一种用于治疗烧伤的火把花根软膏剂、制备方法及其应用技术领域
本发明涉及一种外用制剂，更具体的说涉及一种用于治疗烧伤的火把花根软膏剂、制备方法及其应用。
技术背景
昆明山海棠[Tripterygiumhypoglaucum(Level)Hutch，简称THH]又名粉背雷公藤、火把花、金刚藤，属卫矛科雷公藤属植物，含有二萜类及生物碱类等活性成分。产于黔东南州，尤其是雷山县雷公山一带，药用部位主要是根部；因此，也被成为火把花根。昆明山海棠与雷公藤同属卫矛科雷公藤属植物，二者在化学结构及药理作用方而相似，具有抗炎、调节免疫、抗肿瘤等作用。但是昆明山海棠属于有毒中药，中医认为“有大毒”，所含总生物碱是其主要毒性成分，并显示出肯定的细胞毒性。近年来研究发现昆明山海棠有抗生育、诱导染色体畸变、诱导细胞凋亡等作用。
发明内容
为解决上述问题，本发明提供了一种用于治疗烧伤的火把花根软膏剂，所述火把花根软膏剂的活性成分为火把花根根芯的水提物。
所述火把花根软膏剂的活性成分为将水提物经过了5-15％醇沉后，上清液浓缩的稠膏。
用于治疗烧伤的火把花根软膏剂的制备方法，包括以下步骤：
1)在粉碎后的火把花根根芯加酸水溶液，调整pH值到5-6；
2)采用药材重量3倍以上的水加热提取粉碎后的火把花根根芯，收集提取液；
3)在提取液中添加乙醇，控制有效成分的含量为生药500g/L，乙醇浓度5-15％，静置超过12h；
4)过滤步骤2)中的上清液，60℃条件下减压浓缩，得到火把花根稠膏；
5)添加辅料，将火把花根稠膏制成外用制剂。
其中，步骤5)所述的将火把花根稠膏制成外用制剂，包括如下步骤：
1)称取硬脂酸10g、凡士林100g、羊毛脂80g、十六醇80g和单硬脂酸甘油酯40g于1000mL烧杯中，置于85℃水浴中加热，不断搅拌至溶解，得到油相；
2)称取十二烷基硫酸钠20g，甘油130g，氮酮25g和对羟基苯甲酸乙酯2g于500mL烧杯中，置于85℃水浴上加热，不断搅拌至溶解，得到水相。
3)称取9.3g火把花根稠膏溶于513g蒸馏水中，溶解后转移到水相中，混合均匀后，将混合液逐渐滴加到油相溶液中，不断搅拌至混合均匀，即得火把花根软膏剂。
其中，步骤1)所述的加热提取方法为回流或60℃以上温浸提取。
上述所述的用于治疗烧伤的火把花根软膏剂在制备治疗烧伤的药物中的应用。
本发明的有益技术效果是：本发明提供的火把花根软膏剂不仅能够迅速治愈烧伤，并且火把花根软膏剂对于皮肤创伤也有良好的修复作用。
具体实施方式
实施例1火把花根提取物的制备
1.将火把花根去皮，保留根芯，称取去皮的火把花根根芯10kg，将根芯粉碎，得到提取原料；将提取原料用3倍提取原料重量的水回流提取3次以上，将提取原料用3倍以上提取原料重量的水回流提取3次以，得到提取液；在低于10℃条件下，静置超过12h，上清液过滤，浓缩上清液，得到火把花根根芯稠膏A。
2.将火把花根去皮，保留根芯，称取去皮的火把花根根芯10kg，将根芯粉碎，用乙酸或盐酸的水溶液调pH值至5-6，得到提取原料；将提取原料用3倍以上提取原料重量的水回流提取3次以上，得到提取液；在低于10℃条件下，静置超过12h，上清液过滤，浓缩上清液，得到火把花根根芯稠膏B。
