治疗更年期综合征及美容的组合物、制备方法及其用途.pdf

本发明涉及一种治疗更年期综合征并具有美容、改善皮肤水份作用的中药组合物及其制备方法、用途和检测方法。其特征在于它含有下述重量配比的原料药物：白芍16－32％，女贞子12－25％，石斛16－32％，何首乌8－20％，珍珠1－8％。制备方法特征是女贞子、石斛、何首乌醇提，药渣与白芍合并后水提醇沉，减压浓缩，浸膏烘干、粉碎，加入珍珠细粉混均，制成各种制剂。药效实验及人体临床试验证实本制剂在改善更年期症状、体征，克服现有西药激素疗法毒副作用，促使妇女内分泌功能恢复到相应水平以及美容、改善皮肤水份方面有明确的优效性和安全性。本中药组合物用于制备美容品，或功能食品，或治疗更年期综合征的药物的用途。

1.  一种治疗更年期综合征并具有美容作用的中药组合物，其特征在于由包括以下按重量配比的各种原料制成：白芍16-32％，石斛16-32％，女贞子12-25％，何首乌8-20％，珍珠1-8％。

2.  根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于其原料药包括下述重量配比的各种：白芍16％，石斛16％，女贞子13％，何首乌9％，珍珠2％，其它原料药44％。

3.  一种治疗更年期综合征并具有美容作用的中药组合物，其特征在于由以下重量配比的原料制成：白芍16，石斛16，女贞子13，何首乌9，珍珠2。

4.  一种治疗更年期综合征并具有美容作用的中药组合物，其特征在于由包括以下按重量配比的各种原料制成：白芍16，石斛16，女贞子13，何首乌9，珍珠2。

5.  根据权利要求1-4中任一权利要求所述的中药组合物的制备方法，其特征在于按以下步骤进行：珍珠水飞粉碎成极细粉备用；女贞子、石斛、何首乌用60-90％浓度的乙醇回流提取，合并提取液，回收溶剂得浸膏I，备用；药渣与白芍合并，加水提取，合并提取液，适当浓缩，加乙醇使含醇量达60-80％，沉淀，倾出上清液，沉淀离心过滤，合并上清液与滤液，减压浓缩，得浸膏II；合并浸膏I与II，干燥，粉碎成细粉，加入珍珠细粉，混匀，制成各种制剂。

6.  根据权利要求5所述的中药组合物的制备方法，其特征在于按以下步骤进行：珍珠水飞粉碎成极细粉备用；女贞子、石斛、何首乌加4-10倍量的60-90％的乙醇回流提取，每次0.5-2.5小时，共2-3次，提取液滤过，合并提取液，减压浓缩至比重1.25-1.40，得浸膏I，备用；药渣与白芍合并，加4-10倍量水提取，每次0.5-2小时，提取2-3次，提取液滤过；合并提取液，减压浓缩至比重1.05-1.20，加乙醇使含醇量达60-80％，静置过夜，倾出上清液，沉淀离心过滤，合并上清液与滤液，减压浓缩至比重1.25-1.40，得浸膏II；合并浸膏I与II，置60-80℃真空干燥箱内烘干，粉碎成细粉，加入珍珠细粉，混匀，制成各种制剂。

7.  根据权利要求1或2或4所述的治疗更年期综合征的中药组合物，其特征在于原料药还加入下述各药中的一至多种：清肝、舒肝类药：桑叶、钩藤、龙胆草、玫瑰花；补肝肾、益精血类药：黑芝麻、枸杞子；宁心安神类药柏子仁、合欢花。

8.  一种治疗更年期综合征并具有美容作用的中药组合物，其特征在于由以下重量配比的原料制成：白芍16％、石斛16％、女贞子13％、何首乌9％、珍珠2％、玫瑰花15％、枸杞子10％、柏子仁10％、合欢花9％。

9.  一种治疗更年期综合征并具有美容作用的中药组合物，其特征在于由以下重量配比的原料制成：白芍17％、石斛17％、女贞子14％、黑芝麻14％、何首乌10％、钩藤9％、龙胆草8％、桑叶8％、珍珠3％。

10.  根据权利要求1-9中任一权利要求所述的治疗更年期综合征并具有美容作用的中药组合物，其特征在于制成的制剂为胶囊、片剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、散剂、口服液、合剂、注射剂、膏剂、酒剂或糖浆剂。

