- 甲基 -1H- 吲哚 -6- 基胺盐酸盐 (B-1)(1.74g， 49 ％ )， 为灰色粉末。1H NMR(DMSO-d6) ： δ9.10(s， 2H)， 7.49(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.28(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 7.15(s， 1H)， 6.84(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 6.38(d， J ＝ 2.8Hz， 1H)， 3.72(s， 3H) ； ESI-MS 146.08m/ + z(MH ).
     其他实例 ：
     B-2 ； 1- 苄基 -1H- 吲哚 -6- 基胺
     按照上述一般流程合成 1- 苄基 -1H- 吲哚 -6- 基胺 (B-2)， 始于 6- 硝基吲哚合苄基 5min run ； ESI-MS 223.3m/ 溴。 总收率 ( ～ 40％ )。 HPLC 保留时间 2.19min， 10-99％ CH3CN， + z(MH ).
     B-3 ； 1-(6- 氨基 - 吲哚 -1- 基 )- 乙酮
     按照上述一般流程合成 1-(6- 氨基 - 吲哚 -1- 基 )- 乙酮 (B-3)， 始于 6- 硝基吲哚 和乙酰氯。总收率 ( ～ 40％ )。HPLC 保留时间 0.54min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS + 175.1m/z(MH ).
     实施例 2
     {[2-( 叔丁氧羰基 - 甲基 - 氨基 )- 乙酰基 ]- 甲基 - 氨基 }- 乙酸乙基酯 在 -20 ℃和氩下， 向搅拌着的 ( 叔丁氧羰基 - 甲基 - 氨基 )- 乙酸 (37g， 0.2mol)与 Et3N(60.6g， 0.6mol) 的 CH2Cl2(300mL) 溶液滴加氯甲酸异丁酯 (27.3g， 0.2mmol)。搅拌 0.5h 后， 在 -20℃下滴加甲基氨基 - 乙酸乙酯盐酸盐 (30.5g， 129mmol)。使混合物升温至 室温 ( 约 1h)， 用水 (500mL) 淬灭。分离有机层， 用 10％柠檬酸溶液洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 过滤， 浓缩。残余物经过柱色谱纯化 ( 石油醚 /EtOAc 1 ∶ 1)， 得到 {[2-( 叔丁氧羰基 - 甲 基 - 氨基 )- 乙酰基 ]- 甲基 - 氨基 }- 乙酸乙基酯 (12.5g， 22％ )。
     {[2-( 叔丁氧羰基 - 甲基 - 氨基 )- 乙酰基 ]- 甲基 - 氨基 }- 乙酸
     将 {[2-( 叔丁氧羰基 - 甲基 - 氨基 )- 乙酰基 ]- 甲基 - 氨基 }- 乙酸乙基酯 (12.3g， 42.7mmol) 与 LiOH(8.9g， 214mmol) 在 H2O(20mL) 与 THF(100mL) 中的悬液搅拌过夜。在真 空下除去挥发性溶剂， 残余物用醚萃取 (2x100mL)。将水相用稀 HCl 溶液酸化至 pH 3， 然 后用 CH2Cl2 萃取 (2x300mL)。合并有机层， 用盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 在真空下浓缩， 得到 {[2-( 叔丁氧羰基 - 甲基 - 氨基 )- 乙酰基 ]- 甲基 - 氨基 }- 乙酸， 为无色的油 (10g， 90％ )。 1
     H NMR(CDCl3)δ
     7.17(brs， 1H)， 4.14-4.04(m， 4H)， 3.04-2.88(m， 6H)， 1.45-1.41(m， 9H) ； ESI-MS + 282.9m/z(M+Na ).
     甲基 -({ 甲基 -[2-(6- 硝基 - 吲哚 -1- 基 )-2- 氧代 - 乙基 ]- 氨甲酰基 }- 甲 基 )- 氨基甲酸叔丁基酯
     在室温和氮下， 向 {[2-( 叔丁氧羰基 - 甲基 - 氨基 )- 乙酰基 ]- 甲基 - 氨基 }- 乙 酸 (13.8g， 53mmol) 与 TFFH(21.0g， 79.5mmol) 在 无 水 THF(125mL) 中 的 混 合 物 加 入 DIEA(27.7mL， 159mmol)。将溶液在室温下搅拌 20min。加入 6- 硝基吲哚 (8.6g， 53mmol) 的 THF(75mL) 溶液， 将反应混合物在 60℃下加热 18h。蒸发溶剂， 使粗混合物重新在 EtOAc 与水之间分配。分离有机层， 用水洗涤 (x3)， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩。加入二乙醚， 继之以 EtOAc。过滤收集所得固体， 用二乙醚洗涤， 风干， 得到甲基 -({ 甲基 -[2-(6- 硝基 - 吲 哚 -1- 基 )-2- 氧代 - 乙基 ]- 氨甲酰基 }- 甲基 )- 氨基甲酸叔丁基酯 (6.42g， 30％ )。 1
     H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ1.37(m， 9H)， 2.78(m， 3H)， 2.95(d， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 3.12(d， J ＝ 2.1Hz， 2H)， 4.01(d， J ＝ 13.8Hz， 0.6H)， 4.18(d， J ＝ 12.0Hz， 1.4H)， 4.92(d， J ＝ 3.4Hz， 1.4H)， 5.08(d， J ＝ 11.4Hz， 0.6H)， 7.03(m， 1H)， 7.90(m， 1H)， 8.21(m， 1H)， 8.35(d， J ＝ 3.8Hz， 1H)， 9.18(m， 1H) ； HPLC 保 留 时 间 3.12min， 10-99 ％ CH3CN， 5min run ； + ESI-MS 405.5m/z(MH ).
     B-26 ； ({[2-(6- 氨 基 - 吲 哚 -1- 基 )-2- 氧 代 - 乙 基 ]- 甲 基 - 氨 甲 酰 基 }- 甲 基 )- 甲基 - 氨基甲酸叔丁基酯
     将 甲 基 -({ 甲 基 -[2-(6- 硝 基 - 吲 哚 -1- 基 )-2- 氧 代 - 乙 基 ]- 氨 甲 酰 基 }- 甲基 )- 氨基甲酸叔丁基酯 (12.4g， 30.6mmol)、 SnCl2·2H2O(34.5g， 153.2mmol) 与 DIEA(74.8mL， 429mmol) 在乙醇 (112mL) 中的混合物加热至 70 ℃达 3h。加入水和 EtOAc， 混合物通过短 C 盐塞过滤。分离有机层， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到 ({[2-(6- 氨基 - 吲 哚 -1- 基 )-2- 氧代 - 乙基 ]- 甲基 - 氨甲酰基 }- 甲基 )- 甲基 - 氨基甲酸叔丁基酯 (B-26) (11.4g， quant.)。HPLC 保 留 时 间 2.11min， 10-99 ％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 375.3m/ + z(MH ).
     2- 取代的 6- 氨基吲哚
     实施例 1B-4-a ； (3- 硝基 - 苯基 )- 肼盐酸盐
     将 3- 硝 基 - 苯 基 胺 (27.6g， 0.2mol) 溶 于 H2O(40mL) 与 37 ％ HCl(40mL) 的 混 合 物。 在 0 ℃ 下 加 入 NaNO2(13.8g， 0.2mol) 的 H2O(60mL) 溶 液， 继之以在该温度下加入
     SnCl2·H2O(135.5g， 0.6mol) 的 37％ HCl(100mL) 溶液。在 0℃下搅拌 0.5h 后， 过滤分离固 体， 用水洗涤， 得到 (3- 硝基 - 苯基 )- 肼盐酸盐 (B-4-a)(27.6g， 73％ )。
     2-[(3- 硝基 - 苯基 )- 肼基 ]- 丙酸乙基酯
     将 (3- 硝基 - 苯基 )- 肼盐酸盐 (B-4-a)(30.2g， 0.16mol) 和 2- 氧代 - 丙酸乙基 酯 (22.3g， 0.19mol) 溶于乙醇 (300mL)。将混合物在室温下搅拌 4h。在减压下蒸发溶剂， 得到 2-[(3- 硝基 - 苯基 )- 肼基 ]- 丙酸乙基酯， 直接用于下一步。
     B-4-b ； 4- 硝基 -1H- 吲哚 -2- 羧酸乙基酯和 6- 硝基 -1H- 吲哚 -2- 羧酸乙基酯
     将来自前步的 2-[(3- 硝基 - 苯基 )- 肼基 ]- 丙酸乙基酯溶于甲苯 (300mL)。加入 PPA(30g)。将混合物在回流下加热过夜， 然后冷却至室温。除去溶剂， 得到 4- 硝基 -1H- 吲 哚 -2- 羧酸乙基酯与 6- 硝基 -1H- 吲哚 -2- 羧酸乙基酯 (B-4-b) 的混合物 (15g， 40％ )。
     B-4 ； 2- 甲基 -1H- 吲哚 -6- 基胺
     在 0℃和 N2 下， 向 LiAlH4(7.8g， 0.21mol) 的 THF(300mL) 悬液滴加 4- 硝基 -1H- 吲 哚 -2- 羧 酸 乙 基 酯 与 6- 硝 基 -1H- 吲 哚 -2- 羧 酸 乙 基 酯 (B-4-b)(6g， 25.7mmol) 在 THF(50mL) 中的混合物。将混合物在回流下加热过夜， 然后冷却至 0℃。在 0℃下向混合物 加入 H2O(7.8mL) 和 10％ NaOH(7.8mL)。过滤除去不溶性固体。将滤液经 Na2SO4 干燥， 过滤， 在减压下浓缩。粗残余物经过柱色谱纯化， 得到 2- 甲基 -1H- 吲哚 -6- 基胺 (B-4)(0.3g， 8％ )。 1
     H NMR(CDCl 3 ) δ 7.57(br s ， 1H) ， 7.27(d ，J ＝ 8.8Hz ， 1H) ， 6.62(s ， 1H) ， 6.51-6.53(m ， 1H) ， 6.07(s ， 1H) ， 3.59-3.25(br s ， 2H) ， 2.37(s ， 3H) ； ESI-MS 147.2m/ + + z(MH ).m/z(MH ).
     实施例 2
     6- 硝基 -1H- 吲哚 -2- 羧酸和 4- 硝基 -1H- 吲哚 -2- 羧酸
     将 4- 硝基 -1H- 吲哚 -2- 羧酸乙基酯与 6- 硝基 -1H- 吲哚 -2- 羧酸乙基酯 (B-4-b) (0.5g， 2.13mmol) 在 10％ NaOH(20mL) 中的混合物在回流下加热过夜， 然后冷却至室温。混 合物用醚萃取。分离水相， 用 HCl 酸化至 pH 1-2。过滤分离所得固体， 得到 6- 硝基 -1H- 吲 哚 -2- 羧酸与 4- 硝基 -1H- 吲哚 -2- 羧酸的混合物 (0.3g， 68％ )。
     6- 硝基 -1H- 吲哚 -2- 羧酸酰胺和 4- 硝基 -1H- 吲哚 -2- 羧酸酰胺
     使 6- 硝 基 -1H- 吲 哚 -2- 羧 酸 与 4- 硝 基 -1H- 吲 哚 -2- 羧 酸 (12g， 58mmol) 和 SOCl2(50mL， 64mmol) 在苯 (150mL) 中的混合物回流 2h。在减压下除去苯和过量的 SOCl2。 将残余物溶于 CH2Cl2(250mL)。 在 0℃下滴加 NH4OH(21.76g， 0.32mol)。 将混合物在室温下搅 拌 1h。 过滤分离所得固体， 得到 6- 硝基 -1H- 吲哚 -2- 羧酸酰胺与 4- 硝基 -1H- 吲哚 -2- 羧 酸酰胺的粗混合物 (9g， 68％ )， 直接用于下一步。
     6- 硝基 -1H- 吲哚 -2- 甲腈和 4- 硝基 -1H- 吲哚 -2 甲腈
     将 6- 硝 基 -1H- 吲 哚 -2- 羧 酸 酰 胺 与 4- 硝 基 -1H- 吲 哚 -2- 羧 酸 酰 胺 的 混 合 物 (5g， 24mmol) 溶于 CH2Cl2(200mL)。加入 Et3N(24.24g， 0.24mol)， 继之以在室温下加入 (CF3CO)2O(51.24g， 0.24mol)。将混合物搅拌 1h， 倒入水 (100mL) 中。分离有机层。水层用 EtOAc 萃取 (100mLx3)。合并有机层， 经 Na2SO4 干燥， 过滤， 在减压下浓缩。粗残余物经过柱 色谱纯化， 得到 6- 硝基 -1H- 吲哚 -2- 甲腈与 4- 硝基 -1H- 吲哚 -2- 甲腈的混合物 (2.5g， 55％ )。
     B-5 ； 6- 氨基 -1H- 吲哚 -2- 甲腈
     将 6- 硝基 -1H- 吲哚 -2- 甲腈与 4- 硝基 -1H- 吲哚 -2- 甲腈 (2.5g， 13.4mmol) 和 阮内镍 (500mg) 在 EtOH(50mL) 中的混合物在室温和 H2(1atm) 下搅拌 1h。滤出阮内镍。在 减压下蒸发滤液， 经过柱色谱纯化， 得到 6- 氨基 -1H- 吲哚 -2- 甲腈 (B-5)(1g， 49％ )。 1
     H NMR(DMSO-d6)δ12.75(br s， 1H)， 7.82(d， J ＝ 8Hz， 1H)， 7.57(s， 1H)， 7.42(s， + 1H)， 7.15(d， J ＝ 8Hz， 1H) ； ESI-MS 158.2m/z(MH ).
     实施例 3
     2， 2- 二甲基 -N- 邻 - 甲苯基 - 丙酰胺
     在 10 ℃下， 向邻 - 甲苯基胺 (21.4g， 0.20mol) 与 Et3N(22.3g， 0.22mol) 的 CH2Cl2 溶 液 加 入 2， 2- 二 甲 基 - 丙 酰 氯 (25.3g， 0.21mol)。 将 混 合 物 在 室 温 下 搅 拌 过 夜， 用 aq.HCl(5 ％， 80mL)、 饱和 NaHCO3 溶液和盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 在真空下浓缩， 得到 2， 2- 二甲基 -N- 邻 - 甲苯基丙酰胺 (35.0g， 92％ )。
     2- 叔丁基 -1H- 吲哚
     在 15 ℃ 下， 向 2， 2- 二 甲 基 -N- 邻 - 甲 苯 基 - 丙 酰 胺 (30.0g， 159mmol) 的 无 水 THF(100mL) 溶液滴加 n-BuLi(2.5M 己烷溶液， 190mL)。将混合物在 15℃下搅拌过夜， 在冰 水浴中冷却， 用饱和 NH4Cl 溶液处理。分离有机层， 水层用乙酸乙酯萃取。合并有机层， 经 无水 Na2SO4 干燥， 过滤， 在真空中浓缩。残余物经过柱色谱纯化， 得到 2- 叔丁基 -1H- 吲哚 (23.8g， 88％ )。
     2- 叔丁基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚
     在 10℃下， 向 2- 叔丁基 -1H- 吲哚 (5.0g， 29mmol) 的 AcOH(20mL) 溶液加入 NaBH4。 将混合物在 10℃下搅拌 20min， 在冰冷却下用 H2O 逐滴处理， 用乙酸乙酯萃取。 合并有机层， 经无水 Na2SO4 干燥， 过滤， 在真空下浓缩， 得到原料与 2- 叔丁基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚的混 合物 (4.9g)， 直接用于下一步。
     2- 叔丁基 -6- 硝基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚
     在 0 ℃下， 向 2- 叔丁基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚与 2- 叔丁基 -1H- 吲哚的混合物 (9.7g) 的 H2SO4(98％， 80mL) 溶液缓慢加入 KNO3(5.6g， 55.7mmol)。将反应混合物在室温下 搅拌 1h， 小心地倒入碎冰中， 用 Na2CO3 碱化至 pH ～ 8， 用乙酸乙酯萃取。合并萃取液， 用盐 水洗涤， 经无水 Na2SO4 干燥， 在真空下浓缩。残余物经过柱色谱纯化， 得到 2- 叔丁基 -6- 硝 基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚 (4.0g， 2 步收率 32％ )。
     2- 叔丁基 -6- 硝基 -1H- 吲哚
     在室温下， 向 2- 叔丁基 -6- 硝基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚 (2.0g， 9.1mmol) 的 1， 4- 二烷 (20mL) 溶液加入 DDQ。回流 2.5h 后， 将混合物过滤， 在真空下浓缩滤液。残余物经过 柱色谱纯化， 得到 2- 叔丁基 -6- 硝基 -1H- 吲哚 (1.6g， 80％ )。 B-6 ； 2- 叔丁基 -1H- 吲哚 -6- 基胺
     向 2- 叔丁基 -6- 硝基 -1H- 吲哚 (1.3g， 6.0mmol) 的 MeOH(10mL) 溶液加入阮内镍 (0.2g)。将混合物在室温和 H2(1atm) 下搅拌 3h。将反应混合物过滤， 浓缩滤液。残余物用 石油醚洗涤， 得到 2- 叔丁基 -1H- 吲哚 -6- 基胺 (B-6)(1.0g， 89％ )。 1
     H NMR(DMSO-d6)δ10.19(s， 1H)， 6.99(d， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 6.46(s， 1H)， 6.25(dd， J ＝ 1.8， 8.1Hz， 1H)， 5.79(d， J ＝ 1.8Hz， 1H)， 4.52(s， 2H)， 1.24(s， 9H) ； ESI-MS 189.1m/ + z(MH ).
     3- 取代的 6- 氨基吲哚
     实施例 1
     N-(3- 硝基 - 苯基 )-N′ - 亚丙基 - 肼
     将氢氧化钠溶液 (10 ％， 15mL) 缓慢加入到搅拌着的 (3- 硝基苯基 )- 肼盐酸盐 (B-4-a)(1.89g， 10mmol) 的乙醇 (20mL) 悬液中直至 pH 6。向混合物加入乙酸 (5mL)， 继之 以丙醛 (0.7g， 12mmol)。在室温下搅拌 3h 后， 将混合物倒入冰水中， 过滤分离所得沉淀， 用 水洗涤， 风干， 得到 N-(3- 硝基 - 苯基 )-N′ - 亚丙基 - 肼， 直接用于下一步。
     3- 甲基 -4- 硝基 -1H- 吲哚和 3- 甲基 -6- 硝基 -1H- 吲哚
     将 N-(3- 硝基 - 苯基 )-N′ - 亚丙基 - 肼的 85％ H3PO4 溶液 (20mL) 与甲苯 (20mL) 的混合物在 90-100℃下加热 2h。冷却后， 在减压下除去甲苯。所得油用 10％ NaOH 碱化至 pH 8。水层用 EtOAc 萃取 (100mLx3)。合并有机层， 干燥， 过滤， 在减压下浓缩， 得到 3- 甲 基 -4- 硝基 -1H- 吲哚与 3- 甲基 -6- 硝基 -1H- 吲哚的混合物 (1.5g， 2 步收率 86％ )， 直接 用于下一步。
     B-7 ； 3- 甲基 -1H- 吲哚 -6- 基胺
     将 3- 甲基 -4- 硝基 -1H- 吲哚与 3- 甲基 -6- 硝基 -1H- 吲哚 (3g， 17mol) 和 10％ Pd-C(0.5g) 在乙醇 (30mL) 中的混合物在 H2(1atm) 和室温下搅拌过夜。滤出 Pd-C， 在减压 下浓缩滤液。 残余物经过柱色谱纯化， 得到 3- 甲基 -1H- 吲哚 -6- 基胺 (B-7)(0.6g， 24％ )。
     119CN 101935301 A
     1说明书85/218 页H NMR(CDCl3)δ7.59(br s， 1H)， 7.34(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 6.77(s， 1H)， 6.64(s， + 1H)， 6.57(m， 1H)， 3.57(br s， 2H)， 2.28(s， 3H) ； ESI-MS 147.2m/z(MH ).147.2m/z(MH+).
     实施例 2
     6- 硝基 -1H- 吲哚 -3- 甲腈
     在 0℃下， 向 6- 硝基吲哚 (4.86g， 30mmol) 的 DMF(24.3mL) 与 CH3CN(243mL) 溶液 滴加 ClSO2NCO(5mL， 57mmol) 的 CH3CN(39mL) 溶液。加入后， 使反应升温至室温， 搅拌 2h。将 混合物倒入冰水中， 用饱和 NaHCO3 溶液碱化至 pH 7-8， 用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水 洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到 6- 硝基 -1H- 吲哚 -3- 甲腈 (4.6g， 82％ )。
     B-8 ； 6- 氨基 -1H- 吲哚 -3- 甲腈
     将 6- 硝 基 -1H- 吲 哚 -3- 甲 腈 (4.6g， 24.6mmol) 与 10 ％ Pd-C(0.46g) 的 EtOH(50mL) 悬液在 H2(1atm) 和室温下搅拌过夜。过滤后， 浓缩滤液， 残余物经过柱色谱纯
     化 ( 石油醚 /EtOAc ＝ 3/1)， 得到 6- 氨基 -1H- 吲哚 -3- 甲腈 (B-8)(1g， 99％ )， 为粉红色粉 末。 1
     H
     NMR(DMSO-d6)δ11.51(s， 1H)， 7.84(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 7.22(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， + + 6.62(s， 1H)， 6.56(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 5.0(s， 2H) ； ESI-MS 157.1m/z(MH ).m/z(MH ).
     实施例 3
     二甲基 -(6- 硝基 -1H- 吲哚 -3- 基甲基 )- 胺
     将 二 甲 基 胺 (25g， 0.17mol) 与 甲 醛 (14.4mL， 0.15mol) 的 乙 酸 (100mL) 溶 液 在 0 ℃下搅拌 30min。向该溶液加入 6- 硝基 -1H- 吲哚 (20g， 0.12mol)。在室温下搅拌 3 天 后， 将混合物倒入 0℃的 15％ NaOH 水溶液 (500mL) 中。过滤收集沉淀， 用水洗涤， 得到二甲 基 -(6- 硝基 -1H- 吲哚 -3- 基甲基 )- 胺 (23g， 87％ )。
     B-9-a ； (6- 硝基 -1H- 吲哚 -3- 基 )- 乙腈
     向 DMF(35mL) 与 Me I(74.6g， 0.53mol) 在水 (35mL) 与 THF(400mL) 中的混合物加 入二甲基 -(6- 硝基 -1H- 吲哚 -3- 基甲基 )- 胺 (23g， 0.105mol)。 使反应混合物回流 10min
     后， 加入氰化钾 (54.6g， 0.84mol)， 使混合物保持回流过夜。然后将混合物冷却至室温， 过 滤。将滤液用盐水洗涤 (300mLx3)， 经 Na2SO4 干燥， 过滤， 浓缩。残余物经过柱色谱纯化， 得 到 (6- 硝基 -1H- 吲哚 -3- 基 )- 乙腈 (B-9-a)(7.5g， 36％ )。
     B-9 ； (6- 氨基 -1H- 吲哚 -3- 基 )- 乙腈
     将 (6- 硝 基 -1H- 吲 哚 -3- 基 )- 乙 腈 (B-9-a)(1.5g， 74.5mmol) 与 10 ％ Pd-C(300mg) 在 EtOH(50mL) 中的混合物在室温和 H2(1atm) 下搅拌 5h。 过滤除去 Pd-C， 蒸发 1 滤液， 得到 (6- 氨基 -1H- 吲哚 -3- 基 ) 乙腈 (B-9)(1.1g， 90％ )。H NMR(DMSO-d6)δ10.4(br s， 1H)， 7.18(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 6.94(s， 1H)， 6.52(s， 1H)， 6.42(dd， J ＝ 8.4， 1.8Hz， 1H)， + 4.76(s， 2H)， 3.88(s， 2H) ； ESI-MS 172.1m/z(MH ).
     实施例 4
     [2-(6- 硝基 -1H- 吲哚 -3- 基 )- 乙基 ]- 氨基甲酸叔丁基酯
     在 0 ℃ 下， 向 (6- 硝 基 -1H- 吲 哚 -3- 基 )- 乙 腈 (B-9-a)(8.6g， 42.8mmol) 的 无 水 THF(200mL) 溶液加入 2M 硼烷 - 二甲基硫配合物的 THF 溶液 (214mL， 0.43mol)。在氮下 将混合物在回流下加热过夜。然后将混合物冷却至室温， 加入 (Boc)2O(14g， 64.2mmol) 与 Et3N(89.0mL， 0.64mol) 的 THF 溶液。将反应混合物保持搅拌过夜， 然后倒入冰水中。分离 有机层， 水相用 EtOAc 萃取 (200x3mL)。 合并有机层， 用水和盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 过滤， 在减压下浓缩。粗产物经过柱色谱纯化， 得到 [2-(6- 硝基 -1H- 吲哚 -3- 基 )- 乙基 ]- 氨 基甲酸叔丁基酯 (5g， 38％ )。
     B-10 ； [2-(6- 氨基 -1H- 吲哚 -3- 基 )- 乙基 ]- 氨基甲酸叔丁基酯
     将 [2-(6- 硝基 -1H- 吲哚 -3- 基 )- 乙基 ]- 氨基甲酸叔丁基酯 (5g， 16.4mmol) 与 阮内镍 (1g) 的 EtOH(100mL) 混合物在室温和 H2(1atm) 下搅拌 5h。滤出阮内镍， 在减压下 蒸发滤液。粗产物经过柱色谱纯化， 得到 [2-(6- 氨基 -1H- 吲哚 -3- 基 )- 乙基 ]- 氨基甲 酸叔丁基酯 (B-10)(3g， 67％ )。 1
     H NMR(DMSO-d6)δ10.1(br s， 1H)， 7.11(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 6.77-6.73(m， 2H)， 6.46(d， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 6.32(dd， J ＝ 8.4， 2.1Hz， 1H)， 4.62(s， 2H)， 3.14-3.08(m， 2H)， + 2.67-2.62(m， 2H)， 1.35(s， 9H) ； ESI-MS 275.8m/z(MH ).
     实施例 5
     一般流程 ：
     a)RX(X ＝ Br， I)，三 氟 甲 磺 酸 锌， TBAI， DIEA，甲 苯 ； b)H2，阮 内 Ni， EtOH orSnCl2·2H2O， EtOH.
     具体实例 ：
     3- 叔丁基 -6- 硝基 -1H- 吲哚
     在室温和氮下， 向 6- 硝基吲哚 (1g， 6.2mmol)、 三氟甲磺酸锌 (2.06g， 5.7mmol) 与 TBAI(1.7g， 5.16mmol) 在无水甲苯 (11mL) 中的混合物加入 DIEA(1.47g， 11.4mmol)。将反 应混合物在 120℃下搅拌 10min， 继之以加入叔丁基溴 (0.707g， 5.16mmol)。将所得混合物 在 120 ℃下搅拌 45min。滤出固体， 浓缩滤液至干， 经过硅胶柱色谱纯化 ( 石油醚 /EtOAc 20 ∶ 1)， 得到 3- 叔丁基 -6- 硝基 -1H- 吲哚， 为黄色固体 (0.25g， 19 ％ )。1H NMR(CDCl3) δ8.32(d， J ＝ 2.1Hz， 1H)， 8.00(dd， J ＝ 2.1， 14.4Hz， 1H)， 7.85(d， J ＝ 8.7Hz， 1H)， 7.25(s， 1H)， 1.46(s， 9H).
     B-11 ； 3- 叔丁基 -1H- 吲哚 -6- 基胺
     将 3- 叔丁基 -6- 硝基 -1H- 吲哚 (3.0g， 13.7mmol) 与阮内镍 (0.5g) 的乙醇悬液在 室温和 H2(1atm) 下搅拌 3h。滤出催化剂， 浓缩滤液至干。残余物经过硅胶柱色谱纯化 ( 石 油醚 /EtOAc 4 ∶ 1)， 得到 3- 叔丁基 -1H- 吲哚 -6- 基胺 (B-11)(2.0g， 77.3％ )， 为灰色固 体。 1
     H NMR(CDCl3) ： δ7.58(m， 2H)， 6.73(d， J ＝ 1.2Hz， 1H)， 6.66(s， 1H)， 6.57(dd， J＝ 0.8， 8.6Hz， 1H)， 3.60(br s， 2H)， 1.42(s， 9H).
     其他实例 ：
     B-12 ； 3- 乙基 -1H- 吲哚 -6- 基胺
     按照上述一般流程合成 3- 乙基 -1H- 吲哚 -6- 基胺 (B-12)， 始于 6- 硝基吲哚和乙 基溴。总收率 (42％ )。HPLC 保留时间 1.95min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 161.3m/ + z(MH ).
     B-13 ； 3- 异丙基 -1H- 吲哚 -6- 基胺按照上述一般流程合成 3- 异丙基 -1H- 吲哚 -6- 基胺 (B-13)， 始于 6- 硝基吲哚 和异丙基碘。总收率 (17 ％ )。HPLC 保留时间 2.06min， 10-99 ％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS + 175.2m/z(MH ).
     B-14 ； 3- 仲丁基 -1H- 吲哚 -6- 基胺
     按照上述一般流程合成 3- 仲丁基 -1H- 吲哚 -6- 基胺 (B-14)， 始于 6- 硝基吲哚 和 2- 溴丁烷。总收率 (20％ )。HPLC 保留时间 2.32min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS + 189.5m/z(MH ).
     B-15 ； 3- 环戊基 -1H- 吲哚 -6- 基胺
     按照上述一般流程合成 3- 环戊基 -1H- 吲哚 -6- 基胺 (B-15)， 始于 6- 硝基吲哚和 碘代 - 环戊烷。总收率 (16％ )。HPLC 保留时间 2.39min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS + 201.5m/z(MH ).
     B-16 ； 3-(2- 乙氧基 - 乙基 )-1H- 吲哚 -6- 基胺
     按照上述一般流程合成 3-(2- 乙氧基 - 乙基 )-1H- 吲哚 -6- 基胺 (B-16)， 始于 6- 硝基吲哚和 1- 溴 -2- 乙氧基 - 乙烷。总收率 (15％ )。HPLC 保留时间 1.56min， 10-99％ + CH3CN， 5min run ； ESI-MS 205.1m/z(MH ).
     B-17 ； (6- 氨基 -1H- 吲哚 -3- 基 )- 乙酸乙基酯按照上述一般流程合成 (6- 氨基 -1H- 吲哚 -3- 基 )- 乙酸乙基酯 (B-17)， 始于 6- 硝基吲哚和碘代 - 乙酸乙基酯。 总收率 (24％ )。 HPLC 保留时间 0.95min， 10-99％ CH3CN， + 5min run ； ESI-MS 219.2m/z(MH ).
     4- 取代的 6- 氨基吲哚
     2- 甲基 -3， 5- 二硝基 - 苯甲酸
     在 0℃下， 向 HNO3(95％， 80mL) 与 H2SO4(98％， 80mL) 的混合物缓慢加入 2- 甲基苯 甲酸 (50g， 0.37mol)。加入后， 将反应混合物搅拌 1.5h， 同时保持温度低于 30℃， 倒入冰水 中， 搅拌 15min。过滤收集所得沉淀， 用水洗涤， 得到 2- 甲基 -3， 5- 二硝基 - 苯甲酸 (70g， 84％ )。
     2- 甲基 -3， 5- 二硝基 - 苯甲酸乙基酯
     将 2- 甲基 -3， 5- 二硝基 - 苯甲酸 (50g， 0.22mol) 在 SOCl2(80mL) 中的混合物在 回流下加热 4h， 然后浓缩至干。加入 CH2Cl2(50mL) 和 EtOH(80mL)。将混合物在室温下搅拌 1h， 倒入冰水中， 用 EtOAc 萃取 (3x100mL)。 合并萃取液， 用 sat.Na2CO3(80mL)、 水 (2x100mL) 和盐水 (100mL) 洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩至干， 得到 2- 甲基 -3， 5- 二硝基 - 苯甲酸乙基酯 (50g， 88％ )。
     2-(2- 二甲氨基 - 乙烯基 )-3， 5- 二硝基 - 苯甲酸乙基酯
     将 2- 甲基 -3， 5- 二硝基 - 苯甲酸乙基酯 (35g， 0.14mol) 与二甲氧基甲基 - 二甲 基 - 胺 (32g， 0.27mol) 在 DMF(200mL) 中的混合物在 100℃下加热 5h。将混合物倒入水中。 过滤收集沉淀， 用水洗涤， 得到 2-(2- 二甲氨基 - 乙烯基 )-3， 5- 二硝基 - 苯甲酸乙基酯 (11.3g， 48％ )。
     B-18 ； 6- 氨基 -1H- 吲哚 -4- 羧酸乙基酯
     将 2-(2- 二甲氨基 - 乙烯基 )-3， 5- 二硝基 - 苯甲酸乙基酯 (11.3g， 0.037mol) 与 SnCl2(83g， 0.37mol) 在乙醇中的混合物在回流下加热 4h。浓缩混合物至干， 将残余物倒入 水中， 用饱和 Na2CO3 溶液碱化至 pH 8。滤出沉淀， 滤液用乙酸乙酯萃取 (3x100mL)。合并萃 取液， 用水 (2x100mL) 和盐水 (150mL) 洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩至干。残余物经过硅胶柱 色谱纯化， 得到 6- 氨基 -1H- 吲哚 -4- 羧酸乙基酯 (B-18)(3g， 40％ )。 1
     H NMR(DMSO-d 6) δ 10.76(br s ， 1H) ， 7.11-7.14(m ， 2H) ， 6.81-6.82(m ， 1H) ，
     6.67-6.68(m， 1H)， 4.94(brs， 2H)， 4.32-4.25(q， J ＝ 7.2Hz， 2H)， 1.35-1.31(t， J ＝ 7.2， + + 3H).ESI-MS 205.0m/z(MH ).205.0m/z(MH ).
     5- 取代的 6- 氨基吲哚
     实施例 1
     一般流程 ：
     具体实例 ：1- 氟 -5- 甲基 -2， 4- 二硝基 - 苯
     向在冰浴中冷却的、 搅拌着的 HNO3(60mL) 与 H2SO4(80mL) 溶液加入 1- 氟 -3- 甲 基 - 苯 (27.5g， 25mmol)， 加入速率使温度不高于 35℃。将混合物在室温下搅拌 30min， 倒 入冰水 (500mL) 中。过滤收集所得沉淀 ( 所需产物与 1- 氟 -3- 甲基 -2， 4- 二硝基苯的约 7 ∶ 3 混合物 )， 从 50mL 异丙醚中重结晶纯化， 得到 1- 氟 -5- 甲基 -2， 4- 二硝基 - 苯， 为白 色固体 (18g， 36％ )。
     [2-(5- 氟 -2， 4- 二硝基 - 苯基 )- 乙烯基 ]- 二甲基 - 胺
     将 1- 氟 -5- 甲 基 -2， 4- 二 硝 基 - 苯 (10g， 50mmol)、 二甲氧基甲基 - 二甲基胺 (11.9g， 100mmol) 与 DMF(50mL) 的混合物在 100℃下加热 4h。将溶液冷却， 倒入水中。过滤 收集红色沉淀， 适当地用水洗涤， 干燥， 得到 [2-(5- 氟 -2， 4- 二硝基 - 苯基 )- 乙烯基 ]- 二 甲基 - 胺 (8g， 63％ )。
     B-20 ； 5- 氟 -1H- 吲哚 -6- 基胺
     将 [2-(5- 氟 -2， 4- 二硝基 - 苯基 )- 乙烯基 ]- 二甲基 - 胺 (8g， 31.4mmol) 与阮 内镍 (8g) 的 EtOH(80mL) 悬液在 H2(40psi) 和室温下搅拌 1h。过滤后， 浓缩滤液， 残余物 经过色谱纯化 ( 石油醚 /EtOAc ＝ 5/1)， 得到 5- 氟 -1H- 吲哚 -6- 基胺 (B-20)， 为褐色固体 (1g， 16％ )。 1
     H NMR(DMSO-d6)δ10.56(br s， 1H)， 7.07(d， J ＝ 12Hz， 1H)， 7.02(m， 1H)， 6.71(d， + + J ＝ 8Hz， 1H)， 6.17(s， 1H)， 3.91(br s， 2H) ； ESI-MS 150.1m/z(MH ).150.1m/z(MH ).
     其他实例 ：
     B-21 ； 5- 氯 -1H- 吲哚 -6- 基胺 按照上述一般流程合成 5- 氯 -1H- 吲哚 -6- 基胺 (B-21)， 始于 1- 氯 -3- 甲基 - 苯。1 总收率 (7％ )。 H NMR(CDCl3)δ.7.85(br s， 1H)， 7.52(s， 1H)， 7.03(s， + 1H)， 6.79(s， 1H)， 6.34(s， 1H)， 3.91(br s， 2H) ； ESI-MS 166.0m/z(MH ).
     B-22 ； 5- 三氟甲基 -1H- 吲哚 -6- 基胺
     按 照 上 述 一 般 流 程 合 成 5- 三 氟 甲 基 -1H- 吲 哚 -6- 基 胺 (B-22)， 始 于 1- 甲 1 基 -3- 三氟甲基 - 苯。 总收率 (2％ )。 H NMR(DMSO-d6)10.79(br s， 1H)， 7.55(s， 1H)， 7.12(s， 1H)， 6.78(s， 1H)， 6.27(s， 1H)， 4.92(s， 2H) ； ESI-MS 200.8m/ + z(MH ).
     实施例 2
     1- 苯磺酰基 -2， 3- 二氢 -1H 吲哚
     在 冰 水 浴 中， 向 DMAP(1.5g)、 苯 磺 酰 氯 (24g， 136mmol) 与 2， 3- 二 氢 -1H- 吲 哚 (14.7g， 124mmol) 在 CH2Cl2(200mL) 中的混合物滴加 Et3N(19g， 186mmol)。加入后， 将混合 物在室温下搅拌过夜， 用水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 在减压下浓缩至干， 得到 1- 苯磺酰基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚 (30.9g， 96％ )。
     1-(1- 苯磺酰基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚 -5- 基 )- 乙酮
     向搅拌着的 AlCl3(144g， 1.08mol) 的 CH2Cl2(1070mL) 悬液加入乙酸酐 (54mL)。 将 混 合 物 搅 拌 15 分 钟。 滴 加 1- 苯 磺 酰 基 -2， 3- 二 氢 -1H- 吲 哚 (46.9g， 0.18mol) 的 缓慢加入碎冰淬灭。分离有机层， 水层用 CH2Cl2 CH2Cl2(1070mL) 溶液。将混合物搅拌 5h， 萃取。合并有机层， 用饱和含有 NaHCO3 和盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 在真空下浓缩， 得到 1-(1- 苯磺酰基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚 -5- 基 )- 乙酮 (42.6g， 79％ )。
     1- 苯磺酰基 -5- 乙基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚
     在 0℃下， 历经 1h 向机械搅拌着的 TFA(1600mL) 加入硼氢化钠 (64g， 1.69mol)。 历 经 1h 向该混合物滴加 1-(1- 苯磺酰基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚 -5- 基 )- 乙酮 (40g， 0.13mol) 的 TFA(700mL) 溶液。 将混合物在 25℃下搅拌过夜， 用 H2O(1600mL) 稀释， 在 0℃下用氢氧化
     钠颗粒碱化。分离有机层， 水层用 CH2Cl2 萃取。合并有机层， 用盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 在 减压下浓缩。残余物经过硅胶柱色谱纯化， 得到 1- 苯磺酰基 -5- 乙基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚 (16.2g， 43％ )。
     5- 乙基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚
     将 1- 苯磺酰基 -5- 乙基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚 (15g， 0.05mol) 在 HBr(48％， 162mL) 中的混合物在回流下加热 6h。将混合物用饱和 NaOH 溶液碱化至 pH9， 用乙酸乙酯萃取。将 有机层用盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 在减压下浓缩。残余物经过硅胶柱色谱纯化， 得到 5- 乙 基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚 (2.5g， 32％ )。
     5- 乙基 -6- 硝基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚
     在 0℃下， 向 5- 乙基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚 (2.5g， 17mmol) 的 H2SO4(98％， 20mL) 溶 液缓慢加入 KNO3(1.7g， 17mmol)。 加入后， 将混合物在 0-10℃下搅拌 10 分钟， 小心地倒入冰 中， 用 NaOH 溶液碱化至 pH9， 用乙酸乙酯萃取。合并萃取液， 用盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓 缩至干。残余物经过硅胶柱色谱纯化， 得到 5- 乙基 -6- 硝基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚 (1.9g， 58％ )。
     5- 乙基 -6- 硝基 -1H- 吲哚
     向 5- 乙基 -6- 硝基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚 (1.9g， 9.9mmol) 的 CH2Cl2(30mL) 溶液加 入 MnO2(4g， 46mmol)。将混合物在室温下搅拌 8h。滤出固体， 浓缩滤液至干， 得到粗的 5- 乙 基 -6- 硝基 -1H- 吲哚 (1.9g， quant.)。
     B-23 ； 5- 乙基 -1H- 吲哚 -6- 基胺
     将 5- 乙基 -6- 硝基 -1H- 吲哚 (1.9g， 10mmol) 与阮内镍 (1g) 的悬液在 H2(1atm) 和室温下搅拌 2h。滤出催化剂， 浓缩滤液至干。残余物经过硅胶柱色谱纯化， 得到 5- 乙 基 -1H- 吲哚 -6- 基胺 (B-23)(760mg， 48％ )。 1
     H NMR(CDCl3)δ7.90(br s， 1H)， 7.41(s， 1H)， 7.00(s， 1H)， 6.78(s， 2H)， 6.39(s， 1H)， 3.39(br s， 2H)， 2.63(q， J ＝ 7.2Hz， 2H)， 1.29(t， J ＝ 6.9Hz， 3H) ； ESI-MS 161.1m/ + z(MH ).
     实施例 3
     2- 溴 -4- 叔丁基 - 苯基胺
     在室温下， 向 4- 叔丁基 - 苯基胺 (447g， 3mol) 的 DMF(500mL) 滴加 NBS(531g， 3mol) 的 DMF(500mL) 溶液。完成后， 将反应混合物用水稀释， 用 EtOAc 萃取。将有机层用水、 盐水 洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩。粗产物无需进一步纯化即可直接用于下一步。
