抑制淀粉样蛋白聚集和使淀粉样沉积物成象的方法 发明领域
本发明涉及抑制淀粉样的蛋白聚集和使淀粉样沉积物成象的方法。更具体地说，本发明涉及抑制淀粉样蛋白聚集以治疗阿尔茨海默病。
发明背景
淀粉样变性是一种以各种不溶性原纤蛋白在患者组织中积聚为特征的疾病。包含积聚物或沉积物的原纤蛋白被称作淀粉样蛋白。虽然沉积物中发现的具体蛋白或肽有所不同，但原纤形态学和大量β-片状二级结构则是许多类型的淀粉样变性所共同存在的。淀粉样沉积物通过淀粉样蛋白的聚集、然后通过聚集物和/或淀粉样蛋白的进一步结合而形成。
多种疾病已显示有淀粉样沉积物的存在，它们有其特定的关联蛋白，这些疾病例如有布氏杆菌病、Muckle-Wells氏综合征、自发性淀粉样变性、淀粉样多神经病、淀粉样心肌病、全身性老年性淀粉样变性、具有淀粉样变性的遗传性小脑出血、阿尔茨海默病、唐氏先天愚征、绵羊疯痒病、痉挛性假硬化症、苦鲁病、Gerstmann-Straussler-Scheinker氏综合征、甲状腺髓样癌，透析患者中的单独心房淀粉样蛋白、β2-微球蛋白淀粉样蛋白，包涵体肌炎、肌肉消耗性疾病中的β2-淀粉样沉积物、镰形细胞贫血、帕金森氏病和胰岛糖尿病II型胰岛瘤。
阿尔茨海默病是一种退化性大脑病症，其临床特征是，记忆、认知、推理、判断和情绪稳定性的进行性丧失，逐渐导致精神衰退，最终死亡。由于阿尔茨海默病和相关的退化性大脑病症是日益老化的人口的主要医学问题，因此，需要新的疾病的诊断和治疗方法。
人们一直努力寻求一种简便的非损伤性的对患者的淀粉样沉积物进行检测和定量的方法。目前，对淀粉样沉积物的检测包括活组织检查或尸体解剖材料地组织学分析。二种方法都有重大缺陷。例如，尸体解剖只能用于死后诊断。
将体内淀粉样沉积物直接成象很困难，因为沉积物与正常的组织有许多相同的物理特性，即，密度和含水量。以往的直接用磁共振(MRI)和计算机辅助段层摄影法(CAT)将淀粉样沉积物成象的尝试令人失望，只能在某些顺利条件下检测出淀粉样沉积物。此外，用抗体、血清淀粉样淀粉样P蛋白或其它探测分子将淀粉样沉积物标记的努力在组织周边方面提供了一些选择性，但对组织内部的成象性差。
因此，一种非损伤性的对患者的淀粉样沉积物进行成象和定量的方法将是有用的。此外，可抑制淀粉样蛋白聚集成淀粉样沉积物的化合物将是有用的。
发明的概述
本发明提供一种治疗阿尔茨海默病的方法，该方法包括将治疗有效量的式I化合物或其药用盐给药于阿尔茨海默病患者：式中，
Ra为氢、C1-C6烷基或-CO-C1-C6烷基；
n为0-5；
R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7独立地表示氢、卤素、-OH、-NH2、NRbRc、-COOH、-CO2C1-C6烷基、-NO2、-OC1-C12烷基、-C1-C8烷基、-CF3、-CN、-OCH2苯基、-OCH2-取代的苯基、-(CH2)m-苯基、-O-苯基、-O-取代的苯基、-CH＝CH-苯基、-O(CH2)pNRbRc、-CO-NRbRc、-NHCO-Rb、-NH(CH2)pNRbRc、-N(C1-C6烷基)(CH2)pNRbRc、-CH(CH2OC1-C6烷基)2；
R8为COOH、四唑基、-SO2Rd或-CONHSO2Rd；
Rb和Rc独立地表示氢、-C1-C6烷基、-(CH2)m-苯基或Rb和Rc与它们所连接的氮原子一起形成选自哌啶基、吡咯基、咪唑基、哌嗪基、4-C1-C6烷基哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、十氢异喹啉或吡唑基的环；
Rd为氢、-C1-C6烷基、-CF3或苯基；
m为0-5；
p为1-5；
A为CH或N；
R1和R2在彼此相邻时可以是甲二氧基。
在一较佳实施方式中，基团连接在苯环的4位。
在本发明方法的一较佳实施方式中，在式I化合物中，
Ra为氢；
n为2；
R3和R4为氢。
在本发明方法的一较佳实施方式中，在式I化合物中，
Ra为氢；
R1为卤素；
R2为氢或卤素；
R3、R4、R5和R6为氢；
n为2-5。
在本发明方法的另一较佳实施方式中，在式I化合物中，
Ra为氢；
n为2或3；
R1为-NRbRc；
R2、R3、R4、R5和R7均为氢。
在本发明方法的一较佳实施方式中，在式I化合物中，
Ra为氢；
n为2；
R3和R4为氢；
R1、R2和R7独立地表示氯、-N(CH2CH3)2、-OH、CH3-、氟、-CF3、苯基、氢、-OCH2苯基、-O(CH2)3N(CH3)2、-O苯基、-O(CH2)7CH3、-CH(CH2OCH2CH3)2、吡咯基、-CH＝CH-苯基、-N[(CH2)3CH3]2、取代的苯基、-OCH2-取代的苯基、吡唑基或-N(苯基)2。
在本发明方法的一较佳实施方式中，在式I化合物中，
Ra为氢；
n为3、4或5；
R3和R4为氢；
R1、R2和R7独立地表示氯或氢。
在本发明方法的一较佳实施方式中，在式I化合物中，
Ra为氢；
n为2；
R3和R4为氢；
R5、R6和R8独立地表示氢、-CO2H、-NO2、-OCH3、咪唑基、-SO2-CH3、-CN、氟、-CH3、-CF3、卤素、-NH-C1-C6烷基、-N(C1-C6烷基)2、-NH2或吡咯基。
在本发明方法的一较佳实施方式中，在式I化合物中，
Ra为氢；
n为2；
R3和R4为氢；
R5为-CO2H。
在本发明的治疗阿尔茨海默病的方法中，最好将治疗有效量的具有以下定义的式I化合物或其药用盐给药于阿尔茨海默病患者：式中，
Ra为氢；
n为1-5；
R1、R2和R7独立地表示氯、-N(CH2CH3)2、-OH、CH3-、氟、-CF3、苯基、氢、-OCH2苯基、-O(CH2)3N(CH3)2、-O-苯基、-O(CH2)7CH3、-CH(CH2OCH2CH3)2、吡咯基、-CH＝CH-苯基、-N[(CH2)3CH3]2、取代的苯基、-OCH2-取代的苯基、吡唑基或-N(苯基)2；
R5和R6独立地表示氢、-CO2H、-NO2-、-OCH3、咪唑基、-CN、氟、-CH3、-CF3或吡咯基。
在本发明方法的较佳实施方式中，式I化合物是
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔4-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二羟基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-二丁基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4，5-三羟基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-4-咪唑-1-基-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔4-(3，4-二氯苯基)丁基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔4-(3，4-二氯苯基)丁基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔4-(3，4-二氯苯基)丁基〕苯氨基}-3，5-二硝基苯甲酸；
2-{4-〔5-(3，4-二氯苯基)戊基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔5-(3，4-二氯苯基)戊基〕苯氨基}-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸；
2-〔4-(3，4-二氯苄基)苯氨基〕苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二甲基苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氟苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-〔4-(2-联苯-4-基乙基)苯氨基〕-5-硝基苯甲酸；
5-硝基-2-(4-苯乙基苯氨基)苯甲酸；
2-(4-苯乙基苯氨基)苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-甲氧基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}对苯二甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-甲基苯甲酸；
4-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}间苯二甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-甲磺酰基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-咪唑-1-基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-6-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-4-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-3-硝基苯甲酸；
5-氰基-2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-4，6-二氟苯甲酸；
6-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-2，3-二氟苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-6-氟苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-3-氟苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-3-甲基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-4-氟苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-3，5-二氟苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-3-三氟甲基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-6-三氟甲基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-三氟甲基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-吡咯-1-基苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-苄氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-(4-{2-〔4-(3-二甲基氨基丙氧基)苯基〕乙基}苯氨基)苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-二乙基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-苯氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-辛氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-(4-{2-〔4-(2-乙氧基-1-乙氧基甲基乙基)苯基〕乙基}苯氨基)苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-吡咯-1-基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-苯乙烯基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-二丁基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4′-乙基联苯-4-基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-辛基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-(4-{2-〔3-(3，5-二氯苯氧基)苯基〕乙基}苯氨基)苯甲酸；
2-(4-{2-〔4-(2-氯-6-氟-苄氧基)苯基〕乙基}苯氨基)苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-吡唑-1-基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-二苯基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-(4-{2-〔4-(3，4-二氯苄氧基)苯基〕乙基}苯氨基)苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-氨基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-三氟甲基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二甲基苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-〔〔4-〔2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)乙基〕苯基}氨基苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-二乙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-硝基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3-硝基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3-氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-二丙基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一盐酸盐；
2-{4-〔2-(4-二乙基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一盐酸盐一水和物；
2-{4-〔3-(3-二丙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3-二甲基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-乙氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-(N-{4-〔3-(4-二乙基氨基苯基)丙基〕苯基}-N-乙氨基)苯甲酸；
2-{4-〔2-(3-二苄基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3-二乙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(3-氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-二甲基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-乙酰氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(3-乙酰氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(3-二丙基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一盐酸盐；
2-{4-〔2-(3-二丁基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一盐酸盐；
2-{4-〔3-(4-乙酰氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3-乙酰氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3-二乙基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一盐酸盐；
2-{4-〔2-(3-哌啶-1-基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一盐酸盐；
2-{4-〔3-(4-二丙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-二丁基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3-二丁基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-(4-{3-〔4-(1H-吡咯-1-基)苯基〕丙基}苯氨基)苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-哌啶-1-基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-二乙基氨基甲酰基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-羧基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-二乙基氨基甲基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-丙氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3-丙氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-吡咯烷-1-基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3-哌啶-1-基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-〔2-二乙基氨基乙基氨基〕苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-〔羟基羰基甲氨基〕苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-〔2-二乙基氨基乙氨基〕苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-吗啉代苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-哌嗪基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-〔4-(3，4-二氯苯基)苯氨基〕苯甲酸。
本发明还提供上述式I中苯甲酸部分被吡啶基羧酸取代的化合物，例如，4-〔4-(3，4-二氯苯基)苯氨基〕-3-羟基羰基哌啶。
本发明还提供抑制淀粉样蛋白聚集成淀粉样沉积物的方法，该方法包括将淀粉样蛋白聚集抑制量的式I化合物或其药用盐给药于需要抑制淀粉样蛋白聚集的患者：式中，
Ra为氢、C1-C6烷基或-CO-C1-C6烷基；
n为0-5；
R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7独立地表示氢、卤素、-OH、-NH2、NRbRc、-COOH、-CO2C1-C6烷基、-NO2、-OC1-C12烷基、-C1-C8烷基、-CF3、-CN、-OCH2苯基、-OCH2-取代的苯基、-(CH2)m-苯基、-O-苯基、-O-取代的苯基、-CH＝CH-苯基、-O(CH2)pNRbRc、-CO-NRbRc、-NHCO-Rb、-NH(CH2)pNRbRc、-N(C1-C6烷基)(CH2)pNRbRc、-CH(CH2OC1-C6烷基)2；
R8为COOH、四唑基、-SO2Rd或-CONHSO2Rd；
Rb和Rc独立地表示氢、-C1-C6烷基、-(CH2)m-苯基或Rb和Rc与它们所连接的氮原子一起形成选自哌啶基、吡咯基、咪唑基、哌嗪基、4-C1-C6烷基哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、十氢异喹啉或吡唑基的环；
Rd为氢、-C1-C6烷基、-CF3或苯基；
m为0-5；
p为1-5；
A为CH或N；
R1和R2在彼此相邻时可以是甲二氧基。
在本发明方法的一较佳实施方式中，在式I化合物中，
Ra为氢；
n为2；
R3和R4为氢。
在本发明方法的一较佳实施方式中，在式I化合物中，
Ra为氢；
R3和R4为氢；
n为2-5。
在本发明方法的一较佳实施方式中，在式I化合物中，
Ra为氢；
n为2；
R3和R4为氢；
R1、R2和R7独立地表示氯、-N(CH2CH3)2、-OH、CH3-、氟、-CF3、苯基、氢、-OCH2苯基、-O(CH2)3N(CH3)2、-O苯基、-O(CH2)7CH3、-CH(CH2OCH2CH3)2、吡咯基、-CH＝CH-苯基、-N[(CH2)3CH3]2、取代的苯基、-OCH2-取代的苯基、吡唑基或-N(苯基)2。
在本发明方法的一较佳实施方式中，在式I化合物中，
Ra为氢；
n为3、4或5；
R3和R4为氢；
R1、R2和R7独立地表示氯或氢。
在本发明方法的一较佳实施方式中，在式I化合物中，
Ra为氢；
n为2；
R3和R4为氢；
R5和R6独立地表示氢、-CO2H、-NO2、-OCH3、咪唑基、-CN、氟、-CH3、-CF3、卤素、-NH-C1-C6烷基、-N(C1-C6烷基)2、-NH2或吡咯基。
在本发明方法的一较佳实施方式中，在式I化合物中，
Ra为氢；
n为2；
R3和R4为氢；
R5为-CO2H。
在本发明的抑制淀粉样蛋白聚集成淀粉样沉积物的方法中，最好将淀粉样蛋白聚集抑制量的具有以下定义的式I化合物或其药用盐给药于需要抑制淀粉样蛋白聚集患者：式中，
Ra为氢；
n为1-5；
R3和R4为氢；
R1、R2和R7独立地表示氯、-N(CH2CH3)2、-OH、CH3-、氟、-CF3、苯基、氢、-OCH2苯基、-O(CH2)3N(CH3)2、-O-苯基、-O(CH2)7CH3、-CH(CH2OCH2CH3)2、吡咯基、-CH＝CH-苯基、-N[(CH2)3CH3]2、取代的苯基、-OCH2-取代的苯基、吡唑基或-N(苯基)2；
R5和R6独立地表示氢、-CO2H、-NO2-、-OCH3、咪唑基、-CN、氟、-CH3、-CF3或吡咯基；
R8表示COOH或四唑基。
在本发明的化合物中，最佳的是具有式II的化合物及其药用盐：式中，
R1为卤素；
R2为氢或卤素；
n和R6的定义与式I中的相同。
另一些较佳的是具有式III的化合物及其药用盐：式中，
R1为卤素；
R2为氢或卤素；
n和R6的定义与式I中的相同。再一些较佳的是具有式IV的化合物及其药用盐：式中，
R1为卤素；
R2为氢或卤素；
n和R6的定义与式I中的相同。
在本发明方法的一较佳实施方式中，提供下述式I的新化合物：
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔4-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二羟基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-二丁基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4，5-三羟基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-4-咪唑-1-基-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔4-(3，4-二氯苯基)丁基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔4-(3，4-二氯苯基)丁基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔4-(3，4-二氯苯基)丁基〕苯氨基}-3，5-二硝基苯甲酸；
2-{4-〔5-(3，4-二氯苯基)戊基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔5-(3，4-二氯苯基)戊基〕苯氨基}-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸；
2-〔4-(3，4-二氯苄基)苯氨基〕苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二甲基苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氟苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-〔4-(2-联苯-4-基乙基)苯氨基〕-5-硝基苯甲酸；
