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1、10申请公布号CN104066433A43申请公布日20140924CN104066433A21申请号201280061902522申请日20121214PCT/EP2011/07303720111216EPA61K36/48200601A61K38/00200601A61K39/0020060171申请人哈尔过敏控股有限公司地址荷兰莱顿72发明人斯特凡约翰科佩尔曼乔安娜宝琳娜玛丽亚范德克雷杰74专利代理机构北京安信方达知识产权代理有限公司11262代理人王思琪郑霞54发明名称药物制剂和其用于治疗花生过敏的用途57摘要本发明涉及可以用于免疫治疗的组合物，且特别涉及可用于经受花生过敏的哺乳类，例。
2、如人类哺乳类的免疫治疗的组合物。本发明还涉及本组合物用于通过免疫治疗使经受过敏的哺乳类的免疫系统脱敏的治疗性治疗的用途，和本组合物用于在对发展某种过敏有高度倾向的哺乳类中的预防性治疗的用途。特别地，本发明涉及包括改性的完整全花生提取物和药学上可接受的稀释剂和/或赋形剂的药物组合物，其中所述改性的全花生提取物是还原且随后烷基化的全花生提取物，优选包括可溶性花生仁蛋白质如ARAH1、ARAH2和ARAH6的脱脂全花生提取物。30优先权数据85PCT国际申请进入国家阶段日2014061386PCT国际申请的申请数据PCT/EP2012/0755352012121487PCT国际申请的公布数据WO20。
3、13/087837EN2013062051INTCL权利要求书1页说明书10页附图9页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书10页附图9页10申请公布号CN104066433ACN104066433A1/1页21药物组合物，所述药物组合物包括改性的全花生提取物和药学上可接受的稀释剂和/或赋形剂，其中所述改性的全花生提取物是还原且随后烷基化的全花生提取物。2根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述全花生提取物是脱脂的。3根据权利要求1或权利要求2所述的药物组合物，其中所述全花生提取物包括可溶性花生仁蛋白质。4根据权利要求1至3中任一项所述的药物组合物，其中所述全花生。
4、提取物包括ARAH1、ARAH2和ARAH6。5根据权利要求1至4中任一项所述的药物组合物，其中所述全花生提取物是通过以下可获得的A研磨花生以提供花生粉；B使用每50ML丙酮5克花生粉在丙酮中孵育所述花生30分钟，以提供脱脂的花生粉；C干燥所述脱脂的花生粉；D在具有在7和9之间的PH的缓冲液中悬浮所述干燥的花生粉；及E分离步骤D得到的上清液，从而提供全花生提取物。6根据权利要求1至5中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物还包括铝。7根据权利要求1至6中任一项所述的组合物，用于通过免疫治疗来治疗经受过敏的哺乳类。8根据权利要求7所述的用途，其中所述哺乳类是人类哺乳类。9根据权利要求1至6中任一。
5、项所述的组合物，用于针对所述过敏原使哺乳类的免疫系统脱敏的治疗性治疗，或用于在与所述过敏原接触后有发展过敏的高度倾向的哺乳类的预防性治疗。10根据权利要求9所述的用途，其中所述哺乳类是人类哺乳类。11根据权利要求1至6中任一项所述的组合物，用于药物。12用于免疫治疗的方法，所述方法包括以足够的量且持续足够的时间向经受过敏的哺乳类、或处于发展过敏的风险的哺乳类施用根据权利要求1至6中任一项所述的组合物，以减少、或消除所述哺乳类对所述过敏原的过敏应答。13根据权利要求12所述的方法，其中所述哺乳类是人类哺乳类。权利要求书CN104066433A1/10页3药物制剂和其用于治疗花生过敏的用途0001。
