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1、10申请公布号CN104083525A43申请公布日20141008CN104083525A21申请号201410266223222申请日20140616A61K36/815200601A61K125/0020060171申请人南京泽朗医药科技有限公司地址210046江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边108号05幢6楼72发明人刘东锋杨成东54发明名称一种从地骨皮中提取地骨皮总黄酮的方法57摘要本发明涉及一种从地骨皮中提取地骨皮总黄酮的方法，具体涉及一种酶解协同超声提取地骨皮总黄酮的方法。其处理步骤包括A地骨皮于60烘干、粉碎，过80目筛；B生物酶酶解；C超声波辅助提取；D过聚酰胺树脂柱，乙醇洗。
2、脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，即得地骨皮总黄酮。本发明以地骨皮为原料，充分利用酶解和超声波的叠加效果，提高地骨皮总黄酮的溶出率，从而提高了地骨皮总黄酮的得率。本发明具有工艺简单、提取时间短、反应条件温和等优点，对环境友好，同时也保证了地骨皮总黄酮的生物活性不被破坏，易于实现工业化生产。51INTCL权利要求书1页说明书2页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书2页10申请公布号CN104083525ACN104083525A1/1页21一种从地骨皮中提取地骨皮总黄酮的方法，其特征在于，包括以下步骤A地骨皮于60烘干、粉碎，过80目筛；B向上述原料中加入49倍的酸性乙。
3、醇溶液，再加入原料12（重量比）的生物酶，搅拌均匀；C置于频率为2040KHZ的超声波提取器中，控温在4560，提取90120MIN，80灭活10MIN，离心，取上清液；D将步骤C中的上清液加入适量的碱调PH值为中性，浓缩至无醇味，转入径高比为148、粒径为80100目的聚酰胺树脂柱，先用蒸馏水洗脱除去杂质，后用48BV的6080的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥至恒重，即得地骨皮总黄酮。2根据权利要求1所述的一种从地骨皮中提取地骨皮总黄酮的方法，其特征在于，步骤B中所述的酸性乙醇为PH4050的6070的乙醇溶液。3根据权利要求1所述的一种从地骨皮中提取地骨皮总黄酮的方法，其特征在于，步。
4、骤B中所述的生物酶为重量比0703的纤维素酶和蛋白酶的混合物。4根据权利要求1所述的一种从地骨皮中提取地骨皮总黄酮的方法，其特征在于，步骤D中所述的碱为碳酸钠、碳酸钾、氢氧化钾、氢氧化钠中的一种。权利要求书CN104083525A1/2页3一种从地骨皮中提取地骨皮总黄酮的方法技术领域0001本发明涉及一种从地骨皮中提取地骨皮总黄酮的方法，尤其涉及一种利用生物酶协同超声波提取地骨皮总黄酮的方法。背景技术0002地骨皮为茄科植物枸杞或宁夏枸杞的干燥根皮。味甘、寒，归肺、肝、肾经，具有凉血除蒸，清肺降火之功效，用于阴虚潮热、骨蒸盗汗、肺热咳嗽、咯血及内热消渴等症。现代药理研究表明地骨皮主要具有清除自。
5、由基、抗氧化等活性，这些作用和其中的黄酮类有效成分有关，因此，地骨皮中黄酮的提取具有重要的意义。0003目前，关于地骨皮总黄酮的提取的专利和文献较少，主要采用回流提取，该方法的缺点在于提取的总黄酮杂质多，收率低，溶剂消耗量大。0004酶工程技术是近年来一种新兴的技术，利用纤维素酶、果胶酶、蛋白酶等（主要是纤维素酶）破坏植物的细胞壁，以有利于有效成分最大限度溶出的一种方法因其处理条件温和，有效成分损失较小。再结合超声波的空化效应以及机械效应，从而使细胞中的有效成分得以释放直接与溶剂接触并溶解在其中，从而提高有效成分的提取率。发明内容0005本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种提取地骨皮总黄。
6、酮的方法，该方法具有工艺简单、易操作、提取时间短、提取率高、对环境友好等优点。0006本发明包括以下步骤A地骨皮于60烘干、粉碎，过80目筛；B向上述原料中加入49倍的酸性乙醇溶液，再加入原料12（重量比）的生物酶，搅拌均匀；C置于频率为2040KHZ的超声波提取器中，控温在4560，提取90120MIN，80灭活10MIN，离心，取上清液；D将步骤C中的上清液加入适量的碱调PH值为中性，浓缩至无醇味，转入径高比为148、粒径为80100目的聚酰胺树脂柱，先用蒸馏水洗脱除去杂质，后用48BV的6080的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥至恒重，即得地骨皮总黄酮。0007本发明步骤B中所述的酸。
7、性乙醇为PH4050的6070的乙醇溶液。0008本发明步骤B中所述的生物酶为重量比0703的纤维素酶和蛋白酶的混合物。0009本发明步骤D中所述的碱为碳酸钠、碳酸钾、氢氧化钾、氢氧化钠中的一种。0010本发明与现有技术相比，具有以下优点（1）总黄酮含量和收率较高本发明采用生物酶酶解，破坏细胞壁的致密结构，在结合超声波的空化作用，使有效成分最大限度的溶出，提高了总黄酮的提取率；（2）本发明采用聚酰胺树脂进行分离纯化，该树脂重复利用率高，价格便宜，使用与工业生产。说明书CN104083525A2/2页40011下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。。
8、0012具体实施方式实施例1地骨皮于60烘干、粉碎，过80目筛，取100G粉末，加入9倍的PH40的70的乙醇溶液，再加入原料1（重量比）的纤维素酶和蛋白酶（重量比为0703）的混合物，搅拌均匀，置于频率为20KHZ的超声波提取器中，控温在60，提取90MIN，80灭活10MIN，离心，取上清液，加入适量的氢氧化钠调PH值为中性，浓缩至无醇味，转入径高比为18、粒径为100目的聚酰胺树脂柱，先用蒸馏水洗脱除去杂质，后用4BV的80的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥至恒重，即得地骨皮总黄酮提取物128G，经UV检测，总黄酮的含量为718。0013实施例2地骨皮于60烘干、粉碎，过80目筛，取。
9、100G粉末，加入6倍的PH45的65的乙醇溶液，再加入原料15（重量比）的纤维素酶和蛋白酶（重量比为0703）的混合物，搅拌均匀，置于频率为40KHZ的超声波提取器中，控温在50，提取120MIN，80灭活10MIN，离心，取上清液，加入适量的碳酸钠调PH值为中性，浓缩至无醇味，转入径高比为16、粒径为80目的聚酰胺树脂柱，先用蒸馏水洗脱除去杂质，后用6BV的70的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥至恒重，即得地骨皮总黄酮提取物142G，经UV检测，总黄酮的含量为751。0014实施例3地骨皮于60烘干、粉碎，过80目筛，取100G粉末，加入4倍的PH50的60的乙醇溶液，再加入原料2（重量比）的纤维素酶和蛋白酶（重量比为0703）的混合物，搅拌均匀，置于频率为20KHZ的超声波提取器中，控温在45，提取110MIN，80灭活10MIN，离心，取上清液，加入适量的氢氧化钾调PH值为中性，浓缩至无醇味，转入径高比为14、粒径为100目的聚酰胺树脂柱，先用蒸馏水洗脱除去杂质，后用8BV的60的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥至恒重，即得地骨皮总黄酮提取物115G，经UV检测，总黄酮的含量为694。说明书CN104083525A。