5-硝基-2-(4-苯乙基苯氨基)苯甲酸；
2-(4-苯乙基苯氨基)苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-甲氧基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}对苯二甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-甲基苯甲酸；
4-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}间苯二甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-甲磺酰基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-咪唑-1-基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-6-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-4-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-3-硝基苯甲酸；
5-氰基-2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-4，6-二氟苯甲酸；
6-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-2，3-二氟苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-6-氟苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-3-氟苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-3-甲基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-4-氟苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-3，5-二氟苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-3-三氟甲基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-6-三氟甲基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-三氟甲基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-吡咯-1-基苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-苄氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-(4-{2-〔4-(3-二甲基氨基丙氧基)苯基〕乙基}苯氨基)苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-二乙基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-苯氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-辛氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-(4-{2-〔4-(2-乙氧基-1-乙氧基甲基乙基)苯基〕乙基}苯氨基)苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-吡咯-1-基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-苯乙烯基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-二丁基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4′-乙基联苯-4-基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-辛基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-(4-{2-〔3-(3，5-二氯苯氧基)苯基〕乙基}苯氨基)苯甲酸；
2-(4-{2-〔4-(2-氯-6-氟-苄氧基)苯基〕乙基}苯氨基)苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-吡唑-1-基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-二苯基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-(4-{2-〔4-(3，4-二氯苄氧基)苯基〕乙基}苯氨基)苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二甲基苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-〔〔4-〔2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)乙基〕苯基〕氨基苯甲酸；或
2-〔4-(3，4-二氯苯基)苯基〕氨基苯甲酸。
本发明还提供下列化合物：
2-{4-〔4-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二羟基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-二丁基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4，5-三羟基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-〔-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-4-咪唑-1-基-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔4-(3，4-二氯苯基)丁基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔4-(3，4-二氯苯基)丁基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔4-(3，4-二氯苯基)丁基〕苯氨基}-3，5-二硝基苯甲酸；
2-{4-〔5-(3，4-二氯苯基)戊基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔5-(3，4-二氯苯基)戊基〕苯氨基}-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸；
2-〔4-(3，4-二氯苄基)苯氨基〕苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二甲基苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氟苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-〔4-(2-联苯-4-基乙基)苯氨基〕-5-硝基苯甲酸；
5-硝基-2-(4-苯乙基苯氨基)苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-氨基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-三氟甲基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-(4-苯乙基苯氨基)苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-甲氧基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}对苯二甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-甲基苯甲酸；
4-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}间苯二甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-甲磺酰基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-咪唑-1-基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-6-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-4-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-3-硝基苯甲酸；
5-氰基-2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-4，6-二氟苯甲酸；
6-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-2，3-二氟苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-6-氟苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-3-氟苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-3-甲基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-4-氟苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-3，5-二氟苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-3-三氟甲基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-6-三氟甲基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-三氟甲基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-吡咯-1-基苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-苄氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-(4-{2-〔4-(3-二甲基氨基丙氧基)苯基〕乙基}苯氨基)苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-二乙基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-苯氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-辛氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-(4-{2-〔4-(2-乙氧基-1-乙氧基甲基乙基)苯基〕乙基}苯氨基)苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-吡咯-1-基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-苯乙烯基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-二丁基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4′-乙基联苯-4-基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-辛基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-(4-{2-〔3-(3，5-二氯苯氧基)苯基〕乙基}苯氨基)苯甲酸；
2-(4-{2-〔4-(2-氯-6-氟-苄氧基)苯基〕乙基}苯氨基)苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-吡唑-1-基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-二苯基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-(4-{2-〔4-(3，4-二氯苄氧基)苯基〕乙基}苯氨基)苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-氨基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-三氟甲基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)乙基〕苯基}氨基苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-二乙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-硝基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3-硝基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3-氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-二丙基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一盐酸盐；
2-{4-〔2-(4-二乙基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一盐酸盐一水和物；
2-{4-〔3-(3-二丙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3-二甲基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-乙氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-(N-{4-〔3-(4-二乙基氨基苯基)丙基〕苯基}-N-乙氨基)苯甲酸；
2-{4-〔2-(3-二苄基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3-二乙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(3-氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-二甲基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(4-乙酰氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(3-乙酰氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(3-二丙基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一盐酸盐；
2-{4-〔2-(3-二丁基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一盐酸盐；
2-{4-〔3-(4-乙酰氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3-乙酰氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3-二乙基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一盐酸盐；
2-{4-〔2-(3-哌啶-1-基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一盐酸盐；
2-{4-〔3-(4-二丙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-二丁基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3-二丁基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-(4-{3-〔4-(1H-吡咯-1-基)苯基〕丙基}苯氨基)苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-哌啶-1-基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-二乙基氨基甲酰基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-羧基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-二乙基氨基甲基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-丙氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3-丙氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-吡咯烷-1-基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔3-(3-哌啶-1-基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
{5-〔(1-丁基-1，2，3，4-四氢-6-喹啉基)亚甲基〕-4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基}乙酸；
{5-〔(1-丁基-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)亚甲基〕-4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基}乙酸；
3-{5-〔(1-丁基-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基)亚甲基〕-4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基}丙酸；
4-{5-〔(1-丁基-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基)亚甲基〕-4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基}丁酸；
2-〔4-(3，4-二氯苯基)苯基〕氨基苯甲酸。
本发明还提供上述式I中末端苯基烷基连接在中心的苯环的2或3位的化合物，即，式Ia化合物
典型的2-和3-取代的化合物是：
2-{3-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{2-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{3-〔3-(4-二乙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{3-〔3-(4-二正丙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{3-〔3-(4-正丙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{3-〔3-(4-〔2-二乙基氨基乙氨基〕苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{2-〔3-(4-〔羟基羰基甲氨基〕苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{2-〔2-(3-〔2-二乙基氨基乙氨基〕苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{3-〔3-(4-吗啉代苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{3-〔3-(4-哌嗪基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{3-〔2-(4-氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{3-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔4-(4-{4-甲基哌嗪基}苯基)丁基〕苯氨基}苯甲酸。
本发明还提供上述新化合物与药用稀释剂、载体或赋形剂混合的药剂。
本发明还提供将淀粉样沉积物成象的方法，该方法包括：
a.将可检测量的式I的标记化合物或其药用盐导入患者：式中，
Ra为氢、C1-C6烷基或-CO-C1-C6烷基；
n为0-5；
R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7独立地表示氢、卤素、-OH、-NH2、NRbRc、-COOH、-CO2C1-C6烷基、-NO2、-OC1-C12烷基、-C1-C8烷基、-CF3、-CN、-OCH2苯基、-OCH2-取代的苯基、-(CH2)m-苯基、-O-苯基、-O-取代的苯基、-CH＝CH-苯基、-O(CH2)pNRbRc、-CO-NRbRc、-NHCO-Rb、-NH(CH2)pNRbRc、-N(C1-C6烷基)(CH2)pNRbRc、-CH(CH2OC1-C6烷基)2；
R8为COOH、四唑基、-SO2Rd或-CONHSO2Rd；
Rb和Rc独立地表示氢、-C1-C6烷基、-(CH2)m-苯基或Rb和Rc与它们所连接的氮原子一起形成选自哌啶基、吡咯基、咪唑基、哌嗪基、4-C1-C6烷基哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、十氢异喹啉或吡唑基的环；
Rd为氢、-C1-C6烷基、-CF3或苯基；
m为0-5；
p为1-5；
A为CH或N；
R1和R2在彼此相邻时可以是甲二氧基；
b.让标记化合物以足够的时间与淀粉样沉积物结合；
c.检测与淀粉样沉积物结合的标记化合物。
在本发明方法的一较佳实施方式中，患者患有或被怀疑患有阿尔茨海默病。
在本发明方法的一较佳实施方式中，所述标记化合物是放射性标记的化合物。
在本发明方法的一较佳实施方式中，所述标记化合物用MRI检测。
本发明还提供下列较佳化合物及其药剂：
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸；
2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸；
2-〔〔4-〔2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)乙基〕苯基〕氨基苯甲酸；
2-{4-〔3-(4-二乙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸。
本发明还提供上述化合物的药用酸加成盐、酰胺和前药。
发明的详细描述
“烷基”一词是指1-12个碳原子的直链或支链烃。烷基的代表性例子有甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基、丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、己基、辛基、癸基和1，1-二甲基辛基。
较佳的烷基有C1-C8烷基，尤其是C1-C6烷基。
“烷氧基”一词是指与氧原子连接的烷基。烷氧基的代表性例子包括甲氧基、乙氧基、叔丁氧基、丙氧基和异丁氧基。较佳的烷氧基有C1-C12烷氧基，尤其是C1-C6烷氧基。
“卤素”一词包括氯、氟、溴和碘。
“取代的”一词分子中的一个或多个氢被另一种原子或原子团置换。例如，取代基包括卤素(尤其是氯)、-OH、-CF3、-NO2、-NH2、-NH(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基)2、C1-C6烷基、-OC1-C6烷基、-CN、-CO2H和-CO2-C1-C6烷基。
“取代的苯基”一词是指其1-4个氢原子独立地被取代基(最好是上面所述的取代基)置换的苯环。典型的“取代的苯基”包括4-氯苯基、3，4-二溴苯基、3-氟-4-甲基苯基、3，4-二氯苯基、3，4-亚甲二氧基苯基和4-二甲基氨基苯基。
符号“-”表示共价键。
