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1、10申请公布号CN104186401A43申请公布日20141210CN104186401A21申请号201410274485322申请日20140618A01K67/0220060171申请人江苏天兆实业有限公司地址222000江苏省连云港市灌南县三口镇大港村申请人上海交通大学72发明人陈方林朱建国钱明春贾亚伟廖忠江蔡学海武军74专利代理机构南京理工大学专利中心32203代理人朱显国54发明名称一种高效预防仔猪腹泻的母猪反饲方法57摘要本发明公开了一种高效预防仔猪腹泻的母猪反饲方法。首先采取腹泻严重仔猪的腹泻粪便100ML，或经绞碎的肠管和内容物的混合物100G，加入灭菌生理盐水至500ML。
2、，加入治疗剂量的抗生素，制备成反饲样品；用注射器抽取20ML样品，直接涂抹或注射到母猪的口腔和鼻腔。本发明具有反饲效果整齐可靠，母猪感染迅速，减少操作次数，母猪母源抗体水平高，哺乳仔猪被动免疫力增强，降低仔猪病毒性腹泻发病率等特点，实施后，显著提高产房母猪所产仔猪的成活率，且反饲方法操作简便，容易控制样品量，效果确实，成本低廉，以较低的投入获取较高的经济效益，并为提高集约化养猪场生产效率提供有效途经。51INTCL权利要求书1页说明书5页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书5页10申请公布号CN104186401ACN104186401A1/1页21一种高效预防。
3、仔猪腹泻的母猪反饲方法，其特征在于，首先采取腹泻严重仔猪的腹泻粪便100ML，或经绞碎的肠管和内容物的混合物100G，加入灭菌生理盐水至500ML，加入治疗剂量的抗生素，制备成反饲样品；用注射器抽取20ML样品，直接涂抹或注射到母猪的口腔和鼻腔。2根据权利要求1所述的高效预防仔猪腹泻的母猪反饲方法，其特征在于，所述的母猪包括产前3周以上的怀孕母猪和后备母猪。3根据权利要求1所述的高效预防仔猪腹泻的母猪反饲方法，其特征在于，所述的腹泻由TGEV或PDEV病毒感染引起。4根据权利要求1所述的高效预防仔猪腹泻的母猪反饲方法，其特征在于，所述的灭菌生理盐水中NACL浓度为09WT。5根据权利要求1所述。
4、的高效预防仔猪腹泻的母猪反饲方法，其特征在于，所述的经绞碎的肠管和内容物的混合物在无菌操作台上操作。6根据权利要求1所述的高效预防仔猪腹泻的母猪反饲方法，其特征在于，所述的抗生素中，青霉素的含量为10KU/ML，链霉素的含量为10MG/ML。权利要求书CN104186401A1/5页3一种高效预防仔猪腹泻的母猪反饲方法技术领域0001本发明涉及一种畜牧生产领域的预防仔猪病毒性腹泻的母猪反饲方法，具体是一种能迅速有效地使母猪感染导致仔猪腹泻的病毒、通过母源抗体有效防治初生仔猪腹泻的母猪反饲方法。背景技术0002随着养猪模式的改变，我国养猪业在取得巨大成绩的同时，情况也在不断发生变化。集约化养猪场。
5、成数倍增长，不可避免地会面临来自动物疫病的更大压力,其中仔猪腹泻病就是其中之一。近年来，每到冬春交替之际，全国各地就会大规模流行猪腹泻病，导致猪只发育迟缓、体弱、发病乃至大批死亡，直接导致较高的死淘率。这些发育迟缓、体弱、发病的猪只，不但影响猪场正常生产，而且增加了养殖成本。通过长期系统的调查研究后认为，造成仔猪腹泻病流行的原因是多方面的，其中以仔猪病毒性感染导致的病毒性腹泻为主要流行形式。我国目前流行的仔猪病毒性腹泻病主要有传染性胃肠炎猪传染性胃肠炎TRANSMISSIBLEGASTROENTERITIS,TGE和猪流行性腹泻PORCINEEPIDEMICDIARRHEA，PED。其中TGE。
