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1、10申请公布号CN104083477A43申请公布日20141008CN104083477A21申请号201410266337722申请日20140616A61K36/74200601A61P35/00200601A61K125/0020060171申请人南京泽朗医药科技有限公司地址210046江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边108号05幢6楼72发明人刘东锋杨成东54发明名称一种鸡屎藤提取物的制备方法及其应用57摘要本发明公开了一种鸡屎藤提取物的制备方法及其抗肿瘤应用。制备方法包括以下步骤取鸡屎藤干燥根茎粉碎，加入原料46倍的7080的甲醇溶液，连续逆流超声提取12次，提取液浓缩后加入到大孔。
2、吸附树脂中吸附，先用23BV的蒸馏水洗脱，再用46BV的7080的甲醇洗脱，收集洗脱液浓缩干燥即得鸡屎藤提取物。本发明具有工艺简单、得率高。可连续操作等优点。经药效学评价，所得鸡屎藤提取物对肿瘤细胞的生长具有明显的抑制作用。将鸡屎藤提取物与医学上可接受的辅料一起制成抗肿瘤的药物，药物的剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、合剂、口服液中的一种。51INTCL权利要求书1页说明书3页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页10申请公布号CN104083477ACN104083477A1/1页21一种鸡屎藤提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤取鸡屎藤干燥根茎。
3、粉碎，置于连续逆流超声提取器中，加入原料46倍的7080的甲醇溶液，控温5060，重复提取12次，每次90120MIN；提取液浓缩后加入到大孔吸附树脂中吸附，先用23BV的蒸馏水洗脱，再用46BV的7080的甲醇洗脱，收集洗脱液浓缩干燥即得鸡屎藤提取物。2根据权利要求1所述的一种鸡屎藤提取物的制备方法，其特征在于，所述的大孔吸附树脂可选AB8、HPD100、D101中的一种。3根据权利要求12所述方法制备的鸡屎藤提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。权利要求书CN104083477A1/3页3一种鸡屎藤提取物的制备方法及其应用技术领域0001本发明属于医药领域，具体涉及一种鸡屎藤提取物的制备方法及其。
4、应用。背景技术0002鸡屎藤为茜草科鸡屎藤属蔓生草本植物，药食兼用，其又名鸡矢藤、牛皮冻臭藤等，其味甘酸、性平，有祛风活血、消食化积、止痛消肿的功效。现在常用其根、叶、茎和果实的提取物具有治疗类风湿关节炎、牙痛、胸痛、痔疮、脾脏感染的作用，并作为利尿剂和催吐药使用，鸡矢藤新鲜叶还被用于熬汤及其他食物加工中。现代药理研究表明，鸡矢藤具有镇痛、镇静、抑菌消炎等作用。0003通过文献检索，国内尚未鸡屎藤提取物用于制备抗肿瘤药物。发明内容0004为满足临床需要，扩大用药品种，更好地治疗肿瘤疾病，本发明提供一种鸡屎藤提取物的制备方法及其抗肿瘤应用。0005为了实现上述目的，本发明的技术方案如下取鸡屎藤干。
5、燥根茎粉碎，置于连续逆流超声提取器中，加入原料46倍的7080的甲醇溶液，控温5060，重复提取12次，每次90120MIN；提取液浓缩后加入到大孔吸附树脂中吸附，先用23BV的蒸馏水洗脱，再用46BV的7080的甲醇洗脱，收集洗脱液浓缩干燥即得鸡屎藤提取物。0006所述的大孔吸附树脂可选AB8、HPD100、D101中的一种。0007鸡屎藤提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。0008通过体外肿瘤细胞体外抑制试验，观察鸡屎藤提取物的抗肿瘤作用，结果表明鸡屎藤提取物对腹水型S180、肝癌及黑色素瘤B16均有一定的抑制作用，具有显著抗癌活性，且其毒副作用小。0009本发明的有益效果通过以下实验得到了验。
6、证实验方法1、受试提取物鸡屎藤提取物2、细胞株腹水瘤细胞株S180、肝癌细胞株BEL7404及黑色素瘤细胞株B16。00103、给药剂量和方法鸡屎藤提取物组10MG/KG/天，灌胃给药，隔一天一次，共五天。0011阴性对照组10MG/KG/天，生理盐水肌注给药，隔一天一次，共五天。0012阳性对照组30MG/KG/天，5氟尿嘧啶肌注给药，隔一天一次，共五天。0013灌胃后2H，用HPLC检测血浆药物浓度。00144、种植瘤模型的建立与给药（1）皮下种植分别将上述细胞培养至90融合，收集细胞，取2106细胞悬液，注射至小鼠肋下皮下组织，于术后15天取材，称量瘤重。另取同样模型，观察30天，计算药。
7、物对说明书CN104083477A2/3页4模型动物存活率的影响。0015（2）脾内种植瘤肝转移模型取2106细胞悬液注射至小鼠脾包膜内，于术后15天取脾和肝脏，测量瘤重和肝转移数。0016（3）给药方式种植瘤细胞同时给药。00175、结果结果如表1、表2和表3显示，鸡屎藤提取物组用药均有不同程度的抑制肿瘤生长和转移的作用，可延长实验小鼠的生存期。0018表1鸡屎藤提取物对种植瘤的抑制作用（N20，S）表2鸡屎藤提取物对肿瘤肝转移发生率的影响（N20，）表3鸡屎藤提取物对实验小鼠生存率的影响（N20，）由表1、表2和表3可以看出，鸡屎藤提取物组用药抑制肿瘤生长、转移的效果与阳性对照组基本相当，。
8、可有效延缓实验小鼠的生存寿命，其效果明显优于对照组。0019本发明用于制备抗肿瘤药物时，将鸡屎藤提取物与医学上可接受的辅料一起制成抗肿瘤的药物，药物的剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、合剂、口服液中的一种。0020下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。说明书CN104083477A3/3页5具体实施方式0021实施例1鸡屎藤提取物的制备取1000G鸡屎藤干燥根茎粗粉，置于连续逆流超声提取器中，加入原料5倍的80的甲醇溶液，控温60，重复提取2次，每次120MIN；提取液浓缩后加入到AB8大孔吸附树脂中吸附，先用2BV的蒸馏水洗脱，再用6BV的75的甲醇洗脱，收集洗脱液浓缩干燥即得鸡屎藤提取物。0022实施例2片剂鸡屎藤提取物40G，淀粉140G，鹅去氧胆酸盐20G，制粒，压片制成1000片。服用方法成人一次1片，一日2次。0023实施例3胶囊鸡屎藤提取物40G，淀粉140G，壳聚糖20G，混匀，制成1000粒。服用方法成人一次1粒，一日2次。说明书CN104083477A。