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用于改善红斑狼疮、相关的风湿疾病和发炎性的关节病的组合物和方法。这个组合物由生物类黄酮和菠萝蛋白酶构成。可以将维生素C加入到组合物中以改善效果。优选的类黄酮是木犀草素或槲皮素。杨梅酮可以与芸香苷一样作为糖苷使用，其含有木犀草素、槲皮素或杨梅酮作为苷元。根据与淋巴细胞Kv1.3通道相互作用的能力，能够选出其他有效的类黄酮。根据与淋巴细胞Kv1.3通道相互作用的能力，能够选出其他有效的黄酮。在优选的治疗方法中，通过口服的方式，至少每天给予类黄酮、菠萝蛋白酶和维生素C的混合物。每天给予三次500mg槲皮素、500mg菠萝蛋白酶和500mg维生素C的混合物是有效的。

1.  治疗红斑狼疮和炎症性关节疾病的组合物，其中包含类黄酮和菠萝蛋白酶。

2.  根据权利要求1所述的组合物，还包含维生素C。

3.  根据权利要求1所述的组合物，其中的类黄酮选自由木犀草素、槲皮素、杨梅酮和芸香苷。

4.  根据权利要求1所述的组合物，其中的类黄酮包含黄酮醇。

5.  根据权利要求1所述的组合物，其中的类黄酮包含糖苷。

6.  根据权利要求5所述的组合物，其中糖苷具有苷元，该苷元是黄酮醇。

7.  根据权利要求6所述的组合物，其中黄酮醇选自于槲皮素、木犀草素和杨梅酮。

8.  根据权利要求1所述的组合物，其中类黄酮被选择与淋巴细胞Kv1.3通道相互作用。

9.  根据权利要求6所述的组合物，其中黄酮醇与淋巴细胞Kv1.3通道相互作用。

10.  根据权利要求1所述的组合物，其中类黄酮包含槲皮素。

11.  根据权利要求10所述的组合物，其中还包含维生素C。

12.  在患者中治疗红斑狼疮和炎症性关节疾病的方法，包括重复给予类黄酮和菠萝蛋白酶的步骤。

13.  根据权利要求12所述的方法，其中给药步骤还包括给予维生素C。

14.  根据权利要求12所述的方法，其中给药步骤为口服给药。

15.  根据权利要求14所述的方法，其中给药步骤为至少每天重复给药。

16.  根据权利要求15所述的方法，其中给药步骤为每天至少重复给药两次。

17.  根据权利要求12所述的方法，其中类黄酮是选自木犀草素、槲皮素、杨梅酮和芸香苷。

18.  根据权利要求12所述的方法，其中类黄酮包含黄酮醇。

19.  根据权利要求12所述的方法，其中类黄酮包含糖苷。

20.  根据权利要求19所述的方法，其中糖苷具有苷元，该苷元是黄酮醇。

21.  根据权利要求20所述的方法，其中黄酮醇选自槲皮素、木犀草素和杨梅酮。

22.  根据权利要求12所述的方法，其中类黄酮被选择与淋巴细胞Kv1.3通道相互作用。

23.  根据权利要求20所述的方法，其中黄酮醇与淋巴细胞Kv1.3通道相互作用。

24.  根据权利要求12所述的方法，其中类黄酮包含槲皮素。

25.  根据权利要求24所述的方法，其中还包含维生素C。

治疗红斑狼疮的组合物
背景技术
技术领域
本发明涉及风湿病和关节病的治疗。
现有技术的记载
红斑狼疮(“Lupus”)是一种慢性炎症疾病，它能影响皮肤、关节、血液和肾脏以及身体的其他部分。红斑狼疮是一种“自身免疫性”疾病，这种疾病发病时免疫系统将促使抗体直接损害身体的各个部分。正常的情况下抗体仅仅作用于细菌、病毒以及其他外源性物质。而当“自身”抗体形成后，则会发生由抗体介导的攻击身体组织的直接损害，或来自于免疫复合物的间接损害。免疫复合物是身体组织的部分和抗体的反应产物。这些复合物形成于皮肤、关节或肾脏中，引起红斑狼疮的多种症状。尽管红斑狼疮的许多病例是轻微的，但这种疾病有可能引发严重的危及生命的症状。
