一种从红景天中提取红景天苷的方法.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201410450304.8

申请日:

2014.09.04

公开号:

CN104173416A

公开日:

2014.12.03

当前法律状态:

公开

有效性:

审中

法律详情:

公开

IPC分类号:

A61K36/41; A61P39/00; A61P39/06; A61P35/00; A61P17/16

主分类号:

A61K36/41

申请人:

南京标科生物科技有限公司

发明人:

张金芳; 杨存

地址:

210046 江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边东108号1幢701室

优先权:

专利代理机构:

代理人:

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内容摘要

本发明涉及一种从红景天中提取红景天苷的方法,其处理步骤包括:以天然红景天为原料,干燥粉碎,过80目筛,得红景天粉末;生物酶酶解;微波辅助提取;大孔吸附树脂纯化;结晶。本发明以红景天为原料,采用生物酶酶解和微波联用,破坏植物的细胞壁,使细胞内的有效成分充分溶出,提高了有效成分的提取率,具有反应条件温和、速度快、耗能低、质量好、省时、无污染等优点,另一方面,微波辅助提取具有提取液蛋白质杂质含量少的优点,适用于工业化生产。

权利要求书

1.   一种从红景天中提取红景天苷的方法,其特征在于,包括以下步骤:
a.以天然红景天为原料,干燥粉碎,过80目筛,得红景天粉末;
b.向红景天粉末中加入10~15倍的PH4.0~5.0醋酸钠/醋酸缓冲溶液,采用生物酶酶解,按原料0.3~1%的用量,于45~55℃进行酶解2~3h;
c.将酶转化后的物料置于微波中,微波功率为200~300W,时间为90~120s,离心,取上清液,浓缩,得粗提物;
d.将步骤c所得的粗提物加水溶解,用大孔吸附树脂吸附纯化,再用粗提物10~15倍的60~80%的乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,得红景天苷粗品;
e.取红景天粗品用有机溶剂重结晶2次,得红景天纯品。

2.
   根据权利要求1所述的一种从红景天中提取红景天苷的方法,其特征在于:步骤b中所述的生物酶为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶中的两种或三种。

