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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201611021559.8 (22)申请日 2016.11.21 (71)申请人 广西大学 地址 530004 广西壮族自治区南宁市西乡 塘区大学东路100号 (72)发明人 陈韦方 (74)专利代理机构 深圳市兴科达知识产权代理 有限公司 44260 代理人 袁士林 (51)Int.Cl. C12P 21/06(2006.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一种利用纳豆菌发酵制备玉米肽的方法 (57)摘要 本发明的目的是提供一种利用纳豆菌发酵 制备。
2、玉米肽的方法， 以玉米蛋白粉为基质， 应用 纳豆菌发酵法制备玉米肽， 分别对接种量体积分 数、 玉米蛋白粉质量分数、 发酵温度、 发酵时间进 行优化， 得出最优工艺条件， 在此条件下发酵， 玉 米蛋白粉的水解度可达到11.17%， 该方法工艺操 作简单， 成本低， 市场前景良好， 适于推广应用。 权利要求书1页 说明书2页 CN 107574213 A 2018.01.12 CN 107574213 A 1.一种利用纳豆菌发酵制备玉米肽的方法， 其特征在于， 包括以下步骤： 步骤1： 用接种环挑取豆菌一环， 置于装有10mL无菌水的试管中充分混匀， 制成悬浊液， 取少量悬浊液， 在斜面培养基平。
3、板上涂划线后， 置培养箱中在35恒温条件下培养24h 45h， 备用； 步骤2： 从步骤1得到的斜面培养基平板上挑取菌种接入装有100mL种子培养基的三角 瓶中， 在37、 180r/min的条件下， 摇床振荡培养18h， 制成107CFU/mL108CFU/mL菌液， 作 为用于发酵玉米蛋白粉的纳豆菌种子液， 备用； 步骤3： 向玉米蛋白粉中加入水配置成浓度为0.05kg/L的底液， 水浸泡24h后， 120蒸 煮10min， 取出冷却至一定温度， 即得玉米蛋白粉质量分数为5%的发酵原料， 备用； 步骤4： 取步骤3得到的质量分数为5%的发酵原料， 接入步骤2得到的体积分数为3%的纳 豆菌液。
4、， 置于培养箱中， 在一定40下发酵水解， 达到72h后， 取出置100水浴中加热10min灭酶， 然后迅速冷却至室温， 4000r/min离心 10min得上清液， 即蛋白水解液。 2.如权利要求1中所述的利用纳豆菌发酵制备玉米肽的方法， 其特征包括： 步骤1中用 接种环挑取豆菌一环， 置于装有10mL无菌水的试管中充分混匀， 制成悬浊液， 取少量悬浊 液， 在斜面培养基平板上涂划线后， 置培养箱中在35恒温条件下培养24h45h。 3.如权利要求1中所述的利用纳豆菌发酵制备玉米肽的方法， 其特征包括： 步骤2中从 步骤1得到的斜面培养基平板上挑取菌种接入装有100mL种子培养基的三角瓶中，。
5、 在37、 180r/min的条件下， 摇床振荡培养18h， 制成107CFU/mL108CFU/mL菌液， 作为用于发酵玉 米蛋白粉的纳豆菌种子液。 4.如权利要求1中所述的利用纳豆菌发酵制备玉米肽的方法， 其特征包括： 步骤3中向 玉米蛋白粉中加入水配置成浓度为0.05kg/L的底液， 水浸泡24h后， 120蒸煮10min， 取出 冷却至一定温度， 即得玉米蛋白粉质量分数为5%的发酵原料。 5.如权利要求1中所述的利用纳豆菌发酵制备玉米肽的方法， 其特征包括： 步骤4中取 步骤3得到的质量分数为5%的发酵原料， 接入步骤2得到的体积分数为3%的纳豆菌液， 置于 培养箱中， 在一定40下发。
6、酵水解， 达到72h后， 取出置100水浴中加热10min灭酶， 然后迅 速冷却至室温， 4000r/min离心10min得上清液， 即蛋白水解液。 权利要求书 1/1 页 2 CN 107574213 A 2 一种利用纳豆菌发酵制备玉米肽的方法 技术领域 0001 本发明涉及一种微生物发酵技术， 特别涉及一种利用纳豆菌发酵制备玉米肽的方 法。 背景技术 0002 木薯广泛栽培于热带与亚热带， 是世界三大薯类之一。 在我国热带地区， 木薯是仅 次于水稻、 甘薯、 甘蔗和玉米的第五大作物。 木薯淀粉是平均链长度为23的支链淀粉， 其颗 粒呈球形或半球形， 平均粒径为1720 m。 通过水解反应，。
