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本发明属于药物制剂领域，本发明涉及一种吸入用乙酰半胱氨酸溶液及其制备方法；本发明溶液中加入生理海水，有效降低乙酰半胱氨酸溶液的致敏性。

1.  一种吸入用乙酰半胱氨酸溶液，其特征在于：其组分包括生理海水。

2.  根据权利要求1所述的溶液，其组分为乙酰半胱氨酸，抗氧化剂、pH调节剂、生理海水，注射用水。

3.  根据权利要求2所述的溶液，其特征在于：pH调节剂为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠。

4.  根据权利要求2所述的溶液，其特征在于：生理海水的用量为溶液总体积的10％～25％。

5.  根据权利要求2所述的溶液，，其特征在于：抗氧化剂为亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、EDTA或其药用盐。

6.  根据权利要求1-5任一项所述的溶液，该溶液的制备方法为：
(1)加入约总体积40％-50％的注射用水和约总体积10％-25％的生理海水，加热至沸，对配液罐及管道进行抽真空处理，充氮气使注射用水冷却至25℃-40℃，保持充氮状态；
(2)按处方量称取0％-0.03％(w/v)乙二胺四乙酸二钠，搅拌至完全溶解；
(5)按处方量准确称取10％-20％(w/v)的乙酰半胱氨酸，搅拌至完全溶解；
(6)按药液浓配体积加入0.1％(w/v)的活性炭，搅拌20分钟；
(7)用0.45μm的微孔滤膜进行粗滤后再用0.22μm的微孔滤膜过滤至可见异物合格；
(8)按处方量配制20％(w/w)的氢氧化钠溶液，调节pH值在6.0－7.5之间，加注射用水至全量，搅拌10分钟；
(9)中间体检查；
(10)充氮气，灌封于5ml的低硼硅棕色安瓿；
(11)检漏、灯检；
(12)抽样全检。

一种吸入用乙酰半胱氨酸溶液及其制备方法
技术领域
本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种吸入用乙酰半胱氨酸溶液及其制备方法。
背景技术
乙酰半胱氨酸(acetylcysteine，NAC)，化学名称为N-乙酰基-L-半胱氨酸，是L-半胱氨酸的乙酰化合物，其分子量是163.2，因其含有活跃的巯基(-SH)，在20世纪60年代初就作为祛痰药用于临床，是一种疗效好、安全性高的治疗呼吸道感染的祛痰药。其分子式如下：

