一种杀菌、抑菌药物组合物及其制剂和制备工艺 【技术领域】
本发明涉及一种杀菌、抑菌药物组合物，尤其涉及一种皮肤和粘膜用杀菌、抑菌复方碘伏药物组合物及其制剂和制备工艺。
背景技术
碘伏(Iodophor)是碘与表面活性剂，如聚乙烯吡咯烷酮、聚氧乙烯醚等物质的不定型结合物，即聚乙烯吡咯烷酮-碘(PVP-I)、壬基酚聚氧乙烯十二烷醇醚-碘(NP10-I)、壬基酚聚氧乙烯醚-碘(POP-I)、聚乙二醇-碘(PEG-I)、烷基磺酸盐-碘(ASE-I)、聚丙氧醚-碘(PPE-I)、烷烯咪唑-碘(PVI-I)、聚乙烯醇-碘(APA-I)、环葡糖甙-碘(CD-I)等碘伏。在医用碘伏中，聚乙烯吡咯烷酮-碘(PVP-I)最常用。碘伏对革兰氏阳性菌和阴性菌敏感，对抗酸杆菌、细菌芽孢、真菌、亲脂病毒和亲水病毒有效，但杀菌作用较慢，3分钟后，才能更好的发挥杀菌作用，在皮肤和粘膜保留有效时间较短，低浓度抑菌作用也较差。三氯羟基二苯醚(DP300，三氯生)也为抗细菌药物，但其对杀灭、预防和治疗皮肤、粘膜细菌、或真菌感染、或细菌和真菌二者混合感染效果不理想，对细菌芽孢无杀灭作用，不能用于以杀灭细菌芽孢为目的实用消毒。醋酸氯己定(Chlorhexidine，曾用名醋酸洗必泰，简称氯己定或洗必泰)，为抗细菌药物，但其对杀灭、预防和治疗皮肤、粘膜细菌、或真菌感染、或细菌和真菌二者混合感染效果不理想，对细菌芽孢无杀灭作用，也不能用于以杀灭细菌芽孢为目的的消毒。
【发明内容】
本发明的目的是提供一种杀菌、抑菌药物组合物，尤其提供一种皮肤和粘膜用杀菌、抑菌复方碘伏药物组合物及其制剂和制备工艺。克服了上述单一组分不能更有效杀灭和治疗皮肤细菌、或真菌感染、或细菌和真菌二者混合感染引起的疾病及其体外不能更迅速和较长时间持续杀菌消毒的缺点。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：
一种杀菌、抑菌药物组合物，包括以下组分制成的药剂：碘伏、三氯羟基二苯醚或醋酸氯己定；
所述碘伏为已知碘与表面活性剂的不定型结合物，所述表面活性剂可选自聚乙烯吡咯烷酮、聚氧乙烯醚等；所述碘伏可选自以下不定型结合物之一：乙烯吡咯烷酮-碘(PVP-I)、壬基酚聚氧乙烯十二烷醇醚-碘(NP10-I)、壬基酚聚氧乙烯醚-碘(POP-I)、聚乙二醇-碘(PEG-I)、烷基磺酸盐-碘(ASE-I)、聚丙氧醚-碘(PPE-I)、烷烯咪唑-碘(PVI-I)、聚乙烯醇-碘(APA-I)、环葡糖甙-碘(CD-I)等，尤其为聚乙烯吡咯烷酮-碘(PVP-I)；
所述组分可为以下重量份配比比例的组分：
碘伏∶三氯羟基二苯醚或醋酸氯己定为(0.02～2.0)∶(0.005～1.0)，优选为(0.2～1.0)∶(0.05～0.6)，最好为0.5∶0.3；
所述碘伏重量份是以有效碘量计；
所述杀菌、抑菌药物组合物还可包括药物学上可用的辅料；
所述药剂可为药剂学上所说的皮肤和粘膜给药剂型；尤其可为溶液剂、酊剂、洗剂、喷剂、擦剂、软膏剂、乳膏剂、膜剂、涂剂、栓剂、凝胶剂；
所述药剂还可为药剂学上所说的消毒剂；尤其可为液体消毒剂、消毒棉球(棉签)、颗粒剂、软膏剂、凝胶剂、消毒片剂、膜剂、泡腾剂和消毒粉剂。
本发明还提供所述杀菌、抑菌药物组合物的制备方法，包括以下步骤：
按上述比例称取碘伏、三氯羟基二苯醚或醋酸氯己定，依常规皮肤用药或消毒剂的制备方法制备而成皮肤和粘膜给药剂型或消毒剂；
所述制备方法还包括加入药学上可用地辅料。
本发明具有以下效果和优点：