6、由冠状病毒引起的猪的高度接触性传染病，其临床症状以呕吐、严重腹泻和脱水性肠炎为主要特征。不同年龄和品种的猪均易感,尤其对2周龄以内的仔猪致死率高达100。TGE呈世界性分布，从20世纪60年代末期,我国就有关于该病的报道，近年来疫区更为扩大，给养猪业造成巨大经济损失。TGE病毒属于冠状病毒科冠状病毒属；而同样由冠状病毒引起的PED，临床以水样腹泻、呕吐、脱水为主要特征，病理变化主要表现在猪的空肠和回肠部分的肠绒毛萎缩和脱落。自2010年下半年以来，中国华南、华东和华北部分省份出现了严重的仔猪腹泻流行，造成大量哺乳仔猪的死亡，给养猪业造成了巨大的经济损失。因此，研究一种仔猪病毒性腹泻的防治方法，。
7、是今后一段时间内我国集约化养猪业面临的紧迫课题之一。0003综上，引起仔猪腹泻的两种主要病毒TGEV和FDEV均属冠状病毒，属于自然界中最容易变异的病毒，这就决定了最有效的免疫方法应该是用当地现实流行的毒株进行免疫，而不是现在使用的已经商品化的疫苗；同时，按照免疫学理论，预防仔猪病毒性腹泻最有效的免疫途径应该是能够刺激黏膜免疫系统的口服免疫，而不是现行的肌肉注射疫苗免疫。所以近年来各地探索施行的母猪反饲预防仔猪病毒性腹泻方法较为科学，而且已经取得了一定的效果。反饲是将感染流行性腹泻病毒仔猪的肠道，经过处理，通过口服感染怀孕母猪及后备母猪即将接种的母猪，使得母猪经过自然感染后产生针对这种病毒的免。
8、疫力，体内有高水平的抗体，产仔后母猪可以通过初乳给予仔猪高滴度的母源抗体，以抵抗病毒的感染；对于冠状病毒及轮状病毒的控制，反饲都是有效的。然而，各厂家在实施反饲方法时，由于缺乏统一规范的方法，效果参差不齐，没有充分发挥反饲在防治仔猪腹泻方面的应有作用。发明内容说明书CN104186401A2/5页40004本发明的目的在于针对仔猪病毒性腹泻病发病率居高不下，现今生猪集约化养猪场实施母猪反饲缺乏统一规范方法这一现状，提供一种适合集约化养殖场实际的、能提高母猪反饲成功率及有效降低仔猪病毒性腹泻发病率的方法。较现行方法，本发明具有反饲效果整齐可靠，操作可控性强，操作次数减少，母猪感染迅速，母猪母源抗。
9、体水平高，哺乳仔猪被动免疫力增强，明显降低仔猪病毒性腹泻发病率等特点。0005为达到上述目的，本发明的一种高效预防仔猪腹泻的母猪反饲方法，首先采取腹泻严重仔猪的腹泻粪便100ML，或腹泻严重仔猪的经绞碎的肠管和内容物的混合物100G，加入灭菌生理盐水至500ML，加入治疗剂量的抗生素，制备成反饲样品；用注射器抽取20ML样品，直接涂抹或注射到母猪的口腔和鼻腔。0006上述母猪包括产前3周以上的怀孕母猪和后备母猪。0007上述腹泻由TGEV或PDEV病毒感染引起。0008上述灭菌生理盐水中NACL浓度为09WT。0009上述经绞碎的肠管和内容物的混合物在无菌操作台上操作。0010上述抗生素中青霉。
10、素的含量为10KU/ML，链霉素的含量为10MG/ML。0011与现有技术相比，本发明有如下的有益效果00121采用本发明的反饲方法可以保证让每个母猪在尽可能短的时间内获得同样确实的病毒感染量，只需一次操作就可使反饲母猪迅速感染并出现腹泻症状，2天后母猪开始腹泻，5天后腹泻率达80以上，710天内腹泻停止。该批母猪所产仔猪病毒性腹泻发病率平均为12，较传统免疫有显著改善，达到了被反饲母猪哺乳所产仔猪被动免疫力增强，仔猪病毒性腹泻发病率明显降低的目标。00132本发明具有反饲效果整齐可靠，母猪感染迅速，减少操作次数，母猪母源抗体水平高，哺乳仔猪被动免疫力增强，降低仔猪病毒性腹泻发病率等特点，实施。