乙酰半胱氨酸为作半胱氨酸衍生物，属粘痰溶解药，主要是通过分子中的巯基，使粘痰中的酸性糖蛋白多肽的二硫键(-S-S-)断裂，脓痰中DNA裂解，无论对白色粘痰或粘痰脓性痰，均能发挥强烈痰液溶解作用，从而使痰液粘稠度降低，易于咳出。乙酰半胱氨酸并非稳定分子，并且在溶液中及暴露于空气时被氧化和降解。
乙酰半胱氨酸不仅具有溶解粘液的作用，还具有较强的抗氧化作用和促进肺表面活性物质生成的作用。目前乙酰半胱氨酸的产品剂型有注射剂、泡腾片、胶囊剂、喷雾剂。
一种吸入用乙酰半胱氨酸溶液，商品名“FLUIMUCI”，药品说明书中不良反应中提到：吸入用乙酰半胱氨酸溶液全身用药时偶然出现机体过敏反应，如荨麻疹和罕见的支气管痉挛。喷雾药液对鼻咽和胃肠道有刺激，可出现鼻溢液、胃肠道刺激，如：口腔炎、恶心和呕吐的情况。在非常罕见的病例中已经报告，一些严重的皮肤反应，如Stevens-Johnson综合症和Lyell氏综合症等，其发生与乙酰半胱氨酸的给药有时间关系。在大多数病例中，能够发现至少一种更有可能涉及触发所报告皮肤粘膜综合症的共-可疑药物。
专利CN 1711998A公开了一种稳定、pH值接近中性的多规格乙酰半胱氨酸溶液及其制备方法，可供口服、喷雾、注射用。其组分特征在于含量达到90％-110％，pH为4.5-8.0，有关物质不大于5％。其组分中包括乙酰半胱氨酸100份，抗氧化剂0.3-3份，其中乙二胺四乙酸二钠0.2-3.0份、抗坏血酸0.3-3.0份、亚硫酸氢钠0.1-2.0份、L-半胱氨酸0.1-1.0份，pH调节剂为1-50份，其中盐酸0.3-10份、氢氧化钠8.0-30份、碳酸氢钠1.0-10份、磷酸二氢钠0.8-5.0份、磷酸氢二钠0.8-5.0份，渗透压调节剂为50-200份，葡萄糖或木糖醇30-180份、甘露醇5-50份、乳糖5-50份、氯化钠5-50份、山梨醇5-50份。
授权专利CN 101242824 B涉及新的溶液中的乙酰半胱氨酸组合物，该专利所述的组合物包含乙酰半胱氨酸，基本无或含有少于0.05％的螯合剂。且该组合物具有适用于静脉内注射或吸入并且还可以口服使用的pH值，pH值范围为6至8。
但现有发明均未提及降低吸入用乙酰半胱氨酸溶液的致敏性，
因而如何制备致敏性较低的乙酰半胱氨酸溶液是一个亟待攻克的难题。
发明内容
本发明目的是提供一种吸入用乙酰半胱氨酸溶液的制备方法。本发明发现，在制备吸入用乙酰半胱氨酸溶液时加入生理海水可以有效降低乙酰半胱氨酸溶液的致敏性。其有益效果见实施例6。
而本发明中使用的生理性海水为高渗盐水，不含抗生素、防腐剂、激素。这种经高科技提取，科学配方研制成的深海水含有大量的矿物质和海水微量元素(铜、锰、锌、银等)，其主要成分是0.9％的氯化钠海水溶液，因为它的渗透压值和正常人的血浆、组织液接近，与鼻腔兼容性良好。生理海水中含有银、锌、锰、铜等多种微量元素，其中锌和银被认为是“杀菌”，铜被认为是“消炎元素”，锰被认为是“抗过敏元素”，所以其还具有一定的杀菌，抗病毒作用，抗过敏作用，消炎作用。单纯使用生理性海水，在作为一种非药物治疗方法使用，可以改善症状，且本发明发现制备吸入用乙酰半胱氨酸溶液加入生理海水后疗效确切。
本发明药液的各项质量指标亦能在长时间存放后保持稳定，证明加了生理海水对药液的活性成分无影响，其有益效果见实施例4，5。
本发明吸入用乙酰半胱氨酸溶液其组分为乙酰半胱氨酸，抗氧化剂、pH调节剂、生理海水，注射用水。
生理海水的用量为溶液总体积的10％～25％
其中，pH调节剂为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠。
抗氧化剂为亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、EDTA或其药用盐。
该溶液的制备方法为：
(1)加入约总体积40％-50％的注射用水和约总体积10％-25％的生理海水，加热至沸，对配液罐及管道进行抽真空处理，充氮气使注射用水冷却至25℃-40℃，保持充氮状态；
(2)按处方量称取0％-0.03％(w/v)乙二胺四乙酸二钠，搅拌至完全溶解；
(5)按处方量准确称取10％-20％(w/v)的乙酰半胱氨酸，搅拌至完全溶解；
(6)按药液浓配体积加入0.1％(w/v)的活性炭，搅拌20分钟；
(7)用0.45μm的微孔滤膜进行粗滤后再用0.22μm的微孔滤膜过滤至可见异物合格；