1)本发明药物对抗细菌、真菌等微生物具有协同和增效作用。利用二种药物组分各自的作用，进行组合后发现组合物药物在杀灭微生物方面比单组分具有更快速作用和较长时间持续抑菌、杀菌作用，并保留了二种药物在复方药制剂中药性稳定、效果稳定的特点。
2)可作为复方外用局部用药和消毒剂，如组合物软膏剂、溶液剂和消毒剂等，在临床上对皮肤真菌合并细菌感染的病人，有独特的疗效和消毒作用，也不影响单纯真菌或细菌感染性皮肤病的治疗效果和清除病原菌。临床初步试验上述组合物软膏和溶液剂，治疗皮肤真菌或细菌，或真菌和细菌混合感染的病人，以及作为消毒剂用于外科病人、外科手术、妇科、口腔科等消毒，均获得显著的疗效。
本发明的上述优点和效果可以通过以下实验来说明。
一、对几种常见致病细菌和真菌的抑菌作用
1、材料与方法
真菌引自空军总医院皮肤科，细菌引自预防医学科学院抗生素研究所和空军总医院检验科。所用菌种为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌黑色变种芽孢繁殖体和白色念珠菌。
真菌培养基为沙氏肉汤培养基，由主要由1％蛋白胨和2％葡萄糖组成，PH为6-6.5；细菌培养基为普通肉汤，PH为7。
药液培养基的制备，按碘伏(PVP-I)和三氯羟基二苯醚或醋酸氯己定不同的比例配制。各组合物配方5mg先用1ml 95％乙醇溶解，再加无菌蒸馏水至5ml；然后各吸取上述配液0.2ml，分别加到1.8ml的培养基中，摇匀后对倍稀释出不同浓度的药液培养基。实验时，每管药液培养基1ml中加入菌液0.02ml；1ml含细菌或芽孢繁殖体105-106个或酵母样真菌103-104个。摇匀后放于35-37℃温箱内培养24小时，其中酵母样真菌48小时，观察结果。
药效判断标准，肉汤清亮同于药物空白对照管，为有抑菌作用；肉汤明显浑浊，或有菌膜生长，则为无抑菌作用。
3、结果
抑菌试验表明，碘伏与三氯羟基二苯醚、碘伏与碘伏醋酸氯己定药液对4株常见致病细菌和真菌(代表菌)的最小抑菌浓度(MIC)有所不同，碘伏与三氯羟基二苯醚、碘伏与醋酸氯己定在(0.02～2.0)∶(0.005～1.0)重量份配比比例配制时对几种常见致病真菌的最小抑菌浓度较低，作用较强(见表1-2、)，证明碘伏与三氯羟基二苯醚或醋酸氯己定配伍后，抗细菌和真菌的作用不受影响，组合物优于其组分药物，二药配伍具有有协同作用和增效作用。
二、对几种常见致病细菌、芽孢和真菌的杀灭作用
1、材料与方法
杀菌试验方法为载体定量法。所用菌种为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌黑色变种芽孢和白色念珠菌。菌悬液用含2％蛋白胨水溶液稀释。所用中和剂为含0.1mol硫代硫酸钠、5％吐温80、0.3％P卵磷脂、1％组氨酸和20％小牛血清等物质的缓冲液(PH7.4)，可去除复方碘伏溶液和其组分药中的药物残留作用。
试验用载体为脱脂白布片(1.0×1.0cm2)。染菌方法为滴染法。试验时，将染菌样片放入预先盛装好的药液(每个样片用量5ml)内，作用至规定的时间，无菌方法取出试验样片，移到含5ml中和剂溶液的试管内，中和5-10分钟，取样0.5ml接种平皿，每一样本接种2个平皿，然后以琼脂倾注法计数存活菌落数，并计算杀菌效果。
2、结果