R1、R3和R5表示的取代基例如包括氨基(NRbRc)和酰氨基(-NHCORb)。Rb和Rc可以是氢、烷基、苯基烷基和取代基苯基烷基，典型的NRbRc基团包括甲氨基、二乙基氨基、异丁基-丙氨基、苄氨基和3，4-二甲氧基苄氨基。酰氨基的例子包括甲酰氨基、乙酰氨基、2-苯基乙酰氨基和2-(3-硝基苯基)乙酰氨基。R1、R3和R5也可以是N-甲基氨基甲氧基和2-(N-苄氨基)乙氧基等氨基烷氧基(-O(CH2)pNRbRc)和氨基烷基氨基(-NH(CH2)pNRbRc)，如3-(二甲基氨基)丙氨基和2-(N-乙基-N-苄氨基)乙氨基。另外，R1、R3和R5等取代基可以是环状结构，例如，当NRbRc是该取代基的一部分时，Rb和Rc与它们所连接的氮原子一起形成选自咪唑、吡咯、哌啶、哌嗪、4-C1-C6烷基哌嗪、吗啉、硫代吗啉、吡唑和十氢异喹啉的环；
R1、R2、R5、R6和R7等取代基也可以是-CH＝CH-苯基(即，苯乙烯基)、苯氧基、O-取代的苯基(如3-碘苯氧基、2，4，6-三羟基苯氧基、2-氟-3-硝基苯氧基)、O-苄基和O-取代的苄基，如2-三氟甲基苄氧基和4-氨基苄氧基。
在本文中，“药用盐、酯、酰胺和前药”一词是指本发明化合物的羧酸盐、氨基酸加成盐、酯、酰胺和前药，它们在合理的医学判断的范围内，适用于与患者组织接触而不会有过度的毒性、刺激、过敏性反应等，与合理的利益/风险比相称，并可有效地用于拟定的用途和本发明化合物的两性离子(如果可能的话)。“盐”一词是指本发明化合物的相对无毒的无机和有机酸加成盐。这些盐可在化合物的最终分离和纯化过程中原地制备或分别通过将纯化的化合物以其游离碱的形式与合适的有机或无机酸反应并将由此形成的盐分离而制备。代表性的盐包括氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、乙酸盐、草酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂酸盐、硼酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、磷酸盐、甲苯磺酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、萘酸盐、甲磺酸盐、葡萄糖酸盐、乳糖酸盐和月桂基磺酸盐等。这些可包括基于碱金属和碱土金属(如钠、锂、钾、钙、镁等)的阳离子以及无毒的铵、季铵和胺阳离子，包括但不限于铵、四甲基铵、四乙基铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、乙胺等。(例如，可参见S.M.Berge等，药用盐(Pharmaceutical Salts)，J.Pharm.Sci.，66：1-19(1977)，该文纳入于此作为参考。)
本发明化合物的可药用的无毒的酯包括C1-C6烷基酯，其中，烷基为直链或支链。可药用酯还包括C5-C7环烷基酯和芳烷基酯，例如但不限于苄基。以C1-C4烷基酯为佳。本发明化合物的酯可用常法制备，例如，将式I的羧酸与乙醇或苄醇等醇反应。
本发明化合物的可药用的无毒的酰胺包括由氨、伯C1-C6烷基胺和仲C1-C6二烷基胺衍生的胺，其中，烷基为直链或支链。当为仲胺时，所述胺也可以是含有一个氮原子的5或6元杂环。以由氨、C1-C3烷基伯酰胺和C1-C2二烷基仲酰胺衍生的胺为佳。本发明化合物的酰胺可用常法制备。
“前药”一词是指这样的化合物：它们例如通过血中水解而在体内迅速转化成上述结构式的本发明化合物。T.Higuchi和.Stella，作为新的给药系统的前药(Pro-drugs as Novel Delivery Systems)，C.S.Symposium Series第14卷和Edward B.Roche编，药物设计中的生物可逆的载体(Bioreversible Carriers inDrug Design)，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press，1987对此作了充分的讨论。这二篇文献纳入于此作为参考。
此外，本发明的化合物可以不是与药用溶剂(如水、乙醇等)形成溶剂合物的形式，也可以是形成溶剂合物的形式。对于本发明的目的而言，溶剂合物形式一般被认为与非溶剂合物形式等效。
本发明的化合物可由于化合物中的非对称中心的存在而呈不同的立体异构体形式。化合物的所有立体异构体形式及其混合物(包括外消旋混合物)被认作构成本发明的一部分。
在本发明的成象方法的第一步骤中，将式I的标记化合物以可检测量导入患者组织中。化合物通常是药学组合物的一部分，通过本领域的技术人员公知的方法施药于组织或患者。
在本发明的方法中，化合物的施药方法可以是口服、直肠给药、肠胃外给药(静脉内给药、肌内给药或皮下给药)、脑池内给药、阴道内给药、腹腔内给药、膀胱内给药、局部给药(粉剂、软膏或滴剂)或颊用或鼻用喷剂。
适合肠胃外注射的组合物可包含生理学上可接受的无菌水性或非水性溶液、分散液、悬浮液或乳液和用于兑成注射用溶液或分散液的无菌粉末。合适的水性和非水性载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇、丙三醇等)和它们的合适的混合物，植物油(如橄榄油)，注射用有机酯(如油酸乙酯)。可通过例如使用包衣剂(如卵磷脂)、维持所需粒径(在分散液的情况下)和使用表面活性剂来维持合适的流动性。
这些组合物也可含辅剂，如防腐剂、湿润剂、乳化剂和分散剂。可用各种抗菌剂和抗真菌剂(例如，对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸等)防止微生物的作用。也可加入等渗剂，例如，糖、氯化钠等。使用延长吸收剂(如单硬脂酸铝和明胶)可使注射用药学组合物的吸收延长。
口服用固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、粉剂和颗粒剂。在这些固体剂型中，活性化合物与下列物质混合：至少一种惰性常用赋形剂(或载体)，如柠檬酸钠或磷酸二钙，或(a)填料或膨胀剂(例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸)；(b)粘合剂，例如，羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(c)增湿剂，如丙三醇；(d)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、土豆或木薯淀粉、海藻酸、某些复合硅酸盐和碳酸钠；(e)溶液缓凝剂，例如，石蜡；(f)吸收促进剂，例如，季铵化合物；(g)湿润剂，例如，十六醇和单硬脂酸甘油酯；(h)吸收剂，例如，高岭土和膨润土；(i)润滑剂，例如，滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固态聚乙二醇、月桂基硫酸钠或它们的混合物。当为胶囊、片剂和丸剂时，剂型也可包含缓冲剂。
在使用乳糖和高分子量的聚乙二醇等赋形剂的软充填的和硬充填的明胶胶囊中，也可使用相似类型的固体成分作为填料。
固体剂型(如片剂、糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒剂)可用包衣剂和包壳剂(如肠衣和本领域公知的其它物质)制备。它们可含有乳浊剂，也可以是在小肠的某一部分以延缓的形式释放活性化合物的组合物。可使用的包埋成分的例子有高分子物质和蜡。如果合适的话，活性化合物也可以是与一种或多种上述赋形剂一起装入微胶囊的形式。
口服用液体剂型包括药用乳液、溶液、悬浮液、糖浆、酏剂。除了活性化合物之外，液体剂型可含有本领域常用的惰性稀释剂(如水和其它溶剂)、增溶剂和乳化剂，例如，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(尤其是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和麻油)、丙三醇、四氢糠醇、聚乙二醇、山梨糖醇的脂肪酸酯或这些物质的混合物等。
除了这些惰性稀释剂之外，上述组合物还可包含辅剂，如湿润剂、乳化剂、悬浮剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。
除了活性化合物之外，悬浮液可含有悬浮剂，例如，乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇和山梨糖醇酐酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂、黄蓍胶和这些物质的混合物等。
直肠给药用组合物最好是栓剂，可通过将本发明的化合物与合适的非刺激性赋形剂或载体(如可可脂、聚乙二醇或栓剂用蜡)混合而制得，栓剂在常温下为固体，但在体温下为液体，这样，它会在直肠或阴道腔中熔化，释放出活性化合物。
本发明化合物的局部施药剂型包括软膏、粉剂、喷雾剂和吸入剂。活性化合物在无菌条件下与生理学上可接受的载体和任何所需的防腐剂、缓冲剂或抛射剂混合。眼用制剂、眼膏、粉剂和溶液也被认为是在本发明的范围内。
在本发明的一较佳实施方式中，将标记化合物以可检测量导入患者中，在足以使化合物与淀粉样沉积物结合的时间过去之后，非损伤性地检测患者体内的标记化合物。在本发明的另一较佳实施方式中，将式I的标记化合物导入患者中，让化合物以足够时间与淀粉样沉积物结合，然后，采取患者的组织检样，体外检测组织中的标记化合物。在本发明的第三种实施方式中，采取患者的组织检样，将式I的标记化合物导入组织检样中。在足以使化合物与淀粉样沉积物结合的时间之后，检测化合物。
将标记化合物给药于患者可采用全身或局部给药途径。例如，标记化合物可以以传输于患者全身的方式给药。也可将标记化合物施药于特定器官或感兴趣的组织。例如，宜将脑中的淀粉样沉积物定位和定量，以诊断或追踪患者阿尔茨海默病的进展。
“组织”一词是指患者身体的一部分。组织的例子包括脑、心、肝、血管和动脉。可检测量是用所选检测方法检测出来而所需的标记化合物的量。导入患者中以供检测的标记化合物的量可容易地由本领域的技术人员确定。例如，将给予患者的标记化合物的量增加至该化合物可用所选检测方法检测出来。在化合物中导入标记以检测化合物。
“患者”一词是指人和其它动物。本领域的技术人员还精通于确定足以使化合物与淀粉样沉积物结合的时间。所需时间可容易地通过将可检测量的式I标记化合物导入患者然后在施药后的不同时间检测标记化合物而加以确定。
“结合”一词是指标记化合物与淀粉样沉积物之间的化学相互作用。结合的例子包括共价键、离子键、亲水性-亲水性相互作用、疏水性-疏水性相互作用和络合。
本领域的技术人员熟悉各种检测标记化合物的方法。例如，磁共振成象法(MRI)、正电子发射段层摄影法(PET)或单光子发射计算段层摄影法(SPECT)可用来检测放射性标记的化合物。导入化合物的标记将取决于所需的检测方法。例如，若选择PET作为检测方法，则化合物必须具有正电子发射原子，如11C或18F。
式I化合物中的合适标记的另一个例子是可用磁共振成象法(MRI)(该方法有时也称核磁共振法(NMR))检测的原子，如13C、15N或19F等。此外，式I标记化合物也可用使用顺磁对比剂的MRI检测。
另一个检测方法的例子是电子顺磁共振法(EPR)。在该情况下，可使用本领域公知的EPR探头，如硝基氧。
淀粉样沉积物的成象也可定量进行，这样，可确定淀粉样沉积物的量。
本发明还提供通过施药于需要抑制淀粉样蛋白聚集的患者以淀粉样蛋白抑制量的式I化合物来抑制淀粉样蛋白聚集成淀粉样沉积物的方法。本领域的技术人员只需增加施药于患者的式I化合物量至淀粉样沉积物的生长减少或停止，就可容易地确定淀粉样蛋白抑制量。生长率可用成象法或通过采取患者的组织检样并观察其中的淀粉样沉积物而加以评估。
需要抑制淀粉样蛋白聚集的患者是患有淀粉样蛋白聚集的疾病或病症的患者。这些疾病和病症的例子包括布氏杆菌病、Muckle-Wells氏综合征、自发性淀粉样变性、淀粉样多神经病、淀粉样心肌病、全身性老年性淀粉样变性、具有淀粉样变性的遗传性小脑出血、阿尔茨海默病、唐氏先天愚征、绵羊疯痒病、痉挛性假硬化症、苦鲁病、Gerstmann-Straussler-Scheinker氏综合征、甲状腺髓样癌，透析患者中的单独心房淀粉样蛋白、β2-微球蛋白淀粉样蛋白，包涵体肌炎、肌肉消耗性疾病中的β2-淀粉样沉积物和胰岛糖尿病II型胰岛瘤。
本发明还提供化合物中的一个或多个原子已被放射性同位素置换的式I化合物(标记化合物)。放射性同位素可以是任何同位素。但优选3H、123I、125I、131I、11C和18F。本领域的技术人员熟悉将放射性同位素导入化合物的方法。例如，容易制得其中的一个碳原子为11C或14C的式I化合物。
本发明的化合物可以每日约0.1-1000mg的剂量施药于患者。对于体重约为70kg的普通成人，约0.01-100mg/kg体重/日的剂量就足够了。但所用具体剂量可进行变化。例如，剂量可取决于许多因素，包括患者的要求、需治疗的病症的严重性、所用化合物的药理活性。对于特定患者的最佳剂量的确定是本领域的技术人员公知的。
下面的实施例是用来举例说明本发明的具体实施方式，而绝非是用来限定包括权利要求书在内的申请文件的范围。
实施例合成
式I化合物可用流程图6-9所示的几个途径制备。流程图1-5显示可用来得到所需起始胺(IV)、(VIII)、(XV)和(XXI)的合成途径。
在流程图1中，合适取代的醛(I)和硝基苯乙酸(II)在150℃于哌啶中加热时产生烯烃(III)。标准的氢化条件(如阮内镍)给出所需胺(IV)。
流程图2描述了含有三个亚甲基系链的胺(VIII)的合成。醛(I)与硝基酮(V)在氢氧化钠的存在下的缩合给出所需的α，β-不饱和酮，而该酮在标准氢化条件下(阮内镍)给出(VII)，然后在Wolff-Kishner条件下给出所需胺(VIII)。
流程图3与流程图2非常类似，所不同的是，醛(I)与取代的苯胺(IX)缩合。
流程图4示出标准的Wittig条件，在该条件中，起始物质(XII)和(XIII)分别通过醛醇缩合和内鎓盐化学而得到。醛(XII)与溴正膦(XIII)在碱(如丁基锂)的存在下反应，给出二烯(XIV)。(XIV)的标准还原条件(例如，阮内镍)给出所需胺(XV)。
流程图5示出含有5-亚甲基系链的胺(XXI)的合成。溴正膦(XVII)〔由相应的取代的溴化物(XVI)形成〕与硝基醛(XIX)〔由相应的醇(XVIII)的Swern氧化而得到〕在碱(如LHDMS)存在下的Wittig反应产生烯烃(XX)。用标准条件(阮内镍)还原(XX)，给出胺(XXI)。
流程图6示出一条得到式I化合物的途径。通过Buchwald偶合(方法A)和其后的皂化或通过使用Ullman反应(方法B)，可从(IV)、(VIII)和(XV)等胺中分离出式I化合物。含羟基的式I化合物(如实施例4和6)需要在合成的最后步骤中用试剂(如三溴化硼)将羟基保护基去甲基化。
当存在反应性官能团(如氨基和羧酸)时也要使用保护基，以避免不希望的副反应。通常将羧基转化成酯(如，叔丁基、苄基)，一般将氨基酰化(如乙酰基或三甲基硅基)。这些和其它的此类保护基是有机化学家周知的，在Greene和Wuts编著，有机合成中的保护基(Protective Groups in Organic Synthesis)，纽约John Wiley and Sons出版(1991年第2版)中有详尽的描述。所有引文纳入于此作为参考。
流程图7示出通过(IV)、(VIII)和(XXI)等胺与氟-硝基中间体(XXIV)在碱(如LHMDS或三乙胺)的存在下反应产生酯(XXV)来合成式I化合物。然后可用标准条件(如氢氧化钠)将该酯皂化。
在流程图8中，可将胺(XV)与可容易得到的氟取代的羧酸〔如(XXVI)或(XXVII)〕在各种碱(如DBU或三乙胺)的存在下偶合，生成式I化合物。
流程图9描述了胺(VIII)与容易得到的甲酯(XXVIII)在碱(如咪唑)的存在下偶合，生成酯(XXIX)。然后可将该酯用常法皂化，生成式I化合物。
流程图10示出含氟中间体(XXIV)的合成，它通过将容易得到的甲酯(XXX)硝化成(XXVIII)而得到。用氰化钾处理(XXVIII)，生成(XXIV)。
在流程图11中，示出与实施例18相关的化合物的合成。邻位取代的苯甲酸(XXVI)的钾盐与取代的苯胺(XXVII)在碳酸钾和乙酸铜的存在下反应，产生各种碘取代的氨基苯甲酸(XXVIII)。(XXVIII)与取代的硼酸和氯化钯的反应产生所需的取代的氨基苯甲酸(XXX)。
当然，应认识到，本发明的若干式I化合物可用标准的有机反应(如氧化、还原、烷基化、缩合、消去和类似的公知合成方法)由式I定义的其它化合物制得。例如，可容易地将Ra表示氢的式I化合物烷基化，形成Ra表示C1-C6烷基的化合物。R1表示NH2的化合物可容易地通过与酰基卤或酸酐反应而酰化，形成R1表示-NHCORb的化合物。类似地，可容易地将R1表示NO2的化合物还原，形成R1表示NH2的化合物。苯甲酸(其中，R8表示COOH)可用常规方法容易地转化成酯、酰胺、盐和其它前药。例如，可将苯甲酸与草酰氯反应，形成酰基氯，然后，可容易地将该酰基氯与磺酰胺(如甲磺酰胺)反应，产生相应的R8表示-CONHSO2CH3的本发明的化合物。胺的形成流程图1流程图2流程图3流程图4流程图5 偶合途径流程图6流程图7R是形成酯的基团，如烷基或苄基。流程图8流程图9含氟中间体的形成流程图10流程图11
实施例1
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸的制备步骤A(流程图1)：1，2-二氯-4-〔2-(4-硝基苯基)乙烯基)苯的制备
将对硝基苯乙酸(51.23g，0.28mol)和3，4-二氯苯甲醛(49.50g，0.28mol)在哌啶(50mL)中的混合液在氮气氛中于150-160℃加热5小时。将反应混合液冷却后，在滚热的甲醇(50mL)中研磨沉积物，然后在-5℃冷却12小时。滤去结晶沉积物，用冷甲醇漂洗，室温下在真空箱中干燥过夜，得到所需产物22.71g(0.077mol，27％)，为橙色固体，mp.190-191℃。
MS：294.9(M+).步骤B(流程图1)：4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯胺的制备
将1，2-二氯-4-〔2-(4-硝基苯基)乙烯基)苯(98.0g，0.33mol)在四氢呋喃(1.6L)中的样品在氢气氛中于阮内镍(Ra-Ni)(20g)的存在下在25-40℃(ΔP＝13.5psi)还原过滤反应混合物，将滤液真空浓缩，得到所需产物85.0g(0.32mol，95.8％)，为橙色固体，mp.68-70℃。
MS：266.1(M+).步骤C(流程图6)：2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸的制备方法A
将4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯胺(28.37g，106.59mmol)、2-溴苯甲酸甲酯(19.10g，88.82mmol)、碳酸铯(40.52g，124.35mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(O)(2.44g，2.67mmol)和(S)-(2，2′-双(二对甲苯基膦基-1，1′-联萘(98％，(S)-甲苯基-BINAP)(2.71g，4.00mmol)(配位体/Pd＝1.5)在无水甲苯(300mL)中的混合物在氮气氛中于100℃加热34小时。冷却至室温后，用乙醚稀释反应混合物，并用硅藻土过滤，然后用乙醚彻底漂洗。将滤液蒸干，得到褐色残余物(68g)。将所得残余物溶解在乙醇(50mL)和THF(100mL)中，然后加入5N氢氧化钠水溶液(200mL)，将混合物回流16小时。真空下除去溶剂。将残余物用浓盐酸酸化至pH3。滤取产生的沉淀物，在滚热的甲醇-H2O(4∶1)中研磨，并在真空下于室温干燥16小时，得到实施例1的化合物(31.95g，0.083mol，77.6％)，为橙色固体，mp.175.0-177.0℃。
元素分析：C21H17NO2Cl2
计算值：C，65.30；H，4.44；N，3.63.
实测值：C，65.40；H，4.54；N，3.50.方法B
将2-氯苯甲酸(5.4g，0.034mol)、4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯胺(10.0g，0.037mol)、无水碳酸钾(16.9g，0.12mol)、铜粉(4.94g，0.077mol)和氯化铜(I)(0.37g，0.0037mol)在无水二甲基甲酰胺(85mL)中的混合物在150℃加热回流24小时。将反应混合物倾入热水(150mL)中，在加热板上加热至90℃。加入木炭，将该混合物在90℃搅拌5分钟。用滤纸将上述温热的褐色混合物过滤。然后用浓盐酸(pH1)将冷却的滤液酸化，滤取沉淀物，在滚热的甲醇-H2O(1∶2)中研磨，于室温真空干燥16小时，得到实施例1的化合物(2.3g，0.006mol，17.5％)，为橙色固体，mp.165.0-173.0℃。
元素分析：C21H17NO2Cl2
计算值：C，65.30；H，4.44；N，3.63.
实测值：C，65.68；H，4.58；N，3.60.
实施例22-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸的制备步骤C(流程图6)：2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸甲酯的制备
将4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯胺(600mg，2.25mmol)、2-溴-5-硝基苯甲酸甲酯(489mg，1.88mmol)、碳酸铯(857mg，2.62mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(O)(51mg，0.056mmol)和(S)-(2，2′-双(二对甲苯基膦基-1，1′-联萘(98％，(S)-甲苯基-BINAP)(58mg，0.085mmol)(配位体/Pd＝1.5)在无水甲苯(16mL)中的混合物在氮气氛中于100℃加热12小时。冷却后，用乙醚稀释反应混合物，用硅藻土过滤，并用乙醚彻底漂洗。将滤液蒸干，得到褐色残余物。用快速色谱法(硅胶，5％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到所需产物540mg(1.21mmol，64％)，mp.107-108℃。
元素分析：C22H18N2Cl2O4
计算值：C，59.34；H，4.07；N，6.29.
实测值：C，59.03；H，4.04；N，5.99.2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸的制备
将2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}5-硝基苯甲酸甲酯(340mg，0.76mmol)和1N氢氧化钠水溶液(4.0mL)在乙醇(4.0mL)和THF(4.0mL)中的溶液加热回流16小时。真空下除去溶剂。将残余物用水稀释，并用浓盐酸酸化至pH1。然后将混合物用二氯甲烷提取，干燥(Na2SO4)，过滤，真空浓缩，得到所需产物329mg(0.76mmol，100％)，为黄色固体，mp.214-217℃。
元素分析：C21H16N2Cl2O4
计算值：C，58.49；H，3.74；N，6.50.
实测值：C，58.24；H，3.81；N，6.28.
实施例32-{4-〔4-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸的制备
往4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯胺(0.836g，3.14mmol)在THF(20mL)中的冷(-78℃)溶液中滴加LHDMS(6.28mL，1M THF溶液，6.28mmol)。让反应混合物在-78℃搅拌10分钟。滴加2-氟-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸甲酯(0.72g，3.14mmol)在THF(30mL)中的溶液，将所得溶液在-78℃搅拌30分钟。让反应混合物逐渐温热至室温，在氮气氛中搅拌2小时。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，并用5N盐酸酸化(pH3)。将有机层用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到褐色残余物。往该残余物在乙醇(20mL)和THF(40mL)中的溶液加入5N NaOH(50mL)，将所得混合物回流过夜。真空下除去溶剂，用浓盐酸将残余物酸化(pH3)。滤取沉淀物，在滚热的甲醇-H2O(1∶1)中研磨，真空箱中干燥16小时，得到实施例3的化合物(0.70g，1.51mmol，48％)，为橙色固体，mp.208-209℃。
元素分析：C22H18N2O5Cl2
计算值：C，57.28；H，3.93；N，6.07.
实测值：C，57.43；H，3.69；N，5.86.
实施例42-{4-〔2-(3，4-二羟基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸的制备步骤A(流程图1)：1，2-二甲氧基-4-〔2-(4-硝基苯基)乙烯基)苯的制备
按实施例1的步骤A中所述方法，由在哌啶(5mL)中的对硝基苯乙酸(25.0g，0.14mol)及3，4-二甲氧基苯甲醛(21.0g，0.14mol)制得标题化合物13.4g(0.047mol，34％)，为黄色固体，mp：133-134℃。
元素分析：C16H15NO4
计算值：C，67.36；H，5.30；N，4.91.