     2- 溴 -4- 叔丁基 -5- 硝基 - 苯基胺
     在室温下， 将 2- 溴 -4- 叔丁基 - 苯基胺 (162g， 0.71mol) 滴加到 H2SO4(410mL) 中， 得到澄清的溶液。然后将该澄清的溶液冷却至 -5 至 -10℃。滴加 KNO3(82.5g， 0.82mol) 的 H2SO4(410mL) 溶液， 同时维持温度在 -5 至 -10℃之间。完成后， 将反应混合物倒入冰 / 水 中， 用 EtOAc 萃取。合并有机层， 用 5％ Na2CO3 和盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩。残余物经 过柱色谱纯化 (EtOAc/ 石油醚 1/10)， 得到 2- 溴 -4- 叔丁基 -5- 硝基苯基胺， 为黄色固体 (152g， 78％ )。
     4- 叔丁基 -5- 硝基 -2- 三甲基甲硅烷基乙炔基 - 苯基胺
     在 氮 气 氛 下， 向 2- 溴 -4- 叔 丁 基 -5- 硝 基 - 苯 基 胺 (27.3g， 100mmol) 在 甲 苯 (200mL) 与 水 (100mL) 中 的 混 合 物 加 入 Et3N(27.9mL， 200mmol)、 Pd(PPh3)2Cl2(2.11g， 3mmol)、 CuI(950mg， 0.5mmol) 和三甲基甲硅烷基乙炔 (21.2mL， 150mmol)。在密封的压力 烧瓶中， 将反应混合物在 70℃下加热 2.5h， 冷却至室温， 通过短 C 盐塞过滤。滤饼用 EtOAc 洗涤。合并滤液， 用 5％ NH4OH 溶液和水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩。粗产物经过柱色谱纯化 (0-10％ EtOAc/ 石油醚 )， 得到 4- 叔丁基 -5- 硝基 -2- 三甲基甲硅烷基乙炔基 - 苯基胺， 为 褐色粘性液体 (25g， 81％ )。
     5- 叔丁基 -6- 硝基 -1H- 吲哚
     在氮气氛下， 向 4- 叔丁基 -5- 硝基 -2- 三甲基甲硅烷基乙炔基 - 苯基胺 (25g， 86mmol) 的 DMF(100mL) 溶液加入 CuI(8.2g， 43mmol)。在密封的压力烧瓶中， 将混合物在 135℃下加热过夜， 冷却至室温， 通过短 C 盐塞过滤。滤饼用 EtOAc 洗涤。合并滤液， 用水 洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩。粗产物经过柱色谱纯化 (10-20％ EtOAc/ 己烷 )， 得到 5- 叔丁 基 -6- 硝基 -1H- 吲哚， 为黄色固体 (12.9g， 69％ )。
     B-24 ； 5- 叔丁基 -1H- 吲哚 -6- 基胺
     将 阮 内 镍 (3g) 加 入 到 5- 叔 丁 基 -6- 硝 基 -1H- 吲 哚 (14.7g， 67mmol) 的 甲 醇 (100mL) 溶液中。将混合物在氢 (1atm) 和 30℃下搅拌 3h。滤出催化剂。将滤液经 Na2SO4 干燥， 浓缩。粗的深褐色粘性油经过柱色谱纯化 (10-20％ EtOAc/ 石油醚 )， 得到 5- 叔丁 1 基 -1H- 吲哚 -6- 基胺 (B-24)， 为灰色固体 (11g， 87％ )。 H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ10.3(br s， 1H)， 7.2(s， 1H)， 6.9(m， 1H)， 6.6(s， 1H)， 6.1(m， 1H)， 4.4(br s， 2H)， 1.3(s， 9H).
     实施例 4
     5- 甲基 -2， 4- 二硝基 - 苯甲酸
     在 0℃下， 向 HNO3(95％， 80mL) 与 H2SO4(98％， 80mL) 的混合物缓慢加入 3- 甲基苯 甲酸 (50g， 0.37mol)。加入后， 将混合物搅拌 1.5h， 同时维持温度低于 30℃。将混合物倒入 冰水中， 搅拌 15min。过滤收集沉淀， 用水洗涤， 得到 3- 甲基 -2， 6 二硝基 - 苯甲酸与 5- 甲 基 -2， 4- 二硝基 - 苯甲酸的混合物 (70g， 84 ％ )。向这种混合物的 EtOH 溶液 (150mL) 滴 加 SOCl2(53.5g， 0.45mol)。将混合物在回流下加热 2h， 在减压下浓缩至干。将残余物溶 于 EtOAc(100mL)， 用 10％ Na2CO3 溶液 (120mL) 萃取。发现有机层含有 5- 甲基 -2， 4- 二硝
     基 - 苯甲酸乙基酯， 而水层含有 3- 甲基 -2， 6- 二硝基 - 苯甲酸。将有机层用盐水 (50mL) 洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩至干， 得到 5- 甲基 -2， 4- 二硝基 - 苯甲酸乙基酯 (20g， 20％ )。
     5-(2- 二甲氨基 - 乙烯基 )-2， 4- 二硝基 - 苯甲酸乙基酯
     将 5- 甲基 -2， 4- 二硝基 - 苯甲酸乙基酯 (39g， 0.15mol) 与二甲氧基甲基 - 二甲基 胺 (32g， 0.27mol) 在 DMF(200mL) 中的混合物在 100℃下加热 5h。 将混合物倒入冰水中。 过 滤收集沉淀， 用水洗涤， 得到 5-(2- 二甲氨基 - 乙烯基 )-2， 4- 二硝基 - 苯甲酸乙基酯 (15g， 28％ )。
     B-25 ； 6- 氨基 -1H- 吲哚 -5- 羧酸乙基酯
     将 5-(2- 二甲氨基 - 乙烯基 )-2， 4- 二硝基 - 苯甲酸乙基酯 (15g， 0.05mol) 与阮 内镍 (5g) 在 EtOH(500mL) 中的混合物在 H2(50psi) 和室温下搅拌 2h。滤出催化剂， 浓缩滤 液至干。残余物经过硅胶柱色谱纯化， 得到 6- 氨基 -1H- 吲哚 -5- 羧酸乙基酯 (B-25)(3g， 30％ )。 1
     H NMR(DMSO-d6)δ10.68(s， 1H)， 7.99(s， 1H)， 7.01-7.06(m， 1H)， 6.62(s， 1H)， 6.27-6.28(m， 1H)， 6.16(s， 2H)， 4.22(q， J ＝ 7.2Hz， 2H)， 1.32-1.27(t， J ＝ 7.2Hz， 3H).
     实施例 5
     1-(2， 3- 二氢 - 吲哚 -1- 基 )- 乙酮
     向在冰水浴中冷却的 NaHCO3(504g， 6.0mol) 与 2， 3- 二氢 -1H- 吲哚 (60g， 0.5mol) 的 CH2Cl2(600mL) 悬液滴加乙酰氯 (78.5g， 1.0mol)。将混合物在室温下搅拌 2h。滤出固 体， 浓缩滤液， 得到 1-(2， 3- 二氢 - 吲哚 -1- 基 )- 乙酮 (82g， 100％ )。
     1-(5- 溴 -2， 3- 二氢 - 吲哚 -1- 基 )- 乙酮
     在 10 ℃ 下， 向 1-(2， 3- 二 氢 - 吲 哚 -1- 基 )- 乙 酮 (58.0g， 0.36mol) 的 乙 酸 (3000mL) 溶液加入 Br2(87.0g， 0.54mol)。将混合物在室温下搅拌 4h。过滤收集沉淀， 得到 粗的 1-(5- 溴 -2， 3- 二氢 - 吲哚 -1- 基 )- 乙酮 (100g， 96％ )， 直接用于下一步。
     5- 溴 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚
     将粗的 1-(5- 溴 -2， 3- 二氢 - 吲哚 -1- 基 )- 乙酮 (100g， 0.34mol) 在 HCl(20％， 1200mL) 中的混合物在回流下加热 6h。将混合物用 Na2CO3 碱化至 pH 8.5-10， 然后用乙酸 乙酯萃取。合并有机层， 用盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 在减压下浓缩。残余物经过硅胶柱色 谱纯化， 得到 5- 溴 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚 (37g， 55％ )。
     5- 溴 -6- 硝基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚
     在 0 ℃下， 向 5- 溴 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚 (45g， 0.227mol) 的 H2SO4(98 ％， 200mL)
     溶液缓慢加入 KNO3(23.5g， 0.23mol)。加入后， 将混合物在 0-10℃下搅拌 4h， 小心地倒入冰 中， 用 Na2CO3 碱化至 pH 8， 用乙酸乙酯萃取。合并有机萃取液， 用盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩至干。残余物经过硅胶柱色谱纯化， 得到 5- 溴 -6- 硝基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚 (42g， 76％ )。
     5- 溴 -6- 硝基 -1H- 吲哚
     向 5- 溴 -6- 硝基 -2， 3- 二氢 -1H- 吲哚 (20g， 82.3mmol) 的 1， 4- 二烷 (400mL)溶液加入 DDQ(30g， 0.13mol)。将混合物在 80℃下搅拌 2h。滤出固体， 浓缩滤液至干。残余 物经过硅胶柱色谱纯化， 得到 5- 溴 -6- 硝基 -1H- 吲哚 (7.5g， 38％ )。 B-27 ； 5- 溴 -1H- 吲哚 -6- 基胺
     将 5- 溴 -6- 硝基 -1H- 吲哚 (7.5g， 31.1mmol) 与阮内镍 (1g) 在乙醇中的混合物 在 H2(1atm) 和室温下搅拌 2h。滤出催化剂， 浓缩滤液至干。残余物经过硅胶柱色谱纯化， 得到 5- 溴 -1H- 吲哚 -6- 基胺 (B-27)(2g， 30％ )。 1
     H NMR(DMSO-d6) δ 10.6(s ， 1H) ， 7.49(s ， 1H) ， 6.79-7.02(m ， 1H) ， 6.79(s ， 1H) ， 6.14-6.16(m， 1H)， 4.81(s， 2H).
     7- 取代的 6- 氨基吲哚
     3- 甲基 -2， 6- 二硝基 - 苯甲酸
     在 0℃下， 向 HNO3(95％， 80mL) 与 H2SO4(98％， 80mL) 的混合物缓慢加入 3- 甲基苯 甲酸 (50g， 0.37mol)。加入后， 将混合物搅拌 1.5h， 同时维持温度低于 30℃。将混合物倒 入冰水中， 搅拌 15min。过滤收集沉淀， 用水洗涤， 得到 3- 甲基 -2， 6- 二硝基 - 苯甲酸与 5- 甲基 -2， 4- 二硝基 - 苯甲酸的混合物 (70g， 84 ％ )。向该混合物的 EtOH 溶液 (150mL) 滴加 SOCl2(53.5g， 0.45mol)。将混合物加热至回流达 2h， 在减压下浓缩至干。将残余物溶 于 EtOAc(100mL)， 用 10％ Na2CO3 溶液 (120mL) 萃取。发现有机层含有 5- 甲基 -2， 4- 二硝 基 - 苯甲酸乙基酯。 将水层用 HCl 酸化至 pH 2-3， 过滤收集所得沉淀， 用水洗涤， 风干， 得到 3- 甲基 -2， 6- 二硝基 - 苯甲酸 (39g， 47％ )。
     3- 甲基 -2， 6- 二硝基 - 苯甲酸乙基酯
     将 3- 甲基 -2， 6- 二硝基 - 苯甲酸 (39g， 0.15mol) 与 SOCl2(80mL) 的混合物在回 流下加热 4h。在减压下除去过量 SOCl2， 将残余物滴加到 EtOH(100mL) 与 Et3N(50mL) 溶液 中。将混合物在 20℃下搅拌 1h， 浓缩至干。将残余物溶于 EtOAc(100mL)， 用 Na2CO3(10％，
     40mLx2)、 水 (50mL 2) 和盐水 (50mL) 洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到 3- 甲基 -2， 6- 二硝 基 - 苯甲酸乙基酯 (20g， 53％ )。
     3-(2- 二甲氨基 - 乙烯基 )-2， 6- 二硝基 - 苯甲酸乙基酯
     将 3- 甲基 -2， 6- 二硝基 - 苯甲酸乙基酯 (35g， 0.14mol) 与二甲氧基甲基 - 二甲基 胺 (32g， 0.27mol) 在 DMF(200mL) 中的混合物在 100℃下加热 5h。将混合物倒入冰水中， 过 滤收集沉淀， 用水洗涤， 得到 3-(2- 二甲氨基 - 乙烯基 )-2， 6- 二硝基 - 苯甲酸乙基酯 (25g， 58％ )。
     B-19 ； 6- 氨基 -1H- 吲哚 -7- 羧酸乙基酯
     将 3-(2- 二甲氨基 - 乙烯基 )-2， 6- 二硝基 - 苯甲酸乙基酯 (30g， 0.097mol) 与阮 内镍 (10g) 在 EtOH(1000mL) 中的混合物在 H2(50psi) 下搅拌 2h。滤出催化剂， 浓缩滤液至 干。残余物经过硅胶柱色谱纯化， 得到 6- 氨基 -1H- 吲哚 -7- 羧酸乙基酯 (B-19)， 为灰白 1 色固体 (3.2g， 16％ )。 H NMR(DMSO-d6)δ10.38(s， 1H)， 7.44-7.41(d， J＝ 8.7Hz， 1H)， 6.98(t， 1H)， 6.65(s， 2H)， 6.50-6.46(m， 1H)， 6.27-6.26(m， 1H)， 4.43-4.36(q， J ＝ 7.2Hz， 2H)， 1.35(t， J ＝ 7.2Hz， 3H).H).
     酚类
     实施例 1
     2- 叔丁基 -5- 硝基苯胺
     在 0 ℃ 下， 向 冷 却 的 硫 酸 溶 液 (90 ％， 50mL) 滴 加 2- 叔 丁 基 - 苯 基 胺 (4.5g， 30mmol)。在 0℃下逐份加入硝酸钾 (4.5g， 45mmol)。将反应混合物在 0-5℃下搅拌 5min， 倒入冰水中， 然后用 EtOAc 萃取三次。合并有机层， 用盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥。除去溶剂 后， 残余物用 70％ EtOH-H2O 重结晶纯化， 得到 2- 叔丁基 -5- 硝基苯胺 (3.7g， 64％ )。 1
     H NMR(400MHz， CDCl3)δ7.56(dd， J ＝ 8.7， 2.4Hz， 1H)， 7.48(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 7.36(d， J ＝ 8.7Hz， 1H)， 4.17(s， 2H)， 1.46(s， 9H) ； HPLC 保留时间 3.27min， 10-99％ CH3CN， + 5min run ； ESI-MS 195.3m/z(MH ).
     C-1-a ； 2- 叔丁基 -5- 硝基苯酚
     在 0℃下， 向 2- 叔丁基 -5- 硝基苯胺 (1.94g， 10mmol) 在 40mL 15％ H2SO4 中的混 合物滴加 NaNO2(763mg， 11.0mmol) 的水 (3mL) 溶液。将所得混合物在 0-5℃下搅拌 5min。 过量 NaNO2 用尿素中和， 然后加入 5mL H2SO4-H2O(v/v 1 ∶ 2)， 使混合物回流 5min。加入另 外三份各 5mL 的 H2SO4-H2O(v/v 1 ∶ 2)， 同时在回流下加热。将反应混合物冷却至室温， 用 EtOAc 萃取两次。合并有机层， 用盐水洗涤， 经 MgSO4 干燥。
     除去溶剂后， 残余物经过柱色谱纯化 (0-10％ EtOAc- 己烷 )， 得到 2- 叔丁基 -5- 硝 基苯酚 (C-1-a)(1.2g， 62％ )。 1
     H NMR(400MHz， CDCl3)δ7.76(dd， J ＝ 8.6， 2.2Hz， 1H)， 7.58(d， J ＝ 2.1Hz， 1H)， 7.43(d， J ＝ 8.6Hz， 1H)， 5.41(s， 1H)， 1.45(s， 9H) ； HPLC 保留时间 3.46min， 10-99％ CH3CN，
     5min run.
     C-1 ； 2- 叔丁基 -5- 氨基苯酚
     向回流着的 2- 叔丁基 -5- 硝基苯酚 (C-1-a)(196mg， 1.0mmol) 的 EtOH(10mL) 溶 液加入甲酸铵 (200mg， 3.1mmol)， 继之以 140mg 10％ Pd-C。将反应混合物回流另外 30min， 冷却至室温， 通过 C 盐塞过滤。 浓缩滤液至干， 经过柱色谱纯化 (20-30％ EtOAc- 己烷 )， 得 1 到 2- 叔丁基 -5- 氨基苯酚 (C-1)(144mg， 87％ )。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ8.76(s， 1H)， 6.74(d， J ＝ 8.3Hz， 1H)， 6.04(d， J ＝ 2.3Hz， 1H)， 5.93(dd， J ＝ 8.2， 2.3Hz， 1H)， 4.67(s， 2H)， 1.26(s， 9H)， HPLC 保 留 时 间 2.26min， 10-99 ％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 166.1m/ + z(MH ).
     实施例 2
     a)RX(X ＝ Br， I)， K2CO3 或 Cs2CO3， DMF ； b)HCO2NH4 或 HCO2K， Pd-C， EtOH 具体实例 ：1- 叔丁基 -2- 甲氧基 -4- 硝基苯
     向 2- 叔丁基 -5- 硝基苯酚 (C-1-a)(100mg， 0.52mmol) 与 K2CO3(86mg， 0.62mmo) 在 DMF(2mL) 中的混合物加入 CH3I(40μL， 0.62mmol)。将反应混合物在室温下搅拌 2h， 用水稀 释， 用 EtOAc 萃取。合并有机层， 用盐水洗涤， 经 MgSO4 干燥。过滤后， 蒸发滤液至干， 得到 1- 叔丁基 -2- 甲氧基 -4- 硝基苯 (82mg， 76％ )， 无需进一步纯化即可使用。 1
     HNMR(400MHz， CDCl3)δ7.77(t， J ＝ 4.3Hz， 1H)， 7.70(d， J ＝ 2.3Hz， 1H)， 7.40(d， J ＝ 8.6Hz， 1H)， 3.94(s， 3H)， 1.39(s， 9H).
     C-2 ； 4- 叔丁基 -3- 甲氧基苯胺
     向回流着的 1- 叔丁基 -2- 甲氧基 -4- 硝基苯 (82mg， 0.4mmol) 的 EtOH(2mL) 溶液 加入甲酸钾 (300mg， 3.6mmol) 的水 (1mL) 溶液， 继之以 10 ％ Pd-C(15mg)。将反应混合物 回流另外 60min， 冷却至室温， 通过 C 盐过滤。浓缩滤液至干， 得到 4- 叔丁基 -3- 甲氧基苯 胺 (C-2)(52mg， 72％ )， 无需进一步纯化即可使用。HPLC 保留时间 2.29min， 10-99％ CH3CN， + 5min run ； ESI-MS 180.0m/z(MH ).
     其他实例 ：
     C-3 ； 3-(2- 乙氧基乙氧基 )-4- 叔丁基苯胺
     按照上述一般流程合成 3-(2- 乙氧基乙氧基 )-4- 叔丁基苯胺 (C-3)， 始于 2- 叔丁 基 -5- 硝基苯酚 (C-1-a) 和 1- 溴 -2- 乙氧基乙烷。 1
     H
     NMR(400MHz， CDCl3)δ6.97(d， J ＝ 7.9Hz， 1H)， 6.17(s， 1H)， 6.14(d， J ＝ 2.3Hz， 1H)， 4.00(t， J ＝ 5.2Hz， 2H)， 3.76(t， J ＝ 5.2Hz， 2H)， 3.53(q， J ＝ 7.0Hz， 2H)， 1.27(s， 9H)， 1.16(t， J ＝ 7.0Hz， 3H) ； HPLC 保 留 时 间 2.55min， 10-99 ％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS + 238.3m/z(MH ).
     C-4 ； 2-(2- 叔丁基 -5- 氨基苯氧基 ) 乙醇
     按照上述一般流程合成 2-(2- 叔丁基 -5- 氨基苯氧基 ) 乙醇 (C-4)， 始于 2- 叔丁 基 -5- 硝基苯酚 (C-1-a) 和 2- 溴乙醇。HPLC 保留时间 2.08min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； + ESI-MS 210.3m/z(MH ).
     实施例 3
     N-(3- 羟基 - 苯基 )- 乙酰胺和乙酸 3- 甲酰氨基 - 苯基酯
     在 0 ℃ 下， 历 经 30min 向 充 分 搅 拌 着 的 3- 氨 基 - 苯 酚 (50g， 0.46mol) 与 NaHCO3(193.2g， 2.3mol) 的氯仿 (1L) 悬液滴加氯乙酰氯 (46.9g， 0.6mol)。加入完成后， 将 反应混合物回流过夜， 然后冷却至室温。过滤除去过量 NaHCO3。将滤液倒入水中， 用 EtOAc 萃取 (300x3mL)。合并有机层， 用盐水 (500mL) 洗涤， 经无水 Na2SO4 干燥， 在减压下浓缩， 得 到 N-(3- 羟基 - 苯基 )- 乙酰胺与乙酸 3- 甲酰氨基 - 苯基酯的混合物 (35g， 4 ∶ 1， 根据 NMR 分析 )。混合物直接用于下一步。
     N-[3-(3- 甲基 - 丁 -3- 烯氧基 )- 苯基 ]- 乙酰胺
     将 N-(3- 羟基 - 苯基 )- 乙酰胺与乙酸 3- 甲酰氨基 - 苯基酯混合物 (18.12g， 0.12mol)、 3- 甲基 - 丁 -3- 烯 -1- 醇 (8.6g， 0.1mol)、 DEAD(87g， 0.2mol) 与 Ph3P(31.44g， 0.12mol) 的苯 (250mL) 悬液在回流下加热过夜， 然后冷却至室温。 将反应混合物倒入水中， 分离有机层。水相用 EtOAc 萃取 (300x3mL)。合并有机层， 用盐水洗涤， 经无水 Na2SO4 干 燥， 浓缩。残余物经过柱色谱纯化， 得到 N-[3-(3- 甲基 - 丁 -3- 烯氧基 )- 苯基 ]- 乙酰胺 (11g， 52％ )。
     N-(4， 4- 二甲基 - 色满 -7- 基 )- 乙酰胺
     将 N-[3-(3- 甲 基 - 丁 -3- 烯 氧 基 )- 苯 基 ]- 乙 酰 胺 (2.5g， 11.4mmol) 与 AlCl3(4.52g， 34.3mmol) 在氟苯 (50mL) 中的混合物在回流下加热过夜。 冷却后， 将反应混合 物倒入水中。分离有机层， 水相用 EtOAc 萃取 (40x3mL)。合并有机层， 用盐水洗涤， 经无水 Na2SO4 干燥， 在真空下浓缩。 残余物经过柱色谱纯化， 得到 N-(4， 4- 二甲基 - 色满 -7- 基 )- 乙 酰胺 (1.35g， 54％ )。
     C-5 ； 3， 4- 二氢 -4， 4- 二甲基 -2H- 色烯 -7- 胺
     将 N-(4， 4- 二甲基 - 色满 -7- 基 )- 乙酰胺 (1.35g， 6.2mmol) 在 20 ％ HCl 溶液 (30mL) 中的混合物在回流下加热 3h， 然后冷却至室温。 将反应混合物用 10％ aq.NaOH 碱化 浓缩， 得到 3， 至 pH8， 用 EtOAc 萃取 (30x3mL)。 合并有机层， 用盐水洗涤， 经无水 Na2SO4 干燥， 1 4- 二氢 -4， 4- 二甲基 -2H- 色烯 -7- 胺 (C-5)(1g， 92％ )。 HNMR(DMSO-d6) δ6.87(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 6.07(dd， J ＝ 8.4， 2.4Hz， 1H)， 5.87(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 4.75(s， 2H)， 3.99(t， J ＝ 5.4Hz， 2H)， 1.64(t， J ＝ 5.1Hz， 2H)， 1.15(s， 6H) ； ESI-MS178.1m/z(MH+).
     实施例 4
     一般流程 ：
     X ＝ F， Cl ； a)ROH， H2SO4 或 MeSO3H， CH2Cl2 ； b)R’ CO2Cl， Et3N， 1， 4- 二 烷或 CHCl3 ； c) HNO3， H2SO4 或 KNO3， H2SO4 或 HNO3， AcOH ； d) 哌啶， CH2Cl2 ； e)HCO2NH4， Pd-C， EtOH 或 SnCl2.2H2O， EtOH 或 H2， Pd-C， MeOH.
     具体实例
     2- 叔丁基 -4- 氟苯酚
     将 4- 氟苯酚 (5g， 45mmol) 和叔丁醇 (5.9mL， 63mmol) 溶于 CH2Cl2(80mL)， 用浓硫 酸 (98％， 3mL) 处理。将混合物在室温下搅拌过夜。将有机层用水洗涤， 用 NaHCO3 中和， 经 MgSO4 干燥， 浓缩。残余物经过柱色谱纯化 (5-15％ EtOAc- 己烷 )， 得到 2- 叔丁基 -4- 氟苯 1 酚 (3.12g， 42％ )。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ9.32(s， 1H)， 6.89(dd， J ＝ 11.1， 3.1Hz， 1H)， 6.84-6.79(m， 1H)， 6.74(dd， J ＝ 8.7， 5.3Hz， 1H)， 1.33(s， 9H).
     2- 叔丁基 -4- 氟苯基甲基碳酸酯
     向 2- 叔丁基 -4- 氟苯酚 (2.63g， 15.7mmol) 与三乙胺 (3.13mL， 22.5mmol) 的二烷 (45mL) 溶液加入氯甲酸甲酯 (1.27mL， 16.5mmol)。将混合物在室温下搅拌 1h。过滤除 去沉淀。然后将滤液用水稀释， 用醚萃取。将醚萃取液用水洗涤， 经 MgSO4 干燥。除去溶剂 后， 残余物经过柱色谱纯化， 得到 2- 叔丁基 -4- 氟苯基甲基碳酸酯 (2.08g， 59％ )。 1
     H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ7.24(dd， J ＝ 8.8， 5.4Hz， 1H)， 7.17-7.10(m， 2H)， 3.86(s， 3H)， 1.29(s， 9H).
     2- 叔丁基 -4- 氟 -5- 硝基苯基甲基碳酸酯 (C-7-a) 和 2- 叔丁基 -4- 氟 -6- 硝基 苯基甲基碳酸酯 (C-6-a)
     向 2- 叔丁基 -4- 氟苯基甲基碳酸酯 (1.81g， 8mmol) 的 H2SO4(98％， 1mL) 溶液缓慢 加入在 0℃下冷却的 H2SO4(1mL) 与 HNO3(1mL) 的混合物。将混合物搅拌 2h， 同时升温至室 温， 倒入冰中， 用二乙醚萃取。将醚萃取液用盐水洗涤， 经 MgSO4 干燥， 浓缩。残余物经过柱 色谱纯化 (0-10％ EtOAc- 己烷 )， 得到 2- 叔丁基 -4- 氟 -5- 硝基苯基甲基碳酸酯 (C-7-a) (1.2g， 55％ ) 和 2- 叔丁基 -4- 氟 -6- 硝基苯基甲基碳酸酯 (C-6-a)(270mg， 12％ )。2- 叔 丁基 -4- 氟 -5- 硝基苯基甲基碳酸酯 (C-7-a) ： 1
     H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ8.24(d， J ＝ 7.1Hz， 1H)， 7.55(d， J ＝ 13.4Hz， 1H)， 3.90(s， 3H)， 1.32(s， 9H). 2- 叔 丁 基 -4- 氟 -6- 硝 基 苯 基 甲 基 碳 酸 酯 (C-6-a) ：1 (C-6-a) ： H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ8.04(dd， J ＝ 7.6， 3.1Hz， 1H)， 7.69(dd， J ＝ 10.1， 3.1Hz， 1H)， 3.91(s， 3H)， 1.35(s， 9H).
     2- 叔丁基 -4- 氟 -5- 硝基苯酚
     向 2- 叔 丁 基 -4- 氟 -5- 硝 基 苯 基 甲 基 碳 酸 酯 (C-7-a)(1.08g， 4mmol) 的 CH2Cl2(40mL) 溶液加入哌啶 (3.94mL， 10mmol)。将混合物在室温下搅拌 1h， 用 1N NaOH 萃 取 (3x)。将水层用 1N HCl 酸化， 用二乙醚萃取。将醚萃取液用盐水洗涤， 干燥 (MgSO4)， 浓 1 缩， 得到 2- 叔丁基 -4- 氟 -5- 硝基苯酚 (530mg， 62％ )。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ10.40(s， 1H)， 7.49(d， J ＝ 6.8Hz， 1H)， 7.25(d， J ＝ 13.7Hz， 1H)， 1.36(s， 9H).
     C-7 ； 2- 叔丁基 -5- 氨基 -4- 氟苯酚
     向回流着的 2- 叔丁基 -4- 氟 -5- 硝基苯酚 (400mg， 1.88mmol) 与甲酸铵 (400mg， 6.1mmol) 的 EtOH(20mL) 溶液加入 5 ％ Pd-C(260mg)。将混合物回流另外 1h， 冷却， 通过 C 盐 过 滤。 蒸 发 除 去 溶 剂， 得 到 2- 叔 丁 基 -5- 氨 基 -4- 氟 苯 酚 (C-7)(550mg， 83 ％ )。 1 HNMR(400MHz， DMSO-d6)δ8.83(br s， 1H)， 6.66(d， J ＝ 13.7Hz， 1H)， 6.22(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)， 4.74(br s， 2H)， 1.26(s， 9H) ； HPLC 保留时间 2.58min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS + 184.0m/z(MH ).
     其他实例 ：
     C-10 ； 2- 叔丁基 -5- 氨基 -4- 氯苯酚
     按照上述一般流程合成 2- 叔丁基 -5- 氨基 -4- 氯苯酚 (C-10)， 始于 4- 氯苯酚和 叔丁醇。 总收率 (6％ )。 HPLC 保留时间 3.07min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 200.2m/ + z(MH ).
     C-13 ； 5- 氨基 -4- 氟 -2-(1- 甲基环己基 ) 苯酚
     按照上述一般流程合成 5- 氨基 -4- 氟 -2-(1- 甲基环己基 ) 苯酚 (C-13)， 始于 4- 氟苯酚和 1- 甲基环己醇。总收率 (3％ )。HPLC 保留时间 3.00min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 224.2m/z(MH+).
     C-19 ； 5- 氨基 -2-(3- 乙基戊烷 -3- 基 )-4- 氟 - 苯酚按照上述一般流程合成 5- 氨 基 -2-(3- 乙基戊烷 -3- 基 )-4- 氟 - 苯酚 (C-19)， 始于 4- 氟苯酚和 3- 乙基 -3- 戊醇。总 收率 (1％ )。
     C-20 ； 2- 金刚烷基 -5- 氨基 -4- 氟 - 苯酚
     2- 金刚烷基 -5- 氨基 -4- 氟 - 苯酚 (C-20) 按照上述一般流程合成， 始于 4- 氟苯 酚和金刚烷 -1- 醇。
     C-21 ； 5- 氨基 -4- 氟 -2-(1- 甲基环庚基 ) 苯酚
     按照上述一般流程合成 5- 氨基 -4- 氟 -2-(1- 甲基环庚基 ) 苯酚 (C-21)， 始于 4- 氟苯酚和 1- 甲基 - 环庚醇。
     C-22 ； 5- 氨基 -4- 氟 -2-(1- 甲基环辛基 ) 苯酚
     5- 氨基 -4- 氟 -2-(1- 甲基环辛基 ) 苯酚 (C-22) 按照上述 - 般流程合成， 始于 4- 氟苯酚和 1- 甲基 - 环辛醇。
     C-23 ； 5- 氨基 -2-(3- 乙基 -2， 2- 二甲基戊烷 -3- 基 )-4- 氟 - 苯酚按照上述一般 流程合成 5- 氨基 -2-(3- 乙基 -2， 2- 二甲基戊烷 -3- 基 )-4- 氟 - 苯酚 (C-23)， 始于 4- 氟 苯酚和 3- 乙基 -2， 2- 二甲基 - 戊烷 -3- 醇。
     实施例 5C-6 ； 2- 叔丁基 -4- 氟 -6- 氨基苯基甲基碳酸酯
     向回流着的 2- 叔丁基 -4- 氟 -6- 硝基苯基甲基碳酸酯 (250mg， 0.92mmol) 与甲酸 铵 (250mg， 4mmol) 的 EtOH(10mL) 溶液加入 5％ Pd-C(170mg)。将混合物回流另外 1h， 冷却， 通过 C 盐过滤。蒸发除去溶剂， 残余物经过柱色谱纯化 (0-15％， EtOAc- 己烷 )， 得到 2- 叔 丁基 -4- 氟 -6- 氨基苯基甲基碳酸酯 (C-6)(60mg， 27％ )。 HPLC 保留时间 3.35min， 10-99％ + CH3CN， 5min run ； ESI-MS 242.0m/z(MH ).
     实施例 6
     碳酸 2， 4- 二 - 叔丁基 - 苯基酯甲基酯
     将氯甲酸甲酯 (58mL， 750mmol) 滴加到在冰水浴中冷却至 0 ℃的、 2， 4- 二 - 叔丁 基 - 苯酚 (103.2g， 500mmol)、 Et3N(139mL， 1000mmol) 与 DMAP(3.05g， 25mmol) 的二氯甲烷
     (400mL) 溶液中。使混合物升温至室温， 同时搅拌过夜， 然后通过硅胶 ( 约 1L) 过滤， 使用 10％乙酸乙酯 - 己烷 ( ～ 4L) 作为洗脱剂。合并滤液， 浓缩， 得到碳酸 2， 4- 二 - 叔丁基 - 苯 基酯甲基酯， 为黄色的油 (132g， quant.)。 1
     H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ7.35(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 7.29(dd， J ＝ 8.5， 2.4Hz， 1H)， 7.06(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 3.85(s， 3H)， 1.30(s， 9H)， 1.29(s， 9H).
     碳酸 2， 4- 二 - 叔丁基 -5- 硝基 - 苯基酯甲基酯和碳酸 2， 4- 二 - 叔丁基 -6- 硝 基 - 苯基酯甲基酯
     向在冰水浴中冷却的、 搅拌着的碳酸 2， 4- 二 - 叔丁基 - 苯基酯甲基酯 (4.76g， 18mmol) 在浓硫酸 (2mL) 中的混合物加入冷却的硫酸 (2mL) 与硝酸 (2mL) 混合物。加入是 缓慢进行的， 以便反应温度不超过 50℃。将反应搅拌 2h， 同时升温至室温。然后向冰水加 入反应混合物， 萃取到二乙醚中。将醚层干燥 (MgSO4)， 浓缩， 经过柱色谱纯化 (0-10％乙酸 乙酯 - 己烷 )， 得到碳酸 2， 4- 二 - 叔丁基 -5- 硝基 - 苯基酯甲基酯与碳酸 2， 4- 二 - 叔丁 基 -6- 硝基 - 苯基酯甲基酯的混合物， 为淡黄色固体 (4.28g)， 直接用于下一步。
     2， 4- 二 - 叔丁基 -5- 硝基 - 苯酚和 2， 4- 二 - 叔丁基 -6- 硝基 - 苯酚
     将碳酸 2， 4- 二 - 叔丁基 -5- 硝基 - 苯基酯甲基酯与碳酸 2， 4- 二 - 叔丁基 -6- 硝 基 - 苯基酯甲基酯的混合物 (4.2g， 12.9mmol) 溶于 MeOH(65mL)， 加入 KOH(2.0g， 36mmol)。 将混合物在室温下搅拌 2h。然后向反应混合物加入浓 HCl 调至酸性 (pH 2-3)， 在水与二乙 浓缩， 经过柱色谱纯化 (0-5％乙酸乙酯 - 己烷 )， 得到 2， 醚之间分配。 将醚层干燥 (MgSO4)， 4- 二 - 叔丁基 -5- 硝基 - 苯酚 (1.31g， 2 步收率 29％ ) 和 2， 4- 二 - 叔丁基 -6- 硝基 - 苯酚。 1 2， 4- 二 - 叔丁基 -5- 硝基 - 苯酚 ： H NMR(4000MHz， DMSO-d6)δ10.14(s， 1H， OH)， 7.34(s， 1H)， 6.83(s， 1H)， 1.36(s， 9H)， 1.30(s， 9H). 1
     2， 4- 二 - 叔丁基 -6- 硝基 - 苯酚 ： H NMR(400MHz， CDCl3)δ11.48(s， 1H)， 7.98(d， J ＝ 2.5Hz， 1H)， 7.66(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 1.47(s， 9H)， 1.34(s， 9H).
     C-9 ； 5- 氨基 -2， 4- 二 - 叔丁基 - 苯酚
     向回流着的 2， 4- 二 - 叔丁基 -5- 硝基 - 苯酚 (1.86g， 7.4mmol) 与甲酸铵 (1.86g) 的乙醇 (75mL) 溶液加入 5％披钯活性碳 (900mg)。 将反应混合物在回流下搅拌 2h， 冷却至室 温， 通过 C 盐过滤。将 C 盐用甲醇洗涤， 合并滤液， 浓缩， 得到 5- 氨基 -2， 4- 二 - 叔丁基 - 苯 1 酚， 为灰色固体 (1.66g， quant.)。 H NMR(400MHz， DMSO-d6) δ8.64(s， 1H， OH)， 6.84(s， 1H)， 6.08(s， 1H)， 4.39(s， 2H， NH2)， 1.27(m， 18H) ； HPLC 保留时间 + 2.72min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 222.4m/z(MH ).
     C-8 ； 6- 氨基 -2， 4- 二 - 叔丁基 - 苯酚
     将 2， 4- 二 - 叔 丁 基 -6- 硝 基 - 苯 酚 (27mg， 0.11mmol) 与 SnCl2·2H2O(121mg， 0.54mmol) 的 EtOH(1.0mL) 溶液在 100℃微波炉中加热 30min。将混合物用 EtOAc 和水稀 释， 用 sat.NaHCO3 碱化， 通过 C 盐过滤。分离有机层， 经 Na2SO4 干燥。蒸发除去溶剂， 得到 6- 氨基 -2， 4- 二 - 叔丁基 - 苯酚 (C-8)， 无需进一步纯化即可使用。 HPLC 保留时间 2.74min， + 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 222.5m/z(MH ).
     实施例 7
     4- 叔丁基 -2- 氯 - 苯酚
     在 0 ℃ 下， 向 4- 叔 丁 基 - 苯 酚 (40.0g， 0.27mol) 与 SO2Cl2(37.5g， 0.28mol) 的 CH2Cl2 溶液加入 MeOH(9.0g， 0.28mol)。加入完全后， 将混合物在室温下搅拌过夜， 然后加 入水 (200mL)。所得溶液用乙酸乙酯萃取。合并有机层， 经无水 Na2SO4 干燥， 过滤， 在真空 下浓缩。残余物经过柱色谱纯化 ( 石油醚 /EtOAc， 50 ∶ 1)， 得到 4- 叔丁基 -2- 氯 - 苯酚 (47.0g， 95％ )。
     4- 叔丁基 -2- 氯苯基甲基碳酸酯
     在 0℃下， 向 4- 叔丁基 -2- 氯苯酚 (47.0g， 0.25mol) 的二氯甲烷 (200mL) 溶液加入 Et3N(50.5g， 0.50mol)、 DMAP(1g) 和氯甲酸甲酯 (35.4g， 0.38mol)。 使反应升温至室温， 搅拌 另外 30min。将反应混合物用 H2O 洗涤， 有机层经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到 4- 叔丁基 -2- 氯 苯基甲基碳酸酯 (56.6g， 92％ )， 直接用于下一步。
     4- 叔丁基 -2- 氯 -5- 硝基苯基甲基碳酸酯
     在 0 ℃ 下， 将 4- 叔 丁 基 -2- 氯 苯 基 甲 基 碳 酸 酯 (36.0g， 0.15mol) 溶 于 浓 H2SO4(100mL)。 历经 25min 逐份加入 KNO3(0.53g， 5.2mmol)。 将反应搅拌 1.5h， 倒入冰 (200g) 中。水层用二氯甲烷萃取。合并有机层， 用 aq.NaHCO3 洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 在真空下浓缩， 得到 4- 叔丁基 -2- 氯 -5- 硝基苯基甲基碳酸酯 (41.0g)， 无需进一步纯化即可使用。
     4- 叔丁基 -2- 氯 -5- 硝基 - 苯酚
     将氢氧化钾 (10.1g， 181mmol) 加入到 4- 叔丁基 -2- 氯 -5- 硝基苯基甲基碳酸酯 (40.0g， 139mmol) 的 MeOH(100mL) 溶液中。30min 后， 将反应用 1N HCl 酸化， 用二氯甲烷萃 在真空下浓缩。粗产物经过柱色谱纯化 ( 石油醚 /EtOAc， 取。合并有机层， 经 Na2SO4 干燥， 30 ∶ 1)， 得到 4- 叔丁基 -2- 氯 -5- 硝基 - 苯酚 (23.0g， 2 步收率 68％ )。
     C-11 ； 4- 叔丁基 -2- 氯 -5- 氨基 - 苯酚
     向 4- 叔丁基 -2- 氯 -5- 硝基 - 苯酚 (12.6g， 54.9mmol) 的 MeOH(50mL) 溶液加入 Ni(1.2g)。将反应在 H2(1atm) 下摇动 4h。将反应混合物过滤， 浓缩滤液。残余物经过柱色 谱纯化 (P.E./EtOAc， 20 ∶ 1)， 得到 4- 叔丁基 -2- 氯 -5- 氨基 - 苯酚 (C-11)(8.5g， 78％ )。 1 HNMR(DMSO-d6)δ9.33(s， 1H)， 6.80(s， 1H)， 6.22(s， 1H)， 4.76(s， 1H)， 1.23(s， 9H) ； ESI-MS + 200.1m/z(MH ).
     实施例 8
     2- 金刚烷基 -4- 甲基 - 苯基乙基碳酸酯
     将氯甲酸乙酯 (0.64mL， 6.7mmol) 滴加到在冰水浴中冷却至 0 ℃的、 2- 金刚烷 基 -4- 甲 基 苯 酚 (1.09g， 4.5mmol)、 Et3N(1.25mL， 9mmol) 与 DMAP( 催 化 量 ) 的 二 氯 甲 烷 (8mL) 溶液中。 使混合物升温至室温， 同时搅拌过夜， 然后过滤， 浓缩滤液。 残余物经过柱色 谱纯化 (10-20％乙酸乙酯 - 己烷 )， 得到 2- 金刚烷基 -4- 甲基 - 苯基乙基碳酸酯， 为黄色 的油 (1.32g， 94％ )。
     2- 金刚烷基 -4- 甲基 -5- 硝基苯基乙基碳酸酯
     在 0℃下， 向冷却的 2- 金刚烷基 -4- 甲基 - 苯基乙基碳酸酯 (1.32g， 4.2mmol) 的 H2SO4(98 ％， 10mL) 溶液逐份加入 KNO3(510mg， 5.0mmol)。将混合物搅拌 3h， 同时升温至室 温， 倒入冰中， 然后用二氯甲烷萃取。合并有机层， 用 NaHCO3 和盐水洗涤， 经 MgSO4 干燥， 浓 缩至干。残余物经过柱色谱纯化 (0-10％ EtOAc- 己烷 )， 得到 2- 金刚烷基 -4- 甲基 -5- 硝 基苯基乙基碳酸酯 (378mg， 25％ )。
     2- 金刚烷基 -4- 甲基 -5- 硝基苯酚
     向 2- 金 刚 烷 基 -4- 甲 基 -5- 硝 基 苯 基 乙 基 碳 酸 酯 (378mg， 1.05mmol) 的 CH2Cl2(5mL) 溶液加入哌啶 (1.0mL)。将溶液在室温下搅拌 1h， 在减压下吸附到硅胶上， 经 过硅胶快速色谱纯化 (0-15 ％， EtOAc- 己烷 )， 得到 2- 金刚烷基 -4- 甲基 -5- 硝基苯酚 (231mg， 77％ )。
     C-12 ； 2- 金刚烷基 -4- 甲基 -5- 氨基苯酚
     向 2- 金刚烷基 -4- 甲基 -5- 硝基苯酚 (231mg， 1.6mmol) 的 EtOH(2mL) 溶液加入 5％披钯碳 (10mg)。将混合物在 H2(1atm) 下搅拌过夜， 然后通过 C 盐过滤。蒸发滤液至干， 无需进一步纯化即可使用。HPLC 保留时间 得到 2- 金刚烷基 -4 甲基 -5- 氨基苯酚 (C-12)， 2.52min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 258.3m/z(MH+).
     实施例 9
     2- 叔丁基 -4- 溴苯酚

