一类含腈基苯的恶二唑亚砜化合物、其制备方法和用途.pdf

本发明涉及与血栓性疾病相关的药物领域。具体而言，本发明涉及一类含腈基取代苯的恶二唑亚砜结构的PAR-1拮抗剂、其制备方法、及含有它们的药物组合物以及它们在制备治疗血栓性疾病药物中的应用。其中，R选自-CN。

权利要求书
1.  具有通式I结构的化合物及其药学上可以接受的盐，

其中，R选自-CN。

2.  权利要求1所定义的通式I化合物，选自下列化合物，


3.  合成权利要求1-2任一所定义的通式I的化合物的方法：

化合物II和化合物III在碱存在下反应，得到化合物IV；化合物IV氧化得 到化合物I，R的定义如权利要求1-2任一所述。

4.  权利要求1-2所定义的通式I化合物及其药学上可以接受的盐在制备治疗血栓 性药物方面的应用。

说明书一类含腈基苯的恶二唑亚砜化合物、其制备方法和用途
技术领域
本发明涉及与血栓疾病相关的药物领域。具体而言，本发明涉及对血栓 性疾病有治疗作用的一类含腈基取代苯等结构的的恶二唑亚砜结构的PAR-1拮 抗剂及其制备方法，以及含有它们的药物组合物。
背景技术
蛋白酶激活受体1(Protease Activated Acceptor-1，PAR-1)是最近发现的抗 血小板类抗血栓药物的新靶点。蛋白酶激活受体1又叫凝血酶受体，凝血酶被凝 血连锁激活后通过PAR-1受体作用于血小板从而激活血小板，引起血小板聚集从 而引起血栓和凝血。PAR-1引起的血栓中富含血小板成分，是动脉血栓的主要成 因。PAR-1拮抗剂能阻断凝血酶激活血小板，从而阻断动脉血栓形成，可以用于 治疗急性冠状动脉疾病(Acute Coronary Syndrome)。已经有几个PAR-1抑制剂处 于临床研究(Chackalamannil S.,Thrombin Receptor(Protease Activated Receptor-1) Antagonists as Potent Antithrombotic Agents with Strong Antiplatelet Effects,J.Med. Chem.,2006,49(18),5389-5403)。
传统的用于防治血栓性疾病的药物分为三类。第一类是抗凝血类，分为 直接凝血酶抑制剂和间接凝血酶抑制剂，该类药物通过作用于凝血连锁的不同环 节来抑制血栓形成，具有抑制各种血栓形成的作用，如维生素K拮抗剂和Xa因 子抑制剂等；第二类是抗血小板类，如COX-1抑制剂和ADP受体拮抗剂等，该 类药物主要用于防治动脉血栓；第三类是纤维蛋白溶解剂，主要用于溶解血液中 形成的纤维蛋白。
抗血小板药物多是传统的动脉血栓防治药物，如氯吡格雷和阿司匹林 等。这些药物的缺点是出血风险比较大。而作为新发现的抗血小板类抗血栓药物 的PAR-1拮抗剂，则具有较小的出血风险，因此这类化合物可以作为治疗动脉 血栓的很有前景的药物。
本发明公开了一类含腈基取代苯等结构的恶二唑亚砜结构的PAR-1拮抗 剂，可以用于制备抗动脉血栓疾病的药物。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种具有良好抗血栓形成活性的具有通式I的 化合物及其药学上可以接受的盐。
本发明的另一个目的是提供制备具有通式I的化合物及其药学上可以接 受的盐的方法。
本发明的再一个目的是提供含有通式I的化合物及其药学上可以接受的 盐作为有效成分，以及一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂的药用 组合物，及其在治疗动脉血栓方面的应用。
现结合本发明的目的对本发明内容进行具体描述。
本发明具有通式I的化合物具有下述结构式：
具有通式I结构的化合物及其药学上可以接受的盐，