6、本发明涉及药物制剂、或组合物，其可以在免疫治疗中使用，并特别涉及可用于对经受花生过敏的哺乳类，例如人类哺乳类的免疫治疗的制剂或组合物。本发明还涉及本制剂或组合物用于通过免疫治疗使经受过敏的哺乳类的免疫系统脱敏的治疗性治疗的用途，和本制剂或组合物用于在对发展某种过敏有高度倾向的哺乳类的预防性治疗的用途。0002过敏原免疫治疗，也称为低敏治疗、免疫脱敏、低敏HYPOSENSIBILIZATION、或过敏原特异性免疫治疗，是用于过敏疾患的一种免疫治疗形式，其中患者被接种越来越大剂量的过敏原，即他们对其过敏的物质或多种物质，旨在诱导免疫耐受性。0003过敏原特异性免疫治疗是治疗过敏疾患的根本原因的唯一。
7、治疗策略。这是极具成本效益的治疗策略，并导致改善的生活质量。0004免疫治疗已被证明产生过敏症状的长期缓解、减少相关的过敏应答的严重程度、以及减少对过敏原的新的致敏的发展机会。免疫治疗旨在调节免疫系统对过敏原的应答。0005免疫治疗通常涵盖经由例如舌下或皮下途径重复暴露于特定过敏原，从而提供过敏患者对过敏原的脱敏，并因此减少过敏症状和用于基于症状的治疗。0006免疫治疗潜在的确切机制不完全清楚，但被接受的是免疫治疗导致对过敏原的免疫应答的改变。改变至少包括IGE合成的变化，和减少免疫系统对特定过敏原的过敏应答的IGE阻断抗体的产生。还观察到TH2向TH1/T调节细胞转化的增加。在分子水平上，部。
8、分潜在机制依赖于过敏原特异性IGG的优先诱导以中和过敏原及过敏原特异性IGE的减少。0007免疫治疗通常涉及使过敏患者暴露至低剂量的过敏原。剂量定期例如每周逐渐增加，直到达到“维持”剂量。这相当于在约4个月中每周一次注射以达到维持剂量。一旦达到维持剂量，施用注射较少，例如每月一次持续几年。通常，治疗越长和剂量越高，治疗收益越大。0008成功完成免疫治疗后，可以预期3至5年或更长时间段的长期保护。如果症状开始复发，或如果个体发生暴露于未包括在先前治疗方案中的新的过敏原，治疗可重复进行。0009花生是造成食物诱导的过敏的最常见的食物之一。花生过敏的根治性治疗尚未获得。使用花生水提取物AQUEOUS。
9、PEANUTEXTRACT的特异性免疫治疗SIT显示对经口摄入的花生的增加的耐受性。然而，如由NELSON等人JALLERGYCLINIMMUNOL1997JUNE；996PT174451报道的，花生水提取物导致不可接受的全身反应，甚至在维持注射期。因此，NELSON等人得出结论“对于这种治疗方法的临床应用，需要改性的花生提取物。”0010花生过敏的主要过敏原是花生种子贮藏蛋白ARAH1豌豆球蛋白和ARAH2羽扇豆球蛋白。在最近的研究MOVRARE等人，INTARCHALLERGYIMMUNOL；2011；第282290页中，患有疑似花生过敏的大部分年轻的成年人具有针对ARAH1和ARAH2的。
10、IGE抗体。除了这些主要过敏原，还报道了IGE针对其它花生仁蛋白质例如ARAH6的反应性。0011已经描述花生过敏原ARAH2和ARAH6通过还原和烷基化的方法的改性提供这些致敏蛋白质的低致敏形式。低致敏性可通过固相免疫测定中减少的IGE结合，或通过激活效应细胞，如嗜碱性粒细胞显示。然而，过敏原ARAH2和ARAH6不包括在花生中发现的所有的过敏原，且仅基于ARAH2和ARAH6，因此没有其它花生过敏原的免疫治疗或免疫接种，说明书CN104066433A2/10页4很可能不足以预防地治疗花生过敏的个体或使其脱敏。0012还原和烷基化不可逆地裂解蛋白质中的二硫键。ARAH2具有4个二硫键且ARA。