实测值：C，66.81；H，5.27；N，4.84.步骤B(流程图1)：4-〔2-(3，4-二甲氧基苯基)乙基〕苯胺的制备
在氢气氛中于25℃将1，2-二甲氧基-4-〔2-(4-硝基苯基)乙烯基)苯(12.1g，0.042mol)在10％Pd-C(2.0g)的存在下于二甲基甲酰胺(120mL)中还原。将反应混合物真空浓缩，得到固体。将该固体用甲醇(400mL)重结晶，得到所需产物6.8g(0.026mol，63％)，为白色结晶，mp.115-116℃。
元素分析：C16H19NO2
计算值：C，74.68；H，7.44；N，5.44.
实测值：C，74.60；H，7.39；N，5.35.步骤C(流程图6)：2-{4-〔2-(3，4-二甲氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸的制备
按实施例1的步骤C的方法B中所述操作，由在无水DMF(75mL)中的4-〔2-(3，4-二甲氧基苯基)乙基〕苯胺(9.25g，0.036mol)、2-氯苯甲酸(5.2g，0.036mol)、无水碳酸钾(15.0g，0.11mol)、铜粉(0.45g，0.007mol)和催化量的氯化铜(I)制得标题化合物。用甲醇/H2O结晶后，得到所需产物4.5g(0.012mol，33％)。mp：137-139℃。
元素分析：C23H23NO4
计算值：C，73.19；H，6.14；N，3.71.
实测值：C，73.47；H，6.03；N，3.78.步骤D：2-{4-〔2-(3，4-二羟基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸的制备
室温下，在氮气氛中往2-{4-〔2-(3，4-二甲氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸(0.28g，0.74mmol)在CH2Cl2(20mL)中的溶液中加入BBr3(3.5mL，1MCH2Cl2溶液，3.5mmol)。让反应混合物在室温搅拌2小时，然后倾入冰水(50mL)中。用乙酸乙酯提取该混合物，将有机层用水洗涤2次，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到所需产物0.24g(0.69mmol，93％)。mp.215-217℃。
元素分析：C21H19NO4
计算值：C，72.19；H，5.48；N，4.00.
实测值：C，71.80；H，5.46；N，3.99.
实施例52-{4-〔2-(4-二丁基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸的制备步骤A(流程图1)：1，1-二丁基氨基-4-〔2-(4-硝基苯基)乙烯基)苯的制备
按实施例1的步骤A中所述方法，由在哌啶(5mL)中的对硝基苯乙酸(9.92g，0.055mol)和4-二丁基氨基苯甲醛(14.32g，0.055mol)制得标题化合物4.12g(0.012mol，16％)，为红色固体。
MS：352.2.(M+)；353.2.(MH+).步骤B(流程图1)：4-〔2-(4，4-二丁基氨基苯基)乙基〕苯胺的制备
按实施例1的步骤B中所述方法，由在甲醇(100mL)中的1，1-二丁基氨基-4-〔2-(4-硝基苯基)乙烯基)苯(4.10g，11.63mmol)和Ra-Ni(2.0g)在氢气氛中于21-32℃(ΔP＝3.6psi)制得标题化合物3.49g(10.76mmol，92.6％)，为无水油状物。
MS：325.3(MH+).步骤C(流程图6)：2-{4-〔2-(4-二丁基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸的制备
按实施例1的步骤C的方法B中所述的操作，由在无水DMF(30mL)中的2-氯苯甲酸(1.46g，9.36mmol)、4-〔2-(4，4-二丁基氨基苯基)乙基〕苯胺(3.31g，10.20mmol)、无水碳酸钾(4.27g，30.88mmol)、铜粉(1.25g，19.65mmol)和氯化铜(I)制得标题化合物0.39g(0.87mmol，8.6％)。mp.115-117℃。
元素分析：C29H36N2O2
计算值：C，78.34；H，8.16；N，6.30.
实测值：C，78.15；H，8.07；N，6.10.
实施例62-{4-〔2-(3，4，5-三羟基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸的制备步骤A(流程图1)：1，2，3-三甲氧基-5-〔2-(4-硝基苯基)乙烯基)苯的制备
按实施例1的步骤A中所述方法，由对硝基苯乙酸(18.6g，0.10mol)、3，4，5-三甲氧基苯甲醛(19.6g，0.10mol)和哌啶(5mL)制得呈固体的标题化合物13.0g(0.041mol，41％)。mp：192-195℃。步骤B(流程图1)：4-〔2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙基〕苯胺的制备
按实施例1的步骤B中所述方法，由在THF(50mL)中的1，2，3-三甲氧基-5-〔2-(4-硝基苯基)乙烯基)苯(9.5g，0.03mol)和Ra-Ni(1.0g)在21-26℃(ΔP＝9.6psi)于氢气氛中制得标题化合物6.6g(0.023mol，74％)，为茶色粉末。mp.91-93℃。步骤C(流程图6)：2-{4-〔2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸甲酯的制备
按实施例1的步骤C中所述方法，由在无水甲苯(100mL)中的4-〔2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙基〕苯胺(0.75g，2.61mmol)、2-溴苯甲酸甲酯(0.47g，2.17mmol)、碳酸铯(0.99g，3.04mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(O)(0.06g，0.065mmol)和(S)-(2，2′-双(二对甲苯基膦基-1，1′-联萘(98％(S)-甲苯基-BINAP)(0.066g，0.098mmol)(配位体/Pd＝1.5)制得标题化合物0.69g(1.63mmol，76％)，为黄色油状物。
元素分析：C25H27NO5
计算值：C，71.24；H，6.46；N，3.32.
实测值：C，71.53；H，6.24；N，3.14.2-{4-〔2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸的制备
往2-{4-〔2-3，4，5-三甲氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸甲酯(0.62g，1.47mmol)在THF-乙醇(2∶1，6mL)中的溶液中加入1N氢氧化钠溶液(4mL)，将反应混合物加热回流5小时。然后将反应混合物真空浓缩，除去有机溶剂。用浓盐酸将残余物酸化(pH3)。滤取沉淀物，在滚热的甲醇-H2O(4∶1)中研磨，室温下真空干燥16小时，得到标题化合物0.59g(1.45mmol，98.5％)，为白色固体。mp.146.0-147.0℃。
元素分析：C24H25NO5
计算值：C，70.75；H，6.18；N，3.44.
实测值：C，70.54；H，6.43；N，3.15.步骤D：2-{4-〔2-(3，4，5-三羟基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸的制备
按实施例4的步骤D中所述方法，由在CH2Cl2(40mL)中的2-{4-〔2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸(0.50g，1.23mmol)和BBr3(10mL，1M CH2Cl2溶液，10.0mmol)制得标题化合物0.25g(0.68mmol，65％)，为绿色固体。mp：160.0-162.0℃。
元素分析：C21H19NO5·1.44H2O
计算值：C，64.46；H，5.64；N，3.58.
实测值：C，64.07；H，5.27；N，3.39.
实施例72-{4-〔2-〔-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸的制备步骤A′(流程图2)：3-(3，4-二氯苯基)-1-(4-硝基苯基)丙烯酮的制备
将氢氧化钠(7.3g，0.18mol)溶解在水(80mL)和95％乙醇(80mL)中，用冰水浴冷却至10℃。一次加入3，4-二氯苯甲醛(31.8g，0.18mol)。加入完毕后，将混合物温热至15℃。在该温度下加入1-(4-硝基苯基)乙酮(30.0g，0.18mol)并剧烈搅拌。搅拌5分钟后，用95％乙醇(300mL)稀释。将所得茶色混合物在室温搅拌30分钟，然后将烧瓶中的内容物在下面的冰水浴冷却下搅拌2小时。滤去淡褐色固体，水洗，空气干燥。将固体溶解在热THF(1.5L)中，用木炭处理。滤去所得混合物，将滤液用95％乙醇(500mL)稀释。将该溶液过滤，烘干(40℃)，得到呈淡褐色固体的标题化合物38.56g(0.12mol，66％)。mp.220-223℃。
元素分析：C15H9Cl2NO3
计算值：C，55.93；H，2.82；Cl，22.01；N，4.35.
实测值：C，55.79；H，2.93；Cl，22.16；N，4.32.步骤B′(流程图2)：1-(4-氨基苯基)-3-(3，4-二氯苯基)丙-1-酮的制备
在氢气氛中于20-32℃(ΔP＝33.4psi)将3-(3，4-二氯苯基)-1-(4-硝基苯基)丙烯酮(34.56g，0.11mol)在Ra-Ni(3.0g)的存在下于THF(250mL)中还原。将反应混合液真空浓缩，用甲醇(100mL)重结晶，得到所需产物23.5g(0.080mol，75％)，为淡黄色固体。mp.127-129℃。
元素分析：C15H13Cl2NO
计算值：C，61.24；H，4.45；N，4.76；Cl，24.10.
实测值：C，60.91；H，4.60；N，4.70；Cl，23.98.步骤C′(流程图2)：4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯胺的制备
将1-(4-氨基苯基)-3-(3，4-二氯苯基)丙-1-酮(20.0g，0.068mol)、NH2NH2-H2O(16mL)和KOH(85％，5.6g)在乙二醇(160mL)中的混合液在氮气氛中加热回流16小时。冷却至室温后，将反应混合物倾入冰水中，用二氯甲烷(2L)提取。将各层分离，将有机层用硫酸钠干燥，并真空浓缩，得到油状物。将该油状物通过快速色谱法(硅胶，二氯甲烷)纯化，得到油状的所需产物14.00g(0.05mol，73％)。
元素分析：C15H15Cl2N
计算值：C，64.30；H，5.40；N，4.99；Cl，25.31.
实测值：C，64.21；H，5.59；N，5.24；Cl，24.87.2，4-二氟-5-硝基苯甲酸甲酯的制备
徐徐搅拌下，将发烟硝酸90％(8.5mL，0.19mol)加入到在1L烧杯中的浓硫酸98％(125mL)中。室温下搅拌10分钟后，滴加2，4-二氟苯甲酸甲酯(21.9g，0.127mol)。滴加完毕后，将反应混合物在室温下徐徐搅拌40分钟。然后将反应混合物倾入冰水中，搅拌10分钟。用乙酸乙酯提取混合物。将各层分离，将有机层用1N氯化钠、饱和碳酸氢钠、水和盐水依次洗涤，并用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到黄色残余物。将该残余物用10％乙酸乙酯/己烷洗涤，过滤，干燥，得到浅黄色固体29.0g(0.133mol，82％)。mp.78-80℃。
元素分析：C8H5F2NO4
计算值：C，44.25；H，2.32；N，6.45.
实测值：C，44.18；H，2.39；N，6.14.2-氟-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸甲酯的制备
将钠金属(1.27g，0.055mol)和甲醇(250mL)在0℃搅拌10分钟。将该溶液加入到2-氟-5-硝基苯甲酸甲酯(10.0g，0.046mol)在甲醇(250mL)中的溶液中，并将混合物在0-5℃搅拌20分钟。然后让反应混合物温热至室温，搅拌2小时。接着，将混合物过滤，得到米色沉淀物。用氯仿(70mL)重结晶，得到标题化合物1.825g(0.008mol，17％)，为米色晶状固体。
元素分析：C9H8FNO5
计算值：C，47.17；H，3.52；N，6.11.
实测值：C，47.09；H，3.47；N，6.00.2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸甲酯的制备
将4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯胺(0.94g，3.3mmol)、2-氟-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸甲酯(0.75g，3.3mmol)和三乙胺(0.46mL)在乙腈(30mL)中的混合物加热回流120小时。将反应混合物冷却至室温，用二氯甲烷稀释，并用饱和碳酸氢钠洗涤。将有机层用硫酸钠干燥，浓缩，得到固体。将该固体用甲醇重结晶，得到所需产物0.67g(1.37mmol，42％)。
元素分析：C24H22N2Cl2O5·0.42H2O
计算值：C，58.01；H，4.63；N，5.64；
实测值：C，57.61；H，4.51；N，5.94.2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸的制备
往2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸甲酯(0.30g，0.061mol)在THF(5mL)中的溶液中加入1N氢氧化钠水溶液(2.5mL)，将混合物在室温搅拌36小时。除去溶剂，将残余物用浓盐酸酸化至pH3。滤取沉淀物，真空干燥16小时。用甲醇重结晶，得到呈橙色固体的标题化合物0.21g(0.043mol，70％)。mp.200-201℃。
元素分析：C23H20N2O5Cl2·0.2H2O
计算值：C，57.68；H，4.29；N，5.85；Cl，14.81.
实测值：C，57.71；H，4.34；N，5.58；Cl，14.56.
实施例82-{4-〔2-〔-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-4-咪唑-1-基-5-硝基苯甲酸的制备2-{4-〔2-〔-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-4-咪唑-1-基-5-硝基苯甲酸甲酯的制备
将2，4-二氟-5-硝基苯甲酸甲酯(1.63g，7.5mmol)、咪唑(0.56g，8.25mmol)和三乙胺(1.14mL，8.25mmol)在乙腈(50mL)中的混合物在室温搅拌16小时。往该深橙色溶液中加入4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯胺(2.10g，7.5mmol)和三乙胺(1.14mL，8.25mmol)，将混合物加热回流过夜。使反应混合物冷却，真空浓缩，得到残余物。将该残余物用二氯甲烷稀释，并用饱和碳酸氢钾溶液洗涤。将有机层用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到粗油。用快速色谱法(硅胶，10％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到所需产物1.0g(1.90mmol，25％)。
MS：524.1(M+).2-{4-〔2-〔-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-4-咪唑-1-基-5-硝基苯甲酸的制备
按实施例8中所述方法，由在THF(30mL)中的2-{4-〔2-〔-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-4-咪唑-1-基-5-硝基苯甲酸甲酯(1.0g，1.9mmol)、1N NaOH(2.0mL)制得标题化合物0.30g(0.6mmol，32％)，为橙色固体。
元素分析：C25H20Cl2N4O4·0.2H2O
计算值：C，58.31；H，3.99；N，10.88；Cl，13.89.
实测值：C，58.34；H，4.07；N，10.73；Cl，13.41.
实施例92-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸的制备2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸甲酯的制备
按实施例2的步骤C中所述方法，由在无水甲苯(15mL)中的4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯胺(600mg，2.14mmol)、2-溴苯甲酸甲酯(380mg，1.78mmol)、碳酸铯(812mg，2.49mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(O)(49mg，0.053mmol)和(S)-(2，2′-双(二对甲苯基膦基-1，1′-联萘(98％，(S)-甲苯基-BINAP)(54mg，0.080mmol)(配位体/Pd＝1.5)制得呈黄色油状的标题化合物0.61g(1.47mmol，69％)，为黄色油状物。
MS：414(M+)，416(MH+).
元素分析：C23H21Cl2O2N·0.4H2O
计算值：C，65.25；H，5.23；N，3.30.
实测值：C，65.76；H，5.18；N，3.10.
2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸的制备
按实施例2中所述方法，由在乙醇(4mL)和THF(4mL)中的2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基)苯氨基}苯甲酸甲酯(0.41g，0.99mmol)和1N NaOH(4.0mL)制得标题化合物0.32g(0.80mmol，81％)，为黄色固体。mp.120-126℃。
元素分析：C22H19Cl2O2N·0.75H2O
计算值：C，64.04；H，5.00；N，3.39.
实测值：C，64.17；H，4.69；N，3.18.
实施例102-{4-〔4-(3，4-二氯苯基)丁基〕苯氨基}苯甲酸的制备(反)-3-(3，4-二氯苯基)-2-丙烯醛的制备
将3，4-二氯苯甲醛(140.0g，0.8mol)和乙醛(300mL)冷却至5℃。将氢氧化钾(5.1g，0.091mol)溶解在热甲醇(40mL)中，将所得溶液加入到上述冷却的混合物中，同时，将内温维持在25-30℃。将混合物在冰水浴中搅拌40分钟，然后用乙酸酐(400mL)处理。加入完毕后，将混合物冷却至100℃并搅拌30分钟，然后冷却至30℃。往该混合物中加入12N HCl/H2O(102mL/1.2L)，将所得混合物加热回流30分钟，然后冷却至室温。将该多相混合物过滤，水洗，得到褐色固体。将所得粗产物溶解在乙酸乙酯中，水洗，用硫酸钠干燥，蒸干。用己烷/乙酸乙酯(9∶1)重结晶，得到标题化合物76.5g(0.38mol，48％)。mp：91-93℃。
元素分析：C9H6Cl2O
计算值：C，53.77；H，3.01；Cl，35.27.
