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1、10申请公布号CN104138527A43申请公布日20141112CN104138527A21申请号201410398498122申请日20140813A61K36/8984200601A61P35/0020060171申请人胡广地址510440广东省广州市白云区鹤边大彭岭三横路6号72发明人胡广胡均霖胡鑫亮74专利代理机构广州市越秀区哲力专利商标事务所普通合伙44288代理人汤喜友54发明名称一种具有抗癌作用的生物发酵组合物及其应用57摘要本发明涉及一种具有抗癌作用的生物发酵组合物,由如下方法制成A配制培养基混合液;B灭菌处理;C冷却;D接种制得发酵液;E静置处理,制得具有抗癌作用的生物发。
2、酵组合物。本发明的组合物,能够改善体内微生态环境,平衡调理肠道有益菌群,修复受损细胞补充体内多种活性生物酶,氨基酸,核酸及微量元素等,提高人体的免疫力,预防疾病,能够有效抑制癌细胞,并且阻断癌细胞的扩散及发展。同时可以改善酸性体质为弱碱性体质。特别适合癌症人群,三高人群,肥胖人群。可以用于制备丸剂、膏剂,水剂等多种剂型,对癌症有着良好的辅助治疗作用,同时对治疗糖尿病、消化系统疾病等具有很好的辅助治疗作用。51INTCL权利要求书2页说明书9页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书2页说明书9页10申请公布号CN104138527ACN104138527A1/2页21一种具有。
3、抗癌作用的生物发酵组合物,其特征在于由如下方法制成A配制培养基混合液所述培养基混合液包括按照质量百分数计的如下组分人工种植人参153、巴西蘑菇153、虫草花13、铁皮石斛123、松茸153、黄芪13、绞股蓝12、红豆杉12、灵芝153、三七13、黑枸杞13、无花果13、当归13、余甘子235、刺梨235、沙棘235、牛蒡根125、苦荞麦153、低聚果糖355、蛋白胨153、奶粉153,余量为水;将上述各组分混合、搅拌均匀,制得培养基混合液;B灭菌处理在经过A步骤制得的培养基混合液中通入110125的水蒸汽,进行灭菌处理;C冷却将经过B步骤处理的培养基混合液降温至3542;D接种在无菌环境中将混。
4、合菌种添加到经过C步骤处理的培养基混合液中,在恒温状态下搅拌混合液完成耗氧,制得发酵液;所述混合菌种的质量为A步骤中的培养基混合液质量的711;所述混合菌种由嗜酸乳杆菌、青春双歧杆菌、动物双歧杆菌、两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、嗜热链球菌、植物乳杆菌、醋酸菌、纳豆菌、地衣芽孢杆菌、光合菌和酵母菌中的两种或两种以上菌种混合而成;E静置处理将经过D步骤制得的发酵液置于密封容器中。每天保持罐内发酵温度为3542,每天排放一次密封容器中的气体,将装有发酵液的密封容器静置2835天,制得具有抗癌作用的生物发酵组合物。2根据权利要求1所述的具有抗癌作用的生物发酵组合物,其特征在于所述。
5、A步骤中的培养基混合液包括按照质量百分数计的如下组分所述培养基混合液包括按照质量百分数的如下组分人工种植人参23、巴西蘑菇23、虫草花13、铁皮石斛123、松茸153、黄芪13、绞股蓝12、红豆杉12、灵芝153、三七13、黑枸杞23、无花果13、当归13、余甘子235、刺梨235、沙棘235、牛蒡根125、苦荞麦153、低聚果糖355、蛋白胨153、奶粉153,余量为水。3根据权利要求1所述的具有抗癌作用的生物发酵组合物,其特征在于所述A步骤中的培养基混合液包括按照质量百分数计的如下组分人工种植人参25、巴西蘑菇2、虫草花2、铁皮石斛15、松茸2、黄芪25、绞股蓝15、红豆杉15、灵芝25、。