11、H6具有6个二硫键。已表明，还原和烷基化引起ARAH2和ARAH6的二级结构的重大变化，导致IGE结合损失和效应细胞的激活。然而，考虑到ARAH2以及在较小程度上的ARAH6仅形成花生过敏致病因素的一部分，仅有ARAH2和ARAH6可能不足以治疗花生过敏的个体。0013除了其它目标以外，本发明的一个目标是提供药物组合物或制剂，用于花生过敏的治疗性或预防性治疗。换言之，除了其它目标以外，本发明的一个目标是提供药物组合物或制剂，用于使患者对花生，或更具体地花生过敏原的脱敏。0014除了其它目标以外，这些目标通过如所附权利要求中限定的药物组合物实现。0015具体地，根据第一方面，除了其它目标以外，这。
12、些目标，通过包括改性的全花生提取物MODIEDWHOLEPEANUTEXTRACT和药学上可接受的稀释剂和/或赋形剂的药物组合物实现，其中所述改性的全花生提取物是还原且随后烷基化的全花生提取物。0016在本发明的上下文中，过敏原被定义为能够通过免疫球蛋白EIGE的应答刺激特应性哺乳类中的超敏反应的抗原。大多数哺乳类仅作为针对寄生虫感染的防御发动显著免疫球蛋白E应答。然而，一些哺乳类可以对许多普通的环境抗原响应。此遗传倾向也被命名为特应性。在特应性哺乳类中，非寄生虫抗原刺激不希望的IGE产生，导致超敏或过敏。0017在本发明的上下文中，全花生提取物是指包括花生中发现的基本上所有的种仁蛋白质的花生。
13、提取物。换句话说，根据本发明的全花生提取物代表花生中发现的蛋白质，并从而代表花生过敏的致病因素过敏原。因此，除了ARAH2和ARAH6，根据本发明的全花生提取物还包括其它花生过敏原，其中主要的花生过敏原是ARAH1。0018根据本发明，本全花生提取物通过还原与烷基化来改性，因此存在于全花生提取物的蛋白质中的二硫键断裂，随后为烷基化，导致包括二硫键的蛋白质的二级结构中的不可逆变化，并从而破坏这些蛋白质中引起IGE过敏反应的表位。0019还原二硫键的合适的剂AGENT是已知的且可以是，例如，2巯基乙醇ME、二硫苏糖醇DTT、二硫赤藓糖醇、半胱氨酸、高半胱氨酸、三丁基膦、亚硫酸盐、三2羧乙基膦TCE。
14、P、氰基硼氢化钠、碱液、谷胱甘肽、E巯基乙胺、巯基乙酸、甲硫醚或乙硫醚。0020烷基化还原的半胱氨酸残基的合适的剂是已知的且可以是，例如，是N乙基马来酰亚胺、胱胺、碘乙酰胺、碘乙酸、烷基卤化物、烷基硫酸盐ALKYLSULFATE、烯烃、或酶。0021考虑到相比ARAH2和ARAH6，ARAH1不包括二硫键，只有单一CYS残基，使包括主要过敏蛋白质ARAH1的全花生提取物经受还原和甲基化从而减少其致敏性是令人惊讶的。因此，ARAH1的还原和烷基化预期不会导致二级结构的变化和伴随全花生提取物的IGE结合损失和效应细胞的激活。尽管这样，特别是考虑到ARAH1是主要的花生过敏原，本发明人惊奇地发现，还。
15、原和烷基化对ARAH1有作用，且从而对改性的花生提取物的致敏性有作用。0022根据本发明该第一方面的优选的实施方案，本全花生提取物在使花生提取物经受还原和烷基化之前被脱脂。除去脂类和其它脂肪物质增加了提取物中的蛋白质含量，并从而增加了免疫原性IGE表位的相对数量，且从而增加了提取物的致敏性。0023根据本发明该第一方面的又另一个优选的实施方案，本全花生提取物包括可溶性花生仁蛋白质，更优选包括至少ARAH1、ARAH2和ARAH6。可溶性花生仁蛋白质代表花生蛋说明书CN104066433A3/10页5白质ARAH1、ARAH2和ARAH6的大多数，即便不是全部过敏原原因表位ALLERGENCAU。
