背景技术
在占全部手术70％的急救麻醉方面，为了患者的安全，从麻醉状态
彻底并且迅速地恢复是必要的(Korttila，k.，et al.，Acta Anaesthesiol.
Scand.，34，pp.400-403，1990；0gg，T.W.，Brit.Med.J.，281，
pp.212-214，1980；Noble，J.，et al.，Postgrad.Med.，J.，
61，pp.103-104，1985)。在开发能够快速地代谢和残留作用少的麻醉
药的方面已经取得了进步，但在手术之后残留有显著的认知障碍问题。
例如丙泊酚(propofol，二异丙基酚；普罗泊酚(Diprivan))是
短时间作用型的静脉给药麻醉剂，因为具有即效性、顺利的诱发性和快
速的恢复性，故作为麻醉剂受到普遍应用，但显示在从麻醉的苏醒时有
引起遗忘的可能性。至今，丙泊酚对于记忆形成的作用还没有充分的弄
清楚，但在啮齿类动物方面非麻醉剂量的丙泊酚造成回避实验的顺行性
遗忘；另一方面在同程度的剂量范围，没有显示引起逆行性遗忘(Pang，
R.et al.，Pharmacol.Biochem.Behva.，44，pp.145-151，1993：
训练后的最大给药量为100mg/kg，认为未能观察到逆行性遗忘的出现)，
但与这个发现相反，本发明者们进一步在高剂量范围内发现也产生逆行
性遗忘(参照实施例)。
关于在人方面的遗忘，丙泊酚就手术中的现象显示有引起顺行性遗
忘的事情(Steib，A.，et al.，Acta Anaesthesiol.Scand.，34，
pp.632-635，1990)，但对于潜在记忆是否给予影响尚有争论(Bethune，
D.W.，et al.，Brit.J.Anaesthesia，69，pp.197-199，1992；以及
Cork，R.C.，et al.，Br.J.Anaesthesia，76，pp.492-498，1996)。
另外，也有报告说与学习、语言、思考以及计划有关联的认知功能，丙
泊酚给药停止后至少存在3小时的被抑制状态(Sanou，J.，et al.，Neuro
Report，7，pp.1130-1132，1996)。
容易从由丙泊酚麻醉后被诱发的认知障碍状态下恢复过来的药剂期
待其在临床上具有有用性，但至今几乎没能见到(Ogg，T.W.，et al.，
Anaesthesia，34，pp.784-789，1979；Ghouri，A.，Anesthesiology，
81，pp.333-339，1994)。例如，对多沙普仑(Doxapram)以及氟马西
尼(Flumazenil)进行了研究，但这些药剂因为存在由于它们的短期作
用特性而产生的再镇静的危险性，所以还没有达到普遍使用的程度。
另一方面，具有脑功能改善作用的2-(1-吡咯烷基)乙酰胺衍生物
已经公开(特开昭56-2960号专利)，特别是N-(2，6-二甲基苯基)-
2-(2-氧代-1-吡咯烷基)乙酰胺(一般名「萘非西坦」、nefiracetam)，
作为脑功能改善剂在临床上的有效性被确证。萘非西坦在各种学习障碍
动物模型方面使形成的记忆能够维持的结果被发现(Yamada，K.，et
al.，CNS Drug Reviews，2，pp.322-342，1996)。
以萘非西坦为代表的认知增强剂尽管明确地具有记忆改善效果，却
需要16～24小时的时间(Mondadori，C.，et al.，Proc.Natl.Acad.