经试验证明，碘伏(PVP-I)与三氯羟基二苯醚的复方碘伏药液(1)、碘伏与碘伏醋酸氯己定的复方碘伏药液(2)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠显示出较好的杀灭效果，在常温下(20-25℃)作用1分钟杀灭率可达99.99％；作用5分钟，可达100％(见表3-4)。复方碘伏溶液(1)和(2)对枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭效果，作用1分钟，其杀灭率可达96.08％-97.88％。但其单组分药碘伏、三氯羟基二苯醚、醋酸氯己定溶液，分别对枯草杆菌芽孢和白色念珠菌作用1分钟的效果较差，碘伏溶液为68.56％-78.68％，三氯羟基二苯醚和醋酸氯己定溶液分别为0％-88.60％和0％-96.56％。对枯草杆菌芽孢和白色念珠菌作用1分钟的效果，复方碘伏溶液(1)或(2)与与其组分药三氯羟基二苯醚溶液或醋酸氯己定溶液进行统计学比较，有显著差异(p＜0.01)。
表1碘伏与三氯羟基二苯醚不同浓度配伍体外对几种常见致病微生物的抑菌作用
最小抑菌浓度(MIC，μg/ml)
碘伏∶三氯羟基二苯醚
金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 枯草杆菌繁殖体 白色念珠菌
0.02∶0.1 2.500 1.250 2.500 5.000
0.1∶0.2 2.500 1.250 0.625 5.000
0.3∶0.5 0.625 0.625 0.625 1.250
0.3∶1.0 0.625 0.32125 0.625 0.625
0.3∶2.0 --- --- --- ---
0.3∶0.1 1.250 1.259 1.250 2.500
0.5∶0.3 0.625 0.625 0.625 2.50
0.5∶0.5 0.3125 0.3125 0.625 1.25
0.5∶0.8 0.3125 0.3125 0.3125 1.25
0.5∶1.0 0.1562 0.1562 0.3125 0.625
0.5∶2.0 --- --- --- ---
1.0∶0.2 0.625 0.625 0.625 1.25
1.0∶0.3 0.625 0.625 0.625 1.25
1.0∶0.5 0.1562 0.3125 0.625 0.626
1.0∶0.8 0.1562 0.1562 0.1562 0.62
2.0∶1.0 0.1562 0.1562 0.1562 0.3215
2.5∶0.5 --- --- --- ---
1.0∶0.0(单药对照) 5.000 5.000 10.000 10.000
0.0∶1.0(单药对照) 0.0250 0.625 0.625 2.500
注：1.细菌和繁殖体菌培养24小时，白色念珠菌培养48小时观察结果。
2.“---”药物浓度高溶解不好，无法观察结果。
表2碘伏与醋酸氯己定不同浓度配伍体外对几种常见致病微生物的抑菌作用
最小抑菌浓度(MIC，μg/ml)
碘伏∶醋酸氯己定
金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 枯草杆菌繁殖体 白色念珠菌
0.02∶0.1 2.500 2.500 2.500 5.000
0.1∶0.2 1.250 1.250 1.250 2.500
0.3∶0.5 0.625 0.625 0.625 1.250
0.3∶1.0 0.3125 0.32125 0.625 0.625
0.3∶2.0 --- --- --- ---