3.
   根据权利要求1和2所述的一种从红景天中提取红景天苷的方法,其特征在于:步骤b中所述的生物酶的比例为1:1或1:1:1。

4.
   根据权利要求1所述的一种从红景天中提取红景天苷的方法,其特征在于:步骤d中所述的大孔吸附树脂型号为AB-8、D-101、HZ-816等。

5.
   根据权利要求1所述的一种从红景天中提取红景天苷的方法,其特征在于:步骤e中所述的有机溶剂为甲醇或无水乙醇。

说明书

一种从红景天中提取红景天苷的方法
技术领域
本发明属于植物深加工技术领域,涉及一种从红景天中提取红景天苷的方法,尤其涉及一种利用酶解-微波提取红景天苷的方法。
背景技术
红景天属于被子植物门蔷薇目景天科红景天属,为多年生草本或亚灌木野生植物,其资源丰富,品种繁多,在我国主要分布在东北、甘肃、新疆、四川、西藏及云南、贵州等地。红景天具有很强的生命力和特殊的适应性,属于天然珍贵药用植物。红景天苷是红景天中的主要有效成分,也是评价红景天及其提取物的最重要指标。现代药理学研究表明,红景天苷具有消除疲劳、抗缺氧、抗肿瘤、抗衰老、抗微波辐射等作用,能够对神经系统、类分泌系统起到调节和双向调节作用,能够改善心血管系统、保护脏器、影响三大物质代谢。此外,红景天苷还具有调节机体免疫及适应原样等作用,被称为继人参、刺五加之后的新一代极具发展潜力的环境适应性药物,在军事医学、航空医学、运动保健医学等领域均具有十分重要的应用价值。因此,红景天苷的提纯工艺优化研究意义重大,有广阔的应用前景。
目前,国内外学者对红景天的化学成分、药理作用、主要有效成分的结构鉴定有较为深入的研究,但对其提取纯化工艺的研究还处于初始阶段。常用的提取方法主要有浸泡或热回流法,这些方法提取时间长、溶剂用量大、提取率低且操作复杂。本发明采用生物酶与微波相结合的技术,可加速有效成分的溶出、缩短提取时间、提高产物得率,具有操作简便、无污染等优点。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的不足,提供一种提取高收率、高纯度红景天苷的方法,该方法具有工艺简单、易操作、反应条件温和、提取率高、产品品质佳的优点,易于实现工业化生产。
本发明包括以下步骤:
a.以天然红景天为原料,干燥粉碎,过80目筛,得红景天粉末;
b.向红景天粉末中加入10~15倍的PH4.0~5.0醋酸钠/醋酸缓冲溶液,采用生物酶酶解,按原料0.3~1%的用量,于45~55℃进行酶解2~3h;
c.将酶转化后的物料置于微波中,微波功率为200~300W,时间为90~120s,离心,取上清液,浓缩,得粗提物;
d.将步骤c所得的粗提物加水溶解,用大孔吸附树脂吸附纯化,再用粗提物10~15倍的60~80%的乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,得红景天苷粗品;
e.取红景天粗品用有机溶剂重结晶2次,得红景天纯品。
步骤b中所述的生物酶为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶中的两种或三种。
步骤b中所述的生物酶的比例为1:1或1:1:1。
步骤d中所述的大孔吸附树脂型号为AB-8、D-101、HZ-816等。
步骤e中所述的有机溶剂为甲醇或无水乙醇。
本发明的有益效果在于:生物酶结合微波法提取红景天苷是一种利用现代生物技术和物理技术有机结合进行实验的方法,具有提取率高、工艺简单、条件温和等特点。其中生物酶首先破坏了构成细胞壁和细胞质的纤维素、半纤维素和果胶质,使其疏松、膨胀、崩溃,从而增大了有效成分的扩散面积,减小了传质阻力,提高了有效成分的得率。再辅以微波的高能作用,使样品介质内各点受到的作用一致,降低目标物与样品基体的结合力,加速目标物从固相进入溶剂的过程。
下面将结合具体实施方式进一步说明本发明,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
实施例1:
以天然红景天为原料,干燥粉碎,过80目筛,得红景天粉末,取粉末500g加入10倍的PH4.0醋酸钠/醋酸缓冲溶液,纤维素酶和果胶酶以1:1,按原料0.3%的用量,于55℃进行酶解3h;将酶转化后的物料置于微波中,微波功率为200W,时间为90s,离心,取上清液,浓缩,得粗提物;将所得的粗提物加水溶解,用大孔吸附树脂AB-8吸附纯化,再用粗提物10倍的60%的乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,得红景天苷粗品,用甲醇重结晶2次,得红景天纯品5.4g,纯度为96.5%。
实施例2:
以天然红景天为原料,干燥粉碎,过80目筛,得红景天粉末,取粉末500g加入15倍的PH5.0醋酸钠/醋酸缓冲溶液,纤维素酶和半纤维素酶以1:1,按原料1.0%的用量,于45℃进行酶解2h;将酶转化后的物料置于微波中,微波功率为250W,时间为120s,离心,取上清液,浓缩,得粗提物;将所得的粗提物加水溶解,用大孔吸附树脂D-101吸附纯化,再用粗提物15倍的80%的乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,得红景天苷粗品,用无水乙醇重结晶2次,得红景天纯品5.2g,纯度为98.4%。
实施例3:
以天然红景天为原料,干燥粉碎,过80目筛,得红景天粉末,取粉末500g加入12倍的PH4.5醋酸钠/醋酸缓冲溶液,纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶以1:1:1,按原料0.5%的用量,于50℃进行酶解2.5h;将酶转化后的物料置于微波中,微波功率为300W,时间为100s,离心,取上清液,浓缩,得粗提物;将所得的粗提物加水溶解,用大孔吸附树脂HZ-816吸附纯化,再用粗提物12倍的70%的乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,得红景天苷粗品,用无水乙醇重结晶2次,得红景天纯品5.5g,纯度为97.3%。