    [1000] 在 室 温 下， 向 2- 叔 丁 基 苯 酚 (250g， 1.67mol) 的 CH3CN(1500mL) 溶 液 加 入 NBS(300g， 1.67mol)。加入后， 将混合物在室温下搅拌过夜， 然后除去溶剂。加入石油醚 (1000mL)， 滤出所得白色沉淀。 在减压下浓缩滤液， 得到粗的 2- 叔丁基 -4- 溴苯酚 (380g)， 无需进一步纯化即可使用。

    [1001] 甲基 (2- 叔丁基 -4- 溴苯基 ) 碳酸酯

    [1002] 在室温下， 向 2- 叔丁基 -4- 溴苯酚 (380g， 1.67mol) 的二氯甲烷 (1000mL) 溶液加 入 Et3N(202g， 2mol)。在 0℃下向上述溶液滴加氯甲酸甲酯 (155mL)。加入后， 将混合物在 0℃下搅拌 2h， 用饱和氯化铵溶液淬灭， 用水稀释。分离有机层， 用水和盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到粗的甲基 (2- 叔丁基 -4- 溴苯基 ) 碳酸酯 (470g)， 无需进一步纯化即可使 用。

    [1003] 甲基 (2- 叔丁基 -4- 溴 -5- 硝基苯基 ) 碳酸酯

    [1004] 在 0 ℃ 下， 将 甲 基 (2- 叔 丁 基 -4- 溴 苯 基 ) 碳 酸 酯 (470g， 1.67mol) 溶 于 浓 H2SO4(1000mL)。 历经 90min 逐份加入 KNO3(253g， 2.5mol)。 将反应混合物在 0℃下搅拌 2h， 倒 入冰水 (20L) 中。过滤收集所得沉淀， 用水充分洗涤， 干燥， 从醚中重结晶， 得到甲基 (2- 叔 丁基 -4- 溴 -5- 硝基苯基 ) 碳酸酯 (332g， 3 步收率 60％ )。

    [1005] C-14-a ； 2- 叔丁基 -4- 溴 -5- 硝基 - 苯酚

    [1006] 向 甲 基 (2- 叔 丁 基 -4- 溴 -5- 硝 基 苯 基 ) 碳 酸 酯 (121.5g， 0.366mol) 的 甲 醇 (1000mL) 溶液逐份加入氢氧化钾 (30.75g， 0.549mol)。 加入后， 将混合物在室温下搅拌 3h， 用 1N HCl 酸化至 pH 7。除去甲醇， 加入水。混合物用乙酸乙酯萃取， 分离有机层， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到 2- 叔丁基 -4- 溴 -5- 硝基 - 苯酚 (C-14-a)(100g， 99％ )。

    [1007] 1- 叔丁基 -2-( 苄氧基 )-5- 溴 -4- 硝基苯

    [1008] 向 2- 叔 丁 基 -4- 溴 -5- 硝 基 苯 酚 (C-14-a)(1.1g， 4mmol) 与 Cs2CO3(1.56g， 4.8mmol) 在 DMF(8mL) 中的混合物加入苄基溴 (500μL， 4.2mmol)。将混合物在室温下搅拌 4h， 用 H2O 稀释， 用 EtOAc 萃取两次。合并有机层， 用盐水洗涤， 经 MgSO4 干燥。除去溶剂后，
     残余物经过柱色谱纯化 (0-5％ EtOAc- 己烷 )， 得到 1- 叔丁基 -2-( 苄氧基 )-5- 溴 -4- 硝基 1 苯 (1.37g， 94％ )。 H NMR(400MHz， CDCl3)7.62(s， 1H)， 7.53(s， 1H)， 7.43(m， 5H)， 5.22(s， 2H)， 1.42(s， 9H)

    [1009] 1- 叔丁基 -2-( 苄氧基 )-5-( 三氟甲基 )-4- 硝基苯

    [1010] 在密封的试管中， 将 1- 叔丁基 -2-( 苄氧基 )-5- 溴 -4- 硝基苯 (913mg， 2.5mmol)、 KF(291mg， 5mmol)、 KBr(595mg， 5mmol)、 CuI(570mg， 3mmol)、氯 二 氟 乙 酸 甲 酯 (1.6mL， 15mmol) 与 DMF(5mL) 的混合物在 125℃下搅拌过夜， 冷却至室温， 用水稀释， 用 EtOAc 萃取 三次。合并有机层， 用盐水洗涤， 经无水 MgSO4 干燥。除去溶剂后， 残余物经过柱色谱纯化 (0-5％ EtOAc- 己烷 )， 得到 1- 叔丁基 -2-( 苄氧基 )-5-( 三氟甲基 )-4- 硝基苯 (591mg， 1 67％ )。 H NMR(400MHz， CDCl3)7.66(s， 1H)， 7.37(m， 5H)， 7.19(s， 1H)， 5.21(s， 2H)， 1.32(s， 9H).

    [1011] C-14 ； 5- 氨基 -2- 叔丁基 -4- 三氟甲基 - 苯酚

    [1012] 向回流着的 1- 叔丁基 -2-( 苄氧基 )-5-( 三氟甲基 )-4- 硝基苯 (353mg， 1.0mmol) 与甲酸铵 (350mg， 5.4mmol) 的 EtOH(10mL) 溶液加入 10％ Pd-C(245mg)。 将混合物回流另外 2h， 冷却至室温， 通过 C 盐过滤。除去溶剂后， 残余物经过柱色谱纯化， 得到 5- 氨基 -2- 叔 丁基 -4- 三氟甲基 - 苯酚 (C-14)(120mg， 52％ )。 1

    [1013] H NMR(400MHz， CDCl3)δ7.21(s， 1H)， 6.05(s， 1H)， 1.28(s， 9H) ； HPLC 保 留 时 间 + 3.46min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 234.1m/z(MH ).

    [1014] 实施例 10

    [1015] 一般流程 ：

    [1016] a)ArB(OH)2， K2CO3， Pd(PPh3)4， H2O， DMF 或 ArB(OH)2， (dppf)PdCl2， K2CO3， EtOH ； b) H2， 阮内 Ni， MeOH 或 HCO2NH4， Pd-C， EtOH 或 SnCl2.2H2O.

    [1018] 具体实例 ：

    [1017] 2- 叔丁基 -4-(2- 乙氧基苯基 )-5- 硝基苯酚

    [1021] 向 2- 叔 丁 基 -4- 溴 -5- 硝 基 苯 酚 (C-14-a)(8.22g， 30mmol) 的 DMF(90mL) 溶 液 加 入 2- 乙 氧 基 苯 基 代 硼 酸 (5.48g， 33mmol)、 碳 酸 钾 (4.56g， 33mmol)、 水 (10mL) 和 1.5mmol)。将混合物在 90℃和氮下加热 3h。在减压下除去溶剂。使残余 Pd(PPh3)4(1.73g， 物在水与乙酸乙酯之间分配。合并有机层， 用水和盐水洗涤， 干燥， 经过柱色谱纯化 ( 石油

    [1020] 醚 - 乙酸乙酯 10 ∶ 1)， 得到 2- 叔丁基 -4-(2- 乙氧基苯基 )-5- 硝基苯酚 (9.2g， 92％ )。 1 H NMR(DMSO-d6)δ10.38(s， 1H)， 7.36(s， 1H)， 7.28(m， 2H)， 7.08(s， 1H)， 6.99(t， 1H， J ＝ 7.35Hz)， 6.92(d， 1H， J ＝ 8.1Hz)， 3.84(q， 2H， J ＝ 6.6Hz)， 1.35(s， 9H)， 1.09(t， 3H， J＝ + 6.6Hz) ； ESI-MS 314.3m/z(MH ).

    [1022] C-15 ； 2- 叔丁基 -4-(2- 乙氧基苯基 )-5- 氨基苯酚

    [1023] 向 2- 叔丁基 -4-(2- 乙氧基苯基 )-5- 硝基苯酚 (3.0g， 9.5mmol) 的甲醇 (30mL) 溶液加入阮内镍 (300mg)。将混合物在 H2(1atm) 和室温下搅拌 2h。滤出催化剂， 浓缩滤 液。残余物经过柱色谱纯化 ( 石油醚 - 乙酸乙酯， 6 ∶ 1)， 得到 2- 叔丁基 -4-(2- 乙氧基 1 苯 基 )-5- 氨 基 苯 酚 (C-15)(2.35g， 92 ％ )。@HNMR(DMSO-d6)#8.89(s， H NMR(DMSO-d6) δ8.89(s， 1H)， 7.19(t， 1H， J ＝ 4.2Hz)， 7.10(d， 1H， J ＝ 1.8Hz)， 7.08(d， 1H， J ＝ 1.8Hz)， 6.94(t， 1H， J ＝ 3.6Hz)， 6.67(s， 1H)， 6.16(s， 1H)， 4.25(s， 1H)， 4.00(q， 2H， J ＝ 6.9Hz)， + 1.26(s， 9H)， 1.21(t， 3H， J ＝ 6.9Hz) ； ESI-MS 286.0m/z(MH ).

    [1024] 其他实例 ：

    [1025] C-16 ； 2- 叔丁基 -4-(3- 乙氧基苯基 )-5- 氨基苯酚

    [1027] 按照上述一般流程合成 2- 叔丁基 -4-(3- 乙氧基苯基 )-5- 氨基苯酚 (C-16)， 始于 2- 叔丁基 -4- 溴 -5- 硝基苯酚 (C-14-a) 和 3- 乙氧基苯基代硼酸。 HPLC 保留时间 2.77min， + 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS286.1m/z(MH ).

    [1026] C-17 ； 2- 叔丁基 -4-(3- 甲氧羰基苯基 )-5- 氨基苯酚 (C-17)

    [1030] 按照上述一般流程合成 2- 叔丁基 -4-(3- 甲氧羰基苯基 )-5- 氨基苯酚 (C-17)， 始 于 2- 叔丁基 -4- 溴 -5- 硝基苯酚 (C-14-a) 和 3-( 甲氧羰基 ) 苯基代硼酸。HPLC 保留时间 2.70min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 300.5m/z(MH+).

    [1031] 实施例 11

    [1029] 1- 叔丁基 -2- 甲氧基 -5- 溴 -4- 硝基苯

    [1034] 向 2- 叔 丁 基 -4- 溴 -5- 硝 基 苯 酚 (C-14-a)(1.5g， 5.5mmol) 与 Cs2CO3(2.2g， 6.6mmol) 在 DMF(6mL) 中的混合物加入甲基碘 (5150μL， 8.3mmol)。将混合物在室温下搅 拌 4h， 用 H2O 稀释， 用 EtOAc 萃取两次。合并有机层， 用盐水洗涤， 经 MgSO4 干燥。除去溶剂 后， 残余物用己烷洗涤， 得到 1- 叔丁基 -2- 甲氧基 -5- 溴 -4- 硝基苯 (1.1g， 69％ )。 1

    [1035] H NMR(400MHz， CDCl3)δ7.58(s， 1H)， 7.44(s， 1H)， 3.92(s， 3H)， 1.39(s， 9H).

    [1036] 1- 叔丁基 -2- 甲氧基 -5-( 三氟甲基 )-4- 硝基苯

    [1037] 在密封的试管中， 将 1- 叔丁基 -2- 甲氧基 -5- 溴 -4- 硝基苯 (867mg， 3.0mmol)、 KF(348mg， 6mmol)、 KBr(714mg， 6mmol)、 CuI(684mg， 3.6mmol)、 氯 二 氟 乙 酸 甲 酯 (2.2mL， 21.0mmol) 在 DMF(5mL) 中的混合物在 125℃下搅拌过夜， 冷却至室温， 用水稀释， 用 EtOAc 萃取三次。合并有机层， 用盐水洗涤， 经无水 MgSO4 干燥。除去溶剂后， 残余物经过柱色谱 纯化 (0-5％ EtOAc- 己烷 )， 得到 1- 叔丁基 -2- 甲氧基 -5-( 三氟甲基 )-4- 硝基苯 (512mg， 1 61％ )。 H NMR(400MHz， ， CDCl3)δ7.60(s， 1H)， 7.29(s， 1H)， 3.90(s， 3H)， 1.33(s， 9H).C-18 ； 1- 叔丁基 -2- 甲氧基 -5-( 三氟甲基 )-4- 氨基苯

    [1038] 向回流着的 1- 叔丁基 -2- 甲氧基 -5-( 三氟甲基 )-4- 硝基苯 (473mg， 1.7mmol) 与 甲酸铵 (473mg， 7.3mmol) 的 EtOH(10mL) 溶液加入 10％ Pd-C(200mg)。将混合物回流 1h， 冷 却， 通过 C 盐过滤。蒸发除去溶剂， 得到 1- 叔丁基 -2- 甲氧基 -5-( 三氟甲基 )-4- 氨基苯 1 (C-18)(403mg， 95％ )。 H NMR(400MHz， CDCl3)δ7.19(s， 1H)， 6.14(s， 1H)， 4.02(bs， 2H)， 3.74(s， 3H)， 1.24(s， 9H).

    [1039] 实施例 12

    [1033] C-27 ； 2- 叔丁基 -4- 溴 -5- 氨基 - 苯酚

    [1042] 向 2- 叔丁基 -4- 溴 -5- 硝基苯酚 (C-14-a)(12g， 43.8mmol) 的 MeOH(90mL) 溶液 加入 Ni(2.4g)。将反应混合物在 H2(1atm) 下搅拌 4h。将反应混合物过滤， 浓缩滤液。使

    [1041] 粗产物从乙酸乙酯和石油醚中重结晶， 得到 2- 叔丁基 -4- 溴 -5- 氨基 - 苯酚 (C-27)(7.2g， 70％ )。 1

    [1043] H NMR(DMSO-d 6) δ 9.15(s ， 1H) ， 6.91(s ， 1H) ， 6.24(s ， 1H) ， 4.90(br s ， 2H) ， + 1.22(s， 9H) ； ESI-MS 244.0m/z(MH ).

    [1044] 实施例 13

    [1045] C-24 ； 2， 4- 二 - 叔丁基 -6-(N- 甲基氨基 ) 苯酚

    [1047] 将 2， 4- 二 - 叔 丁 基 -6- 氨 基 - 苯 酚 (C-9)(5.08g， 23mmol)、 NaBH3CN(4.41g， 70mmol) 与低聚甲醛 (2.1g， 70mmol) 在甲醇 (50mL) 中的混合物在回流下搅拌 3h。除去溶 剂后， 残余物经过柱色谱纯化 ( 石油醚 -EtOAc， 30 ∶ 1)， 得到 2， 4- 二 - 叔丁基 -6-(N- 甲基 氨基 ) 苯酚 (C-24)(800mg， 15％ )。 1

    [1048] HNMR(DMSO-d6)δ8.67(s， 1H)， 6.84(s， 1H)， 5.99(s， 1H)， 4.36(q， J ＝ 4.8Hz， 1H)， + 2.65(d， J ＝ 4.8Hz， 3H)， 1.23(s， 18H) ； ESI-MS 236.2m/z(MH ).

    [1049] 实施例 14

    [1046] 2- 甲基 -2- 苯基 - 丙烷 -1- 醇

    [1052] 在 0-5℃下， 向 2- 甲基 -2- 苯基 - 丙酸 (82g， 0.5mol) 的 THF(200mL) 溶液滴加硼 烷 - 二甲基硫 (2M， 100mL)。将混合物在该温度下搅拌 30min， 然后在回流下加热 1h。冷却 后， 加入甲醇 (150mL) 和水 (50mL)。混合物用 EtOAc 萃取 (100mLx3)， 合并有机层， 用水和 盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到 2- 甲基 -2- 苯基 - 丙烷 -1- 醇， 为油 (70g， 77％ )。

    [1053] 2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲基 - 乙基 ]- 苯

    [1054] 在 0 ℃下， 向 NaH(29g， 0.75mol) 的 THF(200mL) 悬液滴加 2- 甲基 -2- 苯基 - 丙 烷 -1- 醇 (75g， 0.5mol) 的 THF(50mL) 溶液。 将混合物在 20℃下搅拌 30min， 然后在 0℃下滴 加 1- 溴 -2- 甲氧基 - 乙烷 (104g， 0.75mol) 的 THF(100mL) 溶液。将混合物在 20℃下搅拌 过夜， 倒入水 (200mL) 中， 用 EtOAc 萃取 (100mLx3)。 合并有机层， 用水和盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩。残余物经过柱色谱纯化 ( 硅胶， 石油醚 )， 得到 2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )-1， 1二 甲基 - 乙基 ]- 苯， 为油 (28g， 27％ )。

    [1055] 1-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲基 - 乙基 ]-4- 硝基 - 苯

    [1056] 向 2-(2- 甲 氧 基 - 乙 氧 基 )-1， 1- 二 甲 基 - 乙 基 ]- 苯 (52g， 0.25mol) 的 CHCl3(200mL) 溶液加入 KNO3(50.5g， 0.5mol) 和 TMSCl(54g， 0.5mol)。将混合物在 20 ℃下 0.7mol)。将反应混合物在 20℃下搅拌 1h， 倒入冰水中。 搅拌 30min， 然后加入 AlCl3(95g， 分离有机层， 水层用 CHCl3 萃取 (50mLx3)。合并有机层， 用水和盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓 缩。残余物经过柱色谱纯化 ( 硅胶， 石油醚 )， 得到 1-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲 基 - 乙基 ]-4- 硝基 - 苯 (6g， 10％ )。

    [1057] 4-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲基 - 乙基 ]- 苯基胺

    [1058] 将 1-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲基 - 乙基 ]-4- 硝基 - 苯 (8.1g， 32mmol) 与阮内镍 (1g) 的 MeOH(50mL) 悬液在 H2(1atm) 和室温下搅拌 1h。滤出催化剂， 浓缩滤液， 得到 4-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲基 - 乙基 ]- 苯基胺 (5.5g， 77％ )。

    [1059] 4-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲基 - 乙基 ]-3- 硝基 - 苯基胺

    [1060] 在 0 ℃下， 向 4-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲基 - 乙基 ]- 苯基胺 (5.8g， 26mmol) 的 H2SO4(20mL) 溶液加入 KNO3(2.63g， 26mmol)。加入完全后， 将混合物在该温度 下搅拌 20min， 然后倒入冰水中。混合物用 EtOAc 萃取 (50mLx3)。合并有机层， 用水和盐 水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩。残余物经过柱色谱纯化 ( 石油醚 -EtOAc， 100 ∶ 1)， 得到 4-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲基 - 乙基 ]-3- 硝基 - 苯基胺 (5g， 71％ )。

    [1061] N-{4-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲基 - 乙基 ]-3- 硝基 - 苯基 }- 乙酰胺

    [1062] 在 0-5℃下， 向 NaHCO3(10g， 0.1mol) 的二氯甲烷 (50mL) 悬液加入 4-[2-(2- 甲氧 基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲基 - 乙基 ]-3- 硝基 - 苯基胺 (5g， 30mmol) 和乙酰氯 (3mL， 20mmol)。 将混合物在 15℃下搅拌过夜， 然后倒入水 (200mL) 中。分离有机层， 水层用二氯甲烷萃取 (50mLx2)。合并有机层， 用水和盐水洗涤。经 Na2SO4 干燥， 浓缩至干， 得到 N-{4-[2-(2- 甲 氧基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲基 - 乙基 ]-3- 硝基 - 苯基 }- 乙酰胺 (5.0g， 87％ )。

    [1063] N-{3- 氨基 -4-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲基 - 乙基 ]- 苯基 }- 乙酰胺

    [1064] 将 N-{4-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲基 - 乙基 ]-3- 硝基 - 苯基 }- 乙酰 胺 (5g， 16mmol) 与阮内镍 (1g) 在 MeOH(50mL) 中的混合物在 H2(1atm) 和室温下搅拌 1h。 滤出催化剂， 浓缩滤液。残余物经过柱色谱纯化 ( 石油醚 -EtOAc， 100 ∶ 1)， 得到 N-{3- 氨基 -4-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲基 - 乙基 ]- 苯基 }- 乙酰胺 (1.6g， 35％ )。

    [1065] N-{3- 羟基 -4-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲基 - 乙基 ]- 苯基 }- 乙酰胺

    [1066] 在 0-5℃下， 向 N-{3- 氨基 -4-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲基 - 乙基 ]- 苯 基 }- 乙酰胺 (1.6g， 5.7mmol) 的 H2SO4(15 ％， 6mL) 溶液加入 NaNO2。将混合物在该温度下 搅拌 20min， 然后倒入冰水中。混合物用 EtOAc 萃取 (30mLx3)。合并有机层， 用水和盐水洗 涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩。残余物经过柱色谱纯化 ( 石油醚 -EtOAc， 100 ∶ 1)， 得到 N-{3- 羟 基 -4-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲基 - 乙基 ]- 苯基 }- 乙酰胺 (0.7g， 38％ )。

    [1067] C-25 ； 2-(1-(2- 甲氧基乙氧基 )-2- 甲基丙烷 -2- 基 )-5- 氨基苯酚

    [1068] 将 N-{3- 羟基 -4-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )-1， 1- 二甲基 - 乙基 ]- 苯基 }- 乙酰胺 (1g， 3.5mmol) 与 HCl(5mL) 的混合物在回流下加热 1h。 将混合物用 Na2CO3 溶液碱化至 pH9， 然后用 EtOAc 萃取 (20mLx3)。合并有机层， 用水和盐水洗涤， 经硫酸钠干燥， 浓缩至干。残 余物经过柱色谱纯化 ( 石油醚 -EtOAc， 100 ∶ 1)， 得到 2-(1-(2- 甲氧基乙氧基 )-2- 甲基丙 1 烷 -2- 基 )-5- 氨基苯酚 (C-25)(61mg， 6％ )。 H NMR(CDCl3)δ9.11(br s， 1H)， 6.96-6.98(d， J ＝ 8Hz， 1H)， 6.26-6.27(d， J ＝ 4Hz， 1H)， 6.17-6.19(m， 1H)， 3.68-3.69(m， + 2H)， 3.56-3.59(m， 4H)， 3.39(s， 3H)， 1.37(s， 6H) ； ESI-MS 239.9m/z(MH ).

    [1069] 实施例 15

    [1070] 4， 6- 二 - 叔丁基 -3- 硝基环己 -3， 5- 二烯 -1， 2- 二酮

    [1072] 向 3， 5- 二 - 叔丁基环己 -3， 5- 二烯 -1， 2- 二酮 (4.20g， 19.1mmol) 的乙酸 (115mL) 溶液缓慢加入 HNO3(15mL)。将混合物在 60℃下加热 40min， 然后倒入 H2O(50mL) 中。将混 合物在室温下放置 2h， 然后置于冰浴中达 1h。收集固体， 用水洗涤， 得到 4， 6- 二 - 叔丁 1 基 -3- 硝基环己 -3， 5- 二烯 -1， 2- 二酮 (1.2g， 24％ )。 H NMR(400MHz， DMSO-d6) δ6.89(s， 1H)， 1.27(s， 9H)， 1.24(s， 9H).

    [1073] 4， 6- 二 - 叔丁基 -3- 硝基苯 -1， 2- 二醇

    [1074] 在分液漏斗中放置 THF/H2O(1 ∶ 1， 400mL)、 4， 6- 二 - 叔丁基 -3- 硝基环己 -3， 5- 二 烯 -1， 2- 二酮 (4.59g， 17.3mmol) 和 Na2S2O4(3g， 17.3mmol)。将分液漏斗密封， 摇动 2min。 混合物用 EtOAc(20mL) 稀释。分离各层， 将有机层用盐水洗涤， 经 MgSO4 干燥， 浓缩， 得到 4， 6- 二 - 叔丁基 -3- 硝基苯 -1， 2- 二醇 (3.4g， 74％ )， 无需进一步纯化即可使用。 1

    [1075] H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ9.24(s， 1H)， 8.76(s， 1H)， 6.87(s， 1H)， 1.35(s， 9H)，

    [1071] 1.25(s， 9H).

    [1076] C-26 ； 4， 6- 二 - 叔丁基 -3- 氨基苯 -1， 2- 二醇

    [1077] 向 4， 6- 二 - 叔丁基 -3- 硝基苯 -1， 2- 二醇 (1.92g， 7.2mmol) 的 EtOH(70mL) 溶 液加入 5％披钯碳 (200mg)。将混合物在 H2(1atm) 下搅拌 2h。向反应重新加入 5％披钯碳 (200mg)， 在 H2(1atm) 下搅拌另外 2h。将混合物通过 C 盐过滤， 浓缩滤液， 经过柱色谱纯化 (10-40％乙酸乙酯 - 己烷 )， 得到 4， 6- 二 - 叔丁基 -3- 氨基苯 -1， 2- 二醇 (C-26)(560mg， 33％ )。 1

    [1078] H NMR(400MHz， CDCl3)δ7.28(s， 1H)， ， 1.42(s， 9H)， 1.38(s， 9H).