0.3∶0.1 1.250 1.259 1.250 2.500
0.5∶0.3 0.625 0.625 0.625 2.50
0.5∶0.5 0.3125 0.625 0.625 1.25
0.5∶0.8 0.3125 0.3125 0.625 1.25
0.5∶1.0 0.1562 0.1562 0.3125 0.625
0.5∶2.0 --- --- --- ---
1.0∶0.2 0.625 0.625 0.625 1.25
1.0∶0.3 0.625 0.625 0.625 1.25
1.0∶0.5 0.1562 0.3125 0.625 0.626
1.0∶0.8 0.1562 0.1562 0.1562 0.62
2.0∶1.0 --- --- --- ---
2.5∶0.5 --- --- --- ---
1.0∶0.0(单药对照) 5.000 5.000 10.000 10.000
0.0∶1.0(单药对照) 1.250 0.625 0.625 2.500
注：1.细菌和繁殖体菌培养24小时，白色念珠菌培养48小时观察结果。
2.“---”药物浓度高溶解不好，无法观察结果。
表3复方碘伏溶液(1)及其组分药对几种微生物的杀灭效果
菌种类别 对照平均菌数 不同作用时间(Min)杀灭率(％)
(cfu/片) 1 3 5 10
复方碘伏溶液(1)：
金黄色葡萄球菌 1150000 99.99 99.99 100.00 100.00
大肠杆菌 1080000 99.99 99.99 100.00 100.00
枯草杆菌芽孢 1166000 96.08 99.99 99.99 100.00
白色念珠菌 125600 99.99 99.99 100.00 100.00
碘伏溶液：
金黄色葡萄球菌 1150000 99.90 99.65 99.96 100.00
大肠杆菌 1080000 90.92 99.98 99.99 100.00
枯草杆菌芽孢 1166000 68.56 92.78 99.52 100.00
白色念珠菌 125600 78.68 99.80 99.96 100.00
三氯羟基二苯醚溶液：
金黄色葡萄球菌 1150000 99.88 98.96 99.98 100.00
大肠杆菌 1080000 97.96 98.88 99.99 100.00
枯草杆菌芽孢 1166000 0.00 16.86 28.66 40.80
白色念珠菌 125600 88.60 98.95 99.92 100.00
注：复方碘伏溶液(1)含0.5％(指有效碘含量，下同)碘伏和0.3％三氯羟基二苯醚，碘伏溶液含0.5％碘伏，三氯羟基二苯醚溶液含0.3％三氯羟基二苯醚。
表4复方碘伏溶液(2)及其组分药对几种微生物的杀灭效果
菌种类别 对照平均菌数 不同作用时间(Min)杀灭率(％)
(cfu/片) 1 3 5 10
复方碘伏溶液(2)：
金黄色葡萄球菌 1150000 99.99 99.99 100.00 100.00
大肠杆菌 1080000 99.99 99.99 100.00 100.00
枯草杆菌芽孢 1166000 97.88 99.99 99.99 100.00
白色念珠菌 125600 99.99 99.99 100.00 100.00
碘伏溶液：
金黄色葡萄球菌 1150000 89.90 99.65 99.96 100.00
大肠杆菌 1080000 90.92 99.98 99.99 100.00