Sci.，USA，91，pp.2041-2045，1994)；另外，对于肾上腺切除动物因
为没有效果，故这些药剂以使长期记忆痕迹的形成变的容易，暗示有调
节遗传因子转录的作用(Mondodori，C.，et al.，Brain Res.，435，
pp.310-314，1987)。这个调节能力可以通过评价萘非西坦对在成熟大
鼠方面用莨菪胺使其受损了的神经细胞粘着分子(NCAM)的ポリシアル
化状态的学习依赖性修饰(在齿状回颗粒细胞层界限门(境界门)的所
定数目的颗粒状细胞中，训练10～12小时后能够出现记忆固定期)的
保护作用得到明确的结果(Doyle，E.，et al.，J.Neurochem.，61，
pp.266-272，1993；Fox，G.B.，et al.，J.Neurochem.，65，pp.2796-2799，
1995；and Murphy，K.J.，et al.，J.Neurochem.，67，pp.1268，1274，
1996)。
同样的作用在使用了PC-12铬亲和性细胞瘤的细胞模型的体外试验
也可以观察到。让萘非西坦在事前与敏化PC-12细胞进行作用的话，显
著地增强其后的神经成长因子诱发性的神经突起发芽以及NCAMポリシ
アル化(Odumeru，O.，et al.，Behav.Brain Res.，83，pp.173-178，
1997)。可以认为此作用没有明确的剂量依赖关系，萘非西坦对训练后
的神经可塑性现象的时间依赖性的强化调节作用，有助于在记忆固定化
基础的神经元突触再构筑(Bailey，C.H.，Annu.Rev.Physiol.，55，
pp.397-426，1993)。
发明概述
本发明的目的在于提供遗忘症的预防以及/或者治疗药。更具体地
说，本发明的目的在于提供适用于由使用了丙泊酚等的麻醉药所致的全
身麻醉引起，并在全身麻醉的清醒后发病的遗忘症的预防以及/或者治
疗药。
本发明者们为了解决上述的任务进行深入研究的结果，发现了以前
作为脑功能改善药有效的2-(1-吡咯烷基)乙酰胺衍生物，特别是萘非
西坦，可以显著地抑制从全身麻醉的状态清醒后产生的遗忘症。本发明
在上述发现的基础上完成的。
即本发明是提供用以下的通式(I)：R2-CH2CONH-R1(式中R1表示吡
啶基、取代的吡啶基、苯基、或者取代的苯基；R2表示具有取代基的2-
氧代-1-吡咯烷基)表示的化合物，其中提供优选含有将萘非西坦作为
有效成分的用于遗忘症的预防以及/或者治疗药。
按此发明的优选形式，可以提供：适用于由全身麻醉引起的遗忘症
的上述预防以及/或者治疗药；适用于在从全身麻醉的状态清醒后引起
的遗忘症的上述预防以及/或者治疗药；遗忘症是顺行性遗忘症的上述
预防以及/或者治疗药；遗忘症是逆行性遗忘症的上述预防以及/或者治
疗药；全身麻醉是通过静脉内给药进行的上述预防以及/或者治疗药；
以及含有有效成分的上述通式(I)的化合物，其中优选含有萘非西坦
和制剂用辅料的药物组合物的上述预防以及/或者治疗药。另外，按本
发明的其它的观点，在制造上述预防以及/或者治疗药中，上述式(I)
的化合物，优选萘非西坦的使用，以及遗忘症的预防以及/或者治疗方
法；上述式(I)的化合物，优选包括将萘非西坦的预防以及/或者治疗
有效量给予患者的步骤方法。
实施发明的最佳形式
是本发明药物的有效成分的上述2-(1-吡咯烷基)乙酰胺衍生物，
作为对脑功能改善有效的化合物而被记载在特开昭56-2960号专利上。
R1表示吡啶基、取代的吡啶基、苯基、或者取代的苯基，作为在取代的
吡啶基或者取代的苯基环上的取代基来说，可以举出例如卤原子、三氟
甲基、硝基、乙酰基、烷基、烷氧基、烷巯基、氨基、磺酰基、氨基乙
氧羰基等。
R2代表有取代基的2-氧代-1-吡咯烷基，但取代基可以使用羟基等。