3.将火把花根去皮，保留根芯，称取去皮的火把花根根芯10kg，将根芯粉碎，用乙酸或盐酸的水溶液调pH值至5-6，得到提取原料；将提取原料用3倍以上提取原料重量的水回流提取3次以上，得到提取液；加入水和乙醇，控制有效成分的含量为生药300g/L，乙醇浓度10-15％，常温静置超过8h，上清液过滤，浓缩上清液，得到火把花根根芯稠膏C。
4.将火把花根去皮，保留根芯，称取去皮的火把花根根芯10kg，将根芯粉碎，用乙酸或盐酸的水溶液调pH值至5-6，得到提取原料；将提取原料用3倍以上提取原料重量的水回流提取3次以上，得到提取液；加入水和乙醇，控制有效成分的含量为生药300g/L，乙醇浓度20-30％，常温静置超过8h，上清液过滤，浓缩上清液，得到火把花根根芯稠膏D。
5.将火把花根去皮，保留根芯，称取去皮的火把花根根芯10kg，将根芯粉碎，用乙酸或盐酸的水溶液调pH值至5-6，得到提取原料；将提取原料用3倍以上提取原料重量的水回流提取3次以上，得到提取液；加入水和乙醇，控制有效成分的含量为生药300g/L，乙醇浓度40-60％，常温静置超过8h，上清液过滤，浓缩上清液，得到火把花根根芯稠膏E。
6.称取火把花根10kg，将火把花根粉碎，用乙酸或盐酸的水溶液调pH值至5-6，得到提取原料；将提取原料用3倍以上提取原料重量的水回流提取3次以上，得到提取液；加入水和乙醇，控制有效成分的含量为生药300g/L，乙醇浓度40-60％，常温静置超过8h，上清液过滤，浓缩上清液，得到火把花根稠膏F。
以雷公藤甲素为指标对上述三组火把花根根芯稠膏用紫外分光光度法测定总生物碱含量，具体如表1所示。
表1不同火把花根提取物的质量比较
分组 干膏收率％ 总生物碱转移率％ 雷公藤甲素转移率％ 外观
稠膏A 12.26 37.5％ 17.4％ 色泽棕褐色，粘稠，杂质少
稠膏B 16.93 98.8％ 41.7％ 色泽深褐色，粘稠，杂质多
稠膏C 12.48 98.9％ 38.9％ 色泽棕褐色，粘稠，杂质较少
稠膏D 11.94 94.4％ 37.4％ 色泽黄褐色，粘稠，杂质较少
稠膏E 8.97 89.2％ 35.7％ 色泽黄褐色，粘稠，杂质较少
稠膏F 10.95 94.5％ 44.9％ 色泽黄褐色，粘稠，杂质较少
对上述三组稠膏进行急性毒理检测，实验动物为体重20±2g的小鼠。具体如表2所示。
表2不同火把花根提取物急毒考察
分组 LD50(生药g/kg)
稠膏A 44.56
稠膏B 38.07
稠膏C 72.25
稠膏D 78.49
稠膏E 81.45
稠膏F 21.53
由此可知，采用火把花根芯的水提取物并对乙醇提取物采用醇浓度调整到5-60％静置除杂，不仅能够降低杂质率，不影响活性成分含量，而且稠膏的色素含量大幅度的降低，有利于制剂。并且稠膏的毒性大幅度的降低。
3火把花软膏剂的制备
实验组1的制备
制备油相：称取硬脂酸10g、凡士林100g、羊毛脂80g、十六醇80g和单硬脂酸甘油酯40g于1000mL烧杯中，置于85℃水浴中加热，不断搅拌至溶解，得到油相；
制备水相：称取十二烷基硫酸钠20g，甘油130g，氮酮25g和对羟基苯甲酸乙酯2g于500mL烧杯中，置于85℃水浴上加热，不断搅拌至溶解；得到水相；
火把花软膏剂的制备：称取实施例1中制备得到稠膏A9.3g溶于513g蒸馏水中，溶解后转移到水相中，混合均匀后，将混合液逐渐滴加到油相溶液中，不断搅拌至混合均匀，即得火把花软膏剂作为实验组1。
