一种多孔七肽自组装微球的制备方法
技术领域
本发明属于多肽自组装领域，特别涉及一种多孔七肽自组装微球的制备方法。
背景技术
多肽是生物体内固有的生物活性大分子，由多种氨基酸按照一定的排列顺序通过肽键结合而成。由于多肽链段上氨基酸残基具有不同的化学结构,多肽可以利用其肽键间氢键作用以及氨基酸残基之间的氢键作用、静电作用、疏水性作用以及π-π堆积作用等有效实现分子自组装。多肽自组装是指在适当条件下氨基酸残基之间通过非共价键相互作用自发组合形成的一类结构明确、构造稳定、具有某种理化性能的分子聚集体或超分子结构。由于多肽是生物体内各种细胞功能的生物活性物质、具有良好的生物相容性和可控的降解性,相对于其他自组装体系,多肽的自组装有着更为广阔的应用前景,尤其是在组织工程、基因治疗等生物医学领域。
但是，多肽自组装不具备很多无机功能材料的优异性能(如电子，光学，催化等)，这在很大程度上限制了它的应用。用多肽自组装的生物或仿生模块结合具有独特的电子，光学，催化等性能的无机功能材料(如纳米晶体，纳米颗粒和多金属氧酸盐(POMS))，为提高生物纳米材料的性能和开发新的功能提供了一种很好的途径。多年来，在多肽与功能无机材料的组合方面已取得相当大的进展，开发出来了具有光学性质、生物成像功能、和包覆性能等多功能材料。此外，由于在储能、有效催化和药物载体等方面具有很大的应用潜在应用，自组装多孔材料也越来越受到研究者们的关注。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种多孔七肽自组装微球的制备方法，该方法操作简单、反应条件温和，所使用的原材料无毒无污染，生物相容性好。
本发明的一种多孔七肽自组装微球的制备方法，包括：
(1)将七肽7AAP溶于1,1,1,3,3,3,-六氟-2-丙醇溶液中，磷钨酸PTA溶于蒸馏水中，超声；其中，7AAP的溶度为0.03～0.48M，PTA的溶度为0.025×10-3～0.8×10-3M；
(2)室温下，取1～10mL步骤(1)中的PTA水溶液加入到10～100μL步骤(1)中的7AAP中，震荡，静置，得到自组装溶液；
(3)将步骤(2)中的自组装溶液放入透析袋，置于去离子水中透析12h，取出至离心管中静置30天，冷冻干燥，得到多孔7AAP/PTA自组装微球。
所述步骤(1)中七肽7AAP的序列为Ile-Gln-Ser-Pro-His-Phe-Phe。
所述步骤(1)中所述的PTA结构为Keggin-type结构。
所述步骤(1)中PTA溶液的pH范围为1～6。
所述步骤(1)中超声时间为60s。
步骤(2)的反应容器为EP管。
所述步骤(2)中静置的时间为2～12h。
所述步骤(3)中透析时内液为自组装反应液，外液为中性去离子水。
所述步骤(3)中透析的时间为4-24h。
所述步骤(3)中静置的时间为30天以上。
步骤(3)中透析后，在EP管中静置。
有益效果
(1)本发明的操作简便、反应条件温和，所使用的原材料无毒无污染，具有优良的生物相容性；
(2)本发明制备的多孔微球分散性好，粒径较均一，形态较规整；
(3)本发明可以对微球的粒径进行有效的控制。
附图说明
图1为实施例1中7AAP/PTA多孔微球的SEM图；
图2为实施例1中7AAP/PTA多孔微球的TEM图；
图3为实施例1中的紫外分光光谱图；其中，(a)为PTA的紫外分光光谱图；(b)为7AAP/PTA多孔微球的紫外分光光谱图；(c)为7AAP的紫外分光光谱图。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1
(1)配制7AAP溶液：将0.010g7AAP在室温下溶解于盛有100μL1,1,1,3,3,3,-六氟-2-丙醇的EP管中，0.22μm的疏水滤头过滤；
(2)配制PTA溶液；将0.0065gPTA溶解于盛有50ml蒸馏水的EP管中，超声60s；调节pH至2；
(3)制备7AAP/PTA复合水凝胶微球：用移液枪吸取1.0mLPTA溶液加入盛有10.0μL7AAP溶液的EP管中，用手轻微震荡，静置4h；
(4)把(3)中的自组装反应液放入透析袋中，在中性去离子水中透析12h，取出至EP管中静置30天，冷冻干燥。
实施例2
(1)配制7AAP溶液：将0.020g7AAP在室温下溶解于盛有100μL1,1,1,3,3,3,-六氟-2-丙醇的EP管中，0.22μm的疏水滤头过滤；
(2)配制PTA溶液；将0.0065gPTA溶解于盛有50mL蒸馏水的EP管中，超声60s；调节pH至2；
(3)制备7AAP/PTA复合水凝胶微球：用移液枪吸取1.0mLPTA溶液加入盛有10.0μL7AAP溶液的EP管中，用手轻微震荡，静置4h；
(4)把(3)中的自组装反应液放入透析袋中，在中性去离子水中透析12h，取出至EP管中静置30天，冷冻干燥。
实施例3
(1)配制7AAP溶液：将0.030g7AAP在室温下溶解于盛有100μL1,1,1,3,3,3,-六氟-2-丙醇的EP管中，0.22μm的疏水滤头过滤；
(2)配制PTA溶液；将0.0065gPTA溶解于盛有50mL蒸馏水的EP管中，超声60s；调节pH至2；
(3)制备7AAP/PTA复合水凝胶微球：用移液枪吸取1.0mLPTA溶液加入盛有10.0μL7AAP溶液的EP管中，用手轻微震荡，静置4h；
(4)把(3)中的自组装反应液放入透析袋中，在中性去离子水中透析12h，取出至EP管中静置30天，冷冻干燥。
实施例4
(1)配制7AAP溶液：将0.040g7AAP在室温下溶解于盛有100μL1,1,1,3,3,3,-六氟-2-丙醇的EP管中，0.22μm的疏水滤头过滤；
(2)配制PTA溶液；将0.0065gPTA溶解于盛有50mL蒸馏水的EP管中，超声60s；调节pH至2。
(3)制备7AAP/PTA复合水凝胶微球：用移液枪吸取1.0mLPTA溶液加入盛10.0μL 7AAP溶液的EP管中，用手轻微震荡，静置4h。
(4)把(3)中的自组装反应液放入透析袋中，在中性去离子水中透析12h，取出至EP管中静置30天，冷冻干燥。