7、 木薯淀粉水解成含有醛基和羰基 的淀粉糖， 如葡萄糖、 麦芽糖和低聚糖等。 0003 木薯淀粉在点分行业常被用作碳源。 除此之外， 它还以原淀粉和各种变性淀粉两 大类型广泛地应用在食品、 饮料、 糖果、 胶粘剂和胶水、 纺织、 造纸、 药品及化妆品和生物降 解材料等方面。 木薯的块根中含30%的淀粉， 而木薯干含有70%的淀粉， 有 “淀粉之王” 的美 誉。 由于木薯与其他农作物相比有不可比拟的优势： 木薯的非粮食农产品， 对土质的要求 低， 耐干旱、 贫瘠， 符合 “不争粮、 不争 （食） 油、 不争糖， 充分利用边际性土地 （不适合种植粮、 棉、 油等作物的土地） ” 的国家粮食发展战略；。
8、 成本低， 具有经济性。 因此， 作为可再生的生物 质资源， 近年来， 木薯淀粉在生物燃料的方面得到了广泛的应用与发展。 0004 为减少高温耗能， 降低水解成本， 本发明选用中温型 -淀粉酶对木薯淀粉进行水 解， 并确定酶水解的最佳工艺条件， 为木薯淀粉在生物燃料中的应用提供理论依据。 发明内容 0005 本发明的目的是提供一种利用纳豆菌发酵制备玉米肽的方法， 以玉米蛋白粉为基 质， 应用纳豆菌发酵法制备玉米肽， 开发出玉米蛋白粉水解度高的方法。 0006 为实现上述的目的， 本发明采用的技术方案为： 步骤1： 用接种环挑取豆菌一环， 置于装有10mL无菌水的试管中充分混匀， 制成悬浊液。 。
9、取少量悬浊液， 在斜面培养基平板上涂划线后， 置培养箱中在35恒温条件下培养24h 45h， 备用； 步骤2： 从步骤1得到的斜面培养基平板上挑取菌种接入装有100mL种子培养基的三角 瓶中， 在37、 180r/min的条件下， 摇床振荡培养18h， 制成107CFU/mL108CFU/mL菌液， 作 为用于发酵玉米蛋白粉的纳豆菌种子液， 备用； 步骤3： 向玉米蛋白粉中加入水配置成浓度为0.05kg/L的底液， 水浸泡24h后， 120蒸 煮10min， 取出冷却至一定温度， 即得玉米蛋白粉质量分数为5%的发酵原料， 备用。 0007 步骤4： 取步骤3得到的质量分数为5%的发酵原料， 接。
10、入步骤2得到的体积分数为3% 的纳豆菌液， 置于培养箱中， 在一定40下发酵水解。 达到72h后， 取出置100水浴中加热 10min灭酶， 然后迅速冷却至室温， 4000r/min离心10min得上清液， 即蛋白水解液。 0008 有益效果： 以玉米蛋白粉为基质， 应用纳豆菌发酵制备玉米肽， 在此条件下发酵， 玉米蛋白粉的水解度可达到11.17%， 该方法工艺操作简单， 成本低， 市场前景良好， 适于推 说明书 1/2 页 3 CN 107574213 A 3 广应用。 附图说明 0009 无。 具体实施方式 0010 为了使本发明的技术手段、 创作特征、 达成目的与功效易于明白了解， 下面。
11、结合具 体实施例， 进一步阐述本发明。 0011 我们采用本发明公开的方法， 进行以下操作： （1） 用接种环挑取豆菌一环， 置于装有10mL无菌水的试管中充分混匀， 制成悬浊液。 取 少量悬浊液， 在斜面培养基平板上涂划线后， 置培养箱中在35恒温条件下培养24h45h， 备用； （2） 从 （1） 得到的斜面培养基平板上挑取菌种接入装有100mL种子培养基的三角瓶中， 在37、 180r/min的条件下， 摇床振荡培养18h， 制成107CFU/mL108CFU/mL菌液， 作为用于 发酵玉米蛋白粉的纳豆菌种子液， 备用； （3） 向玉米蛋白粉中加入水配置成浓度为0.05kg/L的底液， 。
12、水浸泡24h后， 120蒸煮 10min， 取出冷却至一定温度， 即得玉米蛋白粉质量分数为5%的发酵原料， 备用。 0012 （4） 取 （3） 得到的质量分数为5%的发酵原料， 接入 （2） 得到的体积分数为3%的纳豆 菌液， 置于培养箱中， 在一定40下发酵水解。 达到72h后， 取出置100水浴中加热10min灭 酶， 然后迅速冷却至室温， 4000r/min离心10min得上清液， 即蛋白水解液。 0013 结果显示， 以玉米蛋白粉为基质， 应用纳豆菌发酵制备玉米肽， 在此条件下发酵， 玉米蛋白粉的水解度可达到11.17%。 0014 以上所述仅为本发明的较佳实施例而已， 并不用以限制本发明， 凡在本发明的思 想和原则之内， 所做的任何修改、 等同替换、 改进等， 均应包含在本发明的保护范围之内。 说明书 2/2 页 4 CN 107574213 A 4 。