红斑狼疮是一种“风湿性”疾病，这类风湿性疾病通常也包含一种自身免疫性成分。红斑狼疮和其他风湿性疾病造成的多种损害通常是由炎症反应过程引起的。炎症通常是一个过程，发生炎症时，其中组织区域的循环加大，血管壁通透性增加使白细胞能渗透到这个区域并攻击外源体。如果自身抗体参与了这个过程，那么身体自己的组织就会被攻击、损害甚至被毁坏。如果关节处发生炎症，那些关节处起缓冲和润滑作用的软骨就会被损坏。对于关节处的骨骼而言，这将引起摩擦损伤，并可导致更多的炎症和损害。这就是为什么抗炎症药物常常被用于治疗红斑狼疮和其他发炎的关节疾病。通常认为一些关节疾病，例如骨关节炎，是“磨损和撕裂性”疾病，其中患者关节处的软骨被自然侵蚀。然而，其最终结果依然是炎症(引起更多损害)，以使得抗炎药也是有效的治疗这类疾病的药物。
使用最广泛的抗炎药是非甾体类抗炎药，如布洛芬或酮洛芬，其能作用于白细胞炎症过程的下游。甾体类药物则通过减缓复制或加速经凋亡而使它们破坏来直接影响白细胞。其他有效药物为细胞毒素类药物例如硫唑嘌呤，它们通过快速破坏分裂细胞例如免疫细胞来抑制免疫系统(并因此抑制炎症)。
可以看到，所有这些药物治疗都存在严重的副作用。非甾体抗炎药能引起严重的消化系统的损害，并常常延长出血时间。甾体药物是可加合的(adductive))，且具有广泛的严重副作用，包括糖尿病。细胞毒素药物会导致免疫系统的过度抑制，往往造成感染甚至癌症。更严重的是，对于许多炎症疾病—尤其是红斑狼疮—可能对这些治疗中的任何一种都不会产生足够的反应。因此，极为需要对于红斑狼疮和其他炎症性疾病安全而有效的治疗。
发明概要
本发明人发现生物类黄酮，特别是黄酮醇(flavnols)，如槲皮索(Quercetin)，补充以菠萝蛋白酶和维生素C(每次500mg，一日三次)可以完全扭转红斑狼疮和其他炎症关节疾病的症状。木犀草素(Luteolin)，杨梅酮(Myricetin)和芸香苷(Rutin)也是本发明中有效的生物类黄酮。试验数据显示木犀草素比槲皮素更为有效。然而，考虑到经济因素，木犀草素难以经济地大量地得到。
尽管不希望将本发明所作的工作限制在单一的解释之中，发明人认为其功效的一个重要因素原因在于特异的生物类黄酮对特定的细胞离子通道的作用。过去，已经发现在某些自身免疫性疾病中，异常的钾通道表达与异常免疫反应相关(参见“异常钾离子通道表达在自体免疫......”，Chandy和Cahalan著，加州大学Irvine分校出版，1990年，和“在双负CD4^-CD8^-T-细胞中的与自体免疫疾病相连的非正常K⁺通道表达”，Eur J.Immunol，Cahalan MD，ChandyGK，Grissmer S.，1990，20；747-751(见“Abnormal K⁺channel expression inAutolmmune Diseases...”by Chandy and Cahalan published in 1990 by the Universityof Califomia at Irvine and“Autoimmune diseases linked to abnormal K+channelexpression in double-negative CD4^-CD8^-T cells，”Eur J.Immunol，Cahalan MD，Chandy GK，Grissmer S.，1990，20：747-751))。人们将患有试验性SLE(系统红斑狼疮)，(I型)糖尿病和EAE(试验性自体免疫脑炎)的老鼠用于Kv1.3通道测试，并发现，这三种疾病均具有CD4^-和CD8^-T细胞(双负T-细胞)的表达，这使得与各自疾病相关的不同组织产生炎症。所有这些疾病显示了通过Kv1.3通道控制的淋巴细胞的增殖。现已分别证明类黄酮，特别是槲皮素，能非常有效的调节钾通道的传导。这向发明人提示了类黄酮对于控制人的红斑狼疮是有效的。
