用于治疗鼓膜破裂的动物的耳用微生物组合物 【发明背景】
【发明领域】
本发明涉及耳用制剂和抗微生物剂，更具体地讲，涉及含有诸如喹诺酮和磺胺嘧啶银的抗微生物剂的组合的耳用制剂。更具体地讲，本发明涉及治疗鼓膜破裂的动物。
现有技术的简要说明
US4404197披露了某些喹诺酮和磺胺嘧啶银在治疗烧伤方面的应用。更具体地讲，该专利披露了包括磺胺嘧啶银和1-乙基-6-氟-1，4二氢-4-氧-7-(1-哌嗪基)-3-喹诺酮羧酸或其金属盐，例如，银、锌、钴或铈盐的组合物。值得注意的是，该专利披露了将所述组合物用于治疗烧伤，并且用于治疗局部、表面或皮肤感染，包括微生物和真菌感染等。不过，该专利没有披露或暗示将所述组合物用于耳部治疗。
US3761590披露了将磺胺嘧啶银单独用于烧伤治疗。将磺胺嘧啶银，优选存在于水可分散的亲水性载体中的磺胺嘧啶银用于烧伤。
Bozaard等(医学微生物系，Limburg大学，荷兰)披露了将磺胺嘧啶银膏用于治疗犬类的外耳道的慢性假单胞菌感染。
US5753269披露了可用于治疗耳部感染的耳用组合物，该组合物包括诸如喹诺酮或它的盐的抗微生物剂和磺胺嘧啶银的治疗有效组合，用于治疗动物的耳部感染。业已惊奇地发现，该组合物是安全地，并且能有效治疗耳部感染，甚至是鼓膜破裂的耳部的感染。到目前为止，对鼓膜破裂的动物的现有治疗都会产生诸如丧失听力的副作用。人们相信大多数抗微生物化合物(例如氨基糖苷)对耳蜗中的毛细胞具有毒性作用。所述毒性表现在听力的最终丧失上。值得注意的是，在鼓膜完整的情况下，当把这些化合物局部涂在皮肤上或外耳道中时可能没有毒性，因为所述鼓膜起着阻挡抗微生物剂直接进入内耳的屏障作用。不过，在鼓膜破裂的情况下，保护性屏障作用丧失，并且破裂的部分会提供化合物进入耳蜗的便利通道，从而增加了中毒的可能性。
发明概述
相反，本发明提供了一种用于治疗耳部感染的改进的组合物，该组合物包含抗微生物剂和磺胺嘧啶银的治疗有效组合，用于治疗动物的耳部感染，所述改进包括可用于安全治疗鼓膜破裂的动物的组合物。本发明还包括治疗动物耳部感染的改进方法，包括施用抗微生物剂和磺胺嘧啶银以治疗有效形式组合的组合物，以便治疗耳部感染，所述改进包括给鼓膜破裂的动物施用所述组合物。
含有诸如抗细菌剂，优选喹诺酮的抗微生物剂和磺胺嘧啶银的组合的组合物可以直接使用，或者与诸如水包油乳液的生理学上可以接受的载体一起使用。该组合物可用于安全并且有效地治疗由假单胞菌、真菌、Malessezia pachydermitis引起的耳部感染。下面将对本发明作更详细地说明。
发明详述
如上文所述，本发明涉及一种用于治疗鼓膜破裂的动物的耳部感染的组合物。该组合物包含诸如抗细菌剂的抗微生物剂，优选喹诺酮或它的盐和磺胺嘧啶银的治疗有效组合。通常，喹诺酮是氟化喹诺酮。下面所披露的有效组合专指喹诺酮。不过，本发明包括磺胺嘧啶银与能够与磺胺嘧啶银组合的其他抗微生物剂的组合，以便以磺胺嘧啶银和喹诺酮的组合形式有效治疗耳部感染。
氟化喹诺酮的非限定性例子可以选自下列一组：恩氟沙星；6-氟-1，4-二氢-1-(甲基氨基)-7-(4-甲基-1-哌嗪基)-4-氧-3-喹诺酮羧酸(氨氟沙星)；苯氟沙星；6-氟-1-(4-氟苯基)-1，4-二氢-7-(4-甲基-1-哌嗪基)-4-氧-3-喹诺酮羧酸(二氟沙星)；氟罗氟沙星(Flerofloxacin)；6，8-二氟-1-(2-氟乙基)-1，4-二氢-7-(4-甲基-1-哌嗪基)-4-氧-3-喹诺酮羧酸(氟罗沙星)；1-乙基-6，8-二氟-1，4-二氢-7-(3-甲基-1-哌嗪基)-4-氧-3-喹诺酮羧酸(洛美沙星)；马波沙星；1-乙基-6-氟-1，4-二氢-4-氧-7-(哌嗪基)-3-喹诺酮羧酸(诺氟沙星)；9-氟-2，3-二氢-3-甲基-10-(4-甲基-1-哌嗪基)-7-氧-7-H-吡啶[1，2，3-de]-1，4-苯并噁嗪-6-羧酸(氧氟沙星)；甲氟哌酸；芦氟沙星；沙氟沙星；和替马氟沙星。本发明优选的氟化喹诺酮是恩氟沙星。被收作本文参考的US4556658，具体针对恩氟沙星对喹诺酮及其制备方法进行了说明性而不是限定性的说明。