(8)按处方量配制20％(w/w)的氢氧化钠溶液，调节pH值在6.0－7.5之间，加注射用水至全量，搅拌10分钟；
(9)中间体检查；
(10)充氮气，灌封于5ml的低硼硅棕色安瓿；
(11)检漏、灯检；
(12)抽样全检；
本发明发现，对罐体和管道进行抽真空充氮气后，可以制备出澄清、无色至浅紫色的药液，且各项质量指标符合规定的药液。在安瓿密封之前将惰性气体至于该溶液之上，利于药液的质量保证，提高药液的安全性
具体实施方式
以下实施案例用于进一步阐明本发明，但不限制本发明的范围：
实施例1：制备对照样品：不加生理海水的吸入用乙酰半胱氨酸溶液的制备(0.3g:3ml)
处方：乙酰半胱氨酸    10kg
乙二胺四乙酸二钠 25g
加注射用水至100000ml
制成                 20000支
制备工艺：
(1)加入约总体积60％-80％的注射用水，加热至沸，对配液罐及管道进行抽真空处理，充氮气使注射用水冷却至25℃-40℃，保持充氮状态；
(2)按处方量称取乙二胺四乙酸二钠，搅拌至完全溶解；
(3)按处方量准确称取乙酰半胱氨酸，搅拌至完全溶解；
(4)按药液浓配体积加入0.1％(w/v)的活性炭，搅拌20分钟；
(5)用0.45μm的微孔滤膜进行粗滤后再用0.22μm的微孔滤膜过滤至可见异物合格；
(6)用20％(w/w)的氢氧化钠调节pH值在6.0－7.5之间，加注射用水至全量，搅拌10分钟；
(7)中间体检查；
(8)灌封于5ml的低硼硅棕色安瓿；
(9)检漏、灯检；
(10)抽样全检；
实施例2：吸入用乙酰半胱氨酸溶液的制备(0.3g:3ml)之一：
处方：乙酰半胱氨酸       10kg
乙二胺四乙酸二钠         25g
生理海水          25000ml
加注射用水至100000ml
制成           20000支
制备工艺：
(1)加入约总体积40％-50％的注射用水和处方量的生理海水，加热至沸，对配液罐及管道进行抽真空处理，充氮气使注射用水冷却至25℃-40℃，保持充氮状态；
(2)按处方量称取乙二胺四乙酸二钠，搅拌至完全溶解；
(3)按处方量准确称取乙酰半胱氨酸，搅拌至完全溶解；
(4)按药液浓配体积加入0.1％(w/v)的活性炭，搅拌20分钟；
(5)用0.45μm的微孔滤膜进行粗滤后再用0.22μm的微孔滤膜过滤至可见异物合格；
(6)按处方量配制20％(w/w)的氢氧化钠溶液，调节pH值在6.0－7.5之间，加注射用水至全量，搅拌10分钟；
(7)中间体检查；
(8)充氮气，灌封于5ml的低硼硅棕色安瓿；
(9)115℃×30min条件灭菌
(10)检漏、灯检；
(11)抽样全检；
实施例3：吸入用乙酰半胱氨酸溶液的制备(0.3g:3ml)之二
处方：乙酰半胱氨酸       10kg
乙二胺四乙酸二钠         25g
生理海水10000ml
加注射用水至100000ml
制成             20000支
制备工艺：
(1)加入约总体积40％-50％的注射用水和处方量的生理海水，加热至沸，对配液罐及管道进行抽真空处理，充氮气使注射用水冷却至25℃-40℃，保持充氮状态；
(2)按处方量称取乙二胺四乙酸二钠，搅拌至完全溶解；
(3)按处方量准确称取乙酰半胱氨酸，搅拌至完全溶解；
(4)按药液浓配体积加入0.1％(w/v)的活性炭，搅拌20分钟；
(5)用0.45μm的微孔滤膜进行粗滤后再用0.22μm的微孔滤膜过滤至可见异物合格；
(6)按处方量配制20％(w/w)的氢氧化钠溶液，调节pH值在6.0－7.5之间，加注射用水至全量，搅拌10分钟；
(7)中间体检查；
(8)充氮气，灌封于5ml的低硼硅棕色安瓿；
(9)115℃×30min条件灭菌
(10)检漏、灯检；
(11)抽样全检；
实施例4：本发明吸入用乙酰半胱氨酸溶液与市售意大利赞邦生产的乙酰半胱氨酸溶液对比研究-低温冻融试验。
根据化学药物制剂研究技术指导原则，对本品进行了冻融试验。参考指导原则，试验设计为，取1批按实施例2制得的样品与市售意大利赞邦生产的乙酰半胱氨酸溶液，做三次冻融循环，循环条件为置于-20℃条件下放置2天，紧接着在40℃条件下放置2天，此为一个循环，于3次循环结束后取样检验。并将试验结果与0天比较。检测结果见表-1。
表-1：吸入用乙酰半胱氨酸溶液冻融试验结果比较：