11.  根据权利要求1-9中任一权利要求所述的治疗更年期综合征并具有美容作用的中药组合物的检测方法，其特征在于采用以下方法中的一至多种：
(1)取本中药组合物适量，制得甲醇提取液，作为供试品溶液；另取女贞子对照药材适量，同法制成对照药材溶液；再取齐墩果酸对照品，加甲醇制成浓度适当的溶液，作为对照品溶液；吸取上述三种溶液各适量，分别点于硅胶G薄层板上，以石油醚-丙酮-氨试液(7∶5∶0.1)为展开剂，展开，晾干，喷以5％香草醛硫酸试液，烘干；在本中药组合物供试品薄层色谱中，分别在与女贞子对照药材和齐墩果酸对照品薄层色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；
(2)取本中药组合物适量，用60-80％乙醇提取，提取液蒸干；残渣加适量甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取何首乌对照药材适量，同法制成对照药材溶液；吸取上述二种溶液各适量，分别点于硅胶GF₂₅₄薄层板上，以苯-乙醇(2-4∶1)为展开剂，展开，晾干，置紫外光灯下检视；本中药组合物供试品薄层色谱中，分别在与对照药材相对应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
(3)取本中药组合物适量，加氨水湿润后搅拌均匀，放置1-1.5小时，用氯仿适量提取，滤过，滤液蒸干，残渣加适量氯仿使溶解，作为供试品溶液；另取石斛对照药材适量，同法制成对照药材溶液；吸取上述二种溶液各适量，分别点于硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(10∶1.5)为展开剂，展开，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，置烘箱烘干；本中药组合物供试品薄层色谱中，在与对照药材相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)珍珠检测：取本中药组合物适量，加稀盐酸，即产生大量气泡，滤过，滤液显钙盐反应；
(5)白芍用高效液相色谱法进行含量测定：
色谱条件和系统适应性用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1％磷酸(16∶84)为流动相，流速1.0ml/min，检测波长230nm；理论板数按芍药甙计，不低于3000；
称取芍药甙对照品适量，制成适当浓度的甲醇溶液，作为对照品溶液；取本中药组合物适量，定量加甲醇，超声提取，过0.4-0.5μm微孔滤膜，作为供试品溶液；分别吸取对照品溶液与本中药组合物供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定。

12.  根据权利要求1-9中任一权利要求所述的治疗更年期综合征的中药组合物的检测方法，其特征在于采用以下方法中的一至多种：
(1)取本中药组合物1g，加甲醇置水浴上加热回流提取，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇制成每1ml甲醇含本中药组合物1g的供试品溶液；另取女贞子对照药材适量，同法制成对照药材溶液；再取齐墩果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-丙酮-氨试液(7∶5∶0.1)为展开剂，展开，晾干，喷以5％香草醛硫酸试液，烘干；在本中药组合物供试品薄层色谱中，分别在与女贞子对照药材和齐墩果酸对照品薄层色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；而本中药组合物所显现的其它斑点，在女贞子对照药材和齐墩果酸对照品色谱相应位置上缺如；
(2)取本中药组合物1g，加60-80％乙醇置水浴上加热回流提取，滤过，滤液蒸干；残渣加甲醇制成每2ml甲醇含本中药组合物1g的供试品溶液；另取何首乌对照药材适量，同法制成对照药材溶液；吸取上述二种溶液各4μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以苯-乙醇(2-4∶1)为展开剂，展开，晾干，置紫外光灯下检视；本中药组合物供试品薄层色谱中，分别在与对照药材相对应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；而本中药组合物所显现的其它斑点，在对照药材和对照品薄层色谱相应位置上缺如；
(3)取本中药组合物适量，加氨水湿润后搅拌均匀，放置1-1.5小时，加8-10倍量氯仿，置水浴上回流提取，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿制成每1ml氯仿含本中药组合物2g的供试品溶液；另取石斛对照药材适量，同法制成对照药材溶液；吸取上述二种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(10∶1.5)为展开剂，展开，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，烘干；本中药组合物供试品薄层色谱中，在与对照药材相应的位置上，显相同颜色的斑点；而本中药组合物所显现的其它斑点，在对照药材和对照品薄层色谱相应位置上缺如；
(4)珍珠检测：取本中药组合物1g，加20ml稀盐酸，即产生大量气泡，滤过，滤液显钙盐反应；
(5)白芍含量测定：照高效液相色谱法测定；
色谱条件和系统适应性用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1％磷酸(16∶84)为流动相，流速1.0ml/min，检测波长230nm；理论板数按芍药甙计，不低于3000；
对照品溶液的制备  称取芍药甙对照品1mg，加甲醇制成1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液；
供试品溶液的制备取本中药组合物1g，置50ml量瓶中，加甲醇30ml，超声提取15-30分钟，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，吸取续滤液过0.4-0.5μm微孔滤膜，作为供试品溶液；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定。

