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1、10申请公布号CN104255450A43申请公布日20150107CN104255450A21申请号201410445989722申请日20140904A01H4/0020060171申请人南京标科生物科技有限公司地址210046江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边东108号1幢701室72发明人张金芳杨存54发明名称一种厚皮香的快速繁殖方法57摘要本发明涉及一种厚皮香的快速繁殖方法,包括外植体的消毒、芽诱导培养、丛生芽增殖、生根培养和炼苗移栽。本发明厚皮香组培方法操作简便,生长周期短,成活率高,遗传性状稳定,可以短期内获得大量的厚皮香幼苗。51INTCL权利要求书1页说明书2页19中华人民共和。
2、国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书2页10申请公布号CN104255450ACN104255450A1/1页21一种厚皮香的快速繁殖方法,包括无菌外植体的获得、芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导、野外炼苗移栽,其主要步骤如下(1)取厚皮香带芽茎段,按照常规的消毒方法对其进行灭菌处理;(2)将步骤(1)灭菌处理过的厚皮香带芽茎段接入培养基配方为MS/WHITE/B5IAA02MG/LIBA05MG/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30G/L,琼脂8G/L,PH5,光照1000LX;(3)取步骤(2)诱导出来的芽放入增殖培养基B52,4D0102MG/LTDZ0205MG/L。
3、ABA1MG/L,附加蔗糖30G/L,琼脂8G/L,PH5,光照1000LX,光期10H,暗期14H;(4)取步骤(3)增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基WHITENAA0102MG/L;(5)取步骤(4)生根后的厚皮香试管苗先进行室内炼苗培养,然后移栽到大田进行培养。2按照权利要求1所述的一种厚皮香的快速繁殖方法,其特征在于步骤(1)中所述厚皮香无菌芽的获得为,取厚皮香带芽茎段,先在漂白粉中浸泡3MIN,毛刷去除表面污渍,流水冲洗25MIN,超净工作台上75酒精处理30S,次氯酸钠处理12MIN,无菌水冲洗57遍。3按照权利要求1所述的一种厚皮香的快速繁殖方法,其特征在于步骤(2)诱导培养基。
4、采用了三种培养基MS、WHITE、B5筛选其诱导效果。4按照权利要求1所述的一种厚皮香的快速繁殖方法,其特征在于步骤(3)增殖培养基中附加了ABA1MG/L,能促进丛生芽的增殖。5按照权利要求1所述的一种厚皮香的快速繁殖方法,其特征在于步骤(4)中的生根培养条件为蔗糖20G/L,琼脂65G/L,PH5,光照1000LX,湿度6070。6按照权利要求1所述的一种厚皮香的快速繁殖方法,其特征在于步骤(5)中厚皮香的炼苗培养方法为小心取出长约5CM的试管苗,洗净根部培养基,栽植于珍珠岩泥炭土11的基质中培养,放置温室,用高锰酸钾溶液定期喷洒,培养20D后,移栽入大田,30D统计成活率。权利要求书CN。
5、104255450A1/2页3一种厚皮香的快速繁殖方法技术领域0001本发明涉及厚皮香组织培养的快繁方法,属于植物技术领域。背景技术0002厚皮香,TERNSTROEMIAGYMNANTHERA(WIGHTETARN)BEDDOME,山茶科,灌木或小乔木,又名白花果,称杆红,莫红砍,山茶树,猪血柴,气血藤。分布于湖北、湖南、贵州、云南、广西、福建、广东、台湾等省。日本、柬埔寨、印度也有分布。多生于酸性黄壤、黄棕壤的常绿阔叶林中或林缘,垂直分布海拔7003500M之间。厚皮香适应性强,又耐阴,树冠浑圆,枝叶层次感强,叶肥厚入冬转绯红,是较优良的下木,适宜种植在林下、林缘等处,为基础栽植材料。喜阴。
6、湿环境,在常绿阔叶树下生长旺盛。也喜光,较耐寒,能忍受10低温。喜酸性土,也能适应中性土和微碱性土。根系发达,抗风力强,萌芽力弱,生长缓慢,不耐强度修剪,但仍可进行轻度修剪,抗污染力强厚皮香生长较慢,原皮香为半阳性树种,抗有害气体性强,又是厂矿区的绿化树种,也是一种中药材,花可入药,可清热解毒,散瘀消肿,主治疥癣瘙痒,感冒等症。目前主要的繁殖方法是播种和扦插繁殖,发芽率较低,只有5060。利用组培方法可以有效的提高厚皮香的繁殖效率,但目前国内外尚无研究。发明内容0003本发明所要解决的技术问题是提供一种厚皮香的快速繁殖方法,采用本发明方法繁殖的厚皮香组培方法简便,生长周期短,成活率高,遗传性状。