16、SINGEPITOPE。0024根据本发明该第一方面的特别优选的实施方案，本全花生提取物是通过以下可获得的0025A研磨花生以提供花生粉；0026B使用每50ML丙酮5克花生粉在丙酮中孵育所述花生30分钟，以提供脱脂的花生粉；0027C干燥所述脱脂的花生粉；0028D在具有在7和9之间的PH的缓冲液中悬浮所述干燥的花生粉；及0029E分离步骤D得到的上清液，从而提供全花生提取物。0030上述方法提供了可溶性花生过敏原蛋白质的纯化提取物，即富集可溶性花生仁蛋白质的提取物，其可以容易地经受随后的还原和烷基化。0031根据本发明该第一方面的另一个特别优选的实施方案，本药物组合物还包括铝。出人意料的是。
17、，发现添加铝至本组合物进一步减少本改性的全花生提取物的致敏性。0032因为显著减少的IGE结合，或IGE表位，本药物组合物特别适合被用于对患者进行花生过敏脱敏的治疗性治疗中，优选地，通过免疫治疗或免疫接种。0033根据本发明，免疫治疗包括以足够的量且持续足够的时间向经受过敏的哺乳类，优选人类哺乳类施用本组合物，以减少、或消除所述哺乳类对所述过敏原的过敏应答。0034典型的足够的量将是以本组合物相对于其施用的个体体重计从约01NG/KG至10MG/KG、10NG/KG至约100G/KG、或01G/KG至1G/KG。通常，治疗将包括以在这些范围的下端的剂量的施用起始，并随着治疗的进展增加剂量。00。
18、35对于脱敏治疗，它通常需要患者接受频繁的施用，例如，最初地每一、两或三天，逐渐减少到每两或三周一次。其它合适的脱敏方案包括皮下注射，每24周一次，注射的剂量可在36个月的时期逐渐增加，且然后以每24周一次继续注射，持续长达约5年的时期。给予每日施用也是可能的，特别是用于舌下施用。0036脱敏的方案还可以包括在各种等价替代形式中常规地被称为快速脱敏、快速过敏原免疫治疗、快速过敏原接种、及快速或急速免疫治疗的治疗形式。从广义上讲，这个过程旨在通过以频繁例如每小时间隔，施用增加剂量的过敏原的一系列注射或经由另一种合适的载体，以使过敏患者提前达到提取物即，过敏原的免疫或维持剂量。如果成功的话，患者将。
19、会表现出对过敏原改善的抵抗，甚至可能呈现出对任何随后的过敏原暴露的完全无反应性。0037各种脱敏方案是本领域已知的，并且可例如包括治疗对过敏原具有速发型超敏反应的患者的方法，使用加速的快速免疫治疗安排，与在接受加速的免疫治疗之前用泼尼松和组胺拮抗剂预治疗这些患者的方法组合。0038本发明将在本发明的优选实施方案的下述实施例中进一步详细说明。在实施例中，参考了附图，其中0039图1显示了个体花生过敏原和西班牙SPANISH品种的提取物的RPHPLC图谱。图A个体花生过敏原在73ML处的峰ARAH2；在995ML处的峰ARAH6；在11ML处的峰ARAH1。图B西班牙品种的提取物空白MQ水；在73。
20、ML处的峰ARAH2；在说明书CN104066433A4/10页6995ML处的峰ARAH6；在11ML处的峰ARAH1；0040图2显示了个体花生过敏原改性之前和之后的RPHPLC图谱。上图ARAH1，箭头指示改性之前天然和之后RA。中图ARAH2，箭头指示改性之前天然和之后RA。下图ARAH6，箭头指示改性之前天然和之后RA；0041图3显示了个体花生过敏原改性之前和之后的远UVCD光谱。上图ARAH1，箭头指示改性之前天然和之后RA。中图ARAH2，箭头指示改性之前天然和之后RA。下图ARAH6，箭头指示改性之前天然和之后RA；0042图4显示了花生过敏小鼠激发后的体温。上图以天然花生提。