上述化合物，用例如记载在特开昭56-2960号专利或者特开平6-65197
号专利上的方法可以容易地制造。在上述化合物当中最优选的化合物是
N-(2，6-二甲基苯基)-2-(2-氧代-1-吡咯烷基)乙酰胺(以一般名：
萘非西坦在临床上使用)。
本发明的药物可以用于遗忘症的预防以及/或者治疗。作为遗忘症
可以举出顺行性遗忘以及逆行性遗忘，但它们中的任何一个或者两者都
是本发明药物的优选的适用对象。在本说明书中，所谓「顺行性遗忘」
是指从与遗忘诱发因子(例如给予全身麻醉剂)有关的时间点开始，对
于将来的事情存在记忆障碍；所谓「逆行性遗忘」是指从与遗忘诱发因
子有关的时间点开始，对于过去的事情存在记忆的再生障碍。当然，本
发明的药物的适用对象并不局限在这些特定的遗忘症上。
已知由全身麻醉可以诱发遗忘症，所以优选将本发明的药物适用于
起因于全身麻醉的遗忘症的预防以及/或者治疗。全身麻醉的种类没有
特别的局限，可以将有诱发遗忘症的可能性的种类中的任何一个作为适
用对象。可以举出例如：氟烷、甲氧氟烷等的吸入麻醉；或者硫喷妥钠、
氯胺酮、丙泊酚等的静脉给药麻醉；在吸入麻醉时被使用的导入麻醉中
的任何一个，或者它们的适宜的组合形式等。这些当中，短时型的静脉
内给药麻醉剂，例如通过丙泊酚的麻醉等是本发明的药物的优选的适用
对象。
本发明的上述药物的给药形式没有特别的限制，对于人可以经口
服·非口服给药。作为本发明的药物，可以将是有效成分的上述通式的
化合物直接使用，但通常优选将是有效成分的化合物同在药理学上、制
剂学上能够容许的添加物中的1种或者2种以上适宜地配合使用，制备
成本领域技术人员周知的形式的制剂，经口服或者非口服使用。作为有
效成分，可以使用通式(I)的化合物的在生理学上被容许的盐、游离
形式的化合物或者在生理学上被容许的盐的水合物或者溶媒化物。
作为适宜经口服给药的制剂的例子，例如可以举出片剂、胶囊剂、
散剂、细粒剂、颗粒剂、溶液剂、或者糖浆剂等；作为适宜经非口服给
药的制剂，可以举出例如皮下、静脉内、或者肌肉内注射用的注射剂、
输液剂、栓剂、吸入剂、透皮吸收剂、经粘膜吸收剂、或者粘贴剂等。
作为药理学上的以及制剂学上能够容许的添加物来说，可以使用例如赋
形剂、崩解剂或者崩解补助剂、粘合剂、润滑剂、包衣剂、色素、稀释
剂、基质、溶解剂或者助溶剂、等张剂、pH调节剂、稳定剂、喷射剂、
以及粘着剂等。
例如对于适宜于口服给药、或者透皮或经粘膜给药的制剂，作为在
药理学上、制剂学上能够容许的添加物，可以使用例如葡萄糖、乳糖、
D-甘露糖醇、淀粉、或者微晶纤维素等的赋形剂；羧甲基纤维素、淀粉、
或者羧甲基纤维素钙等的崩解剂或崩解补助剂；羟丙基纤维素、羟丙基
甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、或明胶等的粘合剂；硬脂酸镁或者滑石
粉等的润滑剂；羟丙基甲基纤维素、白糖、聚乙二醇、或二氧化钛等的
包衣剂；凡士林、液体石蜡、聚乙二醇、明胶、高岭土、甘油、精制水、
或硬化脂肪等的基质。另外可以使用氟利昂、乙醚、或压缩气体等的喷
射剂；聚丙烯酸钠、聚乙烯醇、甲基纤维素、聚异丁烯、聚丁烯等的粘
着剂；木棉布或塑料片等的基质布等的制剂用添加物制造制剂。
对于适用于注射或者输液用的制剂，可以添加例如注射用蒸馏水、
生理盐水、丙二醇等的水性或者临用时能够构成溶解型注射剂的溶解剂
或者助溶剂；葡萄糖、氯化钠、D-甘露糖醇、甘油等的等张剂；无机酸、
有机酸、无机碱或有机碱等的pH调节剂等的制剂用添加物。
本发明的药物的剂量没有特别的限制，可以根据给药形式、遗忘形
成的程度、是预防还是治疗给药等的不同给药目的、患者的年龄、体重
等适当地进行选择。举一个例子的话，以有效成分的剂量计，为每日200～
2,000mg，优选300～900mg的范围，可以将上述的1日剂量分成几次
