一种石斛种子繁殖方法.pdf

本发明公开了一种石斛种子繁殖方法，属于石斛人工栽培技术领域。其方法包括以下步骤：在播种培养基中播种，在增殖培养基中进行增殖培养，在生根培养基中进行生根培养，及在壮苗培养基中进行壮苗培养，从而得到栽培苗。本发明有效解决了现有技术外植体基数小，不易消毒，原球茎分化慢，繁殖周期长，增殖倍数低，无菌体系建立难等技术问题。

1.  一种石斛种子繁殖方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)播种：在无菌环境下，将种子接在播种培养基中，培养基PH值5.8，培养温度为25-27℃，光照强度为2300LUX，光照时间12h，培养天数45天，种子萌发形成原球茎；
（2）增殖：将原球茎转到增殖培养基中进行增殖培养，使得原球茎形成萌发状小苗，培养基PH值5.8，培养温度为26-27℃，光照强度为2300LUX，光照时间12-13h，培养天数45-50天；
（3）生根：将萌发状小苗转到生根培养基中进行生根培养，得到完整性小苗，培养基PH值5.8，培养温度为26-27℃，光照强度为2300LUX，光照时间12-14h，培养天数60天；
（4）壮苗培养：将生根培养形成的完整性小苗转到壮苗培养基中进行壮苗培养，从而得到栽培苗，培养基PH值5.8，培养温度为25-27℃，光照强度为2400LUX，光照时间为12-14h，培养天数90-100天。

2.  根据权利要求1所述的石斛种子繁殖方法，其特征在于：所述播种培养基的配比为：硝酸钾68g，硫酸铵5.6g，磷酸二氢钾12g，硫酸镁16g，氯化钙15g，乙二胺四乙酸二钠1.68g，硫酸亚铁3g，硫酸锰2.12g，硫酸锌1.72g，硼酸2600mg，碘化20mg，钾30mg，维生素B₁10mg,烟酸200mg，甘氨酸8mg，蔗糖20mg，土豆10g，白糖3g。

3.  根据权利要求1所述的石斛种子繁殖方法，其特征在于：所述增殖培养基的配比为：硝酸钾70g，硫酸铵5.6g，磷酸二氢钾13g，硫酸镁16g，氯化钙15g，乙二胺四乙酸二钠1.68g，硫酸亚铁3g，硫酸锰2.12g，硫酸锌1.88g，硼酸2600mg，碘化20mg，钾30mg，维生素B₁10mg,烟酸200mg，甘氨酸8mg，蔗糖20mg，BA0.5-1mg/L,24D0.6-0.8mg/L, 土豆10g，白糖3g。

4.  根据权利要求1所述的石斛种子繁殖方法，其特征在于：所述生根培养基的配比为：硝酸钾72g，硫酸铵5.6g，磷酸二氢钾14g，硫酸镁16g，氯化钙15g，乙二胺四乙酸二钠1.68g，硫酸亚铁3g，硫酸锰2.12g，硫酸锌2.16g，硼酸2600mg，碘化20mg，钾30mg，维生素B₁10mg,烟酸200mg，甘氨酸8mg，蔗糖20mg，IBA0.5-1mg/L,24D0.7-0.9mg/L, 土豆10g，白糖3g。

5.  根据权利要求1所述的石斛种子繁殖方法，其特征在于：所述壮苗培养基的配比为：硝酸钾75g，硫酸铵5.6g，磷酸二氢钾15g，硫酸镁16g，氯化钙15g，乙二胺四乙酸二钠1.68g，硫酸亚铁3g，硫酸锰2.12g，硫酸锌2.28g，硼酸2600mg，碘化20mg，钾30mg，维生素B₁10mg,烟酸200mg，甘氨酸8mg，蔗糖20mg，24D0.6-0.8mg/L, 土豆10g，白糖3g。