6、三七15、黑枸杞25、无花果2、当归15、余甘子2、刺梨25、沙棘25、牛蒡根15、苦荞麦2、低聚果糖355、蛋白胨153、奶粉153,余量为水。4根据权利要求13任一项所述的具有抗癌作用的生物发酵组合物,其特征在于所述B步骤中混合菌种的质量为A步骤中的培养基混合液质量为10,所述混合菌种由嗜酸乳杆菌、青春双歧杆菌、动物双歧杆菌、两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、嗜热链球菌、植物乳杆菌、醋酸菌、纳豆菌、地衣芽孢杆菌、光合菌和酵母菌混合而成。5根据权利要求13任一项所述的具有抗癌作用的生物发酵组合物,其特征在于所述B步骤中的水蒸气的温度为120;所述C步骤中培养基混合液降温至4。
7、2;所述E步骤中应保持在3542,装有发酵液的密封容器静置时间为30天。6根据权利要求13任一项所述的具有抗癌作用的生物发酵组合物,其特征在于在E权利要求书CN104138527A2/2页3步骤后还包括F步骤和G步骤F检验检测经过E步骤制得的制得人工种植人参益生菌发酵组合物中蛋白酶、氨基酸、核酸,维生素、小分子肽的组成和含量;G口感调配在经过E步骤制得的具有抗癌作用的生物发酵组合物中加入、壳寡糖,岩藻多糖,茶多酚为天然防腐剂,并辅以三氯蔗糖调节口感甜度,并调节PH值为35。7根据权利要求13任一项所述的具有抗癌作用的生物发酵组合物,其特征在于所述A步骤中的培养基混合液中还包括以质量百分数计的人。
8、参13。8根据权利要求13任一项所述的具有抗癌作用的生物发酵组合物,其特征在于将经过E步骤处理的具有抗癌作用的生物发酵组合物进行冷冻干燥处理。9含有如8所述的具有抗癌作用的生物发酵组合物的片剂、胶囊剂、丸剂或膏剂及水剂。10含有如权利要求13任一项所述的具有抗癌作用的生物发酵组合物的液体制剂。权利要求书CN104138527A1/9页4一种具有抗癌作用的生物发酵组合物及其应用技术领域0001本发明涉及一种生物发酵组合物及其应用,尤其是涉及一种具有抗癌作用的生物发酵组合物及其应用。背景技术0002科技的进步给人们的生活带来了方便与快捷,并使人们的物质生活水平也得到了很大的改善,但也带来了一系列负。
9、面问题生态环境的破坏及污染、水污染,农药化肥激素的伤害,各种添加剂在食品中的滥用、抗生素药物的滥用等。给人们生活的生态环境带了破坏,同时加上现代人们快节奏的生活、上网族低头族辐射伤害,流感病毒的侵害,工作压力的提高,使得大部分人的身体免疫力逐渐降低,长期处于亚健康状态,更令人担忧的是癌病糖尿病艾滋病及三高人群逐年上升,人类健康面临前所未有的挑战。发明内容0003为了解决人们免疫力低、亚健康容易患病等问题,本发明提供了一种具有抗癌作用的生物发酵组合物及其应用。0004为解决上述问题,本发明所采用的技术方案如下0005一种具有抗癌作用的生物发酵组合物,由如下方法制成0006A配制培养基混合液所述培。
10、养基混合液包括按照质量百分数计的如下组分人工种植人参153、巴西蘑菇153、虫草花13、铁皮石斛123、松茸153、黄芪13、绞股蓝12、红豆杉12、灵芝153、三七13、黑枸杞13、无花果13、当归13、余甘子235、刺梨235、沙棘235、牛蒡根125、苦荞麦153、低聚果糖355、蛋白胨1535、奶粉153,余量为水;将上述各组分混合、搅拌均匀,制得培养基混合液;0007B灭菌处理在经过A步骤制得的培养基混合液中通入110125的水蒸汽,进行灭菌处理;0008C冷却将经过B步骤处理的培养基混合液降温至3542;0009D接种在无菌环境中将混合菌种添加到经过C步骤处理的培养基混合液中,在恒。