7、稳定,可以短期内获得大量的厚皮香幼苗。0004本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的取厚皮香带芽茎段,先在漂白粉中浸泡3MIN,毛刷去除表面污渍,流水冲洗25MIN,超净工作台上75酒精处理30S,次氯酸钠处理12MIN,无菌水冲洗57遍,灭菌处理过的厚皮香带芽茎段接入培养基配方为B5IAA02MG/LIBA05MG/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30G/L,琼脂8G/L,PH5,光照1000LX,诱导出来的芽放入增殖培养基B52,4D02MG/LTDZ03MG/LABA1MG/L,附加蔗糖30G/L,琼脂8G/L,PH5,光照1000LX,光期10H,暗期14H,增殖培养出来。
8、的丛生芽放入生根培养基WHITENAA02MG/L,生根培养条件为蔗糖20G/L,琼脂65G/L,PH5,光照1000LX,湿度6070,然后将试管苗进行炼苗移栽,小心取出长约5CM的试管苗,洗净根部培养基,栽植于珍珠岩泥炭土11的基质中培养,放置温室,用高锰酸钾溶液定期喷洒,培养20D后,移栽入大田,30D统计成活率。0005采用本发明制备的厚皮香成活率为95,周期短,产量大,能耗少,利于大规模种植。0006下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。0007实施例1取厚皮香带芽茎段,先在漂白粉中浸泡3MIN,毛刷去除表面污渍,流水冲洗25MIN。
9、,超说明书CN104255450A2/2页4净工作台上75酒精处理30S,次氯酸钠处理12MIN,无菌水冲洗57遍,灭菌处理过的厚皮香带芽茎段接入培养基配方为MSIAA02MG/LIBA05MG/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30G/L,琼脂8G/L,PH5,光照1000LX,诱导出来的芽放入增殖培养基B52,4D01MG/LTDZ02MG/LABA1MG/L,附加蔗糖30G/L,琼脂8G/L,PH5,光照1000LX,光期10H,暗期14H,增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基WHITENAA01MG/L,生根培养条件为蔗糖20G/L,琼脂65G/L,PH5,光照1000LX,湿度60。
10、70,然后将试管苗进行炼苗移栽,厚皮香成活率为90。0008实施例2取厚皮香带芽茎段,先在漂白粉中浸泡3MIN,毛刷去除表面污渍,流水冲洗25MIN,超净工作台上75酒精处理30S,次氯酸钠处理12MIN,无菌水冲洗57遍,灭菌处理过的厚皮香带芽茎段接入培养基配方为WHITEIAA02MG/LIBA05MG/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30G/L,琼脂8G/L,PH5,光照1000LX,诱导出来的芽放入增殖培养基B52,4D02MG/LTDZ05MG/LABA1MG/L,附加蔗糖30G/L,琼脂8G/L,PH5,光照1000LX,光期10H,暗期14H,增殖培养出来的丛生芽放入生根培。
11、养基WHITENAA02MG/L,生根培养条件为蔗糖20G/L,琼脂65G/L,PH5,光照1000LX,湿度6070,然后将试管苗进行炼苗移栽,厚皮香成活率为91。0009实施例3取厚皮香带芽茎段,先在漂白粉中浸泡3MIN,毛刷去除表面污渍,流水冲洗25MIN,超净工作台上75酒精处理30S,次氯酸钠处理12MIN,无菌水冲洗57遍,灭菌处理过的厚皮香带芽茎段接入培养基配方为WHITEIAA02MG/LIBA05MG/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30G/L,琼脂8G/L,PH5,光照1000LX,诱导出来的芽放入增殖培养基B52,4D02MG/LTDZ02MG/LABA1MG/L,。
12、附加蔗糖30G/L,琼脂8G/L,PH5,光照1000LX,光期10H,暗期14H,增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基WHITENAA01MG/L,生根培养条件为蔗糖20G/L,琼脂65G/L,PH5,光照1000LX,湿度6070,然后将试管苗进行炼苗移栽,厚皮香成活率为92。0010实施例4取厚皮香带芽茎段,先在漂白粉中浸泡3MIN,毛刷去除表面污渍,流水冲洗25MIN,超净工作台上75酒精处理30S,次氯酸钠处理12MIN,无菌水冲洗57遍,灭菌处理过的厚皮香带芽茎段接入培养基配方为MSIAA02MG/LIBA05MG/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30G/L,琼脂8G/L,PH5,光照1000LX,诱导出来的芽放入增殖培养基B52,4D01MG/LTDZ05MG/LABA1MG/L,附加蔗糖30G/L,琼脂8G/L,PH5,光照1000LX,光期10H,暗期14H,增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基WHITENAA01MG/L,生根培养条件为蔗糖20G/L,琼脂65G/L,PH5,光照1000LX,湿度6070,然后将试管苗进行炼苗移栽,厚皮香成活率为93。说明书CN104255450A。