赤雹果提取物在制备镇痛、抗炎或/和抗过敏药物中的应用.pdf

本发明公开了赤雹果提取物在制备镇痛、抗炎或/和抗过敏药物中的用途，它是针对现有中枢性镇痛药和解热镇痛药之缺陷和赤雹果的开发潜力而发明的。发明人通过多年实验研究，发现赤雹果提取物具有很强的镇痛、抗炎和抗过敏作用，而且高效、低毒、不产生成瘾性、无明显副作用，比现有的中枢性镇痛药和解热镇痛药具有显著的优点。所说的赤雹果提取物可以是赤雹果水提取物；也可以是赤雹果水溶性提取物、赤雹果乙醇提取物、赤雹果正丁醇提取物、赤雹果乙酸乙酯提取物、赤雹果石油醚提取物之其中的任意一种或任意二、三、四种的组合。

1、  赤雹果提取物在制备镇痛、抗炎或/和抗过敏药物中的用途。

2、  权利要求1中所述的赤雹果提取物为赤雹果水提取物。

3、  权利要求1中所述的赤雹果提取物为赤雹果水溶性提取物、赤雹果乙醇提取物、赤雹果正丁醇提取物、赤雹果乙酸乙酯提取物、赤雹果石油醚提取物之其中的任意一种或任意二、三、四种的组合。

