前列地尔冻干乳剂及其制备方法 技术领域：
本发明涉及医药技术领域，确切地说它是一种前列地尔冻干乳剂及其制备方法。
背景技术：
前列地尔有抑制血小板聚集、血栓素A2生成、动脉粥样脂质斑块形成及免疫复合物的作用，并能扩张外周和冠脉血管。本品是外源性前列地尔E1(PGE1)，是一种血管扩张剂及抑制血小板聚集剂。PGE1通过激活细胞内腺苷酸环化酶，使血小板和血管平滑肌内的环磷酸腺苷(cAMP)水平成倍的增加，致使产生惰性血小板及血管扩张。患者注射本品后的血小板体外实验对一般诱聚剂的反映均低下。该药为白色针状结晶，在乙醇中易溶，在水中微溶，在PH7.4-8.0的磷酸盐缓冲液中溶解。本品的水溶液很不稳定。
以前列地尔为主要有效成分的注射液“注射用前列地尔(曾用名：注射用前列腺素E1)”、“前列地尔注射液”已经由卫生行政部门批准生产。用于心肌梗死，血栓性脉管炎、闭塞性动脉硬化等症。亦可用于治疗慢性动脉闭塞症如血栓闭塞性脉管炎、慢性动脉粥样硬化症所致的肢体慢性溃疡，微血管循环障碍所致的四肢静息性疼痛；并可作为血管移植术后的抗栓治疗，用以抑制移植血管内的血栓形成(本品能用于小儿先天性动脉导管未闭症的手术前治疗，用以缓解低氧血症保持导管血流以等候时机手术治疗)。
已有的前列地尔注射液存在一定的缺点：前列地尔在水中很不稳定，在注射液中会发生降解，有效期短。注射剂的制备过程要求无菌操作，对工艺以及设备要求较高，乳滴易于聚集。
发明内容：
本发明地目的是提供一种前列地尔冻干乳剂及其制备方法，其制备工序简单，使药物含量更加可控，提高了药物及附加剂(辅料)的稳定性。为广大患者提供更安全，稳定，有效的冻干乳剂。其主要技术方案是该冻干乳剂的成分为药物、注射用油、稳定剂、乳化剂、PH调节剂、冻干保护剂，其余为注射用水。
每1000-5000ml药液中含有：
前列地尔 5-400mg
注射用油 1-50ml
乳化剂 适量
稳定剂 适量
甘油 适量
PH调节剂 适量
防腐剂 适量
冻干保护剂 适量
注射用油的最佳应用剂量为5-30ml；可以是任何种类的植物油，如：豆油、茶油、橄榄油、红花油等中的一种或几种混合物。粒度为50nm-1000nm。
乳化剂：磷脂、泊洛沙姆、HS15(聚乙二醇12-羟基硬脂酸酯、polyethyleneglycol 660 hydroxystearate as a nonionic solubilizer for injectionsolutions)、吐温类等中的一种或几种混合物，用量为1-20g。
稳定剂：无水亚硫酸钠、Vc、氮气、二丁基羟基甲苯、α-生育酚、α-醋酸生育酚、氢醌等中的一种或几种混合物，用量为0.1-10g。
PH调节剂：氢氧化钠、醋酸钠、醋酸、磷酸盐、盐酸、柠檬酸等中的一种或几种混合物，调节PH为4-9。
防腐剂：尼泊金酯类，用量为0-1g。
冻干保护剂：糖类物质，如：葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、海藻糖、右旋糖苷、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等中的一种或几种，冻干保护剂的含量为4％-40％(W/V)。
其制备方法如下：
1)在配制设备中，将前列地尔溶解于注射用油中；
2)将乳化剂加入适量注射用水中，并加入稳定剂；
3)将2)在搅拌的条件下加入1)中(或1)在搅拌的条件下加入2)中)，在20℃-60℃时搅拌、通过匀质仪，将溶液反复匀化，得到均匀的溶液；
4)加入适量冻干保护剂，经冷冻干燥去除水分，得干燥的前列地尔冻干乳剂；
5)将制得的冻干乳剂按需要量加水，水合振荡后复原成乳剂，注射给药
冻干保护剂：如甘露醇、海藻糖等随乳剂的冻结和结晶的生长，逐渐浓缩，并分布在乳滴周围，阻止乳滴的融合；可以抑制冰晶的生长，从而减少冰晶对乳滴的损伤；可以提高乳剂的玻璃化转变温度，并在一定的降温速率下，使乳剂实现部分玻璃化，避免了晶态固化，减少了在通常的平衡冻结方法中由于冰晶生长而引起的各种损伤；在乳剂冻结过程中，保护剂使溶液的粘性增加，从而弱化了水的结晶过程，达到了保护的目的。
本发明的优点是：前列地尔的注射用冻干乳剂具有制作工艺简便、稳定性好等优点。通过加入冻干保护剂后冷冻干燥，制成冻干乳剂，临用前按需要量加注射用水，经水合，振荡即能回复成前列地尔乳剂。实验结果显示，本发明显著提高了前列地尔的稳定性，并简化了制备工序，使药物含量更加可控，为广大患者提供了更安全、稳定、有效的制剂。
前列地尔的含量测定用HPLC分析[1]：前列地尔制成冻干乳剂后，药物浓度增加，干扰因素减少，使含量测定变得更加简便、准确。
HPLC的色谱条件为：色谱柱 十八烷基硅烷键合硅胶ODS C18