11、后，显著提高产房母猪所产仔猪的成活率。00143本发明在进行反饲样品接种母猪时创造性地采用注射器涂抹或口腔灌注，这样即可保证感染量的准确一致，更重要的是保证每个母猪都能接种样品，确保反饲效果准确一致，而且保证该方法的规范化操作和推广。00154本发明所采用的反饲方法操作简便，容易控制样品量，效果确实，成本低廉，以较低的投入获取较高的经济效益，并为提高集约化养猪场生产效率提供有效途经。具体实施方式0016本实施例在以本发明的技术方案为前提下进行实施，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件。0017本发明涉及提供一种对现行反饲方法改进了的、能提。
12、高母猪反饲成功率、降低产房仔猪病毒性腹泻发病率的方法。其基本依据是，引起仔猪腹泻的两种主要病毒TGEV和FDEV均属冠状病毒，属于自然界中最容易变异的病毒，采用当地现实流行的毒株进行免疫一定比已经商品化的疫苗更有效；而根据免疫学理论采用直接刺激黏膜免疫系统的口服免疫应该比现行的肌肉注射疫苗免疫效果好。0018为了有效防治本场其他批次母猪所产仔猪出现病毒性腹泻，本发明一改传统免疫方法，在经PCR确诊腹泻是TGEV或和PDEV感染所致后，立即采用反饲方法使母猪迅速说明书CN104186401A3/5页5感染二种病毒，这样母猪体内就会产生较高滴度的针对二种病毒的抗体，将抗体分泌到乳汁，所产仔猪通过及。
13、时哺乳获得高滴度母源抗体，从而起到抑制二种病毒感染、防治仔猪病毒性腹泻的效果。为了确保反饲效果整齐可靠，在操作方法上,本发明一改现行的让母猪自由采食反饲样品而获得感染的做法,首先采取腹泻严重仔猪的腹泻粪便100ML，或经绞碎的腹泻严重仔猪的肠管和内容物的混合物100G，加入灭菌生理盐水至500ML，加入治疗剂量的抗生素，制备成反饲样品；用注射器抽取20ML样品，直接涂抹或注射到母猪口腔和鼻腔。或是这样就可以保证让每个母猪在尽可能短的时间内获得同样确实的病毒感染量,只需一次操作就可使反饲母猪迅速感染并出现腹泻症状，2天后母猪开始腹泻，5天后腹泻率达80以上，710天内腹泻停止。该批母猪所产仔猪病。
14、毒性腹泻发病率平均为12，较传统免疫有显著改善，达到了被反饲母猪哺乳所产仔猪被动免疫力增强，仔猪病毒性腹泻发病率明显降低的目标。0019有一个产房有310头待产母猪，已经按照常规免疫程序进行过TGEV和PDEV二联苗肌肉注射免疫，该批母猪总产仔3710头，产后3天仔猪全部出现腹泻症状，10天内仔猪死亡2656头，死亡率达716。经PCR检测，该批次仔猪感染TGEV和PDEV,说明本场仔猪腹泻主要是由TGEV和PDEV感染引起的。0020实施例10021有一个产房仔猪出生3天后发生大批出现腹泻，病仔猪有喷射状稀粪及呕吐，同时伴有食欲稍减退，精神沉郁，7日龄以内的仔猪死亡率达到716。随机采取如下。
15、措施00221立即收集由于急性腹泻新死或濒临死亡的仔猪消化道胃内容物和内脏，每头猪的样品存放于一个样品袋内，将大部分样品冷冻保存20，并在同一天送三至五头猪样品至相关实验室，经PCR检测，该批次仔猪感染TGEV和PDEV,说明本场仔猪腹泻主要是由TGEV和PDEV感染引起的。00232在无菌操作台，一头仔猪取100克肠管及内容物，将样品置于冰上，无菌操作将内脏绞碎，放入灭菌生理盐水09NACL中至500ML，加入常规治疗剂量的抗生素，制备成反饲样品；00243一头仔猪肠管及内容物所制备的样品作为25头母猪即产前3周以上的怀孕母猪和后备母猪的反饲剂量；00254取50ML的灭菌注射器，接上15C。