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1、10申请公布号CN104173416A43申请公布日20141203CN104173416A21申请号201410450304822申请日20140904A61K36/41200601A61P39/00200601A61P39/06200601A61P35/00200601A61P17/1620060171申请人南京标科生物科技有限公司地址210046江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边东108号1幢701室72发明人张金芳杨存54发明名称一种从红景天中提取红景天苷的方法57摘要本发明涉及一种从红景天中提取红景天苷的方法,其处理步骤包括以天然红景天为原料,干燥粉碎,过80目筛,得红景天粉末;生物酶。

2、酶解;微波辅助提取;大孔吸附树脂纯化;结晶。本发明以红景天为原料,采用生物酶酶解和微波联用,破坏植物的细胞壁,使细胞内的有效成分充分溶出,提高了有效成分的提取率,具有反应条件温和、速度快、耗能低、质量好、省时、无污染等优点,另一方面,微波辅助提取具有提取液蛋白质杂质含量少的优点,适用于工业化生产。51INTCL权利要求书1页说明书2页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书2页10申请公布号CN104173416ACN104173416A1/1页21一种从红景天中提取红景天苷的方法,其特征在于,包括以下步骤A以天然红景天为原料,干燥粉碎,过80目筛,得红景天粉末;B。

3、向红景天粉末中加入1015倍的PH4050醋酸钠/醋酸缓冲溶液,采用生物酶酶解,按原料031的用量,于4555进行酶解23H;C将酶转化后的物料置于微波中,微波功率为200300W,时间为90120S,离心,取上清液,浓缩,得粗提物;D将步骤C所得的粗提物加水溶解,用大孔吸附树脂吸附纯化,再用粗提物1015倍的6080的乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,得红景天苷粗品;E取红景天粗品用有机溶剂重结晶2次,得红景天纯品。2根据权利要求1所述的一种从红景天中提取红景天苷的方法,其特征在于步骤B中所述的生物酶为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶中的两种或三种。3根据权利要求1和2所述的一种从红景天中提取红景。

4、天苷的方法,其特征在于步骤B中所述的生物酶的比例为11或111。4根据权利要求1所述的一种从红景天中提取红景天苷的方法,其特征在于步骤D中所述的大孔吸附树脂型号为AB8、D101、HZ816等。5根据权利要求1所述的一种从红景天中提取红景天苷的方法,其特征在于步骤E中所述的有机溶剂为甲醇或无水乙醇。权利要求书CN104173416A1/2页3一种从红景天中提取红景天苷的方法技术领域0001本发明属于植物深加工技术领域,涉及一种从红景天中提取红景天苷的方法,尤其涉及一种利用酶解微波提取红景天苷的方法。背景技术0002红景天属于被子植物门蔷薇目景天科红景天属,为多年生草本或亚灌木野生植物,其资源丰。

5、富,品种繁多,在我国主要分布在东北、甘肃、新疆、四川、西藏及云南、贵州等地。红景天具有很强的生命力和特殊的适应性,属于天然珍贵药用植物。红景天苷是红景天中的主要有效成分,也是评价红景天及其提取物的最重要指标。现代药理学研究表明,红景天苷具有消除疲劳、抗缺氧、抗肿瘤、抗衰老、抗微波辐射等作用,能够对神经系统、类分泌系统起到调节和双向调节作用,能够改善心血管系统、保护脏器、影响三大物质代谢。此外,红景天苷还具有调节机体免疫及适应原样等作用,被称为继人参、刺五加之后的新一代极具发展潜力的环境适应性药物,在军事医学、航空医学、运动保健医学等领域均具有十分重要的应用价值。因此,红景天苷的提纯工艺优化研究。

