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本发明涉及根皮素在制备防治糖尿病药物中的应用，发明人通过引进转入Ay基因的自发糖尿病动物模型kkay小鼠，研究根皮素对小鼠糖尿病血糖及血脂等相关指标的影响，证实其抗糖尿病作用，为根皮素用于制备防治糖尿病的药物提供依据。

1.  根皮素在制备预防和/或治疗糖尿病药物中的用途。

根皮素在制备预防和/或治疗糖尿病药物中的用途
技术领域
本发明涉及根皮素在制备预防和/或治疗糖尿病药物中的用途，属于医药技术领域。
背景技术
糖尿病是一组由于胰岛素分泌缺陷和/或胰岛素作用障碍所致的以高血糖为特征的代谢性疾病。持续高血糖与长期代谢紊乱等可导致全身组织器官，特别是眼、肾、心血管及神经系统的损害及其功能障碍和衰竭。严重者可引起失水，电解质紊乱和酸碱平衡失调等急性并发症酮症酸中毒和高渗昏迷。糖尿病的症状可分为两大类：一大类是与代谢紊乱有关的表现，尤其是与高血糖有关的“三多一少”，另一大类是各种急性，慢性并发症的表现。
随着社会的发展、生活水平的提高，糖尿病患病率呈现出世界性的上升趋势。WHO报告，1998-2003年，全球20-79岁糖尿病患者增加35.67%，达到1.94亿人，预计到2025年将达到3.33亿人，其中发展中国家患者的增长速度远远超过发达国家，新增病例将主要集中在中国、印支次大陆及非洲等等发展中国家。糖尿病的流行成为发展中国家和发达国家中的少数民族及欠发达地区所面临的重大社会和公共卫生问题。
迄今为止，治疗糖尿病的药物主要有三类：口服降糖化学药，如：磺酰脲类、双胍类、α糖苷酶抑制剂、胰岛素增敏剂和非磺酰脲类促胰岛素分泌剂等；胰岛素，包括：普通胰岛素、基因工程胰岛素和低精蛋白锌人胰岛素等；以及一些中药制剂包括：地黄、桑白皮、人参、知母、黄连等。尽管治疗糖尿病的药物有数十种，但依旧没有能够改变其在发达国家是第六位死因的现状。鉴于此，有必要研制新型的高效、安全的治疗糖尿病的药物。
发明内容
本发明的目的是提供根皮素的一种医药新用途，即其可用于制备预防和/或治疗糖尿病药物的用途。
据发明人了解，迄今为止，尚未见有关根皮素抗糖尿病生物活性或临床应用方面的研究。
根皮素是一种黄酮类化合物，具有多种药理作用，如抗氧化、免疫抑制，以及对细胞增殖、凋亡中的作用等，可广泛应用于医药、保健、食品、化妆品等领域。本发明通过构建能够满足生物样品中根皮素的分析方法，明确了根皮素在体内药动学规律。此外，利用kkay小鼠，发明人考察了根皮素的抗糖尿病作用，发现根皮素具有潜在的抗糖尿病作用。
附图说明
图1 根皮素对糖尿病小鼠血糖的影响；
图2 根皮素对糖尿病小鼠高密度脂蛋白的影响；
图3根皮素对糖尿病小鼠低密度脂蛋白的影响；
图4根皮素对糖尿病小鼠甘油三脂的影响；
图5 SD大鼠口服三剂量根皮素药时曲线；
图6 SD大鼠口服根皮素（100 mg·kg-1）后组织分布。
具体实施方式
下面是根皮素抗糖尿病的部分药效学试验及结果。
1实验动物
SPF级健康kkay小鼠100只，体重18～22 g，由成都达硕生物科技有限公司提供；清洁级健康C57BL/6J小鼠20只，体重18～22 g，由第四军医大学实验动物中心提供；所有实验动物适应性喂养3天后用于实验。
2动物造模方法
kkay小鼠在无菌环境下利用普通饲料喂养1周，测血糖达到糖尿病标准开始高脂饮食，维持高血糖状态。
3动物分组与处理方法
将高血糖kkay小鼠完全随机分为5组，分别为：对照组，根皮素5mg/kg组，10mg/kg组，20mg/kg组和格列美脲组，上述小鼠每天灌胃相应剂量的药物；正常C57BL/6J小鼠作为空白照组灌胃同等体积生理盐水。开始给药后每7天测血糖一次，第四次测血糖后处死所有小鼠，取血测血脂四项。
4根皮素对糖尿病小鼠血糖的影响
连续观察四周给药后糖尿病小鼠的血糖变化。经过四次监测我们发现，根皮素能够剂量依赖地降低小鼠的血糖；到第四周，各给药组血糖与对照组相比明显降低，有显著的统计学差异（P<0.05），见图1。
5根皮素对糖尿病小鼠高密度脂蛋白的影响
在给药四周后放血处死小鼠，检测血液中高密度脂蛋白的含量，结果表明（图2），根皮素能够剂量依赖地增加高密度脂蛋白的含量，与对照相比有显著的统计学差异（P<0.05）。
6根皮素对糖尿病小鼠低密度脂蛋白的影响
在给药四周后放血处死小鼠，检测血液中低密度脂蛋白的含量，结果表明（图3），根皮素能够剂量依赖地降低低密度脂蛋白的含量，与对照相比有显著的统计学差异（P<0.05）。
7根皮素对糖尿病小鼠甘油三脂的影响
在给药四周后放血处死小鼠，检测血液中甘油三脂的含量，结果表明（图4），根皮素能够剂量依赖地降低甘油三脂含量，与对照相比有显著的统计学差异（P<0.05）。
根皮素在大鼠体内的吸收动力学研究
健康SD大鼠18只，雌雄各半，体质量(200±20) g，随即分为三组，实验采用单次灌胃给药方式，每组给药剂量分别为100 mg·kg-1、200 mg·kg-1、300 mg·kg-1。于给药前(0 min)和给药后2、5、10、15、30、60、120、240、360、480和720 min，由大鼠眼眶静脉取血约0.7 mL，置于肝素化的EP管中，5000 rpm离心15 min，取上清液得大鼠血浆，于-20 ℃冷冻保存。
各给药剂量下测得的平均血药浓度-时间曲线见图5。采用中国药理学会数学药理委员会编制的DAS2.0实用药动学软件处理血药浓度数据，求得其药动学参数，结果见表1。