给药。本发明的药物的给药时间也可以适当地选择。在麻醉前给予本发
明药物的时候，确认对遗忘能够得到预防效果(后述的实施例、表3以
及4)；在麻醉后给予本发明药物的时候，也可以期待得到同样的效果。
实施例
以下通过实施例更具体地说明本发明，但本发明的范围并不仅仅局
限在下述的实施例中。
实施例中使用N-(2，6-二甲基苯基)-2-(2-氧代-1-吡咯烷基)
乙酰胺〔一般名：萘非西坦(nefiracetam)，在以下实施例中简称为「萘
非西坦」。〕，对于通过用短时间作用型的经静脉内给药的麻醉剂丙泊酚
(propofol，二异丙基酚)诱发的遗忘的作用进行研究。更具体地说，
对于通过给予非麻醉剂量以及麻醉剂量的丙泊酚所诱发的顺行性以及逆
行性遗忘，用NCAMポリシアル化的调节和大鼠的被动的回避反应实验
的记忆再生配合起来进行研究，通过对这两组数据进行评价得到给予萘
非西坦的效果。
(1)实验法
(a)被动的回避训练
将出生80日的雄性wistar大鼠(300～350g)，在不限制进食进水
的标准条件下每一只分别放入一个笼中。这些实验动物在试验开始3日
前放入试验环境中，在该条件下饲养。采用试行阶梯渐近式(ステツプ
スル-)明暗室进行受试动物的回避试验。在训练当日评价各动物的行
动性后，大鼠放入受试动物的回避反应装置的明室，将大鼠从明室直至
进入到暗室的时间作为潜伏期时间记录。在动物刚进入暗室之后给予
0.75mA的5秒钟的轻度足部电击(foot shock)，为了躲避这个刺激，
大鼠立即回到明室。为了试验各动物的记忆再生能力，在训练12小时
后将动物放入明室，记录一直到进入暗室时的潜伏期时间。此数值作为
动物对抑制刺激(足部刺激)记忆能力的尺度。评价基准时间为600秒。
丙泊酚(アルドリツチ公司)溶解在含有10％吐温-20(希格玛公司)
的0.9％生理食盐水中，于训练前15分钟腹腔注射给药。对于其它的试
验，在训练后的不同时间给药。对于单独给予丙泊酚或者将其与萘非西
坦合并给药的动物的丙泊酚麻醉到达深度，从夹紧尾部反应(テ-ルピ
ンチ)的丧失以及四肢的除去反射时间来判断。用恢复反射的显示时间
作为表示从麻醉状态的恢复时间的尺度。萘非西坦(第一制药公司)在
训练1小时前腹腔内给药。所有的试验手续均得到都柏林的大学·学院
的生物医学部门的审查委员会的认可后，由取得健康省颁发的相应资格
证的人来进行试验。
(b)海马ポリシアル化神经元的定量
为了检出海马ポリシアル化神经元，使用Fox等的方法(Fox，G.B.，
et al.，
J.Neurochem，65，pp.2796-2799，1995)进行PSA(聚唾液酸)
免疫细胞测定。将12μm的冷冻保存轴切片在70％(v/v)乙醇中固定，
与抗唾液酸、腹水1∶500稀释液(根据G.Rougon教授的方法：Rougon，G.et
al.，J.Cell，Biol.，103，pp.2429-2437，1986)一起孵化一液。此切片与
结合了荧光素的山羊抗小鼠IgM1∶100稀释液(カルバイオケム公司)
接触3小时之后，接种到荧光强化培养基的Citifluor(注册商标)(琼
脂)上。
将此切片与プロピジウム·碘(40ng/mlPBS；希格玛·化学公司，
英国)短时间(60秒)接触，将核用荧光逆向染色。避免5～10μm核周
围的二次计数，使用10个12μm的切片从前囟的-5.6mm处计测颗粒细
胞层以及界限门的PSA免疫阳性神经元的总数。将细胞数用颗粒细胞层
的总面积除，乘以平均颗粒细胞层面积(用这个标准0.15±0.01mm2)，
再将计算出的平均值±标准误差的结果用相当于单位面积的PSA阳性细
胞数表示。面积的计算测量用定量电视显微镜500图象分析系统
(Quantimet 500 Image Analysis System)进行。