喹诺酮或其盐和磺胺嘧啶银是以有效量使用的，以便提供治疗有效性组合物。喹诺酮或其盐的使用量占组合物重量的0.005-1.5％，优选占组合物重量的0.1-1％。磺胺嘧啶银的使用量占组合物的0.05-2％，优选占组合物的0.5-1.5％。
在制备所述组合物时，喹诺酮和磺胺嘧啶银能够以任何方便的方式组合。例如，可以将粉碎的磺胺嘧啶银和喹诺酮彼此混合。该组合物可以直接使用，或者优选在与可以药用的生理载体一起配制的制剂中使用。
可以药用的生理载体的非限定性例子可以是水包油乳液。通常，所述油是无刺激性的润肤油。所述油的说明性，而不是限定性的例子可以选自矿物油、植物油和具有已知组成的再造的植物油。所述油的更具体的，但是非限定性的例子可以选自花生油、芝麻油、棉籽油等；由Huls America公司出售的中等链(C6-C12)甘油三酯(例如，MiglyolNeutral Oils 810，812，818，829，840等)。本发明所使用的典型的乳化剂可以选自Span60，它是山梨聚糖单硬脂酸酯；以及Tween60，它是Polysorbate60(这两种化合物都可以从ICI Americas购买)。所述乳化剂优选是非离子型的。乳化剂的用量可以占组合物重量的1.5-6.5％，优选占组合物重量的3.0-5.0％。所述乳液的疏水相可以占组合物重量的15.0-25.0％，优选占组合物重量的18.0-22.0％。
本发明的一个独特特征是，本发明的组合物能够制备为含有本文所披露的水包油乳液基形式。迄今为止，磺胺嘧啶银一直是作为用于烧伤治疗的膏基或固体合成敷料形式制备的。相关的硝酸银溶液被认为是不合适的。
除了上述成分之外，本发明的组合物制剂可以含有其他成分，如防腐剂(苯甲醇，parabens，或苯甲酸盐)，稳定剂(十六烷基硬脂醇，甘油酯)，矫味剂和着色剂。
下面是对提供本发明组合物的方法的说明性的而不是限定性的说明。在一个具有适当装备的容器中，在油中加热乳化剂和脂肪酸醇，以便形成悬浮液，并且将活性成分添加到该悬浮液中。在另一个容器中，将乳化剂添加到热水中，以便形成水溶液。将防腐剂和所述悬浮液添加到该溶液中，并且剧烈搅拌。所得到的包含本发明组合物的混合物能有效治疗耳部感染。
在治疗耳部感染时，优选以药学有效量将所述组合物施用在耳部来给予这种组合物。根据需要，所述组合物的用量为每只耳朵5-20滴，优选每只耳朵8-12滴，以便覆盖耳道。该组合物能够在必要时经常施用，优选每天2次。
通过下面的非限定性实施例将对本发明的上述及其他方面作进一步的说明，其中，所有的份数和百分比是以重量为基础的，除非另有说明。
实施例
下面的实施例说明了本发明的耳用组合物，以及制备和使用这种组合物的方法。在本发明的该实施方案中，按以下方法组合磺胺嘧啶银和喹诺酮。
将Polysorbate60(Tween60)添加到有不锈钢套的罐里的50-60℃的水中。将所得到的水溶液加热到61-75℃，在66℃的温度下，将防腐剂(苯甲醇)添加到该水溶液中，同时搅拌3-10分钟。
在75℃的温度下，用3-5分钟时间将恩氟沙星和磺胺嘧啶银添加到装在另一个容器中的Mygliol油中。将山梨聚糖单硬脂酸酯(Span60)和十六烷基硬脂醇添加到该油混合物中。将所得到的油混合物加热到62-75℃。然后用3-5分钟时间在剧烈搅拌下将该油混合物添加到所述温度为66℃的水溶液中。将所得到的组合物冷却到35-45℃，并且通过与高剪切力乳化剂混合或流过匀浆器进行匀浆。将该组合物进一步冷却到25-30℃。将最终的组合物包装在合适的容器中。
实施例1-3披露了使用上述方法和具有下面所列举的重量份数的成分制备含有本发明组合物的制剂。
实施例1
成分 重量份数
恩氟沙星 0.005-1.5
磺胺嘧啶银(SSD) 0.05-2.0
Polysorbate60 0.5-3.5
山梨聚糖单硬脂酸酯 0.5-3.0
十六烷基硬脂醇 0.5-3.0