实测值：C，53.75；H，3.10；Cl，35.58.(反)，(反)-1，2-二氯-4-〔4-(4-硝基苯基)-1，3-丁二烯基〕苯的制备
将在氯仿(1.5L)中的溴化4-硝基苄(200.0g，0.93mol)和三苯膦(244.0g，0.93mol)的混合物加热回流过夜。将反应混合物冷却至室温，真空浓缩，除去氯仿，然后悬浮在乙醚中，剧烈搅拌。过滤悬浮液，用乙醚洗涤所得米色固体，在80℃干燥16小时，得到溴化〔(4-硝基苯基)甲基〕三苯基正膦433.0g(0.91mol，98％)。将溴化〔(4-硝基苯基)甲基〕三苯基正膦(100.0g，0.23mol)在无水THF(500mL)中的溶液冷却至5℃。滴加正丁基锂(2.4m，96mL，0.23mol)，将温度维持在5-10℃。然后移去冷却浴，让反应混合物温热至室温。4小时后，滴加(反)-3-(3，4-二氯苯基)-2-丙醛(36.2g，0.18mol)在THF(100mL)中的溶液，将所得混合物在室温搅拌16小时。将混合物过滤，，并将滤液真空浓缩，得到残余物。用快速色谱法(硅胶，20％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到所需产物16.0g(0.05mol，28％)。mp.125-135℃。
元素分析：C16H11Cl2NO2
计算值：C，60.02；H，3.46；N，4.37；Cl，22.15.
实测值：C，59.77；H，3.47；N，4.40；Cl，22.39.4-〔4-(3，4-二氯苯基)丁基〕苯胺的制备
按实施例1的步骤B中所述方法，在20-26℃(ΔP＝19.3psi)于氢气氛中，由在THF(75mL)和甲醇(75mL)中的(反)，(反)-1，2-二氯-4-〔4-(4-硝基苯基)-1，3-丁二烯基〕苯(15.42g，0.048mol)、Ra-Ni(1g)制得呈固体的标题化合物10.97g(0.037mol，78％)。mp.50-52℃。
元素分析：C16H17NCl2
计算值：C，65.32；H，5.82；N，4.76.
实测值：C，65.43；H，5.84；N，4.61.2-{4-〔4-(3，4-二氯苯基)丁基〕苯氨基}苯甲酸的制备
按实施例1的步骤C的方法B中所述操作，由在无水DMF(5mL)中的4-〔4-(3，4-二氯苯基)丁基〕苯胺(0.50g，1.7mmol)、2-氯苯甲酸(0.24g，1.56mmol)、无水碳酸钾(0.71g，5.15mmol)、铜粉(0.21g，3.28mmol)和氯化铜(I)(0.015g，0.15mmol)制得标题化合物。mp.98-105℃。
实施例112-(4-〔4-(3，4-二氯苯基)丁基〕苯氨基)-5-硝基苯甲酸的制备
将2-氟-5-硝基苯甲酸(1.85g，0.01mol)、4-〔4-(3，4-二氯苯基)丁基〕苯胺(2.94g，0.01mol)和三乙胺(2.80mL)在乙腈(110mL)中的混合物加热回流48小时。将反应混合物冷却、真空浓缩，除去溶剂。并将所得残余物溶解在二氯甲烷中，用稀盐酸洗涤。将有机层用硫酸钠干燥，真空浓缩，得到粗固体。用快速色谱法(硅胶，二氯甲烷)纯化，得到所需产物1.40g(0.003mol，30％)。
元素分析：C23H19N2O4Cl2
计算值：C，60.27；H，4.18；N，6.11；Cl，14.47.
实测值：C，60.16；H，4.41；N，6.09；Cl，15.69.
实施例122-{4-〔4-(3，4-二氯苯基)丁基〕苯氨基}3，5-二硝基苯甲酸的制备
往4-〔4-(3，4-二氯苯基)丁基〕苯胺(1.47g，5.0mmol)和DBU(0.75mL，7.5mmol)在乙腈(25mL)中的冷(0℃)溶液中滴加2-氟-2，5-二硝基苯甲酸(1.15g，5.0mmol)在乙腈(15mL)中的溶液。在0℃搅拌30分钟后，用稀盐酸将反应混合物中和，用乙酸乙酯提取，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到粗残余物。用乙醇重结晶，得到标题化合物2.06g(4.1mmol，82％)，为亮橙色固体。
元素分析：C23H19Cl2N3O6
计算值：C，54.77；H，3.80；N，8.33；Cl，14.06.
实测值：C，54.68；H，4.00；N，8.12；Cl，13.81.
实施例132-{4-〔5-(3，4-二氯苯基)戊基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸的制备溴化〔(3，4-二氯苯基)甲基〕三苯基正膦的制备
将4-溴甲基-1，2-二氯苯(2.40g，0.01mol)和三苯膦(5.24g，0.02mol)在甲苯(30mL)中的混合物在室温搅拌16小时。将固体过滤，用甲苯漂洗，并在室温烘干，得到所需产物3.95g(0.0078mol，78％)，为白色粉末。
1H-NMR〔二甲亚砜(DMSO)：ppm〕：7.89-7.61(m，15H)，7.50(d，J＝8.3Hz，1H)，7.04(t，J＝2.3Hz，1H)，6.97(m，1H)，5.20(d，J＝15.9Hz，2H).4-(4-硝基苯基)丁醛的制备
往草酰氯(在二氯甲烷中的2.0M溶液，14.1mL，28.2mmol)在二氯甲烷(20mL)中的冷(-70℃)溶液中滴加二甲亚砜(4.40g，56.32mmol)。然后将所得反应混合物在氮气氛中于-70℃搅拌30分钟。滴加4-(4-硝基苯基)丁-1-醇(5.00g，25.6mmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液，将反应混合物在-70℃搅拌1小时。加入三乙胺(16mL，115mmol)，然后让反应混合物逐渐温热至室温，并搅拌30分钟。接着用水将混合物的反应中止，用乙酸乙酯提取。将有机层用0.1N盐酸溶液、水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到淡褐色油状物。将该油状物用快速色谱法(硅胶，50％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到所需产物3.20g(16.56mmol，65％)。
1H-NMR(DMSO：ppm)：9.75(s，1H)，8.12(d，J＝8.3Hz，2H)，7.30(d，J＝8.3Hz，2H)，2.72(t，J＝7.7Hz，2H)，2.47(t，J＝7.1Hz，2H)，1.94(m，2H).1，2-二氯-4-〔5-(4-硝基苯基)-1-戊烯基〕苯的制备
将溴化〔(3，4-二氯苯基)甲基〕三苯基正膦(3.95g，7.9mmol)在无水THF(20mL)中的溶液冷却至0℃。滴加LHDMS(1.0M/THF，9mL，9.0mol)，将温度维持在0℃。搅拌30分钟后，滴加4-(4-硝基苯基)丁醛(1.45g，7.5mmol)在THF(5mL)中的溶液，让混合物在2小时内温热至室温。然后用水将混合物的反应中止，并用乙酸乙酯提取。将有机层用0.1N盐酸溶液、水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到淡褐色油状物。将该油状物用快速色谱法(硅胶，10％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到所需产物2.5g(7.4mmol，99％)。
MS：335(M+)，337(MH+).4-〔5-(3，4-二氯苯基)戊基〕苯胺的制备
按实施例1，步骤B中所述方法，在25-40℃(ΔP＝9.9psi)由在THF(50mL)中的1，2-二氯-4-〔5-(4-硝基苯基)-1-戊烯基〕苯(2.5g，7.4mmol)和Ra-Ni(1g)制得标题化合物1.06g(3.4mmol，46％)。
1H-NMR(DMSO：ppm)：7.45(d，J＝8.3Hz，1H)，7.41(d，J＝2.2Hz，1H)，7.12(m，1H)，6.74(d，J＝8.3Hz，2H)，6.40(d，J＝8.3Hz，2H)，4.73(s，2H)，2.50(t，J＝7.7Hz，2H)，2.31(t，J＝7.6Hz，2H)，1.6-1.5(m，4H)，1.5-1.4(m，2H).2-{4-〔5-(3，4-二氯苯基)戊基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸的制备
往4-〔5-(3，4-二氯苯基)戊基〕苯胺(0.231g，0.75mmol)在THF(2mL)中的冷(-78℃)溶液中滴加LHDMS(2.25mL，1M己烷溶液，2.25mmol)。将反应混合物在-78℃搅拌10分钟。滴加2-氟-5-硝基苯甲酸(0.139g，0.75mmol)在THF(2mL)中的溶液，并将该溶液在-78℃搅拌30分钟。氮气氛中逐渐温热至室温并搅拌2小时。用乙酸乙酯稀释反应混合物，并用1N HCl酸化(pH3)。将有机层用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到褐色残余物。将残余物用快速色谱法(硅胶，2％甲醇/二氯甲烷)纯化，然后用甲醇重结晶，得到所需产物265mg(0.56mmol，75％)。mp.147-148℃。
元素分析：C24H22Cl2N2O4·0.37H2O
计算值：C，60.05；H，4.77；N，5.84.
实测值：C，59.67；H，4.64；N，5.51.
实施例142-{4-〔5-(3，4-二氯苯基)戊基〕苯氨基}-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸的制备2-{4-〔5-(3，4-二氯苯基)戊基〕苯氨基}-4-甲氧基5-硝基苯甲酸甲酯的制备
按实施例13中所述方法，由在THF(5mL)中的4-〔5-(3，4-二氯苯基)戊基〕苯胺(231mg，0.75mmol)、LHDMS(6.28mL，1M THF溶液，6.28mmol)和2-氟-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸甲酯(172g，0.75mmol)制得标题化合物。将标题化合物用快速色谱法(硅胶，10％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到所需产物145mg(0.28mmol，37％)。
MS：515.2(M+)，517.2(MH+).2-{4-〔5-(3，4-二氯苯基)戊基〕苯氨基}-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸的制备
按实施例2中所述方法，由在THF(1.2mL)中的2-{4-〔5-(3，4-二氯苯基)戊基〕苯氨基}-4-甲氧基-5-硝基苯甲酸甲酯(145mg，0.28mmol)和1N氢氧化钠水溶液(0.56mL)制得标题化合物。将标题化合物用快速色谱法(硅胶，10％甲醇/二氯甲烷)纯化，然后用甲醇重结晶，得到所需产物58mg(0.12mmol，41％)。mp.192-193℃。
元素分析：C25H24Cl2N2O5
计算值：C，59.65；H，4.81；N，5.56.
实测值：C，59.29；H，4.58；N，5.36.
实施例152-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸的制备2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸甲酯的制备
按实施例2的步骤C中所述方法，由在无水甲苯(15mL)中的4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯胺(420mg，1.25mmol)、2-溴苯甲酸甲酯(310mg，1.25mmol)、碳酸铯(569mg，1.75mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(O)(34mg，0.037mmol)和(S)-(2，2′-双(二对甲苯基膦基-1，1′-联萘(98％，(S)-甲苯基-BINAP)(38mg，0.056mmol)(配位体/Pd＝1.5)制得标题化合物0.51g(1.11mmol，74％)，为橙色固体。mp.117-118℃。
MS：457.1(M+)；459.1(MH+)2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸的制备
按实施例2中所述的方法，由在乙醇(2mL)和THF(4mL)中的2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸甲酯(0.50g，1.09mmol)、2N NaOH(5.0mL)制得标题化合物0.49g(1.10mmol，100％)，为橙色固体。mp.153-155℃。
MS：443.2(M+)，445.2(MH+)
实施例162-{4-〔2-(3，4-二甲基苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸的制备2-{4-〔2-(3，4-二甲基苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸甲酯的制备
按实施例2的步骤C中所述的方法，由在无水甲苯(32mL)中的4-〔2-(3，4-二甲基苯基)乙基〕苯胺(1.0g，4.43mmol)、2-溴-5-硝基苯甲酸甲酯(0.96g，3.69mmol)、碳酸铯(1.68g，5.17mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(O)(101mg，0.11mmol)和(S)-(2，2′-双(二对甲苯基膦基-1，1′-联萘(98％，(S)-甲苯基-BINAP)(113mg，0.17mmol)(配位体/Pd＝1.5)制得标题化合物1.31g(3.24mmol，73％)，为黄色固体。mp.115-117℃。
MS：405(M+)
元素分析：C24H24O4N2·0.25H2O
计算值：C，71.27；H，5.98；N，6.93.
实测值：C，70.48；H，6.03；N，6.85.2-{4-〔2-(3，4-二甲基苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸的制备
按实施例2中所述方法，由在乙醇(50mL)和THF(50mL)中的2-{4-〔2-(3，4-二甲基苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸甲酯(1.12g，2.76mmol)和1N NaOH(50mL)制得标题化合物1.03g(2.63mmol，81％)，为黄色固体。mp.214-216℃。
元素分析：C23H22O4N2·0.25H2O
计算值：C，69.99；H，5.74；N，7.18.
实测值：C，69.90；H，5.82；N，6.81.
实施例172-〔〔4-〔2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)乙基〕苯基〕氨基苯甲酸的制备步骤A(流程图1)：反-1-氯-2-三氟甲基-4-〔2-(4-硝基苯基)乙烯基)苯的制备
将对硝基苯乙酸(51.85g，0.29mol)和4-氯-3-三氟甲基苯甲醛(47.85g，0.23mol)在哌啶(19.5g，0.23mol)中的混合物在氮气氛中于150-160℃加热1小时。将反应混合物冷却至80-100℃，加入回流中的异丙醇(150mL)。将混合物继续冷却至室温，然后冷却下放置5小时。滤取晶状沉淀物，用冷异丙醇漂洗，在真空箱中于室温干燥过夜，得到反-1-氯-2-三氟甲基-4-〔2-(4-硝基苯基)乙烯基)苯22.53g(68.75mmol，30％)，为橙色固体。mp.173-174℃。
MS：327.0(M+)步骤B(流程图1)：4-〔2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)乙基〕苯胺的制备
按实施例1的步骤B中所述的方法，于18-29℃(ΔP＝20.5psi)在氢气氛中由在THF(0.5L)中的反-1-氯-2-三氟甲基-4-〔2-(4-硝基苯基)乙烯基)苯(22.53g，0.069mol)和Ra-Ni(22g)制得呈白色固体的标题化合物20.0g(66.73mmol，97％)。mp.62-64℃。
MS：298.1(M+)2-〔〔4-〔2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)乙基〕苯基〕氨基苯甲酸的制备
往4-〔2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)乙基〕苯胺(4.33g，14.45mmol)在THF(50mL)中的冷(-78℃)溶液中滴加LHMDS(43.35mL，43.35mmol)(1M/THF)。将反应混合物在-78℃搅拌10分钟。滴加2-氟苯甲酸(2.02g，14.45mmol)在THF(50mL)中的溶液。将混合物在-78℃搅拌2小时，然后温热至室温，再搅拌3小时。将反应混合物真空浓缩(40℃)，除去有机溶剂。将残余物用3N盐酸溶液酸化至pH3。滤取沉淀物，用10％ HCl(40mL)漂洗，真空干燥过夜，得到呈灰白色固体的所需产物4.3g(10.24mmol，70％)。mp.150-152℃。
元素分析：C22H17O2NClF3·0.59H2O
计算值：C，61.39；H，4.26；N，3.25.
实测值：C，61.01；H，4.34；N，3.30.
实施例182-〔4-(3，4-二氯苯基)苯氨基〕苯甲酸的制备邻溴苯甲酸钾盐的制备
往邻溴苯甲酸(201.03g，1.0mol)在甲醇(500mL)中的溶液加入碳酸钾(69g，1.0mol)。将混合物浓缩，得到所需产物(239.1g，1.0mol，100％)。2-〔(4-碘苯基)氨基〕苯甲酸的制备
将邻溴苯甲酸钾盐(47.8g，0.2mol)、4-碘苯胺(43.8g，0.2mol)、碳酸钾(13.8g，0.1mol)和乙酸铜(2.87g，6％)在二甘醇二甲醚(100mL)中的混合物加热回流30分钟。将反应混合物用水(1.0L)稀释，过滤。用稀乙酸将滤液酸化。滤取生成的沉淀物，用水洗涤，并在50℃真空干燥16小时。用乙酸乙酯重结晶，得到呈固体的所需产物(29.7g，0.087mol，44％)。mp.205-206℃。
元素分析：C13H10NO2I
计算值：C，45.05；H，2.97；N，4.13.