11、温状态下搅拌混合液完成耗氧,制得发酵液;0010所述混合菌种的质量为A步骤中的培养基混合液质量的711;0011所述混合菌种由嗜酸乳杆菌、青春双歧杆菌、动物双歧杆菌、两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、嗜热链球菌、植物乳杆菌、醋酸菌、纳豆菌、地衣芽孢杆菌、光合菌和酵母菌中的两种或两种以上菌种混合而成;0012E静置处理将经过D步骤制得的发酵液置于密封容器中,每天保持发酵温度为3542,每天排放一次密封容器中的气体,将装有发酵液的密封容器静置2835天,制得具有抗癌作用的生物发酵组合物。0013人工种植人参大补元气、补脾益肺、生津止渴、安神增智,有强精健身益寿延年的说明书CN10。
12、4138527A2/9页5作用。0014巴西蘑菇含有丰富的维生素B、维生素D、多醣类植物凝血索以及抑制癌细胞类固醇类,具有提高人体免疫力和自然治愈力的效果。0015虫草花含有丰富的蛋白质、氨基酸以及虫草素、甘露醇、SOD、多糖类等成分,其中虫草酸和虫草素能够综合调理人机体内环境,增强体内巨噬细胞的功能,对增强和调节人体免疫功能、提高人体抗病能力有一定的作用。0016铁皮石斛又名云南铁皮、铁皮斗,属于补益药中的补阴药,具有益胃生0017灵芝主要含麦角甾醇0304,真菌溶菌酶及酸性蛋白酶、L甘露醇、浠醇、灵芝多糖等。对神经系统有抑制作用,循环系统有降压和加强心脏收缩力的作用,对呼吸系统有祛痰作用,。
13、此外,还有护肝、提高免疫功能,抗菌等作用。0018三七其性温,味辛,具有散淤止血,消肿定痛的功效。0019黑枸杞又名黑果枸杞,味甘、性平,富含蛋白质、枸杞多糖、氨基酸、维生素、矿物质、微量元素等多种营养成分。还含有丰富的黑果色素天然原花青素红果枸杞不含,其OPC含量超过蓝莓黑果枸杞含OPC3690MG/100G;蓝莓含OPC3303380MG/100G,是迄今为止,发现OPC含量最高的天然野生植物。原花青素OPC是最有效的天然水溶性自由基清除剂,其功效是VC的20倍、VE的50倍。具有增强免疫力、延缓衰老等作用。0020无花果具有健胃清肠,消肿解毒的功效。0021当归味甘;辛;苦;性温,具有补。
14、血;活血;调经止痛;润燥滑肠等功效。0022余甘子;果实味酸微涩,清热凉血,消食健脾,生津止渴。主治血热血瘀,消化不良,腹胀,咳嗽,喉痛,口干及维生素C缺乏症。在藏药中,余甘子主治培根病、赤巴病、血病、高血压病等。研究结果表明,余甘子具有抗炎,抗氧化,抗衰老,保肝等作用。0023刺梨;其花、叶果、籽可入药,有健胃、消食、滋补,止泻的功效。特别是刺梨富含超氧化物歧化酶简称SOD,SOD是国际公认具有抗衰、防癌作用的活性物质,还具有抗病毒、抗辐射的作用,在心血管、消化系统和各种肿瘤疾病防治方面,应用十分广泛。0024沙棘;性温味酸涩,具有活血散淤、化痰宽胸、生津止渴、清热止泻的功效,主治跌打损伤、。
15、肺脓疡、咳嗽痰多、呼吸困难、消化不良、高热伤阴、肠炎痢疾、胃痛、闭经等病症。沙棘中黄酮可提高血清补体水平,增强巨噬细胞的功能,故既可补充营养,又能提高机体的抗病能力。0025绞股蓝;主要有效成份是绞股蓝皂甙、绞股蓝糖甙多糖、水溶性氨基酸、黄酮类、多种维生素、微量元素、矿物质等,具有降血脂,调血压防治血栓,防治心血管疾患,调节血糖,促睡眠,缓衰老,防抗癌,提高免疫力,调节人体生理机能。0026黄芪;有增强机体免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗应激、降压和较广泛的抗菌作用。能消除实验性肾炎蛋白尿,增强心肌收缩力,调节血糖含量。黄芪不仅能扩张冠状动脉,改善心肌供血,提高免疫功能,而且能够延缓细胞衰老的。