一种石斛种子繁殖方法
技术领域
本发明属于石斛人工栽培技术领域，特别是涉及一种石斛种子繁殖方法。
背景技术
石斛种苗生产中，一般以果实（种子）作为外植体进行快速繁殖。但该方法繁育的种苗，母体性状受限，性状差异大，品种杂，变异大，容易退化，品质难以保证，优良种性难以保持。而以茎尖或茎段作为繁殖材料，进行组培无性快繁时，虽然可以得到目标性选择强，性状一致，品质一致，纯度高的种苗，但存在着外植体基数小，不易消毒，原球茎分化慢，繁殖周期长，增殖倍数低，无菌体系建立难等技术问题，因此在实际生产中应用不多。
发明内容
针对上述现有技术的不足之处，本发明提供了一种石斛种子繁殖方法，能完全解决上述现有技术存在的问题。
本发明采用的技术方案是：一种石斛种子繁殖方法，其特征在于：包括以下步骤： 
(1)播种：在无菌环境下，将种子接在播种培养基中，培养基PH值5.8，培养温度为25-27℃，光照强度为2300LUX，光照时间12h，培养天数45天，种子萌发形成原球茎；
（2）增殖：将原球茎转到增殖培养基中进行增殖培养，使得原球茎形成萌发状小苗，培养基PH值5.8，培养温度为26-27℃，光照强度为2300LUX，光照时间12-13h，培养天数45-50天；
（3）生根：将萌发状小苗转到生根培养基中进行生根培养，得到完整性小苗，培养基PH值5.8，培养温度为26-27℃，光照强度为2300LUX，光照时间12-14h，培养天数60天；
（4）壮苗培养：将生根培养形成的完整性小苗转到壮苗培养基中进行壮苗培养，从而得到栽培苗，培养基PH值5.8，培养温度为25-27℃，光照强度为2400LUX，光照时间为12-14h，培养天数90-100天。
作为优选，所述播种培养基的配比为：硝酸钾68g，硫酸铵5.6g，磷酸二氢钾12g，硫酸镁16g，氯化钙15g，乙二胺四乙酸二钠1.68g，硫酸亚铁3g，硫酸锰2.12g，硫酸锌1.72g，硼酸2600mg，碘化20mg，钾30mg，维生素B₁10mg,烟酸200mg，甘氨酸8mg，蔗糖20mg，土豆10g，白糖3g。
作为优选，所述增殖培养基的配比为：硝酸钾70g，硫酸铵5.6g，磷酸二氢钾13g，硫酸镁16g，氯化钙15g，乙二胺四乙酸二钠1.68g，硫酸亚铁3g，硫酸锰2.12g，硫酸锌1.88g，硼酸2600mg，碘化20mg，钾30mg，维生素B₁10mg,烟酸200mg，甘氨酸8mg，蔗糖20mg，BA0.5-1mg/L,24D0.6-0.8mg/L, 土豆10g，白糖3g。
作为优选，所述生根培养基的配比为：硝酸钾72g，硫酸铵5.6g，磷酸二氢钾14g，硫酸镁16g，氯化钙15g，乙二胺四乙酸二钠1.68g，硫酸亚铁3g，硫酸锰2.12g，硫酸锌2.16g，硼酸2600mg，碘化20mg，钾30mg，维生素B₁10mg,烟酸200mg，甘氨酸8mg，蔗糖20mg，IBA0.5-1mg/L,24D0.7-0.9mg/L, 土豆10g，白糖3g。
作为优选，所述壮苗培养基的配比为：硝酸钾75g，硫酸铵5.6g，磷酸二氢钾15g，硫酸镁16g，氯化钙15g，乙二胺四乙酸二钠1.68g，硫酸亚铁3g，硫酸锰2.12g，硫酸锌2.28g，硼酸2600mg，碘化20mg，钾30mg，维生素B₁10mg,烟酸200mg，甘氨酸8mg，蔗糖20mg，24D0.6-0.8mg/L, 土豆10g，白糖3g。
与现有技术相比，本发明的优点在于：有效解决了现有技术外植体基数小，不易消毒，原球茎分化慢，繁殖周期长，增殖倍数低，无菌体系建立难等技术问题。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的详细说明。
一种石斛种子繁殖方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)播种：在无菌环境下，将种子接在播种培养基中，培养基PH值5.8，培养温度为25-27℃，光照强度为2300LUX，光照时间12h，培养天数45天，种子萌发形成原球茎。播种培养基的配比为：硝酸钾68g，硫酸铵5.6g，磷酸二氢钾12g，硫酸镁16g，氯化钙15g，乙二胺四乙酸二钠1.68g，硫酸亚铁3g，硫酸锰2.12g，硫酸锌1.72g，硼酸2600mg，碘化20mg，钾30mg，维生素B₁10mg,烟酸200mg，甘氨酸8mg，蔗糖20mg，土豆10g，白糖3g。
（2）增殖：将原球茎转到增殖培养基中进行增殖培养，使得原球茎形成萌发状小苗，培养基PH值5.8，培养温度为26-27℃，光照强度为2300LUX，光照时间12-13h，培养天数45-50天。所述增殖培养基的配比为：硝酸钾70g，硫酸铵5.6g，磷酸二氢钾13g，硫酸镁16g，氯化钙15g，乙二胺四乙酸二钠1.68g，硫酸亚铁3g，硫酸锰2.12g，硫酸锌1.88g，硼酸2600mg，碘化20mg，钾30mg，维生素B₁10mg,烟酸200mg，甘氨酸8mg，蔗糖20mg，BA0.5-1mg/L,24D0.6-0.8mg/L, 土豆10g，白糖3g。
（3）生根：将萌发状小苗转到生根培养基中进行生根培养，得到完整性小苗，培养基PH值5.8，培养温度为26-27℃，光照强度为2300LUX，光照时间12-14h，培养天数60天。所述生根培养基的配比为：硝酸钾72g，硫酸铵5.6g，磷酸二氢钾14g，硫酸镁16g，氯化钙15g，乙二胺四乙酸二钠1.68g，硫酸亚铁3g，硫酸锰2.12g，硫酸锌2.16g，硼酸2600mg，碘化20mg，钾30mg，维生素B₁10mg,烟酸200mg，甘氨酸8mg，蔗糖20mg，IBA0.5-1mg/L,24D0.7-0.9mg/L, 土豆10g，白糖3g。
（4）壮苗培养：将生根培养形成的完整性小苗转到壮苗培养基中进行壮苗培养，从而得到栽培苗，培养基PH值5.8，培养温度为25-27℃，光照强度为2400LUX，光照时间为12-14h，培养天数90-100天。所述壮苗培养基的配比为：硝酸钾75g，硫酸铵5.6g，磷酸二氢钾15g，硫酸镁16g，氯化钙15g，乙二胺四乙酸二钠1.68g，硫酸亚铁3g，硫酸锰2.12g，硫酸锌2.28g，硼酸2600mg，碘化20mg，钾30mg，维生素B₁10mg,烟酸200mg，甘氨酸8mg，蔗糖20mg，24D0.6-0.8mg/L, 土豆10g，白糖3g。
本发明的繁殖方法有效解决了现有技术外植体基数小，不易消毒，原球茎分化慢，繁殖周期长，增殖倍数低，无菌体系建立难等技术问题。并且，此组培方法提高了从种源到种植苗的品种纯正性及稳定性，种植苗的移栽成活率得到提升，发芽率提高，增加了繁殖代数。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。