(c)统计的分析
所有的值用平均值±标准误差表示，这些的统计方面的显著性，与
行动数据有关的使用曼-惠特尼的U检验(Mann-Whitney U-test)、与
免疫组织化学数据有关的使用学生氏的t检验(Student t-test)，当
p＜0.05时的值作为有显著性差异。
(2)结果
为了判定丙泊酚是否对顺行性遗忘有影响，在被动的回避反应训练
的15分钟前给予麻醉剂。对照组的所有动物从训练12小时后到宰杀前
的逃避潜伏期时间来判断学习的充分程度，但给予75mg/kg丙泊酚的动
物进入暗室的潜伏期时间缩短，明显的显示出显著性的遗忘。另外，这
种的遗忘状态在10mg/kg的低剂量上没有出现显著性的潜伏期时间缩短
现象，所以有存在剂量依赖性的结论。结果表示在表1。潜伏期时间用
平均值±标准误差(n＝6)表示，对于与对照组动物相比有显著性差异
者(p＜0.05)*号表示。
在通过75mg/kg丙泊酚诱发的遗忘动物和对照组动物之间，训练5
分钟前在开放场所的运动活性(探索行动)方面没有见到差别(处理组
和对照组在5分钟内越线者分别是144.0±6.5、135.0±24.2)。并且
即使在12小时后的将要记忆再生试验之前不久在这方面也没有见到差
异(处理组和对照组在5分钟内越线者分别是110.6±4.9、119.3±
13.0)。因此认为上述的遗忘状态不是通过降低注意力或者运动等造成
的。
在训练后3小时通过给予丙泊酚能够诱发逆行性遗忘。对于逆行性
遗忘的诱发与诱发顺行性遗忘相比需要大剂量的丙泊酚(150mg/kg)，在
此剂量时认为意识能够完全消失。这些动物在12小时后的将要记忆再
生试验之前意识完全地恢复(在开放场所在注意力和运动等方面没有见
到缺陷：处理组和对照组在5分钟内越线者分别是158.0±25.8、163.0
±13.5)，在训练12小时后没有能出现记忆再生(表1)。
表1-1
处置
在顺行性遗忘方面的记忆再生(sec)
对照组
545±33
丙泊酚(10mg/kg)
454±87
丙泊酚(75mg/kg)
105±38*
*与无处置的对照动物(对照组)相比有显著性差异
表1-2
处置
在逆行性遗忘方面的记忆再生(sec)
对照组
590±7
丙泊酚(100mg/kg)
554±30
丙泊酚(150mg/kg)
168±93*
*与无处置的对照动物(对照组)相比有显著性差异
从以上的结果可知，丙泊酚的麻醉作用显示出与向短期记忆的长期
保存方向的固定化有关的2个特性。对于顺行性遗忘即使用比较低的浓
度也可以诱发相比，逆行性遗忘必须使用其2倍的用量，但这些记忆痕
迹当初是不稳定的，显示出随时间的经过被强化。
因为在经过4小时训练后即使给予麻醉有效量，记忆再生也不能形
成，所以可以判断由丙泊酚所致的逆行性遗忘的诱发是时间依赖性的。
结果表示于表2。表中，值用平均值±标准误差(n＝6)表示。逆行性遗
忘只是在训练后3小时以内被诱发，在此以后记忆显示出进入最终性的
被长期保存的性质。另外，对于在训练6小时后给予150mg/kg的丙泊
酚的动物，在12小时后的记忆再生方面没有见到注意力的欠缺或者运
动低下(处理组和对照组在5分钟内越线者分别是88.7±9.4、92.3±
13.1)。
表2
丙泊酚150mg/kg给药时间(h)
记忆再生(sec)
|
训练后0
108±10*
训练后1
183±42*
训练后2
251±86*
训练后3
210±74*
训练后4
541±41
训练后5
558±29
训练后6
471±83
与无处置对照动物(567±23(sec))相比有显著性差异
训练1小时前给予萘非西坦(9mg/kg)，可以完全防止在训练15分
钟前经丙泊酚(75mg/kg)处置诱发的顺行性遗忘。另外，对于丙泊酚
和萘非西坦的合并给药组、或者萘非西坦单独给药组和对照组之间，在