16、进程。0027红豆杉;其提取物次生代谢衍生物紫杉醇,是治疗转移性卵巢癌和乳腺癌的最好药物之一,同时对肺癌、食道癌也有显着疗效,对肾炎及细小病毒炎症有明显抑制。0028松茸;含有18种氨基酸、14种人体必需微量元素、49种活性营养物质、5种不饱和脂肪酸、8种维生素、2种糖蛋白、丰富的膳食纤维和多种活性酶,另含有3种珍贵的活性物质,分别是双链松茸多糖、松茸多肽和松茸醇,是世界上最珍贵的天然药用菌类。松茸不说明书CN104138527A3/9页6仅营养均衡、充足,而且还有提高免疫力、抗癌抗肿瘤、治疗糖尿病及心血管疾病、抗衰老养颜、促肠胃保肝脏等多种功效。0029醋酸菌;可产生乳白色的菌膜,代谢产物含。
17、有纤维素,味道有酸腥味,与酵母菌共生在一起培养有促进生长的作用,产生的醋酸可清理肠胃,帮助消化。0030纳豆菌;是枯草芽孢杆菌的一个亚种,是一类好氧型、内生抗逆胞子的杆状细菌,自身没有致病性,只具有单层细胞外膜,能产生多种抗菌素和酶,具有广谱抗菌活性和极强的抗逆能力。0031地衣芽孢杆菌;可调整菌群失调达到治疗目的,可促使机体产生抗菌活性物质、杀灭致病菌,能产生抗活性物质,并具有独特的生物夺氧作用机制,能抑制致病菌的生长繁殖。0032光合菌;营养丰富,他的细胞干物质中蛋白质含量高达65以上,其蛋白质氨基酸组成比较齐全,细胞中含有多种维生素,尤其是B族维生素极为丰富,VB2叶酸,泛酸,生物素的含。
18、量也很高,同时还含有大量的类胡萝卜素,辅酶Q等活性物质。另外光合菌能够分解体内亚硝酸盐,硫化物等有害物质,维护体内微生态平衡抑制病原菌产生。0033嗜酸乳杆菌属,主要存在小肠中,释放乳酸,乙酸和一些对有害菌起作用的抗菌素。0034青春双歧杆菌,可明显增加血中超氧化物歧化酶SOD的活性与含量。从而减少自由基的氧化反应和对人体细胞的损伤,具有延年益寿的功效。青春双歧杆菌还具有降低胆固醇和甘油三酯的作用,使胆固醇转化成人体不吸收的粪甾醇,从粪便排出体外。0035动物双歧杆菌,可提高机体的抗体水平,激活巨噬细胞的吞噬活性,对提高机体的抗感染能力、预防、抑制和杀死肿瘤细胞的产生具有重要作用。此外,动物双。
19、歧杆菌还具有保护肝脏、降低胆固醇的作用。0036嗜热链球菌,生成的多糖、细菌素、乳酸等具有抗肿瘤活性的作用,通过激活机体免疫系统,抑制细胞的突变来抵抗肿瘤的发生;产生超氧化物歧化酶SOD可以清除体内代谢过程中产生的过量超氧阴离子自由基,延缓衰老;能使艰难梭菌、鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌的菌落直径减少约30;能使金黄葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、产气荚膜梭菌的菌落直径减少约20;但该益生菌对人白色念珠菌没有抑制效应。0037植物乳杆菌,而且其产出的酸性物质能降解重金属;由于此菌是厌氧细菌兼性好氧,在繁殖过程中能产出乳酸杆菌素。0038酵母菌,发酵后的酵母菌还是一种很强的抗氧化物,可以保护肝脏,有。
20、一定的解毒作用。酵母菌里的硒、铬等矿物质能抗衰老、抗肿瘤、预防动脉硬化,并提高人体的免疫力。0039本发明方案,将人工种植人参、松茸、黄芪、红豆杉、巴西蘑菇、虫草花、铁皮石斛、灵芝、三七、黑枸杞、无花果、当归、沙棘、刺梨、余甘子等进行发酵处理,上述各组分中含有多种对人体有益的物质,能够改善提高体内微生态环境,大大提升整体免疫力,其中发酵所用菌种混合菌种形成的一个共生共荣的菌落群,能够使得发酵更和谐完善形成一个共生共享完美的有机体。本发明制得的产品,含有多种人体所需的蛋白酶、氨基酸、核酸,多糖、维生素、酵素、抗氧化物质、小分子肽微量元素等物质,能够提高人体的免疫力,预防疾病,能够杀死癌细胞,对癌。
