生产L-丙氨酸的方法.pdf

摘要
申请专利号：	CN201110025960.X	申请日：	20110120
公开号：	CN102605015A	公开日：	20120725
当前法律状态：		有效性：	失效
法律详情：
IPC分类号：	C12P13/06,C12R1/38	主分类号：	C12P13/06,C12R1/38
申请人：	烟台恒源生物工程有限公司
发明人：	马玉岳
地址：	265709 山东省龙口市兰高镇四平村
优先权：	CN201110025960A
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内容摘要

本发明公开了一种生产L-丙氨酸的方法，包括如下步骤：在无菌的斜面培养基上活化传代德阿昆哈假单胞菌，活化后的德阿昆哈假单胞菌接种于无菌的摇瓶种子液培养基中培养，当OD净增0.5～0.6，pH值为8.0～9.0连续不变时流加天门冬氨酸，控制pH值最低为6.0，当pH值为6.0，连续不变时完成发酵；所述摇瓶种子液培养基为谷氨酸钠1％、蛋白胨0.8％、氯化钠0.5％、硫酸镁0.1％、磷酸二氢钾0.05％、玉米干粉0.55％。所述斜面培养基为谷氨酸钠1％、蛋白胨0.8％、氯化钠0.5％、硫酸镁0.1％、磷酸二氢钾0.05％、酵母膏0.5％、牛肉膏0.5％、琼脂2％。本发明的生产L-丙氨酸的方法，L-丙氨酸的产量和纯度高。

权利要求书

1.一种生产L-丙氨酸的方法，包括如下步骤：在无菌的斜面培养基上活化传代德阿昆哈假单胞菌，活化后的德阿昆哈假单胞菌接种于无菌的摇瓶种子液培养基中培养，当OD净增0.5～0.6，pH值为8.0～9.0连续不变时流加天门冬氨酸，控制pH值最低为6.0，当pH值为6.0，连续不变时完成发酵；所述摇瓶种子液培养基为谷氨酸钠1％、蛋白胨0.8％、氯化钠0.5％、硫酸镁0.1％、磷酸二氢钾0.05％、玉米干粉0.55％。所述斜面培养基为谷氨酸钠1％、蛋白胨0.8％、氯化钠0.5％、硫酸镁0.1％、磷酸二氢钾0.05％、酵母膏0.5％、牛肉膏0.5％、琼脂2％。

说明书

技术领域

本发明涉及一种生产L-丙氨酸的方法。

背景技术

L-丙氨酸(L-Alanine)亦称α-氨基丙酸，是生命体内与糖代谢密切相关、需求量较多的氨基酸之一，已在医药、食品及化工等行业中得到广泛应用，并已成为继谷氨酸、赖氨酸之后的又一重要的氨基酸产业，大力发展生产是十分必要的。目前的L-丙氨酸生产方法为以富马酸为主生产原料，整体细胞酶催化生物反应法生产L-丙氨酸。

发明内容

本发明的目的是提供一种生产L-丙氨酸的方法。

本发明所提供的生产L-丙氨酸的方法，包括如下步骤：

在无菌的斜面培养基上活化传代德阿昆哈假单胞菌，活化后的德阿昆哈假单胞菌接种于无菌的摇瓶种子液培养基中培养，当OD净增0.5～0.6，pH值为8.0～9.0连续不变时流加天门冬氨酸，控制pH值最低为6.0，当pH值为6.0，连续不变时完成发酵；

所述摇瓶种子液培养基为谷氨酸钠1％、蛋白胨0.8％、氯化钠0.5％、硫酸镁0.1％、磷酸二氢钾0.05％、玉米干粉0.55％。

所述斜面培养基为谷氨酸钠1％、蛋白胨0.8％、氯化钠0.5％、硫酸镁0.1％、磷酸二氢钾0.05％、酵母膏0.5％、牛肉膏0.5％、琼脂2％。

本发明的生产L-丙氨酸的方法，L-丙氨酸的产量和纯度高。

具体实施方式

以下百分含量如无特殊说明均为质量百分含量。

实施例

摇瓶种子液培养基：谷氨酸钠1％、蛋白胨0.8％、氯化钠0.5％、硫酸镁0.1％、磷酸二氢钾0.05％、玉米干粉0.55％。

斜面培养基：谷氨酸钠1％、蛋白胨0.8％、氯化钠0.5％、硫酸镁0.1％、磷酸二氢钾0.05％、酵母膏0.5％、牛肉膏0.5％、琼脂2％。

在无菌的斜面培养基上活化传代德阿昆哈假单胞菌，培养温度30±℃，活化后的德阿昆哈假单胞菌接种于装有无菌的摇瓶种子液培养基的种子罐中培养，罐温30±1℃，罐压 0.05～0.08MPa，通风量20～24m3/h，当OD净增0.5～0.6，终点pH值为8.0～9.0连续6小时不变时流加天门冬氨酸，控制pH值，最低为6.0，当pH值为6.0，连续1小时不变，完成发酵。