发明的具体描述
以下描述将帮助本领域技术人员制备和使用本发明，以及阐述发明者所认为的实施本发明的最佳形式。既然本发明的总的实质在此已被界定，即特定地提供一种有效的红斑狼疮和其他自体免疫和关节炎症疾病的治疗，那么各种改进对于本领域技术人员，将是显而易见的。
类黄酮是在大多数陆生植物中发现的普遍存在的次生产物。不象其他传统药用植物化合物，如生物碱类具有含氮基团，类黄酮具有含氧基团。因此，它们是最终地电子受体而不是电子供体。类黄酮抑制在细胞因子释放通路中的5-脂肪氧化酶，因为类黄酮分子4’、3和7位上的羟基基团接受电子(参见，类黄酮对于花生四烯酸代谢的作用，A，F.Welton，L.D.Tobias，与类黄酮的公知作用相关的细胞激活的生物化学，S.G.Laychock，在生物学和医药学中的植物类黄酮：生物化学，药理学，和构效关系，231-242页，1986 Alan R liss，Inc.(Effects of FLAVONOIDS on Arachidonic Acid Metabolism，A.F.Welton，L.D.Tobias，The Biochemistry of Cell Activation Related to the Putative Action ofFLAVONOIDS，S.G.Laychock，Plant Flavonoids in Biology and Medicine：Biochemical，Pharmacololcal，and Structure-Activity Relationships，pg 231-242，1986Alan R Liss，Inc.)。类黄酮通过自由基的螯合来调节免疫反应，这可防止形成环氧二醇及其进一步对DNA的攻击。甚至催化离子和信号转导物都可被类黄酮螯合(参见，类黄酮与Cu²⁺离子相互作用的结构依存关系：对于它们的抗氧化性质的推断(Structural dependence off lavonoid interactions with Cu²⁺ ions：implications for their antioxidant properties)，Brown JE，Khodr H，Hider RC，Rice-EvansCA，Biochem J.1998 Mar 15；330(pt3)：1173-8)。
已经阐明了类黄酮的许多生物作用。例如，类黄酮能抑制脱碘酶，这是一种传播(promulgate)甲状腺功能的酶。碘苏氨酸(Iodotheonine)脱碘酶结合氧，并且直接破坏基础氧化作用。类黄酮具有结合氧运输分子碘苏氨酸脱碘酶的配体的空间结合模拟。(“类黄酮在免疫应答的氧自由基调节中的作用”(“Role ofFLAVONOIDS in the Oxygen-free Radical Modulation of Immune Responses”)，B.Pignol，et al.，“在免疫应答的氧自由基调节中的类黄酮的作用”(Role ofFlavonoids in the Oxygen-Free Radical Modulation of the Immune Response)，生物学和医药学中的植物类黄酮II：生物化学、细胞学和医药学性质(Plant Flavonoids inBiology and Medicine II：Biochemical，Cellular，and Medicinal Properties)，pg.173-182，1988 Alan R.Liss，Inc.