21、症有着良好的辅助治疗作用,同时对治疗糖尿病、消化系统疾病等具有很好的辅助治疗作用。此外,经过发酵作用,大分子的多糖、多肽等物质分解为小分子物质,说明书CN104138527A4/9页7如多肽分解为小分子肽,使得人体更容易被人体吸收,同时混合菌落能够使肠胃系统中菌落达到很好的平衡、抑制有害细菌,使得人体更加健康,预防各种疾病的发生。0040本发明中,优选的方案为所述A步骤中的培养基混合液包括按照质量百分数的如下组分所述培养基混合液包括按照质量百分数计的如下组分人工种植人参23、巴西蘑菇23、虫草花13、铁皮石斛123、松茸153、黄芪13、绞股蓝12、红豆杉12、灵芝153、三七13、黑枸杞23。
22、、无花果13、当归13、余甘子235、刺梨235、沙棘235、牛蒡根125、苦荞麦153、低聚果糖355、蛋白胨153、奶粉153。0041本发明中,优选的方案为所述A步骤中的培养基混合液包括按照质量百分数计的如下组分人工种植人参25、巴西蘑菇2、虫草花2、铁皮石斛15、松茸2、黄芪25、绞股蓝15、红豆杉15、灵芝25、三七15、黑枸杞25、无花果2、当归15、余甘子2、刺梨25、沙棘25、牛蒡根15、苦荞麦2、低聚果糖355、蛋白胨153、奶粉153,余量为水。0042本发明中,优选的方案为所述B步骤中混合菌种的质量为A步骤中的培养基混合液质量为10,所述混合菌种由嗜酸乳杆菌、青春双歧杆菌。
23、、动物双歧杆菌、两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、嗜热链球菌、植物乳杆菌、醋酸菌、纳豆菌、地衣芽孢杆菌、光合菌和酵母菌混合而成。0043本发明中,优选的方案为所述B步骤中的水蒸气的温度为120;所述C步骤中培养基混合液降温至45;所述E步骤中白天保持环境温度为33,夜间保持环境温度为25,装有发酵液的密封容器静置时间为30天。0044本发明中,优选的方案为所述A步骤中的培养基混合液中还包括以质量百分数计的西洋参13。0045本发明中,优选的方案为在E步骤后还包括F步骤和G步骤0046F检验检测经过E步骤制得的制得人工种植人参益生菌发酵组合物中蛋白酶、氨基酸、维生素、分子肽的组。
24、成和含量;该步骤可以了解制得的具有抗癌作用的生物发酵组合物中的营养成分,以便在生产中发现问题,及时作出调整。0047G口感调配在经过E步骤制得的具有抗癌作用的生物发酵组合物中加入壳寡糖,岩藻多糖,茶多酚绿茶提取物当中的一种物质为防腐剂,并调节PH值为35。该步骤,可以根据不同受众的口感进行调配,制作出各种口味的产品。其中壳寡糖、岩藻多糖和茶多酚作为天然的防腐剂,对人体无伤害,更有利于人体的健康。0048本发明的具有抗癌作用的生物发酵组合物,可以用于直接制备液体制剂等剂型的产品;也可以将其作为原料,进行冷冻干燥处理,用于制备片剂、胶囊剂、丸剂或膏剂等剂型的产品。0049与现有技术相比,本发明的优。
25、点是将人工种植人参、巴西蘑菇、虫草花、铁皮石斛、灵芝、三七、黑枸杞、无花果、当归、沙棘、刺梨、余甘子等进行发酵处理,上述各组分中含有多种人体有益物质,能够提高人体免疫力,其中发酵所用菌种混合菌种形成的一个共生共荣的菌落群,能够使得发酵更完全。本发明制得的产品,含有多种人体所需的蛋白酶、氨基酸、多糖、维生素、酵素、抗氧化物质、小分子肽等物质,能够提高人体的免疫力,预防疾病,能够抑制癌细胞,对癌症有着良好的辅助治疗作用,同时对治疗糖尿病、肝病,消化系统说明书CN104138527A5/9页8疾病等具有很好的辅助治疗作用。此外,经过发酵作用,大分子的多糖、多肽等物质分解为小分子物质,如多肽分解为小分。