    [1079] 苯胺

    [1080] 实施例 1

    [1081] 一般流程 ：

    [1082] 具体实例 ：D-1 ； 4- 氯 - 苯 -1， 3- 二胺

    [1086] 将 1- 氯 -2， 4- 二硝基 - 苯 (100mg， 0.5mmol) 与 SnCl2·2H2O(1.12g， 5mmol) 在乙 醇 (2.5mL) 中的混合物在室温下搅拌过夜。加入水， 混合物然后用饱和 NaHCO3 溶液碱化至 pH 7-8。溶液用乙酸乙酯萃取。合并有机层， 用盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 过滤， 浓缩， 得到 4- 氯 - 苯 -1， 3- 二胺 (D-1)(79mg， quant.)。HPLC 保留时间 0.38min， 10-99％ CH3CN， 5min + run ； ESI-MS 143.1m/z(MH )

    [1087] 其他实例 ：

    [1085] D-2 ； 4， 6- 二氯 - 苯 -1， 3- 二胺

    [1090] 按照上述一般流程合成 4， 6- 二氯 - 苯 -1， 3- 二胺 (D-2)， 始于 1， 5- 二氯 -2， 4- 二 硝基 - 苯。 收率 (95％ )。 HPLC 保留时间 1.88min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 177.1m/ + z(MH ).

    [1089] D-3 ； 4- 甲氧基 - 苯 -1， 3- 二胺

    [1093] 按照上述一般流程合成 4- 甲氧基 - 苯 -1， 3- 二胺 (D-3)， 始于 1- 甲氧基 -2， 4- 二 硝基 - 苯。收率 (quant.)。HPLC 保留时间 0.31min， 10-99％ CH3CN， 5min run.

    [1092] D-4 ； 4- 三氟甲氧基 - 苯 -1， 3- 二胺

    [1096] 按照上述一般流程合成 4- 三氟甲氧基 - 苯 -1， 3- 二胺 (D-4)， 始于 2， 4- 二硝 基 -1- 三氟甲氧基 - 苯。收率 (89％ )。HPLC 保留时间 0.91min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； + ESI-MS 193.3m/z(MH ).

    [1095] D-5 ； 4- 丙氧基苯 -1， 3- 二胺

    [1099] 按照上述一般流程合成 4- 丙氧基苯 -1， 3- 二胺 (D-5)， 始于 5- 硝基 -2- 丙氧 基 - 苯 基 胺。 收 率 (79 ％ )。HPLC 保 留 时 间 0.54min， 10-99 ％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS + 167.5m/z(MH ).

    [1100] 实施例 2

    [1101] 一般流程 ：

    [1098] a)HNO3， H2SO4 ； b)SnCl2·2H2O， EtOH 或 H2， Pd-C， MeOH 具体实例 ：

    [1106] 2， 4- 二硝基 - 丙基苯将丙基苯 (10g， 83mmol) 的浓 H2SO4(50mL) 溶液冷却至 0℃达 30min， 历经 15min 逐 份加入预先冷却至 0℃的、 浓 H2SO4(50mL) 与发烟 HNO3(25mL) 溶液。 将混合物在 0℃下搅拌另 外 30min， 然后升温至室温。将混合物倒入冰 (200g)- 水 (100mL) 中， 用醚萃取 (2x100mL)。 合并萃取液， 用 H2O(100mL) 和盐水 (100mL) 洗涤， 经 MgSO4 干燥， 过滤， 浓缩， 得到 2， 4- 二硝 基 - 丙基苯 (15.6g， 89％ )。 1

    [1108] H NMR(CDCl3， 300MHz)δ8.73(d， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 8.38(dd， J ＝ 8.3， J ＝ 2.2， 1H)， 7.6(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)， 2.96(dd， 2H)， 1.73(m， 2H)， 1.06(t， J ＝ 7.4Hz， 3H).

    [1109] D-6 ； 4- 丙基 - 苯 -1， 3- 二胺

    [1110] 向 2， 4- 二硝基 - 丙基苯 (2.02g， 9.6mmol) 的乙醇 (100mL) 溶液加入 SnCl2(9.9g， 52mmol)， 继之以浓 HCl(10mL)。将混合物回流 2h， 倒入冰水 (100mL) 中， 用固体碳酸氢钠中 和。将溶液进一步用 10％ NaOH 溶液碱化至 pH ～ 10， 用醚萃取 (2x100mL)。合并有机层， 用盐水 (100mL) 洗涤， 经 MgSO4 干燥， 过滤， 浓缩， 得到 4- 丙基 - 苯 -1， 3- 二胺 (D-6)(1.2g， 83％ )。在用于下一步时没有必要进一步纯化 ； 不过， 长时间后产物是不稳定的。 1

    [1111] H NMR(CDCl3， 300MHz)δ6.82(d， J ＝ 7.9Hz， 1H)， 6.11(dd， J ＝ 7.5， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 6.06(d， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 3.49(br s， 4H， NH2)， 2.38(t， J ＝ 7.4Hz， 2H)， 1.58(m， 2H)， + 0.98(t， J ＝ 7.2Hz， 3H) ； ESI-MS 151.5m/z(MH ).

    [1112] 其他实例 ：

    [1113] D-7 ； 4- 乙基苯 -1， 3- 二胺 按照上述一般流程合成 4- 乙基苯 -1， 3- 二胺 (D-7)， 始于乙基苯。 总收率 (76％ )。D-8 ； 4- 异丙基苯 -1， 3- 二胺

    [1118] 按照上述一般流程合成 4- 异丙基苯 -1， 3- 二胺 (D-8)， 始于异丙基苯。总收率 (78％ )。

    [1117] D-9 ； 4- 叔丁基苯 -1， 3- 二胺

    [1121] 按照上述一般流程合成 4- 叔丁基苯 -1， 3- 二胺 (D-9)， 始于叔丁基苯。总收率 (48％ )。 1

    [1122] H NMR(400MHz， CDCl3) 7.01(d， J ＝ 8.3Hz， 1H)， 6.10(dd， J ＝ 2.4， 8.3Hz， 1H)，

    [1120] 13 6.01(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 3.59(br， 4H)， 1.37(s， 9H) ； C NMR(100MHz， CDCl3)δ145.5， 145.3， + 127.6， 124.9， 105.9， 104.5， 33.6， 30.1 ； ESI-MS164.9m/z(MH ).

    [1123] 实施例 3

    [1124] 一 般 流 程 ：

    [1125] a)KNO3， H2SO4 ； b)(i)HNO3， H2SO4 ； (ii)Na2S， S， H2O ； c)Boc2O， NaOH， THF ； d)H2， Pd-C， 具体实例 ：MeOH

    [1126] 4- 叔丁基 -3- 硝基 - 苯基胺

    [1129] 在 0℃下， 向 4- 叔丁基 - 苯基胺 (10.0g， 67.01mmol) 的 H2SO4(98％， 60mL) 溶液缓 慢加入 KNO3(8.1g， 80.41mmol)。加入后， 使反应升温至室温， 搅拌过夜。然后将混合物倒入 冰水中， 用 sat.NaHCO3 溶液碱化至 pH 8。混合物用 CH2Cl2 萃取若干次。合并有机层， 用盐 水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩。残余物经过柱色谱纯化 ( 石油醚 -EtOAc， 10 ∶ 1)， 得到 4- 叔 丁基 -3- 硝基 - 苯基胺 (10g， 77％ )。

    [1130] (4- 叔丁基 -3- 硝基 - 苯基 )- 氨基甲酸叔丁基酯

    [1131] 将 4- 叔丁基 -3- 硝基 - 苯基胺 (4.0g， 20.6mmol) 与 Boc2O(4.72g， 21.6mmol) 在 NaOH(2N， 20mL) 与 THF(20mL) 中的混合物在室温下搅拌过夜。在减压下除去 THF。将残余 物溶于水， 用 CH2Cl2 萃取。 将有机层用 NaHCO3 和盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到 (4- 叔 丁基 -3- 硝基 - 苯基 )- 氨基甲酸叔丁基酯 (4.5g， 74％ )。

    [1132] D-10 ； (3- 氨基 -4- 叔丁基 - 苯基 )- 氨基甲酸叔丁基酯

    [1133] 将 (4- 叔丁基 -3- 硝基 - 苯基 )- 氨基甲酸叔丁基酯 (3.0g， 10.19mol) 与 10 ％ Pd-C(1g) 的 MeOH(40mL) 悬液在 H2(1atm) 和室温下搅拌过夜。过滤后， 浓缩滤液， 残余物经 过柱色谱纯化 ( 石油醚 -EtOAc， 5 ∶ 1)， 得到 (3- 氨基 -4- 叔丁基 - 苯基 )- 氨基甲酸叔丁基 1 酯 (D-10)， 为褐色的油 (2.5g， 93％ )。H NMR(CDCl3)δ7.10(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 6.92(s， 1H)， 6.50-6.53(m， 1H)， 6.36(s， 1H)， 3.62(br s， 2H)， 1.50(s， 9H)， 1.38(s， 9H) ； ESI-MS 528.9m/ + z(2M+H ).

    [1134] 其他实例 ：

    [1128] D-11 ； (3- 氨基 -4- 异丙基 - 苯基 )- 氨基甲酸叔丁基酯

    [1137] 按照上述一般流程合成 (3- 氨基 -4- 异丙基 - 苯基 )- 氨基甲酸叔丁基酯 (D-11)， 始于异丙基苯。总收率 (56％ )。

    [1136] D-12 ； (3- 氨基 -4- 乙基 - 苯基 )- 氨基甲酸叔丁基酯

    [1140] 按照上述一般流程合成 (3- 氨基 -4- 乙基 - 苯基 )- 氨基甲酸叔丁基酯 (D-12)， 始 于乙基苯。总收率 (64％ )。 1

    [1141] H NMR(CD3OD， 300MHz)δ6.87(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 6.81(d， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 6.63(dd， J ＝ 8.1， J ＝ 2.2， 1H)， 2.47(q， J ＝ 7.4Hz， 2H)， 1.50(s， 9H)， 1.19(t， J ＝ 7.4Hz， + 3H) ； ESI-MS 237.1m/z(MH ).

    [1139] D-13 ； (3- 氨基 -4- 丙基 - 苯基 )- 氨基甲酸叔丁基酯

    [1144] 按照上述一般流程合成 (3- 氨基 -4- 丙基 - 苯基 )- 氨基甲酸叔丁基酯 (D-13)， 始 于丙基苯。总收率 (48％ )。

    [1145] 实施例 4

    [1143] (3- 氨基 -4- 叔丁基 - 苯基 )- 氨基甲酸苄基酯

    [1148] 将 4- 叔 丁 基 苯 -1， 3- 二 胺 (D-9)(657mg， 4mmol) 与 吡 啶 (0.39mL， 4.8mmol) 的 CH2Cl2/MeOH(12/1， 8mL) 溶液冷却至 0℃， 历经 10min 滴加氯甲酸苄基酯 (0.51mL， 3.6mmol)

    [1147] 的 CH2Cl2(8mL) 溶液。将混合物在 0℃下搅拌 15min， 然后升温至室温。1h 后， 将混合物用 1M 柠檬酸 (2x20mL)、 饱和含水碳酸氢钠 (20mL) 洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤， 在真空中浓缩， 得到粗的 (3- 氨基 -4- 叔丁基 - 苯基 )- 氨基甲酸苄基酯， 为褐色粘性的胶 (0.97g)， 无需进 一步纯化即可使用。 1

    [1149] H NMR(400MHz， CDCl3)δ7.41-7.32(m， 6H， )， 7.12(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)， 6.89(br s， 1H) ， 6.57(dd ，J ＝ 2.3 ， 8.5Hz ， 1H) ， 5.17(s ， 2H) ， 3.85(br s ， 2H) ， 1.38(s ， 9H) ； 13 CNMR(100MHz， CDCl3， rotameric)δ153.3(br)， 145.3， 136.56， 136.18， 129.2， 128.73， 128.59 ， 128.29 ， 128.25 ， 127.14 ， 108.63(br) ， 107.61(br) ， 66.86 ， 33.9 ， 29.7 ； ESI-MS + 299.1m/z(MH ).

    [1150] (4- 叔丁基 -3- 甲酰氨基 - 苯基 )- 氨基甲酸苄基酯

    [1151] 将 (3- 氨 基 -4- 叔 丁 基 - 苯 基 )- 氨 基 甲 酸 苄 基 酯 (0.97g， 3.25mmol) 与 吡 啶 (0.43mL， 5.25mmol) 的 CH2Cl2(7.5mL) 溶 液 冷 却 至 0 ℃， 历 经 2min 滴 加 甲 酸 - 乙 酸 酐 (3.5mmol， 混 合 净 的 甲 酸 (158μL， 4.2mmol， 1.3equiv.) 与 乙 酸 酐 (0.32mL， 3.5mmol， 1.1eq.) 再熟化 1 小时而制备 ) 的 CH2Cl2(2.5mL) 溶液。 加入完全后， 使混合物升温至室温， 由此沉积出沉淀， 将所得浆液搅拌过夜。将混合物用 1M 柠檬酸 (2x20mL)、 饱和含水碳酸氢 过滤。浑浊的混合物在干燥剂上沉积出一薄层固体， HPLC 分 钠 (20mL) 洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 析显示这是所需的甲酰胺。浓缩滤液至大约 5mL， 用己烷 (15mL) 稀释， 以进一步沉淀甲酰 胺。将干燥剂 (Na2SO4) 悬浮在甲醇 (50mL) 中， 过滤， 滤液合并有产物， 从 CH2Cl2/ 己烷中重 结晶。浓缩所得混合物， 得到 (4- 叔丁基 -3- 甲酰氨基 - 苯基 )- 氨基甲酸苄基酯， 为灰白 1 13 色固体 (650mg， 2 步收率 50％ )。 H 和 C NMR(CD3OD) 显示产物是旋转异构混合物。 1

    [1152] H NMR(400MHz， CD3OD， 旋 转 异 构 体 ) 8.27(s， 1H-a)， 8.17(s， 1H-b)， 7.42-7.26(m ， 8H) ， 5.17(s ， 1H-a) ， 5.15(s ， 1H-b) ， 4.86(s ， 2H) ， 1.37(s ， 9H-a) ， 1.36(s ， 9H13 )； C NMR(100MHz， CD3OD， 旋转异构体 )1636.9， 163.5， 155.8， 141.40， 141.32，139.37， 138.88， 138.22， 138.14， 136.4， 135.3， 129.68， 129.65， 129.31， 129.24， 129.19， 129.13， 128.94， 128.50， 121.4(br)， 118.7(br)， 67.80， 67.67， 35.78， 35.52， 31.65， 31.34 ； + ESI-MS 327.5m/z(MH ).

    [1153] N-(5- 氨基 -2- 叔丁基 - 苯基 )- 甲酰胺

    [1154] 向 100mL 烧瓶装入 (4- 叔丁基 -3- 甲酰氨基 - 苯基 )- 氨基甲酸苄基酯 (650mg， 1.99mmol)、 甲醇 (30mL) 和 10％ Pd-C(50mg)， 在 H2(1atm) 下搅拌 20h。加入 CH2Cl2(5mL) 以 淬灭催化剂， 然后将混合物通过 C 盐过滤， 浓缩， 得到 N-(5- 氨基 -2- 叔丁基 - 苯基 )- 甲酰 胺， 为灰白色固体 (366mg， 96％ )。根据 1H 和 13C NMR(DMSO-d6) 是旋转异构的。 1

    [1155] H NMR(400MHz， DMSO-d6， 旋 转 异 构 体 c) 9.2 (d， J ＝ 10.4Hz， 1H)， 9.15(s， 1H)， 8.23(d， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 8.06(d， J ＝ 10.4Hz， 1H)， 7.06(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)， 7.02(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)， 6.51(d， J ＝ 2.5Hz， 1H)， 6.46(dd， J ＝ 2.5， 8.5Hz， 1H)， 6.39(dd， J 13 ＝ 2.5， 8.5Hz， 1H)， 6.29(d， J ＝ 2.5Hz， 1H)， 5.05(s， 2H)， 4.93(s， 2H)， 1.27(s， 9H) ； C NMR(100MHz， DMSO-d6，旋 转 异 构 体 )δ164.0， 160.4， 147.37， 146.74， 135.38， 135.72， 132.48， 131.59， 127.31， 126.69， 115.15， 115.01， 112.43， 112.00， 33.92， 33.57， 31.33， + 30.92 ； ESI-MS 193.1m/z(MH ).

    [1156] D-14 ； 4- 叔丁基 -N3- 甲基 - 苯 -1， 3- 二胺向 100mL 烧瓶装入 N-(5- 氨基 -2- 叔丁基 - 苯基 )- 甲酰胺 (340mg， 1.77mmol)， 用 氮净化。加入 THF(10mL)， 将溶液冷却至 0℃。历经 2min 加入氢化铝锂的 THF 溶液 (4.4mL， 1M 溶液 )。然后使混合物升温至室温。回流 15h 后， 将黄色悬液冷却至 0 ℃， 先后加入水 (170μL)、 15％含水 NaOH(170μL) 和水 (510μL) 淬灭， 在室温下搅拌 30min。将混合物通 过 C 盐过滤， 滤饼用甲醇 (50mL) 洗涤。合并滤液， 在真空中浓缩， 得到灰色 - 褐色固体， 在 氯仿 (75mL) 与水 (50mL) 之间分配。分离有机层， 用水 (50mL) 洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤， 3 浓缩， 得到 4- 叔丁基 -N - 甲基 - 苯 -1， 3- 二胺 (D-14)， 为褐色的油， 放置后固化 (313mg， 98％ )。 1

    [1158] HNMR(400MHz， CDCl3) 7.01(d， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 6.05(dd， J ＝ 2.4， 8.1Hz， 1H)， 13 6.03(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 3.91(br s， 1H)， 3.52(br s， 2H)， 2.86(s， 3H)， 1.36(s， 9H) ； C NMR(100MHz， CDCl3)δ148.4， 145.7， 127.0， 124.3， 103.6， 98.9， 33.5， 31.15， 30.31 ； ESI-MS + 179.1m/z(MH ).

    [1159] 实施例 5

    [1160] 具体实例 ：2， 4- 二硝基 - 丙基苯

    [1164] 将丙基苯 (10g， 83mmol) 的浓 H2SO4(50mL) 溶液在 0℃下冷却 30min， 历经 15min 逐 份加入预先冷却至 0℃的浓 H2SO4(50mL) 与发烟 HNO3(25mL) 溶液。 将混合物在 0℃下搅拌另 外 30min， 然后升温至室温。将混合物倒入冰 (200g)- 水 (100mL) 中， 用醚萃取 (2x100mL)。 合并萃取液， 用 H2O(100mL) 和盐水 (100mL) 洗涤， 经 MgSO4 干燥， 过滤， 浓缩， 得到 2， 4- 二硝

    [1163] 基 - 丙基苯 (15.6g， 89％ )。 1

    [1165] H NMR(CDCl3， 300MHz)δ8.73(d， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 8.38(dd， J ＝ 8.3， 2.2Hz， 1H)， 7.6(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)， 2.96(m， 2H)， 1.73(m， 2H)， 1.06(t， J ＝ 7.4Hz， 3H).

    [1166] 4- 丙基 -3- 硝基苯胺

    [1167] 将 2， 4- 二硝基 - 丙基苯 (2g， 9.5mmol) 的 H2O(100mL) 悬液在接近回流下加热， 并 且剧烈搅拌。 历经 45min 滴加澄清的橙色 - 红色多硫化物溶液 (300mL(10eq.)， 预先通过加 热硫化钠一水合物 (10.0g)、 硫粉 (2.60g) 和 H2O(400mL) 制备 )。将红色 - 褐色溶液在回流 下加热 1.5h。将混合物冷却至 0℃， 用醚萃取 (2x200mL)。合并有机萃取液， 经 MgSO4 干燥， 过滤， 在减压下浓缩， 得到 4- 丙基 -3- 硝基苯胺 (1.6g， 93％ )， 无需进一步纯化即可使用。

    [1168] (3- 硝基 -4- 丙基 - 苯基 )- 氨基甲酸叔丁基酯

    [1169] 将 4- 丙基 -3- 硝基苯胺 (1.69g， 9.4mmol) 溶于吡啶 (30mL)， 同时搅拌。加入 Boc 酸酐 (2.05g， 9.4mmol)。将混合物搅拌， 并且在回流下加热 1h， 然后在真空中除去溶剂。将 所得油重新溶于 CH2Cl2(300mL)， 用水 (300mL) 和盐水 (300mL) 洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 过滤， 浓缩。粗油含有单与双酰化硝基产物， 经过柱色谱纯化 (0-10％ CH2Cl2-MeOH)， 得到 (3- 硝 基 -4- 丙基 - 苯基 )- 氨基甲酸叔丁基酯 (2.3g， 87％ )。

    [1170] 甲基 -(3- 硝基 -4- 丙基 - 苯基 )- 氨基甲酸叔丁基酯

    [1171] 向 (3- 硝基 -4- 丙基 - 苯基 )- 氨基甲酸叔丁基酯 (200mg， 0.71mmol) 的 DMF(5mL) 溶液加入 Ag2O(1.0g， 6.0mmol)， 继之以甲基碘 (0.20mL， 3.2mmol)。将所得悬液在室温下搅 拌 18h， 通过 C 盐垫过滤。滤饼用 CH2Cl2(10mL) 洗涤。在真空中浓缩滤液。粗油经过柱色 谱纯化 (0-10％ CH2Cl2-MeOH)， 得到甲基 -(3- 硝基 -4- 丙基 - 苯基 )- 氨基甲酸叔丁基酯， 为黄色的油 (110mg， 52％ )。 1

    [1172] H NMR(CDCl3， 300MHz)δ7.78(d， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 7.42(dd， J ＝ 8.2， 2.2Hz， 1H)， 7.26(d， J ＝ 8.2Hz， 1H)， 3.27(s， 3H)， 2.81(t， J ＝ 7.7Hz， 2H)， 1.66(m， 2H)， 1.61(s， 9H)， 0.97(t， J ＝ 7.4Hz， 3H).

    [1173] D-15 ； (3- 氨基 -4- 丙基 - 苯基 )- 甲基 - 氨基甲酸叔丁基酯

    [1174] 向甲基 -(3- 硝基 -4- 丙基 - 苯基 )- 氨基甲酸叔丁基酯 (110mg， 0.37mmol) 的 EtOAc(10mL) 溶液加入 10％ Pd-C(100mg)。将所得悬液在室温和 H2(1atm) 下搅拌 2 天。用 TLC 监测反应的进程。完成后， 将反应混合物通过 C 盐垫过滤。在真空中浓缩滤液， 得到 (3- 氨基 -4- 丙基 - 苯基 )- 甲基 - 氨基甲酸叔丁基酯 (D-15)， 为无色结晶性固体 (80mg， + 81％ )。ESI-MS 265.3m/z(MH ).

    [1175] 其他实例 ：

    [1176] D-16 ； (3- 氨基 -4- 乙基 - 苯基 )- 甲基 - 氨基甲酸叔丁基酯 按照上述一般流程合成 (3- 氨基 -4- 乙基 - 苯基 )- 甲基 - 氨基甲酸叔丁基酯(D-16)， 始于乙基苯。总收率 (57％ )。D-17 ； (3- 氨基 -4- 异丙基 - 苯基 )- 甲基 - 氨基甲酸叔丁基酯

    [1180] 按照上述一般流程合成 (3- 氨基 -4- 异丙基 - 苯基 )- 甲基 - 氨基甲酸叔丁基酯 (D-17)， 始于异丙基苯。总收率 (38％ )。

    [1179] 2′ - 乙氧基 -2， 4- 二硝基 - 联苯

    [1183] 向压力烧瓶装入 2- 乙氧基苯基代硼酸 (0.66g， 4.0mmol)、 KF(0.77g， 13mmol)、 Pd2(dba)3(16mg， 0.02mmol) 与 2， 4- 二硝基 - 溴苯 (0.99g， 4.0mmol) 在 THF(5mL) 中的混合 物。将容器用氩净化 1min， 继之以加入三叔丁基膦 (0.15mL， 0.48mmol， 10％己烷溶液 )。将 反应容器用氩净化另外 1min， 密封， 在 80℃下加热过夜。冷却至室温后， 通过 C 盐塞过滤。 将滤饼用 CH2Cl2(10mL) 冲洗， 合并有机萃取液， 在减压下浓缩， 得到粗产物 2′ - 乙氧基 -2， 4- 二硝基 - 联苯 (0.95g， 82％ )。没有进行进一步纯化。 1

    [1184] H NMR(300MHz， CDCl3)δ8.75(s， 1H)， 8.43(d， J ＝ 8.7Hz， 1H)， 7.60(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.40(t， J ＝ 7.8Hz， 1H)， 7.31(d， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.08(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 6.88(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 3.44(q， J ＝ 6.6Hz， 2H)， 1.24(t， J ＝ 6.6Hz， 3H) ； HPLC 保留时间 3.14min， 10-100％ CH3CN， 5min 梯度

    [1185] 2′ - 乙氧基 -2- 硝基联苯 -4- 基胺

    [1186] 在 90℃下， 将预先通过加热硫化钠一水合物 (10g)、 硫 (1.04g) 和水 (160mL) 制备 的、 澄清的橙色 - 红色多硫化物溶液 (120mL， 7.5eq.) 历经 45 分钟滴加到 2′ - 乙氧基 -2， 4- 二硝基 - 联苯 (1.2g， 4.0mmol) 的水 (40mL) 悬液中。将红色 - 褐色溶液在回流下加热 1.5h。将混合物冷却至室温， 加入固体 NaCl(5g)。将溶液用 CH2Cl2 萃取 (3x50mL)， 合并有 机萃取液， 浓缩， 得到 2′ - 乙氧基 -2- 硝基联苯 -4- 基胺 (0.98g， 95％ )， 无需进一步纯化 即可用于下一步。 1

    [1187] H NMR(300MHz， CDCl3)δ7.26(m， 2H)， 7.17(d， J ＝ 2.7Hz， 1H)， 7.11(d， J ＝ 7.8Hz，

    [1182] 1H)， 7.00(t， J ＝ 6.9Hz， 1H)， 6.83(m， 2H)， 3.91(q， J ＝ 6.9Hz， 2H)， 1.23(t， J ＝ 7.2Hz， 3H) ； + HPLC 保留时间 2.81min， 10-100％ CH3CN， 5min 梯度 ； ESI-MS 259.1m/z(MH ).

    [1188] (2′ - 乙氧基 -2- 硝基联苯 -4- 基 )- 氨基甲酸叔丁基酯

    [1189] 将 2′ - 乙氧基 -2- 硝基联苯 -4- 基胺 (0.98g， 4.0mmol) 与 Boc2O(2.6g， 12mmol) 的混合物用加热枪加热。根据 TLC 显示原料消耗后， 粗混合物经过快速色谱纯化 ( 硅胶， CH2Cl2)， 得 到 (2 ′ - 乙 氧 基 -2- 硝 基 联 苯 -4- 基 )- 氨 基 甲 酸 叔 丁 基 酯 (1.5g， 83 ％ )。 1 H NMR(300MHz， CDCl3)δ7.99(s， 1H)， 7.55(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.25(m， 3H)， 6.99(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 6.82(m， 2H )， 3.88(q， J ＝ 6.9Hz， 2H)， 1.50(s， 9H)， 1.18(t， J ＝ 6.9Hz， 3H) ； HPLC 保留时间 3.30min， 10-100％ CH3CN， 5min 梯度

    [1190] D-18 ； (2′ - 乙氧基 -2- 氨基联苯 -4- 基 )- 氨基甲酸叔丁基酯

    [1191] 在 -10 ℃下， 向 NiCl2.6H2O(0.26g， 1.1mmol) 的 EtOH(5mL) 溶液加入 NaBH4(40mg， 1.1mmol)。观察到气体放出， 生成黑色沉淀。搅拌 5min 后， 加入 (2′ - 乙氧基 -2- 硝基联 苯 -4- 基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (0.50g， 1.1mmol) 的 EtOH(2mL) 溶液。历经 20min 分 3 份加 入另外的 NaBH4(80mg， 60mmol)。将反应在 0℃下搅拌 20min， 继之以加入 NH4OH(4mL， 25％水 溶液 )。将所得溶液搅拌 20min。粗混合物通过短二氧化硅塞过滤。将滤饼用 5％ MeOH 的 合并有机萃取液， 在减压下浓缩， 得到 (2′ - 乙氧基 -2- 氨基联 CH2Cl2 溶液 (10mL) 冲洗， 苯 -4- 基 )- 氨基甲酸叔丁基酯 (D-18)(0.36g， quant.)， 无需进一步纯化即可使用。HPLC 保留时间 2.41min， 10-100％ CH3CN， 5min 梯度 ； ESI-MS 329.3m/z(MH+).

    [1192] 实施例 7

    [1193] D-19 ； N-(3- 氨基 -5- 三氟甲基 - 苯基 )- 甲磺酰胺

    [1195] 将 5- 三 氟 甲 基 - 苯 -1， 3- 二 胺 (250mg， 1.42mmol) 的 吡 啶 (0.52mL) 与 CH2Cl2(6.5mL) 溶液冷却至 0℃。缓慢加入甲磺酰氯 (171mg， 1.49mmol)， 加入速率使溶液的 温度低于 10℃。将混合物在～ 8℃下搅拌， 在 30min 后升温至室温。在室温下搅拌 4h 后， 根据 LCMS 分析显示反应几乎是完全的。 将反应混合物用 sat.aq.NH4Cl(10mL) 溶液淬灭， 用 CH2Cl2 萃取 (4x10mL)， 经 Na2SO4 干燥， 过滤， 浓缩， 得到 N-(3- 氨基 -5- 三氟甲基 - 苯基 )- 甲 磺酰胺 (D-19)， 为微红色半固体 (0.35g， 97％ )， 无需进一步纯化即可使用。 1

    [1196] H-NMR(CDCl 3， 300MHz) δ 6.76(m ， 1H) ， 6.70(m ， 1H) ， 6.66(s ， 1H) ， 3.02(s ， 3H) ； + ESI-MS 255.3 m/z(MH ).

    [1197] 环状胺

    [1198] 实施例 1

    [1194] 7- 硝基 -1， 2， 3， 4- 四氢 - 喹啉

    [1201] 在 0 ℃下， 向 1， 2， 3， 4- 四氢 - 喹啉 (20.0g， 0.15mol) 的 H2SO4(98 ％， 150mL) 溶液 缓慢加入 KNO3(18.2g， 0.18mol)。将反应升温至室温， 搅拌过夜。然后将混合物倒入冰水 中， 用饱和 NaHCO3 溶液碱化至 pH 8。用 CH2Cl2 萃取后， 合并有机层， 用盐水洗涤， 经硫酸钠 干燥， 浓缩。残余物经过柱色谱纯化 ( 石油醚 -EtOAc， 10 ∶ 1)， 得到 7- 硝基 -1， 2， 3， 4- 四 氢 - 喹啉 (6.6g， 25％ )。

    [1202] 7- 硝基 -3， 4- 二氢 -2H- 喹啉 -1- 羧酸叔丁基酯

    [1203] 将 7- 硝基 -1， 2， 3， 4- 四氢 - 喹啉 (4.0g， 5.61mmol)、 Boc2O(1.29g， 5.89mmol) 与 DMAP(0.4g) 在 CH2Cl2 中的混合物在室温下搅拌过夜。 用水稀释后， 混合物用 CH2Cl2 萃取。 合 并有机层， 用 NaHCO3 和盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到粗的 7- 硝基 -3， 4- 二氢 -2H- 喹 啉 -1- 羧酸叔丁基酯， 无需进一步纯化即可用于下一步。

    [1204] DC-1 ； 叔丁基 7- 氨基 -3， 4- 二氢喹啉 -1(2H)- 羧酸酯

    [1205] 将粗的 7- 硝基 -3， 4- 二氢 -2H- 喹啉 -1- 羧酸叔丁基酯 (4.5g， 16.2mol) 与 10％ Pd-C(0.45g) 的 MeOH(40mL) 悬液在 H2(1atm) 和室温下搅拌过夜。 过滤后， 浓缩滤液， 残余物 经过柱色谱纯化 ( 石油醚 -EtOAc， 5 ∶ 1)， 得到叔丁基 7- 氨基 -3， 4- 二氢喹啉 -1(2H)- 羧 1 酸酯 (DC-1)， 为褐色固体 (1.2g， 2 步收率 22 ％ )。 HNMR(CDCl3)δ7.15(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 6.84(d， J ＝ 8Hz， 1H)， 6.36-6.38(m， 1H)， 3.65-3.68(m， 2H)， 3.10(br s， 2H)， 2.66(t， J＝ + 6.4Hz， 2H)， 1.84-1.90(m， 2H)， 1.52(s， 9H) ； ESI-MS496.8m/z(2M+H ).

    [1206] 实施例 2

    [1200] 3-(2- 羟基 - 乙基 )-1， 3- 二氢 - 吲哚 -2- 酮

    [1210] 将搅拌着的羟吲哚 (5.7g， 43mmol) 与阮内镍 (10g) 在乙烷 -1， 2- 二醇 (100mL) 中 的混合物在高压釜中加热。反应完全后， 过滤混合物， 在真空下除去过量二醇。将残留的油 用己烷研制， 得到 3-(2- 羟基 - 乙基 )-1， 3- 二氢 - 吲哚 -2- 酮， 为无色结晶性固体 (4.6g， 70％ )。

    [1211] 1， 2- 二氢 -3- 螺 -1′ - 环丙基 -1H- 吲哚 -2- 酮

    [1212] 在 -20℃下， 向 3-(2- 羟基 - 乙基 )-1， 3- 二氢 - 吲哚 -2- 酮 (4.6g， 26mmol) 与三 乙胺 (10mL) 的 CH2Cl2(100mL) 溶液滴加 MsCl(3.4g， 30mmol)。然后使混合物升温至室温， 搅拌过夜。过滤混合物， 在真空下浓缩滤液。残余物经过柱色谱纯化， 得到粗的 1， 2- 二 氢 -3- 螺 -1’ - 环丙基 -1H- 吲哚 -2- 酮， 为黄色固体 (2.5g)， 直接用于下一步。

    [1209] 1， 2- 二氢 -3- 螺 -1′ - 环丙基 -1H- 吲哚

    [1214] 向 1， 2- 二氢 -3- 螺 -1′ - 环丙基 -1H- 吲哚 -2- 酮 (2.5g 粗产物 ) 的 THF(50mL) 溶液逐份加入 LiAlH4(2g， 52mmol)。加热混合物至回流后， 倒入碎冰中， 用氨水碱化至 pH 8， 用 EtOAc 萃取。合并有机层， 用盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到粗的 1， 2- 二 氢 -3- 螺 -1′ - 环丙基 -1H- 吲哚， 为黄色固体 ( 约 2g)， 直接用于下一步。

    [1215] 6- 硝基 -1， 2- 二氢 -3- 螺 -1′ - 环丙基 -1H- 吲哚

    [1216] 历经 20min 向冷却 (-5℃至 -10℃ ) 的 NaNO3(1.3g， 15.3mmol) 的 H2SO4(98％， 30mL) 溶液滴加 1， 2- 二氢 -3- 螺 -1′ - 环丙基 -1H- 吲哚 (2g， 粗产物 )。 加入后， 将反应混合物搅 拌另外 40min， 倒在碎冰 (20g) 上。 然后将冷却了的混合物用 NH4OH 碱化， 用 EtOAc 萃取。 将 有机层用盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 在减压下浓缩， 得到 6- 硝基 -1， 2- 二氢 -3- 螺 -1′ - 环 丙基 -1H- 吲哚， 为深灰色固体 (1.3g)。

    [1217] 1- 乙酰基 -6- 硝基 -1， 2- 二氢 -3- 螺 -1′ - 环丙基 -1H- 吲哚

    [1218] 将 NaHCO3(5g) 悬浮在 6- 硝基 -1， 2- 二氢 -3- 螺 -1′ - 环丙基 -1H- 吲哚 (1.3g， 粗产物 ) 的 CH2Cl2(50mL) 溶液中。在剧烈搅拌的同时， 滴加乙酰氯 (720mg)。将混合物搅 拌 1h， 过滤。在真空下浓缩滤液。残余物经过硅胶快速柱色谱纯化， 得到 1- 乙酰基 -6- 硝 基 -1， 2- 二氢 -3- 螺 -1′ - 环丙基 -1H- 吲哚 (0.9g， 4 步收率 15％ )。

    [1219] DC-2 ； 1- 乙酰基 -6- 氨基 -1， 2- 二氢 -3- 螺 -1′ - 环丙基 -1H- 吲哚

    [1220] 将 1- 乙酰基 -6- 硝基 -1， 2- 二氢 -3- 螺 -1′ - 环丙基 -1H- 吲哚 (383mg， 2mmol) 与 Pd-C(10 ％， 100mg) 在 EtOH(50mL) 中的混合物在室温和 H2(1atm) 下搅拌 1.5h。滤出 催化剂， 在减压下浓缩滤液。残余物用 HCl/MeOH 处理， 得到 1- 乙酰基 -6- 氨基 -1， 2- 二 氢 -3- 螺 -1′ - 环丙基 -1H- 吲哚 (DC-2)(300mg， 90％ )， 为盐酸盐。

    [1221] 实施例 3

    [1213] 3- 甲基 - 丁 -2- 烯酸苯基酰胺

    [1224] 将 3- 甲基 - 丁 -2- 烯酸 (100g， 1mol) 与 SOCl2(119g， 1mol) 的混合物在回流下加 热 3h。在减压下除去过量的 SOCl2。加入 CH2Cl2(200mL)， 继之以在 0℃下加入苯胺 (93g， 1.0mol) 的 Et3N(101g， 1mol) 溶液。将混合物在室温下搅拌 1h， 用 HCl(5％， 150mL) 淬灭。 分离水层， 用 CH2Cl2 萃取。合并有机层， 用水 (2x100mL) 和盐水 (100mL) 洗涤， 经 Na2SO4 干 燥， 浓缩， 得到 3- 甲基 - 丁 -2- 烯酸苯基酰胺 (120g， 80％ )。

    [1225] 4， 4- 二甲基 -3， 4- 二氢 -1H- 喹啉 -2- 酮

    [1226] 将 AlCl3(500g， 3.8mol) 小 心 地 加 入 到 3- 甲 基 - 丁 -2- 烯 酸 苯 基 酰 胺 (105g， 0.6mol) 的苯 (1000mL) 悬液中。将反应混合物在 80℃下搅拌过夜， 倒入冰水中。分离有机 层， 水层用乙酸乙酯萃取 (250mLx3)。 合并有机层， 用水 (200mLx2) 和盐水 (200mL) 洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到 4， 4- 二甲基 -3， 4- 二氢 -1H- 喹啉 -2- 酮 (90g， 86％ )。

    [1227] 4， 4- 二甲基 -1， 2， 3， 4- 四氢 - 喹啉

    [1228] 在 0℃下， 将 4， 4- 二甲基 -3， 4- 二氢 -1H- 喹啉 -2- 酮 (35g， 0.2mol) 的 THF(100mL) 溶液滴加到 LiAlH4(18g， 0.47mol) 的 THF(200mL) 悬液中。加入后， 将混合物在室温下搅 拌 30min， 然后缓慢加热至回流达 1h。然后冷却混合物至 0 ℃。小心地加入水 (18mL) 和 NaOH(10％， 100mL) 以淬灭反应。 滤出固体， 浓缩滤液， 得到 4， 4- 二甲基 -1， 2， 3， 4- 四氢 - 喹 啉。

    [1229] 4， 4- 二甲基 -7- 硝基 -1， 2， 3， 4- 四氢 - 喹啉

    [1230] 在 0℃下， 向 4， 4- 二甲基 -1， 2， 3， 4- 四氢 - 喹啉 (33g， 0.2mol) 在 H2SO4(120mL) 中 的混合物缓慢加入 KNO3(20.7g， 0.2mol)。 加入后， 将混合物在室温下搅拌 2h， 小心地倒入冰 水中， 用 Na2CO3 碱化至 pH 8。混合物用乙酸乙酯萃取 (3x200mL)。合并萃取液， 用水和盐水 洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到 4， 4- 二甲基 -7- 硝基 -1， 2， 3， 4- 四氢 - 喹啉 (21g， 50％ )。

    [1231] 4， 4- 二甲基 -7- 硝基 -3， 4- 二氢 -2H- 喹啉 -1- 羧酸叔丁基酯

    [1232] 将 4， 4- 二 甲 基 -7- 硝 基 -1， 2， 3， 4- 四 氢 - 喹 啉 (25g， 0.12mol) 与 Boc2O(55g， 0.25mol) 的混合物在 80℃下搅拌 2 天。 混合物经过硅胶色谱纯化， 得到 4， 4- 二甲基 -7- 硝 基 -3， 4- 二氢 -2H- 喹啉 -1- 羧酸叔丁基酯 (8g， 22％ )。

    [1223] DC-3 ； 叔丁基 7- 氨基 -3， 4- 二氢 -4， 4- 二甲基喹啉 -1(2H)- 羧酸酯

    [1234] 将 4， 4- 二甲基 -7- 硝基 -3， 4- 二氢 -2H- 喹啉 -1- 羧酸叔丁基酯 (8.3g， 0.03mol) 与 Pd-C(0.5g) 在甲醇 (100mL) 中的混合 物在 H2(1atm) 和室温下 搅拌 过滤。滤出催 化 剂， 浓缩滤液。残余物用石油醚洗涤， 得到叔丁基 7- 氨基 -3， 4- 二氢 -4， 4- 二甲基喹 1 啉 -1(2H)- 羧酸酯 (DC-3)(7.2g， 95％ )。 H NMR(CDCl3)δ7.11-7.04(m， 2H)， 6.45-6.38(m， 1H)， 3.71-3.67(m， 2H)， 3.50-3.28(m， 2H)， 1.71-1.67(m， 2H)， 1.51(s， 9H)， 1.24(s， 6H).