；“类黄酮脱碘酶抑制剂与酶活性位点模型的构效关系(Stmcture Activity Relationships of FLAVONOIDS Deiodinase Inhibitors andEnzyme Active Site Model)”，S.V.Cody，生物学和医药学中的植物类黄酮：生物化学、药理学和构效关系(Plant Flavonoids in Biology and Medicine：Biochemical，Pharmacological，and Structure-Activity Relationships)，1986 Alan R.Liss，Inc.，pg.373-382)。因此，“类黄酮调低了体内平衡的恒温器”。(“植物黄酮抑制碘苏氨酸脱碘酶”(“Iodothyronine Deiodinase is Inhibited by PlantFLAVONOIDS”)，J.Koehrle pg.324，“类黄酮脱碘酶抑制剂与酶活性位点模型的构效关系”(Structure Activity Relationships of FLAVONOIDS DeiodinaseInhibitors and Enzyme Active Site Model)，S.V.Cody，生物学和医药学中的植物类黄酮：生物化学、药理学和构效关系(Plant Flavonoids in Biology and Medicine：Biochemical，Pharmacological，and Structure-Activity Relationships)，1986 Alan R.Liss，Inc.，pg.373-382)。
本发明中类黄酮的活性被认为是通过作用于如上所述的离子通道而介导的。然而，这些对于甲状腺的作用表明在本发明中这些类黄酮可能对不止作用于一个生物系统。本发明人将菠萝蛋白酶包括在本发明中，因为一些迹象表明这些酶能够帮助被损坏的关节处的软骨的再生。总的来说，单独的菠萝蛋白酶并不能缓解骨关节炎或被红斑狼疮引发的关节炎所造成的关节疼痛。从逻辑上来说这个化合物对红斑狼疮是无效的，因为红斑狼疮引起的持续炎症将掩盖菠萝蛋白酶的任何关节修复效果。显然，骨关节炎，至少在一些情况下，被炎症过程所介导。这可以解释为何菠萝蛋白酶对治疗这种病并不十分有效。
然而，本发明的这种类黄酮成分通过它对离子通道的作用，也可能通过其他的目前没有阐明的生物学效应控制炎症。由于离子通道内的变化降低了白细胞活性，因而降低了炎症对关节的攻击。免疫系统调节作用的降低(如由白细胞介导的)降低了自体抗体的产生。在这些条件下，菠萝蛋白酶显示其能帮助关节的修复。显然，菠萝蛋白酶在某些方面与类黄酮是协同增效的，因为不用菠萝蛋白酶，用类黄酮在治疗上就明显不如联合使用有效。许多天然食品含有类黄酮；但是，如果有也是极少植物，含有菠萝蛋白酶和有效的类黄酮。同时，现在还不清楚天然产物中的类黄酮的结合是否会降低“适宜”类黄酮的整体活性。由于各种原因，许多针对红斑狼疮和相关疾病的食疗并未成功。然而，本发明人相信维生素C的加入将增加类黄酮/菠萝蛋白酶混合物的效果，显然未加维生素C的混合物也有效。可是，因为维生素C是相对无害的，它已用于大量的试验中。
专家们进行的关于离子通道功能的筛选试验指出大量类黄酮尤其是某些类黄酮醇具有适宜的电荷结构来调节关键的离子通道。在本发明的多数试验中使用的槲皮素在离子通道功能试验中非常有效。在这样的试验中木犀草素比槲皮素更有效。有限的试验显示用木犀草素替换本发明配方中的槲皮素将更为有效。然而此时发明人缺少药用级别木犀草素的已备来源来证明它是否总体上显著地更为有效。槲皮素和木犀草素结构上差一个羟基(与槲皮素相比，木犀草素缺乏)。有限数目的试验显示杨梅酮在本发明中有一定活性；这个化合物比槲皮素多了一个羟基。另外，芸香苷在本发明中同样具有适当活性。芸香苷是一种槲皮素的糖苷(芸香糖苷)，以使得，芸香苷的代谢可能会得到槲皮素。很显然具有与槲皮素或木犀草素相似结构的其他类黄酮，或者这些类黄酮的糖苷，在本发明中同样具有功能。