枯草杆菌芽孢 1166000 68.56 92.78 99.52 100.00
白色念珠菌 125600 78.68 99.80 99.96 100.00
醋酸氯己定溶液：
金黄色葡萄球菌 1150000 99.90 99.99 100.00 100.00
大肠杆菌 1080000 99.96 99.99 100.00 100.00
枯草杆菌芽孢 1166000 0.00 18.86 32.70 46.55
白色念珠菌 125600 96.56 99.99 100.00 100.00
注：复方碘伏溶液(2)含0.5％碘伏和0.3％醋酸氯己定，碘伏溶液含0.5％碘伏，醋酸氯己定溶液含0.3％醋酸氯己定。
三、临床病例报告举例
本发明组合物，即碘伏∶三氯羟基二苯醚或醋酸氯己定配方重量份配比比例为0.02～2.0∶0.005～1.0配制而成的外用药剂和消毒剂时，对治疗外伤感染、预防细菌、真菌感染及真菌、细菌混合感染的病症具有较好的治疗效果和消毒作用。
例1.关××，男，32岁，因手部皮皮肤破损，开始没有引起重视，后细菌感染，红肿化脓，诊断为外伤细菌感染，细菌培养为金黄色葡萄球菌感染。遂给予复方碘伏喷剂外用，连用1周，痊愈。
例2.万××，男性，20岁，因双股部内侧皮损伴痒4月而就诊，诊断为股癣。治疗前症状和体征明显，真菌培养为红色毛癣菌。遂给予复方碘伏溶液连用1周，第2周症状和体征消失，真菌镜检和培养均显示阴性，临床痊愈。
例3.曾××，男性，32岁，因左足3-5趾内侧皮损伴痒1周而就诊，诊断为足癣。治疗前症状和体征明显，真菌培养为白色念珠菌。遂给予复方碘伏软膏连用1周，第2周症状和体征消失，真菌镜检和培养均显示阴性，临床痊愈。
例4.毕××，男性，25岁，因双足趾间皮损伴痒半年，近日较痒抓破，病情加重，拌红肿就诊，诊断为趾间型足癣拌细菌感染。治疗前症状和体征均较重，镜检培养为须癣毛癣菌，细菌培养为金黄色葡萄菌。遂给予复方碘伏乳膏连用1周，停药时症状和体征基本消失，真菌镜检和细菌培养均阴性；第2周临床和真菌、细菌学检查均痊愈。
例5.党××，男性，20岁，因头部患疖肿拌红肿5天就诊，细菌培养为金黄色葡萄菌，诊断为化脓性毛囊炎。治疗前症状和体征明显，遂给予复方碘伏消毒溶液杀菌消毒，连用使用5次，第5天症状和体征消失，细菌培养阴性，临床痊愈。
例6.刘××，男性，22岁，因不小心被自行车创致左腿下肢破损，多处流血，用复方碘伏消毒洗液消毒处理，每天二次，连续3天，伤口未见感染，4天后伤口愈合。
病例7.黄××，女性，25岁，因右颈部皮损伴痒2周就诊，真菌镜检阳性，诊断为体癣，治疗前症状和体征明显，真菌培养为红色毛癣菌。遂给予复方碘伏涂剂外用，连用1周，第2周临床和真菌学痊愈。
病例8.贾××，男性，28岁，因前胸背部皮损伴痒1年而就诊，诊断为花斑癣。治疗前症状和体征积明显，真菌镜检阳性。遂给予复方碘伏洗剂治疗，连用1周，第2周停药时症状和体征消失，真菌镜检阴性，临床痊愈。
病例9.沈××，男性，25岁，因双小腿皮损伴痒2年，近日较痒抓破，病情加重，拌红肿就诊，诊断为细菌和真菌感染。治疗前症状和体征均较重，镜检培养为须癣毛癣菌，细菌培养为阳性，遂给予复方碘伏凝胶剂治疗，连用2周，停药时症状和体征基本消失，真菌镜检和细菌培养为阴性；第3周临床痊愈。
病例10.王××，女性，26岁，因外阴部部皮损伴痒1年而就诊，诊断为尖锐湿疣，遂给予复方碘伏擦剂治疗，连用10周，停药时症状和体征消失，临床判为治愈。