    [1235] 实施例 4

    [1236] 1- 氯 -4- 甲基戊烷 -3- 酮

    [1238] 在 5 ℃下， 使乙烯穿过异丁酰氯 (50g， 0.5mol) 与 AlCl3(68.8g， 0.52mol) 的无水 CH2Cl2(700mL) 溶液。4h 后， 乙烯的吸收停止， 将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物倒入 冷的稀 HCl 溶液中， 用 CH2Cl2 萃取。合并有机相， 用盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 过滤， 浓缩， 得 到粗的 1- 氯 -4 甲基戊烷 -3- 酮， 无需进一步纯化即可用于下一步。

    [1239] 4- 甲基 -1-( 苯基氨基 )- 戊烷 -3- 酮

    [1240] 将 粗 的 1- 氯 -4- 甲 基 戊 烷 -3- 酮 ( 约 60g)、苯 胺 (69.8g， 0.75mol) 与 NaHCO3(210g， 2.5mol) 的 CH3CN(1000mL) 悬液在回流下加热过夜。冷却后， 滤出不溶性盐， 浓缩滤液。将残余物用 CH2Cl2 稀释， 用 10％ HCl 溶液 (100mL) 和盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 过滤， 浓缩， 得到粗的 4- 甲基 -1-( 苯基氨基 )- 戊烷 -3- 酮。

    [1241] 4- 甲基 -1-( 苯基氨基 )- 戊烷 -3- 醇

    [1242] 在 -10℃下， 将 NaBH4(56.7g， 1.5mol) 逐渐加入到粗的 4- 甲基 -1-( 苯基氨基 )- 戊 烷 -3- 酮 ( 约 80g) 在 MeOH(500mL) 中的混合物中。加入后， 使反应混合物升温至室温， 搅 拌 20min。除去溶剂， 使残余物在水与 CH2Cl2 之间分配。分离有机相， 用盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 过滤， 浓缩。所得胶用醚研制， 得到 4- 甲基 -1-( 苯基氨基 )- 戊烷 -3- 醇， 为白色固 体 (22g， 23％ )。

    [1237] 5， 5- 二甲基 -2， 3， 4， 5- 四氢 -1H- 苯并 [b] 氮杂将 4- 甲基 -1-( 苯基氨基 )- 戊烷 -3- 醇 (22g， 0.11mol) 在 98％ H2SO4(250mL) 中 的混合物在 50℃下搅拌 30min。将反应混合物倒入冰水中， 用饱和 NaOH 溶液碱化至 pH 8， 用 CH2Cl2 萃取。合并有机相， 用盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 过滤， 浓缩。残余物经过柱色谱纯化 ( 石油醚 )， 得到 5， 5- 二甲基 -2， 3， 4， 5- 四氢 -1H- 苯并 [b] 氮杂 8％ )。

    [1245] 为褐色的油 (1.5g，5， 5- 二甲基 -8- 硝基 -2， 3， 4， 5- 四氢 -1H- 苯并 [b] 氮杂 在 0 ℃ 下， 将 KNO3(0.76g， 7.54mmol) 逐 份 加 入 到 5， 5- 二 甲 基 -2， 3， 4， 5- 四 (1.1g， 6.28mmol) 的 H2SO4(15mL) 溶液中。在该温度下搅拌 15min氢 -1H- 苯并 [b] 氮杂用 EtOAc 萃取。将有机层用盐水洗 后， 将混合物倒入冰水中， 用 sat.NaHCO3 碱化至 pH 8， 涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到粗的 5， 5- 二甲基 -8- 硝基 -2， 3， 4， 5- 四氢 -1H- 苯并 [b] 氮 杂 (1.2g)， 无需进一步纯化即可用于下一步。 1-(5， 5- 二甲基 -8- 硝基 -2， 3， 4， 5- 四氢苯并 [b] 氮杂 -1- 基 ) 乙酮 将 乙 酰 氯 (0.77mL， 11mmol) 加 入 到 粗 的 5， 5- 二 甲 基 -8- 硝 基 -2， 3， 4， 5- 四 (1.2g， 5.45mmol) 与 NaHCO3(1.37g， 16.3mmol) 的 CH2Cl2(20mL) 悬

    [1247] 氢 -1H- 苯并 [b] 氮杂液中。将混合物在回流下加热 1h。冷却后， 将混合物倒入水中， 用 CH2Cl2 萃取。将有机层用 盐水洗涤， 经硫酸钠干燥， 浓缩。 残余物经过柱色谱纯化， 得到 1-(5， 5- 二甲基 -8- 硝基 -2， 3， 4， 5- 四氢苯并 [b] 氮杂

    [1249] -1- 基 ) 乙酮 (1.05g， 2 步收率 64％ )。 -1- 基 ) 乙酮 -1- 基 ) 乙酮 (1.05g， -1- 基 ) 乙酮， 为白DC-4 ； 1-(8- 氨基 -2， 3， 4， 5- 四氢 -5， 5- 二甲基苯并 [b] 氮杂 将 1-(5， 5- 二甲基 -8- 硝基 -2， 3， 4， 5- 四氢苯并 [b] 氮杂40mmol) 与 10％ Pd-C(0.2g) 的 MeOH(20mL) 悬液在 H2(1atm) 和室温下搅拌 4h。过滤后， 浓 缩滤液， 得到 1-(8- 氨基 -2， 3， 4， 5- 四氢 -5， 5- 二甲基苯并 [b] 氮杂 色固体 (DC-4)(880mg， 94％ )。 1

    [1251] H NMR(CDCl3)δ7.06(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 6.59(dd， J ＝ 8.4， 2.4Hz， 1H)， 6.50(br s， 1H)， 4.18-4.05(m， 1H)， 3.46-3.36(m， 1H)， 2.23(s， 3H)， 1.92-1.85(m， 1H)， 1.61-1.51(m， + 3H)， 1.21(s， 3H)， 0.73(t， J ＝ 7.2Hz， 3H) ； ESI-MS 233.0m/z(MH ).

    [1252] 实施例 5

    [1253] 螺 [1H- 茚 -1， 4′ - 哌啶 ]-3(2H)- 酮， 1′ - 苄基

    [1255] 将螺 [1H- 茚 -1， 4 ′ - 哌啶 ]-1 ′ - 羧酸， 2， 3- 二氢 -3- 氧代 -， 1， 1- 二甲基乙 基酯 (9.50g， 31.50mmol) 在饱和 HCl/MeOH(50mL) 中的混合物在 25 ℃下搅拌过夜。在减 压下除去溶剂， 得到灰白色固体 (7.50g)。向这种固体的无水 CH3CN 溶液 (30mL) 加入无水 K2CO3(7.85g， 56.80mmol)。将悬液搅拌 5min， 在室温下滴加苄基溴 (5.93g， 34.65mmol)。将 混合物搅拌 2h， 倒入碎冰中， 用 CH2Cl2 萃取。合并有机层， 经 Na2SO4 干燥， 在真空下浓缩， 得 到粗的螺 [1H- 茚 -1， 4′ - 哌啶 ]-3(2H)- 酮， 1′ - 苄基 (7.93g， 87％ )， 无需进一步纯化即 可使用。

    [1256] 螺 [1H- 茚 -1， 4′ - 哌啶 ]-3(2H)- 酮， 1′ - 苄基， 肟

    [1257] 向 螺 [1H- 茚 -1， 4 ′ - 哌 啶 ]-3(2H)- 酮， 1 ′ - 苄 基 (7.93g， 27.25mmol) 的 EtOH(50mL) 溶 液 一 次 性 加 入 盐 酸 羟 胺 (3.79g， 54.50mmol) 和 无 水 乙 酸 钠 (4.02g， 49.01mmol)。 将混合物回流 1h， 然后冷却至室温。 在减压下除去溶剂， 加入 200mL 水。 混合物 用 CH2Cl2 萃取。 合并有机层， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到螺 [1H- 茚 -1， 4′ - 哌啶 ]-3(2H)- 酮， 1′ - 苄基， 肟 (7.57g， 91％ )， 无需进一步纯化即可使用。

    [1258] 1， 2， 3， 4- 四氢喹啉 -4- 螺 -4′ -(N′ - 苄基 - 哌啶 )

    [1259] 在 0 ℃ 下， 向 螺 [1H- 茚 -1， 4 ′ - 哌 啶 ]-3(2H)- 酮， 1 ′ - 苄 基， 肟 (7.57g， 24.74mmol) 的无水 CH2Cl2(150mL) 溶液滴加 DIBAL-H(135.7mL， 1M 甲苯溶液 )。将混合物 在 0℃下搅拌 3h， 用 CH2Cl2(100mL) 稀释， 用 NaF(20.78g， 495mmol) 和水 (6.7g， 372mmol) 淬 灭。将所得悬液在 0℃下剧烈搅拌 30min。过滤后， 残余物用 CH2Cl2 洗涤。合并滤液， 在真 空下浓缩， 得到灰褐色油， 经过硅胶柱色谱纯化 (CH2Cl2-MeOH， 30 ∶ 1)， 得到 1， 2， 3， 4- 四氢 喹啉 -4- 螺 -4′ -(N′ - 苄基 - 哌啶 )(2.72g， 38％ )。

    [1260] 1， 2， 3， 4- 四氢喹啉 -4- 螺 -4′ - 哌啶

    [1261] 将 1， 2， 3， 4- 四 氢 喹 啉 -4- 螺 -4 ′ -(N ′ - 苄 基 - 哌 啶 )(300mg， 1.03mmol) 与 Pd(OH)2-C(30mg) 的 MeOH(3mL) 悬液在 H2(55psi) 和 50℃下搅拌过夜。 冷却后， 滤出催化剂，

    [1254] 用 MeOH 洗涤。合并滤液， 在减压下浓缩， 得到 1， 2， 3， 4- 四氢喹啉 -4- 螺 -4′ - 哌啶， 为白 色固体 (176mg， 85％ )， 无需进一步纯化即可使用。

    [1262] 7′ - 硝基 - 螺 [ 哌啶 -4， 4′ (1′ H)- 喹啉 ]， 2′， 3′ - 二氢 - 羧酸叔丁基酯

    [1263] 在 0 ℃ 下，将 KNO3(69.97mg， 0.69mmol) 逐 份 加 入 到 1， 2， 3， 4- 四 氢 喹 啉 -4- 螺 -4′ - 哌啶 (133mg， 0.66mmol) 的 98％ H2SO4(2mL) 悬液中。加入完全后， 使反应 混合物升温至室温， 搅拌另外 2h。然后将混合物倒入碎冰中， 用 10％ NaOH 碱化至 pH ～ 8。 滴加 Boc2O(172mg， 0.79mmol)， 将混合物在室温下搅拌 1h。混合物然后用 EtOAc 萃取， 合并 有机层， 经 Na2SO4 干燥， 过滤， 浓缩， 得到粗的 7′ - 硝基 - 螺 [ 哌啶 -4， 4′ (1′ H)- 喹啉 ]， 2′， 3′ - 二氢 - 羧酸叔丁基酯 (230mg)， 无需进一步纯化即可用于下一步。

    [1264] 7′ - 硝基 - 螺 [ 哌啶 -4， 4′ (1′ H)-1- 乙酰基 - 喹啉 ]， 2′， 3′ - 二氢 - 羧酸 叔丁基酯

    [1265] 在 室 温 下， 将 乙 酰 氯 (260mg， 3.30mmol) 滴 加 到 7 ′ - 硝 基 - 螺 [ 哌 啶 -4， 4′ (1′ H)- 喹啉 ]， 2′， 3′ - 二氢 - 羧酸叔丁基酯 (230mg) 与 NaHCO3(1.11g， 13.17mmol) 的 MeCN(5mL) 悬液中。使反应混合物回流 4h。冷却后， 过滤悬液， 浓缩滤液。残余物经过 柱色谱纯化 ( 石油醚 -EtOAc， 10 ∶ 1)， 得到 7′ - 硝基 - 螺 [ 哌啶 -4， 4′ (1′ H)-1- 乙酰 基 - 喹啉 ]， 2′， 3′ - 二氢 - 羧酸叔丁基酯 (150mg， 2 步收率 58％ )。

    [1266] DC-5 ； 7′ - 氨基 - 螺 [ 哌啶 -4， 4′ (1′ H)-1- 乙酰基 - 喹啉 ]， 2′， 3′ - 二氢 - 羧 酸叔丁基酯

    [1267] 将 7′ - 硝基 - 螺 [ 哌啶 -4， 4′ (1′ H)-1- 乙酰基 - 喹啉 ]， 2′， 3′ - 二氢 - 羧 酸叔丁基酯 (150mg， 0.39mmol) 与阮内镍 (15mg) 的 MeOH(2mL) 悬液在 H2(1atm) 和 25℃下搅 拌过夜。 过滤除去催化剂， 用 MeOH 洗涤。 合并滤液， 经 Na2SO4 干燥， 过滤， 浓缩， 得到 7′ - 氨 基 - 螺 [ 哌啶 -4， 4′ (1′ H)-1- 乙酰基 - 喹啉 ]， 2′， 3′ - 二氢 - 羧酸叔丁基酯 (DC-5) (133mg， 96％ )。

    [1268] 实施例 7

    [1269] 2-(2， 4- 二硝基苯硫基 )- 乙酸 在 室 温 下， 将 Et3N(1.5g， 15mmol) 和 巯 基 - 乙 酸 (1g， 11mmol) 加 入 到 1- 氯 -2， 烷 (50mL) 溶液中。在室温下搅拌 5h 后， 加入4- 二硝基苯 (2.26g， 10mmol) 的 1， 4- 二H2O(100mL)。所得悬液用乙酸乙酯萃取 (100mLx3)。将乙酸乙酯萃取液用水和盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到 2-(2， 4- 二硝基苯硫基 )- 乙酸 (2.3g， 74％ )， 无需进一步纯化即可 使用。

    [1272] DC-7 ； 6- 氨基 -2H- 苯并 [b][1， 4] 噻嗪 -3(4H)- 酮

    [1273] 使 2-(2， 4- 二硝基苯硫基 )- 乙酸 (2.3g， 9mmol) 与氯化锡 (II) 二水合物 (22.6g， 0.1mol) 的乙醇 (30mL) 溶液回流过夜。在减压下除去溶剂后， 将残留浆液用水 (100mL) 稀 释， 用 10％ Na2CO3 溶液碱化至 pH 8。所得悬液用乙酸乙酯萃取 (3x100mL)。将乙酸乙酯萃 取液用水和盐水洗涤， 经硫酸钠干燥， 浓缩。残余物用 CH2Cl2 洗涤， 得到 6- 氨基 -2H- 苯并[b][1， 4] 噻嗪 -3(4H)- 酮 (DC-7)， 为黄色粉末 (1g， 52％ )。 1

    [1274] H NMR(DMSO-d6)δ10.24(s.1H)， 6.88(d， 1H， J ＝ 6Hz)， 6.19-6.21(m， 2H)， 5.15(s， + 2H)， 3.28(s， 2H) ； ESI-MS 181.1m/z(MH ).

    [1275] 实施例 7

    [1276] N-(2- 溴 -5- 硝基苯基 ) 乙酰胺

    [1278] 在 25℃下， 将乙酸酐 (1.4mL， 13.8mmol) 滴加到搅拌着的 2- 溴 -5- 硝基苯胺 (3g， 13.8mmol) 的冰乙酸 (30mL) 溶液中。将反应混合物在室温下搅拌过夜， 然后倒入水中。过 滤收集沉淀， 用水洗涤， 在真空下干燥， 得到 N-(2- 溴 -5- 硝基苯基 ) 乙酰胺， 为灰白色固体 (3.6g， 90％ )。

    [1279] N-(2- 溴 -5- 硝基苯基 )-N-(2- 甲基丙 -2- 烯基 ) 乙酰胺

    [1280] 在 25 ℃下， 将 3- 溴 -2- 甲基丙烯 (3.4g， 55.6mmol) 的无水 DMF(30mL) 溶液滴加 到 N-(2- 溴 -5- 硝基苯基 ) 乙酰胺 (3.6g， 13.9mmol) 与碳酸钾 (3.9g， 27.8mmol) 的无水 DMF(50mL) 溶液中。将反应混合物在 25℃下搅拌过夜。然后将反应混合物过滤， 滤液用饱 和 Na2CO3 溶液处理。分离有机层， 水层用 EtOAc 萃取。合并有机萃取液， 用水和盐水洗涤， 经 MgSO4 干燥， 过滤， 在真空下浓缩， 得到 N-(2- 溴 -5- 硝基苯基 )-N-(2- 甲基丙 -2- 烯基 ) 乙酰胺， 为金色固体 (3.1g， 85％ )。ESI-MS313m/z(MH+).

    [1281] 1-(3， 3- 二甲基 -6- 硝基二氢吲哚 -1- 基 ) 乙酮

    [1282] 将 N-(2- 溴 -5- 硝基苯基 )-N-(2- 甲基丙 -2- 烯基 ) 乙酰胺 (3.1g， 10.2mmol)、 四 乙基氯化铵水合物 (2.4g， 149mmol)、 甲酸钠 (1.08g， 18mmol)、 乙酸钠 (2.76g， 34.2mmol) 与 乙酸钯 (0.32g， 13.2mmol) 的无水 DMF(50mL) 溶液在 80℃和 N2 气氛下搅拌 15h。冷却后， 通过 C 盐过滤混合物。将 C 盐用 EtOAc 洗涤， 合并滤液， 用 sat.NaHCO3 洗涤。分离有机层， 用水和盐水洗涤， 经 MgSO4 干燥， 过滤， 在减压下浓缩， 得到 1-(3， 3- 二甲基 -6- 硝基二氢吲 哚 -1- 基 ) 乙酮， 为褐色固体 (2.1g， 88％ )。

    [1283] DC-8 ； 1-(6- 氨基 -3， 3- 二甲基 -2， 3- 二氢 - 吲哚 -1- 基 )- 乙酮

    [1284] 将 10％ Pd-C(0.2g) 加入到 1-(3， 3- 二甲基 -6- 硝基二氢吲哚 -1- 基 ) 乙酮 (2.1g， 9mmol) 的 MeOH(20mL) 悬液中。将反应在 H2(40psi) 和室温下搅拌过夜。滤出 Pd-C， 在真空 下浓缩滤液， 得到粗产物， 经过柱色谱纯化， 得到 1-(6- 氨基 -3， 3- 二甲基 -2， 3- 二氢 - 吲 哚 -1- 基 )- 乙酮 (DC-8)(1.3g， 61％ )。

    [1285] 实施例 8

    [1277] 2， 3， 4， 5- 四氢 -1H- 苯并 [b] 氮杂在 0℃下， 将 DIBAL(90mL， 90mmol) 滴加到 4- 二氢 -2H- 萘 -1- 酮肟 (3g， 18mmol) 的二氯甲烷 (50mL) 溶液中。将混合物在该温度下搅拌 2h。将反应用二氯甲烷 (30mL) 淬 灭， 继之以用 NaF(2g， 0.36mol) 和 H2O(5mL， 0.27mol) 处理。继续在 0℃下剧烈搅拌所得悬 液达 30min。过滤后， 浓缩滤液。残余物经过快速柱色谱纯化， 得到 2， 3， 4， 5- 四氢 -1H- 苯 并 [b] 氮杂

    [1290] 为无色的油 (1.9g， 70％ )。 (1.9g， 13mmol) 滴 加 到8- 硝基 -2， 3， 4， 5- 四氢 -1H- 苯并 [b] 氮杂 在 -10 ℃ 下， 将 2， 3， 4， 5- 四 氢 -1H- 苯 并 [b] 氮 杂KNO3(3g， 30mmol) 的 H2SO4(50mL) 溶液中。将混合物搅拌 40min， 倒在碎冰上， 用氨水碱化至 pH 13， 用 EtOAc 萃取。合并有机相， 用盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到 8- 硝基 -2， 3， 4， 5- 四氢 -1H- 苯并 [b] 氮杂

    [1292] 为黑色固体 (1.3g， 51％ )， 无需进一步纯化即可使用。 -1- 基 )- 乙酮1-(8- 硝基 -2， 3， 4， 5- 四氢 - 苯并 [b] 氮杂将 乙 酰 氯 (1g， 13mmol) 滴 加 到 8- 硝 基 -2， 3， 4， 5- 四 氢 -1H- 苯 并 [b] 氮 杂(1.3g， 6.8mmol) 与 NaHCO3(1g， 12mmol) 在 CH2Cl2(50mL) 中的混合物中。搅拌 1h 后， 过滤 混合物， 浓缩滤液。将残余物溶于 CH2Cl2， 用盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩。残余物经过柱 色谱纯化， 得到 1-(8- 硝基 -2， 3， 4， 5- 四氢 - 苯并 [b] 氮杂 (1.3g， 80％ )。

    [1294] -1- 基 ) 乙酮， 为黄色固体 -1- 基 )- 乙酮DC-9 ； 1-(8- 氨基 -2， 3， 4， 5- 四氢 - 苯并 [b] 氮杂 将 1-(8- 硝基 -2， 3， 4， 5- 四氢 - 苯并 [b] 氮杂-1- 基 )- 乙酮 (1.3g， 5.4mmol) 与 -1- 基 )- 乙Pd-C(10％， 100mg) 在 EtOH(200mL) 中的混合物在 H2(1atm) 和室温下搅拌 1.5h。通过一层 C 盐过滤混合物， 浓缩滤液， 得到 1-(8- 氨基 -2， 3， 4， 5- 四氢 - 苯并 [b] 氮杂 酮 (DC-9)， 为白色固体 (1g， 90％ )。 1

    [1296] H NMR(CDCl3)δ7.01(d， J ＝ 6.0Hz， 1H)， 6.56(dd， J ＝ 6.0， 1.8Hz， 1H)， 6.50(d， J ＝ 1.8Hz， 1H)， 4.66-4.61(m， 1H)， 3.50(br s， 2H)， 2.64-2.55(m， 3H)， 1.94-1.91(m， 5H)， + 1.77-1.72(m， 1H)， 1.32-1.30(m， 1H) ； ESI-MS 204.1m/z(MH ).

    [1297] 实施例 9

    [1298] 6- 硝基 -4H- 苯并 [1， 4]嗪 -3- 酮在 0 ℃下， 历经 30min 将氯乙酰氯 (8.75mL， 0.11mol) 滴加到 4- 硝基 -2- 氨基苯 酚 (15.4g， 0.1mol)、 苄 基 三 甲 基 氯 化 铵 (18.6g， 0.1mol) 与 NaHCO3(42g， 0.5mol) 在 氯 仿 (350mL) 中的混合物中。加入后， 将反应混合物在 0℃下搅拌 1h， 然后在 50℃下搅拌过夜。 在减压下除去溶剂， 残余物用水 (50mL) 处理。过滤收集固体， 用水洗涤， 从乙醇中重结晶， 得到 6- 硝基 -4H 苯并 [1， 4]

    [1301] 嗪 -3- 酮， 为淡黄色固体 (8g， 41％ )。 嗪6- 硝基 -3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [1， 4]将 BH3·Me2S 的 THF 溶 液 (2M， 7.75mL， 15.5mmol) 滴 加 到 6- 硝 基 -4H- 苯 并 [1，4]嗪 -3- 酮 (0.6g， 3.1mmol) 的 THF(10mL) 悬液中。将混合物在室温下搅拌过夜。在 嗪， 为红色固0℃下将反应用 MeOH(5mL) 淬灭， 然后加入水 (20mL)。混合物用 Et2O 萃取， 合并有机层， 用 盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到 6- 硝基 -3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [1， 4] 体 (0.5g， 89％ )， 无需进一步纯化即可使用。

    [1303] 4- 乙酰基 -6- 硝基 -3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [1， 4]嗪在 室 温 下 剧 烈 搅 拌 下， 将 乙 酰 氯 (1.02g， 13mmol) 滴 加 到 6- 硝 基 -3， 4- 二 嗪 (1.8g， 10mmol) 与 NaHCO3(7.14g， 85mmol) 在 CH2Cl2(50mL) 中的混氢 -2H- 苯并 [1， 4]合物中。加入后， 将反应在该温度下搅拌 1h。过滤混合物， 在真空下浓缩滤液。将残余物用 Et2O ∶己烷 (1 ∶ 2， 50mL) 处理， 搅拌 30min， 然后过滤， 得到 4- 乙酰基 -6- 硝基 -3， 4- 二 氢 -2H- 苯并 [1， 4]

    [1305] 嗪， 为淡黄色固体 (2g， 90％ )。 嗪 嗪 (1.5g， 67.6mmol) 与DC-10 ； 4- 乙酰基 -6- 氨基 -3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [1， 4] 将 4- 乙 酰 基 -6- 硝 基 -3， 4- 二 氢 -2H- 苯 并 [1， 4]Pd-C(10％， 100mg) 在 EtOH(30mL) 中的混合物在 H2(1atm) 下搅拌过夜。滤出催化剂， 浓缩 滤液。将残余物用 HCl/MeOH 处理， 得到 4- 乙酰基 -6- 氨基 -3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [1， 4] 嗪盐酸盐 (DC-10)， 为灰白色固体 (1.1g， 85％ )。 1

    [1307] H NMR(DMSO-d6)δ10.12(br s， 2H)， 8.08(br s， 1H)， 6.90-7.03(m， 2H)， 4.24(t， J + ＝ 4.8Hz， 2H)， 3.83(t， J ＝ 4.8Hz， 2H)， 2.23(s， 3H) ； ESI-MS 192.1m/z(MH ).

    [1308] 实施例 10

    [1309] 1， 2， 3， 4- 四氢 -7- 硝基异喹啉盐酸盐

    [1311] 将 1， 2， 3， 4- 四氢异喹啉 (6.3mL， 50.0mmol) 滴加到搅拌着的冰冷却的脓 H2SO4 溶 液 (25mL) 中。逐份 KNO3(5.6g， 55.0mmol)， 同时维持温度低于 5℃。将混合物在室温下搅 拌过夜， 小心地倒入冰冷的浓 NH4OH 溶液中， 然后用 CHCl3 萃取三次。合并有机层， 用盐水 洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩。将所得深褐色油溶于 EtOH， 在冰浴中冷却， 用浓 HCl 处理。过 滤收集黄色沉淀， 从甲醇中重结晶， 得到 1， 2， 3， 4- 四氢 -7- 硝基异喹啉盐酸盐， 为黄色固体 (2.5g， 23％ )。

    [1310] H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ9.86(s， 2H)， 8.22(d， J ＝ 1.6Hz， 1H)， 8.11(dd， J ＝ 8.5， 2.2Hz， 1H)， 7.53(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)， 4.38(s， 2H)， 3.38(s， 2H)， 3.17-3.14(m， 2H) ； + HPLC 保留时间 0.51min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 179.0m/z(MH ).

    [1313] 叔丁基 3， 4- 二氢 -7- 硝基异喹啉 -2(1H)- 羧酸酯

    [1312] 1将 1， 2， 3， 4- 四 氢 -7- 硝 基 异 喹 啉 (2.5g， 11.6mmol)、 1， 4- 二烷 (24mL)、H2O(12mL) 与 1N NaOH(12mL) 的混合物在冰浴中冷却， 加入 Boc2O(2.8g， 12.8mmol)。将混 合物在室温下搅拌 2.5h， 用 5％ KHSO4 溶液酸化至 pH 2-3， 然后用 EtOAc 萃取。将有机层经 MgSO4 干燥， 浓缩， 得到叔丁基 3， 4- 二氢 -7- 硝基异喹啉 -2(1H)- 羧酸酯 (3.3g， quant.)， 无需进一步纯化即可使用。 1

    [1315] H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ8.13(d， J ＝ 2.3Hz， 1H)， 8.03(dd， J ＝ 8.4， 2.5Hz， 1H)， 7.45(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)， 4.63(s， 2H)， 3.60-3.57(m， 2H)， 2.90(t， J ＝ 5.9Hz， 2H)， 1.44(s， + 9H) ； HPLC 保留时间 3.51min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 279.2m/z(MH ).

    [1316] DC-6 ； 叔丁基 7- 氨基 -3， 4- 二氢异喹啉 -2(1H)- 羧酸酯

    [1317] 在 N2 气氛下， 将 Pd(OH)2(330.0mg) 加入到搅拌着的叔丁基 3， 4- 二氢 -7- 硝基异喹 啉 -2(1H)- 羧酸酯 (3.3g， 12.0mmol) 的 MeOH(56mL) 溶液中。将反应混合物在 H2(1atm) 和 室温下搅拌 72h。通过 C 盐过滤除去固体。浓缩滤液， 经过柱色谱纯化 (15-35％ EtOAc- 己 烷 )， 得到叔丁基 7- 氨基 -3， 4- 二氢异喹啉 -2(1H)- 羧酸酯 (DC-6)， 为粉红色油 (2.0g， 69％ )。 1

    [1318] H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ6.79(d， J ＝ 8.1Hz， 1H0， 6.40(dd， J ＝ 8.1， 2.3Hz， 1H)， 6.31(s， 1H)， 4.88(s， 2H)， 4.33(s， 2H)， 3.48(t， J ＝ 5.9Hz， 2H)， 2.58(t， J ＝ 5.9Hz， 2H)， 1.42(s， 9H) ； HPLC 保 留 时 间 2.13min， 10-99 ％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 249.0m/ + z(MH ).

    [1319] 其他胺类 ：

    [1320] 4- 溴 -3- 硝基苄腈

    [1322] 在 0℃下， 向 4- 溴苄腈 (4.0g， 22mmol) 的浓 H2SO4(10mL) 溶液滴加硝酸 (6mL)。将 反应混合物在 0℃下搅拌 30min， 然后在室温下搅拌 2.5h。将所得溶液倒入冰水中。过滤收 集白色沉淀， 用水洗涤， 直至洗液为中性。使固体从乙醇 / 水混合物 (1 ∶ 1， 20mL) 中重结 晶两次， 得到 4- 溴 -3- 硝基苄腈， 为白色结晶性固体 (2.8g， 56％ )。 1

    [1323] H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ8.54(s， 1H)， 8.06(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.99(d， 13 J ＝ 8.4Hz， 1H) ；C NMR(75MHz， DMSO-d6)δ150.4， 137.4， 136.6， 129.6， 119.6， 117.0， + 112.6 ； HPLC 保留时间 1.96min， 10-100％ CH3CN， 5min 梯度 ； ESI-MS 227.1m/z(MH ).

    [1324] 2′ - 乙氧基 -2- 硝基联苯 -4- 甲腈

    [1325] 向 50mL 圆底烧瓶装入 4- 溴 -3- 硝基苄腈 (1.0g 4.4mmol)、 2- 乙氧基苯基代硼酸 (731mg， 4.4mmol)、 Pd2(dba)3(18mg， 0.022mmol) 和氟化钾 (786mg， 13.5mmol)。排空反应容 器， 充以氩。加入无水 THF(300mL)， 继之以加入 P(t-Bu)3(0.11mL， 含 10％ wt. 己烷 )。将 反应混合物在室温下搅拌 30min， 然后在 80℃下加热 16h。冷却至室温后， 通过 C 盐垫过滤 所得混合物， 浓缩。分离 2′ - 乙氧基 -2- 硝基联苯 -4- 甲腈， 为黄色固体 (1.12g， 95％ ). 1

    [1326] H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ8.51(s， 1H)， 8.20(d， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 7.68(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.41(t， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.37(d， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.08(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 13 7.03(d， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 3.91(q， J ＝ 7.2Hz， 2H)， 1.12(t， J ＝ 7.2Hz， 3H) ；C NMR(75MHz， DMSO-d6)δ154.9， 149.7， 137.3， 137.2， 134.4， 131.5， 130.4， 128.4， 125.4， 121.8， 117.6， 112.3， 111.9， 64.1， 14.7 ； HPLC 保 留 时 间 2.43min， 10-100 ％ CH3CN， 5min 梯 度 ； ESI-MS + 269.3m/z(MH ).

    [1327] 4- 氨甲基 -2′ - 乙氧基 - 联苯 -2- 基胺

    [1328] 在 0℃下， 历经 30min 向 2′ - 乙氧基 -2- 硝基联苯 -4- 甲腈 (500mg， 1.86mmol) 的 THF(80mL) 溶液加入 BH3.THF 溶液 (5.6mL， 10 ％ wt.THF 溶液， 5.6mmol)。将反应混合物在 0℃下搅拌 3h， 然后在室温下搅拌 15h。 将反应溶液冷却至 0℃， 加入 H2O/THF 混合物 (3mL)。

    [1321] 在室温下搅拌 6h 后， 在减压下除去挥发物。将残余物溶于 EtOAc(100mL)， 用 1NHCl 萃取 (2x100mL)。将水相用 1N NaOH 溶液碱化至 pH 1， 用 EtOAc 萃取 (3x50mL)。合并有机层， 用 水 (50mL) 洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 过滤， 蒸发。在真空下干燥后， 分离 4- 氨甲基 -2′ - 乙氧 基 - 联苯 -2- 基胺， 为褐色的油 (370mg， 82％ )。 1

    [1329] H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ7.28(dt， J ＝ 7.2Hz， J ＝ 1.8Hz， 1H)， 7.09(dd， J＝ 7.2Hz， J ＝ 1.8Hz， 1H)， 7.05(d， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 6.96(dt， J ＝ 7.2Hz， J ＝ 0.9Hz， 1H)， 6.83(d， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 6.66(d， J ＝ 1.2Hz， 1H)， 6.57(dd， J ＝ 7.5Hz， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 4.29(s， 2H)， 4.02(q， J ＝ 6.9Hz， 2H)， 3.60(s， 2H)， 1.21(t， J ＝ 6.9Hz， 3H) ； HPLC 保留时间 + 1.54min， 10-100％ CH3CN， 5min 梯度 ； ESI-MS 243.3m/z(MH ).