使用本发明组合物治疗临床病人的效果是极为显著的。除了这里描述的例子以外，可以毫不夸张地讲，很多病人使用槲皮素/菠萝蛋白酶/维生素C的混合物时呈现相似的结果。
在第一批试验对象中的一人是BZ，她已卧床9个月，既不能坐也不能翻身。出现了典型的红斑狼疮蝴蝶样皮疹(Lupus butterfly rash)，诊断显示血液试验ANA(抗核酸抗体)滴定度呈阳性，符合红斑狼疮的诊断标准。这位病人的母亲以前红斑狼疮的试验是阳性，曾使用几种药物治疗，包括羟氯喹(plaquinel)和环孢霉素。第二个病人，KA，也已经被诊断为红斑狼疮阳性，正在使用羟氯喹和环孢霉素治疗。
这两位受试的病人通过在一至两个月内使用上述剂量的药丸(500mg槲皮素/500mg菠萝蛋白酶/500g维生素C)，每天三次，都从疲劳、压抑、痛苦的症状中快速恢复，消除了相关的皮疹，并恢复到正常生活状态，肾潮红停止，同时疼痛消除。这两个病人陈述通过使用本发明的化合物他们感到完全恢复而没有任何副作用，并能保持一种完美的健康状态。
在从他们说已经“完全康复”起的两个月之后，BZ和KA停止服用药物。就如所预期的，在两周以内症状开始重新出现。在重新进行上述治疗之后，所有症状又消失。这显示本发明产品仅仅对SLE(系统性红斑狼疮)的改善发挥作用。
其他的病人显示了相似的积极的结果。MK是一名65岁的老年妇女，患有血清反应阳性的风湿症的关节炎。她由于每周用22.5mg氨甲蝶呤治疗而出现副作用。她不再继续使用氨甲蝶呤，开始使用本发明的组合物，在一个月内，她的滑膜炎出现了显著的减弱。
NM是一位37岁的妇女，患有炎症性的多关节炎和ANA(抗核抗体)呈阳性。她出现斯耶格伦氏(Sjogrens)综合征，带有阳性SSA(抗-Ro)抗体。在用本发明组合物治疗三个月后，她注意到头发脱落减少，关节疼痛和肿胀减轻。她的血清学指标也改善了。她起初ANA滴定度是170，SSA滴定度是584，而且偶尔会非常非常高。她最近的血清学指标显示：ANA滴定度是67，SSA滴定度是429。
DS是一位患有SLE/斯耶格伦氏病的57岁妇女。她的患病症状是肺部浸润和肺部渗液，虽然用高剂量的泼尼松、羟氯喹和硫唑嘌呤加以治疗，她仍有持续的肺部症状，发热，关节肿大，提高的抗DNA抗体。使用本发明组合物治疗一个月后，抗DNA水平由454降到186(正常少于30)。
LC是一名46岁的妇女，患有SLE。她主要症状是关节炎和反复发作的浆膜炎。她有反复发作的胸痛和心悸。1999年，她的超声波心动描记图显示瓣膜变化，有痕量二尖瓣回流和轻度至中度三尖瓣回流。她还有肺部高血压，RV心脏收缩压力为45。LC开始使用本发明的组合物，在四个月之后逐渐摆脱了20mg的强的松(qd)和羟氯喹。她的最近的超声波心动描记图显示出改善，没有显示出肺部高血压的任何迹象。
目前，多于50位病人(大多数患有某种类型的红斑狼疮，其他人患有各种关节炎疾病)已经使用本发明的组合物治疗。实际上所有的病人的病情都出现明显的改善。
因此以下的权利要求理解为包括上述专门阐述和描述的内容，概念上的相等的内容，显然能被替换的内容，实质上包含了本发明的本质思想的内容。本领域技术人员将认识到能形成上述优选实施例的各种改变和改进，而不超出本发明的范围。仅仅是为了举例说明的目的提出了示例性的实施方式，而不应将其认为是对本发明的限制。因此，将能理解，除了在这里被专门描述的以外，在附加的权利要求的范围内，本发明都能被实施。