结论证明：按实施例2的处方及工艺进行制备的样品，及市售的吸入用乙酰半胱氨酸溶液，各项质量指标符合规定。说明本发明制备的药液在低温循环试验条件下具有一定的放置稳定性，说明本发明的制剂在运输、贮藏、使用过程中具有较好的稳定性。
实施例5：乙酰半胱氨酸溶液的稳定性比较：
将按实施例1，2制得的样品及市售品置于稳定性试验箱中，40℃放置6个月，测定产品的稳定性，结果示于表-2。
表-2本发明吸入用乙酰半胱氨酸溶液的加速试验结果


结论：本发明实施例2样品与和实施实施例1样品，市售制剂进行稳定性考察对比。结果显示按本发明实施例2(加入生理海水)的处方工艺制备的药液在进行6个月的加速试验后，各项质量指标未发生变化，产品的有关物质的增长幅度比其它样品的低。说明加入生理海水可以更好的起到稳定样品质量的效果。
实施例6：本发明吸入用乙酰半胱氨酸溶液对动物的刺激性和过敏性测试
考察按实施例2制备的吸入用乙酰半胱氨酸溶液吸入给药后，对动物鼻黏膜、气管上皮、肺组织的刺激性及过敏性试验。为适用于不同动物，本发明采用口鼻暴露的方式给药，主要对家兔采用面罩雾化吸入试验，对大鼠采用呼吸暴露塔雾化药物(将大鼠置于呼吸暴露塔中固定，仅将口鼻暴露自主吸入雾化药物)。
1.试验材料
试剂：实施案例5中制备的5号吸入用乙酰半胱氨酸溶液，规格：3ml:0.3g，另外使用购自武汉滨湖双鹤药液有限责任公司的氯化钠注射液 (批号141019801)、LPS(Sigma公司，批号102M4035V)。
试验动物：新西兰兔12只，购自上海市松江区松联实验动物场，批号：2007001103216。大鼠，共36只，购自上海市松江区松联实验动物场，批号：2007001103217。
刺激性和过敏性考察研究：
(1)家兔雾化吸入试验方法
给药方案：新西兰家兔12只，雌雄各半。
随机分为受试药物组和阴性对照组，每组6只。
受试药物组采用压缩雾化吸入机，家兔用呼吸面罩雾化吸入乙酰半胱氨酸溶液(3ml:0.3g)，按300mg/kg的剂量给药，每天2次，给药间隔6小时，持续5～10天。同时，每次给药过程中用玻璃小瓶收集沿面罩内壁滴下的药液，待测。阴性对照组采用0.9％的氯化钠注射液同法给药。
检测结果家兔面罩吸入给药实际给药剂量为(150mg/kg(相当于临床用药剂量7.5mg/kg的20倍)，
解剖和病理学观察：给药结束后48小时进行解剖取材后观察：取肺、气管、舌、鼻粘膜置甲醛溶液中固定24h以上，进行病理学检查。
受试药物组和阴性对照组两组：肉眼观察兔喉头、气管、支气管及其分支黏膜无充血、出血、水肿和感染，未见明显泡沫样炎性渗出液；两侧肺表面无出血、感染、肺无实变或肺气肿现象。剪开气管、支气管及其分支，也未见明显泡沫样炎性渗出液；两侧肺脏的性状、体积、色泽、位置和硬度正常，无积水(或血性分泌物)、出血、淤血和肿物等。