13.  根据权利要求1-9中任一权利要求所述的中药组合物制备美容品，或功能食品，或治疗更年期综合征的药物的用途。

治疗更年期综合征及美容的组合物、制备方法及其用途
技术领域；
本发明涉及中药组合物及其制备方法，具体涉及一种治疗更年期综合征并具有改善皮肤水份、具有美容作用的中药组合物及其制备方法、用途。
背景技术
目前，公知的更年期综合征是由于卵巢功能衰退乃至消失，引起内分泌失调和植物神经紊乱所产生的一组症候群。其病理后果涉及内分泌系统(雌酮、雌二醇降低，促卵泡激素、促黄体生成激素增高、月经失调等)，植物神经系统(烘热汗出，血管舒缩功能失调—血压波动等)，神经精神系统(烦躁、焦虑及各种更年期精神神经症状等)等多个组织靶器官。
现有西药对该疾病的治疗通常是用性激素(主要是雌激素)替代疗法，但其副作用(子宫出血、靶器官恶性变等)影响很多人不能接受这种方法的治疗。
中药组合物没有西药类似的毒副作用，但现有中药组合物作用靶点主要体现对植物神经紊乱证候群的改善，而内分泌调整作用相对显得不足。检索国家食品药品监督管理局基础数据库，由国家正式批准的治疗更年期综合征的中药里，尚无同时具备改善植物神经紊乱症候群(治标)和调整内分泌(治本)两项功效的中药。分析原因，中药多通过调整机体功能以及组方药味类雌激素样作用来达到调整内分泌目的。组方药味的选择、成分配比及提取工艺的优劣直接关系到药物的疗效。因此，中药组合物及制备方法的创新研究尤为重要。
作为改善皮肤水份、美容用途多为外用化妆品，内服的美容品或功能食品较少。本中药组合物主要通过中药补肾及植物类激素样作用调节内分泌，同时通便排除肌体内毒素，加之特定的养颜润肤中药，多层次多方为的药理作用达到润肤保水目的。检索国家药品和保健食品库，尚无与本发明相同的的中药组合物及其制备方法。
当前中国药品法规定：构成药品组分的原料药必须取得国家法定标准后，才能使用到制剂中。因而结构全新的中药制剂研究包括原料药的创新研究、取得国家标准、进行制剂的创新研究几个过程。现有治疗更年期综合征的中药较多地以《药典》收载的中药材为基础申请中药组合物专利。其实质或发明点表现在为取得有效药理成分，以物质方法特征的形式进行处方组分和含量配比的创新研究。
治疗更年期综合征并具有美容作用的中药组合物制备方法研究，其关键是如何把药物中的有效活性成分尽可能筛选保留下来，或通过制备过程取得新的有效活性成分。目前中药组合物制备方法特征较多体现在最佳提取方法和最佳工艺路线的创新研究。通过制备方法给予了该中药组合物新的特性，使其能用于更年期综合征症状、体征的改善及内分泌调节，以及美容改善皮肤水份的特定的用途。
发明内容
为了克服现有西药激素替代疗法的毒副作用及现有中药调整内分泌力度不足的问题，本发明提供一种治疗更年期综合征，改善植物神经紊乱症候群，调整内分泌水平，又没有西药毒副作用，及具有美容、改善皮肤水份的功效，安全、优效的中药组合物及其制备方法，以及其标定、检测方法。
技术方案：
本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下：
本发明公开一种治疗更年期综合征及美容，改善皮肤水份的中药组合物，其特征在于它含有下述重量配比的原料药物：白芍16-32％，石斛16-32％，女贞子12-25％，何首乌8-20％，珍珠1-8％。
各原料的优选重量配比为：白芍16，石斛16，女贞子13，何首乌9，珍珠2。
本组合物可以制成任意药剂学常规剂型。
可以采用以下步骤制备：
珍珠水飞粉碎成极细粉备用；女贞子、石斛、何首乌用60-90％浓度的乙醇回流提取，合并提取液，回收溶剂得浸膏I，备用；药渣与白芍合并，加水提取，合并提取液，适当浓缩，加乙醇使含醇量达60-80％，沉淀，倾出上清液，沉淀离心过滤，合并上清液与滤液，减压浓缩，得浸膏II；合并浸膏I与II，干燥，粉碎成细粉，加入珍珠细粉，混匀，制成各种制剂。
优选制备方法为：
(1)珍珠水飞粉碎成极细粉备用。
(2)女贞子、石斛、何首乌加4-10倍量的60-90％的乙醇回流提取，每次0.5-2.5小时，共2-3次，提取液滤过。合并提取液，减压浓缩至比重1.25-1.40，得浸膏I，备用。
(3)药渣与白芍合并，加4-10倍量水提取，每次0.5-2小时，提取2-3次，提取液滤过。合并提取液，减压浓缩至比重1.05-1.20，加乙醇使含醇量达60-80％，静置过夜，倾出上清液，沉淀离心过滤，合并上清液与滤液，减压浓缩至比重1.25-1.40，得浸膏II。
(4)合并浸膏I与II，置60-80℃真空干燥箱内烘干，粉碎成细粉，加入珍珠细粉，混匀。
(5)将步骤(4)所得的细粉制成各种制剂，其特征在于制成制剂为胶囊、片剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、散剂、口服液、合剂、注射剂、膏剂、酒剂或糖浆剂。
本中药组合物的功能主治为滋肾平肝、清心安神，用于更年期综合征肝肾阴虚、心肝火旺证及美容，改善皮肤水份的药物、或美容品、或功能食品的用途。证见；烘热汗出、颜面潮红、腰膝酸软、情绪波动、心烦易怒、容易激惹、心悸失眠、多梦易惊、头昏脑胀、眩晕耳鸣、口干咽燥、手足心热、皮肤干燥、月经失调、阴道干涩等相关症状；同时皮肤肌肉得不到气血濡养则容颜失色，影响美容。本中药组合物帮助更年期妇女身体机能调节至正常，促使妇女失调的内分泌功能恢复到相应水平，并通过滋肾、濡养肌肤达到美容，改善皮肤水份目的。