实测值：C，45.05；H，2.97；N，3.92.2-〔4-(3，4-二氯苯基)苯氨基〕苯甲酸的制备
将3，4-二氯苯基硼酸(880mg，2.3mmol)、2-〔(4-碘苯基)氨基〕苯甲酸(339mg，1mmol)、PdCl2·dppf·二氯甲烷〔与二氯甲烷配位的氯化1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁合钯(II)(1∶1)〕(67mg，0.082mmol)、碳酸钾(829mg，6mmol)和H2O(2mL)在二噁烷(15mL)中的混合物加热回流1小时。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，过滤。将滤液用1N盐酸处理，用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，真空浓缩，得到黄色固体。将该黄色固体用快速色谱法(硅胶，10％甲醇/二氯甲烷)纯化，得到所需产物272mg(0.76mmol，76％)。mp.＞220℃。
元素分析：C19H13O2NCl2
计算值：C，63.23；H，3.71；N，3.88.
实测值：C，62.95；H，3.73；N，3.63.
用上述一般性的方法，制得本发明的下述化合物：
实施例19
2-{4-〔3-(4-二乙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
MS：403(M+).
元素分析：C26H30N2O2·0.40mol H2O
计算值：C，69.31；H，6.87；N，6.12.
实测值：C，69.29；H，7.04；N，6.35.
实施例20
2-{4-〔3-(4-硝基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.150-153℃
MS：376(M+).
实施例21
2-{4-〔3-(3-硝基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.164-167℃
MS：376(M+).
元素分析：C22H20N2O4·2.20mol H2O
计算值：C，63.51；H，5.91；N，6.73.
实测值：C，63.56；H，5.45；N，6.46.
实施例22
2-{4-〔3-(4-氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.110-112℃
MS：347(M+1+).
实施例23
2-{4-〔3-(3-氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.109℃
MS：333(M+1+).
实施例24
2-{4-〔2-(4-氨基苯基)苯氨基}苯甲酸
mp.198-201℃
MS：333(M+1+).
元素分析：C21H20N2O2·0.1mol H2O
计算值：C，75.47；H，6.09；N，8.38.
实测值：C，75.32；H，6.12；N，8.27.
实施例25
2-{4-〔2-(4-二丙基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一盐酸盐
mp.176-177C
MS：417(M+1+).
元素分析：C27H32N2O2
计算值：C，71.59；H，7.34；N，6.18；Cl，7.83.
实测值：C，71.31；H，7.24；N，6.19；Cl，7.74.
实施例26
2-{4-〔2-(4-二乙基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一盐酸盐一水和物
MS：389(M+1+).
元素分析：C25H28N2O2·HCl·H2O
计算值：C，67.78；H，7.05；N，6.32；Cl，8.00.
实测值：C，67.83；H，7.01；N，6.30；Cl，7.75.
实施例27
2-{4-〔3-(3-二丙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
MS：431(M+1+).
元素分析：C28H34N2O2·0.2H2O
计算值：C，77.46；H，7.99；N，6.45.
实测值：C，77.43；H，7.86；N，6.40.
实施例28
2-{4-〔3-(3-二甲基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.115-117℃
MS：374(M+)，375(M+1+).
元素分析：C24H26N2O2·0.1H2O
计算值：C，76.61；H，7.02；N，7.44.
实测值：C，76.57；H，7.21；N，7.47.
实施例29
2-{4-〔3-(4-乙氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.133℃
MS：375(M+1+).
元素分析：C24H26N2O2·0.1H2O
计算值：C，76.61；H，7.02；N，7.44.
实测值：C，76.62；H，7.06；N，7.36.
实施例30
2-(N-{4-〔3-(4-二乙基氨基苯基)丙基〕苯基}-N-乙基氨基)苯甲酸
MS：431(M+1+).
元素分析：C28H34N2O2
计算值：C，78.10；H，7.96；N，6.51.
实测值：C，78.02；H，8.17；N，6.50.
实施例31
2-{4-〔2-(3-二苄基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.95.5-97.5℃。
元素分析：C35H32N2O2
计算值：C，82.00；H，6.29；N，5.46.
实测值：C，81.81；H，6.58；N，5.44.
实施例32
2-{4-〔3-(3-二乙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
MS：403(M+1+).
元素分析：C26H30N2O2·0.1H2O
计算值：C，77.23；H，7.53；N，6.93.
实测值：C，77.14；H，7.82；N，6.88.
实施例33
2-{4-〔2-(3-氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.182-184℃。
MS：333(M+1+).
元素分析：C21H20N2O2·0.25H2O
计算值：C，74.87；H，6.13；N，8.43.
实测值：C，74.86；H，6.16；N，8.32.
实施例34
2-{4-〔3-(4-二甲基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
MS：375(M+1+).
元素分析：C24H26N2O2·0.1H2O
计算值：C，76.61；H，7.02；N，7.44.
实测值：C，76.52；H，7.22；N，7.49.
实施例35
2-{4-〔2-(4-乙酰基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.224℃。
MS：375(M+1+).
实施例36
2-{4-〔2-(3-乙酰基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.213-215℃。
MS：375(M+1+).
实施例37
2-{4-〔2-(3-二丙基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一盐酸盐
mp.189-193℃。
MS：417(M+1+).
元素分析：C27H32N2O2·HCl
计算值：C，71.58；H，7.34；N，6.18；Cl，7.83.
实测值：C，71.48；H，7.35；N，6.10；Cl，7.66.
实施例38
2-{4-〔2-(3-二丁基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一盐酸盐
mp.175-180℃。
MS：445(M+).
元素分析：C29H36N2O2·HCl
计算值：C，72.40；H，7.75；N，5.82；Cl，7.37.
实测值：C，72.61；H，7.95；N，5.78；Cl，7.23.
实施例39
2-{4-〔3-(4-乙酰基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.176-178℃。
MS：389(M+1+).
实施例40
2-{4-〔3-(3-乙酰基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.140-145℃。
MS：389(M+1+).
实施例41
2-{4-〔2-(3-二乙基氨基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一盐酸盐
mp.166-171℃。
MS：389(M+1+).
元素分析：C25H28N2O2·HCl
计算值：C，70.66；H，6.88；N，6.59；Cl，8.34.
实测值：C，70.48；H，6.89；N，6.57；Cl，18.39.
实施例42
2-{4-〔2-(3-哌啶-1-基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一盐酸盐
mp.187-193℃。
MS：401(M+1+).
元素分析：C26H28N2O2·HCl
计算值：C，71.46；H，6.69；N，6.41；Cl，8.11.
实测值：C，71.28；H，6.73；N，6.35；Cl，8.30.
实施例43
2-{4-〔3-(4-二丙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
MS：431(M+1+).
元素分析：C29H34N2O2
计算值：C，78.10；H，7.96；N，6.51.
实测值：C，77.91；H，8.03；N，6.43.
实施例44
2-{4-〔3-(4-二丁基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
MS：459(M+1+).
元素分析：C30H38N2O2
计算值：C，78.56；H，8.35；N，6.11.
实测值：C，78.40；H，8.50；N，6.19.
实施例45
2-{4-〔3-(3-二丁基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
MS：459(M+1+).
元素分析：C30H38N2O2
计算值：C，78.56；H，8.35；N，6.11.
实测值：C，78.40；H，8.43；N，6.11.
实施例46
2-(4-{3-〔4-(1H-吡咯-1-基)苯基〕丙基}苯氨基)苯甲酸
mp.131-136℃。
MS：397(M+1+).
元素分析：C26H24N2O2·0.2H2O
计算值：C，78.05；H，6.15；N，7.00.
实测值：C，77.95；H，6.17；N，7.08.
实施例47
2-{4-〔3-(4-哌啶-1-基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
MS：415(M+1+).
元素分析：C27H30N2O2·0.2H2O
计算值：C，77.55；H，7.33；N，6.70.
实测值：C，77.37；H，7.35；N，6.63.
实施例48
2-{4-〔3-(4-二乙基氨基甲酰基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.57-62℃。
MS：431(M+1+).
元素分析：C27H30N2O3·0.3H2O
计算值：C，74.39；H，7.07；N，6.43.
实测值：C，74.23；H，6.97；N，6.27.
实施例49
2-{4-〔3-(4-羧基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.236-239℃。
MS：375(M+).
实施例50
2-{4-〔3-(4-二乙基氨基甲基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.137℃。
MS：417(M+1+).
实施例51
2-{4-〔3-(4-丙氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
MS：389(M+1+).
元素分析：C25H28N2O2·0.2H2O
计算值：C，76.58；H，7.30；N，7.14.
实测值：C，76.61；H，7.29；N，7.03.
实施例52
2-{4-〔3-(3-丙氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
MS：389(M+1+).
元素分析：C25H28N2O2·0.1H2O
计算值：C，76.93；H，7.28；N，7.18.
实测值：C，76.85；H，7.44；N，7.06.
实施例53
2-{4-〔3-(4-吡咯烷-1-基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.171-177℃。
MS：401(M+1+).
元素分析：C26H28N2O2·0.2H2O
计算值：C，77.27；H，7.08；N，6.93.
实测值：C，77.09；H，6.97；N，6.96.
实施例54
2-{4-〔3-(3-哌啶-1-基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.59-61℃。
MS：415(M+1+).
元素分析：C27H30N2O2·0.3H2O
计算值：C，77.22；H，7.34；N，6.67.
实测值：C，77.18；H，7.25；N，6.49.
实施例55
{5-〔(1-丁基-1，2，3，4-四氢-6-喹啉基)亚甲基〕-4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基}乙酸
mp.222-224℃。
MS：391(M+1+).
实施例56
{5-〔(1-丁基-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)亚甲基〕-4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基}乙酸
mp.＞250℃。
MS：377(M+1+).
元素分析：C18H20N2O3S2·0.4H2O
计算值：C，56.34；H，5.46；N，7.30；S，16.71.
实测值：C，56.27；H，5.18；N，7.31；S，16.74.
实施例57
3-{5-〔(1-丁基-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基)亚甲基〕-4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基}丙酸
mp.214-215℃。
MS：405(M+1+).
实施例58
4-{5-〔(1-丁基-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基)亚甲基〕-4-氧代-2-硫代噻唑烷-3-基}丁酸
mp.152-154℃。
MS：417(M-1+)，418(M+)，419(M+1+).
元素分析：C21H26N2O3S2·0.2H2O
计算值：C，59.74；H，6.30；N，6.64；S，15.19.
实测值：C，59.59；H，6.16；N，6.52；S，15.38.
实施例59
2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-5-甲基苯甲酸
mp.98-99℃。
MS：414(M+).
实施例60
N-(2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酰基)甲磺酰胺由实施例9的产物与甲磺酰胺反应而制得。
mp.53-61℃
元素分析：C23H22Cl2N2O3S·0.13H2O
计算值：C，57.58；H，4.68；N，5.84.
实测值：C，57.20；H，4.66；N，5.51.
实施例61
2-{4-〔2-(3，4-二甲基苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸
mp.214-216℃
元素分析：C23H22N2O4·0.25H2O
计算值：C，69.99；H，5.74；N，7.18.
实测值：C，69.90；H，5.82；N，6.81.
实施例62
2-〔4-(2-联苯-4-基乙基)苯氨基〕-5-硝基苯甲酸
mp.239-244℃
MS：439(MH+).
实施例63
2-{4-〔2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸
mp.207-209℃
元素分析：C22H16ClF3N2O4
计算值：C，56.85；H，3.47；N，6.03.
实测值：C，56.75；H，3.71；N，5.83.
实施例64
5-氨基-2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸通过实施例2的产物与氢气在阮内镍的存在下反应而制得。
mp.137-142℃
元素分析：C21H18Cl2N2O2·0.96mol THF
计算值：C，63.94；H，4.72；N，6.00.
实测值：C，64.33；H，4.91；N，6.35.
实施例65
5-硝基-2-(4-苯乙基苯氨基)苯甲酸
mp.198-202℃
元素分析：C21H18N2O4·0.11H2O
计算值：C，69.22；H，5.04；N，7.69.
实测值：C，69.59；H，5.27；N，7.22.
实施例66
2-{4-〔2-(4-氟-3-三氟甲基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.148-150℃
元素分析：C22H17F4NO2
计算值：C，65.51；H，4.25；N，3.47.
实测值：C，65.51；H，4.13；N，3.46.
实施例67
2-{4-〔2-(3，4-二氟苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸
mp.203-208℃
元素分析：C21H16F2N2O4
计算值：C，63.32；H，4.05；N，7.03.
实测值：C，62.94；H，4.37；N，6.87.
实施例68
{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯基}-〔2-(1H-四唑-5-基)苯基〕胺按实施例1中所述方法，使用由市售的2-氟苄腈和叠氮化钠在标准反应条件下合成的四唑氟中间体而制得。mp.129收缩，152-157℃。
元素分析：C21H17Cl2N5·0.15乙酸乙酯·0.15己烷
计算值：C，61.80；H，4.64；N，16.12.
实测值：C，61.61；H，4.28；N，15.83.
实施例69
2-{4-〔2-(4-氟-3-三氟甲基苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸
mp.190-193℃
元素分析：C22H16F4N2O4
计算值：C，58.93；H，3.60；N，6.25.
实测值：C，58.69；H，3.42；N，6.57.
实施例70
2-(4-苯乙基苯氨基)苯甲酸
mp.173-182℃
元素分析：C21H19NO2
计算值：C，79.47；H，6.03；N，4.41.
实测值：C，79.42；H，5.97；N，4.47.
实测值：C，79.59；H，6.03；N，4.50.
实施例71
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-氟苯甲酸
mp.180-182℃
元素分析：C21H16Cl2FNO2·0.06H2O
计算值：C，62.23；H，4.01；N，3.46.
实测值：C，61.83；H，4.04；N，3.29.
实施例72
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}烟酸
mp.168-171℃
元素分析：C20H16Cl2N2O2
计算值：C，62.03；H，4.16；N，7.23.
*实测值：C，62.11；H，4.17；N，7.07.
实施例73
2-{4-〔2-(3-氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸
mp.192.5-194.5℃
元素分析：C21H17ClN2O4
计算值：C，63.56；H，4.32；N，7.06.
实测值：C，63.83；H，4.62；N，6.79.
实施例74
2-{4-〔2-(4-氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸
mp.210-212℃
元素分析：C21H17ClN2O4·0.26H2O
计算值：C，62.82；H，4.40；N，6.98.
实测值：C，62.51；H，4.34；N，6.58.
实施例75
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-甲基苯甲酸
mp.153-160℃
元素分析：C22H19Cl2NO2·0.61H2O
计算值：C，64.25；H，4.96；N，3.41.
实测值：C，63.87；H，4.64；N，3.55.
实施例76
2-{4-〔2-(2-氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸
mp.236-238℃。
实施例77
2-{4-〔2-(2，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸
mp.200.5-202.5℃
元素分析：C21H16Cl2N2O4
计算值：C，58.49；H，3.74；N，6.50.
实测值：C，58.33；H，3.67；N，6.29.
实施例78
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-6-三氟甲基苯甲酸
mp.130-132℃
元素分析：C22H16Cl2F3NO2
计算值：C，58.17；H，3.55；N，3.08.
实测值：C，58.25；H，3.65；N，3.05.
实施例79
2-{4-〔2-(4-二丁基氨基苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸
mp.＞260℃
实施例80
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-二甲基氨基苯甲酸
mp.75-80℃
实施例81
2-{4-〔2-(3，5-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.191-194℃
元素分析：C2lH17Cl2NO2
计算值：C，65.30；H，4.44；N，3.63.
实测值：C，65.38；H，4.29；N，3.52.
实施例82
2-(4-{2-〔(4aS，8aR)-4-(八氢异喹啉-2-基)苯基〕乙基}苯氨基)苯甲酸按实施例1，用十氢异喹啉醛而制得，而十氢异喹啉醛由反-十氢异喹啉和对氟苯甲醛在标准反应条件下得到。mp.203-206℃。
元素分析：C30H34N2O2·0.12H2O
计算值：C，78.89；H，7.56；N，6.13.
实测值：C，78.49；H，7.58；N，5.90.