实验组2的制备：采用制备实验组1的制备方法分别制备油相和水相，称取稠膏B9.3g溶于513g蒸馏水中，溶解后转移到水相中，混合均匀后，将混合液逐渐滴加到油相溶液中，不断搅拌至混合均匀，即得火把花软膏剂作为实验组2。
实验组3的制备：采用制备实验组1的制备方法分别制备油相和水相，称取稠膏C9.3g溶于513g蒸馏水中，溶解后转移到水相中，混合均匀后，将混合液逐渐滴加到油相溶液中，不断搅拌至混合均匀，即得火把花软膏剂作为实验组3。
实验组4的制备：采用制备实验组1的制备方法分别制备油相和水相，称取稠膏D9.3g溶于513g蒸馏水中，溶解后转移到水相中，混合均匀后，将混合液逐渐滴加到油相溶液中，不断搅拌至混合均匀，即得火把花软膏剂作为实验组4。
实验组5的制备：采用制备实验组1的制备方法分别制备油相和水相，称取稠膏F9.3g溶于513g蒸馏水中，溶解后转移到水相中，混合均匀后，将混合液逐渐滴加到油相溶液中，不断搅拌至混合均匀，即得火把花软膏剂作为实验组5。
实施例3火把花软膏剂的活性考察
选用新西兰兔60只，雌雄各半，体重2.5±0.5kg。实验前24小时用脱毛剂硫化钡进行脱毛，实验时在各组动物背部用凝固汽油(普通汽油25ml，95％酒精60ml，松香60g、甘油5ml、二甲苯5ml、植物油5ml)烧灼20s，形成面积为30cm2的深Ⅱ度创面。造模后随机分为5组:火把花软膏剂1-5组，珍石烧伤膏(国药准字Z20020090)组、空白基质组。烧伤后半小时后用生理盐水清洗创面，然后分别在烧伤部位涂抹给药，2次/天，0.4g/次，观察创面愈合时间并测取涂药治疗后5天、10天、15天、20天、25天创面愈合面积，按(药前面积-药后面积)/药前面积计算愈合百分率。并分别于实验第3、7、14、21天对创面组织进行病理切片观察。
表3火把花软膏剂对创面愈合数量的影响
![]()
注:与空白基质组比较，*P<0.05，**P<0.01；
(一)表1结果显示:与空白基质组比较，在给药后25天，对原药材加酸游离出生物碱的火把花软膏剂实验组2、3、4能够显著提高烧伤大鼠的愈合率(p<0.05)。
表4火把花软膏剂对创伤面积和愈合率的影响![]()
![]()
注:与空白基质组比较，*P<0.05，**P<0.01。
表4结果显示:与空白基质组比较，火把花软膏剂各实验组都能在给药后10、15、20、25天能显著减少烧伤大鼠创伤面积、提高创面愈合率(p<0.05-0.01)。火把花软膏剂实验组2、3、4后15、20、25天能显著减少烧伤大鼠创伤面积、提高创面愈合率(p<0.05)。
表5火把花软膏剂对创面愈合天数的影响![]()
组别 剂量(g/只) N(只) 痊愈天数
空白基质组 0.8 12 27.25士2.54
实验组1 0.8 12 25.67士1.97*
实验组2 0.8 12 22.92士0.93**
实验组3 0.8 12 20.12士1.68**
实验组4 0.8 12 21.75士1.35**
实验组5 0.8 12 24.42士2.68*
珍石烧伤膏 0.8 12 20.75士1.71**
注:与空白基质组比较，*P<0.05，**P<0.01。
表5结果显示:与空白基质组比较，火把花软膏剂各组均能显著减少创面愈合的天数(p<0.05-0.01)。其中实验组3的技术效果最为理想。