肝藏血，肾藏精，肝肾同源。血虚则肝旺，阴虚则火旺，本证肝肾阴虚为本，故首当滋肾养肝。
白芍养血益阴，平抑肝阳，敛阴收汗、柔肝缓急。针对本证肝肾阴虚之特点，本品重用白芍为臣药颐养肝血、敛肝阴、缓肝急，濡养肌肤，以固其本而为君药。
女贞子功善养阴益精，滋补肝肾。本方用之滋肾养肝，养阴益精以助其源而为臣药。
石斛功善益阴、生津、清热。本品用之甘淡生津，益肾清热，助君药滋阴清热，兼治更年期发热自汗而定心志，增液益润肤，与女贞子共为臣药。
珍珠功善镇心安神，养阴熄风，清热明目。本品助君臣药宁心定志，镇心安神，润肤祛皱而为佐助。
何首乌入肝肾经补肝、益肾、养血，专入肝肾，补养真阴，具有阴阳平秘的作用，善治肝肾阴虚诸症，兼以通便行滞，排除体内代谢废物及毒素。本品用之助君臣药益肾养肝，以为佐助。
本证病位于心、肝、肾，而诸药分别归入心、肝、肾经，故不再另设引经使药。
全方滋肾平肝、清心安神，用于更年期综合征肝肾阴亏、心肝火旺之证，使肝肾阴复，心肝火清，疾病向愈，同时肌肤得以濡润，容颜复常，以获其功。
本中药组合物的药理作用：
主要药效学实验
①本中药组合物对硝酸毛果芸香碱所致大鼠汗腺分泌的影响
将大鼠按体重、性别随机分组，设本中药组合物高、中、低剂量组、更年安片对照组、阴性对照组共5组。各组均连续口服给药一周。末次给药后皮下注射硝酸毛果云香碱溶液，用放大镜观察大鼠足跖部出现的汗点数，结果用统计学处理。
实验结果表明，本中药组合物对毛果云香碱所致大鼠汗腺分泌有抑制作用，且与更年安片对照组比有显着性差异。从而说明本中药组合物对植物神经系统的兴奋性有抑制作用，改善更年期患者多汗症状。
②本中药组合物对戊巴比妥钠小鼠睡眠时间的影响
将小鼠50只，按体重、性别随机分成：本中药组合物高、中、低剂量组、更年安片对照组、阴性对照组共5组。各组均连续口服给药一周。末次给药后腹腔注射戊巴比妥钠溶液，记录小鼠睡眠时间。结果用统计学处理。
实验结果表明，本中药组合物对戊巴比妥钠小鼠睡眠时间的延长作用，且与更年安片对照组比有显着性差异。提示其具有镇静安定的作用。可改善更年期患者睡眠效益和烦燥不安症状。
③本中药组合物对左旋甲状腺素阴虚小鼠体重、体温、心率的影响
将小鼠按体重、性别随机分成：本中药组合物高、中、低剂量组、更年安片对照组、空白对照组、模型组共6组。除空白组外各组均连续口服给药一周。给药后第三天开始皮下注射左旋甲状腺素，末次给药后称重、测体温、心率。结果用统计学处理。
实验结果表明，本中药组合物各剂量组对左旋甲状腺素阴虚小鼠体重和心率没有明显影响。本中药组合物对左旋甲状腺素所致小鼠阴虚模型显示有降温作用，提示本中药组合物有利于更年期阴虚火旺及烘热症状的改善。
④本中药组合物对幼年雌性大鼠子宫、卵巢及动情周期的影响
将大鼠按体重、性别随机分成：本中药组合物高、中、低剂量组、己烯雌酚组、空白对照组5组。除己烯雌酚组连续皮下注射5天外，各组均连续口服给药一周。进行阴道涂片检查，观察动情周期变化。各组给药结束后处死、解剖，观察子宫积液出现情况，计算子宫、卵巢体重比，结果用统计学处理。
实验结果表明，本中药组合物对幼年雌性大鼠子宫/体重比有明显的增重作用、对幼年雌性大鼠动情期发生率有明显的提高作用、对幼年雌性大鼠血清中雌二醇含量有明显的升高作用，且与空白对照组比有显着性差异。显示本中药组合物有一定的雌激素样或促性腺作用，提示本中药组合物具有调节性激素水平的功能。
⑤本中药组合物对去势大鼠血清激素水平地影响
取去势完全的大鼠50只，按体重随机分为模型对照组、更年安组、本中药组合物给药组(分高、中、低剂量)、空白对照组共5组。连续给药15天。末次给药后用典型的双抗体放射免疫法测定血清中促滤泡生成激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、雌二醇(E2)和孕激素(PROG)的水平，子宫及肾上腺称重。
实验结果表明，本中药组合物与对照组相比可明显增加去势大鼠的子宫和肾上腺系数，有利于更年期综合征的改善。
以上实验结果表明，本中药组合物具有改善更年期综合征相关症状，调节内分泌激素水平的药理作用。
本中药组合物急性毒性试验
应用小鼠进行本中药组合物急性毒性实验表明：小鼠口服灌胃本中药组合物在150.8g生药/kg剂量下，连续观察7天，无一动物死亡，小鼠全身状况、饮食、摄水和体重增长均正常，动物处死尸解无病理学改变。LD₅₀＞150.8g生药/kg。提示临床用药安全。
本中药组合物大鼠灌胃24周长期毒性试验
设本中药浸膏高、中、低3个剂量组及1个溶剂对照组。每组用大鼠30只，雌雄各半。每天灌胃给药一次，共24周。研究结果表明，给予上述剂量的药物后，大鼠一般体征，体重增长与对照组无显着差异。各组大鼠的血液学指标、血液生化指标、尿液检查均在正常范围内，脏器和组织学检查未发现与药物有关的毒性反应。
本中药组合物人体试验结论及功效
