紫杉醇粗品中胶质和色素的去除方法技术领域
本发明属于紫杉醇除杂技术领域,具体的说,涉及一种紫杉醇粗品中胶质和色素的去除方法。
背景技术
紫杉醇作为新型抗癌药物,由于其独特的抗癌机理一直成为全世界关注的焦点,人们投入了巨大的精力,对分离纯化的每一个细节都进行了详细的研究,逐步完善了生产工艺的要求。目前紫杉醇的提取纯化工艺有溶剂萃取法、固相萃取法、色谱分离法、膜分离法、超临界萃取法、离子交换法、键合物解离法和化学反应法。
目前紫杉醇规模化生产工艺主要采用柱层析分离和结晶这两种纯化操作法,两种方法发挥各自优势,取长补短,使紫杉醇生产收率高、效率高、时间短。硅胶层析分离由于分离载体硅胶价格低廉、样品载量大成为紫杉醇层析分离的主要方法,硅胶层析分离方法的难点是洗脱溶剂系统的研究,寻找低毒环保、价格低廉、分离效率高的洗脱溶剂系统。
发明内容
为解决以上技术问题,本发明的目的在于提供一种紫杉醇粗品中胶质和色素的去除方法,操作简单方便,而且洗脱剂系统成本低,分离效率高,低毒环保。
本发明目的是这样实现的:
一种紫杉醇粗品中胶质和色素的去除方法,其关键在于按以下步骤进行:
a、向紫杉醇粗品中加入溶剂丙酮,充分溶解;
b、向溶液中加入硅胶拌合,制成料胶,层析分离载体为硅胶,硅胶目数为200~300目;
c、向层析柱中干法填装空白硅胶,再将料胶填装层析柱,并以洗脱剂正己烷-丙酮-二氯甲烷梯度洗脱,目标段流份进行浓缩和干燥得到去杂紫杉醇。
优选地,上述步骤b中硅胶的加入量为紫杉醇粗品的2倍,该硅胶的目数为200~300目。
优选地,上述步骤c中料胶采用干法上样到层析柱,所述层析柱直径100mm,高度为150cm。
优选地,上述步骤c中空白硅胶填装量为紫杉醇粗品的4~6倍;该空白硅胶的目数为200~300目。
优选地,上述洗脱溶剂中正己烷:丙酮:二氯甲烷=58:25:17。
优选地,上述紫杉醇粗品的纯度为8%。
有益效果:
本发明一种紫杉醇粗品中胶质和色素的去除方法,采用优化的硅胶层析分离方法,一次层析分离就去除80%以上杂质,紫杉醇含量由8%提高至40%以上,操作简单方便,而且洗脱剂系统成本低,分离效率高,低毒环保。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
实施例1:
一种紫杉醇粗品中胶质和色素的去除方法,按以下步骤进行:
向500g纯度为8%的紫杉醇粗品中加入1500ml丙酮充分溶解,加200~300目硅胶1000g拌合,制成料胶,直径100mm、高150cm层析柱填装200~300目空白硅胶2000g,干法填装层析柱,正己烷-丙酮-二氯甲烷为洗脱剂,洗脱剂比例为正己烷:丙酮:二氯甲烷=58:25:17,目标物紫杉醇段流份浓缩、干燥,紫杉醇含量为40%,胶质、色素去除率为80%。
实施例2:
一种紫杉醇粗品中胶质和色素的去除方法,按以下步骤进行:
向500g纯度为8%的紫杉醇粗品中加入1500ml丙酮充分溶解,加200~300目硅胶1000g拌合,制成料胶,直径100mm、高150cm层析柱填装200~300目空白硅胶2500g,干法填装层析柱,正己烷-丙酮-二氯甲烷为洗脱剂,洗脱剂比例为正己烷:丙酮:二氯甲烷=58:25:17,目标物紫杉醇段流份浓缩、干燥,紫杉醇含量为45%,胶质、色素去除率为82.22%。
实施例3:
一种紫杉醇粗品中胶质和色素的去除方法,按以下步骤进行:
向500g纯度为8%的紫杉醇粗品中加入1500ml丙酮充分溶解,加200~300目硅胶1000g拌合,制成料胶,直径100mm、高150cm层析柱填装200~300目空白硅胶3000g,干法填装层析柱,正己烷-丙酮-二氯甲烷为洗脱剂,洗脱剂比例为正己烷:丙酮:二氯甲烷=58:25:17,目标物紫杉醇段流份浓缩、干燥,紫杉醇含量为48%,胶质、色素去除率为83.33%。
最后需要说明的是,上述描述仅仅为本发明的优选实施例,本领域的普通技术人员在本发明的启示下,在不违背本发明宗旨及权利要求的前提下,可以做出多种类似的表示,这样的变换均落入本发明的保护范围之内。