流动相 0.02mol/L磷酸二氢钾(PH4.9)∶乙腈＝3∶2
检测波长 214nm
粒度测定仪：本实验中应用PSS.NICOMPTM 380作为测定粒径的仪器。
具体实施方式：
实施例1：
1)在配制设备中，将前列地尔5mg溶解于1ml注射用大豆油中；
2)将0.2g的注射用大豆卵磷脂与适量的注射用水混合均匀，并加入0.1g无水亚硫酸钠；
3)将2)在搅拌的条件下加入1)中，在20℃时搅拌后通过匀质仪，将溶液反复匀化，得到均匀的溶液。制得1000ml的药液；
4)加入4％的甘露醇作为冻干保护剂，经冷冻干燥去除水分，得干燥的前列地尔冻干乳剂；
5)将制得冻干乳剂按需要量加水，水合振荡后复原成乳剂。
实施例2：
1)在配制设备中，将前列地尔20mg溶解于10ml注射用茶油中；
2)将5g的注射用蛋黄卵磷脂与适量的注射用水混合均匀，并加入0.1g尼泊金乙酯；
3)将1)在搅拌的条件下加入2)中，在40℃时搅拌后通过匀质仪，将溶液反复匀化，得到均匀的溶液。制得2000ml的药液；
4)加入5％的葡萄糖和2％的甘露醇作为冻干保护剂，经冷冻干燥去除水分，得干燥的前列地尔冻干乳剂；
5)将制得冻干乳剂按需要量加水，水合振荡后复原成乳剂。
实施例3：
1)在配制设备中，将前列地尔400mg溶解于50ml注射用橄榄油中；
2)将10g的泊洛沙姆与适量的注射用水混合均匀，并加入1g尼泊金乙酯；
3)将2)在搅拌的条件下加入1)中，在60℃时搅拌后通过匀质仪，将溶液反复匀化，得到均匀的溶液。制得5000ml的药液；
4)加入40％的蔗糖作为冻干保护剂，经冷冻干燥去除水分，得干燥的前列地尔冻干乳剂；
5)将制得冻干乳剂按需要量加水，水合振荡后复原成乳剂。
实施例4：
1)在配制设备中，将前列地尔30mg溶解于5ml注射用大豆油中；
2)将5g的吐温-80与适量的注射用水混合均匀，并加入0.1g尼泊金乙酯和0.1g尼泊金丙酯；
3)将2)在搅拌的条件下加入1)中，在40℃时搅拌后通过匀质仪，将溶液反复匀化，得到均匀的溶液。制得药液共2000ml；
4)加入8％的海藻糖作为冻干保护剂，经冷冻干燥去除水分，得干燥的前列地尔冻干乳剂；
5)将制得冻干乳剂按需要量加水，水合振荡后，复原成乳剂；
实施例5：
1)在配制设备中；将前列地尔80mg溶解于10ml注射用大豆油中；
2)将10g的HS15与适量的注射用水混合均匀；
3)将1)在搅拌的条件下加入2)中，在40℃时搅拌后通过匀质仪，将溶液反复匀化，得到均匀的溶液。制得药液共1000ml；
4)加入5％的甘露醇和5％的葡萄糖作为冻干保护剂，经冷冻干燥去除水分，充氮气，得干燥的前列地尔冻干乳剂；
5)将制得冻干乳剂按需要量加水，水合振荡后复原成乳剂。
实施例6：
1)在配制设备中，将前列地尔100mg溶解于10ml注射用红花油中；
2)将10g的卵磷脂与适量的注射用水混合均匀，并加入适量Vc；
3)将2)在搅拌的条件下加入1)中，在40℃时搅拌后通过匀质仪，将溶液反复匀化，得到均匀的溶液。制得药液共1000ml；
4)加入8％的山梨醇作为冻干保护剂，经冷冻干燥去除水分，得干燥的前列地尔冻干乳剂；
5)将制得冻干乳剂按需要量加水，水合振荡后复原成乳剂。
实施例7：
1)在配制设备中，将前列地尔50mg溶解于2ml注射用大豆油中；
2)将0.2g注射用大豆卵磷脂和0.2g HS15与适量的注射用水混合均匀；
3)将2)在搅拌的条件下加入1)中，在40℃时搅拌后通过匀质仪，将溶液反复匀化，得到均匀的溶液。制得药液共1000ml；
4)加入5％的甘露醇作为冻干保护剂，经冷冻干燥去除水分，充氮气，得干燥的前列地尔冻干乳剂；
5)将制得冻干乳剂按需要量加水，水合振荡后复原成乳剂。
参考文献：
1、国家食品药品监督管理局 国家药品标准 国家药典委员会 2003第29册138-141。
实验结果：
表1：冻干前后粒度变化
粒/径 实施例 实施例 实施例 实施例 实施例 实施例 实施例
nm 一 二 三 四 五 六 七
冻干前 188 236 811 261 86 268 166
水化后 202 308 962 288 92 386 182
表2：两种剂型理化性质比较(实施例七)
前列地尔含量 乳剂粒度nm 菌检
自制
自制 冻干乳剂 自制
注射液 注射液 注射液
冻干乳剂 (水化 冻干乳剂
后)
0月 100 100 311 182 合格 合格
1月 99.6 100.6 326 178 合格 合格
2月 98.2 100.2 345 189 合格 合格
3月 96.8 99.8 356 192 合格 合格
由此可知，乳剂冻干前后的粒度没有显著的变化，长期储存有较好的稳定性。药物含量、粒度、菌检均无明显变化。而注射液的含量下降，粒度变大。