组织病理学检查显示肺组织未见出血、炎症细胞浸润、纤维增生等明 显病理改变；气管上皮、皮下组织未见明显病理改变；鼻腔前庭部扁平上皮、呼吸部粘膜嗅部嗅上皮未见出血、炎细胞浸润等病理改变。
(2)大鼠雾化吸入试验
给药方案：取大鼠18只，雌雄各半，随机分为受试药物组、阴性对照组和空白组，每组6只，通过吸入雾化药物。
受试药物组按大鼠按1g/kg给予吸入用乙酰半胱氨酸溶液(3ml:0.3g)；
阴性对照组给予等体积的氯化钠注射液；
空白组不给药。各组均每日给药两次。
两次间隔6h以上，连续5-10天给药。
受试药物组每次给药过程中将每次给药过程中将呼吸暴露塔排出管插入装有约纯水30ml的玻璃瓶中，收集排出给药系统的所得收集液待测。末次给药后48h解剖取材，肉眼观察呼吸道黏膜及肺部有无泡沫样炎性渗出液及充血、出血、感染等，并进行组织病理学检查。
经检测：大鼠吸入给药实际给药剂量为300mg/kg(相当于临床用量7.5mg/kg的40倍)
肉眼观察喉头、声门粘膜无出血和水肿，两侧肺表面无出血、感染、肺无实变或肺气肿。气管、支气管及其分支粘膜无充血、出血和感染，未见明显泡沫样炎性渗出液。
组织病理学检查显示肺组织均未见出血、炎症细胞浸润、纤维增生等明显病理改变；气管上皮，皮下组织未见明显病理改变；鼻腔前庭部扁平上皮、呼吸部粘膜嗅部上皮未见出血、炎细胞浸润等病理改变。
结论：综合上述两项刺激性试验可得，本发明的吸入用乙酰半胱氨酸 溶液的无刺激性。
(3)过敏性考察研究：
大鼠雾化吸入试验
给药方案：取大鼠18只，雌雄各半，随机分为受试药物组、阳性对照组和阴性对照组，每组6只，通过吸入雾化药物。
受试药物按大鼠按1g/kg给予吸入用乙酰半胱氨酸溶液(3ml:0.3g)；
阳性对照组按8mg/kg给予雾化脂多糖(LPS)溶液(1mg/ml)，
阴性对照组给予氯化钠注射液。
各组均每日给药两次，两次间隔6h以上，连续7天给药。
受试药物组每次给药过程中将每次给药过程中将呼吸暴露塔排出管插入装有约纯水30ml的玻璃瓶中，收集排出给药系统的所得收集液待测。
解剖和病理学观察：给药结束后解剖取材，
阳性对照组：大鼠在给药过程中有竖毛、便稀、趴窝不动等现象；解剖后，肉眼可见气管内有少量渗出液，鼻黏膜出血，肺部有针尖状出血点，有微血栓形成。
受试药物组与阴性对照组：大鼠肺部外观颜色粉红，未见明显异常改变。
阳性对照组：大鼠肺部可见炎症细胞浸润、纤维增生等明显病理改变：气管上皮组织细胞增生、排列紊乱；鼻腔前庭部扁平上皮、呼吸部黏膜嗅部上皮可见炎细胞浸润、角化层增生等病理改变。
受试药物组与阴性对照组：大鼠肺部未见明显异常改变。
结论：综合上述过敏性试验考察，本发明的吸入用乙酰半胱氨酸溶液无过敏反应。
表8：:病理学评分标准