    [1330] E-1 ； (2- 氨基 -2′ - 乙氧基 - 联苯 -4- 基甲基 ) 氨基甲酸叔丁基酯

    [1331] 将 Boc2O(123mg， 0.565mmol) 的 1， 4- 二烷 (10mL) 溶液历经 30min 加入到 4- 氨 烷 (10mL) 溶液中。将甲基 -2′ - 乙氧基 - 联苯 -2- 基胺 (274mg， 1.13mmol) 的 1， 4- 二反应混合物在室温下搅拌 16h。 在旋转蒸发器上除去挥发物。 残余物经过快速色谱纯化 ( 硅 1 ∶ 4)， 得到 (2- 氨基 -2′ - 乙氧基 - 联苯 -4- 基甲基 ) 氨基甲酸叔丁 胶， EtOAc-CH2Cl2， 基酯 (E-1)， 为淡黄色油 (119mg， 31％ )。1H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ7.27(m， 2H)， 7.07(dd， J ＝ 7.2Hz， J ＝ 1.8Hz， 1H)， 7.03(d， J ＝ 7.8Hz， 1H)， 6.95(dt， J ＝ 7.2Hz， J ＝ 0.9Hz， 1H)， 6.81(d， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 6.55(s， 1H)， 6.45(dd， J ＝ 7.8Hz， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 4.47(s， 2H)， 4.00(q， J ＝ 7.2Hz， 2H)， 1.38(s， 9H)， 1.20(t， J ＝ 7.2Hz， 3H) ； HPLC 保 留 时 间 2.34min， + 10-100％ CH3CN， 5min 梯度 ； ESI-MS 343.1m/z(MH ).

    [1332] 实施例 22- 溴 -1- 叔丁基 -4- 硝基苯

    [1335] 向 1- 叔丁基 -4- 硝基苯 (8.95g， 50mmol) 与硫酸银 (10g， 32mmol) 的 50mL 90％硫 酸溶液滴加溴 (7.95g， 50mmol)。继续在室温下搅拌过夜， 然后将混合物倒入稀亚硫酸氢钠 溶液中， 用 EtOAc 萃取三次。合并有机层， 用盐水洗涤， 经 MgSO4 干燥。过滤后， 浓缩滤液， 得到 2- 溴 -1- 叔丁基 -4- 硝基苯 (12.7g， 98％ )， 无需进一步纯化即可使用。 1

    [1336] H NMR(400MHz， CDCl3)δ8.47(d， J ＝ 2.5Hz， 1H)， 8.11(dd， J ＝ 8.8， 2.5Hz， 1H)， 7.63(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 1.57(s， 9H) ； HPLC 保留时间 4.05min， 10-100％ CH3CN， 5min 梯度 .

    [1337] 2- 叔丁基 -5- 硝基苄腈

    [1338] 在氮气氛下， 向 2- 溴 -1- 叔丁基 -4- 硝基苯 (2.13g， 8.2mmol) 与 Zn(CN)2(770mg， 6.56mmol) 的 DMF(10mL) 溶液加入 Pd(PPh3)4(474mg， 0.41mmol)。在密封的容器中将混合物 在 205℃下加热 5h。冷却至室温后， 将混合物用水稀释， 用 EtOAc 萃取两次。合并有机层， 用盐水洗涤， 经 MgSO4 干燥。除去溶剂后， 残余物经过柱色谱纯化 (0-10％ EtOAc- 己烷 )， 得到 2- 叔丁基 -5- 硝基苄腈 (1,33g， 80％ )。 1

    [1339] H NMR(400MHz， CDCl3)δ8.55(d， J ＝ 2.3Hz， 1H)， 8.36(dd， J ＝ 8.8， 2.2Hz， 1H)，

    [1334] 7.73(d， J ＝ 8.9Hz， 1H)， 1.60(s， 9H) ； HPLC 保留时间 3.42min， 10-100％ CH3CN， 5min 梯度 .

    [1340] E-2 ； 2- 叔丁基 -5- 氨基苄腈

    [1341] 向回流着的 2- 叔丁基 -5- 硝基苄腈 (816mg， 4.0mmol) 的 EtOH(20mL) 溶液加入甲 酸铵 (816mg， 12.6mmol)， 继之以 10％ Pd-C(570mg)。将反应混合物回流另外 90min， 冷却至 室温， 通过 C 盐过滤。浓缩滤液， 得到 2- 叔丁基 -5- 氨基苄腈 (E-2)(630mg， 91 ％ )， 无需 进一步纯化即可使用。HPLC 保留时间 2.66min， 10-99 ％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS175.2m/ + z(MH ).

    [1342] 实施例 3

    [1343] (2- 叔丁基 -5- 硝基苯基 ) 甲胺

    [1345] 在氮下， 向 2- 叔丁基 -5- 硝基苄腈 (612mg， 3.0mmol) 的 THF(10mL) 溶液加入 BH3. THF 溶液 (12mL， 1M THF 溶液， 12.0mmol)。将反应混合物在 70℃下搅拌过夜， 冷却至 0℃。 加入甲醇 (2mL)， 继之以加入 1N HCl(2mL)。 回流 30min 后， 将溶液用水稀释， 用 EtOAc 萃取。 水层用 1N NaOH 碱化， 用 EtOAc 萃取两次。合并有机层， 用盐水洗涤， 经 MgSO4 干燥。除去 溶剂后， 残余物经过柱色谱纯化 (0-10％ MeOH-CH2Cl2)， 得到 (2- 叔丁基 -5- 硝基苯基 ) 甲 胺 (268mg， 43％ )。 1

    [1346] H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ8.54(d， J ＝ 2.7Hz， 1H)， 7.99(dd， J ＝ 8.8， 2.8Hz， 1H)， 7.58(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 4.03(s， 2H)， 2.00(t， J ＝ 2.1Hz， 2H)， 1.40(s， 9H) ； HPLC 保留时间 + 2.05min， 10-100％ CH3CN， 5min 梯度 ； ESI-MS 209.3m/z(MH ).

    [1347] 叔丁基 2- 叔丁基 -5- 硝基苄基氨基甲酸酯

    [1348] 将 (2- 叔丁基 -5- 硝基苯基 ) 甲胺 (208mg， 1mmol) 与 Boc2O(229mg， 1.05mmol) 的 THF(5mL) 溶液回流 30min。冷却至室温后， 将溶液用水稀释， 用 EtOAc 萃取。合并有机层， 用盐水洗涤， 经 MgSO4 干燥。过滤后， 浓缩滤液， 得到叔丁基 2- 叔丁基 -5- 硝基苄基氨基甲 酸酯 (240mg， 78％ )， 无需进一步纯化即可使用。 1

    [1349] H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ8.26(d， J ＝ 2.3Hz， 1H)， 8.09(dd， J ＝ 8.8， 2.5Hz， 1H)， 7.79(t， J ＝ 5.9Hz， 1H)， 7.68(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 4.52(d， J ＝ 6.0Hz， 2H)， 1.48(s， 18H) ； HPLC 保留时间 3.72min， 10-100％ CH3CN， 5min 梯度 .

    [1350] 梯度 .

    [1351] E-4 ； 叔丁基 2- 叔丁基 -5- 氨基苄基氨基甲酸酯

    [1352] 在氮气氛下， 向叔丁基 2- 叔丁基 -5- 硝基苄基氨基甲酸酯 (20mg， 0.065mmol) 的 5％ AcOH-MeOH(1mL) 溶液加入 10％ Pd-C(14mg)。 将混合物在 H2(1atm) 和室温下搅拌 1h。 通 过 C 盐过滤除去催化剂， 浓缩滤液， 得到叔丁基 2- 叔丁基 -5- 氨基苄基氨基甲酸酯 (E-4)， 无需进一步纯化即可使用。 1

    [1353] H NMR(400MHz， CDCl3)δ7.09(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)， 6.62(d， J ＝ 2.6Hz， 1H)， 6.47(dd， J ＝ 8.5， 2.6Hz， 1H)， 4.61(br s， 1H)， 4.40(d， J ＝ 5.1Hz， 2H)， 4.15(br s， 2H)，

    [1344] 1.39(s， 9H)， 1.29(s， 9H) ； HPLC 保 留 时 间 2.47min， 10-100 ％ CH3CN， 5min 梯 度 ； ESI-MS + 279.3m/z(MH ).

    [1354] 实施例 4

    [1355] 2- 叔丁基 -5- 硝基苯甲酸

    [1357] 将 2- 叔丁基 -5- 硝基苄腈 (204mg， 1mmol) 的 5mL 75％ H2SO4 溶液在 200℃下微波 处理 30min。将反应混合物倒入冰中， 用 EtOAc 萃取， 用盐水洗涤， 经 MgSO4 干燥。过滤后， 浓缩滤液， 得到 2- 叔丁基 -5- 硝基苯甲酸 (200mg， 90％ )， 无需进一步纯化即可使用。 1

    [1358] H NMR(400MHz， CDCl3)δ8.36(d， J ＝ 2.6Hz， 1H)， 8.24(dd， J ＝ 8.9， 2.6Hz， 1H)， 7.72(d， J ＝ 8.9Hz， 1H)1.51(s， 9H) ； HPLC 保留时间 2.97min， 10-100％ CH3CN， 5min 梯度 .

    [1359] 甲基 2- 叔丁基 -5- 硝基苯甲酸酯

    [1360] 向 2- 叔 丁 基 -5- 硝 基 苯 甲 酸 (120mg， 0.53mmol) 与 K2CO3(147mg， 1.1mmol) 在 DMF(5.0mL) 中的混合物加入 CH3I(40μL， 0.64mmol)。将反应混合物在室温下搅拌 10min， 用水稀释， 用 EtOAc 萃取。合并有机层， 用盐水洗涤， 经 MgSO4 干燥。过滤后， 浓缩滤液， 得 到甲基 2- 叔丁基 -5- 硝基苯甲酸酯， 无需进一步纯化即可使用。 1

    [1361] H NMR(400MHz， CDCl3)δ8.20(d， J ＝ 2.6Hz， 1H)， 8.17(t， J ＝ 1.8Hz， 1H)， 7.66(d， J ＝ 8.6Hz， 1H)， 4.11(s， 3H)， 1.43(s， 9H).

    [1362] E-6 ； 甲基 2- 叔丁基 -5- 氨基苯甲酸酯

    [1363] 向回流着的 2- 叔丁基 -5- 硝基苯甲酸酯 (90mg， 0.38mmol) 的 EtOH(2.0mL) 溶液 加入甲酸钾 (400mg， 4.76mmol) 的水 (1mL) 溶液， 继之以加入 20mg 10％ Pd-C。将反应混合 物回流另外 40min， 冷却至室温， 通过 C 盐过滤。浓缩滤液， 得到甲基 2- 叔丁基 -5- 氨基苯 1 甲酸酯 (E-6)(76mg， 95％ )， 无需进一步纯化即可使用。 HNMR(400MHz， CDCl3)δ7.24(d， J ＝ 8.6Hz， 1H)， 6.67(dd， J ＝ 8.6， 2.7Hz， 1H)， 6.60(d， J ＝ 2.7Hz， 1H)， 3.86(s， 3H)， 1.34(s， + 9H) ； HPLC 保留时间 2.19min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 208.2m/z(MH ).

    [1364] 实施例 5

    [1356] 2- 叔丁基 -5- 硝基苯 -1- 磺酰氯

    [1367] 将 2- 叔丁基 -5- 硝基苯胺 (0.971g， 5mmol) 的浓 HCl(5mL) 悬液冷却至 5-10 ℃， 滴加 NaNO2(0.433g， 6.3mmol) 的 H2O(0.83mL) 溶液。继续搅拌 0.5h， 然后真空过滤混合 物。在 3-5℃下将滤液与 Na2SO3(1.57g， 12.4mmol) 的 H2O(2.7mL) 溶液同时加入到搅拌着的 CuSO4(0.190g， 0.76mmol) 与 Na2SO3(1.57g， 12.4mmol) 的 HCl(11.7mL) 与 H2O(2.7mL) 溶 液 中。继续搅拌 0.5h， 滤出所得沉淀， 用水洗涤， 干燥， 得到 2- 叔丁基 -5- 硝基苯 -1- 磺酰氯 (0.235g， 17％ )。 1

    [1368] H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ9.13(d， J ＝ 2.5Hz， 1H)， 8.36(dd， J ＝ 8.9， 2.5Hz， 1H)， 7.88(d， J ＝ 8.9Hz， 1H)， 1.59(s， 9H).

    [1369] 2- 叔丁基 -5- 硝基苯 -1- 磺酰胺

    [1370] 在 0 ℃下， 向 2- 叔丁基 -5- 硝基苯 -1- 磺酰氯 (100mg， 0.36mmol) 的醚 (2mL) 溶 液加入含水 NH4OH(128μL， 3.6mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜， 用水稀释， 用醚萃取。 合并醚萃取液， 用盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥。除去溶剂后， 残余物经过柱色谱纯化 (0-50％ EtOAc- 己烷 )， 得到 2- 叔丁基 -5- 硝基苯 -1- 磺酰胺 (31.6mg， 34％ )。

    [1371] E-7 ； 2- 叔丁基 -5- 氨基苯 -1- 磺酰胺

    [1372] 将 2- 叔 丁 基 -5- 硝 基 苯 -1- 磺 酰 胺 (32mg， 0.12mmol) 与 SnCl2·2H2O(138mg， 0.61mmol) 的 EtOH(1.5mL) 溶液在 100℃微波炉中加热 30min。 将混合物用 EtOAc 和水稀释， 用 sat.NaHCO3 碱化， 通过 C 盐过滤。从水中分离有机层， 经 Na2SO4 干燥。蒸发除去溶剂， 得 到 2- 叔丁基 -5- 氨基苯 -1- 磺酰胺 (E-7)(28mg， 100％ )， 无需进一步纯化即可使用。HPLC 保留时间 1.99min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 229.3m/z(MH+).

    [1373] 实施例 6

    [1374] E-8 ； (2- 叔丁基 -5- 氨基苯基 ) 甲醇

    [1376] 在 0℃下， 向甲基 2- 叔丁基 -5- 氨基苯甲酸酯 (159mg， 0.72mmol) 的 THF(5mL) 溶 液滴加 LiAlH4(1.4mL， 1M THF 溶液， 1.4mmol)。将反应混合物回流 2h， 用 H2O 稀释， 用 EtOAc 萃取。合并有机层， 用盐水洗涤， 经 MgSO4 干燥。过滤后， 浓缩滤液， 得到 (2- 叔丁基 -5- 氨 基苯基 ) 甲醇 (E-8)(25mg， 20％ )， 无需进一步纯化即可使用。 1

    [1377] H NMR(400MHz， CDCl3)δ7.17(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)， 6.87(d， J ＝ 2.6Hz， 1H)， 6.56(dd， J ＝ 8.4， 2.7Hz， 1H)， 4.83(s， 2H)， 1.36(s， 9H).

    [1378] 实施例 7

    [1375] 1- 甲基 - 吡啶一甲基硫酸盐将硫酸甲酯 (30mL， 39.8g， 0.315mol) 滴加到无水吡啶 (25.0g， 0.316mol) 中。将 混合物在室温下搅拌 10min， 然后在 100℃下搅拌 2h。 将混合物冷却至室温， 得到粗的 1- 甲 基 - 吡啶

    [1382] 一甲基硫酸盐 (64.7g， quant.)， 无需进一步纯化即可使用。 1- 甲基 -2- 吡啶酮 将 1- 甲基 - 吡啶 一甲基硫酸盐 (50g， 0.243mol) 的水 (54mL) 溶液冷却至 0℃。 一甲基硫酸盐溶液分别制备铁氰化钾 (160g， 0.486mol) 的水 (320mL) 溶液和氢氧化钠 (40g， 1.000mol) 的水 (67mL) 溶液， 从两支分液漏斗中滴加到充分搅拌着的 1- 甲基 - 吡啶 中， 加入速率使反应混合物的温度没有上升至 10℃以上。调节这两种溶液的加入速率， 以 便当加入一半铁氰化钾溶液时已经加入全部氢氧化钠溶液。加入完全后， 使反应混合物升 温至室温， 搅拌过夜。加入干燥碳酸钠 (91.6g)， 将混合物搅拌 10min。分离有机层， 水层用 干燥， 浓缩， 得到 1- 甲基 -2- 吡啶酮 (25.0g， 94％ )， CH2Cl2 萃取 (100mLx3)。合并有机层， 无需进一步纯化即可使用。

    [1384] 1- 甲基 -3， 5- 二硝基 -2- 吡啶酮

    [1385] 在 0℃下， 将 1- 甲基 -2- 吡啶酮 (25.0g， 0.229mol) 加入到硫酸 (500mL) 中。搅拌 5min 后， 在 0℃下滴加硝酸 (200mL)。加入后， 将反应混合物缓慢升至 100℃， 然后维持 5h。 将反应混合物倒入冰中， 用碳酸钾碱化至 pH 8， 用 CH2Cl2 萃取 (100mLx3)。合并有机层， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到 1- 甲基 -3， 5- 二硝基 -2- 吡啶酮 (12.5g， 28％ )， 无需进一步纯化 即可使用。

    [1386] 2- 异丙基 -5- 硝基 - 吡啶

    [1387] 向 1- 甲基 -3， 5- 二硝基 -2- 吡啶酮 (8.0g， 40mmol) 的甲醇 (20mL) 溶液滴加 3- 甲 基 -2- 丁酮 (5.1mL， 48mmol)， 继之以氨的甲醇溶液 (10.0g， 17％， 100mmol)。将反应混合物 在 70℃和大气压下加热 2.5h。在真空下除去溶剂， 将残余的油溶于 CH2Cl2， 然后过滤。将 滤液经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到 2- 异丙基 -5- 硝基 - 吡啶 (1.88g， 28％ )。

    [1388] E-9 ； 2- 异丙基 -5- 氨基 - 吡啶

    [1389] 将 2- 异丙基 -5- 硝基 - 吡啶 (1.30g， 7.82mmol) 溶于甲醇 (20mL)， 加入阮内镍 (0.25g)。将混合物在 H2(1atm) 和室温下搅拌 2h。滤出催化剂， 在真空下浓缩滤液， 得到 1 2- 异丙基 -5- 氨基 - 吡啶 (E-9)(0.55g， 52％ )。H NMR(CDCl3)δ8.05(s， 1H)， 6.93-6.99(m， 2H)， 3.47(br s， 2H)， 2.92-3.02(m， 1H)， 1.24-1.26(m， 6H).ESI-MS 137.2m/z(MH+).

    [1390] 实施例 8

    [1392] 磷酸 2， 4- 二 - 叔丁基 - 苯基酯二乙基酯

    [1394] 在 0℃下， 向 NaH(60％矿物油分散体， 6.99g， 174.7mmol) 的 THF(350mL) 悬液滴加 到 2， 4- 二 - 叔丁基苯酚 (35g， 169.6mmol) 的 THF(150mL) 溶液中。将混合物在 0℃下搅拌 15min， 然后在 0℃下滴加氯代磷酸二乙酯 (30.15g， 174.7mmol)。加入后， 将混合物在该温 度下搅拌 15min。 用 sat.NH4Cl(300mL) 淬灭反应。 分离有机层， 水相用 Et2O 萃取 (350mLx2)。 合并有机层， 用盐水洗涤， 经无水 Na2SO4 干燥， 在真空下浓缩， 得到粗的磷酸 2， 4- 二 - 叔丁 基 - 苯基酯二乙基酯， 为黄色的油 (51g， 被一些矿物油污染 )， 直接用于下一步。

    [1395] 1， 3- 二 - 叔丁基 - 苯

    [1396] 在 -78℃和 N2 气氛下， 向 NH3( 液体， 250mL) 加入磷酸 2， 4- 二 - 叔丁基 - 苯基酯二 乙基酯 (51g， 来自上步的粗产物， 约 0.2mol) 的 Et2O( 无水， 150mL) 溶液。向溶液加入小片 锂金属， 直至持续为蓝色。将反应混合物在 -78℃下搅拌 15min， 然后用饱和 NH4Cl 溶液淬 灭， 直至混合物变为无色。蒸发液体 NH3， 将残余物溶于水， 用 Et2O 萃取 (300mLx2)。合并有 机相， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到粗的 1， 3- 二 - 叔丁基 - 苯， 为黄色的油 (30.4g， 2 步收率 94％， 被一些矿物油污染 )， 直接用于下一步。

    [1397] 2， 4- 二 - 叔丁基 - 苯甲醛和 3， 5- 二 - 叔丁基 - 苯甲醛

    [1398] 在 0 ℃ 下，向 搅 拌 着 的 1， 3- 二 - 叔 丁 基 - 苯 (30g， 157.6mmol) 的 无

    [1393] 水 CH2Cl2(700mL) 溶 液 加 入 TiCl4(37.5g， 197mmol)，继 之 以 滴 加 MeOCHCl2(27.3g， 236.4mmol)。使反应升温至室温， 搅拌 1h。将混合物倒入冰水中， 用 CH2Cl2 萃取。合并有 机相， 用 NaHCO3 和盐水洗涤， 经硫酸钠干燥， 浓缩。残余物经过柱色谱纯化 ( 石油醚 )， 得到 2， 4- 二 - 叔丁基 - 苯甲醛与 3， 5- 二 - 叔丁基 - 苯甲醛的混合物 (21g， 61％ )。

    [1399] 2， 4- 二 - 叔丁基 -5- 硝基 - 苯甲醛和 3， 5- 二 - 叔丁基 -2- 硝基 - 苯甲醛

    [1400] 在 0℃下， 向 2， 4- 二 - 叔丁基 - 苯甲醛与 3， 5- 二 - 叔丁基 - 苯甲醛在 H2SO4(250mL) 中的混合物逐份加入 KNO3(7.64g， 75.6mmol)。 将反应混合物在该温度下搅拌 20min， 然后倒 入碎冰中。将混合物用 NaOH 溶液碱化至 pH 8， 用 Et2O 萃取 (10mLx3)。合并有机层， 用水和 盐水洗涤， 浓缩。残余物经过柱色谱纯化 ( 石油醚 )， 得到 2， 4- 二 - 叔丁基 -5- 硝基 - 苯甲 醛与 3， 5- 二 - 叔丁基 -2- 硝基 - 苯甲醛的混合物 (2 ∶ 1， NMR)， 为黄色固体 (14.7g， 82％ )。 进一步经过柱色谱纯化 ( 石油醚 ) 后， 分离 2， 4- 二 - 叔丁基 -5- 硝基苯甲醛 (2.5g， 含有 10％ 3， 5- 二 - 叔丁基 -2- 硝基 - 苯甲醛 )。

    [1401] 1， 5- 二 - 叔丁基 -2- 二氟甲基 -4- 硝基 - 苯和 1， 5- 二 - 叔丁基 -3- 二氟甲基 -2- 硝 基-苯

    [1402] 将 2， 4- 二 - 叔丁基 -5- 硝基 - 苯甲醛 (2.4g， 9.11mmol， 被 10 ％ 3， 5- 二 - 叔丁 基 -2- 硝基 - 苯甲醛污染 ) 的净 deoxofluor 溶液在室温下搅拌 5h。将反应混合物倒入冷 用二氯甲烷萃取。合并有机层， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 经过柱色谱 却的饱和 NaHCO3 溶液中， 纯化 ( 石油醚 )， 得到 1， 5- 二 - 叔丁基 -2- 二氟甲基 -4- 硝基 - 苯 (1.5g) 和 1， 5- 二 - 叔 丁基 -2- 二氟甲基 -4- 硝基 - 苯与 1， 5- 二 - 叔丁基 -3- 二氟甲基 -2- 硝基 - 苯的混合物 (0.75g， 含有 28％ 1， 5- 二 - 叔丁基 -3- 二氟甲基 -2- 硝基 - 苯 )。

    [1403] E-10 ； 1， 5- 二 - 叔丁基 -2- 二氟甲基 -4- 氨基 - 苯

    [1404] 向铁粉 (5.1g， 91.1mmol) 的 50％乙酸 (25mL) 悬液加入 1， 5- 二 - 叔丁基 -2- 二氟 甲基 -4- 硝基 - 苯 (1.3g， 4.56mmol)。 将反应混合物在 115℃下加热 15min。 滤出固体， 用乙 酸和 CH2Cl2 洗涤。 合并滤液， 浓缩， 用 HCl/MeOH 处理。 过滤收集沉淀， 用 MeOH 洗涤， 干燥， 得 到 1， 5- 二 - 叔丁基 -2- 二氟甲基 -4- 氨基 - 苯 HCl 盐 (E-10)， 为白色固体 (1.20g， 90％ )。 1 H NMR(DMSO-d6)δ7.35-7.70(t， J ＝ 53.7Hz， 1H)， 7.56(s， 1H)， 7.41(s， 1H)， 1.33-1.36(d， + J ＝ 8.1Hz， 1H) ； ESI-MS 256.3m/z(MH ).

    [1405] 实施例 9

    [1406] 一般流程 ：

    [1407] A)Pd(PPh3)4， K2CO3， H2O， THF ； B)Pd2(dba)3， P(tBu)3， KF， THF

    [1409] 方法 A

    [1410] 在 2 英 钱 小 瓶 中， 将 2- 溴 苯 胺 (100mg， 0.58mmol) 和 相 应 的 芳 基 代 硼 酸 (0.82mmol) 溶 于 THF(1mL)。 加 入 H2O(500μL)，继 之 以 K2CO3(200mg， 1.0mmol) 和 Pd(PPh3)4(100mg， 0.1mmol)。将小瓶用氩净化， 密封。然后将小瓶在 75℃下加热 18h。将粗

    [1408] 样品稀释在 EtOAc 中， 通过硅胶塞过滤。经由 Savant Speed-vac 浓缩有机层。粗胺无需进 一步纯化即可使用。

    [1411] 方法 B

    [1412] 在 2 英 钱 小 瓶 中， 加 入 相 应 的 芳 基 代 硼 酸 (0.58mmol)， 继 之 以 KF(110mg， 1.9mmol)。将固体悬浮在 THF(2mL) 中， 然后加入 2- 溴苯胺 (70μL， 0.58mmol)。将小瓶用 t 氩净化 1min。 加入 P( Bu)3(100μL， 10％己烷溶液 )， 继之以 Pd2(dba)3(900μL， 0.005M THF 溶液 )。将小瓶再次用氩净化， 密封。在室温下将小瓶在轨道振荡器上搅拌 30min， 在 80℃ 下在加热模块上加热 16h。然后将小瓶冷却至 20℃， 使悬液穿过 C 盐垫。用 EtOAc(5mL) 洗 涤滤垫。合并有机层， 在真空下浓缩， 得到粗胺， 无需进一步纯化即可使用。

    [1413] 下表包括按照上述一般流程制备的胺。

    [1414] 产物 F-1 F-2 F-3 F-4 F-5 F-6 F-7 F-8 F-9 F-10 F-11 F-12 F-13 F-14名称 4′ - 甲基 - 联苯 -2- 基胺 3′ - 甲基 - 联苯 -2- 基胺 2′ - 甲基 - 联苯 -2- 基胺 2′， 3′ - 二甲基 - 联苯 -2- 基胺 (2′ - 氨基 - 联苯 -4- 基 )- 甲醇 N*4′ *， N*4′ *- 二甲基 - 联苯 -2， 4′ - 二胺 2′ - 三氟甲基 - 联苯 -2- 基胺 (2′ - 氨基 - 联苯 -4- 基 )- 乙腈 4′ - 异丁基 - 联苯 -2- 基胺 3′ - 三氟甲基 - 联苯 -2- 基胺 2- 吡啶 -4- 基 - 苯基胺 2-(1H- 吲哚 -5- 基 )- 苯基胺 3′， 4′ - 二甲基 - 联苯 -2- 基胺 4′ - 异丙基 - 联苯 -2- 基胺方法 A A A A A B B A A B BA A178CN 101935301 A说明书A B B B B B B B B B B B B B B B B B B B B144/218 页F-15 F-16 F-17 F-18 F-19 F-20 F-21 F-22 F-23 F-24 F-25 F-26 F-27 F-28 F-29 F-30 F-31 F-32 F-33 F-34 F-353′ - 异丙基 - 联苯 -2- 基胺 4′ - 三氟甲基 - 联苯 -2- 基胺 4′ - 甲氧基 - 联苯 -2- 基胺 3′ - 甲氧基 - 联苯 -2- 基胺 2- 苯并 [1， 3] 二氧杂环戊烯 -5- 基 - 苯基胺 3′ - 乙氧基 - 联苯 -2- 基胺 4′ - 乙氧基 - 联苯 -2- 基胺 2′ - 乙氧基 - 联苯 -2- 基胺 4′ - 甲硫基 - 联苯 -2- 基胺 3′， 4′ - 二甲氧基 - 联苯 -2- 基胺 2′， 6′ - 二甲氧基 - 联苯 -2- 基胺 2′， 5′ - 二甲氧基 - 联苯 -2- 基胺 2′， 4′ - 二甲氧基 - 联苯 -2- 基胺 5′ - 氯 -2′ - 甲氧基 - 联苯 -2- 基胺 4′ - 三氟甲氧基 - 联苯 -2- 基胺 3′ - 三氟甲氧基 - 联苯 -2- 基胺 4′ - 苯氧基 - 联苯 -2- 基胺 2′ - 氟 -3′ - 甲氧基 - 联苯 -2- 基胺 2′ - 苯氧基 - 联苯 -2- 基胺 2-(2， 4- 二甲氧基 - 嘧啶 -5- 基 )- 苯基胺 5′ - 异丙基 -2′ - 甲氧基 - 联苯 -2- 基胺179CN 101935301 A说明书B B B B B B B B B B B B B B B B B B B B B145/218 页F-36 F-37 F-38 F-39 F-40 F-41 F-42 F-43 F-44 F-45 F-46 F-47 F-48 F-49 F-50 F-51 F-52 F-53 F-54 F-55 F-562′ - 三氟甲氧基 - 联苯 -2- 基胺 4′ - 氟 - 联苯 -2- 基胺 3′ - 氟 - 联苯 -2- 基胺 2′ - 氟 - 联苯 -2- 基胺 2′ - 氨基 - 联苯 -3- 甲腈 4′ - 氟 -3′ - 甲基 - 联苯 -2- 基胺 4′ - 氯 - 联苯 -2- 基胺 3′ - 氯 - 联苯 -2- 基胺 3′， 5′ - 二氟 - 联苯 -2- 基胺 2′， 3′ - 二氟 - 联苯 -2- 基胺 3′， 4′ - 二氟 - 联苯 -2- 基胺 2′， 4′ - 二氟 - 联苯 -2- 基胺 2′， 5′ - 二氟 - 联苯 -2- 基胺 3′ - 氯 -4′ - 氟 - 联苯 -2- 基胺 3′， 5′ - 二氯 - 联苯 -2- 基胺 2′， 5′ - 二氯 - 联苯 -2- 基胺 2′， 3′ - 二氯 - 联苯 -2- 基胺 3′， 4′ - 二氯 - 联苯 -2- 基胺 2′ - 氨基 - 联苯 -4- 羧酸甲基酯 2′ - 氨基 - 联苯 -3- 羧酸甲基酯 2′ - 甲硫基 - 联苯 -2- 基胺180CN 101935301 A说明书B B B B B B B B B B B B146/218 页F-57 F-58 F-59 F-60 F-61 F-62 F-63 F-64 F-65 F-66 F-67 F-68

    [1415] N-(2′ - 氨基 - 联苯 -3- 基 )- 乙酰胺 4′ - 甲亚磺酰基 - 联苯 -2- 基胺 2′， 4′ - 二氯 - 联苯 -2- 基胺 4′ - 甲磺酰基 - 联苯 -2- 基胺 2′ - 氨基 - 联苯 -2- 羧酸异丙基酯 2- 呋喃 -2- 基 - 苯基胺 1-[5-(2- 氨基 - 苯基 )- 噻吩 -2- 基 ]- 乙酮 2- 苯并 [b] 噻吩 -2- 基 - 苯基胺 2- 苯并 [b] 噻吩 -3- 基 - 苯基胺 2- 呋喃 -3- 基 - 苯基胺 2-(4- 甲基 - 噻吩 -2- 基 )- 苯基胺 5-(2- 氨基 - 苯基 )- 噻吩 -2- 甲腈实施例 10乙基 2-(4- 硝基苯基 )-2- 甲基丙酸酯

    [1419] 在 0℃下， 将叔丁醇钠 (466mg， 4.85mmol) 加入到 DMF(20mL) 中。将浑浊的溶液重 新冷却至 5℃。加入乙基 4- 硝基苯基乙酸酯 (1.0g， 4.78mmol)。将紫色浆液冷却至 5℃， 历 经 40min 滴加甲基碘 (0.688mL， 4.85mmol)。将混合物在 5-10℃下搅拌 20min， 然后重新装 入叔丁醇钠 (466mg， 4.85mmol) 和甲基碘 (0.699mL， 4.85mmol)。将混合物在 5-10℃下搅拌 20min， 第三次装入叔丁醇钠 (47mg， 0.48mmol)， 继之以甲基碘 (0.057mL， 0.9mmol)。加入乙 酸乙酯 (100mL) 和 HCl(0.1N， 50mL)。分离有机层， 用盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥。过滤后， 浓 缩滤液， 得到乙基 2-(4- 硝基苯基 )-2- 甲基丙酸酯 (900mg， 80％ )， 无需进一步纯化即可使 用。

    [1420] G-1 ； 乙基 2-(4- 氨基苯基 )-2- 甲基丙酸酯

    [1418] 将乙基 2-(4- 硝基苯基 )-2- 甲基丙酸酯 (900mg， 3.8mmol) 的 EtOH(10mL) 溶液 用 10 ％ Pd-C(80mg) 处 理， 加 热 至 45 ℃。 历 经 15min 加 入 甲 酸 钾 (4.10g， 48.8mmol) 的 H2O(11mL) 溶液。将反应混合物在 65℃下搅拌 2h， 然后用另外 300mg Pd/C 处理。将反应搅 拌 1.5h， 然后通过 C 盐过滤。在减压下减少溶剂体积大约 50％， 用 EtOAc 萃取。有机层经 Na2SO4 干燥， 在减压下除去溶剂， 得到乙基 2-(4- 氨基苯基 )-2- 甲基丙酸酯 (G-1)(670mg， 85％ )。 1

    [1422] H NMR(400MHz， CDCl3)δ7.14(d， J ＝ 8.5Hz， 2H)， 6.65(d， J ＝ 8.6Hz， 2H)， 4.10(q， J ＝ 7.1Hz， 2H)， 1.53(s， 6H)， 1.18(t， J ＝ 7.1Hz， 3H).

    [1423] 实施例 11

    [1424] G-2 ； 2-(4- 氨基苯基 )-2- 甲基丙烷 -1- 醇

    [1426] 在 0℃下， 将乙基 2-(4- 氨基苯基 )-2- 甲基丙酸酯 (30mg， 0.145mmol) 的 THF(1mL) 溶液用 LiAlH4(1M THF 溶液， 0.226mL， 0.226mmol) 处理， 搅拌 15min。 将反应用 0.1N NaOH 处 理， 用 EtOAc 萃取， 有机层经 Na2SO4 干燥。在减压下除去溶剂， 得到 2-(4- 氨基苯基 )-2- 甲 基丙烷 -1- 醇 (G-2)， 无需进一步纯化即可使用 ： 1

    [1427] H NMR(400MHz， CDCl3)δ7.17(d， J ＝ 8.5Hz， 2H)， 6.67(d， J ＝ 8.5Hz， 2H)， 3.53(s， 2H)， 1.28(s， 6H).

    [1428] 实施例 12

    [1425] 2- 甲基 -2-(4- 硝基苯基 ) 丙腈

    [1431] 在 0 ℃下， 将叔丁醇钠 (662mg， 6.47mmol) 的 DMF(20mL) 悬液用 4- 硝基苯基乙腈 (1000mg， 6.18mmol) 处理， 搅拌 10min。历经 15min 滴加甲基碘 (400μL， 6.47mmol)。将 溶液在 0-10℃下搅拌 15min， 然后在室温下搅拌另外 15min。向该紫色溶液加入叔丁醇钠 (662mg， 6.47mmol)， 将溶液搅拌 15min。历经 15min 滴加甲基碘 (400μL， 6.47mmol)， 将溶 液搅拌过夜。加入叔丁醇钠 (192mg， 1.94mmol)， 将反应在 0℃下搅拌 10 分钟。加入甲基碘 (186μL， 2.98mmol)， 将反应搅拌 1h。然后使反应混合物在 1N HCl(50mL) 与 EtOAc(75mL) 之间分配。将有机层用 1N HCl 和盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 浓缩， 得到 2- 甲基 -2-(4- 硝基

    [1430] 苯基 ) 丙腈， 为绿色蜡状固体 (1.25g， 99％ )。1H NMR(400MHz， CDCl3)δ8.24(d， J ＝ 8.9Hz， 2H)， 7.66(d， J ＝ 8.9Hz， 2H)， 1.77(s， 6H).

