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具有生物活性的人参三醇皂苷制剂及用途
    【技术领域】

    本发明涉及一种生物活性制剂，尤其是一种含人参三醇皂苷的制剂及其在制药领域中的应用。

    背景技术

    五加科人参属植物—人参(又叫高丽参)、西洋参、三七(或田七)等的根、叶、花均具有药用价值，从这些植物中提取的人参皂甙、西洋参皂甙和三七总皂甙主要含有以Rb₁为主的人参二醇型皂苷和以Rg₁为主的人参三醇型皂苷。人参二醇型皂苷和人参三醇型皂苷在改善血液循环的血流动力学、降低血液粘度、降低血脂等方面有着极其相似的作用，如中国专利ZL89100070.3公开的“人参分组皂苷的制备方法及其药物组合物及应用”，其中，制备方法是将所说的总皂苷溶解于低级醇溶液中，然后用碱金属氢氧化物作为沉淀剂进行沉淀，分离出沉淀物和上清物；药物组合物是指含有人参二醇型皂苷或人参三醇型皂苷的药物；其应用是指该药物组合物在预防和治疗因自然或化学突变、自由基氧化损伤或放射损伤或物理损伤而引起的细胞、组织或器官病变中的应用。该种方法的不足之处在于：用强碱会破坏易于水解的人参皂苷。又如中国专利CN1300594A公开了一种应用于造血功能性疾病的药物组合物。再如中国专利CN1334738A公开的一种用于中风后遗症的制剂。但是，人参二醇型皂苷和人参三醇型皂苷对神经系统的作用却是完全不同的，甚至是相反的。

    【发明内容】

    本发明的第一个目的在于提供一种具有生物活性的人参三醇皂苷制剂。

    本发明的第二个目地在于提供一种具有生物活性的人参三醇皂苷的制备方法。

    本发明的第三个目的在于提供具有生物活性的人参三醇皂苷作为制备对脑细胞活力或脑神经细胞活力具有正性的加强作用的药物或食品的应用。

    本发明的第四个目的在于提供具有生物活性的人参三醇皂苷作为制备治疗或改善因血液系统或神经系统弱化而引起的脑供血、脑供氧不足及神经活动减弱的疾病或功能失调的药物或食品的应用。

    本发明的第一个目的是这样实现的，它由下列重量百分比的生物活性成分组成：

    人参三醇皂苷           7-100％

    制剂用辅料             0-93％。

    本发明的第一个目的还可通过下列方案实现，它由下列重量百分比的生物活性成分组成：

    人参三醇皂苷           35-65％

    制剂用辅料             余量。

    所述人参三醇皂苷Rg₁的含量为45-99％。

    所述制剂用辅料为药用或食用辅料中的一种或几种，并制成医药或食品上可以接受的制剂。

    所述药用辅料为甘露醇、山梨醇、乳糖、蔗糖、淀粉及其衍生物、纤维素及其衍生物、卡波姆934、黄原胶、明胶、Syloid204、氨基酸及其衍生物、NaCl、CaCl₂、CaCO₃中的一种或几种。

    所述食用辅料为大豆油、花生油、聚乙二醇、面粉、骨胶、果胶、茶叶、蜂蜜中的一种或几种。

    本发明的第二个目的通过下列工艺方法实现：

    1、按人参皂苷∶乙醇＝1∶3-7的量，将人参皂苷加入浓度为70-90的乙醇中搅拌；

    2、边搅拌边按人参皂苷∶丙酮＝1∶10-30的量加入丙酮，充分搅拌后，在5-15℃下置8小时以上，过滤取滤液，减压浓缩至干；

    3、将上述干滤物上到硅胶柱上，用CHCl₃∶CH₃OH＝7∶3溶剂洗脱，收集含人参三醇皂苷的洗脱液，浓缩、干燥得含量大于45％的人参三醇皂苷；

    4、将上述人参三醇皂苷用硅胶柱层析法，并用CHCl₃∶CH₃OH＝7∶3溶剂洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，即得含量为90％的人参三醇皂苷。