21、取物01、06、和3MG/小鼠激发。下图以改性的花生提取物01、06、和3MG/小鼠激发；0043图5显示了实施例6A中使用的致敏、脱敏和激发方案的时间线，和实施例7B中使用的致敏、脱敏和激发方案的时间线；0044图6显示了在第91天激发的小鼠的温度A，与在第85天的肥大细胞激活B；MMCP1；0045图7显示了在第112天激发的小鼠的温度；0046图8显示了在第99天测试的所有组的血清中MMCP1的水平；0047图9显示了在第99天测试的所有组的血清中IGEA、IGG1B0048和IGG2AC的水平。实施例0049实施例1样品采集和提取物的制备005012种花生样品由MALEKI博士USDE。
22、PARTMENTOFAGRICULTURE,NEWORLEANS,USA慷慨地提供，包括四种不同的品种兰纳RUNNER、西班牙SPANISH、巴伦西亚VALENCIA和弗吉尼亚VIRGINIA。这些品种通常在西欧和美国消费。部分花生被烘烤在预热的循环热空气烘箱中140持续15分钟。0051手工研磨花生并用丙酮脱脂5克花生使用50ML丙酮脱脂30分钟，并留在室温RT干燥过夜。以10ML50MMTRISHCLPH8010W/V悬浮1G脱脂的花生粉，并在RT搅拌1小时。随后将样品离心，并将上清液通过02M的纤维素膜过滤器WHATMANFP30/0,2CAS,WHATMANGMBH,DASSEL,GE。
23、RMANY过滤并用于进一步的研究。0052提取物以等分试样储存在20用于单次使用。蛋白质浓度使用BRADFORD分析测定。以牛血清白蛋白BSA2MG/ML来自PIERCE,IL,USA制备标准曲线，并稀释至50500G/ML的范围。将粗花生提取物CPE以50MMTRISHCLPH80稀释40X。将来自BIORAD,USA的蛋白测定试剂以水稀释5X。将20L标准品和样品与1ML5X稀释的试剂混合，且将250L的每个样品和标准品置于有平面的平底平板F型FLATBOTTOMPLATEWITHFLATFTYPE的孔中。50MMTRISHCLPH80被用作空白。结果总结于表1中。0053表1花生样品和其。
24、提取物中的蛋白质浓度。0054说明书CN104066433A5/10页700550056实施例2ARAH1、ARAH2和ARAH6在花生仁中的丰度。0057使用AGILENT1200系列HPLC及XBRIDGEBEH苯基35M柱21150MM,WATERS,IRELAND，开发了RPHPLC方法以定量ARAH1、ARAH2、和ARAH6。通过使用以下的流动相进行梯度洗脱A在MILIQMQ水中的01TFA，和B在甲醇中的0085TFA。所使用的梯度为3洗脱液B/MIN，以50的洗脱液B开始直到100，持续15分钟。在280NM和215NM处记录色谱图。215NM处的记录被用于比较峰面积。0058。
25、将样品用MQ水稀释至1MG/ML的蛋白质浓度，且空白是MQ水。花生过敏原ARAH1、ARAH2、和ARAH6的纯化的制品PREPARATION用于分配峰。主要花生过敏原ARAH1、ARA说明书CN104066433A6/10页8H2、和ARAH6的分离峰被定量，并以总蛋白质面积的百分比表示。0059图1A显示了使用ARAH1、ARAH2、和ARAH6的单一、纯化形式的这种分析的实例。这些过敏原被基线分离，并且该方法允许提取物中的定量。0060图1B显示了花生提取物的实例，且箭头指示对应于ARAH1、ARAH2、和ARAH6的峰。可以看出，ARAH1是该提取物中丰度较高的过敏原。0061对所有花。