其中，R选自-CN。
优选以下具有通式I的化合物，

本发明所述通式I化合物通过以下步骤合成：

化合物II和化合物III在碱存在下反应，得到化合物IV；化合物IV氧 化得到化合物I，R的定义如前所述。。
本发明所述式I化合物的药学上可接受的盐，包括但是不限于与各种无 机酸如盐酸、硫酸、硝酸、磷酸、氢溴酸等形成的盐，也包括与各种有机酸如乙 酸、琥珀酸、马来酸、苹果酸以及各种氨基酸等形成的盐。
本发明所述通式I化合物具有PAR-1的拮抗作用，可作为有效成分用于 制备抗血栓方面的治疗药物。本发明所述通式I化合物的活性是通过体外模型验 证的。
本发明的通式I化合物在相当宽的剂量范围内是有效的。例如每天服用 的剂量约在1mg-500mg/人范围内，分为一次或数次给药。实际服用本发明通式 I化合物的剂量可由医生根据有关的情况来决定。这些情况包括：被治疗者的身 体状态、给药途径、年龄、体重、对药物的个体反应，症状的严重程度等。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明。需要说明的是，下述实施例 仅是用于说明，而并非用于限制本发明。本领域技术人员根据本发明的教导所做 出的各种变化均应在本申请权利要求所要求的保护范围之内。
实施例1

A、IV-1的合成
2.03g(10mmol)化合物II-1、3.70g(10mmol)化合物III和4.15g(30 mmol)固体碳酸钾在20mL乙醇中搅拌过夜。反应混合物倾倒到200mL冰水中， 搅拌，用浓盐酸调节pH＝4，50mL×3的二氯甲烷萃取，合并有机相，食盐水 洗涤，无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，得到的残余物经过柱层析纯 化，得到纯品IV-1，白色固体，MS，m/z＝515([M+Na]+)。
B、I-1的合成
2.46g(5mmol)化合物IV-1溶于25mL二氯甲烷中，-10℃下搅拌，慢慢 加入3.13g(20mmol)间氯过氧苯甲酸(mCPBA)。反应混合物在该温度下搅拌1 小时后，室温下继续搅拌过夜。反应混合物倾倒到200mL冰水中，搅拌，50mL ×3的二氯甲烷萃取，合并有机相，先后用3％NaHCO3溶液和食盐水洗涤，无水 硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，得到的残余物经过柱层析纯化，得到纯 品I-1，白色固体，MS,m/z＝526([M+NH4]+)。
实施例2-3
按照实施例1的方法，合成了具有通式I的下列化合物。

其中，实施例4为对比化合物(仍是申请人发现的全新结构)，以充分 说明药理效果。
实施例5体外血小板聚集抑制试验
在96孔板中，在TRAP(凝血酶受体活化肽)诱导的血小板聚集中进行物 质的药理学试验。注射器中预先加入3.13％的柠檬酸钠溶液，然后抽入20mL健 康志愿者的血液，在1500g下离心20分钟，将富含血小板的血浆(PRP)分离出 来并以1μL PGE1溶液(500μg/mL的乙醇溶液)/mL PRP的量进行处理。在室温 下孵育5分钟后，将其在1200g下离心20分钟以除去白细胞。将不含白细胞的 PRP以5mL/份分批转移到15mL的PP管中，并在3600g下离心使血小板沉淀。 而后，滗出上层血浆，将得自5mL PRP的血小板沉淀重新混悬于1mL Tyrode (120mM NaCl，2.6mM KCl，12mM NaHCO3，0.39mM NaH2PO4，10mM  HEPES，0.35％BSA，5.5mM葡萄糖，pH＝7.4)中，并用Tyrode调节至3×105/μL 的血小板计数。将13mL这种细胞混悬液用866μL的10mM CaCl2溶液处理， 以每孔120μL的量将其吸至96孔板中，在96孔板的孔中已经提前加入了15μL 待测试物质。在室温下黑暗中孵育30分钟，加入15μL TRAP溶液(70-100μM) 作为激动剂，在SpectraMax中37℃下振荡20分钟，在650nm下纪录动力学， 计算阴性对照(tyrode/DMSO)和阳性对照(15μL激动剂/DMSO)的曲线下面积，并 将差异定为100％。将待测试化合物以系列稀释物的形式吸移，一式两份地进行 测定，同样测定各物质浓度的AUC，计算与对照相比的AUC抑制％。通过该抑 制％按照4参数方程借助非线性回归分析计算IC50值。下表给出了结果。
化合物 血小板凝聚的抑制IC50(nM) 实施例1化合物(I-1) 7.6 实施例2化合物(I-2) 10.4 实施例3化合物(I-3) 12.5 实施例4化合物(对比例) 14.7
从上表可以看出，本发明的化合物在血小板凝聚试验中均表现出较好的 抑制作用，特别是I-1。