为了评价本中药组合物治疗更年期综合征的有效性和安全性。2003年12月～2004年4月在四家国家药品临床研究基地进行了区组随机、双盲、阳性药平行对照、多中心临床研究。为了做到保密和避免在国内公开使用，试验前与各临床试验单位合同中签订有保密协议，并在临床试验中严格遵守保密条例。
研究人数：计划人数240人；实际入选234人。其中对照组116例，试验组118例。
试验药物：本中药组合物；
对照药物：国家最新批准上市的国药准字治疗更年期综合征药物。
给药方案：口服。一次4粒，一日3次，连续服用4周。
纳入病例标准：
1、年龄45～55岁之间。
2、符合女性更年期综合征西医诊断标准，绝经5年以内，且FSH≥40miu/ml，E2＜168pg/l的受试者。
3、受试者未用治疗更年期综合征的激素替代疗法3个月以上，中药2个月以上。
4、中医辨证肝肾阴虚，心肝火旺证者。
5、签署知情同意书。
治疗前组间可比性分析：两组年龄、病程、妇科B超情况、使用更年期药物情况、血压比较，差异无显着性意义(P＞0.05)。疾病基线情况：治疗前除心悸试验组病情偏重外，其余中医烘热汗出、烦燥易怒、腰膝酸软、胸闷、多梦易惊、失眠、头晕耳鸣，五心烦热，胁痛，口干口苦等症状、舌象、脉象、中医证候积分、雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)比较，差异无显着性意义(P＞0.05)。
可比性检测结果提示，影响两组预后的主要因素具有均衡性。
更年期综合征疗效判定标准：参照《中药新药临床研究指导原则》制定
①临控：临床症状、体征消失，理化检查结果恢复相应水平，治疗后积分值比治疗前降低95％以上。
②显效：临床症状、体征明显好转，理化检查结果基本恢复相应水平，治疗后积分值比治疗前降低70％以上。
③有效：临床症状、体征有所好转，理化检查结果有所改善，治疗后积分值比治疗前降低30％以上。
④无效：临床症状、体征、理化检查结果均无好转或恶化，治疗后积分值比治疗前降低不足30％。
中医证候疗效判定标准；根据积分法判定中医证候疗效。
疗效指数(n)＝(试验前积分-试验后积分)/试验前积分×100％
①临床控制：中医证候积分改善超过95％
②显效：中医证候积分改善超过70％者少于95％
③有效：中医证候积分改善超过30％者少于70％
④无效：中医证候积分改善低于30％
中医症状积分标准：(依据围绝经期综合征“改良Kupperman”评分法制定)
烘热汗出：0分(-)：   无。
          4分(+)：   每天发作＜3次。
          8分(++)：  每天发作3-9次。
          12分(+++)：每天发作≥10次。
烦躁易怒：0分(-)：   无。
          2分(+)：  偶有发作。
          4分(++)： 经常发作，但可坚持日常生活、工作。
          6分(+++)：持续发作，影响日常生活、工作。
失    眠：0分(-)：  无。
          2分(+)：  睡眠时常觉醒或睡而不稳，晨醒早，但不影响工作。
          4分(++)： 睡眠不足4小时，尚能坚持工作。
          6分(+++)：睡眠不足3小时或彻夜不眠，难以坚持工作。
头晕耳鸣：0分(-)：  无。
          1分(+)：  偶有。
          2分(++)： 常有头晕耳鸣。
          3分(+++)：经常出现，持续不解。
五心烦热：0分(-)：  无。
          1分(+)：  偶有。
          2分(++)： 常有。
          3分(+++)：经常出现，持续不解。
腰膝酸软：0分(-)：  无。
          1分(+)：  偶有。
          2分(++)： 常有。
          3分(+++)：经常出现，持续不解。
胁    痛：0分(-)：  无。
          1分(+)：  偶有发生。
          2分(++)： 经常发作。
胸    闷：0分(-)：  无。
          1分(+)：  偶有。
          2分(++)： 经常出现。
心    悸：0分(-)：  无。
          1分(+)：  偶有
          2分(++)： 经常出现。
          3分(+++)：持续不解。
多梦易惊：0分(-)：  无。
          1分(+)：  偶尔出现。
          2分(++)： 经常出现。
口干口苦：0分(-)： 无。
          1分(+)： 偶有。
          2分(++)：经常出现。
试验结果：
两组治疗前后总积分变化比较：
组别            N      疗前积分         疗后积分      降低积分值      组内统计量(t)     P
中药组合物组    118    24.15±5.40      6.43±4.75    17.67±5.59      26.352           ＜0.01
对照组          116    23.35±5.05      7.79±4.71    15.50±6.13      24.214           ＜0.01