26、子肽,使得人体更容易被人体吸收,同时混合菌落能够使肠胃系统中菌落达到很好的平衡、消灭有害细菌,使得人体更加健康。0050下面结合具体实施方式对本发明作进一步详细说明。具体实施方式0051实施例10052一种人工种植人参益生菌发酵组合物,由如下方法制成0053A配制培养基混合液所述培养基混合液包括按照质量百分数的如下组分人工种植人参25、巴西蘑菇2、虫草花2、铁皮石斛15、松茸2、黄芪25、绞股蓝15、红豆杉15、灵芝25、三七15、黑枸杞25、无花果2、当归15、余甘子2、刺梨25、沙棘25、牛蒡根15、苦荞麦2、低聚果糖45、蛋白胨15、奶粉3,余量为水;将上述各组分混合、搅拌均匀,制得培养。
27、基混合液;0054B灭菌处理在经过A步骤制得的培养基混合液中通入120的水蒸汽,进行灭菌处理;0055C冷却将经过B步骤处理的培养基混合液降温至42;0056D接种在无菌环境中将混合菌种添加到经过C步骤处理的培养基混合液中,在恒温状态下搅拌混合液完成耗氧,制得发酵液;0057所述混合菌种的质量为A步骤中的培养基混合液质量的10;0058所述混合菌种由嗜酸乳杆菌、青春双歧杆菌、动物双歧杆菌、两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、嗜热链球菌、植物乳杆菌、醋酸菌、纳豆菌、地衣芽孢杆菌、光合菌和酵母菌混合而成;0059E静置处理将经过D步骤制得的发酵液置于密封容器中,每天保持发酵温度为3。
28、542,每天排放一次密封容器中的气体,将装有发酵液的密封容器静置30天,制得具有抗癌作用的生物发酵组合物。0060实施例20061一种人工种植人参益生菌发酵组合物,由如下方法制成0062A配制培养基混合液所述培养基混合液包括按照质量百分数的如下组分人工种植人参15、巴西蘑菇3、虫草花1、铁皮石斛3、松茸15、黄芪3、绞股蓝1、红豆杉2、灵芝15、三七3、黑枸杞1、无花果3、当归1、余甘子35、刺梨2、沙棘35、牛蒡根1、苦荞麦3、低聚果糖35、蛋白胨3、奶粉15,余量为水;将上述各组分混合、搅拌均匀,制得培养基混合液;0063B灭菌处理在经过A步骤制得的培养基混合液中通入120的水蒸汽,进行灭。
29、菌处理;0064C冷却将经过B步骤处理的培养基混合液降温至42;0065D接种在无菌环境中将混合菌种添加到经过C步骤处理的培养基混合液中,在恒温状态下搅拌混合液完成耗氧,制得发酵液;0066所述混合菌种的质量为A步骤中的培养基混合液质量的10;0067所述混合菌种由嗜酸乳杆菌、青春双歧杆菌、动物双歧杆菌、两歧双歧杆菌、短双说明书CN104138527A6/9页9歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、嗜热链球菌、植物乳杆菌、醋酸菌、纳豆菌、地衣芽孢杆菌、光合菌和酵母菌混合而成;0068E静置处理将经过D步骤制得的发酵液置于密封容器中,每天保持发酵温度为3542,每天排放一次密封容器中的气体,将装有发。
30、酵液的密封容器静置30天,制得具有抗癌作用的生物发酵组合物。0069实施例30070一种人工种植人参益生菌发酵组合物,由如下方法制成0071A配制培养基混合液所述培养基混合液包括按照质量百分数的如下组分人工种植人参3、巴西蘑菇15、虫草花3、铁皮石斛12、松茸3、黄芪1、绞股蓝2、红豆杉1、灵芝3、三七1、黑枸杞3、无花果1、当归3、余甘子2、刺梨35、沙棘2、牛蒡根25、苦荞麦15、低聚果糖5、蛋白胨15、奶粉3,余量为水;将上述各组分混合、搅拌均匀,制得培养基混合液;0072B灭菌处理在经过A步骤制得的培养基混合液中通入120的水蒸汽,进行灭菌处理;0073C冷却将经过B步骤处理的培养基混。