通过药动学参数可知，大鼠分别以100 mg·kg-1、200 mg·kg-1、300 mg·kg-1给药剂量灌胃给予根皮素后，其在大鼠体内吸收迅速，2 min即可测到原药，在30 min前，三种给药剂量的下均已达到最大血药浓度，AUC以及Cmax随着给药剂量的增加而呈递增趋势，并对不同给药剂量下所得AUC进行回归分析，r > 0.99，表明根皮素在大鼠体内的吸收动力学呈线性关系。而t1/ 2值说明根皮素在大鼠体内吸收分布迅速消除也很快。这可能与其化学结构及理化性质都有非常密切的联系，根皮素的小分子结构是导致其在体内迅速吸收分布的重要因素。
根皮素在大鼠体内的分布动力学研究
大鼠100 mg·kg-1灌胃给予根皮素15，30，60，120 min后，将得到的大鼠组织匀浆样品处理后分析测定，给药后不同时间点大鼠不同组织根皮素分布柱形图见图6（其中因部分组织中药物浓度较低，单独以纵坐标轴0~6 μg·g-1范围的柱形图表示）。
由根皮素大鼠体内分布试验结果可知，灌胃给药后根皮素在大鼠各组织器官中浓度的排列顺序为：给药15 min后，肠＞胃＞血浆＞肝＞睾丸，其余组织器官药物浓度很低几乎检测不到；给药30 min后，胃＞肠＞睾丸、子宫和卵巢＞心、肝、肺、肾，脾和脑中根皮素浓度很低几乎检测不到；给药60 min后，胃＞肠＞肝＞肺＞心、肾、睾丸、子宫和卵巢＞血浆＞脾，脑组织几乎检测不到根皮素，给药120 min后，肺＞胃＞肠＞肝＞心、肾、睾丸、子宫和卵巢＞血浆、脾，脑组织中依然检测不到根皮素。
通过建立的根皮素在大鼠组织样品中的LC-MS含量测定分析方法，根据大鼠血浆中根皮素药物吸收动力学研究确了根皮素在大鼠体内组织分布试验的采样时间点为给药后的15，30，60，120 min, 对这4个时间点采集的10种组织样品及血浆进行了测定，获得根皮素在大鼠体内的组织分布情况。
大鼠灌胃给予100 mg·kg-1 根皮素后，其在大鼠体内组织器官中分布迅速，在给药仅15 min后，药物可以在胃、肠、肝中被检出；由于采用灌胃给药方式，药物主要在胃、肠道吸收，因此这两种组织在30 min以前的药物浓度明显高于其他各组织，占组织总药物含量的90 %左右；60 min时胃、肠中的药物含量逐渐降低，而心、肝、肺、肾、生殖器官中的药物浓度开始逐渐升高，肝和肺相对较高，是心、肾、生殖器官的2倍左右；120 min肺中的药物浓度继续升高，高于其他组织器官的药物浓度，达到各组织药物总含量的一半以上，这可能与肺中的血流量大有关，其他组织中的药物呈下降趋势，说明除肺以外的其他组织在60 min之前药物分布均达到了最大浓度。从总体趋势来看，在大鼠给予根皮素后分布迅速但不是很广泛，在心、脾、生殖器官中药物富集较少，在肺中富集较多，最大浓度是肝中最大浓度的5倍，由此可说明根皮素具有一定的肺组织靶向性。肾脏中的药物富集也很少，由此可推测大部分根皮素在体内已转化成其他物质由尿液排出体外。在检测过程中根皮素在脑中几乎检测不到，说明根皮素不易透过血脑屏障。血浆药物浓度上升迅速，又在很短的时间内下降；大部分组织在血药浓度最大时亦有较高的浓度，之后随血药浓度的下降，各组织中药物浓度也下降，总趋势基本一致。