下列实施例的化合物通过前述方法而制得，或通过使用标准的组合合成方法，将卤代苯甲酸酯与取代的苯胺反应，形成相应的二芳基胺，然后皂化成式I的苯甲酸而得到。下面的反应以0.15毫摩尔等级进行。将各卤代苯甲酸酯反应物(0.18M)在甲苯中的溶液置于2英钱反应瓶中。将各苯胺反应物溶解在无水甲苯中，形成0.15M溶液。用Distriman吸液管将1mL(0.15mmol，1当量)的各卤代苯甲酸酯溶液加入到合适的加入了1mL(0.18mmol，1.2当量)的苯胺反应物的瓶中。将0.025M的Pd2(dba)3〔二钯-三(二亚苄基丙酮)〕和0.075M的BINAP〔2，2′-双(二苯基膦基)-1，1′-联萘〕溶解在甲苯中，制得催化剂溶液，将0.25mL该催化剂溶液加入到各反应瓶中。将碱〔通常是碳酸铯(68mg，0.21mmol，1.40当量)〕加入到各反应瓶中，给瓶加盖，将其置于摇箱中，在100℃加热48小时。然后将反应混合物冷却，蒸去反应溶剂。将固体残余物悬浮在400μL乙酸乙酯中，滤去所有催化剂。将滤液浓缩蒸干，得到苯甲酸部分被酯化(例如，苄酯或甲酯)的式I化合物。将所得酯溶解在500μLTHF/乙醇(1∶1，v/v)中，加入300μL的5M氢氧化钠。将所得溶液在60℃振荡5小时，然后冷却，浓缩蒸干，得到所需式I化合物。用此方法得到的典型化合物如下。这些化合物的结构式一般通过质谱分析加以确定。
实施例83
2-(3′，5′-二氯-3-甲基联苯-4-基氨基)苯甲酸
MS：371；MW：372.2495.
实施例84
2-(3′，5′-二溴-3-甲基联苯-4-基氨基)苯甲酸
MS：459；MW：461.1515.
实施例85
2-(4-1，3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基-2-甲基苯氨基)苯甲酸
MS：347；MW：347.3683.
实施例86
2-(2，2′，4′-三氯联苯-4-基氨基)苯甲酸
MS：391；MW：392.6678.
实施例87
2-(2-氯-3′，4′-二氟联苯-4-基氨基)苯甲酸
MS：359；MW：359.7578.
实施例88
2-(3′-溴-2-氯联苯-4-基氨基)苯甲酸
MS：401；MW：402.6737.
实施例89
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸
实施例90
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-3-硝基苯甲酸
实施例91
3-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
实施例92
5-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}间苯二甲酸
实施例93
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
实施例94
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-4，5-二甲氧基苯甲酸
实施例95
2-{4-〔2-(3-氯-4-甲基苯基)乙基〕苯氨基}-3-硝基苯甲酸
实施例96
3-{4-〔2-(3-氯-4-甲基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
实施例97
5-{4-〔2-(3-氯-4-甲基苯基)乙基〕苯氨基}间苯二甲酸
实施例98
2-{4-〔2-(3-氯-4-甲基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
实施例99
4-(4-{2-〔(4aS，8aR)-4-(八氢异喹啉-2-基)苯基〕乙基}苯氨基)苯甲酸
实施例100
2-{4-〔3-(4-二乙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}-5-甲氧基苯甲酸
实施例101
2-{4-〔2-(3-甲氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
实施例102
2-{4-〔2-(3-溴苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
实施例103
2-{4-〔2-(3-氟苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
实施例104
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-甲氧基苯甲酸
实施例105
4-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}烟酸
实施例106
2-〔2-(4-氟-3-三氟甲基苯基)-2，3-二氢-IH-异吲哚-5-基氨基〕苯甲酸
实施例107
2-{4-〔2-(3-氟-4-甲基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
实施例108
2-{4-〔3-(4-二乙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}-5-硝基苯甲酸
实施例109
4-{4-〔3-(4-二乙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
实施例110
4-{4-〔3-(4-二乙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}-3-甲氧基-6-硝基苯甲酸
实施例111
4-{4-〔3-(4-二乙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}-3-甲氧基苯甲酸
实施例112
2-{4-〔2-(3-氯-4-甲基苯基)乙基〕苯氨基}-5-甲氧基苯甲酸
实施例113
{4-〔2-(3-氯-4-甲基苯基)乙基〕苯基}-(2-甲氧基-5-硝基苯基)胺
实施例114
2-{4-〔3-(4-二乙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}-3-硝基苯甲酸
实施例115
3-{4-〔3-(4-二乙基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
实施例116
2-{4-〔2-(3，4-二甲氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.159-161℃
实施例117
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一钠
mp.107-108℃
实施例118
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸一钾
mp.＞200℃
实施例119
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸钙盐(1∶1)
mp.＞220℃
实施例120
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸2-羟基-1，1-二羟甲基乙铵
mp.185-187℃
实施例121
2-{4-〔4-(3，4-二氯苯基)丁基〕苯氨基}-5-甲氧基苯甲酸
mp.155-158℃
实施例122
2-{4-〔2-(3，4-二氟苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.184-185℃
实施例123
2-{3-〔2-(4-氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.155-157℃
实施例124
2-{3-〔2-(3，4-二甲基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.182-184℃
实施例125
2-{4-〔2-(2，4-二甲氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.180-181℃
实施例126
2-{4-〔2-(2-氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.140-143℃
实施例127
2-{4-〔2-(2-羟基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.218-219℃
实施例128
2-{4-〔2-(3-氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.152-154℃
实施例129
2-〔4-(2-联苯-4-基乙基)苯氨基〕苯甲酸
mp.200-202℃
实施例130
2-{4-〔2-(2，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.181-183℃
实施例131
3-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.137-138℃
实施例132
4-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基)苯甲酸
mp.214-215℃
实施例133
2-{4-〔2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.146-147℃
实施例134
2-{4-〔2-(4-苯氧基苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
mp.153-154℃
实施例135
2-{4-〔5-(3，4-二氯苯基)戊基〕苯氨基}苯甲酸
mp.106-108℃
实施例136
2-{4-〔2-(4-{2-羟基羰基苯基氨基}苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
MS：451(M□1).
实施例137
2-(3′，5′-二氯联苯-4-基氨基)苯甲酸
mp.＞220℃
实施例138
4-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-2-甲氧基-5-硝基苯甲酸
mp.74-78℃
实施例139
2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}-5-氟苯甲酸
mp.122-123℃
实施例140
5-氨基-2-{4-〔5-(3，4-二氯苯基)戊基〕苯氨基}苯甲酸
mp.182-184℃
实施例141
N-(2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酰基)-C，C，C-三氟甲磺酰胺
MS：531(M-).
实施例142
N-(2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酰基)苯磺酰胺
MS：539.
实施例143
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-三氟甲基苯甲酸
mp.190-192℃； MS：453(M□1).
实施例144
4-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}间苯二甲酸
mp.264-266℃
实施例145
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-4-三氟甲基苯甲酸
mp.134-136℃；MS：454(M+).
实施例146
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-3-三氟甲基苯甲酸
MS：454(M+).
实施例147
2-({4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯基}甲氨基}-5-二甲基氨基苯甲酸
mp.128-131℃
实施例148
2-({4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯基}甲氨基)苯甲酸
MS：400(M+).
实施例149
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-二丙基氨基苯甲酸
MS：485(M+).
实施例150
5-二丁基氨基-2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
MS：513(M+).
实施例151
2-{4-〔2-(3，4-二氯苯基)乙基〕苯氨基}-5-二乙基氨基苯甲酸
mp.106-110℃
实施例152
2，2′-〔1，2-乙二基二(4，1-亚苯基亚氨基)〕二-苯甲酸
实施例153
4-〔3-〔4-(二乙基氨基)苯基〕丙基)-N-(2-甲氧基-5-硝基苯基)苯胺
实施例154
2-{3-〔2-(4-氯苯基)乙基〕苯氨基}苯甲酸
实施例155
2-{3-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
实施例156
2-{3-〔3-(4-二乙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
实施例157
2-{3-〔3-(4-二正丙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
下述实施例158-163举例说明本发明的化合物在合成本发明的其它化合物和衍生物中作为起始物质和中间体的应用。这些实施例举例说明了硝基还原成氨基、氨基的烷基化和羧酸基团的酯化。这些反应见述于下面的归纳化了的流程图12中。
流程图12其中，Rb和Rc的定义同上，E为形成酯的基团，例如C1-C6烷基(如甲基、2，2，2-三氯乙基)、苄基、二苯基甲基等。
实施例1582-{4-〔3-(4-硝基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
室温下往4-〔3-(4-硝基苯基)丙基〕苯胺(4.08g，15.9mmol)和2-溴苯甲酸(3.52g，17.5mmol)在异丙醇(100mL)中的浆液中加入乙酸铜(87mg，0.478mmol)和乙酸钾(3.44g，35.0mmol)。将所得混合物加热回流23小时，然后冷却至室温。减压下除去溶剂后，将残余物用水(100mL)稀释，并用1.0M氢氧化钠水溶液碱化至pH9.0。将水层用乙醚(20mL，二次)洗涤，并用1.0M盐酸溶液酸化至pH3.0。用抽吸法将形成的沉淀物过滤，并在60℃真空干燥，得到呈米黄色固体的标题化合物(5.75g，得率96％)。mp.150-153℃。
MS(Fab)：376(MH+).
实施例1592-{4-〔3-(4-氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
室温下在氩气氛中往2-{4-〔3-(4-硝基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸(实施例158)(3.0g，7.97mmol)在DMF(40mL)中的溶液中加入10％Pd-C(300mg)。往烧瓶中导入氢气(1atm)，将混合物在室温搅拌14小时。用硅藻土将反应混合物过滤，除去Pd-C，真空浓缩。将残余物用甲醇(约50mL)稀释，真空浓缩。此操作重复3次，以完全除去DMF。将残余物再用甲醇稀释，滤去不溶物。真空下除去滤液中的溶剂，得到油状物，将该油状物用乙腈(50mL)稀释，缓慢滴加水(100mL)。过滤形成的沉淀物，在60℃真空干燥，得到呈白色固体的标题化合物(2.34g，得率85％)。mp.110-112℃。
MS(Fab)：347(MH+).
实施例1602-{4-〔3-(4-氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸甲酯
室温下往2-{4-〔3-(4-氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸(实施例159)(2.34g，6.75mmol)在甲醇(50mL)中的溶液中加入浓硫酸(1.0mL)。将混合物回流搅拌3.0日.在5℃用三乙胺(10mL)中止反应，减压下除去溶剂。将残余物用水(20mL)稀释，并用乙醚(20mL，4次)提取。将合并的乙醚层用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压下除去溶剂，通过柱层析纯化，得到呈黄色无定形质的粗标题化合物(2.59g)。使用该物质而未作进一步纯化。
实施例1612-{4-〔3-(4-二乙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸甲酯和2-{4-〔3-(4-乙氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸甲酯
在5℃往上述粗酯(2.59g，约6.75mmo1)和乙醛(2.0mL，35.1mmol)在乙腈(50mL)中的溶液中加入NaBH3CN(1.70g，27.0mmol)，将悬浮液搅拌30分钟，同时，监测pH并加入1.0M盐酸水溶液，使混合物保持适度酸性(pH3.0-4.0)。让反应混合物用1.0小时温热至室温，然后用1.0M氢氧化钠水溶液碱化至pH9.0。减压下浓缩反应混合物，除去乙腈，将所得水溶液用1.0M盐酸水溶液酸化至pH3.0。将所得水溶液用氯仿(20mL，3次)提取，将合并的提取液用盐水(5mL)洗涤。用无水硫酸钠干燥后，减压下除去溶剂，通过柱层析(硅胶60N，正己烷/氯仿/三乙胺50∶98∶2)纯化。最先洗脱出来的是二烷基化物(1.07g，38％)，为黄色无定形物。
MS(Fab)：417(MH+).
随后洗脱出来的是单烷基化物(0.79g，30％)，为黄色无定形物。
MS(Fab)：389(MH+).
实施例1622-{4-〔3-(4-二乙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
室温下往2-{4-〔3-(4-二乙基氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸甲酯(1.68g，4.03mmol)在乙醇(50mL)中的乳液加入3M氢氧化钾水溶液(4.0mL，12.0mmol)，然后将混合物加热回流40分钟。将反应混合物冷却至室温，用1.0M盐酸水溶液中和至pH9.0。减压下将混合物浓缩，除去乙醇，将所得水溶液用氯仿(50mL，3次)提取。将合并的提取液用盐水(10mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压下除去溶剂，通过柱层析(硅胶60N，浓NH4OH/甲醇/氯仿0.2∶2∶100至0.5∶5∶100)纯化，得到黄色油状物。将该油状物用丙酮稀释，将所得溶液在室温减压浓缩，得到呈无定形固体的标题化合物(1.62g，0.2水和物，99％).
MS(Fab)：403(MH+).
元素分析：C26H30N2O2·0.20H2O
计算值：C，76.89；H，7.54；N，6.90.
实测值：C，76.73；H，7.67；N，7.10.
实施例1632-{4-〔3-(4-乙氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸
按实施例162中所述方法，由2-{4-〔3-(4-乙氨基苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸甲酯(得自实施例161)、乙醇(10mL)和3M氢氧化钾溶液(1.0mL)制得呈黄色固体的标题化合物253mg(0.1水和物，90％)。
MS(Fab)：375(MH+).
元素分析：C24H26N2O2·0.10H2O
计算值：C，76.61；H，7.02；N，7.44.
实测值：C，76.62；H，7.06；N，7.36.