赤雹果提取物在制备镇痛、抗炎或/和抗过敏药物中的应用
技术领域：本发明属于中药制剂技术领域，涉及赤雹果提取物在制药方面的新用途。
背景技术：疼痛不仅是多种疾病的共有症状，而且其本身也是一种疾病。疼痛除了痛觉感受外，常伴有情绪、心血管和呼吸等方面的变化，重者可导致休克，因此，治疗疼痛是目前临床上的一大难题。控制疼痛除了治疗原发病外，主要以药物治疗为主。目前，临床上常用的镇痛药按其作用特点可分为中枢性镇痛药和解热镇痛药两类。其中，中枢性镇痛药镇痛作用强，但因具有成瘾性而依法限用；解热镇痛药虽兼有解热、镇痛、抗炎等作用，且无成瘾性，但镇痛作用较弱，多数又有胃肠道反应(如胃溃疡、胃出血、恶心呕吐等)以及变态反应等副作用。因此，寻找非成瘾性、高效、低毒、副作用少的镇痛药就成了制药领域的当务之急。
赤雹果(Thladiantha Dubia Bunge，别名：赤苞果、赤包果、赤包子、土瓜、王瓜)是一种在民间应用已久的草药，资源丰富，分布广泛。据《河北中草药》(1977年10月第一版第740页)记载，它主要用于治疗闪腰岔气、肺结核、反胃吐酸，咳嗽吐血，黄疸、痢疾、便血等症，且毒性较低，无明显副作用。民间长期应用无成瘾性。但是，关于赤雹果具有镇痛、抗炎以及抗过敏之药效作用的研究尚未见有公开。
发明内容：
本发明的目的是，针对现有镇痛药的缺陷和赤雹果的开发潜力，提供一种以赤雹果为原料制备镇痛、抗炎或/和抗过敏药的新途径。
本发明人通过多年实验研究，发现赤雹果提取物具有很强的镇痛、抗炎和抗过敏作用，所以提出其技术解决方案为：赤雹果提取物在制备镇痛、抗炎或/和抗过敏药物中的用途。
前面所述的赤雹果提取物可以是赤雹果水提取物；也可以是赤雹果水溶性提取物、赤雹果乙醇提取物、赤雹果正丁醇提取物、赤雹果乙酸乙酯提取物、赤雹果石油醚提取物之其中的任意一种或任意二、三、四种的组合。
以上赤雹果提取物在药效学研究上的主要技术参数如下：
1、在镇痛活性研究方面：
(1)采用小鼠扭体法：对小鼠扭体反应的抑制率分别为：(5mg/kg)吗啡78.3％、(200mg/kg)阿司匹林60.3％；而(1g/kg)赤雹果的水提取物、水溶性提取物、乙酸乙酯提取物、乙醇提取物、正丁醇提取物和石油醚提取物，则依次为：67.8％、69.5％、53.6％、46.9％、39.4％和29.8％。
(2)采用小鼠热板法：小鼠痛阈提高率为：(5mg/kg)吗啡90.3％、(200mg/kg)阿司匹林10.2％；而(1g/kg)赤雹果的水提取物、水溶性提取物、乙酸乙酯提取物、乙醇提取物、正丁醇提取物和石油醚提取物，则依次为：49.8％、54.6％、36.5％、42.9％、19.1％和13.8％。
(3)采用小鼠甩尾法：痛反应的抑制率：(0.75mg/kg)吗啡188％、(200mg/kg)阿司匹林124％；而0.5g/kg赤雹果的水溶性提取物为40％，1g/kg赤雹果的水溶性提取物为145％，2g/kg赤雹果的水溶性提取物为165％。
(4)赤雹果水溶性提取物不同疼痛模型的镇痛作用的ED50分别为：小鼠扭体法：3.80(2.45～5.75)g/kg，相当生药：11.73(7.56～17.75)；小鼠甩尾法：1.99(1.29～3.09)g/kg，相当生药：6.14(3.98～9.54)g/kg；小鼠热板法：2.29(2.12～3.63)g/kg，相当生药：7.07(6.54～11.20)g/kg。
上述试验以及小鼠福尔马林实验、大鼠佐剂性关节炎性疼痛实验等实验结果都表明，赤雹果提取物具有显著的镇痛作用。
2、在镇痛作用与吗啡受体关系的研究方面：
采用小鼠浸尾法测定痛阈，注射吗啡7.5mg/kg，药前痛阈19.3±4.4S，药后痛阈55.6±12.4S，痛阈提高188％；注射纳络酮2mg/kg，15min后，注射吗啡7.5mg/kg，药前痛阈20.4±6.9S，药后15.7±4.5S，痛阈提高-23％。灌胃2g/kg赤雹果水溶性提取物，药前痛阈19.5±4.3S，药后痛阈47.9±11.5S，痛阈提高145.6％；注射纳络酮2mg/kg，15min后，灌胃2g/kg赤雹果水溶性提取物，药前痛阈18.8±5.8S，药后痛阈44.6±14.0S，痛阈提高137.2％。上述试验结果说明：纳络酮可完全抗拮吗啡地镇痛作用，但对赤雹果水溶性提取物的镇痛作用无明显影响，提示赤雹果提取物的镇痛作用不是由吗啡受体介导的。
连续用吗啡7天后，其镇痛作用明显降低，连续用赤雹果7天后，其镇痛作用不减弱，说明赤雹果提取物镇痛作用无耐受性。
试验还表明：赤雹果水溶性提取物单次灌胃给药的镇痛作用达峰时间为(35±5.3)min，与吗啡相近，阿司匹林达峰时间为(60.2±13.5)min，但其镇痛作用持续时间明显长于吗啡和阿司匹林，镇痛作用维持时间分别为：赤雹果提取物(3.88±0.35)h，吗啡(2.16±0.82)h，阿司匹林(2.75±0.87)h。
3、在抗炎作用研究方面：
(1)采用小鼠耳廓肿胀法：1g/kg赤雹果水溶性提取物对二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀度的抑制率为47.5％，3mg/kg地塞米松的抑制率为52.0％。赤雹果其他几种提取物对二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀也有不同程度的抑制作用。
(2)采用大鼠棉球肉芽肿实验法：1g/kg赤雹果水溶性提取物对大鼠棉球肉芽肿的抑制率为38.6％，3mg/kg地塞米松的抑制率为41.3％。赤雹果其他几种提取物对大鼠面球肉芽肿也有不同程度的抑制作用。
上述试验以及大鼠足跖肿胀法和大鼠佐剂性关节炎实验都证明，赤雹果提取物具有显著的抗炎作用。
4、在抗过敏作用研究方面：
(1)采用大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒试验法：1g/kg赤雹果水溶性提取物对天花粉引起的大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒保护率为75.8％，20mg/kg色甘酸钠为64.7％。
(2)采用大鼠同种被动皮肤过敏试验法：血清浓度为1∶5时，1g/kg赤雹果水溶性提取物对蓝斑直径的抑制率为40.2％，10mg/kg扑尔敏对蓝斑直径的抑制率为23.8％。试验结果表明明，赤雹果提取物具有明显的抗过敏作用。
与现有技术相比，本发明的进步主要在于：
(1)用赤雹果提取物制备镇痛、抗炎或/和抗过敏药物，高效、低毒、不产生成瘾性、无明显副作用，比现有的中枢性镇痛药和解热镇痛药具有显著的优点，是一种理想的镇痛药，必将为解除患者病痛发挥出积极作用。
(2)发现了赤雹果的新用途，提升了这种民间草药的医用价值。赤雹果原本资源丰富、分布广泛，繁殖力强，易于人工栽植。并且该植物抗病虫害能力强，几乎不被病虫害所侵袭，故被农药污染的机率低。可以想象，扩大赤雹果的采集和种植范围，不仅有利于保证充足、绿色的药材供应，而且也会为药农扩大生产带来经济利益。
(3)赤雹果提取物提取工艺简单，成本低，采用常规技术即可获得该提取物及其制备出不同药物剂型。试验过程表明，不同的提取方法、步骤可获得不同的有效成分和产率。进一步的试验研究，可在有效成分、药效、产率等方面为工业化生产找到最佳方案。
附图说明：图1是本发明的工艺流程图。
具体实施方式：下面参照工艺流程图，结合实施例对本发明作详细说明。
实施例，步骤1，将赤雹果干品粉碎，加8倍水/次煎煮3次，过滤，合并煎煮液，浓缩为浸膏，即为赤雹果水提取物。该提取物可直接用来制备镇痛、抗炎或/和抗过敏药物。
步骤2，将步骤1中的浸膏溶于10倍量热水成混悬液，然后用石油醚萃取3次，得石油醚萃取液，回收溶剂得赤雹果石油醚提取物。
步骤3，将步骤2中的水层再加乙酸乙酯萃取3次，得乙酸乙酯萃取液，回收溶剂得赤雹果乙酸乙酯提取物。
步骤4，将步骤3中的水层再加正丁醇萃取3次，得正丁醇萃取液，回收溶剂得赤雹果正丁醇提取物。
步骤5，将步骤4中的水层再加乙醇萃取3次，得乙醇萃取液，回收溶剂得赤雹果乙醇提取物。
步骤6，将步骤5中的水层浓缩，得赤雹果水溶性提取物。
由上述2、3、4、5、6步骤分别得到的赤雹果的石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、乙醇提取物和水溶性提取物，经药效实验得知，它们均具有镇痛、抗炎和抗过敏作用。其不同提取物镇痛强度顺序为：赤雹果水溶性提取物＞赤雹果水提取物＞赤雹果乙酸乙酯提取物＞赤雹果乙醇提取物＞赤雹果正丁醇提取物＞赤雹果石油醚提取物。实施中，可以单独使用一种或者使用其中的任意二、三、四种的组合，用来制备镇痛、抗炎或/和抗过敏药物。
                 工艺流程图