苯甲醇 1.0-3.0
Miglyol油 8-18
水 89.4-18
实施例2：
成分 重量份数
恩氟沙星 0.5-1.0
磺胺嘧啶银(SSD) 0.5-1.5
Polysorbate60 1.0-3.0
山梨聚糖单硬脂酸酯 1.0-2.0
十六烷基硬脂醇 1.0-2.0
苯甲醇 1.5-2.5
Miglyol油 12-16
水 85-74
实施例3：
成分 重量份数
恩氟沙星 0.5
磺胺嘧啶银(SSD) 1.0
Polysorbate60 2.5
山梨聚糖单硬脂酸酯 1.5
十六烷基硬脂醇 1.5
苯甲醇 2.0
Miglyol油 14.5
水 76.5
实施例4
用多种犬类耳部病原体对恩氟沙星(喹诺酮)和磺胺嘧啶银的组合进行体外微生物学研究。该研究是按照临床实验标准国家委员会(NCCLS)的指南进行的，将ATCC对照生物用于测试的每一个琼脂平板。首先，确定每一种活性成分的最低抑制浓度(MICs)。根据MICs，恩氟沙星和磺胺嘧啶银(SSD)都对常见的皮肤(耳部)病原体起作用。每一种成分具有不同的作用方式，尽管这两种成分都是杀细菌剂。不同的作用方式降低了产生抗性的可能性。另外，在实验过的浓度下，恩氟沙星对鳞斑霉属或念珠菌属不起作用。磺胺嘧啶银能对这两种病原体起作用。以前没有报导过磺胺嘧啶银对鳞斑霉属的活性的证据。
使用MIC数据，通过标准检验板系统制备了含有组合的每一种抗微生物剂的系列稀释液的琼脂平板。为了确定恩氟沙星和磺胺嘧啶银之间的可能的相互作用，制备了稀释液，对于每一种抗微生物剂来说，所述稀释液是从高于MIC的三种稀释液到低于MIC的三种稀释液。在接触所述抗微生物剂之后，比较了每一种分离物的生长(抑制)模式。将具有相同反应的同一个属的分离物分成一组，然后对所有分离物进行数学计算，这种计算被设计成用于表示所述抗微生物剂是拮抗剂、协同剂或者是介于二者之间的制剂。被称为分段抑制浓度(FIC)指数的标准计算可以通过以下公式表示：
其中，X＝药物X的浓度，它是在其检验板行中的最低抑制浓度，而Y＝在其检验板行中的浓度。
FIC指数等于或小于0.5，表示是协同性的。FIC指数等于或大于2.0，表示是拮抗性的。FIC指数等于或大于0.5，但是小于2.0，表示不起作用。
为了进行比较，还将恩氟沙星与克霉唑进行组合。克霉唑具有抗真菌活性，但是对细菌基本上没有活性。将相同系列的病原体用于评估两种抗微生物剂的组合。在下面提供了表明所观察到的两种组合的反应的来自本研究的FIC数据(表1)。
表1 相互作用的抗微生物范围
分段抑制浓度指数
生物 Enro*+SSD Enro+Clotr
铜绿假单胞菌(15)** 0.507-0.751.167-2.67
中间葡萄球菌(12) 1.5 1.5
大肠杆菌(7) 0.36-1.5 0.8-1.8
肺炎克雷伯氏菌(5) 0.62-1.5 1.8-2.3
β溶血链球菌(9) 0.625-1.5 0.75-2.25
鳞斑霉属物种(12) 1.5 0.56-1.5
念珠菌属物种(4) 1.5-1.75 1.5
*药物缩写为：Enro＝恩氟沙星，SSD＝磺胺嘧啶银
Clotr＝克霉唑
**括号中的数字表示测试过的分离物的数量。
对于上面所披露的分离物来说，恩氟沙星和磺胺嘧啶银的组合在拮抗作用方面没有价值。很多细菌分离物的FIC指数低于1.0，表现出加和作用的明显倾向。少数计算表现出协同作用。对于鳞斑霉属和念珠菌属具有较小的累加作用倾向。
已前一直没有预见到恩氟沙星和磺胺嘧啶银的加和作用，因为具有不同活性模式的抗微生物剂组合可以被方便地证实为拮抗性的。例如，明确证实了恩氟沙星和克霉唑组合的拮抗性。在上面所提到的五种细菌属的三种中，计算出了高于2的得分。克霉唑没有抗细菌活性，然而有关数据表明，这种药物明显能干扰恩氟沙星的抗细菌作用。
尽管上面出于说明的目的对本发明进行了详细说明，可以理解的是，所述细节只是用于说明目的的，本领域技术人员在不超出由权利要求书所限定的本发明的构思和范围的前提下，可以对这些细节加以改变。