生物学实施例
用已很好建立的指示在治疗阿尔茨海默病的临床有用性的若干体外和体内试验评估代表性的式I化合物。淀粉样蛋白试验BASSR(β-淀粉样蛋白自我接种(self-seeding)放射性测定)材料：原液：测定用缓冲液：50mM磷酸钠，pH7.5，100mM氯化钠，0.02％NaN3，1M尿素(过滤，在4℃贮存)可溶性Aβ(1-40)肽(加州Torrance市Bachem公司产品)：2.2mg/mL去离子水溶液(以等分试样贮存在-20℃，解冻后保持在冰上)在贮存1周后会自我接种。通常，应将溶液贮存至测定中未出现停滞期。125I标记的Aβ(1-40)：150K-350K cpm/μL100％乙腈-0.1％三氟乙酸(TFA)-1％β-巯基乙醇(以等分试样贮存在-20℃)。125I标记的Aβ(1-40)可按H.LeVine，III在Neurobiol.Aginig，16，755(1995)(该文纳入于此作为参考)中所述方法制备，也可由伊利诺斯州Arlington Heights的Amersham公司购得。最终测定条件：每次测定须用30μM可溶性Aβ(1-40)/去离子水/测定用缓冲液+20K+50Kcpm125I标记的Aβ(1-40)。将受试化合物溶解在DMSO中，通常形成5-50mM原液，使测定时的DMSO最终浓度小于1％v/v。测定：用于50次测定的反应混合液(在冰上)包含每次测定所需的0.1-0.2μL125I标记的A125I标记的Aβ(1-40)+1μL可溶性Aβ(1-40)+13.5μL测定用缓冲液。下面是足以满足50个测定孔所需的反应混合液的各成分的量：
5-10μL干的125I标记的Aβ(1-40)
675μL测定用缓冲液
50μL可溶性Aβ(1-40)测定方法
1)通过将各成分混合并贮存在冰上而制得上述反应混合液
2)将14.5μL反应混合液吸移至冰上的聚丙烯U形底96孔微量滴定板的50个孔的各孔中。(Costar 3794)。
3)将1.7μL稀释过的受试化合物(包括溶剂对照)以8个一列加入到各孔中。从1mM(最终浓度为100μM)起的在测定用缓冲液-尿素中的连续3倍稀释液＝7种稀释液+零。因此，96孔板各可容纳11个试样+1个刚果红对照(在2倍步骤中，0.039μM-最终的5μM)。
4)将滴定板用铝膜(Beckman538619)密封，在冰上培育10分钟。
5)将温度升至37℃，培育3-5小时(取决于肽的种类)。
6)剥去铝膜，在各孔中加入200μL冰冷的含尿素的测定用缓冲液，用96孔板(Millipore MAGV N22，马萨诸塞州Bedfird市)中的孔径0.2μm的GVWP滤膜真空过滤，收集放射性标记的纤丝。用本领域技术人员公知的标准方法测定纤丝的放射性活性。BASST(β-淀粉样蛋白自我接种，硫黄素T)
一种测定自我接种的淀粉样蛋白纤丝生长的方法方法：材料：原液：测定用缓冲液：50mM磷酸钠，pH7.5，100mM氯化钠，0.02％ NaN3，1M尿素(过滤，在4℃贮存)可溶性Aβ(1-40)：2.2mg/mL去离子水溶液(以等分试样贮存在-20℃，解冻后保持在冰上)在贮存1周后会自我接种。通常，应将溶液贮存至测定中未出现停滞期。最终测定条件：30μM可溶性Aβ(1-40)/去离子水/测定用缓冲液。将受试化合物溶解在DMSO中，通常形成5-50mM原液，使测定时的DMSO最终浓度小于1％v/v。测定：用于50次测定的反应混合液(在冰上)包含每次测定所需的1μL可溶性Aβ(1-40)+13.5μL测定用缓冲液。下面是50个测定孔的各孔中滴入的的反应混合液的各成分的量：
50μL可溶性Aβ(1-40)
675μL测定用缓冲液测定方法
1)通过将各成分混合并贮存在冰上而制得上述反应混合液
2)将14.5μL反应混合液吸移至冰上的聚苯乙烯U形底96孔微量滴定板(Corning 25881-96)的50个孔的各孔中。
3)将1.7μL稀释过的受试化合物(包括溶剂对照)以8个一列加入到各孔中。从1mM(最终浓度为100μM)起的在测定用缓冲液-尿素中的连续3倍稀释液＝7种稀释液+零。因此，96孔板各可容纳11个试样+1个刚果红对照(在2倍步骤中，0.039μM-最终的5μM)。
4)将滴定板用铝膜密封，在冰上培育10分钟。
5)将温度升至37℃，培育3-5小时(取决于肽的种类)。
6)剥去铝膜，在各孔中加入250μL在50mM甘氨酸-NaOH中的5μM硫黄素T(ThT)[T-3516，Sigma-Aldrich公司产品]，pH8.5。5分钟内读取滴定板读数器上的荧光(ex＝440nm/20nm；em＝485nm/20nm)。BAPA(β-淀粉样肽聚集)
此测定方法是测定化合物抑制β-淀粉样肽聚集的活性。
此测定方法的用途是提供一种用基于过滤的端点测定来测定β-淀粉样蛋白聚集的更高容量的方法。在该测定方法中，用六氟异丙醇(HFIP)将初始的淀粉样肽分解成单体状态，并使用33μM的浓度，该浓度足够地高，使得聚集会在几小时内于pH6.0出现。方法：β-淀粉样肽聚集，pH6.0(BAPA)
在96孔板(Costar 3794)中加入25μL 50mM磷酸钠缓冲液(pH6.0)、10μL在20％HFIP中的0.5mg/mL Aβ(1-40)肽+0.1μL测定用放射性碘记的125I Aβ(1-40)[125I Aβ(1-40)]和1μL受试化合物(起始浓度为50mM，DMSO浓度小于1％)。然后在室温培育2-4小时。用200μL 50mM磷酸缓冲液(pH6.0)停止反应，用0.2μm 96孔滤板(Millipore MAGU N22)过滤。用100μL同一磷酸缓冲液洗涤滤板。使滤器浸透Meltilex(1450-441)后，用Microbeta计数器检测聚集，并作本底校正。BATYM测定方法：
将所需的Aβ(1-42)(加利福尼亚肽)的六氟异丙醇原液变干。将Aβ(1-42)溶解在DMSO中，然后与磷酸盐缓冲的盐水(PBS)(pH7.4)混合。将混合的Aβ(1-42)溶液用0.2μOmnipore膜注射滤器(马萨诸塞州Bedfird市Millipore公司产品)过滤。将在DMSO中的受试化合物(50次浓缩物)加入到96孔板的各孔(0.5μL/孔)中。并在各孔中加入24.5μL的Aβ(1-42)溶液。将板在1,000g离心5分钟，在37℃培育1日(Aβ1-42，最终浓度为100μM)。
培育后，在各孔中加入250μL硫黄素T在甘氨酸-NaOH缓冲液(pH8.5，50mM)中的30μM溶液，用荧光板读数器测定荧光(ex＝440nm/20nm；em＝485nm/20nm)。用下式由荧光的减小计算出抑制活性：
抑制(％)＝{(F(Aβ)-F(Aβ+化合物)}/{(F(Aβ)-F(溶剂+化合物)}×100
用下列方程式通过曲线拟合程序计算出IC50。由二个不同实验重复3次得到数据。
抑制(x)＝100-100/{1+(x/IC50)n}
x＝受试化合物浓度(M)
IC50＝(M)
n＝Hill氏系数
代表性的式I化合物在上述测定中显示出0.1μM至100μM以上的抑制活性(IC50)。
用上述方法测得的本发明的具体的代表性化合物的结果示于下面的表1。
表1.式I化合物的β-淀粉样蛋白抑制活性实施例 BASSR BASST BATYM BAPA No. (IC50＝μM) (IC50＝μM) (IC50＝μM) (IC50＝μM) 1 10(P)，＞100(P) 2，4，30，10(P) 50，58.8(P) 60(P)，＞100
(6x)，＞100(Q)， 3(Q) 57.8(Q) (P)86(Q)，
＞100(R)， ＞100(R) ＞60(R)，
＞100(S)， 11(S)，11(T) ＞60(S)，
52(T) 6(Z) 11(T)
＞100(Z) 2 2.2，4.1，4.1，12， 1，1.5(P) 6.52(P) 70(P)
4.5 3 4.5，5，5 2(P) 11.7(P) ＞60(P)
(所有3个V形) 3(Q)
15(ppt)，5(Q) 4 30， 3，4，8 26.3，30.7 67
＞100(3x) 5 70，＞100 4.5 10 74 6 15，21，20，40 4，1，3 21.5 ＞60 7 18，13，12，20 2 8.83 39 8 15，15，18，15 3，＞100 7.17 9 20(ppt)，30， 1，2(P) 20.1，28.2(P) 75(P)
52，40(P) 38.6(R)10 70，50 4 75.7 6711 18(ppt)， 1，1，3(P) 5.62(P) 23(P)
20(ppt)， 1，0.8(Q) 6.78(Q) 9(Q)
20(2x)，＞100(P)
＞100，21，30(Q)12 20(4x) 1，1 3.93 ＞6013 21，＞100， 0.9 6.41 6
20(ppt)，
15(ppt)，＞10014 18(ppt)，8， 1.0 10.9 ＞10
6(ppt)，7(ppt) (V形)15 100(3x)P 1(P) 8.52(P) ＞60(P)
100，16 1.2(Q) 7.26(Q) 7(Q)
(V形) 7.07(Q)
12，15，11(Q)
表1.式I化合物的β-淀粉样蛋白抑制活性(续)实施例 BASSR BASST BATYM BAPANo. (IC50＝μM) (IC50＝μM) (IC50＝μM) (IC50＝μM)16 18，7.5，10(P) 3，0，3(P) 12(P) 13(P)
70，32，42(Q) 1.1，0.8，0.6(Q) 10.3(Q)17 ＞100(ppt)(3x) 6.2 64.5 ＞60(Q)，41(R)18 ＞100(5x)(P) 30，＞100(P) ＞100(P) 9，＞40，53(P)，1219 3，4，＞100，2.2 ＞100，1，1，1.5 31.0，34.0 ＞60，4320 4.2 6 68.6 2221 3 4 62.7 2622 3 9 ＞100 2423 20 2 ＞100 1724 ＞100 20 ＞100 9125 ＞100 4 21.1 4726 ＞100 1 ＞100 5727 ＞100 3 19.8 7428 ＞100 5 42.3 2729 ＞100 4 38.1 3030 30，20 4，2 75.3 3831 ＞100 1 22.6 8632 ＞100 1 29.2 9633 ＞100 ＞100 ＞100 ＞1034 45 3 45.0 4835 ＞100 100 ＞100 15436 ＞100 ＞100 ＞100 14937 ＞100 0.8 30.2 2538 20，10(V) 3 23.4 18439 ＞100 20 ＞100 2140 ＞100 3.0 ＞100 5341 ＞100 5 49.7 4242 ＞100 2 55.6 3043 ＞100 0.3 24.2 6344 ＞100 1 26.5 5245 ＞100 1 21.5 3246 ＞100 6 34.347 ＞100 2 38.248 25 10 ＞10049 ＞100 ＞100 ＞10050 ＞100 ＞100 ＞10051 85 0.8 39.1
表1.式I化合物的β-淀粉样蛋白抑制活性(续)实施例 BASSR BASST BATYM BAPA No. (IC50＝μM) (IC50＝μM) (IC50＝μM) (IC50＝μM) 52 75 0.5 36.5 53 ＞100 0.3 30.0 54 ＞100 0.4 43.9 55 12 2 5.1 101 56 ＞100 3 11.5 30 57 4.8 1.5 4.0 50 58 3.5 1 5.1 60 59 ＞100 ＞100 ＞100 3 60 ＞100 3 40.7 8 61 18，7.5，10 3，0.3 12 13 62 ＞100 1.5 8.98 63 15，15，18(ppt) 1 9.43 45 64 ＞100 5 35 ＞100 65 60，80 1.5 15.9 ＞100(V形) 66 ＞100(ppt)， 2.1 50.1 ＞100
＞100(ppt) 67 41 4 13.3 ＞60 68 ＞100，＞100 1 ＞100 110 69 2(V形)，3.5(ppt) 0.8 11.7 58 70 20，100 10 ＞100 65 71 ＞100 3 ＞60 72 40，15，12 2，2.5 74.8 ＞60，＞60 73 25，35，40 0.3 9.43 ＞60 74 6，18，19，18 0.3，0.5 8.36 ＞60 75 ＞100 2.2 46.2 ＞60 76 3 0.5 8.59 ＞60 77 18，15 8，0.3 9.49 ＞60 78 70 0.1 ＞100 8 79 3.1，50，38，70， 1，0.3，0.3，0.3 9.14 51
70，30，40 80 ＞100 4 24.8 ＞60 81 ＞100 15 48.4 73 82 ＞100，＞100，＞100 2，0.3，0.3 83 ＞100 ＞100 9，47，29 84 ＞100 ＞100 5，40，21 85 ＞100 18 8，77，45
表1.式I化合物的β-淀粉样蛋白抑制活性(续)实施例 BASSR BASST BATYM BAPA No. (IC50＝μM) (IC50＝μM) (IC50＝μM) (IC50＝μM) 86 40 18 ＞10，89，37 87 ＞100 50 ＞10，15，32 88 ＞100 10 ＞10，37，27 116 ＞100，＞100 18，30 96 117 ＞100 3 61.3 ＞100 118 ＞100，＞100 6 ＞60 119 ＞100 3 ＞60 120 ＞100 3 ＞60 121 ＞100，＞100 1 122 ＞100 2 ＞100 ＞60 123 ＞100(3x)，14 3，3 70.8
4，18，＞100， 3.2，4(Q) 85.2(Q) ＞60(Q)
＞100(Q) 124 ＞100 10 62.7 125 82 10 ＞100 80 126 ＞100，＞100 4，5 84 63
30，100(Q) 10，4(Q) 73.9(Q) ＞60(Q) 127 ＞100(ppt) 10 ＞100 67 128 ＞100(ppt)(4x) 10，41，6 75 60
11，＞100(3x)
15，20，10，7.5 7，3，3(Q) ＞60(Q) ＞60(Q)
(Q)
15，＞100(3x)Q 129 1(V形)(2x) 10，3，2，2 ＞100 ＞102
＞100(ppt) 130 ＞100(3x) 2，＞100，50 47.5 238 131 ＞100 10 93.5 ＞60 132 ＞100 10 ＞100 60 133 ＞100 ＞100 ＞100 ＞60 134 ＞100 2 36.5 ＞60 135 ＞100 1.2 31.2 ＞60 136 ＞100 3 ＞100 53 137 ＞100，＞100 3 52 141 ＞100 7 56.7 ＞50 142 ＞100 2.1 26.9 55 143 ＞100(4x) 40，30 ＞100 2，＞60，＞60 144 15，25 40 ＞100 114
表1.式I化合物的β-淀粉样蛋白抑制活性(续) 实施例 BASSR BASST BATYM BAPA
No. (IC50＝μM) (IC50＝μM) (IC50＝μM) (IC50＝μM)
145 10，40，30 4 56.8 9
146 ＞100 30 ＞100 ＞60
147 ＞100 10 93.4 ＞60
148 ＞100 ＞100
149 ＞100 ＞100 ＞100 ＞60
150 ＞100 10 ＞100 76
151 ＞100，＞100 5，＞100 ＞100 108
154 ＞100 3，30 70.8
155 ＞100 3 44.6
156 27.8
157 25.9
具体值之后的括号内的字母表示受试化合物的具体的合成批号。“P”、“Q”、“R”、“S”、“T”和“Z”、表示同一化合物的不同批号。例如，10(P)表示受试化合物是P批的。若未标明批号，则该化合物为P批的。
缩写“ppt”是指沉淀物，表示沉淀物在所示浓度形成。此外，“V形”一词是指沉淀后观察到抑制。
数目和×(即，4×)之后的数值是指化合物测试4次，各次的结果相同。
本发明化合物在常用来评估治疗与淀粉样蛋白聚集相关的疾病(尤其是阿尔茨海默病和其它淀粉样变性)的试剂的体内测定中还显示出良好的活性。在一个测定中，通过皮下注射硝酸银、弗罗因德完全佐剂和静脉内注射淀粉样蛋白促进因子，将淀粉样蛋白导入小鼠脾脏内。在11日内，每日施用硝酸银。从第1日至第11日，将受试化合物每日给予小鼠。在第12日，杀死小鼠，取出脾脏，制备组织标本，用刚果红染色，显微镜下对脾脏中被双折射的刚果红染色的淀粉样蛋白占据的区域的百分比进行定量。在此测试中，相对于未处理的对照，评估出本发明化合物抑制脾脏淀粉样蛋白沉积的活性可达70％。
在另一个体内测试中，用转基因小鼠评估本发明的化合物。小鼠该小鼠具有带感染性蛋白启动子的人β-淀粉样前体蛋白转基因，这在Hsiao等，“相关记忆缺陷、Aβ评估和转基因小鼠的淀粉样斑(Correlative memory deficits，Aβelevation，and amyloid pasques in transgenic mice)”，Science 1966；274：99-102中有描述。这些转基因小鼠在约9月龄时逐步显现出β-淀粉样沉积。至15月龄，出现大量扩散、密集的老年斑，主要在新皮层、嗅球和海马。从8月龄(在就要出现淀粉样沉积之前)起给小鼠口服本发明化合物，继续数月(至约14-18月龄)。然后杀死小鼠，取脑。对脑中的淀粉样物的量作组织学和生化学定量。在此模型中，相对于未处理的对照物，评估出本发明化合物抑制皮层和海马中的淀粉样蛋白积聚的活性可达49％。
上述数据表明，代表性的本发明化合物在用来测定蛋白聚集抑制活性的标准测定方法中显示出活性。本发明化合物显示出优异的特异性(例如，如在BASST、BATYM和BAPA测定中所示)。因此，本发明化合物对临床上抑制淀粉样蛋白聚集和对淀粉样沉积进行成象以供诊断用是非常有用的。本发明的化合物以药剂的形式使用，下面的实施例举例说明典型的组合物。
实施例164
片剂
成分 量
实施例1的化合物 50mg
乳糖 80mg
玉米淀粉(混合用) 10mg
玉米淀粉(糊剂用) 8mg
硬脂酸镁(1％) 2mg
150mg
将实施例1的化合物与乳糖和玉米淀粉(混合用)混合，均匀掺和，得到粉末。将玉米淀粉(糊剂用)悬浮在6mL水中，搅拌加热，形成糊剂。将该糊剂加入到上述混合的粉末中，将混合物制粒。让湿颗粒通过#8硬筛，在50℃干燥。将混合物用1％硬脂酸镁润滑，压片。每日给予患者1-4片，以预防淀粉样蛋白聚集和治疗阿尔茨海默病。
实施例165非经肠的溶液
在700mL丙二醇和200mL水的注射用溶液中加入20.0g化合物19(实施例19)。搅拌所得混合物，用盐酸将pH调整至5.5。使用注射用水将体积调整至1000mL。将所得溶液灭菌，以2.0mL(40mg化合物19)充入各5.0mL安瓿中，氮气氛中密封。将上述溶液注射于患甲状腺髓样癌并需要治疗的患者。
实施例166药膏制剂
将10mg 2-{4-〔3-(3，4-二氯苯基)丙基〕苯氨基}苯甲酸与1mL丙二醇和2mg含树脂类交联剂的丙烯酸类聚合物粘合剂混合。将混合物涂敷在可渗透的背衬(30cm2)上，贴在患者的上背，对淀粉样多神经病作持续释放治疗。
上面对本发明化合物及其制造和使用方式和方法进行了充分、清楚和完整的描述，使与其相关的领域的技术人员能够制造和使用之。应该明白，上面描述的是本发明的优选实施方式，可在不偏离权利要求书中所述的本发明的实质和范围的条件下对本发明作各种变更。下面的权利要求书具体指出和清楚地要求保护说明书中所述的本发明的主题。