1M3种子罐发酵液可转化天门冬氨酸2.5吨，转化率95％，L-丙氨酸提取率98％。

资源描述

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1、(10)申请公布号 CN 102605015 A (43)申请公布日 2012.07.25 CN 102605015 A *CN102605015A* (21)申请号 201110025960.X (22)申请日 2011.01.20 C12P 13/06(2006.01) C12R 1/38(2006.01) (71)申请人烟台恒源生物工程有限公司地址 265709 山东省龙口市兰高镇四平村 (72)发明人马玉岳 (54) 发明名称生产 L- 丙氨酸的方法 (57) 摘要本发明公开了一种生产 L- 丙氨酸的方法，包括如下步骤：在无菌的斜面培养基上活化传代德阿昆哈假单胞菌，。

2、活化后的德阿昆哈假单胞菌接种于无菌的摇瓶种子液培养基中培养，当 OD 净增 0.5 0.6， pH 值为 8.0 9.0 连续不变时流加天门冬氨酸，控制 pH 值最低为 6.0，当 pH 值为 6.0，连续不变时完成发酵；所述摇瓶种子液培养基为谷氨酸钠 1、蛋白胨 0.8、氯化钠 0.5、硫酸镁 0.1、磷酸二氢钾 0.05、玉米干粉 0.55。所述斜面培养基为谷氨酸钠 1、蛋白胨 0.8、氯化钠0.5、硫酸镁0.1、磷酸二氢钾0.05、酵母膏 0.5、牛肉膏 0.5、琼脂 2。本发明的生产 L- 丙氨酸的方法， L- 丙氨酸的产量和纯度高。。

3、 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页说明书 1 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请权利要求书 1 页说明书 1 页 1/1 页 2 1. 一种生产 L- 丙氨酸的方法，包括如下步骤：在无菌的斜面培养基上活化传代德阿昆哈假单胞菌，活化后的德阿昆哈假单胞菌接种于无菌的摇瓶种子液培养基中培养，当 OD 净增 0.5 0.6， pH 值为 8.0 9.0 连续不变时流加天门冬氨酸，控制 pH 值最低为 6.0，当 pH 值为 6.0，连续不变时完成发酵；所述摇瓶种子液培养基为谷氨酸钠1、蛋白胨0.8、氯化钠0.5、硫酸镁0.1、。

4、磷酸二氢钾 0.05、玉米干粉 0.55。所述斜面培养基为谷氨酸钠1、蛋白胨0.8、氯化钠0.5、硫酸镁0.1、磷酸二氢钾 0.05、酵母膏 0.5、牛肉膏 0.5、琼脂 2。权利要求书 CN 102605015 A 2 1/1 页 3 生产 L- 丙氨酸的方法技术领域 0001 本发明涉及一种生产 L- 丙氨酸的方法。背景技术 0002 L-丙氨酸(L-Alanine)亦称-氨基丙酸，是生命体内与糖代谢密切相关、需求量较多的氨基酸之一，已在医药、食品及化工等行业中得到广泛应用，并已成为继谷氨酸、赖氨酸之后的又一重要的氨基酸产业，大力发展生。

5、产是十分必要的。目前的 L- 丙氨酸生产方法为以富马酸为主生产原料，整体细胞酶催化生物反应法生产 L- 丙氨酸。发明内容 0003 本发明的目的是提供一种生产 L- 丙氨酸的方法。 0004 本发明所提供的生产 L- 丙氨酸的方法，包括如下步骤： 0005 在无菌的斜面培养基上活化传代德阿昆哈假单胞菌，活化后的德阿昆哈假单胞菌接种于无菌的摇瓶种子液培养基中培养，当 OD 净增 0.5 0.6， pH 值为 8.0 9.0 连续不变时流加天门冬氨酸，控制 pH 值最低为 6.0，当 pH 值为 6.0，连续不变时完成发酵； 0006 所述摇瓶种子液培养基为谷氨酸钠 1、。

6、蛋白胨 0.8、氯化钠 0.5、硫酸镁 0.1、磷酸二氢钾 0.05、玉米干粉 0.55。 0007 所述斜面培养基为谷氨酸钠1、蛋白胨0.8、氯化钠0.5、硫酸镁0.1、磷酸二氢钾 0.05、酵母膏 0.5、牛肉膏 0.5、琼脂 2。 0008 本发明的生产 L- 丙氨酸的方法， L- 丙氨酸的产量和纯度高。具体实施方式 0009 以下百分含量如无特殊说明均为质量百分含量。 0010 实施例 0011 摇瓶种子液培养基：谷氨酸钠 1、蛋白胨 0.8、氯化钠 0.5、硫酸镁 0.1、磷酸二氢钾 0.05、玉米干粉 0.55。 0012 斜面培养基：。

7、谷氨酸钠 1、蛋白胨 0.8、氯化钠 0.5、硫酸镁 0.1、磷酸二氢钾 0.05、酵母膏 0.5、牛肉膏 0.5、琼脂 2。 0013 在无菌的斜面培养基上活化传代德阿昆哈假单胞菌，培养温度 30，活化后的德阿昆哈假单胞菌接种于装有无菌的摇瓶种子液培养基的种子罐中培养，罐温 301，罐压 0.05 0.08MPa，通风量 20 24m3/h，当 OD 净增 0.5 0.6，终点 pH 值为 8.0 9.0 连续 6 小时不变时流加天门冬氨酸，控制 pH 值，最低为 6.0，当 pH 值为 6.0，连续 1 小时不变，完成发酵。 0014 1M3种子罐发酵液可转化天门冬氨酸 2.5 吨，转化率 95， L- 丙氨酸提取率 98。说明书 CN 102605015 A 3 。

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