    血液是人体新成代谢的载体，血液具有运输各种营养成份、氧份从而保持神经细胞活性的功能。脑力劳动者出现的头痛、头昏、精神不佳等状况是由于大脑供血和供氧不足造成的。

    因此，为了能清楚地说明本发明的第三个、第四个目的，现将本发明的药理研究结果报告如下：

    1、本发明对小鼠中枢神经递质受体和脑内蛋白质合成的影响

    用现有的药理模型，应用90％和45％的人参皂苷Rg₁样品给小鼠ip样品(50mg/Kg)连续5天，两种样品均能使中枢M胆碱受体密度显著增高及显著增加脑内蛋白质的含量，结果如下：

    中枢M胆碱受体密度测定(n＝6)

    组别    Bmax(f mol/mg protein)(mean±SD)    P    KD(nM)(mean±SD)  P

    对照组     360.01±57.23                             0.66±0.37

    Rg₁       508.45±102.13                  ＜0.05    0.68±0.23   ＞0.05

    Rg₁45％   502.11±72.34                   ＜0.05    0.63±0.21   ＞0.05

    上表表明样品均可提高脑内M胆碱受体密度。M胆碱受体在中枢神经系统内的分布极广，其主要功能之一是维持意识清醒和记忆功能。含45％的人参皂苷Rg₁样品因其能提高脑内M胆碱受体浓度，从而可以解释人参三醇皂苷具有恢复记忆的作用。

    2、本发明对脑缺血的改善作用

    长时间工作的脑力劳动者、体弱多病者、激烈运动者、血液粘稠者等会导致脑缺血和缺氧。用脑缺血模型、小鼠常压下而缺氧试验及小鼠断头后张口实验模型做实验，结果如下：

    样品对大鼠脑缺血后脑梗死范围的影响

    组别        n    剂量(g/kg)    左脑梗死范围％    P

    缺血对照组  10    --           15.20±4.41

    Rg₁        10   0.08          8.45±3.56      ＜0.01

    Rg₁45％    10   0.08          8.21±3.43      ＜0.01

    小鼠常压下耐缺氧时间及小鼠断头后张口呼吸时间的影响

    组别     n    剂量(g/kg)耐缺氧时间/min  P      张口呼吸时间/s   p

    对照组   10      --       20.01±4.41           14.32±3.21

    Rg₁     10     0.06      25.34±4.58   ＜0.01  18.78±4.18    ＜0.01

    Rg₁45％ 10     0.06      24.28±4.43   ＜0.01  19.33±4.56    ＜0.01

    结果表明样品具有良好的抗脑缺血作用，延长小鼠常压下耐缺氧时间及小鼠断头后张口呼吸时间，证明本发明具有供血、供氧作用。

    3、本发明提高脑力工作者工作效率和改善大脑供血、供氧的试验

    选一家软件开发公司的职员，在充分了解试验内容及可能对人体产生的作用的基础上，筛选年龄在24-40岁的工作人员64名，男女均有，随机分为对照和试验两组。对照组服用空白安慰剂，试验组给予含75.8％的人参皂苷Rg₁药物(25mg/片)，服用方法为每天刚上班时口含一片，试验周期为10天。实验结果如下：

    组别    n  头昏  头痛  精力不集中  连续工作时间    工作效率

    对照组  32   8    3        9            2h          75.42％

    试验组  32   4    2        4            3h          88.97％

    由以上结果，可以得出本发明的优点在于：

    1、本发明提供的人参三醇皂苷的制备方法原料来源广泛，工艺简单，不需用碱，易于工业化生产，产品质量易于控制，可做成药物注射剂，或者片剂、胶囊、冲剂、口服液、果糖、饮品等各种药用或保健用口服剂型。

    2、本发明提供的人参三醇皂苷制剂能治疗或改善因血液系统或神经系统弱化而引起的大脑供氧、供血不足及神经活动减弱的疾病和功能失调。

    3、本发明提供的人参三醇皂苷制剂对脑细胞活力和脑神经细胞活力具有正性的增强作用。

    4、本发明除能改善血流动力学、改善血液质量外，还能防止血管及神经炎症的发生，并能提高血中氧分压，改善睡眠时间和睡眠质量，恢复记忆，降低头痛、头昏、精力不集中等机体反应，从而提高生活质量和工作效率。