【具体实施方式】
实施例1
软膏剂
按0.5∶0.3的配方比例称取原料碘伏(PVP-I)0.5克(指有效碘含量，下同)、三氯羟基二苯醚0.3克，先用少量95％乙醇溶解，用0/W剂型，赋形剂为十八醇4克、硬脂酸4克、单硬脂酸甘油脂3.5克、凡士林10克、甘油10克，土温-80 2克和余量蒸馏水混合均匀，紫外灭菌，配制成软膏剂100克。
实施例2
乳膏剂
按0.2∶0.6配方比例称取原料碘伏(PVP-I)0.2克、醋酸氯己定0.6克，先用少量95％乙醇溶解，用0/W剂型，赋形剂为十八醇4克、硬脂酸10克、单硬脂酸甘油脂5克、凡士林6克、甘油10克，三乙醇胺0.8克和余量蒸馏水混合均匀，灭菌，制成乳膏剂100克。
实施例3
溶液剂或洗剂
按0.02∶1.0配方比例称取原料碘伏(PVP-I)0.02克、三氯羟基二苯醚1.0克，加20ml95％乙醇，20ml丙二醇，余量蒸馏水混合均匀，灭菌，制成溶液剂或洗剂100ml。
实施例4
酊剂
按2.0∶0.005的配方比例称取原料碘伏(PEG-I)2.0克、醋酸氯己定0.005克，加50ml95％乙醇，20ml丙二醇，10ml甘油和余量蒸馏水混合均匀，灭菌，制成酊剂100ml。
实施例5
栓剂
按0.5∶0.5的配方比例称取原料碘伏(PEG-I)0.5克、醋酸氯己定0.5克，聚乙二醇-1000 73.5克，聚乙二醇-4000 25克。配制时聚乙二醇-1000和聚乙二醇-4000熔化，待温度降至50℃时加入上述原料药物搅匀，制成栓剂100ml，然后灌模，即得。
实施例6
喷剂
按0.25∶0.3的配方比例称取原料碘伏(PVP-I)0.25克、三氯羟基二苯醚0.3克，加20ml95％乙醇，20ml甘油和余量蒸馏水，混合均匀，灭菌，制成喷剂100ml。
实施例7
软膏剂
按0.3∶0.5的配方比例称取原料碘伏(PEG-I)0.3克、醋酸氯己定0.5克，先用少量95％乙醇溶解，用0/W剂型，赋形剂为十八醇4克、硬脂酸4克、单硬脂酸甘油脂3.5克、凡士林10克、甘油10克，土温-80 2克和余量蒸馏水，混合均匀，灭菌，制成软膏剂100克。
实施例8
膜剂
按0.5∶0.5的配方比例称取原料碘伏(PVP-I)0.5克、三氯羟基二苯醚0.5克，先用少量95％乙醇溶解，加入先用蒸馏水溶解的15克聚乙烯醇17-88中，随加随搅拌，加入30克甘油，加蒸馏水至100g，搅匀即可。
实施例9
乳膏剂
按1.0∶0.5配方比例称取碘伏(PVP-I)1.0克、三氯羟基二苯醚0.5克原料，先用少量95％乙醇溶解，用0/W剂型，赋形剂为十八醇4克、硬脂酸10克、单硬脂酸甘油脂5克、凡士林6克、甘油10克，三乙醇胺0.8克和余量蒸馏水，混合均匀，灭菌，配制成乳膏剂100克。
实施例10
液体消毒剂
按0.5∶0.3的配方比例称取原料碘伏(PEG-I)0.5克、三氯羟基二苯醚0.3克，加25ml 95％乙醇，10ml甘油和余量蒸馏水，混合均匀，灭菌，制成消毒剂100ml。
实施例11
消毒粉剂
按0.2∶0.1的配方比例称取原料碘伏(PEG-I)0.2克、醋酸氯己定0.1克，先用少量95％乙醇溶解，加淀粉20g、滑石粉余量，混合均匀，灭菌，制成粉剂100g。
实施例12
消毒颗粒剂或泡腾片剂
按0.5∶0.6的配方比例称取原料碘伏(PVP-I)0.5克、三氯羟基二苯醚0.6克，加入柠檬酸0.5克、碳酸氢钠0.5克、余量加至淀粉100.0克，混匀，整粒，按常规方法制成颗粒剂，装袋即得，或压片，制成泡腾片剂。