    [1432] 2- 甲基 -2-(4- 硝基苯基 ) 丙烷 -1- 胺

    [1433] 在 0 ℃ 下， 向 冷 却 的 2- 甲 基 -2-(4- 硝 基 苯 基 ) 丙 腈 (670mg， 3.5mmol) 的 THF(15mL) 溶液滴加 BH3(1M THF 溶液， 14mL， 14mmol)。将混合物升温至室温， 在 70℃下加 热 2h。加入 1N HCl 溶液 (2mL)， 继之以加入 NaOH 直至 pH ＞ 7。混合物用醚萃取， 浓缩醚 萃取液， 得到 2- 甲基 -2-(4- 硝基苯基 ) 丙烷 -1- 胺 (610mg， 90％ )， 无需进一步纯化即可 1 使用。 H NMR(400MHz， CDCl3)δ8.20(d， J ＝ 9.0Hz， 2H)， 7.54(d， J ＝ 9.0Hz， 2H)， 2.89(s， 2H)， 1.38(s， 6H).

    [1434] 叔丁基 2- 甲基 -2-(4- 硝基苯基 ) 丙基氨基甲酸酯

    [1435] 在 0℃下， 向冷却的 2- 甲基 -2-(4- 硝基苯基 ) 丙烷 -1- 胺 (600mg， 3.1mmol) 与 1N NaOH(3mL， 3mmol) 的 1， 4- 二 烷 (6mL) 与水 (3mL) 溶液加入 Boc2O(742mg， 3.4mmol)。 使反 然后用乙酸乙酯萃取。 将有 应升温至室温， 搅拌过夜。 将反应用 5％ KHSO4 溶液调节至碱性， 机层经 MgSO4 干燥， 浓缩， 得到叔丁基 2- 甲基 -2-(4- 硝基苯基 ) 丙基氨基甲酸酯 (725mg， 80％ )， 无需进一步纯化即可使用。 1

    [1436] HNMR(400MHz， CDCl3)δ8.11(d， J ＝ 8.9Hz， 2H)， 7.46(d， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 3.63(s， 2H)， 1.31-1.29(m， 15H).

    [1437] G-3 ； 叔丁基 2- 甲基 -2-(4- 氨基苯基 ) 丙基氨基甲酸酯

    [1438] 向回流着的叔丁基 2- 甲基 -2-(4- 硝基苯基 ) 丙基氨基甲酸酯 (725mg， 2.5mmol) 与甲酸铵 (700mg， 10.9mmol) 的 EtOH(25mL) 溶液加入 5％ wt 披钯碳 (400mg)。将混合物回 流 1h， 冷却， 通过 C 盐过滤。浓缩滤液， 得到叔丁基 2- 甲基 -2-(4- 氨基苯基 ) 丙基氨基甲 酸酯 (G-3)(550mg， 83％ )， 无需进一步纯化即可使用。 1

    [1439] H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ6.99(d， J ＝ 8.5Hz， 2H)， 6.49(d， J ＝ 8.6Hz， 2H)， 4.85(s， 2H)， 3.01(d， J ＝ 6.3Hz， 2H)， 1.36(s， 9H)， 1.12(s， 6H) ； HPLC 保 留 时 间 2.02min， + 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 265.2m/z(MH ).

    [1440] 实施例 13

    [1441] 7- 硝基 -1， 2， 3， 4- 四氢 - 萘 -1- 醇

    [1443] 将 7- 硝基 -3， 4- 二氢 -2H- 萘 -1- 酮 (200mg， 1.05mmol) 溶于甲醇 (5mL)， 逐份加入 NaBH4(78mg， 2.05mmol)。将反应在室温下搅拌 20min， 然后浓缩， 经过柱色谱纯化 (10-50％ 乙酸乙酯 - 己烷 )， 得到 7- 硝基 -1， 2， 3， 4- 四氢 - 萘 -1- 醇 (163mg， 80％ )。 1

    [1444] HNMR(400MHz， CD3CN)δ8.30(d， J ＝ 2.3Hz， 1H)， 8.02(dd， J ＝ 8.5， 2.5Hz， 1H)， 7.33(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)， 4.76(t， J ＝ 5.5Hz， 1H)， 2.96-2.80(m， 2H)， 2.10-1.99(m， 2H)， 1.86-1.77(m， 2H) ； HPLC 保留时间 2.32min， 10-99％ CH 3CN， 5min run.

    [1442] H-1 ； 7- 氨基 -1， 2， 3， 4- 四氢 - 萘 -1- 醇

    [1446] 将 7- 硝基 -1， 2， 3， 4- 四氢 - 萘 -1- 醇 (142mg， 0.73mmol) 溶于甲醇 (10mL)， 烧瓶 用 N2(g) 冲洗。加入 10％ Pd-C(10mg)， 将反应在 H2(1atm) 和室温下搅拌过夜。过滤反应， 浓缩滤液， 得到 7- 氨基 -1， 2， 3， 4- 四氢 - 萘 -1- 醇 (H-1)(113mg， 95 ％ )。HPLC 保留时间 + 0.58min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 164.5m/z(MH ).

    [1447] 实施例 14

    [1448] 7- 硝基 -3， 4- 二氢 -2H- 萘 -1- 酮肟

    [1450] 向 7- 硝 基 -3， 4- 二 氢 -2H- 萘 -1- 酮 (500mg， 2.62mmol) 的 吡 啶 (2mL) 溶 液 加 入羟胺溶液 (1mL， ～ 50％水溶液 )。将反应在室温下搅拌 1h， 然后浓缩， 经过柱色谱纯化 (10-50％乙酸乙酯 - 己烷 )， 得到 7- 硝基 -3， 4- 二氢 -2H- 萘 -1- 酮肟 (471mg， 88％ )。 HPLC + 保留时间 2.67min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 207.1m/z(MH ).

    [1451] 1， 2， 3， 4- 四氢 - 萘 -1， 7- 二胺

    [1452] 将 7- 硝基 -3， 4- 二氢 -2H- 萘 -1- 酮肟 (274mg， 1.33mmol) 溶于甲醇 (10mL)， 烧瓶 用 N2(g) 净化。加入 10％ Pd-C(50mg)， 将反应在 H2(1atm) 和室温下搅拌过夜。过滤反应， 浓缩滤液， 得到 1， 2， 3， 4- 四氢 - 萘 -1， 7- 二胺 (207mg， 96％ )。 1

    [1453] H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ6.61-6.57(m， 2H)， 6.28(dd， J ＝ 8.0， 2.4Hz， 1H)， 4.62(s， 2H)， 3.58(m， 1H)， 2.48-2.44(m， 2H)， 1.78-1.70(m， 2H)， 1.53-1.37(m， 2H).

    [1454] H-2 ； (7- 氨基 -1， 2， 3， 4- 四氢 - 萘 -1- 基 )- 氨基甲酸叔丁基酯

    [1455] 向 冷 却 至 0 ℃ 的、 1， 2， 3， 4- 四 氢 - 萘 -1， 7- 二 胺 (154mg， 0.95mmol) 与 三 乙 胺 (139μL， 1.0mmol) 的甲醇 (2mL) 溶液加入二碳酸二叔丁酯 (207mg， 0.95mmol)。将反应在 0℃下搅拌， 然后浓缩， 经过柱色谱纯化 (5-50％甲醇 - 二氯甲烷 )， 得到 (7- 氨基 -1， 2， 3， 4- 四氢 - 萘 -1- 基 )- 氨基甲酸叔丁基酯 (H-2)(327mg， quant.).HPLC 保留时间 1.95min， + 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 263.1m/z(MH ).

    [1456] 实施例 15

    [1449] N-(2- 溴 - 苄基 )-2， 2， 2- 三氟 - 乙酰胺

    [1459] 在氮气氛下， 向 2- 溴苄基胺 (1.3mL， 10.8mmol) 的甲醇 (5mL) 溶液加入三氟乙酸 乙酯 (1.54mL， 21.6mmol) 和三乙胺 (1.4mL， 10.8mmol)。 将反应在室温下搅拌 1h。 然后在真 空下浓缩反应混合物， 得到 N-(2- 溴 - 苄基 )-2， 2， 2- 三氟 - 乙酰胺 (3.15g， quant.)。HPLC + 保留时间 2.86min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 283.9m/z(MH ).

    [1460] I-1 ； N-(4′ - 氨基 - 联苯 -2- 基甲基 )-2， 2， 2- 三氟 - 乙酰胺

    [1461] 将 N-(2- 溴 - 苄基 )-2， 2， 2- 三氟 - 乙酰胺 (282mg， 1.0mmol)、 4-(4， 4， 5， 5- 四甲 基 -1， 3， 2- 二氧硼杂环戊烷 -2- 基 ) 苯胺 (284mg， 1.3mmol)、 Pd(OAc)2(20mg， 0.09mmol) 与 PS-PPh3(40mg， 3mmol/g， 0.12mmol) 溶于 DMF(5mL)， 加入 4M K2CO3 溶液 (0.5mL)。将反应在 80℃下加热过夜。将混合物过滤， 浓缩， 经过柱色谱纯化 (0-50％乙酸乙酯 - 己烷 )， 得到 N-(4′ - 氨基 - 联苯 -2- 基甲基 )-2， 2， 2- 三氟 - 乙酰胺 (I-1)(143mg， 49％ )。HPLC 保留 + 5min run ； ESI-MS 295.5m/z(MH ). 时间 1.90min， 10-99％ CH3CN，

    [1462] 商业上可获得的胺

    [1458] 胺 J-1 J-2 J-3 J-4 J-5 J-6 J-7 J-8 J-9 J-10名称 2- 甲氧基 -5- 甲基苯胺 2， 6- 二异丙基苯胺 吡啶 -2- 胺 4- 戊基苯胺 异喹啉 -3- 胺 苯胺 4- 苯氧基苯胺 2-(2， 3- 二甲基苯氧基 ) 吡啶 -3- 胺 4- 乙炔基苯胺 2- 仲丁基苯胺J-11 J-12 J-13 J-14 J-15 J-16 J-17 J-18 J-19 J-20 J-21 J-22 J-23 J-24 J-25 J-26 J-27 J-28 J-29 J-30 J-312- 氨基 -4， 5- 二甲氧基苄腈 2- 叔丁基苯胺 1-(7- 氨基 -3， 4- 二氢异喹啉 -2(1H)- 基 ) 乙酮 4-(4- 甲基 -4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 ) 苯胺 2′ - 氨甲基 - 联苯 -4- 基胺 1H- 吲唑 -6- 基胺 2-(2- 甲氧基苯氧基 )-5-( 三氟甲基 ) 苯胺 2- 叔丁基苯胺 2， 4， 6- 三甲基苯胺 5， 6- 二甲基 -1H- 苯并 [d] 咪唑 -2- 胺 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -4- 胺 2- 仲丁基 -6- 乙基苯胺 喹啉 -5- 胺 4-( 苄氧基 ) 苯胺 2′ - 甲氧基 - 联苯 -2- 基胺 苯并 [c][1， 2， 5] 噻二唑 -4- 胺 3- 苄基苯胺 4- 异丙基苯胺 2-( 苯磺酰基 ) 苯胺 2- 甲氧基苯胺 4- 氨基 -3- 乙基苄腈J-32 J-33 J-34 J-35 J-36 J-37 J-38 J-39 J-40 J-41 J-42 J-43 J-44 J-45 J-46 J-47 J-48 J-49 J-50 J-51 J-524- 甲基吡啶 -2- 胺 4- 氯苯胺 2-( 苄氧基 ) 苯胺 2- 氨基 -6- 氯苄腈 3- 甲基吡啶 -2- 胺 4- 氨基苄腈 3- 氯 -2， 6- 二乙基苯胺 3- 苯氧基苯胺 2- 苄基苯胺 2-(2- 氟苯氧基 ) 吡啶 -3- 胺 5- 氯吡啶 -2- 胺 2-( 三氟甲基 ) 苯胺 (4-(2- 氨基苯基 ) 哌嗪 -1- 基 )( 苯基 ) 甲酮 1H- 苯并 [d][1， 2， 3] 三唑 -5- 胺 2-(1H- 吲哚 -2- 基 ) 苯胺 4- 甲基 - 联苯 -3- 基胺 吡啶 -3- 胺 3， 4- 二甲氧基苯胺 3H- 苯并 [d] 咪唑 -5- 胺 3- 氨基苄腈 6- 氯吡啶 -3- 胺187CN 101935301 A说邻 - 甲苯胺 1H- 吲哚 -5- 胺明书153/218 页J-53 J-54 J-55 J-56 J-57 J-58 J-59 J-60 J-61 J-62 J-63 J-64 J-65 J-66 J-67 J-68 J-69 J-70 J-71 J-72 J-73[1， 2， 4] 三唑并 [1， 5-a] 吡啶 -8- 胺 2- 甲氧基吡啶 -3- 胺 2- 丁氧基苯胺 2， 6- 二甲基苯胺 2-( 甲硫基 ) 苯胺 2-(5- 甲基呋喃 -2- 基 ) 苯胺 3-(4- 氨基苯基 )-3- 乙基哌啶 -2， 6- 二酮 2， 4- 二甲基苯胺 5- 氟吡啶 -2- 胺 4- 环己基苯胺 4- 氨基 - 苯磺酰胺 2- 乙基苯胺 4- 氟 -3- 甲基苯胺 2， 6- 二甲氧基吡啶 -3- 胺 4- 叔丁基苯胺 4- 仲丁基苯胺 5， 6， 7， 8- 四氢萘 -2- 胺 3-( 吡咯烷 -1- 磺酰基 )- 苯基胺 4- 金刚烷 -1- 基 - 苯基胺J-74 J-75 J-76 J-77 J-78 J-79 J-803- 氨基 -5， 6， 7， 8- 四氢萘 -2- 醇 苯并 [d][1， 3] 二氧杂环戊烯 -5- 胺 5- 氯 -2- 苯氧基苯胺 N1- 甲苯磺酰基苯 -1， 2- 二胺 3， 4- 二甲基苯胺 2-( 三氟甲硫基 ) 苯胺 1H- 吲哚 -7- 胺J-81 J-82 J-83 J-84 J-85 J-86 J-87 J-88 J-89 J-90 J-91 J-92 J-933- 甲氧基苯胺 喹啉 -8- 胺 2-(2， 4- 二氟苯氧基 ) 吡啶 -3- 胺 2-(4- 氨基苯基 ) 乙腈 2， 6- 二氯苯胺 2， 3- 二氢苯并呋喃 -5- 胺 对 - 甲苯胺 2- 甲基喹啉 -8- 胺 2- 叔丁基苯胺 3- 氯苯胺 4- 叔丁基 -2- 氯苯胺 2- 氨基 - 苯磺酰胺 1-(2- 氨基苯基 ) 乙酮189CN 101935301 A说间 - 甲苯胺明书155/218 页J-94 J-95 J-96 J-97 J-98 J-99

    [1464] 2-(3- 氯 -5-( 三氟甲基 ) 吡啶 -2- 基氧基 ) 苯胺 2- 氨基 -6- 甲基苄腈 2-( 丙 -1- 烯 -2- 基 ) 苯胺 4- 氨基 -N- 吡啶 -2- 基 - 苯磺酰胺 2- 乙氧基苯胺

    [1467] 酰胺 ( 式 I 化合物 ) 一般流程 ：

    [1473] 具体实例 ：215 ； 4- 氧代 -N- 苯基 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺

    [1476] 向 4- 羟 基 - 喹 啉 -3- 羧 酸 (A-1)(19mg， 0.1mmol)、 HATU(38mg， 0.1mmol) 与 DIEA(34.9μL， 0.2mmol) 的 DMF(1mL) 溶液加入苯胺 (18.2μL， 0.2mmol)， 将反应混合物在 室温下搅拌 3h。过滤所得溶液， 经过 HPLC 纯化 (10-99％ CH3CN/H2O)， 得到 4- 氧代 -N- 苯 1 基 -1H- 喹 啉 -3- 羧 酰 胺 (215)(12mg， 45 ％ )。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ12.97(s， 1H)， 12.50(s， 1H)， 8.89(s， 1H)， 8.34(dd， J ＝ 8.1， 1.1Hz， 1H)， 7.83(t， J ＝ 8.3Hz， 1H)， 7.75(m， 3H).7.55(t， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 7.37(t， J ＝ 7.9Hz， 2H)， 7.10(t， J ＝ 6.8Hz， 1H)， HPLC 保留时 + 间 3.02min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 265.1m/z(MH ).

    [1477] 下表列举由上述一般流程合成的其他实例。

    [1475] 式 I 化合物 2酸 A-1胺 C-23 4 5 6 7 8 9A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1J-17 J-110 G-2 E-8 J-118 D-7 J-197195CN 101935301 A说11 12 A-1 A-1明书F-7 F-6161/218 页13 15 16 18 19 20 21 23 24 25 26 29 31 32 33 34 36 37A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-21 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1E-2 J-56 J-211 J-161 J-112 J-200 J-98 C-15 J-72 F-57 J-196 J-208 J-87 B-21 J-227 C-19 J-203 J-8038 39A-1 A-17J-46 D-10196CN 101935301 A说40 42 43 44 45 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-7 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1明书J-125 J-95 C-16 J-140 J-205 J-102 J-181 F-25 J-19 B-24 F-2 J-178 J-26 J-219 J-74 J-61 D-4 F-35 D-11 J-174 J-106 F-47 J-111162/218 页197CN 101935301 A说66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 A-1明书J-214 J-236 F-55 D-8 F-11 F-61 J-66 J-157 J-104 J-195 F-46 B-20 J-92 F-41 J-30 J-222 J-190163/218 页A-10 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-183 84 85 86 87A-1 A-1 A-1 A-1 A-1F-40 J-32 F-53 J-15 J-39198CN 101935301 A说88 89 90 91 92 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1明书G-3 J-134 J-18 J-38 C-13164/218 页93 95 96 97 99 100 102 103 104 106 107 108 109 110 111 112 113 114A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-2 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-11 A-1 A-1199F-68 J-189 B-9 F-34 J-4 J-182 J-117 C-9 B-4 J-11 DC-6 DC-3 DC-4 J-84 J-43 J-235 B-7 D-18CN 101935301 A说115 116 118 120 121 122 123 124 125 126 128 130 131 132 134 135 136 137 138 139 140 A-1 A-3 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-2 A-1 A-1明书F-62 J-229 F-12 J-1 J-130 J-49 F-66 B-24 J-143 C-25 J-176 J-233 J-240 J-220 F-58 F-19 C-8 C-9 F-44 F-59 J-64165/218 页A-22 A-14 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-6 A-1 A-1 A-1142 143A-1 A-1200J-10 C-7CN 101935301 A说144 145 146 147 150 151 152 153 154 155 156 160 161 162 164 165 166 167 168 169 170 171 172 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1明书J-213 B-18 J-55 J-207 J-162 F-67 J-156 C-23 J-107 J-3 F-36 D-6 C-3 J-171 J-204 J-65 F-54 J-226 J-48 B-1 J-42 F-52 F-64166/218 页201CN 101935301 A说173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1明书J-180 F-63 DC-2 J-212 J-57 J-153 J-154 J-198 F-1 F-37 DC-1 J-231 J-173167/218 页A-15 A-1186 187 188 189 190 191 192 193 194 195A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1202B-15 B-3 B-25 J-24 F-49 J-23 J-36 J-68 J-37 J-127CN 101935301 A说197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1明书J-167 J-210 F-3 H-1 J-96 F-28 B-2 C-5 J-179 J-8 B-17 C-12 J-126 J-101 J-152 J-217 F-51 J-221 J-136 J-147 J-185 C-13 J-114168/218 页A-17 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-2 A-1203CN 101935301 A说220 222 A-1 A-1明书C-26 J-35169/218 页223 224 226 227 228 229 230 231 233 234 235 236 240 241 242 244 245 246 247 250 252A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1204F-23 I-1 J-129 J-120 J-169 J-59 J-145 C-17 J-239 B-22 E-9 J-109 J-34 J-82 D-2 J-228 J-177 J-78 F-33 J-224 J-135CN 101935301 A说253 254 255 256 257 259 A-1 A-2 A-8 A-1 A-1 A-1明书F-30 B-20 C-9 J-45 J-67 B-14170/218 页261 262 263 264 265 266 267 268 270 271 273 274 276 277 278 279 280A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-8 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1205F-13 DC-7 J-163 J-122 J-40 C-14 J-7 E-7 B-5 D-9 H-2 B-24 J-139 F-38 F-10 F-56 J-146CN 101935301 A说281 283 284 285 286 287 288 289 290 291 292 293 294 295 296 297 301 302 303 304 305 306 307 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-3 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1明书J-62 F-18 J-16 F-45 J-119 C-13 C-6 J-142 F-15 C-10 J-76 J-144 J-54 J-128 J-12 J-138 J-14 F-5 J-13 E-1 F-17 F-20 F-43171/218 页A-17 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1206CN 101935301 A说308 309 310 311 312 313 314 315 317 319 320 321 322 324 325 326 328 329 330 331 332 333 334 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-2 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1明书J-206 J-5 J-70 J-60 F-27 F-39 J-116 J-58 J-85 C-7 B-6 J-44 J-22 J-172 J-103 F-60 J-115 J-148 J-133 J-105 J-9 F-8 DC-5172/218 页207CN 101935301 A说335 336 337 338 339 344 345 346 348 349 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-2明书J-194 J-192 C-24 J-113 B-8 F-22 J-234 J-6 F-21 J-29173/218 页A-12 A-1 A-1350 351 352 353 354 355 357 358 360 361 362 363 364A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-24 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1208J-100 B-23 B-10 D-10 J-186 J-25 B-13 J-232 J-151 F-26 J-91 F-32 J-88CN 101935301 A说365 366 367 368 369 370 371 372 373 374 375 376 377 378 380 381 383 384 385 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1明书J-93 F-16 F-50 D-5 J-141 J-90 J-79 J-209 J-21 J-238 J-71 J-187 J-237 D-3 J-99 B-24 B-12 F-48 J-83174/218 页A-16 A-1 A-1 A-5 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1387 388 389 391A-1 A-1 A-1 A-1209J-168 F-29 J-27 F-9CN 101935301 A说392 394 395 397 398 400 401 402 403 405 406 407 408 410 411 412 413 414 417 A-1明书J-52 J-170 C-20 J-199 J-77 J-183 F-4 J-149 C-22 J-33 B-24 C-7 J-81 F-31 J-191 B-19 J-131 J-50 F-65175/218 页A-22 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-6 A-3 A-1 A-1 A-13 A-1 A-1 A-1 A-1418 419 420 421A-1 A-1 A-1 A-1210J-223 J-216 G-1 C-18CN 101935301 A说422 423 424 425 426 427 428 429 430 431 432 433 434 435 436 437 438 439 440 441 442 443 444 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1明书J-20 B-16 F-42 J-28 C-11 J-124 C-1 J-218 J-123 J-225 F-14 C-9 J-159 J-41 F-24 J-75 E-10 J-164 J-215 D-19 J-165 J-166 E-6176/218 页211CN 101935301 A说445 446 447 448 449 450 451 452 453 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1明书J-97 J-121 J-51 J-69 J-94 J-193 J-31 J-108 D-1177/218 页454 455 456 457 458 459 461 463 464 465 466 467 468 469A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-3 A-1 A-1 A-1 A-20 A-12212J-47 J-73 J-137 J-155 C-4 J-53 J-150 J-202 C-9 E-4 J-2 J-86 J-184 J-132CN 101935301 A说470 473 474 475 477 478 479 480 481 483 484 B-26-I B-27-I C-27-I D-12-I D-13-I D-15-I D-16-I D-17-I DC-10-I DC-8-I DC-9-I A-1明书J-160 J-89 J-201 J-158 J-63 B-11 J-230 J-175 J-188 C-21 D-14 B-26 B-27 C-27 D-12 D-13 D-15 D-16 D-17 DC-10 DC-8 DC-9178/218 页A-21 A-1 A-1 A-1 A-1 A-4 A-23 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1 A-1

    [1479] 吲哚 实施例 1 一般流程 ：

    [1494] 具体实例 ：188-I ； 6-[(4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 基 ) 碳酰氨基 ]-1H- 吲哚 -5- 羧酸

    [1497] 将 6-[(4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 基 ) 碳酰氨基 ]-1H- 吲哚 -5- 羧酸乙基酯 (188) (450mg， 1.2mmol) 与 1N NaOH 溶液 (5mL) 在 THF(10mL) 中的混合物在 85℃下加热过夜。 使反 应混合物在 EtOAc 与水之间分配。 将水层用 1N HCl 溶液酸化至 pH 5， 过滤沉淀， 用水洗涤， 风干， 得到 6-[(4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 基 ) 碳酰氨基 ]-1H- 吲哚 -5- 羧酸 (188-1)(386mg， 1 93％ )。 H-NMR(400MHz， DMSO-d6)δ12.92-12.75(m， 2H)， 11.33(s， 1H)， 8.84(s， 1H)， 8.71(s， 1H)， 8.30(dd， J ＝ 8.1， 0.9Hz， 1H)， 8.22(s， 1H)， 7.80-7.72(m， 2H)， 7.49(t， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.41(t， J ＝ 2.7Hz， 1H)， 6.51(m， 1H) ； HPLC 保 留 时 间 2.95min， 10-99 ％ CH3CN， 5min run ； + ESI-MS 376.2m/z(MH ).

    [1498] 343 ； N-[5-( 异丁基氨甲酰基 )-1H- 吲哚 -6- 基 ]-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺

    [1499] 向 6-[(4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 基 ) 碳酰氨基 ]-1H- 吲哚 -5- 羧酸 (188-I)(26mg， 0.08mmol)、 HATU(38mg， 0.1mmol) 与 DIEA(35μL， 0.2mmol) 的 DMF(1mL) 溶 液 加 入 异 丁

    [1496] 基胺 (7mg， 0.1mmol)， 将反应混合物在 65 ℃下搅拌过夜。过滤所得溶液， 经过 HPLC 纯 化 (10-99 ％， CH3CN/H2O)， 得 到 产 物 N-[5-( 异 丁 基 氨 甲 酰 基 )-1H- 吲 哚 -6- 基 ]-4- 氧 代 -1H- 喹啉 -3- 羧羧酰胺 (343)(20mg， 66％ )。 1

    [1500] H-NMR(400MHz， DMSO-d6)δ12.66(d， J ＝ 7.4Hz， 1H)， 12.42(s， 1H)， 11.21(s， 1H)， 8.81(d， J ＝ 6.6Hz， 1H)， 8.47(s， 1H)， 8.36(t， J ＝ 5.6Hz， 1H)， 8.30(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.79(t， J ＝ 7.9Hz， 1H)， 7.72-7.71(m， 2H)， 7.51(t， J ＝ 7.2Hz， 1H)， 7.38(m， 1H)， 6.48(m， 1H)， 3.10(t， J ＝ 6.2Hz， 2H)， 1.88(m， 1H)， 0.92(d， J ＝ 6.7Hz， 6H) ； HPLC 保留时间 2.73min， + 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 403.3m/z(MH ).

    [1501] 另一实例 ：148 ； 4- 氧代 -N-[5-(1- 哌啶基羰基 )-1H- 吲哚 -6- 基 ]-1H- 喹啉 -3- 羧酰胺

    [1503] 按照上述一般流程合成 4- 氧代 -N-[5-(1- 哌啶基羰基 )-1H- 吲哚 -6- 基 ]-1H- 喹 啉 -3- 羧酰胺 (148)， 偶联酸 (188-I) 与哌啶。总收率 (12 ％ )。HPLC 保留时间 2.79min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS415.5m/z(MH+).

    [1504] 实施例 2

    [1505] 一般流程 ：

    [1502] 具体实例 ：158 ； 4- 氧代 -N-(5- 苯基 -1H- 吲哚 -6- 基 )-1H- 喹啉 -3- 羧酰胺

    [1510] 将 N-(5- 溴 -1H- 吲 哚 -6- 基 )-4- 氧 代 -1H- 喹 啉 -3- 羧 酰 胺 (B-27-I)(38mg， 0.1mol)、 苯基代硼酸 (18mg， 0.15mmol)、 (dppf)PdCl2(cat.) 与 K2CO3(100μL， 2M 溶液 ) 在 DMF(1mL) 中的混合物在 180 ℃微波中加热 10min。将反应过滤， 经过 HPLC 纯化 (10-99 ％

    [1509] CH3CN/H2O)， 得到产物 4- 氧代 -N-(5- 苯基 -1H- 吲哚 -6- 基 )-1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 (158) (5mg， 13％ )。HPLC 保留时间 3.05min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 380.2m/z(MH+).

    [1511] 下表列举按照上述一般流程合成的其他实例。

    [1512] 式 I 化合物 237 327 404 1 342 347 65

    [1513] 代硼酸 2- 甲氧基苯基代硼酸 2- 乙氧基苯基代硼酸 2， 6- 二甲氧基苯基代硼酸 5- 氯 -2- 甲氧基 - 苯基代硼酸 4- 异丙基苯基代硼酸 4-(2- 二甲氨基乙基氨甲酰基 ) 苯基代硼酸 3- 吡啶基代硼酸实施例 327 ； N-[1-[2-[ 甲基 -(2- 甲氨基乙酰基 )- 氨基 ] 乙酰基 ]-1H- 吲哚 -6- 基 ]-4- 氧 代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺

    [1516] 向 甲 基 -{[ 甲 基 -(2- 氧 代 -2-{6-[(4- 氧 代 -1， 4- 二 氢 - 喹 啉 -3- 羰 基 )- 氨 基 ]- 吲 哚 -1- 基 }- 乙 基 )- 氨 甲 酰 基 }- 甲 基 }- 氨 基 甲 酸 叔 丁 基 酯 (B-26-I)(2.0g， 1.25M 甲醇溶 3.7mmol) 在 CH2Cl2(50mL) 与甲醇 (15mL) 混合物中的溶液加入 HCl 溶液 (60mL， 液 )。将反应在室温下搅拌 64h。过滤收集所沉淀的产物， 用二乙醚洗涤， 在高真空下干燥， 得到产物 N-[1-[2-[ 甲基 -(2- 甲氨基乙酰基 )- 氨基 ] 乙酰基 ]-1H- 吲哚 -6- 基 ]-4- 氧 代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺的盐酸盐 (27)， 为灰白色固体 (1.25g， 70％ )。 1

    [1517] H-NMR(400MHz， DMSO-d6)δ13.20(d， J ＝ 6.7Hz， 1H)， 12.68(s， 1H)， 8.96-8.85(m， 1H)， 8.35(d， J ＝ 7.9Hz， 1H)， 7.91-7.77(m， 3H)， 7.64-7.54(m， 3H)， 6.82(m， 1H)， 5.05(s， 0.7H)， 4.96(s， 1.3H)， 4.25(t， J ＝ 5.6Hz， 1.3H)， 4.00(t， J ＝ 5.7Hz， 0.7H)， 3.14(s， 2H)， 3.02(s， 1H)， 2.62(t， J ＝ 5.2Hz， 2H)， 2.54(t， J ＝ 5.4Hz， 1H) ； HPLC 保 留 时 间 2.36min， + 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 446.5m/z(MH ).

    [1515] 酚类 实施例 1

    [1521] 275 ； 4- 苄氧基 -N-(3- 羟基 -4- 叔丁基 - 苯基 )- 喹啉 -3- 羧酰胺

    [1523] 向 N-(3- 羟基 -4- 叔丁基 - 苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 (428)(6.7mg， 0.02mmol) 与 Cs2CO3(13mg， 0.04mmol) 在 DMF(0.2mL) 中 的 混 合 物 加 入 BnBr(10μL， 0.08mmol)。将反应混合物在室温下搅拌 3h。将反应混合物过滤， 用 HPLC 纯化， 得到 4- 苄 氧基 -N-(3- 羟基 -4- 叔丁基苯基 )- 喹啉 -3- 羧酰胺 (275). 1

    [1524] H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ12.23(s， 1H)， 9.47(s， 1H)， 9.20(s， 1H)， 8.43(d， J ＝ 7.9Hz， 1H)， 7.79(t， J ＝ 2.0Hz， 2H)， 7.56(m， 1H)， 7.38-7.26(m， 6H)， 7.11(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 6.99(dd， J ＝ 8.4， 2.1Hz， 1H)， 5.85(s， 2H)， 1.35(s， 9H).HPLC 保 留 时 间 3.93min， + 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 427.1m/z(MH ).

    [1522] 另一实例 ：415 ； N-(3- 羟基 -4- 叔丁基 - 苯基 )-4- 甲氧基 - 喹啉 -3- 羧酰胺

    [1527] 按照上述一般流程合成 N-(3- 羟基 -4- 叔丁基 - 苯基 )-4- 甲氧基 - 喹啉 -3- 羧酰 胺 (415)， 使 N-(3- 羟基 -4- 叔丁基 - 苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 (428) 与甲基碘反 1 应。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ12.26(s， 1H)， 9.46(s， 1H)， 8.99(s， 1H)， 8.42(t， J ＝ 4.2Hz，

    [1526] 1H)， 7.95-7.88(m， 2H)， 7.61-7.69(m， 1H)， 7.38(d， J ＝ 2.1Hz， 1H)， 7.10(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 6.96(dd， J ＝ 8.4， 2.1Hz， 1H)， 4.08(s， 3H)， 1.35(s， 9H) ； HPLC 保留时间 3.46min， 10-99 ％ + CH3CN， 5min run ； ESI-MS 351.5m/z(MH ).

    [1528] 476 ； N-(4- 叔丁基 -2- 氰基 -5- 羟基苯基 )-1， 4- 二氢 -4- 氧代喹啉 -3- 羧酰胺

    [1530] 在氮下， 向 N-(4- 叔丁基 -2- 溴 -5- 羟基苯基 )-1， 4- 二氢 -4- 氧代喹啉 -3- 羧 酰 胺 (C-27-I)(84mg， 0.2mmol)、 Zn(CN)2(14mg， 0.12mmol) 的 NMP(1mL) 悬 液 加 入 0.014mmol)。将混合物在 200℃微波中加热 1h， 过滤， 用制备型 HPLC 纯化， Pd(PPh3)4(16mg， 得到 N-(4- 叔丁基 -2- 氰基 -5- 羟基苯基 )-1， 4- 二氢 -4- 氧代喹啉 -3- 羧酰胺 (476)。 1

    [1531] H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ13.00(d， J ＝ 6.4Hz、 1H)， 12.91(s， 1H)， 10.72(s， 1H)， 8.89(d， J ＝ 6.8Hz， 1H)， 8.34(d， J ＝ 8.2Hz， 1H)， 8.16(s， 1H)， 7.85-7.75(m， 2H)， 7.56-7.54(m， 1H)， 7.44(s， 1H)， 1.35(s， 9H) ； HPLC 保留时间 3.42min， 10-100％ CH3CN， 5min + 梯度 ； ESI-MS 362.1m/z(MH ).

    [1532] 苯胺

    [1533] 实施例 1

    [1534] 一般流程 ：

    [1529] 具体实例 ：260 ； N-(5- 氨基 -2- 叔丁基 - 苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺

    [1539] 将 [3-[(4- 氧 代 -1H- 喹 啉 -3- 基 ) 碳 酰 氨 基 ]-4- 叔 丁 基 - 苯 基 ] 氨 基 甲 酸 叔 丁 基 酯 (353)(33mg， 0.08mmol)、 TFA(1mL) 与 CH2Cl2(1mL) 的 混 合 物 在 室 温 下 搅 拌 过

    [1538] 夜。浓缩溶液， 将残余物溶于 DMSO(1mL)， 经过 HPLC 纯化 (10-99 ％ CH3CN/H2O)， 得到产物 N-(5- 氨 基 -2- 叔 丁 基 - 苯 基 )-4- 氧 代 -1H- 喹 啉 -3- 羧 酰 胺 (260)(15mg， 56 ％ )。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ13.23(d， J ＝ 6.6Hz， 1H)， 12.20(s， 1H)， 10.22(br s， 2H)， 8.88(d， J ＝ 6.8Hz， 1H)， 8.34(d， J ＝ 7.8Hz， 1H)， 7.86-7.80(m， 3H)， 7.56-7.52(m， 2H)， 7.15(dd， J ＝ 8.5， 2.4Hz， 1H)， 1.46(s， 9H) ； HPLC 保留时间 2.33min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS + 336.3m/z(MH ).

    [1540] 下表列举按照上述一般流程合成的其他实例。

    [1541] 起始中间体 60 D-12-I D-13-I 114 D-16-I D-15-I D-17-I

    [1542] 产物 101 282 41 393 157 356 399实施例 2 一般流程 ：

    [1545] 具体实例 ：485 ； N-(3- 二甲氨基 -4- 叔丁基 - 苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺

    [1548] 向 N-(3- 氨基 -4- 叔丁基 - 苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 (271)(600mg， 1.8mmol) 的 CH2Cl2(15mL) 与甲醇 (5mL) 悬液加入乙酸 (250μL) 和甲醛 (268μL， 3.6mmol，

    [1547] 37wt ％水溶液 )。10min 后， 一次性加入氰基硼氢化钠 (407mg， 6.5mmol)。在 1.5 和 4.2h 时加入另外的甲醛 (135μL， 1.8mmol， 37wt％水溶液 )。4.7h 后， 将混合物用醚 (40mL) 稀 释， 用水 (25mL) 和盐水 (25mL) 洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤， 浓缩。所得红色 - 褐色泡沫经过 制备型 HPLC 纯化， 得到 N-(3- 二甲氨基 -4- 叔丁基 - 苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 (485)(108mg， 17％ )。 1

    [1549] H NMR(300MHz， CDCl3) 13.13(br s， 1H)， 12.78(s， 1H)， 8.91(br s， 1H)， 8.42(br s， 1H)， 8.37(d， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 7.72-7.58(m， 2H)， 7.47-7.31(m， 3H)， 3.34(s， 6H)， 1.46(s， + 9H) ； HPLC 保留时间 2.15min， 10-100％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 364.3m/z(MH ).