组间统计量(t)          1.172            2.185         2.999
P                      ＞0.05           ＜0.05        ＜0.01
治疗后两组受试者中医证候积分均有明显降低，P＜0.01，差异有显着性意义。其中本中药组合物组和对照组平均降低积分差值比较，P＜0.01，差异有显着性意义，本中药组合物组优于对照组。
本中药组合物治疗更年期综合征的总有效率为99.1％，控显率为65.5％；对照组总有效率为94.8％，控显率为43.5％；两组疗效比较，P＜0.05，差异有显着性意义，本中药组合物优于对照组。
本中药组合物对肝肾阴虚、心肝火旺证的证候疗效，本中药组合物总有效率为99.1％，控显率为69.9％；对照组总有效率为94.8％，控显率为44.4％；两组疗效比较，P＜0.05，差异有显着性意义，本中药组合物优于对照组。
本中药组合物对改善更年期受试者烘热汗出、烦燥易怒、心悸、腰膝酸软、胸闷、多梦易惊、失眠、头晕耳鸣，五心烦热，胁痛，口干口苦等症状均有较好的临床疗效。两组个中医症状治疗前后差异均有显着性意义(P＜0.01)。
治疗后本中药组合物组受试者血清FSH值降低，平均降低19.64±28.470，对照组受试者血清FSH平均降低9.30±28.955。两组下降的差值比较，试验组优于对照组，P＜0.05。
治疗后本中药组合物组受试者血E2上升，平均上升30.0759±58.10382，对照组平均上升14.4130±36.01510，表明两者均可缓解更年期受试者雌激素下降的趋势。两组上升的差值比较，试验组优于对照组，P＜0.05。
以上妇科激素水平的变化，说明试验组治疗后血清FSH值降低，E2值上升，有利于调节更年期妇女激素恢复到相应的水平。
试验组不良事件发生率为1例(0.85％)，受试者03.12.21受寒后感冒恶寒、流涕等，症状属轻度，服用感康后，症状03.12.27消失，其间服用原治疗药物剂量不变。分析原因肯定与治疗药物无关。
对照组不良事件发生率1例(0.85％)，于服药后第2天出现头晕、乏力、困倦、嗜睡等中度不良反应，停药3天后自然缓解，并因此退出临床试验。分析原因很可能与药物有关。
治疗前后检测血、尿、便常规和肝、肾功能、心电图没有发现与试验组用药有关，且有临床意义的异常变化，说明本中药组合物用药安全。美容，改善皮肤水份的人体试验
为了评价本中药组合物美容，改善皮肤水份作用的有效性。本中药组合物2003年6月～12月进行了32例临床自身对照人体观察。评价方法参照卫生部《保健食品功能学评价程序》执行。
1纳入标准：年龄为30-50岁，皮肤水份≤12。
2服用方案：口服。一次1袋，一日2次，连续服用4周。
3.功效性指标：测试前额眉间皮肤的水份，对试食前后皮肤水份变化进行统计。
4.功效判定标准
有效：水份得到改善，恢复到＞12，并经统计学检验有显着性差异。
无效：水份没有得到显着改善。
5结果判定：有效27人，无效5人。治疗前后自身对照观察，统计结果差异有显着性意义(P＜0.01)。
组别          N    疗前评分      疗后评分       升高分值      统计量(t)    P
中药组合物组  32   10.22±1.18   12.84±1.08    2.63±1.04    6.65         ＜0.01
人体试验结论：
以上两项人体研究结果表明，本中药组合物具有改善更年期综合征相关症状、体征，调节内分泌激素水平和具有美容，改善皮肤水份的药理作用。本中药组合物是治疗更年期综合征及美容，改善皮肤水份的安全、有效地中药组合物。
有益效果
本发明组合物的有益效果是克服了现有西药激素替代疗法的毒副作用和现有中药调整妇女内分泌水平力度不足的缺陷。提供了一种治疗更年期综合征，既改善植物神经紊乱症候群，同时调整妇女内分泌水平，并具有美容，改善皮肤水份作用，又没有西药毒副作用，更加安全有效，品质更高的中药组合物及制备方法。
药效实验证明本发明组合物对硝酸毛果云香碱所致大鼠汗腺分泌均有明显抑制作用；对左旋甲状腺素所致体温升高有明显抑制作用；明显延长戊巴比妥钠小鼠睡眠时间；对幼年雌性大鼠子宫体重比、动情期动物出现数均有明显增加；能明显提高大鼠血清中雌二醇水平；明显增加去势大鼠的子宫和肾上腺系数。在动物急毒、长毒实验中没有发现毒副作用。
严格的随机、双盲、对照、多中心的人体试验表明，本发明组合物治疗更年期综合征，能显着改善烘热汗出、颜面潮红、腰膝酸软、情绪波动、心烦易怒、容易激惹、心悸失眠、多梦易惊、头昏脑胀、眩晕耳鸣、口干咽燥、手足心热、皮肤干燥、月经失调、阴道干涩等相关症状，帮助更年期妇女身体机能调节至正常，促使妇女失调的内分泌功能恢复到相应水平。
自身对照人体试验表明，本发明组合物治疗前后结果差异有显着性意义，具有美容，改善皮肤水份的作用。
在人体试验中没有发现明显的毒副作用，对血、尿、便常规和肝、肾功能、心电图无明显影响。表明本中药组合物具有改善更年期综合征相关症状、体征，调节内分泌激素水平及美容，改善皮肤水份的药理作用，是治疗更年期综合征及美容，改善皮肤水份的安全、有效的中药组合物。