31、合液降温至42;0074D接种在无菌环境中将混合菌种添加到经过C步骤处理的培养基混合液中,在恒温状态下搅拌混合液完成耗氧,制得发酵液;0075所述混合菌种的质量为A步骤中的培养基混合液质量的10;0076所述混合菌种由嗜酸乳杆菌、青春双歧杆菌、动物双歧杆菌、两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、嗜热链球菌、植物乳杆菌、醋酸菌、纳豆菌、地衣芽孢杆菌、光合菌和酵母菌混合而成;0077E静置处理将经过D步骤制得的发酵液置于密封容器中,每天保持发酵温度为3542,每天排放一次密封容器中的气体,将装有发酵液的密封容器静置30天,制得具有抗癌作用的生物发酵组合物。0078实施例40079将实。
32、施例13制得的具有抗癌作用的生物发酵组合物,分别加入壳寡糖,岩藻多糖,茶多酚,用三氯蔗糖调口感甜度,并调节人PH值为35。然后对上述产品对提升免疫力以及抗癌的作用进行测试00801、提升免疫力测试0081选取300名志愿者,这些志愿者有一定程度的失眠、精神不振、身体疲劳等症状,将实施例13制得的产品分别给100位上述志愿者服用,每天服用一次,每个5天进行观察,观察1个月,观察结果如下表1其中A表示轻微缓解、B表示缓解、C表示恢复正常,字母后的数字表示志愿者个数0082表1免疫力指标评价表0083说明书CN104138527A7/9页1000840085从上表中数据可以看出,实施例13制得的产品。
33、对失眠、精神不振和身体疲劳具有明显的改善作用,其中实施例1效果最优,实施例1、3的产品在第10天时志愿者症状均得到一定缓解,实施例2的产品在15天时志愿者症状均得到一定缓解,在第25天时,服用实施例2的产品的志愿者完全恢复比例超过65,服用实施例1、3的产品志愿者完全恢复的比例达到7177;第30天时,服用实施例2的产品的志愿者完全恢复比例达到92,服用实施例1、3的产品志愿者完全恢复的比例将近100;可以看出,本发明产品对上述症状具有明显的改善作用。服用上述产品的志愿者,改善了睡眠质量、身体疲劳完全缓解、精神好,免疫力得到了明显的提升。00862、辅助抗癌作用测试0087取40个肿瘤切片,每。
34、10个肿瘤切片分为一组,其中第一组至第三组分别用实施例13制得的组合物进行培养,第四组利用LB培养基进行培养,观察并计算肿瘤细胞的增殖说明书CN104138527A108/9页11率,结果如下表20088表2辅助抗癌作用评价表0089第1天第2天第5天第10天第一组78655434第二组79706038第三组78695839第四组808080800090从上表中数据可以看出,本发明的产品对癌细胞的增殖具有一定的抑制作用,其中实施例1效果最优。00913、MDAMB231细胞人乳腺癌细胞转移的抑制效应0092为了测定本发明提取物对癌细胞转移的抑制效果,将孔径大小为8M的聚碳酸酯膜被50G的MAT。
35、RIGEL充分地包被1小时并在空气中干燥24小时。将含有01BSA的条件培养基各30加入到BOYDENCHAMBER的下室中。分别取3个加入了50L的MDAMB231细胞1106细胞/孔的含有01BSA的RPMI1640FBSFREE培养基,分别向3个培养基其中加入实施例13获得的组合物,然后分别加入到BOYDENCHAMBER的上室中。在37,5CO2和95空气的湿度培养箱中培养16小时后,用MEOH固定膜并用QUIC溶液DIFFCOCOLTD染色。通过分光法计算从上室进入到下室的细胞数,结果见表30093表3MDAMB231细胞转移的抑制效应测试表00940095说明书CN104138527A119/9页120096从上表中数据可以看出,本发明的实施例13的产品对MDAMB231细胞转移有着很好的抑制作用,其中实施例1的抑制效果优于其他实施例。0097上述实施方式仅为本发明的优选实施方式,不能以此来限定本发明保护的范围,本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。说明书CN104138527A12。