    [1550] 下表列举按照上述一般流程合成的其他实例。

    [1551] 起始中间体 69 160 282 41

    [1552] 产物 117 462 409 98实施例 3 一般流程 ：

    [1555] 具体实例 ：94 ； N-(5- 氨基 -2- 甲基 - 苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺

    [1558] 向 4- 羟 基 - 喹 啉 -3- 羧 酸 (A-1)(50mg， 0.26mmol)、 HBTU(99mg， 0.26mmol) 与 DIEA(138μL， 0.79mmol) 的 THF(2.6mL) 溶 液 加 入 2- 甲 基 -5- 硝 基 苯 基 胺 (40mg， 0.26mmol)。 将混合物在 150℃微波中加热 20min， 浓缩所得溶液。 将残余物溶于 EtOH(2mL)， 加入 SnCl22H2O(293mg， 1.3mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物用饱和 NaHCO3 溶液碱化至 pH 7-8， 用乙酸乙酯萃取。合并有机层， 用盐水洗涤， 经 Na2SO4 干燥， 过滤浓缩。 将残余物溶于 DMSO， 经过 HPLC 纯化 (10-99％ CH3CN/H2O)， 得到产物 N-(5- 氨基 -2- 甲基 - 苯

    [1557] 基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 (94)(6mg， 8％ )。 HPLC 保留时间 2.06min， 10-99％ CH3CN， + 5min run ； ESI-MS 294.2m/z(MH ).

    [1559] 另一实例 ：

    [1560] 17 ； N-(5- 氨基 -2- 丙氧基 - 苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺

    [1562] 按照上述一般流程制备 N-(5- 氨基 -2- 丙氧基 - 苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰 胺 (17)， 始于 4- 羟基 - 喹啉 -3- 羧酸 (A-1) 和 5- 硝基 -2- 丙氧基 - 苯基胺。收率 (9％ )。 HPLC 保留时间 3.74min， 10-99％ CH3CN， 5minrun ； ESI-MS 338.3m/z(MH+).

    [1563] 实施例 4

    [1564] 一般流程 ：

    [1561] 具体实例 ：248 ； N-(3- 乙酰氨基 -4- 甲基 - 苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺向 N-(3- 氨 基 -4- 甲基 - 苯基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 (167)(33mg， 0.11mmol) 与 DIEA(49μL， 0.28mmol) 的 THF(1mL) 溶液加入乙酰氯 (16μL， 0.22mmol)。将反应在室温下搅拌 30min。 LCMS 分析表明已经发生二酰化作用。 加入哌啶 (81μL， 0.82mmol) 的 CH2Cl2(2mL) 溶液， 将反 应搅拌另外 30min， 此时根据 LCMS 检测只有所需产物。浓缩反应溶液， 将残余物溶于 DMSO， 经过 HPLC 纯化 (10-99 ％ CH3CN/H2O)， 得到产物 N-(3- 乙酰氨基 -4- 甲基 - 苯基 )-4- 氧 代 -1H- 喹 啉 -3- 羧 酰 胺 (248)(4mg， 11 ％ )。1H NMR(400MHz， DMSO-d6) 12.95(d， J＝ 6.6Hz， 1H)， 12.42(s， 1H)， 9.30(s， 1H)， 8.86(d， J ＝ 6.8Hz， 1H)， 8.33(dd， J ＝ 8.1， 1.3Hz， 1H)， 7.85-7.81(m， 2H)， 7.76(d， J ＝ 7.8Hz， 1H)， 7.55(t， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 7.49(dd， J ＝ 8.2， 2.2Hz， 1H)， 7.18(d， J ＝ 8.3Hz， 1H)， 2.18(s， 3H)， 2.08(s， 3H) ； HPLC 保 留 时 间 2.46min， + 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 336.3m/z(MH ).

    [1569] 下表列举按照上述一般流程合成的其他实例。

    [1568] 221CN 101935301 A说始于 260 260 429 41 101 8 271 271 167 69 160 160 69 282 282 41 101 101 8 8 X CO CO CO CO CO CO CO2 CO2 CO2 CO2 CO2 CO2 CO2 CO2 CO2 CO2 CO2 CO2 CO2 CO2明书R2 Me neopentyl Me Me Me Me Et Me Et Me Me Et Et Me Et Me Me Et Me Et 产物 316 196 379 232 243 149 127 14 141 30 221 382 225 249 472 471 239 269 129 298187/218 页222CN 101935301 A说160 SO2明书Me 340188/218 页

    [1571] 实施例 5 一般流程 ：

    [1574] 具体实例 ：

    [1576] 4- 氧代 -N-[3-( 三氟甲基 )-5-( 乙烯基磺酰氨基 ) 苯基 ]-1， 4- 二氢喹啉 -3- 羧 向 N-[3- 氨基 -5-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 (429)(500mg， 烷 (4mL) 悬液加入 NMM(0.4mL， 3.6mmol)。在氩气氛下加入 β- 氯乙酰胺

    [1577] 1.4mmol) 的 1， 4- 二磺酰氯 (0.16mL， 1.51mmol)。将混合物在室温下搅拌 6.5h， 然后 TLC(CH2Cl2-EtOAc， 8 ∶ 2) 显示新的斑点， Rf 与原料非常相似。加入另外 0.5eq.NMM， 将混合物在室温下搅拌过夜。粗 混合物的 LCMS 分析显示所需产物转化率＞ 85％。将混合物浓缩， 用 1M HCl(5mL) 处理， 用 EtOAc(3x10mL) 和 CH2Cl2(3x10mL) 萃取。合并有机萃取液， 经 Na2SO4 干燥， 过滤， 浓缩， 得到 4- 氧代 -N-[3-( 三氟甲基 )-5-( 乙烯基磺酰氨基 ) 苯基 ]-1， 4- 二氢喹啉 -3- 羧酰胺， 为橙 色泡沫 (0.495g， 79％ )， 无需进一步纯化即可用于下一步。 1

    [1578] H-NMR(d 6-Acetone ， 300MHz) δ 8.92(s ， 1H) ， 8.41-8.38(m ， 1H) ， 7.94(m ， 2H) ， 7.78(br s， 2H)， 7.53-7.47(m， 1H)， 7.30(s， 1H)， 6.87-6.79(dd， J ＝ 9.9Hz， 1H)， 6.28(d， J ＝ 16.5Hz， 1H)， 6.09(d， J ＝ 9.9Hz， 1H) ； ESI-MS 436.4m/z(MH )

    [1579] 318 ； 4- 氧代 -N-[3-[2-(1- 哌啶基 ) 乙基磺酰氨基 ]-5-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-1H- 喹 啉 -3- 羧酰胺

    [1580] 将 4- 氧代 -N-[3-( 三氟甲基 )-5-( 乙烯基磺酰氨基 ) 苯基 ]-1， 4- 二氢喹啉 -3- 羧 酰 胺 (50mg， 0.11mmol)、 哌 啶 (18μL， 1.6eq) 与 LiClO4(20mg， 1.7eq) 的 混 合 物 悬 浮 在 CH2Cl2 ∶异丙醇的 1 ∶ 1 溶液 (1.5mL) 中。使混合物在 75℃下回流 18h。此后， LCMS 分析 显示所需产物转化率＞ 95％。粗混合物经过反相 HPLC 纯化， 得到 4- 氧代 -N-[3-[2-(1- 哌 啶基 ) 乙基磺酰氨基 ]-5-( 三氟甲基 ) 苯基 ]-1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 (318)， 为微黄色固体 (15mg， 25％ )。 1

    [1581] H-NMR(d6-Acetone， 300MHz)δ8.92(br s， 1H)， 8.4(d， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 8.05(br s， 1H)， 7.94(br s， 1H)， 7.78(br s， 2H)， 7.53-7.51(m， 1H)， 7.36(br s， 1H)， 3.97(t， J ＝ 7.2Hz， 2H)， 3.66(t， J ＝ 8Hz， 2H)， 3.31-3.24(m， 6H)， 1.36-1.31(m， 4H) ； ESI-MS489.1m/z(MH+).

    [1582] 下表列举按照上述一般流程合成的其他实例。起始中间体 429 429 131 131 胺 吗啉 二甲胺 哌啶 吗啉 产物 272 359 133 46

    [1584] 实施例 6 一般流程 ：

    [1587] 具体实例 ：258 ； N- 二氢吲哚 -6- 基 -4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺

    [1590] 将 N-(1- 乙酰基二氢吲哚 -6- 基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 (233)(43mg， 0.12mmol)、 1N NaOH 溶液 (0.5mL) 与乙醇 (0.5mL) 的混合物加热至回流达 48h。浓缩溶 液， 将残余物溶于 DMSO(1mL)， 经过 HPLC 纯化 (10-99 ％ CH3CN-H2O)， 得到产物 N- 二氢吲 哚 -6- 基 -4- 氧 代 -1H- 喹 啉 -3- 羧 酰 胺 (258)(10mg， 20 ％ )。HPLC 保 留 时 间 2.05min， + 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 306.3m/z(MH ).

    [1591] 下表列举按照上述一般流程合成的其他实例。

    [1589] 始于 DC-8-I DC-9-I产物 386 10条件 NaOH HCl溶剂 EtOH EtOH224CN 101935301 A说175 109 334 DC-10-I 22 35 238 105明书HCl HCl NaOH NaOH EtOH EtOH EtOH THF190/218 页

    [1593] 实施例 2 一般流程 ：

    [1596] 具体实例 ：299 ； 4- 氧代 -N-(1， 2， 3， 4- 四氢喹啉 -7- 基 )-1H- 喹啉 -3- 羧酰胺

    [1599] 将 7-[(4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 基 ) 碳酰氨基 ]-1， 2， 3， 4- 四氢喹啉 -1- 羧酸叔丁基 酯 (183)(23mg， 0.05mmol)、 TFA(1mL) 与 CH2Cl2(1mL) 的混合物在室温下搅拌过夜。浓缩溶 得到产物 4- 氧代 -N-(1， 液， 将残余物溶于 DMSO(1mL)， 经过 HPLC 纯化 (10-99％ CH3CN-H2O)， 2， 3， 4- 四氢喹啉 -7- 基 )-1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 (299)(7mg ； 32％ )。 HPLC 保留时间 2.18min， + 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 320.3m/z(MH ).

    [1600] 另一实例 ：

    [1598] 300 ； N-(4， 4- 二甲基 -1， 2， 3， 4- 四氢喹啉 -7- 基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺

    [1603] 按 照 上 述 一 般 流 程 合 成 N-(4， 4- 二 甲 基 -1， 2， 3， 4- 四 氢 喹 啉 -7- 基 )-4- 氧 代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺 (300)， 始于 4， 4- 二甲基 -7-[(4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 基 ) 碳酰氨

    [1602] 基 ]-1， 2， 3， 4- 四氢喹啉 -1- 羧酸叔丁基酯 (108)。收率 (33％ )。 1

    [1604] H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ13.23(d， J ＝ 6.6Hz， 1H)， 12.59(s， 1H)， 8.87(d， J ＝ 6.8Hz， 1H)， 8.33(d， J ＝ 7.7Hz， 1H)， 7.86-7.79(m， 3H)， 7.58-7.42(m， 3H)， 3.38(m， 2H)， 1.88(m， 2H)， 1.30(s， 6H) ； HPLC 保 留 时 间 2.40min， 10-99 ％ CH3CN， 5min run ； + ESI-MS348.2m/z(MH ).

    [1605] 其他

    [1606] 实施例 1

    [1607] 具体实例 ：163 ； 4- 氧 代 -1， 4- 二 氢 - 喹 啉 -3- 羧 酸 (4- 氨 甲 基 -2 ′ - 乙 氧 基 - 联 苯 -2- 基 )- 酰胺

    [1611] 在室温下， 将 {2′ - 乙氧基 -2-[(4- 氧代 -1， 4- 二氢喹啉 -3- 羰基 )- 氨基 ]- 联 苯 -4- 基甲基 }- 氨基甲酸叔丁基酯 (304)(40mg， 0.078mmol) 在 CH2Cl2/TFA 混合物 (3 ∶ 1， 20mL) 中搅拌 1h。在旋转蒸发器上除去挥发物。粗产物经过制备型 HPLC 纯化， 得到 4- 氧 代 -1， 4- 二氢喹啉 -3- 羧酸 (4- 氨甲基 -2 ′ - 乙氧基联苯 -2- 基 ) 胺 (163)， 为黄褐色 1 固 体 (14mg.43 ％ )。 H NMR(300MHz， DMSO-d6)δ12.87(d， J ＝ 6.3Hz， 1H)， 11.83(s， 1H)， 8.76(d， J ＝ 6.3Hz， 1H)， 8.40(s， 1H)， 8.26(br s， 2H)， 8.01(dd， J ＝ 8.4Hz， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 7.75(dt， J ＝ 8.1Hz， J ＝ 1.2Hz， 1H)， 7.67(d， J ＝ 7.8Hz， 1H)， 7.47-7.37(m， 2H)， 7.24(s， 2H)， 7.15(dd， J ＝ 7.5Hz， J ＝ 1.8Hz， 1H)， 7.10(d， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 7.02(dt， J ＝ 7.5Hz， J ＝ 0.9Hz， 1H)， 4.09(m， 2H)， 4.04(q， J ＝ 6.9Hz， 2H)， 1.09(t， J ＝ 6.9Hz， 3H) ； HPLC 保留时 间 1.71min， 10-100％ CH3CN， 5min 梯度 ； ESI-MS 414.1m/z(MH+).

    [1610] 另一实例 ：390 ； N-[3-( 氨甲基 )-4- 叔丁基 - 苯基 ]-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺

    [1614] 按照上述一般流程合成 N-[3-( 氨甲基 )-4- 叔丁基 - 苯基 ]-4- 氧代 -1H- 喹 啉 -3- 羧酰胺 (390)， 始于 [5-[(4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 基 ) 碳酰氨基 ]-2- 叔丁基 - 苯基 ] 甲基氨基甲酸叔丁基酯 (465)。HPLC 保留时间 2.44min， 10-99％ CH3CN， 5min 梯度 ； ESI-MS m/z 350.3(M+H)+.

    [1615] 实施例 2

    [1616] 一般流程 ：

    [1613] 具体实例 ：3-(2-(4-(1- 氨基 -2- 甲基丙烷 -2- 基 ) 苯基 ) 乙酰基 ) 喹啉 -4(1H)- 酮

    [1621] 合并 (2- 甲基 -2-{4-[2- 氧代 -2-(4- 氧代 -1， 4- 二氢 - 喹啉 -3- 基 )- 乙基 ]- 苯 基 )- 丙基 )- 氨基甲酸叔丁基酯 (88)(0.50g， 1.15mmol)、 TFA(5mL) 与 CH2Cl2(5mL)， 在室温 下搅拌过夜。反应混合物然后用 1N NaOH 中和。过滤收集沉淀， 得到产物 3-(2-(4-(1- 氨 基 -2- 甲基丙烷 -2- 基 ) 苯基 ) 乙酰基 ) 喹啉 -4(1H)- 酮， 为褐色固体 (651mg， 91％ )。 HPLC + 保留时间 2.26min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS 336.5mL)(MH ).

    [1620] 323 ； [2- 甲基 -2-[4-[(4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 基 ) 碳酰氨基 ] 苯基 ]- 丙基 ] 氨 基甲酸甲基酯

    [1623] 将 氯 甲 酸 甲 酯 (0.012g， 0.150mmol) 加 入 到 3-(2-(4-(1- 氨 基 -2- 甲 基 丙 烷 -2- 基 ) 苯基 ) 乙酰基 ) 喹啉 -4(1H)- 酮 (0.025g， 0.075mmol)、 TEA(0.150mmol， 0.021mL) 与 DMF(1mL) 的溶液中， 在室温下搅拌 1h。然后加入哌啶 (0.074mL， 0.750mmol)， 将反应搅 得到产物 拌另外 30min。将反应混合物过滤， 经过制备型 HPLC 纯化 (10-99％ CH3CN- 水 )， [2- 甲基 -2-[4-[(4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 基 ) 碳酰氨基 ] 苯基 ]- 丙基 ] 氨基甲酸甲基酯 (323)。

    [1622] 227CN 101935301 A

    [1624] 1说明书193/218 页H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ12.94(br s， 1H)， 12.44(s， 1H)， 8.89(s， 1H)， 8.33(dd， J ＝ 8.2， 1.1Hz， 1H)， 7.82(t， J ＝ 8.3Hz， 1H)， 7.76(d， J ＝ 7.7Hz， 1H)， 7.67(d， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 7.54(t， J ＝ 8.1Hz， 1H)， 7.35(d， J ＝ 8.7Hz， 2H)， 7.02(t， J ＝ 6.3Hz， 1H)， 3.50(s， 3H)， 3.17(d， J ＝ 6.2Hz， 2H)， 1.23(s， 6H) ； HPLC 保 留 时 间 2.93min， 10-99 ％ CH3CN， 5min run ； + ESI-MS394.0m/z(MH ).

    [1625] 下表列举按照上述一般流程合成的其他实例。

    [1626] 产物 119 416 460 251 341 28 396

    [1627] 氯甲酸酯 氯甲酸乙酯 氯甲酸丙酯 氯甲酸丁酯 氯甲酸异丁酯 氯甲酸新戊酯 2- 甲氧基乙基氯甲酸酯 ( 四氢呋喃 -3- 基 ) 甲基氯甲酸酯实施例 3 一般流程 ：

    [1630] 具体实例 ：273-I ； N-(1- 氨基四氢萘 -7- 基 )-4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 羧酰胺

    [1633] 向 [7-[(4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 基 ) 碳酰氨基 ] 四氢萘 -1- 基 ] 氨基甲酸叔丁基酯 (273)(250mg， 0.6mmol) 的二氯甲烷 (2mL) 溶液加入 TFA(2mL)。 将反应在室温下搅拌 30min。

    [1632] 向反应混合物加入更多的二氯甲烷 (10mL)， 将溶液用饱和 NaHCO3 溶液洗涤 (5mL)。在有机 层中开始生成沉淀， 因此合并有机层， 浓缩， 得到 N-(1- 氨基四氢萘 -7- 基 )-4- 氧代 -1H- 喹 啉 -3- 羧酰胺 (273-I)(185mg， 93％ )。HPLC 保留时间 1.94min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； + ESI-MS 334.5m/z(MH ).

    [1634] 159 ； [7-[(4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 基 ) 碳酰氨基 ] 四氢萘 -1- 基 ] 氨基甲酸甲基 酯

    [1635] 向 N-(1- 氨 基 四 氢 萘 -7- 基 )-4- 氧 代 -1H- 喹 啉 -3- 羧 酰 胺 (273-I)(65mg， 0.20mmol) 与 DIEA(52μL， 0.29mmol) 的 甲 醇 (1mL) 溶 液 加 入 氯 甲 酸 甲 酯 (22μL， 0.29mmol)。将反应在室温下搅拌 1h。反应混合物的 LCMS 分析显示对应于单加成和双加成 产物的峰。加入哌啶 (2mL)， 将反应搅拌过夜， 然后观察到只有单加成产物。将所得溶液过 滤， 经过 HPLC 纯化 (10-99％ CH3CN-H2O)， 得到产物 [7-[(4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 基 ) 碳酰氨 基 ] 四氢萘 -1- 基 ] 氨基甲酸甲基酯 (159)(27mg， 35％ )。 HPLC 保留时间 2.68min， 10-99％ + CH3CN， 5min run ； ESI-MS 392.3m/z(MH ).

    [1636] 另一实例 ：

    [1637] 482 ； [7-[(4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 基 ) 碳酰氨基 ] 四氢萘 -1- 基 ] 氨基甲酸乙基酯 按照上述一般流程合成 [7-[(4- 氧代 -1H- 喹啉 -3- 基 ) 碳酰氨基 ] 四氢萘 -1- 基 ] 氨基甲酸乙基酯 (482)， 始于胺 (273-I) 和氯甲酸乙酯。总收率 (18 ％ )。HPLC 保留时间 2.84min， 10-99％ CH3CN， 5min run ； ESI-MS406.5m/z(MH+).

    [1639] 下面是按照上述实施例制备的本发明化合物的鉴别数据。

    [1640] 表2

    [1638] 一些化合物的 NMR 数据如下表 2-A 所示 ：

    [1647] B) 检测和测量化合物的 ΔF508-CFTR 纠正 (Correction) 与强化性质的测定法

    [1660] I) 测定化合物 ΔF508-CFTR 调控性质的膜电位光学方法

    [1661] 光学膜电位测定法采用如 Gonzalez 和 Tsien 所述的电压 - 敏感性 FRET 传感 器 ( 参 见， Gonzalez， J.E.and R.Y.Tsien(1995) ″ Voltage sensing by fluorescence resonance energy transfer in single cells ″ Biophys J 69(4) ： 1272-80， and Gonzalez， J.E.and R.Y.Tsien(1997) ″ Improved indicators of cell membrane potential that use fluorescence resonance energy transfer ″ Chem Biol 4(4) ： 269-77) 与 测 量 荧 光 变 化 的 仪 器 的 组 合， 例 如 电 压 / 离 子 探 针 读 数 器 (VIPR)( 参 见， Gonzalez， J.E.， K.Oades， et al.(1999)″ Cell-based assays and instrumentation for screening ion-channel targets″ Drug Discov Today 4(9) ： 431-439)。

    [1662] 这些电压敏感性测定法基于膜溶性、 电压敏感性染剂 DiSBAC2(3) 与荧光磷脂 CC2-DMPE 之间荧光共振能量转移 (FRET) 的变化， 所述荧光磷脂连接于质膜的外部小叶， 充 当 FRET 供体。 膜电位 (Vm) 的变化导致带负电的 DiSBAC2(3) 跨越质膜重新分布， 从 CC2-DMPE TM 转移的能量相应地改变。 荧光发射的变化可以利用 VIPR II 监测， 它是一种整合的液体处 理器和荧光检测器， 被设计用来在 96- 或 384- 孔微量滴定平板中进行细胞类筛选。

    [1663] 纠正化合物的鉴别

    [1664] 为了鉴别纠正与 ΔF508-CFTR 有关的运输缺陷的小分子， 开发了单加入 HTS 测定 格式。在有或没有 ( 阴性对照 ) 供试化合物的存在下， 在 37℃下将细胞在无血清培养基中 温育 16 小时。作为阳性对照， 将平板接种在 384- 孔平板中的细胞在 27℃下温育 16 小时， 以 “温度 - 纠正” ΔF508-CFTR。随后将细胞用克雷布斯林格氏溶液冲洗 3 次， 加载电压 - 敏 感性染剂。为了活化 ΔF508-CFTR， 向每孔加入 10μM 福司扣林和 CFTR 强化剂染料木素 (20μM) 以及无 Cl 培养基。无 Cl 培养基的加入促进响应于 ΔF508-CFTR 活化的 Cl- 流 出， 使用 FRET 类电压 - 传感染剂光学监测所致膜的去极化。

    [1659] 强化化合物的鉴别

    [1666] 为了鉴别 ΔF508-CFTR 的强化剂， 开发了双加入 HTS 测定格式。在第一加入期间， 向每孔加入含有或没有供试化合物的无 Cl 培养基。22 秒后， 进行含有 2-10μM 福司扣林 的无 Cl 培养基的第二加入， 以活化 ΔF508-CFTR。两次加入后的细胞外 Cl- 浓度为 28mM， 这促进响应于 ΔF508-CFTR 活化的 Cl- 流出， 使用 FRET 类电压 - 传感染剂光学监测所致膜 的去极化。

    [1667] 溶液

    [1668] 浴溶液 #1(mM) ： NaCl 160， KCl 4.5， CaCl2 2， MgCl2 1， HEPES10， pH 7.4(NaOH)。

    [1669] 无氯浴溶液 ： 浴溶液 #1 中的氯化物盐用葡糖酸盐取代。

    [1670] CC2-DMPE ： 在 DMSO 中制成 10mM 储备溶液， 贮存在 -20℃下。

    [1671] DiSBAC2(3) ： 在 DMSO 中制成 10mM 储备溶液， 贮存在 -20℃下。

    [1672] 细胞培养

    [1673] 使用稳定表达 ΔF508-CFTR 的 NIH3T3 小鼠成纤维细胞进行膜电位的光学测量。 2 在 175cm 培养烧瓶中， 将细胞供养在 37℃下、 在 5％ CO2 和 90％湿度中、 和 Dulbecco 氏改 性 Eagle 氏培养基中， 其中补充有 2mM 谷氨酰胺、 10 ％胎牛血清、 1X NEAA， β-ME、 1X 青霉 素 / 链霉素和 25mMHEPES。就全部光学测定而言， 将细胞按 30,000/ 孔接种在 384- 孔涂有 Matrigel 的平板中， 在 37℃下培养 2 小时， 然后在 27℃下培养 24 小时， 供强化剂测定。就 纠正测定而言， 在 27℃或 37℃下将细胞用和不用化合物培养 16-24 小时。

    [1674] B) 测定化合物的 ΔF508-CFTR 调控性质的电生理测定法

    [1675] 1.Ussing 室测定法

    [1676] 对表达 ΔF508-CFTR 的极化上皮细胞进行 Ussing 室实验， 以进一步鉴定在光学 测定法中鉴别的 ΔF508-CFTR 调控剂。将生长在 Costar Snapwell 细胞培养插件上的 FRTΔF508-CFTR 上皮细胞固定在 Ussing 室内 (Physiologic Instruments， Inc.， San Diego， CA)， 利用电压箝系统 (Department of Bioengineering， University of Iowa， IA， and， Physiologic Instruments， Inc.， San Diego， CA) 连续使单层短路。施加 2mV 脉冲测量跨 上皮电阻。在这些条件下， FRT 上皮证明有 4KΩ/cm2 或以上的电阻。将溶液维持在 27℃下， 通入空气。利用无电池插件纠正电极偏移电位和流体电阻。在这些条件下， 电流反映顶端 膜中 Cl 通过 ΔF508-CFTR 的流动。利用 MP100A-CE 界面和 AcqKnowledge 软件 (v3.2.6 ； BIOPAC Systems， Santa Barbara， CA) 获取数字方式的 ISC。

    [1677] 纠正化合物的鉴别

    [1678] 典型的方案采用基底外侧至顶端膜 Cl- 浓度梯度。 为了建立这种梯度， 对基底外侧 膜使用正常的套环， 而顶端 NaCl 被等摩尔葡糖酸钠代替 ( 用 NaOH 滴定至 pH 7.4)， 得到跨 越上皮的大幅 Cl 浓度梯度。 所有实验均是用完整单层进行的。 为了充分活化 ΔF508-CFTR， 施加福司扣林 (10μM) 和 PDE 抑制剂 IBMX(100μM)， 继之以加入 CFTR 强化剂染料木素 (50μM)。

    [1679] 正如在其他细胞类型中所观察到的， 在低温下温育稳定表达 ΔF508-CFTR 的 FRT 细胞会增加 CFTR 在质膜中的功能密度。为了测定纠正化合物的活性， 将细胞与 10μM 供试 化合物在 37℃下温育 24 小时， 随后洗涤 3 次， 然后记录。将 cAMP- 和染料木素 - 介导的化 合物 - 处置细胞 ISC 正常化为 27℃和 37℃对照， 以活性百分比表示。与 37℃对照相比， 细胞用纠正化合物预温育显著增加 cAMP- 和染料木素 - 介导的 ISC。

    [1680] 强化化合物的鉴别

    [1681] 典型的方案采用基底外侧至顶端膜 Cl- 浓度梯度。为了建立这种梯度， 对基底外 侧膜使用正常的套环， 用制霉菌素 (360μg/ml) 可渗透化， 而顶端 NaCl 被等摩尔葡糖酸钠 代替 ( 用 NaOH 滴定至 pH 7.4)， 得到跨越上皮的大幅 Cl 浓度梯度。所有实验均是在制霉 菌素可渗透化后 30 分钟进行的。向细胞培养插件两侧加入福司扣林 (10μM) 和所有供试 化合物。比较假定 ΔF508-CFTR 强化剂与已知强化剂染料木素的功效。

    [1682] 溶液

    [1683] 基 底 外 侧 溶 液 (mM) ： NaCl(135)， CaCl2(1.2)， MgCl2(1.2)， K2HPO4(2.4)， KHPO4(0.6)， N-2- 羟基乙基哌嗪 -N′ -2- 乙磺酸 (HEPES)(10)， 葡萄糖 (10)。用 NaOH 滴定 溶液至 pH 7.4。

    [1684] 顶端溶液 (mM) ： 与基底外侧溶液相同， NaCl 用葡糖酸钠 (135) 代替。

    [1685] 细胞培养

    [1686] 使用表达 ΔF508-CFTR(FRTΔF508-CFTR) 的 Fisher 大鼠上皮 (FRT) 细胞， 对从我们的 光学测定法鉴别的假定 ΔF508-CFTR 调控剂进行 Ussing 室实验。在 Costar Snapwe11 细 在 Coon 氏改性 Ham 氏 F-12 培养基中培养 胞培养插件上培养细胞， 在 37℃下和 5％ CO2 中， 5 天， 其中补充有 5％胎牛血清、 100U/ml 青霉素和 100μg/ml 链霉素。 在用于鉴定化合物的 强化性质之前， 将细胞在 27℃下温育 16-48 小时， 以纠正 ΔF508-CFTR。为了测定纠正化合 物的活性， 在 27℃或 37℃下将细胞用和不用化合物温育 24 小时。

    [1687] 2. 全细胞记录

    [1688] 利 用 开 孔 - 碎 片 全 细 胞 记 录， 监测经过温度和供试化合物纠正的稳定表达 ΔF508-CFTR 的 NIH3T3 细胞中的宏观 ΔF508-CFTR 电流 (IΔF508)。 简而言之， 利用 Axopatch 200B 碎片 - 箝放大器 (Axon Instruments Inc.， Foster City， CA)， 在室温下进行 IΔF508 的 电压箝记录。在 10kHz 的取样频率下获取所有记录， 在 1kHz 下低通滤波。吸移管在充满 细胞内溶液时具有 5-6MΩ 的电阻。在这些记录条件下， 计算室温下的 Cl- 反向电位 (ECl) 为 -28mV。所有记录具有＞ 20GΩ 的密封电阻和＜ 15MΩ 的串联电阻。利用装有 Digidata 1320 A/D 界面和 Clampex 8(Axon Instruments Inc.) 的 PC 进行脉冲发生、 数据获取和分 析。浴液含有＜ 250μL 盐水， 利用重力灌注系统连续灌注， 速率 2ml/min。

    [1689] 纠正化合物的鉴别

    [1690] 为了测定纠正化合物增加质膜中功能性 ΔF508-CFTR 密度的活性， 我们利用上 述开孔 - 碎片 - 记录技术测量纠正化合物处理 24 小时后的电流密度。为了充分活化 ΔF508-CFTR， 向细胞加入 10μM 福司扣林和 20μM 染料木素。 在我们的记录条件下， 在 27℃ 下温育 24 小时后的电流密度高于在 37℃下温育 24 小时后的观测值。 这些结果与低温温育 对质膜中 ΔF508-CFTR 密度的已知影响是一致的。为了测定纠正化合物对 CFTR 电流密度 的影响， 将细胞与 10μM 供试化合物在 37℃下温育 24 小时， 与 27℃和 37℃对照比较电流密 度 ( 活性％ )。在记录之前， 将细胞用细胞外记录介质洗涤 3 次， 以除去任何剩余的供试化 合物。与 37℃对照相比， 用 10μM 纠正化合物预温育显著增加 cAMP- 和染料木素 - 依赖性 电流。

    [1691] 强化化合物的鉴别也 利 用 开 孔 - 碎 片 - 记 录 技 术 研 究 了 ΔF508-CFTR 强 化 剂 增 加 稳 定 表 达 ΔF508-CFTR 的 NIH3T3 细胞中宏观 ΔF508-CFTR Cl- 电流 (IΔF508) 的能力。从光学测定法 鉴别的强化剂引起 IΔF508 的剂量 - 依赖性增加， 效力和功效与光学测定法相似。 在所有所检 查的细胞中， 强化剂施加之前和期间的反向电位为 -30mV 左右， 它是所计算的 ECl(-28mV)。

    [1693] 溶液

    [1694] 细 胞 内 溶 液 (mM) ： Cs- 天 冬 氨 酸 盐 (90)， CsCl(50)， MgCl2(1)， HEPES(10) 和 240μg/ml 两性霉素 -B( 用 CsOH 调节 pH 至 7.35)。

    [1695] 细 胞 外 溶 液 (mM) ： N- 甲 基 -D- 葡 糖 胺 (NMDG)-Cl(150)， MgCl2(2)， CaCl2(2)， HEPES(10)( 用 HCl 调节 pH 至 7.35)。

    [1696] 细胞培养

    [1697] 使用稳定表达 ΔF508-CFTR 的 NIH3T3 小鼠成纤维细胞进行全细胞记录。 在 175cm2 培养烧瓶中， 将细胞供养在 37℃下、 在 5％ CO2 和 90％湿度中、 和 Dulbecco 氏改性 Eagle 氏 培养基中， 其中补充有 2mM 谷氨酰胺、 10％胎牛血清、 1X NEAA， β-ME、 1X 青霉素 / 链霉素和 25mM HEPES。就全细胞记录而言， 将 2,500-5,000 细胞接种在涂有聚 -L- 赖氨酸的玻璃盖 片上， 在 27℃下培养 24-48 小时， 然后用于测试强化剂活性 ； 用或不用纠正化合物在 37℃下 温育， 用于测量纠正剂的活性。

    [1698] 3. 单通道记录

    [1699] 利用所切除的内侧外翻膜碎片观察在 NIH3T3 细胞中稳定表达的经过温度纠正的 ΔF508-CFTR 的单通道活动和强化化合物的活性。 简而言之， 利用 Axopatch 200B 碎片 - 箝 放大器 (Axon Instruments Inc.)， 在室温下进行单通道活动的电压箝记录。在 10kHz 的 取样频率下获取所有记录， 在 400Hz 下低通滤波。将碎片吸移管改造成 Corning Kovar Sealing #7052 玻璃 (World Precision Instruments， Inc.， Sarasota， FL)， 在充满细胞外 溶液时具有 5-8MΩ 的电阻。在切除后加入 1mMMg-ATP 和 75nM cAMP- 依赖性蛋白激酶催化 性亚单位 (PKA ； Promega Corp.Madison， WI)， 活化 ΔF508-CFTR。通道活动稳定后， 利用重 力微量灌注系统灌注碎片。 将流入物置于碎片附近， 导致 1-2 秒内溶液交换完全。 为了维持 迅速灌注期间的 ΔF508-CFTR 活性， 向浴溶液加入非特异性磷酸酶抑制剂 F-(10mM NaF)。 在这些记录条件下， 通道活动在整个碎片记录期间 ( 长达 60 分钟 ) 保持恒定。由正电荷从 细胞内溶液向细胞外溶液运动 ( 阴离子向相反方向运动 ) 所产生的电流以正电流显示。吸 移管电位 (Vp) 维持在 80mV。

    [1700] 分析含有≤ 2 个活动通道的膜碎片的通道活动。在实验过程期间同时开放的最 大数量决定了活动通道的数量。为了测定单通道电流幅度， 在 100Hz 下 “离线” 过滤从 120 秒 ΔF508-CFTR 活性记录的数据， 然后用于构建全点幅度直方图， 利用 Bio-Patch 分析软件 (Bio-Logic Comp.France) 带入多高斯函数。从 120 秒通道活动测定总微观电流和开放概 率 (P0)。P0 是利用 Bio-Patch 软件或者从 P0 ＝ I/i(N) 测定的， 其中 I ＝平均电流， i ＝单 通道电流幅度， N ＝碎片中活动通道的数量。

    [1701] 溶液

    [1702] 细胞外溶液 (mM) ： NMDG(150)， 天冬氨酸 (150)， CaCl2(5)， MgCl2(2) 和 HEPES(10) ( 用 Tris 碱调节 pH 至 7.35)。

    [1703] 细胞内溶液 (mM) ： NMDG-Cl(150)， MgCl2(2)， EGTA(5)， TES(10) 和 Tris 碱 (14)( 用HCl 调节 pH 至 7.35)。

    [1704] 细胞培养

    [1705] 使用稳定表达 ΔF508-CFTR 的 NIH3T3 小鼠成纤维细胞进行切除膜碎片箝记录。 2 在 175cm 培养烧瓶中， 将细胞供养在 37℃下、 在 5％ CO2 和 90％湿度中、 和 Dulbecco 氏改 性 Eagle 培养基中， 其中补充有 2mM 谷氨酰胺、 10％胎牛血清、 1X NEAA， β-ME、 1X 青霉素 / 链霉素和 25mMHEPES。 就单通道记录而言， 将 2,500-5,000 细胞接种在涂有聚 -L- 赖氨酸的 玻璃盖片上， 在 27℃下培养 24-48 小时备用。

    [1706] 本发明化合物可用作 ATP 结合弹夹转运蛋白的调控剂。下表 3 阐述表 1 中某些实 施方式的 EC50 和相对功效。

    [1707] 下表 3 中， 适用下列含义 ：

    [1708] EC50 ： “+++” 表示＜ 10μM ； “++” 表示 10μM 至 25μM ； “+” 表示 25μM 至 60μM。

    [1709] ％功效 ： “+” 表示＜ 25％ ； “++” 表示 25％至 100％ ； “+++” 表示＞ 100％

    [1710] 表3

    [1711] 253