上述治疗更年期综合征及美容，改善皮肤水份的中药组合物，还可以添加其它原料药以增强其疗效，例如清肝、舒肝类药桑叶、钩藤、龙胆草、玫瑰花；补肝肾、益精血类药黑芝麻、枸杞子；宁心安神类药柏子仁、合欢花中的一至多种。
其它原料的优选添加比例为全方重量的44％，例如：白芍16％，石斛16％，女贞子13％，何首乌9％，珍珠2％，其它原料药44％。
具体实施方式：
实施例1
处方：白芍16，女贞子13，石斛16，何首乌9，珍珠2。
(1)珍珠水飞粉碎成极细粉备用。
(2)女贞子、石斛、何首乌加6倍量的90％的乙醇回流提取，每次2小时，
共2次，提取液滤过。合并提取液，减压浓缩至比重1.25-1.30，得浸膏I，备用。
(3)何首乌等药渣与白芍合并，加6倍量水提取，每次2小时，提取2次，提取液滤过。合并提取液，减压浓缩至比重1.05-1.20，加乙醇使含醇量达75％，静置过夜，倾出上清液，沉淀离心过滤，合并上清液与滤液，减压浓缩至比重1.25-1.30，得浸膏II。
(4)合并浸膏I与II，置65℃真空干燥箱内烘干，粉碎成细粉，加入珍珠细粉，混匀。
(5)将步骤(4)所得混匀细粉用适当浓度的乙醇制成颗粒，干燥，整粒，压制成1000片，即得。
每日服药量折合生药量30-40g，分3次服用。
实施例2
处方：白芍16％、石斛16％、女贞子13％、何首乌9％、珍珠2％、
      玫瑰花15％、枸杞子10％、柏子仁10％、合欢花9％。
制法：
(1)珍珠水飞粉碎成极细粉备用。
(2)女贞子、石斛、何首乌加8倍量的75％的乙醇回流提取，每次1.5小时，共3次，提取液滤过。合并提取液，减压浓缩至比重1.30-1.35，得浸膏I，备用。
(3)药渣与白芍、枸杞子、合欢花、玫瑰花、柏子仁合并，加8倍量水提取，每次1.5小时，提取3次，提取液滤过。合并提取液，减压浓缩至比重1.05-1.20，加乙醇使含醇量达70％，静置过夜，倾出上清液，沉淀离心过滤，合并上清液与滤液，减压浓缩至比重1.30-1.35，得浸膏II。
(4)合并浸膏I与II，置70℃真空干燥箱内烘干，粉碎成细粉，加入珍珠细粉，混匀。
(5)将步骤(4)所得混匀细粉用适当浓度的乙醇制成颗粒，干燥，整粒，制成颗粒1000g，即得。
每日服药量折合生药量35-45g，分3次服用。
实施例3
处方：自芍17％、石斛17％、女贞子14％、黑芝麻14％、何首乌10％、
      钩藤9％、龙胆草8％、桑叶8％、珍珠3％。
制法：
(1)珍珠水飞粉碎成极细粉备用。
(2)女贞子、石斛、何首乌、钩藤、黑芝麻加10倍量的65％的乙醇回流提取，每次1小时，共3次，提取液滤过。合并提取液，减压浓缩至比重1.30-1.40，得浸膏I，备用。
(3)药渣与白芍、桑叶、龙胆草合并，加10倍量水提取，每次1小时，提取3次，提取液滤过。合并提取液，减压浓缩至比重1.05-1.20，加乙醇使含醇量达65％，静置过夜，倾出上清液，沉淀离心过滤，合并上清液与滤液，减压浓缩至比重1.30-1.40，得浸膏II。
(4)合并浸膏I与II，置75℃真空干燥箱内烘干，粉碎成细粉，加入珍珠细粉，混匀。
(5)将步骤(4)所得混匀细粉装入胶囊，即得。
本发明组合物每日服药量折合生药量40-45g，分3次服用。
本申请的各种组合物，可以用以下检测方法，供检测并鉴别本中药组合物中的各组成成分，鉴别并区分各组分色谱和中药组合物色谱的差异。
(1)取本中药组合物适量，加甲醇置水浴上加热回流提取，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取女贞子对照药材适量，同法制成对照药材溶液；再取齐墩果酸对照品，加甲醇制成浓度适当的溶液，作为对照品溶液；吸取上述三种溶液各适量，分别点于硅胶G薄层板上，以石油醚-丙酮-氨试液(7∶5∶0.1)为展开剂，展开，晾干，喷以5％香草醛硫酸试液，烘干；在本中药组合物供试品薄层色谱中，分别在与女贞子对照药材和齐墩果酸对照品薄层色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；
(2)取本中药组合物适量，加60-80％乙醇置水浴上加热回流提取，滤过，滤液蒸干；残渣加适量甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取何首乌对照药材适量，同法制成对照药材溶液；吸取上述二种溶液各适量，分别点于硅胶GF₂₅₄薄层板上，以苯-乙醇(2-4∶1)为展开剂，展开，晾干，置紫外光灯下检视；本中药组合物供试品薄层色谱中，分别在与对照药材相对应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
(3)取本中药组合物适量，加氨水湿润后搅拌均匀，放置1-1.5小时，加氯仿适量，置水浴上回流提取，滤过，滤液蒸干。残渣加适量氯仿使溶解，作为供试品溶液；另取石斛对照药材适量，同法制成对照药材溶液；吸取上述二种溶液各适量，分别点于硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(10∶1.5)为展开剂，展开，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，置烘箱烘干；本中药组合物供试品薄层色谱中，在与对照药材相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)珍珠检测；取本中药组合物适量，加稀盐酸，即产生大量气泡，滤过，滤液显钙盐反应；