16、M的软橡皮管，每头母猪抽取20ML上述反饲样品，直接涂抹或注射到健康母猪鼻腔或口腔里。00265注意事项1样品要现配现用；2本场样品只能用于本场反饲，且严禁引用其他场的样品对本场母猪进行反饲；3反饲的所有母猪必须表现出明显的临床症状即明显的腹泻症状；4人工感染后第二天就有母猪只出现腹泻，到第五天人工感染的母猪80以上出现腹泻，710内人工感染腹泻的母猪全部康复；5反饲只能用于产前三周以上的怀孕母猪及所有的后备母猪，产前三周内的母猪禁用。0027表1不同猪舍母猪反饲感染及产后仔猪腹泻情况0028说明书CN104186401A4/5页60029由表1可见，当一个产房开始出现仔猪腹泻后，采用本发明改。
17、进的母猪反饲方法对全场所有符合反饲条件的母猪全部进行反饲，取得了明显的降低仔猪腹泻的效果。妊娠母猪1310头，反饲后1114头出现腹泻，腹泻发病率85，总产仔15536头，仔猪腹泻1398头，腹泻率9；同样采用反饲的251头母猪，反饲后218头出现腹泻，腹泻发病率87，产仔2658头，仔猪腹泻318头，腹泻发病率12。而反饲前本场有一个产房310头待产母猪，已经按照常规免疫程序进行过TGEV和PDEV二联苗肌肉注射免疫，该批母猪总产仔3710头，产后3天仔猪全部出现腹泻症状，10天内仔猪死亡2656头，死亡率达716。可见反饲后以上各项指标均较反饲前的有显著改善。说明本发明提供的一种改进了的提。
18、高母猪反饲成功率、降低仔猪腹泻发病率的反饲方法，达到了被反饲母猪哺乳所产仔猪被动免疫力增强，仔猪病毒性腹泻发病率明显降低的目的。0030实施例20031有一个猪场腹泻先发生于保育或育肥期间的猪，病猪有喷射状稀粪及呕吐，同时伴有食欲稍减退，精神沉郁，发病率达62。为了预防产房仔猪发病，决定采取以下反饲措施00321立即收集病猪腹泻粪便，可将不同猪的粪便混合在一起；00332经PCR检测，该批次仔猪感染TGEV和PDEV,确诊本场仔猪腹泻主要是由TGEV和PDEV感染引起的。00343取100ML腹泻粪便，放入400ML的灭菌生理盐水09NACL中，加入常规治疗剂量的抗生素，制备成反饲样品；003。
19、54取50ML的灭菌注射器，接上15CM的软橡皮管，每头母猪抽取20ML上述反饲样品，直接涂抹或注射到母猪即产前3周以上的怀孕母猪和后备母猪鼻腔或口腔里。00365注意事项1样品要现配现用；2本场样品只能用于本场反饲，且严禁引用其他场的样品对本场母猪进行反饲；3反饲的所有母猪必须表现出明显的临床症状即明显的腹泻症状；4人工感染后第二天就有母猪只出现腹泻，到第五天人工感染的母猪80以上出现腹泻，710内人工感染腹泻的母猪全部康复；5反饲只能用于产前三周以上的怀孕母猪及所有的后备母猪，产前三周内的母猪禁用。0037表2不同猪舍母猪反饲感染及产后仔猪腹泻情况0038说明书CN104186401A5/。
20、5页70039由表2可看出，当一个保育舍开始出现仔猪腹泻后，采用本发明改进的母猪反饲方法对全场所有符合反饲条件的母猪全部进行反饲，取得了明显的降低仔猪腹泻的效果。妊娠母猪1210头，反饲后1004头出现腹泻，腹泻发病率83，总产仔14983头，仔猪腹泻1198头，腹泻率8；同样采用反饲的451头母猪，反饲后383头出现腹泻，腹泻发病率85，产仔4789头，仔猪腹泻527头，腹泻发病率11。而反饲前本场有一个产房310头待产母猪，已经按照常规免疫程序进行过TGEV和PDEV二联苗肌肉注射免疫，该批母猪总产仔3710头，产后3天仔猪全部出现腹泻症状，10天内仔猪死亡2656头，死亡率达716。可见反饲后以上各项指标均较反饲前的有显著改善。说明本发明提供的一种改进了的提高母猪反饲成功率、降低仔猪腹泻发病率的反饲方法，达到了被反饲母猪哺乳所产仔猪被动免疫力增强，仔猪病毒性腹泻发病率明显降低的目的。说明书CN104186401A。