26、生样品分析其ARAH1、ARAH2、和ARAH6的含量，如表2中总结的。对于所有的测试样品，ARAH1的含量比ARAH2和ARAH6的含量高。0062表2花生提取物中ARAH1、ARAH2、和ARAH6的含量。0063说明书CN104066433A7/10页900640065在所有测试的样品中，ARAH1比ARAH2或ARAH6丰度更高。0066实施例3改性影响ARAH2和ARAH6，但不影响ARAH1。0067如前文所述处理纯化的过敏原ARAH1、ARAH2、和ARAH6。简而言之，在60用DTT孵育过敏原1小时，并加入IAA，并将混合物在室温下孵育15小时。0068处理的过敏原通过RPHP。
27、LC被测试，以确定它们的流动性是否受到影响。在图2中，可以清楚地看出，ARAH1不受这种改性影响，然而ARAH2和ARAH6则受其影响。为了进一步研究这点，应用了另一个测试远UVCD光谱，通过该测试可以估算纯化的蛋白质中的二级结构元件的含量。光谱对蛋白质浓度归一化。图3显示了改性影响ARAH2和ARAH6，而ARAH1则不受影响。0069实施例4还原且烷基化的花生提取物具有低IGE结合效价。0070获得来自20位患有花生过敏的患者的血清并进行IGEELISA。用花生提取物包被ELISA平板，并将天然花生提取物的IGE结合效价定义为1，且改性的花生提取物的IGE结合效价与此有关。表3显示了每名患。
28、者改性的花生提取物相对于天然花生提取物的剩余效价。改性的花生提取物的平均剩余效价是天然花生提取物效价的7。0071表3个体患者的改性的花生提取物相对于天然提取物的效价。0072血清编号改性的花生提取物的剩余效价D190013D440004D480169D500014D600053D620041D640178说明书CN104066433A8/10页10D650003D680043D690113D700091D740045D770118D800028D810082D980082D1030122D1050062D1070088D1140059平均值00720050073实施例5改性的花生提取物的体内。
29、安全性。0074如前文所述使小鼠对花生提取物过敏。这些小鼠每组6只被以天然或改性的花生提取物激发。追踪体温90分钟。温度曲线示于图4。0075可以清楚地看出，以天然花生提取物的激发导致了伴随体温的快速和大幅下降的严重过敏反应。这在01MG/ML的剂量时已经发生。与之相反，以改性的花生提取物的激发没有导致这样的反应，即使在30倍较高的剂量3MG/小鼠时也没有。0076实施例6和70077介绍0078在花生过敏免疫治疗的体内小鼠模型中，分析了测试制品的效力。这些实施例表明化学改性的花生提取物有或没有吸附至氢氧化铝有效地用于治疗已被花生致敏的小鼠的潜力。0079材料和方法0080小鼠0081五周龄无。
30、特异病原体雌性C3H/HEOUJ小鼠购自CHARLESRIVER,FRANCE。所有小鼠在UTRECHTUNIVERSITY,THENETHERLANDS动物护理设施ANIMALCAREFACILITY内的无特异病原体条件下饲养。实验经UTRECHTUNIVERSITY动物实验委员会ANIMALEXPERIMENTS说明书CN104066433A109/10页11COMMITTEE批准。使用的食物含有植物性蛋白质包括大豆，但是无花生蛋白质。0082致敏和激发0083小鼠每组N6通过在第0、1、2、7、14、21、28天胃内IG施用每只小鼠6MG花生提取物PE和在400LPBS中的15G霍乱毒素。