(5)白芍高效液相色谱法进行含量测定：
色谱条件和系统适应性用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1％磷酸(16∶84)为流动相，流速1.0ml/min，检测波长230nm；理论板数按芍药甙计，应不低于3000。
称取芍药甙对照品适量，制成适当浓度的甲醇溶液，作为对照品溶液；取本中药组合物适量，定量加甲醇，超声提取，过0.4-0.5μm微孔滤膜，作为供试品溶液；分别吸取对照品溶液与本中药组合物供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定。
检测实施例1
用薄层色谱法测定女贞子。
取本中药组合物1g，加甲醇置水浴上加热回流提取，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇制成每1ml甲醇含本中药组合物1g的供试品溶液；另取女贞子对照药材适量，同法制成对照药材溶液；再取齐墩果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-丙酮-氨试液(7∶5∶0.1)为展开剂，展开，晾干，喷以5％香草醛硫酸试液，置烘箱中烘干；在本中药组合物供试品薄层色谱中，分别在与女贞子对照药材和齐墩果酸对照品薄层色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；而本中药组合物所显现的其它斑点，在女贞子对照药材和齐墩果酸对照品色谱相应位置上缺如；
检测实施例2
用薄层色谱法测定何首乌。
取本中药组合物1g，加60-80％乙醇置水浴上加热回流提取，滤过，滤液蒸干；残渣加甲醇制成每2ml甲醇含本中药组合物1g的供试品溶液；另取何首乌对照药材适量，同法制成对照药材溶液；吸取上述二种溶液各4μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以苯-乙醇(2-4∶1)为展开剂，展开，晾干，置紫外光灯下检视；本中药组合物供试品薄层色谱中，分别在与对照药材相对应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；再喷以磷钼酸试液，稍加热，日光下斑点显蓝色；而本中药组合物所显现的其它斑点，在对照药材和对照品薄层色谱相应位置上缺如；
检测实施例3
用薄层色谱法测定石斛：
取本中药组合物2g，加氨水湿润后搅拌均匀，放置1-1.5小时，加8-10倍量氯仿，置水浴上回流提取，滤过，滤液蒸干。残渣加氯仿制成每1ml氯仿含本中药组合物2g的供试品溶液；另取石斛对照药材适量，同法制成对照药材溶液；吸取上述二种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(10∶1.5)为展开剂，展开，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，置烘箱烘干；本中药组合物供试品薄层色谱中，在与对照药材相应的位置上，显相同颜色的斑点；而本中药组合物所显现的其它斑点，在对照药材和对照品薄层色谱相应位置上缺如；
以上3项测定表明本中药组合物薄层色谱与单味对照药材或对照品的薄层色谱不同，说明单味中药材经过本制备工艺提取后，其组合物具备了与原单味药材不同的薄层色谱特征，它可以用薄层色谱法标定并鉴别出来。同时在组合物薄层色谱中，分别在与对照药材和对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点，说明中药组合物薄层色谱中含有单味对照药材或对照品薄层色谱的特征斑点，它可以用薄层色谱法标定并鉴别出来。
检测实施例4
珍珠检测：取本中药组合物1g，加20ml稀盐酸，即产生大量气泡，滤过，滤液显钙盐反应。
检测实施例5
白芍含量测定：照高效液相色谱法测定。
色谱条件和系统适应性  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1％磷酸(16∶84)为流动相，流速1.0ml/min，检测波长230nm；理论板数按芍药甙计，应不低于3000。
对照品溶液的制备称取芍药甙对照品1mg，加甲醇制成1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备取本中药组合物1g，置50ml量瓶中，加甲醇30ml，超声提取15-30分钟，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，吸取续滤液过0.4-0.5μm微孔滤膜，作为供试品溶液。
测定法分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，本中药组合物每1g含芍药甙(C₂₃H₂₈O₁₁)计，不得低于4.8mg。