    【具体实施方式】

    实施例1

    1、取人参皂苷100克，溶于90％的乙醇500毫升中搅拌；

    2、边搅拌边加入2000毫升丙酮，充分搅拌后，在5℃下置8小时以上，过滤取滤液，减压浓缩至干；

    3、将上述干燥滤物上到硅胶柱上，用CHCl₃∶CH₃OH＝7∶3溶剂洗脱，收集含人参三醇皂苷的洗脱液5000毫升，浓缩、干燥，得Rg₁大于45％的人参三醇皂苷10克；

    4、将上述人参三醇皂苷用硅胶柱层析法，用CHCl₃∶CH₃OH＝7∶3溶剂洗脱，收集Rg₁组分，反复数次即得含量为90％以上的人参三醇皂苷成品。

    实施例2

    1、取人参皂苷100克，溶于70％的乙醇700毫升中搅拌；

    2、边搅拌边加入3000毫升丙酮，充分搅拌后，在15℃下置8小时以上，过滤取滤液，减压浓缩至干；

    3、将上述干燥滤物上到硅胶柱上，用CHCl₃∶CH₃OH＝7∶3溶剂洗脱，收集含人参三醇皂苷的洗脱液1000毫升，浓缩、干燥，得Rg₁大于45％的人参三醇皂苷10克：

    4、将上述人参三醇皂苷用硅胶柱层析法，用CHCl₃∶CH₃OH＝7∶3溶剂洗脱，收集Rg₁组分，反复数次即得含量为90％以上的人参三醇皂苷成品。

    实施例3

    按下列配方取料，采用现有工艺方法制成人参三醇皂苷颗粒冲剂1000袋，每袋重3.5g：

    人参三醇皂苷(Rg₁＝45％)        125克

    蔗糖                            3000克

    糊精                            400克

    乙醇                            适量。

    日服一次，每次服一袋(睡前服用)。

    实施例4

    按下列配方取料，采用现有工艺方法制成人参三醇皂苷胶丸1000粒，每粒重370mg：

    人参三醇皂苷(Rg₁＝45％)        75克

    PEG400                          300克

    实施例5

    按下列配方取料，采用现有工艺方法制成人参三醇皂苷冻干粉针剂1000支，每支250mg：

    人参三醇皂苷(Rg₁＝90％)        250克。

    实施例6

    按下列配方取料，采用现有工艺方法制成人参三醇皂苷口服液1000支，每支11g：

    人参三醇皂苷(Rg₁＝45％)        145克

    蜂  蜜                  1000克

    蒸馏水                  加至10kg。

    实施例7

    按下列配方取料，采用现有工艺方法制成人参三醇皂苷含片1000片：

    配方1

    人参三醇皂苷(Rg₁＝75％)   25克

    乳糖                       250克

    甘露糖                     100克

    17％淀粉浆                 50克

    十二烷基硫酸钠             1克。

    配方2

    人参三醇皂苷(Rg₁＝80％)   35克

    PEG600                     40克

    乳糖                       100克

    甘露糖                     50克

    糊  精                     5克

    十二烷基硫酸钠             1克

    PEG-4000～6000             200克

    本异型片为骨架型片，具有缓释作用。

    配方3

    人参三醇皂苷(Rg₁＝88％)    10克

    乳糖                        230克

    甘露糖                      120克

    黄原胶                      20克

    明胶                        15克

    甘油                        4克

    薄荷醇                      0.5克

    十二烷基硫酸钠                 1克。

    该片细腻、润滑、清香。

    实施例8

    按下列配方取料，制成人参三醇皂苷咀嚼片：

    人参三醇皂苷(Rg₁＝88％)        45克

    β-CD                           35克

    甘露糖                          50克

    蔗糖                            5克

    甲基纤维素                      2克

    阿司巴糖                        0.3克

    薄荷香精                        0.3克

    Syloid240                       0.7克

    硬脂酸镁                        1.3克

    制法：先将人参三醇皂苷和β-CD混合研磨，制成包合物备用。按上述配方将蔗糖、甘露醇和阿司巴糖混合后，过40目筛3次，再加入甲基纤维素和前述备用包合物，过12目筛3次，用10％啊拉伯胶浆为黏合剂制成湿料，过10目筛，在80℃下干燥8小时，用12目筛整粒，喷入薄荷香精后加入Syloid240和硬脂酸镁，压片即得1000片咀嚼片。