6、意义重大,有广阔的应用前景。0003目前,国内外学者对红景天的化学成分、药理作用、主要有效成分的结构鉴定有较为深入的研究,但对其提取纯化工艺的研究还处于初始阶段。常用的提取方法主要有浸泡或热回流法,这些方法提取时间长、溶剂用量大、提取率低且操作复杂。本发明采用生物酶与微波相结合的技术,可加速有效成分的溶出、缩短提取时间、提高产物得率,具有操作简便、无污染等优点。发明内容0004本发明的目的是针对现有技术的不足,提供一种提取高收率、高纯度红景天苷的方法,该方法具有工艺简单、易操作、反应条件温和、提取率高、产品品质佳的优点,易于实现工业化生产。0005本发明包括以下步骤A以天然红景天为原料,干燥粉。

7、碎,过80目筛,得红景天粉末;B向红景天粉末中加入1015倍的PH4050醋酸钠/醋酸缓冲溶液,采用生物酶酶解,按原料031的用量,于4555进行酶解23H;C将酶转化后的物料置于微波中,微波功率为200300W,时间为90120S,离心,取上清液,浓缩,得粗提物;D将步骤C所得的粗提物加水溶解,用大孔吸附树脂吸附纯化,再用粗提物1015倍的6080的乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,得红景天苷粗品;E取红景天粗品用有机溶剂重结晶2次,得红景天纯品。0006步骤B中所述的生物酶为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶中的两种或三种。0007步骤B中所述的生物酶的比例为11或111。0008步骤D中所述的大。

8、孔吸附树脂型号为AB8、D101、HZ816等。说明书CN104173416A2/2页40009步骤E中所述的有机溶剂为甲醇或无水乙醇。0010本发明的有益效果在于生物酶结合微波法提取红景天苷是一种利用现代生物技术和物理技术有机结合进行实验的方法,具有提取率高、工艺简单、条件温和等特点。其中生物酶首先破坏了构成细胞壁和细胞质的纤维素、半纤维素和果胶质,使其疏松、膨胀、崩溃,从而增大了有效成分的扩散面积,减小了传质阻力,提高了有效成分的得率。再辅以微波的高能作用,使样品介质内各点受到的作用一致,降低目标物与样品基体的结合力,加速目标物从固相进入溶剂的过程。0011下面将结合具体实施方式进一步说明。

9、本发明,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。0012具体实施方式实施例1以天然红景天为原料,干燥粉碎,过80目筛,得红景天粉末,取粉末500G加入10倍的PH40醋酸钠/醋酸缓冲溶液,纤维素酶和果胶酶以11,按原料03的用量,于55进行酶解3H;将酶转化后的物料置于微波中,微波功率为200W,时间为90S,离心,取上清液,浓缩,得粗提物;将所得的粗提物加水溶解,用大孔吸附树脂AB8吸附纯化,再用粗提物10倍的60的乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,得红景天苷粗品,用甲醇重结晶2次,得红景天纯品54G,纯度为965。0013实施例2以天然红景天为原料,干燥粉碎,过80目筛,得红景天粉末,。

10、取粉末500G加入15倍的PH50醋酸钠/醋酸缓冲溶液,纤维素酶和半纤维素酶以11,按原料10的用量,于45进行酶解2H;将酶转化后的物料置于微波中,微波功率为250W,时间为120S,离心,取上清液,浓缩,得粗提物;将所得的粗提物加水溶解,用大孔吸附树脂D101吸附纯化,再用粗提物15倍的80的乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,得红景天苷粗品,用无水乙醇重结晶2次,得红景天纯品52G,纯度为984。0014实施例3以天然红景天为原料,干燥粉碎,过80目筛,得红景天粉末,取粉末500G加入12倍的PH45醋酸钠/醋酸缓冲溶液,纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶以111,按原料05的用量,于50进行酶解25H;将酶转化后的物料置于微波中,微波功率为300W,时间为100S,离心,取上清液,浓缩,得粗提物;将所得的粗提物加水溶解,用大孔吸附树脂HZ816吸附纯化,再用粗提物12倍的70的乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩,得红景天苷粗品,用无水乙醇重结晶2次,得红景天纯品55G,纯度为973。说明书CN104173416A。

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