31、CT,LISTBIOLOGICALLABORATORIES,INC致敏。对照小鼠接受PBS及每只小鼠在400LPBS中的15LCT/小鼠。从第42天，每周三次持续三周实施例5或每周两次持续六周实施例6，以200L不同的测试制品改性的PE/氢氧化铝或其各自的对照图5，将不同组的小鼠在颈部皮下SC脱敏。以下，非致敏性PBS致敏小鼠组和致敏性PE致敏小鼠无免疫治疗组被分别描述为PBS对照和PE对照。0084过敏性评价0085作为过敏性休克的客观参数，体温是通过直肠测温方法在IP激发后每1020分钟，持续90分钟测量的。在模型过程中的几个时间点，采集血液用于抗体和MMCP1肥大细胞蛋白酶1的测量。在第。
32、91天实施例5或第112天实施例6，小鼠被IP激发后，其体温立即被追踪90分钟。0086实施例60087结果0088在第91天IP激发后，改性的PE制品有效地减少了过敏应答，如通过激发后的温度下降测量的图6A。比较003和01MG如温度测量的对过敏休克应答的改善的以不同浓度的改性的PE的脱敏表明小的剂量依赖性作用图6A。0089比较2组最高浓度01和1MG的MPE，没有观察到温度差别图6A。如以MPE免疫治疗后温度的较小降低表明的过敏休克应答的改善，同样地通过第85天肥大细胞激活的水平表明MMCP1；图6B。测试的最低剂量003MG/小鼠没有导致改善，而2组更高的IT的剂量分别为01和1MG/。
33、小鼠表明了肥大细胞的激活的下降。0090实施例70091结果0092在第112天IP激发后，两种免疫治疗制品单一改性的PE和吸附到明矾的改性的PE有效地减少了过敏应答，如通过激发后温度下降测量的图7。0093相比非吸附的提取物，明矾吸附的提取物显示了稍微改善的效力特性图7A。以不同浓度的吸附到明矾的改性的PE的脱敏表明过敏休克应答的改善的剂量依赖性作用，如通过温度测量的图7。0094在模型的过程期间测定所有组的血清中的MMCP1和抗体IGE、IGG1和IGG2A的水平。显示了第99天免疫治疗对这些免疫学参数的影响图8和图9。0095相比阴性PBS对照，所有组中MMCP1水平升高。相比未接受免疫。
34、治疗的小鼠PE对照，及以明矾吸附的改性的PE脱敏的小鼠，以改性的PE脱敏的组显示了MMCP1的增加图8。0096相比阴性PBS对照，所有组的IGE水平较大。如常见于临床的，免疫治疗导致IGE水平的增加图9A。这表明了由于免疫治疗免疫系统的加强。在注射过程期间升高较大，且其后稍微减小数据未显示。0097接受免疫治疗的小鼠显示血清中IGG1增加的水平，且明矾吸附的和非吸附的提说明书CN104066433A1110/10页12取物之间具有可比较的水平图9B。IGG2A水平与人类中的IGG4相当的增加则由明矾吸附的花生制品处理的组占优图9C。0098结论0099通过还原和烷基化改性的花生提取物能够改善。
35、IP激发后小鼠的过敏应答。不同免疫模型每周3次持续三周或每周两次持续6周SC注射表明了可比效的有效的结果。花生提取物吸附至氢氧化铝后效应稍大。这可能是由于这些小鼠的血清中IGG2A水平的升高与人类中的IGG4相当。说明书CN104066433A121/9页13图1A图1B说明书附图CN104066433A132/9页14图2说明书附图CN104066433A143/9页15图3说明书附图CN104066433A154/9页16图4说明书附图CN104066433A165/9页17图5说明书附图CN104066433A176/9页18图6说明书附图CN104066433A187/9页19图7说明书附图CN104066433A198/9页20图8说明书附图CN104066433A209/9页21图9说明书附图CN104066433A21。