反应潜伏期时间上没有见到有显著性差异。即使对于通过高剂量的丙泊
酚(150mg/kg)诱发出逆行性遗忘的动物也能够得到同样的结果。结果
表示于表3。表中的*号表示与单独给予丙泊酚相比显示出显著性差异(p
＜0.05)、值用平均值±标准误差(n＝6)表示。
表3-1
处置
在顺行性遗忘方面的记忆再生(sec)
对照组
535±32
丙泊酚(75mg/kg)
98±18
萘非西坦(9mg/kg)
531±68
丙泊酚(75kg/mg)+
萘非西坦(9mg/kg)
510±90*
*与单独给予丙泊酚(75mg/kg)动物相比有显著性差异
表3-2
处置
在逆行性遗忘方面的记忆再生(sec)
对照组
568±32
丙泊酚(150mg/kg)
209±74
萘非西坦(9mg/kg)
532±68
丙泊酚(150kg/mg)+
萘非西坦(9mg/kg)
565±22*
*与单独给予丙泊酚(150mg/kg)动物相比有显著性差异
对于丙泊酚单独给药组以及丙泊酚和萘非西坦合并给药组，对麻醉
的质量没有见到影响。两组的动物在夹紧尾部反射反应的丧失以及四肢
的除去反射方面显示出同样地反应时间(丙泊酚单独给药组以及和萘非
西坦合并给药组，分别是199.0±6.2、181.0±14.1秒)。从恢复反射
的回复来判断，作用的持续性在两组间也是同等程度(丙泊酚单独给药
组以及和萘非西坦合并给药组，分别是96.3±12.7、90.3±10.5分钟)。
下面，探讨萘非西坦是否会保护在海马的齿状回神经元的ポリシア
ル化状态的学习依赖性修饰。作为对照组，调查通过丙泊酚被诱发的顺
行性遗忘后的齿状回PSA阳性神经元的发生频率，象在表4-1表示的那
样，在进行过被动的回避训练的动物方面，可以见到训练12小时后的
免疫应答阳性神经元的发生频率显著地增大，ポリシアル化细胞数显著
地增加(Fox，G.B.，et al.，J.Neurochem.，65，pp.2796-2799，1995；
Murphy，K.J.，J.Neurochem，67，pp.1268-1274，1996)。另外，对
于在训练15分钟前给予丙泊酚(75mg/kg)引起遗忘的动物，ポリシア
ル化神经元的数，同刚训练之后或者不经训练处理的动物比较没有能够
见到差别。
另一方面，在合并给药组方面(在训练15分钟前给予丙泊酚所诱
发的顺行性遗忘，通过在训练1小时前给予萘非西坦而将该前向性遗忘
防止的动物)，可以见到与在对照组被观察到的同样程度的ポリシアル
化神经元的增加。另外即使在丙泊酚诱发的逆行性遗忘通过给予萘非西
坦使其防止的动物组方面，由海马齿状回神经元的学习依赖所致的ポリ
シアル化的增加也能够保存。这个结果见表4。
在给予萘非西坦(9mg/kg)1小时后的未训练动物组和未训练对照
组之间的比较方面，PSA阳性齿状回神经元没有显著地差异(分别是69
±3、64.5±2.3)，这些ポリシアル化神经元的增加，可以确定只是给
予萘非西坦不是其起因。
表4-1
处置
时间(h)
相当于单位面积的细胞数(顺行性遗忘)
未训练
-
64.4±3.9
对照组
0
63.0±4.5
对照组
12
90.0±7.8
丙泊酚(75mg/kg)
12
57.0±5.0
丙泊酚(75kg/mg)+
萘非西坦(9mg/kg)
12
83.0±7.5*
*与单独给予丙泊酚(75mg/kg)动物相比有显著性差异
表4-2
处置
时间(h)
相当于单位面积的细胞数(逆行性遗忘)
未训练
-
64.4±3.9
对照组
0
63.0±4.5
对照组
12
90.0±7.8
丙泊酚(150mg/kg)
12
66.0±3.7
丙泊酚(150kg/mg)+
萘非西坦(9mg/kg)
12
103.0±8.9*
*与单独给予丙泊酚(75mg/kg)动物相比有显著性差异